CN114041409A - 一种高蛋白浮萍的培养方法 - Google Patents
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Abstract
一种高蛋白浮萍的培养方法,包括以下步骤:步骤1,从野生浮萍中筛选蛋白质含量最高的浮萍品系;步骤2,在无菌的环境下,配置高蛋白浮萍培养液;步骤3,将步骤1筛选出的浮萍品系转移到所述步骤2中的高蛋白浮萍培养液中进行培养;步骤4,按照所述步骤2‑步骤3的方法进行继代扩繁。利用本发明的培养方法,可得到具有高蛋白含量的浮萍,可以极大提高饲料营养含量。
Description
技术领域
本发明涉及浮萍培养技术领域,特别是涉及一种高蛋白浮萍的培养方法。
背景技术
浮萍(Lemna minor L.)是单子叶水面漂浮植物,隶属于浮萍科浮萍属,广布于世界各地,其个体小,扩繁快,对环境的适应能力强,对盐碱水环境有一定的抗性,对重金属镉离子有富集能力。同时浮萍本身富含蛋白质及各种氨基酸,常用于制作畜牧饲料以及水产养殖饲料等。
浮萍本身是一种简单的水生单子叶植物,全球温暖地区广布,但不见于印度尼西亚爪哇。中国南北各省,生于水田、池沼或其它静水水域均有分布。其不仅具有很高的氮磷吸附能力,能够降低水体氮磷含量,同时也具有丰富的营养物质,例如多种氨基酸等,常用来做猪饲料、鸭饲料以及草鱼饵料等。目前已有科学家认为浮萍以其富含多种营养蛋白等特点可以被用来制作食物。现有普通紫萍的蛋白质含量交底,一般在25%左右,在作为饲料应用时,存在很大的局限性。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中存在的浮萍蛋白含量较低的问题,而提供一种高蛋白浮萍的培养方法。
为实现本发明的目的所采用的技术方案是:
一种高蛋白浮萍的培养方法,包括以下步骤:
步骤1,从野生浮萍中筛选蛋白质含量最高的浮萍品系;
步骤2,在无菌的环境下,配置高蛋白浮萍培养液,所述高蛋白浮萍培养液包括以下组分:
MgSO4·7H2O:0.4-0.5mM
Ca(NO3)2·4H2O:1.4-1.5mM
KNO3:1.0-1.2mM
KH2PO4:0.4-0.5mM
Mg(NO3)2·6H2O:0.4-0.5mM
CaCl2·2H2O:50-60μM
KCl:50μ-60M
Na2MoO4·2H2O:6.1-6.3μM
H2BO3:69-72μM
K2H2EDTA·2H2O:30-32μM
FeNH4-EDTA:56.7-57.1μM
MnCl2·4H2O:13.8-14.2μM
ZnNa2EDTA·4H2O:2.8-3.2μM
CoSO4·7H2O:4.8-5.2μM
Na2-EDTA·2H2O:18.6-19.2μM
所述组分中均调节pH5.6-5.8;
步骤3,将步骤1筛选出的浮萍品系转移到所述步骤2中的高蛋白浮萍培养液中进行培养;
步骤4,按照所述步骤2-步骤3的方法进行继代扩繁。
在上述技术方案中,所述步骤1中,通过蛋白质含量鉴定的方法,筛选出蛋白质含量最高的浮萍品系。
在上述技术方案中,所述步骤1中,筛选出蛋白质含量高于35%的浮萍品系。
在上述技术方案中,所述步骤2中,配置高蛋白浮萍培养液后,进行高压灭菌。
在上述技术方案中,所述步骤3中,酒精灯灼烧1-2秒后的镊子沾取8-10片步骤1得到的浮萍品系,将其转移至高蛋白浮萍培养液中,进行培养。
在上述技术方案中,所述步骤3中,利用封口膜将转移有高蛋白浮萍的高蛋白浮萍培养液密封后,在培养箱内进行培养。
在上述技术方案中,所述步骤3的培养条件为23-25℃。
在上述技术方案中,所述步骤3在16-18小时/天的光周期,95-100μmol m-2s-1的光强条件下培养。
在上述技术方案中,所述步骤4中,每6-10天继代一次。
本发明的另一方面,一种饲料,包括利用所述培养方法得到的高蛋白浮萍。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
1.利用本发明的培养方法,可得到具有高蛋白含量的浮萍,可以极大提高饲料营养含量,同时可以在一定程度上减量替代进口大豆在饲料中的使用,进一步降低饲料的制作成本。
2.本发明的特定的高蛋白培养基的组成更适用于高蛋白浮萍的培养,实现高蛋白浮萍的高效扩繁。
3.本发明的培养方法简单,便于商业化推广应用。
附图说明
图1是高蛋白浮萍蛋白质含量。
图2是普通紫萍蛋白质含量。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
一种高蛋白浮萍的培养方法,包括以下步骤:
步骤1,采集普通野生型浮萍,对采集得到的浮萍进行蛋白质含量鉴定,筛选出其中蛋白质含量最高的浮萍品系(浮萍属L.minor)。
步骤2,在无菌超净台中,于50mL锥形瓶中倒入40mL高蛋白浮萍培养液,高蛋白浮萍培养液成分及含量为:
MgSO4·7H2O:0.4mM
Ca(NO3)2·4H2O:1.4mM
KNO3:1.0mM
KH2PO4:0.4mM
Mg(NO3)2·6H2O:0.4mM
CaCl2·2H2O:50μM
KCl:50μM
Na2MoO4·2H2O:6.1μM
H2BO3:69μM
K2H2EDTA·2H2O:30μM
FeNH4-EDTA:56.7μM
MnCl2·4H2O:13.8μM
ZnNa2EDTA·4H2O:2.8μM
CoSO4·7H2O:4.8μM
Na2-EDTA·2H2O:18.6μM
以上试剂均调至pH5.6,并进行高压灭菌处理。
步骤3,用酒精灯灼烧2秒后的镊子沾取10片筛选得到的高蛋白浮萍,将其转移至倒好高蛋白浮萍培养液的锥形瓶中。
步骤3,用封口膜将锥形瓶密封后放入培养箱培养。一次可培养若干瓶,每7天进行一次继代扩繁,继代扩繁操作同步骤2-3。培养条件为23℃,光周期为16小时/天,光强为95μmol m-2s-1,每周继代一次。
实施例2
一种高蛋白浮萍的培养方法,包括以下步骤:
步骤1,采集普通野生型浮萍,对采集得到的浮萍进行蛋白质含量鉴定,筛选出其中蛋白质含量最高的浮萍品系(浮萍属L.minor)。
步骤2,在无菌超净台中,于50mL锥形瓶中倒入40mL高蛋白浮萍培养液,高蛋白浮萍培养液成分及含量为:
MgSO4·7H2O:0.5mM
Ca(NO3)2·4H2O:1.5mM
KNO3:1.2mM
KH2PO4:0.5mM
Mg(NO3)2·6H2O:0.5mM
CaCl2·2H2O:60μM
KCl:60μM
Na2MoO4·2H2O:6.3μM
H2BO3:72μM
K2H2EDTA·2H2O:32μM
FeNH4-EDTA:57.1μM
MnCl2·4H2O:14.2μM
ZnNa2EDTA·4H2O:3.2μM
CoSO4·7H2O:5.2μM
Na2-EDTA·2H2O:19.2μM
以上试剂均调至pH5.8,并进行高压灭菌处理。
步骤3,用酒精灯灼烧2秒后的镊子沾取8片筛选得到的高蛋白浮萍,将其转移至倒好高蛋白浮萍培养液的锥形瓶中。
步骤3,用封口膜将锥形瓶密封后放入培养箱培养。一次可培养若干瓶,每10天进行一次继代扩繁,继代扩繁操作同步骤2-3。培养条件为25℃,光周期为18小时/天,光强为100μmol m-2s-1,每周继代一次。
实施例3
本产品是经过实施例1筛选培养后得到的高蛋白浮萍,蛋白质含量高达36.03%的高蛋白浮萍(图1),氮磷钾的含量分别为1.24%、1.09%、1.02%,其中包含18种氨基酸,并通过高蛋白浮萍培养液进行高效扩繁后,与普通野生型浮萍相比,具有更高的蛋白质含量(图2),对于制作饲料,补充重要植物蛋白源具有重要作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出的是,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,从野生浮萍中筛选蛋白质含量最高的浮萍品系;
步骤2,在无菌的环境下,配置高蛋白浮萍培养液,所述高蛋白浮萍培养液包括以下组分:
MgSO4·7H2O:0.4-0.5mM
Ca(NO3)2·4H2O:1.4-1.5mM
KNO3:1.0-1.2mM
KH2PO4:0.4-0.5mM
Mg(NO3)2·6H2O:0.4-0.5mM
CaCl2·2H2O:50-60μM
KCl:50μ-60M
Na2MoO4·2H2O:6.1-6.3μM
H2BO3:69-72μM
K2H2EDTA·2H2O:30-32μM
FeNH4-EDTA:56.7-57.1μM
MnCl2·4H2O:13.8-14.2μM
ZnNa2EDTA·4H2O:2.8-3.2μM
CoSO4·7H2O:4.8-5.2μM
Na2-EDTA·2H2O:18.6-19.2μM
所述组分中均调节pH5.6-5.8;
步骤3,将步骤1筛选出的浮萍品系转移到所述步骤2中的高蛋白浮萍培养液中进行培养;
步骤4,按照所述步骤2-步骤3的方法进行继代扩繁。
2.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤1中,通过蛋白质含量鉴定的方法,筛选出蛋白质含量最高的浮萍品系。
3.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤1中,筛选出蛋白质含量高于35%的浮萍品系。
4.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤2中,配置高蛋白浮萍培养液后,进行高压灭菌。
5.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤3中,酒精灯灼烧1-2秒后的镊子沾取8-10片步骤1得到的浮萍品系,将其转移至高蛋白浮萍培养液中,进行培养。
6.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤3中,利用封口膜将转移有高蛋白浮萍的高蛋白浮萍培养液密封后,在培养箱内进行培养。
7.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤3的培养条件为23-25℃。
8.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤3在16-18小时/天的光周期,95-100μmol m-2s-1的光强条件下培养。
9.如权利要求1所述的高蛋白浮萍的培养方法,其特征在于,所述步骤4中,每6-10天继代一次。
10.一种饲料,其特征在于,包括利用如权利要求1-9中任一项所述培养方法得到的高蛋白浮萍。
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李燕: "氮磷施用差异对不同浮萍生长及其粗蛋白质含量的影响", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士) 农业科技辑》 * |
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