CN114216987B - 高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 - Google Patents
高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114216987B CN114216987B CN202111576710.5A CN202111576710A CN114216987B CN 114216987 B CN114216987 B CN 114216987B CN 202111576710 A CN202111576710 A CN 202111576710A CN 114216987 B CN114216987 B CN 114216987B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- impurity
- cefixime
- solution
- retention time
- respect
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 229960002129 cefixime Drugs 0.000 title claims abstract description 154
- OKBVVJOGVLARMR-QSWIMTSFSA-N cefixime Chemical compound S1C(N)=NC(C(=N\OCC(O)=O)\C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=C(C=C)CS[C@@H]32)C(O)=O)=O)=C1 OKBVVJOGVLARMR-QSWIMTSFSA-N 0.000 title claims abstract description 130
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 53
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 197
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Substances OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 12
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 5
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 79
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 71
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 20
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 15
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 13
- AAEQXEDPVFIFDK-UHFFFAOYSA-N 3-(4-fluorobenzoyl)-2-(2-methylpropanoyl)-n,3-diphenyloxirane-2-carboxamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1NC(=O)C1(C(=O)C(C)C)OC1(C=1C=CC=CC=1)C(=O)C1=CC=C(F)C=C1 AAEQXEDPVFIFDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 9
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 9
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 4
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N phenanthrene Chemical compound C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 claims description 3
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract description 18
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract description 18
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 15
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 abstract 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 40
- XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N (3s,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N 0.000 description 27
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 25
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 19
