CN114107213A - Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用 - Google Patents

Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114107213A
CN114107213A CN202111337409.9A CN202111337409A CN114107213A CN 114107213 A CN114107213 A CN 114107213A CN 202111337409 A CN202111337409 A CN 202111337409A CN 114107213 A CN114107213 A CN 114107213A
Authority
CN
China
Prior art keywords
rprm
application
radiation
ionizing radiation
gene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202111337409.9A
Other languages
English (en)
Inventor
杨红英
张雅瑞
王敬东
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suzhou University
Original Assignee
Suzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou University filed Critical Suzhou University
Priority to CN202111337409.9A priority Critical patent/CN114107213A/zh
Publication of CN114107213A publication Critical patent/CN114107213A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0688—Cells from the lungs or the respiratory tract
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0693—Tumour cells; Cancer cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2740/15043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明揭示了一种RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，所述应用用于非疾病的诊断和治疗，具体的采用基因敲除或敲低技术用于抑制RPRM表达，或者采用小分子抑制剂用于靶向抑制RPRM蛋白、或用于抑制RPRM蛋白与IPO11结合而阻断RPRM核转运、或用于抑制RPRM蛋白与ATM结合，或者采用促进RPRM磷酸化的方法以增加组织的电离辐射耐受性。基于本发明所述的应用，进一步的指出了肿瘤放疗中对正常组织的辐射防护，减少肿瘤患者正常组织的辐射损伤从而降低放疗副作用并提高放疗效率，也可用于对辐射职业从业人员的辐射防护。为制备辐射防护剂上的应用提供了基础。

Description

RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用
技术领域
本发明涉及一种RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，属于生物技术领域。
背景技术
随着我国核工业和核电的发展以及核科技在国民经济各个领域的广泛应用，核辐射事故发生的可能性也随之增高，特别是日本“3.11”大地震和海啸引发的福岛核泄漏事故，引起了全世界对核安全和核应急的高度重视，加之核恐怖事件的隐忧，急性辐射损伤（ARI）防治的重要性日益凸显，已成为一个亟待解决的重要问题。另一方面，随着恶性肿瘤发生率的增长，作为肿瘤治疗重要手段之一的放疗应用日益广泛，超过一半的肿瘤患者在治疗的某个阶段中需要接受放射治疗。但电离辐射在杀伤肿瘤组织的同时，也会对正常组织造成不同程度的损伤，引发相关的副反应，从而严重降低患者治疗后的生活质量以及肿瘤预后。尽管通过图像引导和剂量分割等方法可在一定程度上降低电离辐射对正常组织的损伤，但患者在接受放射治疗的同时仍存在因正常组织靶外辐射损伤而产生副作用的风险。目前因辐射损伤副作用限制放疗疗效也是一个亟待解决的具有挑战性的医疗难题。所以，对提高正常组织辐射抗性方法包括辐射防护剂和基因抗辐射的研发和探索日趋紧迫。
发明内容
鉴于现有技术不能满足对正常组织进行辐射防护的需求，本发明提出了一种RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用。
本发明的目的，将通过以下技术方案得以实现：
RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，所述应用用于非疾病的诊断和治疗。
