CN114053316A - 一种脱脂月见草籽提取物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物提取物的应用技术领域，具体公开一种脱脂月见草籽提取物及其应用。所述脱脂月见草籽提取物的制备方法包括：将脱脂月见草籽加入体积含量为52‑55%的甲醇水溶液中，在35‑37℃下进行超声提取，然后过滤收集滤液，进行浓缩、冷冻干燥，得到所述脱脂月见草籽提取物。该脱脂月见草籽提取物可用于作为α葡萄糖苷酶抑制剂和作为降血糖药品。本发明提供的脱脂月见草籽提取物具有良好的抑制α‑葡萄糖苷酶的活性，且其抑制活性较现有的α‑葡萄糖苷酶抑制剂（阿卡波糖）的抑制活性高，对α葡萄糖苷酶的抑制效果作用较持久，作用效果温和，极大提升了脱脂月见草籽的资源化利用价值，扩展了脱脂月见草籽的新的应用领域。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取物的应用技术领域，尤其涉及一种脱脂月见草籽提取物及其应用。
背景技术
脱脂月见草籽是月见草籽提油后的副产物，约占草籽重量的50-55％。随着月见草油需求量的增加和月见草油市场的扩大，过去20年中，月见草的年产量扩大了近20倍，而因此产生的脱脂月见草籽数量剧增。目前脱脂月见草籽的处理方式是直接丢弃或当作普通的动物饲料，造成了严重的资源浪费。
糖尿病、高脂血症和肥胖症均为常见的慢性病种类，发病频率较高，并且发病率还在持续升高。其中，糖尿病是最慢性的疾病之一，其随着肥胖和年龄的增多而极易发病。α-葡萄糖苷酶抑制对改善高血糖症状和高血糖所致的肥胖症、糖尿病等各种疾病很有用。此外，添加α-葡萄糖苷酶抑制剂的食品，适用于代谢异常的患者食用，也适用于健康人作为代谢异常预防食品。目前已的三种α-葡萄糖苷酶抑制剂有阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖，但这些α-葡萄糖苷酶抑制剂药物存在腹部不适和胃肠胀气等副作用，且抑制效果持续时间短、抑制活性有限。因此寻找一种抑制活性高、持续作用时间长的新的α-葡萄糖苷酶抑制剂迫在眉睫。
发明内容
针对现有α-葡萄糖苷酶抑制剂存在的上述问题，本发明提供一种脱脂月见草籽提取物及其应用，该脱脂月见草籽提取物具有较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性，且抑制活性持续时间长、对肠道无明显副作用，为开发脱脂月见草籽提取物的新应用和提升其资源化利用价值方面提供了新的思路。
为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：
一种脱脂月见草籽提取物，其制备方法包括：
将脱脂月见草籽加入体积含量为52-55％的甲醇水溶液中，在35-37℃下进行超声提取，然后过滤收集滤液，进行浓缩、冷冻干燥，得到所述脱脂月见草籽提取物。
本发明通过上述制备方法得到的脱脂月见草籽提取物具有良好的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，且其抑制活性较现有的α-葡萄糖苷酶抑制剂(阿卡波糖)的抑制活性高，对α葡萄糖苷酶的抑制效果作用较持久，作用效果温和。且上述脱脂月见草籽提取物可以在机体内发挥良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，实现在机体内发挥良好的降血糖作用。
优选的，所述脱脂月见草籽提取物的制备方法还包括：将所述过滤分离的滤渣重复进行2-3次所述超声提取及过滤过程，合并所述过滤过程收集的滤液，再进行所述浓缩和冷冻干燥过程。
优选的，所述脱脂月见草籽与所述甲醇水溶液的质量体积比为1g：18mL-25mL。
优选的，所述超声提取的功率为280-320W、时间为44-50min。
优选的，所述浓缩的方法为：在35-40℃下进行减压旋转蒸发浓缩。
本发明还提供了所述脱脂月见草籽提取物在作为α葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。
本发明提供的脱脂月见草籽提取物在作为α葡萄糖苷酶抑制剂中的应用，极大提升了脱脂月见草籽的资源化利用价值，扩展了脱脂月见草籽的新的应用领域。
本发明还提供了所述脱脂月见草籽提取物在作为降血糖药品中的应用。
本发明提供的脱脂月见草籽提取物在作为降血糖药品中的应用，极大提升了脱脂月见草籽的资源化利用价值，并有效降低了α葡萄糖苷酶抑制剂及降血糖产品的成本，具有较高的实际应用价值。
优选的，所述降血糖药品包括所述脱脂月见草籽提取物及药学上可接受的载体。
附图说明
图1是本发明实施例2中不同浓度的脱脂月见草籽提取物和阿卡波糖对α葡萄糖苷酶的抑制活性统计图。
图2是本发明实施例2中脱脂月见草籽提取物和阿卡波糖对α葡萄糖苷酶抑制活性随时间变化的统计图。
图3是本发明实施例3中不同组大鼠在灌胃淀粉后的血糖浓度随时间变化的统计图。
图4是本发明实施例3中灌胃脱脂月见草籽提取物和阿卡波糖后不同组大鼠在餐后2h的血糖曲线下面积统计图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种脱脂月见草籽提取物，其制备方法包括：
将50g脱脂月见草籽加入体积含量为54％的1050mL甲醇水溶液中，在35℃、300W功率下超声提取44min，然后过滤收集滤液。分离的滤渣再重复进行2次上述超声提取过程(加入的甲醇水溶液和超声提取条件不变)。将上述三次超声提取后收集的滤液合并，在37℃下进行减压旋转蒸发浓缩、冷冻干燥，得到脱脂月见草籽提取物。
实施例2
实施例1中制备得到的脱脂月见草籽提取物的α葡萄糖苷酶抑制活性。
1、试验方法
硝基苯酚吡喃葡萄糖苷在α葡萄糖苷酶的作用下可分解成为对硝基苯酚，加入α葡萄糖苷酶抑制剂后，通过检测酶作用后释放的对硝基苯酚的吸光度来计算各α葡萄糖苷酶抑制剂的抑制率。
将缓冲液(90μL PBS)、0.15U/mL的α葡萄糖苷酶(60μL)、不同浓度的脱脂月见草籽提取物的水溶液(20μL)和1mM硝基苯酚吡喃葡萄糖苷水溶液(30μL)混合到96孔酶标板中，在25℃下反应30min后，利用多功能酶标仪在405nm测定吸光度。同时，设置空白组(用等体积的缓冲液代替α葡萄糖苷酶的加入)、对照组(用等体积的水代替脱脂月见草籽提取物的水溶液)和阳性对照组(用等体积的阿卡波糖水溶液代替脱脂月见草籽提取物的水溶液)。
实验结果以抑制率(％)和半抑制率浓度(IC50)表示。IC50表示可以抑制50％的α葡萄糖苷酶活力的样品浓度。
α葡萄糖苷酶抑制率通过以下计算：
抑制率(％)＝[1-(A1-A0)/(A2-A0)]×100％；
其中A0是空白组的吸光度，A1是样品组的吸光度，A2是对照组的吸光度。
2、实验结果
不同浓度的脱脂月见草籽提取物对α葡萄糖苷酶抑制活性如图1所示，脱脂月见草籽提取物对α葡萄糖苷酶抑制活性呈剂量依赖关系，IC50值为2.90±0.26μg/mL，显著性低于阿卡波糖(IC50值为1.14±0.18mg/mL)。
在加入脱脂月见草籽提取物(10μg/mL)和阿卡波糖(500μg/mL)后，α葡萄糖苷酶活性随时间变化的关系如图2所示，脱脂月见草籽提取物组和阿卡波糖组中的α葡萄糖苷酶活性都随着时间的延长而下降，且前期脱脂月见草籽提取物组的α葡萄糖苷酶活力一直低于阿卡波糖组。但从15min开始阿卡波糖组的α葡萄糖苷酶活性趋于稳定，而脱脂月见草籽提取物组的酶活力仍在下降。说明脱脂月见草籽提取物对α葡萄糖苷酶的抑制效果作用较持久，作用效果比较温和，且抑制效果优于阿卡波糖。
以上结果表明，脱脂月见草籽提取物在体外条件下具有良好的α葡萄糖苷酶抑制效果，且抑制效果要明显优于现有的α葡萄糖苷酶抑制剂。
实施例3
实施例1中制备得到的脱脂月见草籽提取物对大鼠餐后血糖的影响。
1、试验方法
25只雄性Wistar健康7周龄大鼠(体重为250-270g)禁食12h后，随机分为空白组、对照组、脱脂月见草籽提取物200mg/kg组、脱脂月见草籽提取物400mg/kg组和阿卡波糖200mg/kg组，每组5只，并称重。
空白组和对照组用蒸馏水2mL灌胃；脱脂月见草籽提取物200mg/kg组灌胃2mL的脱脂月见草籽提取物水溶液(按大鼠体重和200mg/kg的比例计算灌胃脱脂月见草籽提取物质量，配置成2mL的水溶液)；脱脂月见草籽提取物400mg/kg组灌胃2mL的脱脂月见草籽提取物水溶液(按大鼠体重和400mg/kg的比例计算灌胃脱脂月见草籽提取物质量，配置成2mL的水溶液)；阿卡波糖200mg/kg组灌胃2mL阿卡波糖水溶液(按大鼠体重和200mg/kg的比例计算灌胃阿卡波糖质量，配置成2mL的水溶液)。10min后，空白组以蒸馏水2mL灌胃，其他组以淀粉溶液2mL灌胃(按大鼠体重和2.5g/kg的比例计算灌胃淀粉质量，配置成2mL的水溶液)，然后分别于0min、30min、60min、90min和120min测定大鼠的血糖值，绘制血糖曲线并用以下公式计算曲线下面积(AUC)。
2、试验结果
各组大鼠在灌胃淀粉后的血糖的变化如图3所示，各组的血糖值均呈现先升高后降低的趋势。空白组血糖的略有升高可能是大鼠在灌胃时的紧张情绪而导致的。与对照组相比，阿卡波糖200mg/kg组、脱脂月见草籽提取物200mg/kg组和脱脂月见草籽提取物400mg/kg组餐后0.5h，1h，1.5h和2h血糖和餐后2h曲线下面积均显著性低于对照组，如图4所示。
以上结果表明脱脂月见草籽提取物抑制了α葡萄糖苷酶的活性而达到降低餐后血糖的效果。
实施例4
一种脱脂月见草籽提取物，其制备方法包括：
将50g脱脂月见草籽加入体积含量为52％的900mL甲醇水溶液中，在36℃、280W功率下超声提取48min，然后过滤收集滤液。分离的滤渣再重复进行3次上述超声提取过程(加入的甲醇水溶液和超声提取条件不变)。将上述三次超声提取后收集的滤液合并，在35℃下进行减压旋转蒸发浓缩、冷冻干燥，得到脱脂月见草籽提取物。
实施例5
一种脱脂月见草籽提取物，其制备方法包括：
将50g脱脂月见草籽加入体积含量为55％的1250mL甲醇水溶液中，在37℃、320W功率下超声提取50min，然后过滤收集滤液。分离的滤渣再重复进行2次上述超声提取过程(加入的甲醇水溶液和超声提取条件不变)。将上述三次超声提取后收集的滤液合并，在40℃下进行减压旋转蒸发浓缩、冷冻干燥，得到脱脂月见草籽提取物。
对实施例4和实施例5制备得到的脱脂月见草籽提取物对α葡萄糖苷酶的抑制活性和在机体内的降血糖作用进行检测，检测方法同实施例2和实施例3。
最终测得实施例4和实施例5制备得到的脱脂月见草籽提取物对α葡萄糖苷酶的抑制活性和在机体内的降血糖作用与实施例1中得到的脱脂月见草籽提取物的效果基本相当。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种脱脂月见草籽提取物，其特征在于：其制备方法包括：
将脱脂月见草籽加入体积含量为52-55%的甲醇水溶液中，在35-37℃下进行超声提取，然后过滤收集滤液，进行浓缩、冷冻干燥，得到所述脱脂月见草籽提取物。
2.如权利要求1所述的脱脂月见草籽提取物，其特征在于：还包括：将所述过滤分离的滤渣重复进行2-3次所述超声提取及过滤过程，合并所述过滤过程收集的滤液，再进行所述浓缩和冷冻干燥过程。
3.如权利要求1所述的脱脂月见草籽提取物，其特征在于：所述脱脂月见草籽与所述甲醇水溶液的质量体积比为1g：18mL-25mL。
4.如权利要求1所述的脱脂月见草籽提取物，其特征在于：所述超声提取的功率为280-320W、时间为44-50min。
5.如权利要求1所述的脱脂月见草籽提取物，其特征在于：所述浓缩的方法为：在35-40℃下进行减压旋转蒸发浓缩。
6.权利要求1~5任一项所述的脱脂月见草籽提取物在作为α葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。
7.权利要求1~5任一项所述的脱脂月见草籽提取物在作为降血糖药品中的应用。
8.如权利要求7中所述的应用，其特征在于：所述降血糖药品包括所述脱脂月见草籽提取物及药学上可接受的载体。
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 代永刚等: "浅谈几种天然降糖食品及降糖保健食品", 《中国食物与营养》 * |
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