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- OKBVVJOGVLARMR-VINNURBNSA-N (6r,7r)-7-[[(2e)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound S1C(N)=NC(C(=N/OCC(O)=O)\C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=C(C=C)CS[C@@H]32)C(O)=O)=O)=C1 OKBVVJOGVLARMR-VINNURBNSA-N 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- ZDMZWMRTKADQNC-HBWVYFAYSA-N (6r,7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-methyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@H]1[C@@H]2N(C1=O)C(=C(CS2)C)C(O)=O)C(=O)C(=N/OCC(O)=O)\C1=CSC(N)=N1 ZDMZWMRTKADQNC-HBWVYFAYSA-N 0.000 description 6
- QVMFLNUARRRNPY-UHFFFAOYSA-N 7-[[2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2-ethoxy-2-oxoethoxy)iminoacetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound C12SCC(C=C)=C(C(O)=O)N2C(=O)C1NC(=O)C(=NOCC(=O)OCC)C1=CSC(N)=N1 QVMFLNUARRRNPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 4
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 4
- VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium hydroxide Chemical compound [OH-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 2
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 2
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 2
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 2
- 201000003146 cystitis Diseases 0.000 description 2
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 206010024971 Lower respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 1
- 201000010927 Mucositis Diseases 0.000 description 1
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 description 1
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 1
- 206010037596 Pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 238000010971 suitability test Methods 0.000 description 1
- 238000011003 system suitability test Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- -1 t-butyl cefixime Chemical compound 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
Abstract
本发明提出一种高效液相色谱分析头孢克肟片有关物质的方法,其采用反相高效液相色谱柱,以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料,0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)‑甲醇(95∶5)为流动相A,0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)‑甲醇(50∶50)为流动相B,采用梯度洗脱。本发明的方法能同时检测头孢克肟片相关的工艺杂质和降解杂质,运行时间较短,基线相对平缓,主成分与各杂质分离度理想,具有较好的专属性、稳定性和精确度。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析领域,具体涉及一种用高效液相色谱评价药物质量的方法。
背景技术
头孢克肟(Cefixime)为口服用的第三代头孢菌素类抗生素,适用于治疗以下由易感微生物引起的急性感染:上呼吸道感染:例如中耳炎;以及其他已知或怀疑病原体对其他常用抗生素具有抗性的上呼吸道感染,或治疗失败可能带来重大风险的其他上呼吸道感染。下呼吸道感染:例如支气管炎。尿路感染:例如膀胱炎,膀胱尿道炎,无并发症的肾盂肾炎。对于由肺炎链球菌,化脓性链球菌,大肠杆菌,奇异变形杆菌,克雷伯氏菌种,流感嗜血杆菌(β-内酰胺酶阳性和阴性),粘膜炎布兰汉氏球菌(β-内酰胺酶阳性和阴性)和肠杆菌属引起的感染也有临床治疗效果。
头孢克肟片首先由LEDERLE LABORATORIES DIV AMERICAN CYANAMID CO公司研发,1989年在美国上市,上市规格包括200mg和400mg。
头孢克肟片在合成和储存过程中会产生多种工艺杂质和降解杂质,具体见表1。
头孢克肟目前收载于中国药典、美国药典、美国药典论坛、英国药典(同欧洲药典)、日本药典中,通过对比各法定标准中的有关物质方法可知,方法主要分为两大色谱体系,一个是四丁基氢氧化铵色谱体系,一个是磷酸盐缓冲液体系。
中国药典项下的方法(四丁基氢氧化铵色谱体系),其方法未收载特定杂质,对于其他文献中方法而言部分特定杂质无法达到分离,而以磷酸盐缓冲体系为美国药典论坛下的方法和英国药典(同欧洲药典),该方法收载了多个特定已知杂质,更为全面。
表1.头孢克肟已知杂质
对比美国药典、美国药典论坛文献和英国药典,发现其对于头孢克肟杂质B:美国药典论坛收载的头孢克肟杂质B(四种杂质结构)比英国药典(两种杂质结构)多了两种结构,更为全面。
因此,为确保本品的有关物质方法的检测能力,我们对上述两个色谱体系方法做了详细的对比。对比结果显示,参照美国药典论坛方法虽然能够检测各已知杂质,但不足之处在于,对杂质B中的各个结构(B1、B2、B3、B4)不能充分分离,杂质A和杂质E也有可能因pH值的细微变化无法分离。故需根据实际情况需要重新开发更为适宜的方法进行头孢克肟片方法开发。
发明内容
本发明提出一种高效液相色谱分析头孢克肟有关物质的方法,其采用如下检测条件:
色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶柱;
流动相:以0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(95∶5)为流动相A,0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(50∶50)为流动相B;采用梯度洗脱,梯度洗脱程序如下表所列:
在一个优选实施方式中,制备供试品溶液的稀释液是是0.05moL/L磷酸二氢钾溶液-0.05moL/L无水磷酸氢二钠溶液按体积比40:60的混合溶液。
在一个优选实施方式中,系统适用性溶液的制备:取头孢克肟适量,加入水稀释制成每1mL中约含头孢克肟0.5mg的溶液,于95℃水浴加热45min后取出,放冷即得。
在一个更优选的实施方式中,混合溶液的制备:取头孢克肟适量,加适量杂质A、B、C、D、E、F头孢克肟叔丁酯对照品溶液,用所述稀释液稀释至每1ml中含头孢克肟片约0.5mg、杂质A、B、C、D、E、F、头孢克肟叔丁酯约0.005mg的混合溶液。
用于本发明的检测器可以采用二极管阵列检测器或紫外检测器中,检测波长为190-400nm,优选地为254nm。流速范围为1.4ml/min~1.6ml/min,优选1.5ml/min。
本发明中,色谱柱柱温为38~42℃,优选40℃。
根据本发明检测有关物质的方法能检出杂质A、B、C、D、E、F和头孢克肟叔丁酯,该检测方法对降解杂质分离较好,方法运行时间较短,基线相对平缓。对水浴检出杂质数目为13个,主成分与特定杂质、工艺杂质及降解杂质分离均较好,方法专属性较好。本发明方法研究出校正因子法定量杂质A、B、C、D、E、F和头孢克肟叔丁酯,有效节约了从国外购买杂质的费用。
本发明的方法不仅可以用于头孢克肟片原料药合成过程中的杂质监测的分析检测,还可以用于头孢克肟原料药以及各种制剂(比如头孢克肟片等剂型)的有关物质检测与监测。
附图说明
图1是根据本发明方法对头孢克肟片相关杂质混合对照品溶液检测的色谱图,图中各杂质均已标记出来。
图2是根据本发明方法对头孢克肟片氧化降解样品进行系统适应性测试的色谱图。
图3至图16分别是本发明条件下头孢克肟及相关杂质(A1、A2、A3、A4、B1、B2、B3、B4、C、D、E、F和头孢克肟叔丁酯)的线性关系图。
图17是本发明条件下酸破坏降解试验专属性色谱图。
图18是本发明条件下碱破坏降解试验专属性色谱图。
图19是本发明条件下高温破坏降解试验专属性色谱图。
图20是本发明条件下高湿破坏降解试验专属性色谱图。
图21是本发明条件下氧化破坏降解试验专属性色谱图。
具体实施方式
色谱条件
在本发明的典型实施例中,色谱条件为:
色谱柱:五氟苯基填料的十八烷基硅烷键合硅胶柱,4.6×250mm,5μm;
流动相A:0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(95∶5);
流动相B:0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(50∶50);
流速:1.5ml/min;
波长:254nm;
柱温:40℃;
进样量:20μl。
梯度程序:
供试品与对照品溶液的制备
供试品溶液和对照品溶液制备:本发明的实施例使用的稀释液是0.05moL/L磷酸二氢钾溶液-0.05moL/L无水磷酸氢二钠溶液按体积比40:60的混合溶液。因为头孢类物质溶液稳定性较差,故供试品需临用新配,对照品溶液在此溶剂下24h内稳定。
供试品溶液制备:取头孢克肟片制剂粉末适量,精密称定,加入稀释液适量,使其溶解并稀释成每1ml中约含头孢克肟片0.5mg的溶液,摇匀,滤过,取续滤液。
对照品溶液精密称取头孢克肟对照品适量,加稀释液定量稀释制成每1ml中约含头孢克肟0.005mg的溶液。
系统适用性溶液取头孢克肟对照品适量,精密称定,加水溶解并稀释制成每1ml中含0.5mg的溶液,于95℃水浴中加热45min,冷却。
系统适应性
以上述方法获得的系统适用性试液,取20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,按头孢克肟、头孢克肟杂质D的顺序出峰,头孢克肟峰与头孢克肟杂质D峰间的分离度应不低于8.0,头孢克肟的拖尾因子不得高于1.5。