优选地，以上所述的RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，采用基因敲除或敲低技术用于抑制RPRM表达，或者采用小分子抑制剂用于靶向抑制RPRM蛋白、或用于抑制RPRM蛋白与IPO11结合而阻断RPRM核转运、或用于抑制RPRM蛋白与ATM结合，或者采用促进RPRM磷酸化的方法以增加组织受电离辐射的耐受性。
优选地，RPRM基因调控组织在制备辐射防护剂上的应用。
DNA双链断裂是电离辐射诱发的最致命的损伤，可以引发一系列细胞DNA损伤应答反应，其中包括激活DNA损伤感应、引发细胞周期阻滞、启动DNA损伤修复信号通路等，从而帮助细胞从辐射损伤中恢复并存活。未被修复的DNA损伤和持续的DNA损伤应答反应可导致慢性炎症，这也是辐射造成组织长期损伤的重要原因之一。因此，靶向DNA损伤修复信号通路及其相关蛋白是提高正常组织辐射耐受性的一种有效策略。
本发明所述的Reprimo（RPRM）是一个受电离辐射诱导的p53依赖的抑癌基因，通过基因敲除/敲低技术抑制RPRM表达或者采用小分子抑制剂靶向抑制RPRM、或抑制其与IPO11结合从而阻断其核转运、或抑制其与ATM结合，以及促进其磷酸化等方式都可以有效地增加正常组织对电离辐射的耐受能力，从而降低正常组织在受照后的辐射损伤程度。本发明的应用为制备辐射防护剂的研发提供基础和研究方向。基于本发明所述的应用，进一步的指出了肿瘤放疗中对正常组织的辐射防护，减少肿瘤患者正常组织的辐射损伤从而降低放疗副作用并提高放疗效率，也可用于对辐射职业从业人员的辐射防护。为制备辐射防护剂上的应用提供了基础。
以下便结合实施例附图，对本发明的具体实施方式作进一步的详述，以使本发明技术方案更易于理解、掌握。
附图说明
图1是小鼠全身辐照后体重变化曲线；
图2是小鼠全身辐照后生存期分析；
图3是小鼠全身辐照后骨髓HE染色；
图4是小鼠全腹照射后小肠HE染色；
图5是小鼠小肠绒毛长度定量分析；
图6是小鼠小肠γ-H2AX免疫组织化学染色图片；
图7是小鼠小肠γ-H2AX表达水平定量分析；
图8是小鼠小肠Ki-67免疫组织化学染色图片；
图9是小鼠小肠Ki-67表达水平定量分析；
图10是敲除IPO11后核内RPRM的蛋白表达水平；
图11是敲除IPO11后微核阳性细胞率；
图12是抑制CDK4/6后核内RPRM蛋白表达水平；
图13是抑制CDK4/6后微核阳性细胞率；
图14是RPRM磷酸化位点失活突变后微核阳性细胞率。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
（1）动物饲养和辐照
实验动物均为无特定病原体（specific pathogen free， SPF）小鼠，饲养于苏州大学实验动物中心SPF动物房。
全身辐照模型构建：采用X射线机（X-RAD320ix，美国）对小鼠（3月龄，每组雌雄各20只）进行9 Gy全身辐照，剂量率为2.0 Gy/min。
造血系统急性损伤模型构建：采用X射线机（X-RAD320ix，美国）对小鼠（3月龄雄鼠，每组各3只）进行9 Gy全身辐照，剂量率为2.0 Gy/min，并于照射后6、24小时收集小鼠骨髓样本。
肠损伤模型构建：采用X射线机（RS2000 X，美国）对小鼠（3月龄雄鼠，每组各3只）进行9 Gy全腹照射，剂量率为1.16 Gy/min，并于照射后3.5天收集小肠样本。以上所有模型均包含RPRM基因敲除小鼠和其对照的野生型小鼠。
（2）生存期实验
小鼠接受全身辐照后继续饲养，每天测量体重并观察存活情况，直至小鼠死亡。
（3）病理学检测
小肠样本经过4%多聚甲醛固定后，分别用75%、85%、95%和无水乙醇进行梯度脱水，再通过二甲苯透明，石蜡包埋后制成病理切片。骨髓样本用4%多聚甲醛固定后先进行脱钙处理，之后的切片制备步骤同小肠。HE染色：制备好的切片通过脱蜡、复水操作后分别用苏木素、伊红染液进行染色。免疫组织化学染色：经过脱蜡、复水后，用柠檬酸钠抗原修复液进行抗原修复。之后经过浸洗和封闭，室温孵育相应的一抗（γ-H2AX，1:5000；Ki67，1:50）和二抗工作液。随后用DAB显色液进行显色反应。待显色结束后用苏木色染液使细胞核着色。最后再经过脱色处理后封片。
（4）细胞培养
人非小细胞肺癌细胞H460培养于含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素、1%丙酮酸钠和1% HEPES的完全培养液中。传代时，吸取培养液，用PBS清洗后加入适量0.25%含EDTA的胰酶消化5分钟，之后用等量完全培养液进行中和，1000 rpm离心5 min，弃去上清后加入适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，重新接种。
（5）质粒转染
取7×105个细胞接种于6孔板中，第二天更换新鲜培养液后加入按适当比例混合的质粒DNA、Lipo8000和无血清培养基混合物，在37℃，含5%二氧化碳的细胞培养箱中孵育4-6小时后更换为不含质粒的新鲜培养液，并继续培养48-72小时。
（6）慢病毒感染
