CN114002213A - Cu/Au/Pt-MOFs及其可视化试纸在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用 - Google Patents

Cu/Au/Pt-MOFs及其可视化试纸在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种Cu/Au/Pt‑MOFs复合材料在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用，所述Cu/Au/Pt‑MOFs复合材料主要由金属有机框架复合材料和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt多金属纳米粒子组成。本发明检测H2O2、Cys或葡萄糖的方法，通过紫外‑可见分光光度计比色可以实现对H2O2、Cys和葡萄糖的定量检测，操作简单，快速，低成本，高灵敏。本发明还公开了基于Cu/Au/Pt‑MOFs复合材料的可视化试纸，可将待测样品直接滴加在试纸上反应，然后通过智能软件读取试纸颜色信息（RGB），只需要微量样品便可快速、便捷、准确地对待测样品中的目标物进行定量。

Description

Cu/Au/Pt-MOFs及其可视化试纸在检测H2O2、Cys或葡萄糖中 的应用
技术领域
本发明属于纳米材料及其分析应用领域，具体涉及一种基于Cu/Au/Pt NPs-金属有机框架（Cu/Au/Pt-MOFs）复合材料检测H2O2、Cys或葡萄糖的方法及可视化试纸。
背景技术
过氧化氢（H2O2），又称双氧水，是一种强氧化剂，具备氧化、防腐、漂白、消毒等作用，常作为防腐剂、漂白剂和杀菌剂被广泛使用于食品加工、工业漂白、外科消毒等领域。接触过量的H2O2会对人体造成刺激和腐蚀，损伤肌体细胞；H2O2大量进入血液后还有可能导致动脉或静脉气体栓塞。我国食品安全相关标准中明确禁止食品中检出过氧化氢残留。此外，H2O2又是活性氧的重要组成部分，在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用，体内H2O2的水平可以反应生命体的生理和病理状态。因此，无论是食品加工还是生命医学领域，构建快速又精确的测定H2O2含量方法具有重要的意义。
半胱氨酸（Cys）是人体的条件必需氨基酸和生糖氨基酸，具有活性基团(-SH)。作为最重要的天然氨基酸之一，在细胞代谢、蛋白质合成和解毒等生物过程中起着至关重要的作用，已被广泛应用于食品和医药行业。同时，Cys也是一种潜在的生物标志物和神经毒素，低浓度的Cys与毛发色素脱失、脂肪和肌肉损失、肝损伤、白细胞、皮肤损伤和人体生长缓慢直接相关。此外，Cys还在阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、癌症和免疫缺陷综合征的诊断中起着重要作用。在临床和医学诊断中，开发快速简单又准确的Cys定量分析方法在食品药品质量检验、临床和医学诊断等方面具有很好的应用前景。
葡萄糖是生物体内新陈代谢不可缺少的营养物质，它的氧化反应放出的热量是人类生命活动所需能量的重要来源。人体内葡萄糖含量水平与生命健康密切相关，通过连续血糖监测（CGM）与调节可以帮助糖尿病患者监控血糖，并预防心脏病、糖尿病视网膜病变和肾功能障碍等并发症。目前传统的检测H2O2的方法主要有滴定法、比色法、电化学法、荧光光谱法和化学发光法等；检测Cys的方法包括化学发光法、荧光光谱法、高效液相色谱法、电化学方法、质谱分析和比色法等；检测葡萄糖的方法包括高效液相色谱法、分光光度法、旋光度法、生物传感器法、气相色谱法等。然而，这些传统的分析技术手段存在检测灵敏度低、检测过程复杂和检测时间长等缺点，目前亟需一种便捷、灵敏、高效的新型检测技术。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测H2O2、Cys或葡萄糖的方法及可视化试纸，可视化试纸可以应用于食品安全和生物医药等领域中H2O2、Cys或葡萄糖的简单、快速、低成本、高灵敏测定。
为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：
一种Cu/Au/Pt-MOFs复合材料在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用，所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料主要由金属有机框架复合材料和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt多金属纳米粒子组成。
上述的应用，优选的，所述金属有机框架复合材料为Cu-TCPP(Fe)。
更优选的，所述金属有机框架复合材料为Cu-TCPP(Fe)；所述Cu-TCPP(Fe)和Cu/Au/Pt多金属纳米粒子的质量比为1:(0.1-10)（更优选为1:1.57），所述Cu/Au/Pt多金属纳米粒子中，Cu、Au、Pt的质量比为1:(0.1-50):(0.1-50)（更优选为1:5.78:4.52）。
优选的，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测H2O2，其检测方法包括如下步骤：在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的H2O2浓度。更优选的，所述 NaOAc缓冲溶液的浓度为0.01-1 M，pH为3-7；所述的TMB的浓度为1-10 mmol/L（更优选为6 mmol/L）；所述NaOAc缓冲溶液、TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液的体积比为(14.5-1450):20:25:10（更优选为14.5:20:25:10）；静置反应的时间为5-30 min。
优选的，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测Cys，其检测方法包括如下步骤：在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、H2O2、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的Cys浓度。更优选的，所述 NaOAc缓冲溶液的浓度为0.01-1 M，pH为3-7；所述的TMB的浓度为1-10 mmol/L更优选为6 mmol/L）；所述H2O2的浓度为1-30 mmol/L；所述NaOAc缓冲溶液、TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液的体积比为(14.5-1450):20:25:10（更优选为14.5:20:25:10）；所述H2O2与其他试剂总和的体积比为1:(2-200)；静置反应的时间为5-60 min。
优选的，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测葡萄糖，其检测方法包括如下步骤：将待测样本与葡萄糖氧化酶孵化后形成孵化液，在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和孵化液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的葡萄糖浓度。更优选的，所述葡萄糖氧化酶浓度为5-15 mg/mL，孵化时间为5-30 min，所述NaOAc缓冲溶液的浓度为0.01-1M，pH为3-7；所述的TMB的浓度为6 mmol/L；所述H2O2的浓度为1-30 mmol/L；所述NaOAc缓冲溶液、TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液的体积比为15.5-1550:20:25:10（更优选为15.5:20:25:10）；静置反应的时间为5-30 min。
基于一个总的发明构思，本发明还提供一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的可视化试纸，由Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的稀释液浸于滤纸，滴加TMB和壳聚糖，经干燥后制成；所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料主要由金属有机框架复合材料和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt多金属纳米粒子组成。
基于一个总的发明构思，本发明还提供该基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的可视化试纸在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用。
优选的，采用所述可视化试纸检测H2O2的检测方法包括如下步骤：在所述可视化试纸上滴加待测样本溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的Cys浓度；
采用所述可视化试纸检测Cys的检测方法包括如下步骤：在所述可视化试纸上滴加H2O2溶液和待测样本溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的Cys浓度；
采用所述可视化试纸检测葡萄糖的检测方法包括如下步骤：将待测样本与葡萄糖氧化酶孵化后得到待测样本孵化溶液，在所述可视化试纸上滴加待测样本孵化溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的葡萄糖浓度。
本发明的技术原理如下（如图1所示）：
本发明利用Cu/Au/Pt NPs-MOFs催化H2O2氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐（TMB）由无色变为蓝色的原理，通过紫外-可见分光光度计比色可以实现对H2O2的定量测定；Cys会抑制Cu/Au/Pt NPs-MOFs对于H2O2和TMB的催化氧化反应，使TMB不发生颜色的改变，通过紫外-可见分光光度计比色可以实现对Cys的定量测定。此外，基于葡萄糖经过葡萄糖氧化酶氧化后生成H2O2与葡萄糖醛酸这一反应，通过检测生成的H2O2含量反映样本中葡萄糖含量。并将这一特点与本发明中的H2O2检测体系结合，实现了对葡萄糖的定量检测。
本发明采用的Cu/Au/Pt-MOFs复合材料，基于金属有机框架比表面积大、多孔结构、易于功能化等优点，在其表面原位生长Cu/Au/Pt NPs，合成一种具有类氧化物酶活性的Cu/Au/Pt-MOFs复合材料。相比于单独的Cu/Au/Pt NPs或MOFs，该Cu/Au/Pt NPs-MOFs表现出更强的过氧化物酶活性，可以作为一种新的过氧化物酶模拟酶。
另外，为了能够更快速便携的测定H2O2、Cys或葡萄糖，本发明还提供一种基于Cu/Au/Pt NPs-MOFs的检测H2O2、Cys及葡萄糖的可视化试纸。通过浸泡-固定的方法，将Cu/Au/Pt NPs-MOFs与TMB固定在试纸上，将待测的H2O2、Cys样品或葡萄糖反应液滴加在试纸上反应后，通过智能手机APP-Color Grab读取试纸颜色信息（RGB），以RGB信息作为输出信号，建立待测物浓度与RGB的相关关系从而对待测样品中的目标物进行准确定量。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1、本发明检测H2O2、Cys或葡萄糖的应用方法，通过紫外-可见分光光度计比色可以实现对H2O2、Cys和葡萄糖的定量检测，操作简单，快速，低成本，高灵敏。
2、本发明采用的Cu/Au/Pt-MOFs复合材料，相比于单独的Cu/Au/Pt NPs或MOFs，可表现出更强的过氧化物酶活性，可以作为一种新的过氧化物酶模拟酶，并应用于食品安全和生物医药等领域中H2O2、Cys及葡萄糖的简单、快速、低成本、高灵敏测定。
3、本发明的可视化试纸，可将待测样品直接滴加在试纸上反应，然后通过智能软件读取试纸颜色信息（RGB），只需要微量样品便可快速、便捷、准确地对待测样品中的目标物进行定量。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明基于Cu/Au/Pt NPs-MOFs检测H2O2、Cys及葡萄糖的原理设计图；
图2是Cu/Au/Pt NPs-MOFs的透射电镜图（A、2μm标尺下图像；B、100nm标尺下图象）；
图3是Cu/Au/Pt NPs-MOFs催化H2O2氧化TMB的紫外可见吸收光谱图（A、不同溶液体系的检测实物照片；B、不同溶液体系的紫外可见吸收光谱图）；
图4是实施例1检测0～1.2 mM范围内H2O2的浓度与吸光度的关系图；
图5是实施例1在652 nm处的吸光度与H2O2浓度的线性关系图；
图6是实施例2检测0～700 μM范围内Cys的浓度与吸光度的关系图；
图7是实施例2在652 nm处的吸光度与Cys浓度的线性关系图；
图8是实施例3检测0～1.4 mM范围内葡萄糖的浓度与吸光度的关系图；
图9是实施例3在652nm处的吸光度与葡萄糖浓度的线性关系图；
图10是实施例4的试纸检测0～5.0 mM范围内H2O2的浓度与试纸RGB的关系图（A、不同浓度H2O2的RGB颜色信号及其对应试纸实物照片；B、不同试纸颜色信号与浓度对应的线性关系图）；
图11是实施例4的试纸检测0～500 μM范围内Cys的浓度与试纸RGB的关系图（A、不同浓度Cys的RGB颜色信号及其对应试纸实物照片；B、不同试纸颜色信号与浓度对应的线性关系图）；
图12是实施例4的试纸检测0～2.5 mM范围内葡萄糖的浓度与试纸RGB的关系图（A、不同浓度葡萄糖的RGB颜色信号及其对应试纸实物照片；B、不同试纸颜色信号与浓度对应的线性关系图）。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本发明做更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。
除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
实施例1：
一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测H2O2的方法，其采用的Cu/Au/Pt-MOFs复合材料由Cu-TCPP(Fe)和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt NPs组成，Cu-TCPP(Fe)和Cu/Au/Pt多金属纳米粒子的质量比为1:1.57，Cu/Au/Pt多金属纳米粒子中，Cu、Au、Pt的质量比为1:5.78:4.52。
一、Cu/Au/Pt NPs-MOFs的制备方法，具体步骤如下：
将0.012 g Cu(NO3)2·3H2O（0.01 mmol）、50 μL三氟乙酸（1.0 M）和50.0 mg聚乙烯吡咯烷酮溶于60 mL DMF和乙醇（V:V=3:1）的混合物中。将0.022 g TCPP(Fe)（0.005mmol）溶解于20 mL DMF和乙醇（V:V=3:1）混合溶液在搅拌状态下滴加到上述混合溶液中。然后，将溶液超声处理10 min，置于反应釜中加热至80 ℃并保持15 h。所得深棕色产品用乙醇洗涤两次，并在8000 rpm，25 ℃下离心10 min收集。最后，将所得Cu-TCPP(Fe)用3 mL乙醇分散得到Cu-TCPP(Fe)分散液。
将1 mL Cu-TCPP(Fe)溶液（1 mg/mL）溶于10 ml超纯水中。在磁力搅拌下，加入36μL CuSO4、75 μL柠檬酸三钠后搅拌10 min。滴加1.5 mL KBH4 (25 mM)后，继续搅拌10 min。滴加75 μL HAuCl4 (0.1M)，75 μL K2PtCl4后，继续搅拌20 min。搅拌完毕后在10000 rpm下离心10 min。用超纯水水洗沉淀后，在12000 rpm下离心10 min收集。最后，将所得Cu/Au/PtNPs-MOFs用1 mL超纯水复溶。
Cu/Au/Pt NPs-MOFs的透射电镜如图2所示，可以看到Cu/Au/Pt NPs均匀的长在片状的Cu-TCPP(Fe)上。
二、Cu/Au/Pt NPs-MOFs的过氧化物酶活性验证
用TMB催化氧化模型研究Cu/Au/Pt NPs-MOFs的过氧化物酶活性。在145 μL醋酸-醋酸钠溶液（NaOAc，0.01 M，pH 5.5）中分别加入20 μL TMB（6 mmol/L）、10 μL H2O2（10mmol/L）和25 μL Cu/Au/Pt NPs-MOFs，在室温下静置反应10 min后，使用紫外-可见分光光度计测量反应体系在550-750 nm范围内的吸收光谱。结果如图3所示，TMB，TMB+H2O2以及Cu/Au/Pt NPs-MOFs+H2O2在550-750 nm范围内几乎没有吸收；只有当Cu/Au/Pt NPs-MOFs加入到TMB+H2O2体系中时，体系才会由无色变成明显的蓝色并在652 nm处出现最大吸收峰；说明Cu/Au/Pt NPs-MOFs具有过氧化物酶活性。
三、Cu/Au/Pt NPs-MOFs测定H2O2的方法，其操作步骤如下：
在145 μL NaOAc缓冲溶液（0.01 M，pH 5.5）中加入20 μL TMB（6 mmol/L）、25 μLCu/Au/Pt NPs-MOFs和10 μL不同浓度的H2O2溶液，在室温下静置反应10 min后，使用紫外-可见分光光度计测量反应体系在550-750 nm范围内的吸收光谱。
如图4所示的紫外-可见吸收光谱可以看到吸光度在0-1200 μM范围内随着H2O2浓度增加而增大；且在10 μM到800 μM的范围内，在652 nm处的吸光度与H2O2浓度呈线性关系，回归方程为ΔA=0.00432C+0.4717（R2 = 0.9656）（图5）。根据11组空白样品的结果，使用公式LOD = 3S/K（S是11组空白样品的标准偏差，K是标准样品的斜率）计算出检出限为0.37 μM，提示该方法对检测H2O2具有较低的检出限。
实施例2：
一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测Cys的方法，Cu/Au/Pt-MOFs复合材料由实施例1的方法制备得到，其操作步骤如下：
在135 μL NaOAc缓冲溶液（0.01 M，pH 5.5）中加入20 μL TMB（6 mmol/L）、10 μLH2O2（20 mmol/L）、25 μL Cu/Au/Pt NPs-MOFs和10 μL不同浓度的Cys溶液，在室温下静置反应15 min后，使用紫外-可见分光光度计测量反应体系在550-750 nm范围内的吸收光谱。
如图6所示的紫外-可见吸收光谱可以看到吸光度在0-700 μM范围内随着Cys浓度增加而减小；且在0 μM到300 μM的范围内，在652 nm处的吸光度与Cys浓度呈线性关系，回归方程为Δ= -0.00592C + 1.6884（R2 = 0.9068）（图7）。根据11组空白样品的结果，使用公式LOD = 3S/K（S是11组空白样品的标准偏差，K是标准样品的斜率）计算出检出限为0.51μM，提示该方法对检测Cys具有较低的检出限。
实施例3：
一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测葡萄糖的方法，Cu/Au/Pt-MOFs复合材料由实施例1的方法制备得到，其操作步骤如下：
首先，将10 μL 8 mg/mL的葡萄糖氧化酶溶液加入到290 μL不同浓度的葡萄糖溶液中混匀，放入金属浴中孵育15 min。然后，取10 μL上述孵化液加入135 μL到含有20 μLTMB（6 mmol/L）、25 μL Cu/Au/Pt NPs-MOFs的 NaOAc缓冲溶液（0.01 M，pH 5.5）中，在室温下静置反应15 min后，使用紫外-可见分光光度计测量反应体系在652 nm处的吸光度。
从图8可以看到652 nm处的吸光度随着葡萄糖浓度增加而增大；且在0 μM到800 μ M的范围内，在652 nm处的吸光度与葡萄糖浓度呈线性关系，回归方程为ΔA= 0.00396C + 0.10782（R2 =0.9937）（图9）。根据6组空白样品的结果，使用公式y=
Figure DEST_PATH_IMAGE001
+3S,将计算出的y带 入回归方程即可得出LOD（S是6组空白样品的标准偏差，
Figure 137905DEST_PATH_IMAGE001
是六次空白的相对标准偏差），可 得检出限为5.2 μM。
实施例4：
一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的可视化试纸，由实施例1的Cu/Au/Pt-MOFs复合材料制成，具体制备方法如下：
首先将whatman # 1滤纸裁为直径为1 cm或6 mm纸圆。将裁好的滤纸浸入3 mLCu/Au/Pt NPs-MOFs稀释液中30 min，每隔5 min摇晃一次，防止滤纸间吸附。将浸泡完毕后的滤纸放置于60 ℃烘箱内干燥30 min，然后滴加100 μL NaOAc缓冲溶液（pH 5.5，10 mM）后继续放置于60 ℃烘箱内干燥20 min。滴加100 μL壳聚糖溶液（0.5%）后室温下静置10min，继续放置于60 ℃烘箱内干燥15 min。滴加30 μL TMB（6mM）后继续放置于60 ℃烘箱内干燥15 min。干燥完成后试纸制作完毕，密封避光保存备用。
基于Cu/Au/Pt NPs-MOFs的可视化试纸在检测H2O2、Cys和葡萄糖中的应用：
1、H2O2的检测
在制备好的试纸上滴加50 μL浓度分别为0 μM、10 μM、100 μM、1 mM、3 mM、5 mM的H2O2标准溶液，室温下静置反应15 min后，使用智能手机APP-Color Grab读取试纸RGB信息。图10所示为不同浓度H2O2溶液下试纸颜色的变化；随着H2O2浓度的增加，试纸颜色越蓝，根据试纸颜色的RGB信息建立回归方程为：B/R=0.00047896C+1.08876，R2=0.9891。
2、Cys的检测
在制备好的试纸上滴加20 μL H2O2溶液（500 μM）与20 μL浓度分别为0 μM、1 μM、30 μM、100 μM、300 μM、500 μM的Cys标准溶液，室温下静置反应15 min后，使用智能手机APP-Color Grab读取试纸RGB信息。图11所示为不同浓度Cys溶液下试纸颜色的变化；随着Cys浓度的增加，试纸颜色越浅，根据试纸颜色的RGB信息建立回归方程为：(△R2+△G2+△B2)1/2=-0.07527C+71.9880，R2=0.9415。
3、葡萄糖的检测
将10 μL 8 mg/mL的葡萄糖氧化酶溶液加入到290 μL浓度为0 μM、10 μM、50 μM、100 μM、500 μM、1000 μM、2000 μM、2500 μM的葡萄糖溶液中混匀，放入金属浴中孵育15min。然后，在制备好的试纸上滴加50 μL上述葡萄糖孵化液，室温下静置反应15 min后，使用智能手机APP-Color Grab读取试纸RGB信息。图12所示为不同浓度葡萄糖溶液下试纸颜色的变化；随着葡萄糖浓度的增加，试纸颜色越蓝，根据试纸颜色的RGB信息建立回归方程为：B/R=0.00161C+1.01777，R2=0.9409。

Claims (9)

1.一种Cu/Au/Pt-MOFs复合材料在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用，其特征在于，所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料主要由金属有机框架复合材料和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt多金属纳米粒子组成；所述金属有机框架复合材料为Cu-TCPP(Fe)；所述Cu-TCPP(Fe)和Cu/Au/Pt多金属纳米粒子的质量比为1:(0.1-10)，所述Cu/Au/Pt多金属纳米粒子中，Cu、Au、Pt的质量比为1:(0.1-50):(0.1-50)。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测H2O2，检测方法包括如下步骤：在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的H2O2浓度。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述NaOAc缓冲溶液的浓度为0.01-1 M，pH为3-7；所述的TMB的浓度为1-10 mmol/L；所述NaOAc缓冲溶液、TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液的体积比为(14.5-1450):20:25:10；静置反应的时间为5-30 min。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测Cys，检测方法包括如下步骤：在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、H2O2、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的Cys浓度。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述 NaOAc缓冲溶液的浓度为0.01-1 M，pH为3-7；所述的TMB的浓度为1-10 mmol/L；所述H2O2的浓度为1-30 mmol/L；所述NaOAc缓冲溶液、TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和待测样本溶液的体积比为(14.5-1450):20:25:10；所述H2O2与其他试剂总和的体积比为1:(2-200)；静置反应的时间为5-60 min。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料检测葡萄糖，检测方法包括如下步骤：将待测样本与葡萄糖氧化酶孵化后形成孵化液，在NaOAc缓冲溶液中加入TMB、Cu/Au/Pt-MOFs复合材料和孵化液，在室温下静置反应后，使用紫外-可见分光光度计测量在550-750 nm范围内的吸收光谱，通过吸光度确定对应的葡萄糖浓度。
7.一种基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的可视化试纸，其特征在于，由Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的稀释液浸于滤纸，滴加TMB和壳聚糖，经干燥后制成；所述Cu/Au/Pt-MOFs复合材料主要由金属有机框架复合材料和在其表面原位生长的Cu/Au/Pt多金属纳米粒子组成；所述金属有机框架复合材料为Cu-TCPP(Fe)；所述Cu-TCPP(Fe)和Cu/Au/Pt多金属纳米粒子的质量比为1:(0.1-10)，所述Cu/Au/Pt多金属纳米粒子中，Cu、Au、Pt的质量比为1:(0.1-50):(0.1-50)。
8.一种如权利要求7所述基于Cu/Au/Pt-MOFs复合材料的可视化试纸在检测H2O2、Cys或葡萄糖中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，采用所述可视化试纸检测H2O2的检测方法包括如下步骤：在所述可视化试纸上滴加待测样本溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的Cys浓度；
采用所述可视化试纸检测Cys的检测方法包括如下步骤：在所述可视化试纸上滴加H2O2溶液和待测样本溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的Cys浓度；
采用所述可视化试纸检测葡萄糖的检测方法包括如下步骤：将待测样本与葡萄糖氧化酶孵化后得到待测样本孵化溶液，在所述可视化试纸上滴加待测样本孵化溶液，在室温下静置反应后，读取试纸RGB信息，通过RGB信息确定对应的葡萄糖浓度。
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