精密量取供试品溶液及对照溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。
供试品溶液色谱图中如有杂质峰,照下表2中的相对保留时间定位各杂质,按乘以校正因子的主成分外标法计算各杂质含量。头孢克肟杂质A1按校正后峰面积计算,不得大于对照品溶液主峰面积的2倍(2.00%);头孢克肟杂质A2、头孢克肟杂质A4按校正后峰面积计算,均不得大于对照品溶液主峰面积的1倍(1.00%);头孢克肟杂质A3按校正后峰面积计算,不得大于对照品溶液主峰面积的0.5倍(0.50%);头孢克肟杂质B1、头孢克肟杂质B2、头孢克肟杂质B3、头孢克肟杂质B4、头孢克肟杂质F按校正后峰面积计算,均不得大于对照品溶液主峰面积的0.75倍(0.75%);头孢克肟杂质C、头孢克肟杂质D、头孢克肟杂质E、头孢克肟叔丁酯按校正后峰面积计算,不得大于对照品溶液主峰面积的0.2倍(0.20%);其他单个杂质不得大于对照品溶液主峰面积的0.2倍(0.20%);杂质总量按校正后峰面积计算,不得大于对照品溶液主峰面积的5倍(5.00%)。
表2.系统适应性试验各成分保留时间和校正因子
取头孢克肟适量,加适量杂质A(含杂质A1、A2、A3、A4)、B(含杂质B1、B2、B3、B4)、C、D、E、F头孢克肟叔丁酯对照品溶液,用所述稀释液稀释至每1ml中含头孢克肟片约0.5mg、杂质A、B、C、D、E、F、头孢克肟叔丁酯约0.005mg的混合溶液。按照上述色谱条件分析,各成分的分离情况列于表3,测试图谱见图1。
表3.混合液中各组分分离情况
由表3可知,各组分间分离度均大于1.5,专属性良好。
为了获得头孢克肟片与降解杂质分离情况,采用头孢克肟片水浴高温降解样品考察头孢克肟片与相邻杂质的分离情况。水浴高温降解样品的制备方法为:称取头孢克肟片(规格:100mg,批号:191202)片粉适量,精密称定,85℃水浴0.5小时,放至室温,以稀释液溶解并稀释成每1ml约含头孢克肟0.5mg的溶液,滤过,取续滤液作水浴高温降解样品供试溶液。
取水浴高温降解样品溶液,按照上述方法进行检测,头孢克肟峰与相邻杂质峰分离较好,各降解杂质间分离度较好,检出杂质个数为13个,测试图谱见图2。
检测限与定量限
取头孢克肟片对照品(批号:130503-201706)、头孢克肟杂质A对照品(头孢克肟杂质A1、杂质A2、杂质A3、杂质A4)(批号:12F-12-25)、头孢克肟杂质B对照品1(头孢克肟杂质B1、杂质B2)(批号:3441-013A7)、头孢克肟杂质B对照品2(头孢克肟杂质B3、杂质B4)(批号:PITBKW-B(7E)-EP-20200323-01)、头孢克肟杂质C对照品(批号:12F-12-26)、头孢克肟杂质D(批号:2235-096A5)、头孢克肟杂质E对照品(批号:3072-002A2)、头孢克肟杂质F对照品(批号:3574-031A4)、头孢克肟叔丁酯对照品(批号:3574-040A8)适量,精密称定,加甲醇溶解并稀释成适当浓度的对照品储备液,精密移取对照品储备液适量,再用稀释液稀释成适当浓度的对照品溶液,按前述方法进样。按信噪比法计算,信噪比约为3:1时浓度为检测限浓度,信噪比约为10:1时浓度为定量限浓度,结果见表4。
表4.有关物质检测限、定量限测定结果
线性关系试验
取头孢克肟片对照品适量,精密称定,加甲醇溶解并稀释成适当浓度的对照品储备液,精密移取对照品储备液适量,加稀释液稀释成一系列浓度的对照品溶液,照前述方法进样,以头孢克肟片主峰峰面积为纵坐标(Y),头孢克肟片对照品溶液浓度为横坐标(X),以峰面积Y对浓度X(μg/ml)进行线性回归,线性方程、相关系数见图3。
另取杂质A对照品、杂质B对照品1、杂质B对照品2、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品、杂质F对照品、头孢克肟叔丁酯对照品溶液同法进行线性试验。线性相关图见图4至图16。
结果表明,头孢克肟杂质A1在0.46~13.28μg/ml浓度范围内,y=17,141.3795x+315.6174,相关系数为0.99994,截距偏差为0.18%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质A2在0.31~8.77μg/ml浓度范围内,y=17,063.3318x+482.8929,相关系数为0.99997,截距偏差为0.56%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质A3在0.23~6.44μg/ml浓度范围内,y=17,646.5885x-30.8325,相关系数为0.99995,截距偏差为0.07%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质A4在0.38~10.84μg/ml浓度范围内,y=16,981.11194x+479.47157,相关系数为0.99998,截距偏差为0.56%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质B1在0.14~7.37μg/ml浓度范围内,y=20,932.39872x-784.70785,相关系数为0.99998,截距偏差为1.01%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质B2在0.14~7.46μg/ml浓度范围内,y=20,302.2026x-893.4673,相关系数为0.9998,截距偏差为1.19%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质B3在0.13~6.67μg/ml浓度范围内,y=23,710.0719x+1,370.8405,相关系数为0.9998,截距偏差为1.72%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质B4在0.15~7.71μg/ml浓度范围内,y=24,780.5023x+1,002.6422,相关系数为0.9997,截距偏差为1.05%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质C在0.20~5.21μg/ml浓度范围内,y=23,908.27748x-77.49248,相关系数为0.99999,截距偏差为0.33%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质D在0.19~5.24μg/ml浓度范围内,y=23,598.0937x-43.1454,相关系数为0.9999,截距偏差为0.18%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质E在0.19~5.06μg/ml浓度范围内,y=28,964.1720x-417.6212,相关系数为0.9999,截距偏差为1.46%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟杂质F在0.29~7.47μg/ml浓度范围内,y=17,957.0250x+1,170.9450,相关系数为0.9999,截距偏差为1.71%,表明与峰面积线性关系良好;
头孢克肟叔丁酯在0.17~5.02μg/ml浓度范围内,y=21,093.12316x+411.67088,相关系数为0.99999,截距偏差为1.91%,表明与峰面积线性关系良好。
头孢克肟在0.20~10.44μg/ml浓度范围内,y=26,552.3466x-980.4232,相关系数为0.9999,截距偏差为0.74%,表明与峰面积线性关系良好。
校正因子的计算
根据上述线性方程的斜率值进行各杂质校正因子的计算如下表5。
表5.各杂质校正因子的计算表
校正因子(F)计算公式:F=头孢克肟斜率/杂质斜率
专属性试验结果
试验得出:在本色谱系统中,空白辅料不干扰主成分峰、特定杂质峰的检测;头孢克肟片峰与各杂质分离较好;头孢克肟片在1mol/L盐酸溶液、1mol/L氢氧化钠溶液、30%双氧水条件下进行降解试验,降解产物物料平衡系数较好,杂质均能检出,且杂质峰与主成分峰分离较好,主要降解杂质间分离较好;高温试验(60℃、30天)、高湿试验(RH75.3%、30天)条件下,头孢克肟片产生的降解杂质与主峰分离度良好,分离度均符合要求。说明本方法专属性较好,适用于本品有关物质检测。
耐用性试验
分别称取杂质A对照品、杂质B对照品1、杂质B对照品2、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品、杂质F对照品、头孢克肟叔丁酯、头孢克肟对照品适量,精密称定,加甲醇溶解并稀释成适当浓度的对照品储备液;精密分别移取对照品储备液适量,加稀释液稀释成适当浓度的混合液,略微调整色谱条件(柱温、流速、pH值、色谱柱),考察杂质A对照品、杂质B对照品1、杂质B对照品2、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品、杂质F对照品、头孢克肟叔丁酯、头孢克肟对照品的分离情况及相对保留时间改变情况,结果见表6。
表6.方法学耐用性试验结果1(自制样品)
上表中所述的初始条件为:以0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(95∶5)为流动相A,0.1mol/L乙酸铵溶液(用醋酸调节pH至4.0)-甲醇(50∶50)为流动相B流速:1.5mL/min,柱温:40℃,色谱柱:菲罗门Titank F5 C18 250×4.6mm,5μm,SN:19E0018103。
试验结论:测定条件参数的微调,系统适用性溶液头孢克肟与头孢克肟杂质D峰之间的分离度均不低于8.0,最小值为12.59,混合溶液中主峰与相邻杂质峰之间的分离度符合规定,最小值为3.20。
供试品溶液中,自制样品头孢克肟杂质A1的含量RSD为7.09%,其他单个杂质的极差最大值为0.04%,总杂含量的极差值为19.05%;均在可接受限度范围(RSD≤20%)之内表明方法耐用性良好。
精密度试验结果
1.进样精密度:
取对照品溶液连续进样6针,以对照品溶液中主峰峰面积、保留时间RSD为考察指标考察仪器的进样精密度,结果见表7。
表7.进样精密度试验结果
考察项目 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD(%) |
保留时间 | 36.066 | 36.054 | 36.049 | 36.099 | 36.105 | 36.144 | 0.10 |
峰面积 | 113237 | 114315 | 113934 | 116652 | 116885 | 114189 | 1.32 |
结果显示,对照品溶液连续进样6针,峰面积RSD值为1.32%,保留时间RSD值为0.10%,表明进样精密度良好。
2.重复性
取本品(批号:191202)分别按照前述供试品与对照品溶液的制备方法制备供试品溶液,均平行制备6份;另取头孢克肟对照品(批号:130503-201706)适量,精密称定,平行配制2份对照品溶液;另取头孢克肟对照品(批号:130503-201706)适量,精密称定,照前述供试品溶液配制制备系统适用性溶液;以本品6份样品的杂质含量测定结果及杂质含量测定极差考察方法的重复性,结果见表8。
表8.进样重复性试验结果
3.中间精密度:
取本品(批号:191202),以2个实验人员在不同仪器上于不同天分别进行重复性试验,以本品12份样品中的杂质含量测定结果及杂质含量测定极差考察方法的中间精密度,结果见表9。
表9.中间精密度试验结果
准确度试验
头孢克肟杂质A准确度试验溶液的配制:
对照品溶液:取头孢克肟对照品(批号:130503-201706)适量,精密称定,加稀释剂溶解并稀释制成0.005mg/ml的溶液,作为对照品溶液,平行制备2份;
杂质A对照品贮备液:取头孢克肟杂质A(批号:12F-12-25)约2mg,精密称定,置20ml量瓶中配制成杂质A贮备液溶液;
杂质A(包括A1、A2、A3、A4)低浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约25mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取杂质A对照贮备液各适量,使加入的头孢克肟杂质A1约为1.5μg/ml、杂质A2约为1μg/ml、杂质A3约为0.5μg/ml、杂质A4约为1μg/ml的溶液,作为杂质A1、A2、A3、A4的低浓度准确度溶液,平行配制3份;
杂质A(包括A1、A2、A3、A4)中浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约25mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取杂质A对照贮备液各适量,使加入的头孢克肟杂质A1约为2.5μg/ml、杂质A2约为1.5μg/ml、杂质A3约为1μg/ml、杂质A4约为1.5μg/ml的溶液,作为杂质A1、A2、A3、A4的中浓度准确度溶液,平行配制3份;
杂质A(包括A1、A2、A3、A4)高浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约12.5mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取杂质A对照贮备液各适量,使加入的头孢克肟杂质A1约为12μg/ml、杂质A2约为7.5μg/ml、杂质A3约为5μg/ml、杂质A4约为10μg/ml的溶液,作为杂质A1、A2、A3、A4的高浓度准确度溶液,平行配制3份;
其他各杂质对照品贮备液:取头孢克肟杂质B对照品1(含杂质B1、B2)(3441-013A7)、头孢克肟杂质C(批号:12F-12-26)、头孢克肟杂质D(批号:2235-096A5)、头孢克肟杂质E(批号:3072-002A2)、头孢克肟杂质F(批号:3574-031A4)、头孢克肟叔丁酯(批号:3574-040A8)各约2mg,精密称定,分别置20ml量瓶中,配制成各杂质贮备液溶液;
杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯低浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约25mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取其他各杂质对照品贮备液适量,使加入的头孢克肟杂质B1约为1.8μg/ml、B2约为1.8μg/ml、杂质C约为0.5μg/ml、杂质D约为0.5μg/ml、杂质E约为0.5μg/ml、杂质F约为1.8μg/ml、叔丁酯约为0.5μg/ml的溶液,作为杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯低浓度准确度溶液,平行配制3份;
杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯中浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约25mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取其他各杂质对照品贮备液适量,使加入的头孢克肟杂质B1约为3.75μg/ml、B2约为3.75μg/ml、杂质C约为1μg/ml、杂质D约为1μg/ml、杂质E约为1μg/ml、杂质F约为3.75μg/ml、叔丁酯约为1μg/ml的溶液,作为杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯中浓度准确度溶液,平行配制3份;
杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯高浓度准确度溶液:取本品(批号:191202)约25mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取其他各杂质对照品贮备液适量,使加入的头孢克肟杂质B1约为5.6μg/ml、B2约为5.6μg/ml、杂质C约为1.5μg/ml、杂质D约为1.5μg/ml、杂质E约为1.5μg/ml、杂质F约为5.6μg/ml、叔丁酯约为1.5μg/ml的溶液,作为杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、头孢克肟叔丁酯中浓度准确度溶液,平行配制3份;
杂质B对照品2(含杂质B3、B4)(批号:PITBKW-B(7E)-EP-20200323-01)对照品储备液:取专属性项下头孢克肟杂质B储备液(杂质B3、B4);
杂质B对照品2(含杂质B3、B4)对照品溶液:取头孢克肟杂质B储备液(杂质B3、B4)适量,加稀释剂稀释成7.5mg/ml的溶液,作为杂质B对照品溶液;
50%准确度溶液:取本品(批号:191202)样品细粉约25.5mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取杂质B对照品溶液适量,使加入的头孢克肟杂质B3、B4约为1.875μg/ml,过滤,取续滤液。平行配制3份;
100%准确度溶液:取本品(批号:191202)样品细粉约25.5mg,精密称定,置20ml量瓶中,精密量取杂质B对照品溶液适量,使加入的头孢克肟杂质B3、B4约为3.75μg/ml,过滤,取续滤液。平行配制3份;