取7×105个细胞接种于6孔板中，第二天更换为1 ml新鲜培养液，同时加入适量慢病毒悬液，培养箱中培养6小时后补加1 ml培养液，继续培养24小时。之后更换为不含病毒的新鲜培养液，继续培养48-72小时。
（7）蛋白免疫印迹实验
取8×106个细胞接种于100 mm细胞培养皿中，第二天更换新鲜培养液，采用X射线机（RS2000 X，美国）进行10 Gy辐照。照后30分钟收集细胞，分别提取细胞质和细胞核蛋白。蛋白变性后进行蛋白质凝胶电泳，经过转膜、封闭后4℃孵育相应的一抗（RPRM，1:1000；IPO11，1:500；Tubulin，1：1000；Histone H3，1：1000；GAPDH，1：1000；）18-22小时，之后室温孵育相应的二抗。最后采用ECL化学发光法检测目标蛋白。
（8）微核形成实验
分别取1×105个细胞接种于18 mm圆形载玻片上，并放置于12孔板中，第二天更换新鲜培养液后用X射线机（RS2000 X，美国）进行2 Gy辐照。照后24小时，用固定液（无水甲醇与乙酸，体积比3:1）固定细胞。细胞经PBS水化后用4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）对细胞核进行染色。然后在正置显微镜（Leica，德国）下计数微核阳性细胞。
（9）统计分析
本实施例中所有给出的数据结果表示为平均值±标准误差。处理组和对照组之间的比较采用OriginPro2019软件进行双向方差分析，P值<0.05被认为是有统计学意义的。
实验结果
（1）RPRM基因敲除小鼠生存期延长，放射敏感性降低
本发明中涉及的具体的RPRM基因敲除方法参见中国专利CN201910405248.9。
请参阅图1和图2，野生型小鼠接受全身辐照后体重迅速下降，最大降幅接近40%。而RPRM基因敲除小鼠体重下降缓慢，第4天至第8天下降幅度一直维持在20%左右，甚至在第8天至第10天出现小幅度回升，随后再次下降直至死亡，如图1所示。受照后，野生型小鼠第4天开始死亡，至第6天全部死亡。RPRM基因敲除小鼠受照后第4天存活率仍为100%，第6天开始死亡，至第8天生存率才降至35%，并一直存活至照后第15天，如图2所示。以上结果表明RPRM基因敲除小鼠对电离辐射更加耐受，RPRM基因敲除对生物体具有很好的辐射防护作用。
（2）RPRM基因敲除小鼠急性放射性骨髓损伤减轻
请参阅图3，野生型小鼠接受全身辐照后6小时，骨髓腔内出现明显的出血，表现为红细胞浸润，并伴随有核细胞数目减少，骨髓增生活跃度下降。而RPRM基因敲除小鼠受照后骨髓腔内红细胞浸润现象明显轻于野生型小鼠。受照后24小时，野生型小鼠髓腔内出血更为明显，有核细胞大量减少，骨髓增生受到抑制。而RPRM基因敲除小鼠髓腔内红细胞浸润较6小时无明显加重，有核细胞数也无进一步减少，骨髓增生活跃度仍高于野生型小鼠。以上结果表明RPRM基因敲除可以减轻小鼠电离辐射诱导的急性骨髓损伤，提高小鼠的辐射耐受性。
（3）RPRM基因敲除小鼠放射性肠损伤减轻
请参阅图4至图9，全腹照射后3.5天，野生型小鼠小肠绒毛发生明显的萎缩和断裂，隐窝数量减少，结构不完整。而RPRM基因敲除小鼠肠绒毛未见明显萎缩，断裂情况较野生型小鼠轻；小肠壁结构完整，隐窝数量虽有减少，但仍明显多于野生型小鼠，如图5所示。对小肠细胞DNA损伤情况进行检测，受照后野生型小鼠小肠细胞γ-H2AX的表达水平升高了1.9倍，而RPRM基因敲除小鼠小肠细胞γ-H2AX的表达水平仅升高了0.6倍，如图6-图7所示。提示RPRM基因敲除后小鼠放射性肠损伤减轻。进一步通过Ki-67染色对小肠细胞增殖情况进行检测，受照后野生型小鼠Ki-67表达水平下降了57.8%，而基因敲除小鼠仅下降了28.7%，如图8-图9所示。这些结果表明RPRM基因敲除小鼠对电离辐射更加耐受，RPRM基因敲除对放射性肠损伤具有很好的防护作用。
（4）抑制RPRM入核转运降低细胞辐射敏感性
请参阅图10和图11，RPRM通过负调控ATM进而影响放射敏感性的关键在于其受电离辐射诱导后会发生核转运，这一转运过程需要入核转运蛋白家族IPO11的介导。因此，通过干扰IPO11的表达来阻断RPRM的核转运，也是增加辐射抗性的一种有效策略。首先构建基于CRISPR-Cas9技术的IPO11缺失细胞模型。受照后，对照组核内RPRM明显增多，而敲除IPO11可以显著抑制RPRM的核转运，如图10所示。提示IPO11是RPRM核转运的重要介导蛋白。随后，通过微核形成实验检测敲除IPO11抑制RPRM核转运后，细胞放射敏感性的变化。表达野生型IPO11的细胞受照后微核阳性细胞率是受照前的4.24倍，而IPO11缺失的细胞受照后微核阳性细胞率仅为受照前的0.66倍，较对照组下降了75%，如图11所示。这些结果表明通过靶向IPO11从而干扰RPRM核转运能够有效地增加细胞辐射耐受能力。
（5）干扰RPRM磷酸化增强细胞放射敏感性
请参阅图12至14，除了关键介导蛋白IPO11外，受CDK4/6调控的RPRM磷酸化修饰也是其核转运的重要信号开关。因此，改变RPRM磷酸化状态也可以有效地干扰其核转运。具体可以通过抑制CDK4/6或磷酸化位点失活突变来实现。CDK4/6可以磷酸化RPRM第98位丝氨酸，使RPRM主要定位在细胞质中。采用CDK4/6抑制剂，如Palbociclib，抑制CDK4/6酶活性后可以显著促进RPRM的核转运，如图12。伴随着RPRM核转运的增多，细胞放射敏感性也明显增强。单独Palbociclib处理后，微核阳性细胞率即是对照组的3.38倍，联合辐照后，微核阳性细胞率较对照组增加了34%，如图13所示。这些结果提示RPRM磷酸化状态参与调控其核转运和对放射敏感性的影响。通过构建RPRM第98位丝氨酸磷酸化失活突变体（S98A），进一步验证了RPRM磷酸化状态与放射敏感性之间的关系。在未受照时，转染RPRM磷酸化失活突变体组（S98A）微核阳性细胞率明显增高，是表达野生型RPRM组（RPRM）的8.19倍，更是阴性对照组（NC）的13.23倍。辐照后，转染失活突变体组的微核阳性率较RPRM组增加了78%，较NC组增加了186%，如图14所示。这些结果表明RPRM的磷酸化修饰参与调控其核转运和细胞放射敏感性，通过抑制RPRM磷酸化可以促进其核转运的发生，从而增强细胞放射敏感性。相反地，促进RPRM磷酸化可以作为抑制其核转运、增强辐射耐受能力的一种有效策略。
本发明尚有多种具体的实施方式。凡采用等同替换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明要求保护的范围之内。

Claims (3)

1.RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，所述应用用于非疾病的诊断和治疗。
2.如权利要求1所述的RPRM基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用，其特征在于：采用基因敲除或敲低技术用于抑制RPRM表达，或者采用小分子抑制剂用于靶向抑制RPRM蛋白、或用于抑制RPRM蛋白与IPO11结合而阻断RPRM核转运、或用于抑制RPRM蛋白与ATM结合，或者采用促进RPRM磷酸化的方法以增加组织的电离辐射耐受性。
3.RPRM基因调控组织在制备辐射防护剂上的应用。
CN202111337409.9A 2021-11-12 2021-11-12 Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用 Pending CN114107213A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111337409.9A CN114107213A (zh) 2021-11-12 2021-11-12 Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111337409.9A CN114107213A (zh) 2021-11-12 2021-11-12 Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114107213A true CN114107213A (zh) 2022-03-01

Family

ID=80378609

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111337409.9A Pending CN114107213A (zh) 2021-11-12 2021-11-12 Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114107213A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015181804A2 (en) * 2014-05-30 2015-12-03 Pontificia Universidad Católica De Chile Method and assay for the non-invasive detection of early gastric cancer by the combined use of methylated reprimo cell-free dna and pepsinogen i/ii
CN109517896A (zh) * 2018-10-17 2019-03-26 苏州大学 Rprm基因及其表达产物的新用途
CN110250108A (zh) * 2019-05-16 2019-09-20 苏州大学 Rprm基因敲除小鼠模型及其构建方法与应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015181804A2 (en) * 2014-05-30 2015-12-03 Pontificia Universidad Católica De Chile Method and assay for the non-invasive detection of early gastric cancer by the combined use of methylated reprimo cell-free dna and pepsinogen i/ii
CN109517896A (zh) * 2018-10-17 2019-03-26 苏州大学 Rprm基因及其表达产物的新用途
CN110250108A (zh) * 2019-05-16 2019-09-20 苏州大学 Rprm基因敲除小鼠模型及其构建方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Y. ZHANG等: "A novel role of Reprimo in the DNA damage response and radiosensitivity of non-small-cell lung cancer cells", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF RADIATION ONCOLOGY*BIOLOGY*PHYSICS》, vol. 3, no. 102, pages 158 *
张雅瑞等: "Peprimo(RPRM)对非小细胞肺癌细胞的放射增敏作用及机制研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》, no. 6, pages 1 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wiel et al. BACH1 stabilization by antioxidants stimulates lung cancer metastasis
CN103957917A (zh) 用atr抑制剂治疗胰腺癌和非小细胞肺癌
Hui et al. Radiosensitization by inhibiting STAT1 in renal cell carcinoma
CN111420030B (zh) Fgf21在制备用于治疗结直肠癌药物中的应用
Shibata et al. Suppression of mammary carcinoma growth in vitro and in vivo by inducible expression of the Cdk inhibitor p21
Wang et al. MicroRNA‐372 enhances radiosensitivity while inhibiting cell invasion and metastasis in nasopharyngeal carcinoma through activating the PBK‐dependent p53 signaling pathway
Yu et al. Different responses of tumor and normal cells to low-dose radiation
Lagroye et al. Influence of 50‐Hz magnetic fields and ionizing radiation on c‐jun and c‐fos oncoproteins
CN112190712A (zh) 氢巯基氧化酶1激动剂和索拉菲尼联合在制备治疗肝癌细胞中的应用
CN114107213A (zh) Rprm基因在调控组织电离辐射耐受性上的应用
CN106390123B (zh) miR-29及其抑制剂在制备抗器官移植排斥药物中的应用
CN113528528B (zh) 一种促进耐伊马替尼慢性髓细胞白血病细胞K562/G01凋亡shRNA及其应用
Wang et al. Targeting p65 to inhibit Cas3 transcription by Onjisaponin B for radiation damage therapy in p65+/-mice
CN109908147B (zh) 苯乙烯基环己烯丙二腈衍生物在制备抗肺癌药物中的应用
CN109045028A (zh) P53转录抑制剂PFTαHBr在制备抗端粒酶阴性p53阳性肿瘤药物中的应用
CN109953989B (zh) 2-(4-哌啶基苯乙烯)-1,3,3-三甲基-3h-吲哚鎓碘化物的药物应用
CN111214659B (zh) Cbx4抑制剂在制备食管鳞癌放射增敏剂中的应用
Vrbic et al. Therapy of stage IV B anaplastic thyroid carcinoma: single institution experience
CN111617251B (zh) Mdm4抑制剂作为治疗鼻咽癌的药物的应用
CN115317625B (zh) 一种小干扰rna在制备改善鼻咽癌预后的药物中的应用
CN115887455B (zh) 钙离子通道阻滞剂阿折地平在制备治疗子宫内膜癌的药物中的应用
CN114306611B (zh) Abhd2基因表达抑制剂、其应用及药物
CN112891547A (zh) 激动gstp1基因在防护放射性肺损伤药物中的应用
Endlich et al. Rat embryo cells immortalized with transfected oncogenes are transformed by γ irradiation
CN117959430A (zh) 抑制7-脱氢胆固醇合成在治疗肿瘤中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination