CN114224934B - 一种改善微循环的杜仲提取物 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药物技术领域，具体涉及一种改善微循环的杜仲提取物。所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。能够有效改善微循环，并通过实验验证了改善体表微循环的效果；同时通过改善微循环的作用，进一步起到减少缺血再灌注对肾脏损伤的功效。

Description

一种改善微循环的杜仲提取物
技术领域
本发明属于药物技术领域，具体涉及一种改善微循环的杜仲提取物。
背景技术
微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环。血液循环最根本的功能是进行血液和组织之间的物质交换，这一功能就是在微循环部分实现的。
微循环血流量与人体组织、器官代谢水平相适应，使人体内各器官生理功能得以正常运行。微循环功能障碍或微循环血流灌注量减少时，营养物质和氧气不能满足组织代谢的需要，同时组织器官中的废物不能及时排出，可导致组织器官功能不全或衰竭，这成为许多疾病发生和发展的重要原因。
微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环。微循环的基本功能是进行血液和组织液之间的物质交换。正常情况下，微循环的血流量与组织器官的代谢水平相适应，保证各组织器官的血液灌流量并调节回心血量。如果微循环发生障碍，将会直接影响各器官的生理功能。
因此，改善人体微循环对调节人体健康具有及其重要的作用。
现有技术中改善微循环的技术众多，如中国专利申请CN110090211A公开一种叶绿素衍生物改善微循环障碍的用途，叶绿素衍生物，例如叶绿素提取物及蚕砂提取物等对改善各部位及整体微循环障碍均具有较好疗效。所述叶绿素衍生物还可通过在多个环节中的作用，综合预防和改善整体及部分部位的微循环障碍。中国专利申请CN101485740A公开一种疏通微循环的药物及其制备方法，其将丹参、赤芍、黄芪、水蛭、地龙、益母草称取后，加水适量，煎熬成合剂，待冷却后，即制成成品装瓶密封备用。经过浓缩再加工还可制成：药丸、颗粒剂、冲剂、片剂、胶囊方便病人服用。中国专利申请CN 113521121 A公开一种中药杜仲在体表和内脏微循环调控中的应用。但是由于其中的成分复杂多样，成分间具有较大的相互影响，其作用功效有待进一步提高。
本发明旨在研究一种杜仲提取物，具有较好的改善微循环的作用，同时，其制备方法简单，易于工业化推广应用。
发明内容
为克服以上技术问题，本发明提供了一种杜仲提取物，具有较好的改善微循环的作用，同时，其制备方法简单，易于工业化推广应用。
为实现以上目的，本发明提供的技术方案如下：
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷(PDG)。
本发明的另一目的在于提供所述杜仲提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)取杜仲皮，粉碎，使用乙醇水溶液进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)将粗提液向使用大孔吸附树脂吸附、洗脱处理；将洗脱液再使用葡聚糖凝胶柱进行吸附、洗脱，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
优选地，步骤(1)中，所述乙醇水溶液的质量浓度为30-80wt％；优选为45-60wt％。
优选地，步骤(1)中，所述提取的温度为45-60℃。
步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为D101型和HPD100A型中的任一种或两种；
步骤(2)中，所述葡聚糖凝胶为Sephadex LH-60和Sephadex LH-20中的任一种或两种。
优选地，步骤(2)中，所述粗提液中加入0.1-0.5％质量的柠檬酸钠后再进行大孔吸附树脂洗脱。
优选地，大孔吸附树脂吸附后依次使用纯水、45-60wt％乙醇进行洗脱，其中，纯水的用量为1-3BV，洗脱速率0.5-1BV/h；45-60wt％乙醇的用量为2-4BV；洗脱速率1-2BV/h。
优选地，葡聚糖凝胶柱吸附后，使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为30-45wt％，柠檬酸的质量分数为0.5-1.5wt％。
本发明的目的还在于提供一种所述的改善微循环的杜仲提取物或所述的杜仲提取物的制备方法制备得到的杜仲提取物的组合物。
优选地，所述提取物组合物包括：松脂醇二葡萄糖苷、绿原酸、咖啡酸、丁酯素二葡萄糖苷、柠檬酸。
优选地，按照重量份数计，所述提取物组合物中包括以下组分：松脂醇二葡萄糖苷10-30份、绿原酸1-10份、咖啡酸1-5份、丁酯素二葡萄糖苷1-10份、柠檬酸1-5份。
优选地，按照重量份数计，所述提取物组合物中包括以下组分：松脂醇二葡萄糖苷10-15份、绿原酸1-7份、咖啡酸2-4份、丁酯素二葡萄糖苷3-6份、柠檬酸1-3份。
本发明的另一目的在于提供所述改善微循环提取物组合物的制备方法，包括如下步骤：
将松脂醇二葡萄糖苷绿原酸、咖啡酸、丁酯素二葡萄糖苷和柠檬酸进行混合或加溶剂混合即可。
本发明的目的还在于提供所述杜仲提取物或提取物的制备方法制备的杜仲提取物或所述提取物组合物在制备改善微循环药物中的应用。
本发明的目的还在于提供一种改善微循环的药物，所述药物包括所述的杜仲提取物或提取物的制备方法制备的杜仲提取物或所述提取物组合物。
与现有技术比，本发明的技术优势在于：
(1)本发明提供了一种改善微循环的杜仲提取物。该提取物中的主要成分为松脂醇二葡萄糖苷，通过改善微循环的作用，进一步减少缺血再灌注对肾脏损伤的功效。
(2)本发明提供了一种杜仲提取物的制备方法，该提取方法能够有效提高松脂醇二葡萄糖苷的提取效率，同时，提高松脂醇二葡萄糖苷的药效。
(3)本发明中在杜仲提取物的制备过程中，使用大孔树脂和凝胶柱结合处理的方式对杜仲皮提取液进行纯化分离，大孔吸附树脂使用D101型和/或HPD100A型，葡聚糖凝胶使用Sephadex LH-60和/或Sephadex LH-20；有效提高了松脂醇二葡萄糖苷的提取效率。
(4)本发明在提取过程中，在吸附前使用柠檬酸钠调节提取液，能够有效增加提取物的有效成分的产率；洗脱液使用葡聚糖凝胶柱吸附后，使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，一方面能够改善洗脱液的pH值环境，另一方面能够有效增加提取液中有效成分的分离效率，同时，提取物的药效也得到进一步增加。
附图说明
图1：肾缺血再灌注以及EU和PDG对C57BL/6J小鼠肾脏病理的影响(HE，400×)；
图2：肾缺血再灌注以及EU和PDG对C57BL/6J小鼠肾纤维化的影响(Masson，400×)；
图3：C57BL/6J小鼠肾缺血再灌注后CD31免疫组化结果(IHC，200×)；
图4：Image-Pro plus分析小鼠肾CD31相对表达面积(Per Area，200×)；
图5：大鼠体表激光多普勒血流成像；其中，A为正常对照组、B为全杜仲胶囊组、C实施例1高剂量组、D为SHR组、E为实施例1中剂量组、F实施例2低剂量组。
现结合附图和实施例对本发明作进一步说明：
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物为：松脂醇二葡萄糖苷。该松脂醇二葡萄糖苷使用市售松脂醇二葡萄糖苷(CAS号：63902-38-5，规格：＞98％，成都瑞芬思生物科技有限公司)。
实施例2
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。
所述提取物的制备过程，包括以下步骤：
(1)取杜仲皮，粉碎，使用质量浓度为60wt％的乙醇水溶液，60℃下进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)先向粗提液中加入0.5％质量的柠檬酸钠，再将粗提液使用D101型大孔吸附树脂吸附、依次使用纯水、60wt％乙醇水溶液进行洗脱，其中，纯水的用量为1BV，洗脱速率0.5BV/h；乙醇水溶液的用量为2BV；洗脱速率1BV/h；将洗脱液再使用Sephadex LH-60葡聚糖凝胶柱进行吸附、使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为45wt％，柠檬酸的质量分数为1.5wt％，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
实施例3
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。
所述提取物的制备过程，包括以下步骤：
(1)取杜仲皮，粉碎，使用质量浓度为45wt％的乙醇水溶液，45℃下进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)先向粗提液中加入0.1％质量的柠檬酸钠，再将粗提液使用HPD100A型大孔吸附树脂吸附、依次使用纯水、45wt％乙醇水溶液进行洗脱，其中，纯水的用量为3BV，洗脱速率1BV/h；乙醇水溶液的用量为4BV；洗脱速率2BV/h；将洗脱液再使用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱进行吸附、使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为30wt％，柠檬酸的质量分数为1.5wt％，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
实施例4
与实施例2的区别在于提取物制备方法不同。
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。
所述提取物的制备过程，包括以下步骤：
(1)取杜仲皮，粉碎，使用质量浓度为60wt％的乙醇水溶液，60℃下进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)将粗提液使用D101型大孔吸附树脂吸附、依次使用纯水、60wt％乙醇水溶液进行洗脱，其中，纯水的用量为1BV，洗脱速率0.5BV/h；乙醇水溶液的用量为2BV；洗脱速率1BV/h；将洗脱液再使用Sephadex LH-60葡聚糖凝胶柱进行吸附、使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为45wt％，柠檬酸的质量分数为1.5wt％，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
实施例5
与实施例4的区别在于提取物制备方法不同。
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。
所述提取物的制备过程，包括以下步骤：
(1)取杜仲皮，粉碎，使用质量浓度为60wt％的乙醇水溶液，60℃下进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)将粗提液使用D101型大孔吸附树脂吸附、依次使用纯水、60wt％乙醇水溶液进行洗脱，其中，纯水的用量为1BV，洗脱速率0.5BV/h；乙醇水溶液的用量为2BV；洗脱速率1BV/h；将洗脱液再使用Sephadex LH-60葡聚糖凝胶柱进行吸附、使用45wt％乙醇水溶液进行洗脱，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
实施例6
一种改善微循环的杜仲提取物组合物，按照重量份数计，包括以下组分：松脂醇二葡萄糖苷(市售松脂醇二葡萄糖苷(CAS号：63902-38-5，规格：＞98％，成都瑞芬思生物科技有限公司))15份、绿原酸7份、咖啡酸4份、丁酯素二葡萄糖苷6份、柠檬酸3份。将以上组分混合后，制得杜仲提取物组合物，备用。
实施例7
一种改善微循环的杜仲提取物组合物，按照重量份数计，包括以下组分：松脂醇二葡萄糖苷(实施例2制备所得松脂醇二葡萄糖苷)10份、绿原酸7份、咖啡酸2份、丁酯素二葡萄糖苷3份、柠檬酸1份。将以上组分混合后，制得杜仲提取物组合物，备用。
对比例1
与实施例2的区别在于提取物制备方法不同。
一种改善微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷。
所述提取物的制备过程，包括以下步骤：
(1)取杜仲皮，粉碎，使用质量浓度为60wt％的乙醇水溶液，60℃下进行提取，过滤，制得粗提液；
(2)将粗提液使用D101型大孔吸附树脂吸附、依次使用纯水、60wt％乙醇水溶液进行洗脱，其中，纯水的用量为1BV，洗脱速率0.5BV/h；乙醇水溶液的用量为2BV；洗脱速率1BV/h；将洗脱液再使用Sephadex LH-60葡聚糖凝胶柱进行吸附、使用醋酸水溶液进行洗脱，其中，所述醋酸水溶液中醋酸的质量分数为1.5wt％，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物。
对比例2
与实施例6的区别在于提取物组合物的组成不同。
一种改善微循环的杜仲提取物，按照重量份数计，包括以下组分：绿原酸7份、咖啡酸4份、丁酯素二葡萄糖苷21份、柠檬酸3份。
效果试验
实验动物：本发明中雄性C57BL/6J小鼠，雄性原发性高血压大鼠SHR，SD雄性大鼠均购买自斯贝福(北京)生物技术有限公司(SCXK(京)2019-0010)。
1.试验1-肾脏微循环影响
1.1实验试剂
阳性药物：(全杜仲胶囊(EU)，批号200101，0.48g/粒，相当于原药材2.5g)，江西普正制药有限公司；
尿素氮检测试剂盒：Invitrogen；
丙二醛(MDA)试剂盒：南京建成生物工程研究所；
肌酐(SCr)试剂盒：中生北控科技股份公司；
麻醉剂：5％水合氯醛；
1.2实验方法
实验分组：将20-22g C57BL/6J小鼠，SPF级，适应性喂养1周，随机分为12组，每组6只，分别为空白对照组、模型组、阳性药物组、实施例1-7及对比例1-2组。
小鼠双侧肾缺血再灌注手术造模方法：5％水合氯醛按75μl/10g腹腔注射麻醉碘伏消毒，腹部正中切开，钝性分离双侧肾蒂血管，用无损伤动脉夹阻断肾蒂血管45min、松开，恢复肾血流，依次缝合。
空白对照组无干预。模型组、阳性药物组和实施例1-7及对比例1-2各组进行双侧肾缺血再灌注手术造模；术后每天按体重给药一次，采用药物干预12d后，通过尾静脉取血80-100μl，4℃×4000rpm离心15min，取上层血清放-30℃保存，检测尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)。取各小鼠双肾，取一部分剪碎后加生理盐水制成匀浆液，4000r/min，4℃离心10min，进行丙二醛(MDA)含量检测；各组用药情况如下表1：
表1小鼠分组及各组给药
检测结果如下表2。
表2肾脏指标
组别 BUN(mmol/L) SCr((μmol/L) MDA(nmol/mL)
空白对照组 5.04±1.23a 17.06±1.27a 0.61±0.28a
模型组 21.71±3.69b 153.46±11.21b 1.69±0.17b
阳性药物组 17.32±6.22c 115.64±13.02c 1.13±0.44c
实施例1 16.04±3.51d 103.22±6.46d 1.12±0.56c
实施例2 9.18±2.55e 80.09±10.03e 0.87±0.83e
实施例3 9.23±3.04e 77.23±5.67e 0.86±1.06e
实施例4 11.46±6.25f 89.21±7.41f 0.79±0.47f
实施例5 14.21±3.14g 96.23±7.05g 0.73±1.23g
实施例6 8.12±3.11h 34.33±3.04h 0.67±0.40h
实施例7 6.97±2.17i 26.81±5.37i 0.63±0.27a
对比例1 17.38±5.44c 131.60±15.22j 1.16±0.18c
对比例2 19.64±8.23j 119.41±16.37c 1.37±1.14d
同一列表中，不同字母间具有显著性差异，P＜0.05。
与空白对照组相比，模型组的肾脏指标具有显著性差异，说明造模成功。与模型组相比，实施例1-7及对比例1-2具有显著性差异，说明本申请中实施例1-7提供的提取物及提取物组合物对改善微循环具有较好的功效。同时，提取物的制备方法和组合物的种类对其功效具有一定的影响。
2.试验2-肾脏微循环影响
对实施例1的提取物进行小鼠急性肾损伤肾脏的病理研究、肾损伤小鼠肾纤维化研究和小鼠肾微循环变化研究。
按照试验1的造模方法和药物干预方法，采用双侧肾缺血再灌注手术造模；缺血30min、45min、60min后再灌注。
重复小鼠肾缺血再灌注手术，设置缺血0min对照组(I/R+Sham)、缺血0min再灌注+全杜仲胶囊组(Sham+EU)、缺血0min再灌注+PDG组(Sham+PDG)、缺血30min模型组(30I/R)、缺血30min再灌注+全杜仲胶囊组(30I/R+EU)、缺血30min再灌注+PDG组(30I/R+PDG)、缺血45min再灌注组(45I/R)、缺血45min再灌注+全杜仲胶囊组(45I/R+EU)和缺血45min再灌注+PDG组(45I/R+PDG)，缺血60min再灌注组(60I/R)、缺血60min再灌注+全杜仲胶囊组(60I/R+EU)和缺血60min再灌注+PDG组(60I/R+PDG)每组10只。各组用药情况如下表3：
表3小鼠分组及各组给药
组别 给药种类 给药剂量
I/R+Sham 生理盐水 0.5g/kg生理盐水
Sham+EU 全杜仲胶囊 0.494g/kg
Sham+PDG 实施例1产品 35mg/kg
30I/R 生理盐水 0.5g/kg生理盐水
30I/R+EU 全杜仲胶囊 0.494g/kg
30I/R+PDG 实施例1产品 35mg/kg
45I/R 生理盐水 0.5g/kg生理盐水
45I/R+EU 全杜仲胶囊 0.494g/kg
45I/R+PDG 实施例1产品 35mg/kg
60I/R 生理盐水 0.5g/kg生理盐水
60I/R+EU 全杜仲胶囊 0.494g/kg
60I/R+PDG 实施例1产品 35mg/kg
给药12d后处死小鼠，取各小鼠双肾，使用4％甲醛固定，寄赛维尔生物科技有限公司进行石蜡切片、HE染色、Masson染色和CD31免疫组化染色，使用Image-Pro Plus分析CD31免疫组化染色图片。
2.1小鼠急性肾损伤肾脏的病理影响
小鼠肾HE染色病理结果显示(图1，各组随机选取1只)，I/R 30min：可见小鼠肾脏弥散性水肿改变为主；I/R 45min：血管球萎缩，肾小囊腔增大，个别刷状缘丢失；I/R60min：肾小管扩张，基质减少，肾小囊腔增大，刷状缘消失，肾损伤60I/R＞45I/R＞30I/R，PDG组可降低I/R诱导的肾损伤。
2.2急性肾损伤小鼠肾纤维化的影响
C57BL/6J小鼠术后各组肾Masson染色结果显示(图2，各组随机选取1只)，I/R后C57BL/6J小鼠肾脏出现一定程度的纤维化，并随着缺血时间的延长而加重，并伴随着一定的病变，PDG可在一定程度上降低缺血再灌注小鼠肾纤维化程度，并减少了一定程度的病理损伤。
2.3急性肾损伤小鼠肾微循环变化的影响
CD31又称为血小板-内皮细胞粘附分子，在组织切片IHC中通常位于血管内皮细胞，可用于证明内皮细胞组织的存在。I/R后小鼠肾脏CD31表达显著降低(图3，各组随机选取1只)，可能缺血再灌注后引起的多方面因素导致炎症、凋亡、微血管堵塞等因素有关，PDG可在一定程度上恢复CD31染色；经Image-Pro plus分析(图4为去除肾小球后Per Area分析，各组随机选取1只的分析结果)；同时，经CD31相对表达量Image-Pro plus Per Area分析，得到CD31相对表达量结果，见表4：
表4CD31表达
组别 CD31相对表达量(Per Area)
I/R+Sham 4.3±0.8e
30I/R 1.6±0.3a
30I/R+EU 2.3±0.7b
30I/R+PDG 3.1±0.4c
45I/R 1.5±0.2a
45I/R+EU 2.6±0.9b
45I/R+PDG 3.5±0.5d
60I/R 1.2±0.4a
60I/R+EU 3.7±0.5d
60I/R+PDG 4.2±0.7e
同一列表中，不同字母间具有显著性差异，P＜0.05。
由上表数据可知，PDG可显著提升CD31表达，提示其改善了肾的微循环。
3.试验3大鼠体表微循环
方法：选择7-8周龄、体重180-190g的雄性原发性高血压大鼠SHR 36只，分为6组，每组6只，分别为模型组(SHR组)、全杜仲胶囊组(阳性药物组)、实施例1高剂量组、实施例1中剂量组、实施例1低剂量组、实施例2低剂量组；另选体重180-190的SD正常大鼠6只，作为正常对照组；对原发性高血压大鼠进行药物干预8周；用药详情如下：
全杜仲胶囊组(阳性药物组)6g/kg/d(按原药材计)、实施例1组35mg/kg/d(高剂量)、实施例1组17.5mg/kg/d(中剂量)、实施例1组8.75mg/kg/d(低剂量)、实施例2组8.75mg/kg/d(低剂量)、正常对照组和SHR组给予6g/kg/d的生理盐水。
使用Moor LDI激光多普勒血流成像系统(线扫)和Moor VMS双通道激光多普勒血流(LDF)检测系统(点扫)；分别检测药物干预8周后大鼠体表耳部的微循环变化情况。
药物干预后，随机选取1只进行大鼠体表皮肤微循环测定；激光多普勒体表皮肤线扫测定血液灌流血流量PU值明显增加(如图5)。
统计每组大鼠体表耳部的微循环表面血液灌流量(点扫)，其结果对比见下表。
表5大鼠体表耳部的微循环表面血液灌流量
组别 左耳血液灌流量(PU) 右耳血液灌流量(PU)
正常对照组 232.6±20.3a 231.8±35.7a
模型组 111.4±17.6b 110.6±14.1b
阳性药物组 206.1±13.4c 204.2±23.9c
实施例1 215.7±20.4d 218.7±30.4d
实施例2 256.3±9.8e 258.2±15.1e
实施例3 257.9±11.3e 256.6±22.6e
实施例4 243.5±20.5f 244.0±21.5f
实施例5 227.6±17.9a 228.1±17.8a
实施例6 271.4±10.2h 272.8±14.6h
实施例7 298.3±21.4i 295.6±27.3i
对比例1 199.7±15.8c 201.2±19.7c
对比例2 163.5±22.6g 164.8±23.1g
同一列表中，不同字母间具有显著性差异，P＜0.05。
与模型组相比，实施例1-7及对比例1-2具有显著性差异，说明本申请中实施例1-7提供的提取物及提取物组合物对改善微循环具有较好的功效，且效果好于全杜仲胶囊的功效。同时，提取物的制备方法和组合物的种类对其功效具有一定的影响。
上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。

Claims (4)

1.一种改善急性肾损伤导致的肾微循环和/或原发性高血压导致的体表皮肤微循环的杜仲提取物，所述提取物包括：松脂醇二葡萄糖苷；
所述杜仲提取物的制备方法，包括以下步骤：
（1）取杜仲皮，粉碎，使用乙醇水溶液进行提取，过滤，制得粗提液；所述乙醇水溶液的质量浓度为30-80wt%；所述提取的温度为45-60℃；
（2）将粗提液加入0.1-0.5%质量的柠檬酸钠，使用大孔吸附树脂吸附、洗脱处理；将洗脱液再使用葡聚糖凝胶柱进行吸附、洗脱，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物；大孔吸附树脂吸附后依次使用纯水、45-60 wt%乙醇进行洗脱，其中，纯水的用量为1-3BV，洗脱速率0.5-1BV/h；45-60 wt%乙醇的用量为2-4 BV；洗脱速率1-2BV/h；葡聚糖凝胶柱吸附后，使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为30-45wt%，柠檬酸的质量分数为0.5-1.5 wt %；
步骤（2）中，所述大孔吸附树脂为D101型和HPD100A型中的任一种或两种；
步骤（2）中，所述葡聚糖凝胶为Sephadex LH-60 和Sephadex LH-20中的任一种或两种。
2.如权利要求1所述的杜仲提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取杜仲皮，粉碎，使用乙醇水溶液进行提取，过滤，制得粗提液；所述乙醇水溶液的质量浓度为30-80wt%；所述提取的温度为45-60℃；
（2）将粗提液加入0.1-0.5%质量的柠檬酸钠，使用大孔吸附树脂吸附、洗脱处理；将洗脱液再使用葡聚糖凝胶柱进行吸附、洗脱，将洗脱液干燥，制得杜仲提取物；大孔吸附树脂吸附后依次使用纯水、45-60 wt%乙醇进行洗脱，其中，纯水的用量为1-3BV，洗脱速率0.5-1BV/h；45-60 wt%乙醇的用量为2-4 BV；洗脱速率1-2BV/h；葡聚糖凝胶柱吸附后，使用含柠檬酸的乙醇水溶液进行洗脱，其中，所述乙醇水溶液中乙醇的质量分数为30-45wt%，柠檬酸的质量分数为0.5-1.5 wt %；
步骤（2）中，所述大孔吸附树脂为D101型和HPD100A型中的任一种或两种；
步骤（2）中，所述葡聚糖凝胶为Sephadex LH-60 和Sephadex LH-20中的任一种或两种。
3.如权利要求1所述的杜仲提取物或权利要求2所述提取物的制备方法制备的杜仲提取物在制备改善急性肾损伤导致的肾微循环和/或原发性高血压导致的体表皮肤微循环药物中的应用。
4.一种改善急性肾损伤导致的肾微循环和/或原发性高血压导致的体表皮肤微循环的药物，其特征在于，所述药物包括权利要求1所述的杜仲提取物或权利要求2所述提取物的制备方法制备的杜仲提取物。
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