150%准确度溶液:取本品(批号:191202)样品细粉约12.8mg,精密称定,置10ml量瓶中,精密量取杂质B对照品溶液适量,使加入的头孢克肟杂质B3、B4约为5.625μg/ml,过滤,取续滤液。平行配制3份;
取上述准确度溶液,照取20μL上述溶液进样测定,记录色谱图,按加校正因子的主成分外标法以峰面积计算回收率及RSD,结果见表10。
表10.头孢克肟杂质A1准确度试验结果
表11.头孢克肟杂质A2准确度试验结果
表12.头孢克肟杂质A3准确度试验结果
/>
表13.头孢克肟杂质A4准确度试验结果
表14.头孢克肟杂质B1准确度试验结果
表15.头孢克肟杂质B2准确度试验结果
/>
表16.头孢克肟杂质C准确度试验结果
表17.头孢克肟杂质D准确度试验结果
表18.头孢克肟杂质E准确度试验结果
表19.头孢克肟杂质F准确度试验结果
表20.头孢克肟叔丁酯准确度试验结果
表21.头孢克肟杂质B3准确度试验结果
表22.头孢克肟杂质B4准确度试验结果
表23.各杂质准确度试验结果汇总
结果显示,头孢克肟杂质A1、头孢克肟杂质A2、头孢克肟杂质A3、头孢克肟杂质A4、头孢克肟杂质B1、头孢克肟杂质B2,头孢克肟杂质F的回收率均在92.92%~105.01%之间;头孢克肟杂质C、头孢克肟杂质D、头孢克肟杂质E、头孢克肟叔丁酯的回收率在91.08%~104.63%之间,头孢克肟杂质B3、头孢克肟杂质B4的回收率在97.70%~103.09%之间,均符合要求,准确度良好。
头孢克肟片有关物质的检测
取三批头孢克肟片(批号:191202、191203、191204),照前述方法检测,结果见表24.
表24.头孢克肟片中有关物质的检测结果(%,校正因子法)
结论:本发明方法能有效分离并准确检出各已知的降解杂质,故本发明方法灵敏度高。
本发明确定的色谱方法经验证,其专属性强,能有效分离和检测样品中可能的工艺杂质和降解杂质,采用相对保留时间和校正因子来定量相关杂质,有效减少了需要从国外购买杂质对照品的时间与成本。该色谱方法可用于头孢克肟片原料药和制剂的有关物质质量控制。
Claims (10)
1.一种高效液相色谱法分析头孢克肟片有关物质的方法,其特征在于包括如下检测条件:
色谱柱采用五氟苯基填料的十八烷基硅烷键合硅胶柱;
流动相:以醋酸调节pH至4.0、0.1mol/L乙酸铵溶液与甲醇按95∶5的体积比为流动相A,用醋酸调节pH至4.0、0.1mol/L乙酸铵溶液与甲醇按50∶50体积比为流动相B; 采用梯度洗脱,梯度洗脱程序如下表所列:
。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,制备供试品溶液的稀释液是0.05moL/L磷酸二氢钾溶液-0.05moL/L无水磷酸氢二钠溶液按体积比40:60的混合溶液。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,系统适用性溶液的制备:取头孢克肟对照品适量,加入水稀释制成每1mL中-含头孢克肟0.5mg的溶液,于95℃水浴加热45min后取出,放冷即得。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,对照品溶液的制备包括:取头孢克肟适量,加适量杂质A、B、C、D、E、F、头孢克肟叔丁酯对照品溶液,用稀释液稀释至每1ml中含头孢克肟-0.5mg、杂质A、B、C、D、E、F、头孢克肟叔丁酯0.005mg的混合溶液。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,采用二极管阵列检测器、紫外检测器中的一种,检测波长为190-400nm。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,流速为1.4ml/min~1.6ml/min。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述色谱柱为菲罗门、Agilent其中的一种。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述色谱柱为五氟苯基填料的C18色谱柱,4.6×250mm,5μm。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其中相对保留时间0.48的杂质A1、相对保留时间0.55的杂质A2、相对保留时间0.81的杂质A3、相对保留时间0.86的杂质A4的校正因子为1.55,相对保留时间1.45的杂质B1、相对保留时间1.47的杂质B2、相对保留时间1.50的杂质B3、相对保留时间1.52的杂质B4的校正因子为1.29,相对保留时间1.19的杂质C、相对保留时间1.35的杂质D、相对保留时间0.59的杂质E的校正因子为1.0、相对保留时间1.67的杂质F的校正因子为1.48、相对保留时间1.84的头孢克肟叔丁酯为1.26。
10.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,检测波长为254nm。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111576710.5A CN114216987B (zh) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | 高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111576710.5A CN114216987B (zh) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | 高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114216987A CN114216987A (zh) | 2022-03-22 |
CN114216987B true CN114216987B (zh) | 2024-02-02 |
Family
ID=80704890
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111576710.5A Active CN114216987B (zh) | 2021-12-22 | 2021-12-22 | 高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114216987B (zh) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110780005A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-02-11 | 江苏海岸药业有限公司 | 一种克立硼罗原料及其合成中间体的分析方法 |
CN111487354A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-04 | 广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 | 一种检测头孢克肟相关杂质的方法 |
CN113740446A (zh) * | 2021-06-25 | 2021-12-03 | 浙江巨泰药业有限公司 | 一种头孢克肟及制剂含量降解质量守衡的有关物质分析方法 |
-
2021
- 2021-12-22 CN CN202111576710.5A patent/CN114216987B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110780005A (zh) * | 2019-11-14 | 2020-02-11 | 江苏海岸药业有限公司 | 一种克立硼罗原料及其合成中间体的分析方法 |
CN111487354A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-04 | 广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 | 一种检测头孢克肟相关杂质的方法 |
CN113740446A (zh) * | 2021-06-25 | 2021-12-03 | 浙江巨泰药业有限公司 | 一种头孢克肟及制剂含量降解质量守衡的有关物质分析方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114216987A (zh) | 2022-03-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
WO2018107975A1 (zh) | 一种右丙亚胺的分析方法 | |
CN116165319B (zh) | 富马酸福莫特罗吸入溶液中非对映异构体的检测方法 | |
CN109374781B (zh) | 一种注射用美洛西林钠舒巴坦钠中有关物质的检测方法 | |
CN115060832A (zh) | 奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及防腐剂含量检测方法 | |
CN109387587B (zh) | 一种l-2-氨基-5-胍基戊酸对映异构体的检测方法 | |
CN114216987B (zh) | 高效液相色谱分析头孢克肟片的方法 | |
CN113533578A (zh) | 一种盐酸溴己新片中有关物质的质量控制方法 | |
CN111487348B (zh) | 一种采用盐酸普拉克索固体制剂配制的盐酸普拉克索溶液及其测定方法 | |
CN111077232A (zh) | 一种沙库比曲缬沙坦钠有关物质的检验方法 | |
CN113740446B (zh) | 一种头孢克肟及制剂含量降解质量守衡的有关物质分析方法 | |
CN114354789B (zh) | 一种同时测定卡博替尼类似物及其有关物质的方法 | |
CN107525875B (zh) | 一种加米霉素有关物质的检测方法 | |
CN113588837B (zh) | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 | |
CN113484450B (zh) | 药物对映异构体检测用衍生化处理方法及测定方法、应用 | |
CN115097023A (zh) | 佐米胺有关物质的高效液相色谱检测方法 | |
CN110501436B (zh) | 替硝唑药物组合物中有关物质的检测方法 | |
CN115248260A (zh) | 一种苯磺顺阿曲库铵原料药中有关物质的hplc分析检测方法 | |
CN112067709A (zh) | 注射用头孢地嗪钠有关物质的测定方法及应用 | |
CN112834627B (zh) | 高效液相色谱法分离测定注射用兰索拉唑有关物质的方法 | |
CN115436541B (zh) | 一种水合氯醛的含量检测方法 | |
CN114200050B (zh) | 一种对溴苯甲醚中的有关物质含量的hplc检测方法 | |
CN115015457B (zh) | 高效液相色谱分析司来帕格中溴乙酸杂质的方法 | |
CN114414715B (zh) | 头孢他啶残留溶剂中苯的检测方法和应用 | |
CN112986468B (zh) | 检测盐酸环丙沙星片中氯代环丙沙星的分析方法 | |
CN109596756B (zh) | 一种组合物及普拉克索起始物料中有关物质的检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |