CN113999819A - 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体 - Google Patents

分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体 Download PDF

Info

Publication number
CN113999819A
CN113999819A CN202111327071.9A CN202111327071A CN113999819A CN 113999819 A CN113999819 A CN 113999819A CN 202111327071 A CN202111327071 A CN 202111327071A CN 113999819 A CN113999819 A CN 113999819A
Authority
CN
China
Prior art keywords
monoclonal antibody
trx
antibody
trx protein
cell strain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111327071.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113999819B (zh
Inventor
杨帆
刘洋
李文
李林
王婷
刘万建
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Shuojing Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Qingdao Shuojing Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Shuojing Biotechnology Co ltd filed Critical Qingdao Shuojing Biotechnology Co ltd
Priority to CN202111327071.9A priority Critical patent/CN113999819B/zh
Publication of CN113999819A publication Critical patent/CN113999819A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113999819B publication Critical patent/CN113999819B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明属于免疫学和体外诊断分支技术领域。用于Trx蛋白的单克隆抗体灵敏度、特异性以及亲和力上都存在一些缺陷，还有较大的改善空间，本领域对于Trx蛋白的单克隆抗体的仍然存在着强烈需求。本发明提供了一种分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株和单克隆抗体。所述分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其传代细胞株，命名为16H6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.C2021186。本发明的杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白单克隆抗体，分泌的抗体具有高亲和力和特异性，可用于体外诊断的多个分支领域。

Description

分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克 隆抗体
技术领域
本发明属于免疫学和体外诊断分支技术领域，涉及一种分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体及其应用。
背景技术
硫氧还蛋白(Trx)是一种低分子量(约12KD)、热稳定的酸性蛋白，存在于细菌、植物及动物等多种生物体内，通过二硫键和硫醇变化在多种反应中起重要作用。Trx在植物体内分布广泛，在叶绿体、线粒体、细胞质和细胞核中均有发现，参与多种生命活动。相对来说，动物体内种类较少，主要参与缓解氧化胁迫，并能控制生长和细胞程序死亡。
通过对Trx的分离测序，发现不同种类的Trx具有很高的同源性，都含有一个高度保守的活性中心。通过共振检测，氧化Trx和还原Trx只在构象上略有差异。
Trx的溶解性高，稳定性好，对于一些在大肠杆菌中不溶或难溶性的蛋白，硫氧还蛋白标签可以促进其以可溶性的方式表达。通过对Trx蛋白的深入研究，人们对它的特点和功能等有了更多的认识，它在生物医药和体外诊断行业中的应用也越来越多。
目前用于Trx蛋白的单克隆抗体灵敏度、特异性以及亲和力上都存在一些缺陷，还有较大的改善空间，本领域对于Trx蛋白的单克隆抗体的仍然存在着强烈需求。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体及其应用，该Trx蛋白的单克隆抗体效价高，灵敏度高，特异性好。
本发明一方面，提供一种能分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏编号为CCTCC NO：C2021186。
本发明另一方面提供所述杂交瘤细胞株的制备方法：
杂交瘤细胞株，是取免疫小鼠脾脏的B淋巴细胞，和小鼠骨髓瘤细胞进行细胞融合得到的，该细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白单克隆抗体。
利用大肠杆菌重组表达系统，进行Trx蛋白、Sumo蛋白、GST蛋白、MBP蛋白的重组表达和纯化。
用重组Trx蛋白进行小鼠免疫，取免疫小鼠脾脏的B淋巴细胞，和小鼠骨髓瘤细胞进行细胞融合，经过亚克隆和筛选得到部分细胞株，并对细胞株进行特异性验证，最终得到特异性好的细胞株，命名为16H6。该细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白单克隆抗体。
本发明第三方面提供抗Trx蛋白单克隆抗体，该单克隆抗体由上述保藏编号为CCTCC NO：C2021186的杂交瘤细胞株产生。该抗体具有高效价和特异性，亚型为IgG1，亚型单一，抗体稳定性好，可在4℃长期保存。
本发明还提供抗Trx蛋白单克隆抗体在制备体外诊断试剂盒中的应用。用抗Trx蛋白单克隆抗体结合重组抗原上的Trx标签，充分暴露抗原表位，增强试剂盒的信号强度，检测灵敏度高。
有益效果：
本发明提供了具有以下优势：本发明提供了分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏编号为NO：C2021186，该杂交瘤细胞株及其传代细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白单克隆抗体；分泌的抗体亚型为IgG1，亚型单一，抗体效价高；该抗体能特异性结合Trx，特异性好。
生物保藏说明：
培养物名称：杂交瘤细胞株16H6，于2021年8月12日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：C2021186。
附图说明
图1是杂交瘤细胞分泌抗体稳定性的检测结果；
图2是抗体效价、亲和力的检测结果；
图3是抗体亚型的检测结果；
图4是特异性的检测结果；
图5是抗体稳定性检测结果。
具体实施方式
下面结合具体实施例及附图对本发明做进一步详细说明。
实施例1分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备
1、小鼠免疫
用Trx蛋白免疫6周龄的雌性balb/c小鼠。蛋白按照100μg/只的剂量与等体积的弗氏完全佐剂混合，乳化完全，背部皮下多点免疫小鼠。三周后加强免疫，蛋白按照50μg/只的剂量与等体积的不完全弗氏佐剂混合，乳化完全，背部皮下多点免疫小鼠。1周后，对小鼠进行断尾采血，检测血清效价。血清效价达到5万以上，准备融合。融合前3天，对小鼠进行腹腔注射免疫，不加佐剂，免疫剂量为100μg/只。
2、细胞融合
融合时，在无菌环境下，取免疫小鼠的脾脏，研磨分散细胞，离心后收集小鼠B淋巴细胞，按照5:1(B淋巴细胞：SP2/0)的比例进行混合，离心，用无血清DMEM培养基清洗细胞，确保混合细胞中无胎牛血清，在37℃水浴中，用1mL PEG进行细胞融合，在1min内边滴加PEG，边轻柔混合，静置30s，使PEG充分作用。
融合结束后，用20ml无血清DMEM终止融合，加入速度有慢到快，在10min内加完。终止结束后，将细胞放入二氧化碳培养箱中孵育20min，800rpm/min离心10min，用HAT培养基重悬融合细胞，置于96孔细胞培养板中，放入二氧化碳培养箱进行培养。
3、杂交瘤细胞筛选和亚克隆
融合后第五天用HAT培养基全换液，第七天通过间接ELISA的方法检测培养上清。具体检测方法如下：
(1)包被：用CBS缓冲液将Trx蛋白稀释成0.5μg/mL,100μL/孔包被到酶标板中，4℃包被过夜。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(2)封闭：用含2％甘氨酸的PBST缓冲液封闭酶标板，200μL/孔，37℃孵育2h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(3)检测：将待检测的细胞上清加入到酶标板中，100μL/孔，同时用小鼠免疫血清做阳性对照，用HAT培养基做空白对照，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(4)加酶标二抗：用PBST缓冲液将HRP标记的羊抗鼠抗体2万倍稀释，加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(5)显色：用TMB显色液避光显色，100μL/孔，37℃孵育15min；用2M硫酸终止液进行终止，50μL/孔，于450nm波长下检测。
选择第一次筛选的阳性孔，重新用HAT培养基换液，隔天收集细胞上清，用间接ELISA方法验证效价，挑选效价高的细胞进行亚克隆。亚克隆采用倍比稀释法，取200-500个细胞，转移到新的96孔细胞培养板的A1孔，按照纵向和横向各2倍稀释，进行亚克隆。七天后用间接ELISA的方法检测培养上清，选取细胞团单一的阳性孔，继续亚克隆，直至96孔板的阳性率达到100％。继续重复2次亚克隆，阳性率均在100％，结束亚克隆，保证杂交瘤细胞株的稳定性。
5、杂交瘤细胞株保存
选取生长稳定的杂交瘤细胞株，用间接ELISA方法，包被Trx蛋白、Sumo蛋白、GST蛋白、MBP蛋白，验证细胞上清的特异性。筛选特异性好的细胞株进行扩大培养，细胞密度达到80％时，收集细胞，用细胞冻存液冻存细胞。将该杂交瘤细胞命名为杂交瘤细胞株16H6，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：C2021186。。
4、杂交瘤细胞分泌抗体稳定性检测
将杂交瘤细胞16H6进行传代培养，共培养30代，分别在1、3、6、9、12、15、18、21、24、27、30代时收集培养上清，用间接ELISA的方法检测Trx质控品，分析细胞分泌抗体的稳定性。检测结果如图1所示：细胞传代30次分泌抗体效价呈现较高的一致性。
实施例2Trx标签单克隆抗体的制备
1、腹水制备
选取12周龄左右的Balb/c雌鼠，每只小鼠腹腔注射500μL的液体石蜡，一周后腹腔注射杂交瘤细胞，剂量为106个/只。5天后，持续观察小鼠，待其腹部膨胀明显后，收集腹水，12000rpm/min离心，去除杂质，置于-80℃冰箱保存。
2、腹水纯化
将腹水从冰箱取出，融化后离心，用0.22μm滤膜进行过滤。参照博格隆protein-A柱说明书进行纯化。收集纯化的抗体，用20mM PB进行透析，48h后收集抗体，0.22μm滤膜过滤后，分装，置于-80℃冰箱中保存，用于后续检测和验证。
具体纯化方法如下：
(1)平衡：取Protein-A层析柱，用10倍体积的上样缓冲液平衡柱子。
(2)上样：将处理好的腹水加入层析柱，用离心管收集流穿液。样品全部过柱后，将流穿液再次上样，同时收集流穿液，将流穿液做好标记(上样过程中，控制流速慢一点，使样品和纯化柱充分结合)。
(3)平衡：上样结束后，用10倍柱体积的上样缓冲液平衡柱子，同时用考马斯亮蓝试剂检测出口液体，液体蛋白浓度低于1mg/mL时，即为平衡完全。
(4)洗脱：提前在600μLEP管中加入30μl中和缓冲液，用10倍柱体积的洗脱缓冲液进行洗脱。洗脱时，每管收集400uL洗脱液，并及时混匀。用考马斯亮蓝试剂检测洗脱液中抗体的浓度(注意收集开始和结束的节点)，并做好标记。
(5)平衡：用10倍柱体积的上样缓冲液进行平衡，用PH试纸检测出口液体的PH，与上样缓冲液PH一致时，结束平衡。用20％乙醇进行冲洗柱子，并储存于20％乙醇中，放置4℃保存。
实施例3单克隆抗体鉴定
1、抗体效价和亲和力测定
采用间接ELISA的方法，对抗体的效价和亲和力进行比对，相较于对照抗体(T8)，本发明所述的抗体效价更高，且线性由于对照抗体。检测结果如图2所示。具体检测方法如下：(1)包被：用CBS缓冲液将Trx蛋白稀释成0.5μg/mL,100μL/孔包被到酶标板中，4℃包被过夜。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(2)封闭：用含2％甘氨酸的PBST缓冲液封闭酶标板，200μL/孔，37℃孵育2h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(3)检测：将待检测的抗体加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(4)加酶标二抗：用PBST缓冲液将HRP标记的羊抗鼠抗体2万倍稀释，加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(5)显色：用TMB显色液避光显色，100μL/孔，37℃孵育15min；用2M硫酸终止液进行终止，50μL/孔，于450nm波长下检测。
2、抗体亚型检测
使用Southern Biotech公司的SBA亚型检测试剂盒，按照说明书进行检测，本发明所述抗体的亚型为IgG1。检测结果如图3所示。
具体检测方法如下：
(1)包被：用CBS缓冲液将试剂盒中的包被抗原稀释成5μg/mL,100μL/孔包被到酶标板中，4℃包被过夜。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(2)封闭：用含2％甘氨酸的PBST缓冲液封闭酶标板，200μL/孔，37℃孵育2h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(3)检测：将待检测的抗体加入到酶标板中(每个抗体做8个检测)，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(4)加酶标二抗：用PBST缓冲液将HRP标记的羊抗鼠抗体(包含IgA-HRP、IgM-HRP、IgG1-HRP、IgG2a-HRP、IgG2b-HRP、IgG3-HRP、κ-HRP、λ-HRP)500倍稀释，加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(5)显色：用TMB显色液避光显色，100μL/孔，37℃孵育15min；用2M硫酸终止液进行终止，50μL/孔，于450nm波长下检测。
3、抗体特异性检测
采用间接ELISA方法，包被4种不同的标签蛋白(Trx蛋白、Sumo蛋白、GST蛋白、MBP蛋白)以及4种含有Trx标签的重组蛋白(Ag1-Trx、Ag5-Trx、Ag13-Trx、Ag15-Trx)，包被蛋白做3个稀释梯度，同时做空白对照，检测抗Trx蛋白单克隆抗体的特异性。本发明说述抗体与其他标签蛋白不反应，与含Trx标签的重组蛋白反应良好，特异性高。检测结果如图4所示。
具体检测方法如下：
(1)包被：用CBS缓冲液将8种包被蛋白稀释，浓度分别为0.5μg/mL、0.1μg/mL、0.02μg/mL，空白对照包被PBST，100μL/孔包被到酶标板中，4℃包被过夜。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(2)封闭：用含2％甘氨酸的PBST缓冲液封闭酶标板，200μL/孔，37℃孵育2h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(3)检测：将待检测的抗体加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(4)加酶标二抗：用PBST缓冲液将HRP标记的羊抗鼠抗体2万倍稀释，加入到酶标板中，100μL/孔，37℃孵育1h。用PBST缓冲液洗板5次，拍干酶标板。
(5)显色：用TMB显色液避光显色，100μL/孔，37℃孵育15min；用2M硫酸终止液进行终止，50μL/孔，于450nm波长下检测。
4、抗体稳定性检测
将本发明所述抗体和外购对照抗体(T8)，按照100μL的装量进行分装，分别进行37℃水浴破坏6天和10天，4℃放置1个月和2个月，-20℃反复冻融20次实验，本发明所述抗体的效价变化比较小，CV值在10％以内，对照抗体CV值在20％以内，本发明说述抗体在稳定性上明显优于外购抗体。检测结果如图5所示，1-6的含义：1、-20℃样本；2、-20℃反复冻融；3、4℃1个月；4、4℃2个月；5、37℃6天；6、37℃10天。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (7)

1.分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏编号为CCTCC NO：C2021186。
2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株，其特征在于，是取免疫小鼠脾脏的B淋巴细胞，和小鼠骨髓瘤细胞进行细胞融合得到的，该细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白单克隆抗体。
3.抗Trx蛋白单克隆抗体，其特征在于，由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌得到。
4.根据权利要求3所述单克隆抗体，其特征在于，亚型为IgG1。
5.权利要求3所述单克隆抗体在制备体外诊断试剂中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，权利要求3所述单克隆抗体是作为标记原料使用。
7.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求3所述单克隆抗体，还包括抗原，所用抗原为含Trx标签的重组蛋白。
CN202111327071.9A 2021-11-10 2021-11-10 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体 Active CN113999819B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111327071.9A CN113999819B (zh) 2021-11-10 2021-11-10 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111327071.9A CN113999819B (zh) 2021-11-10 2021-11-10 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113999819A true CN113999819A (zh) 2022-02-01
CN113999819B CN113999819B (zh) 2023-11-28

Family

ID=79928718

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111327071.9A Active CN113999819B (zh) 2021-11-10 2021-11-10 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113999819B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115028691A (zh) * 2022-06-29 2022-09-09 青岛硕景生物科技有限公司 一种检测试纸用的独立质控系统、杂交瘤细胞株、质控线用包被单克隆抗体及其应用

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06261783A (ja) * 1993-03-16 1994-09-20 Toyota Central Res & Dev Lab Inc チオレドキシンに特異的に反応するモノクローナル抗体
US20030108518A1 (en) * 2001-06-14 2003-06-12 Mark Frewin TRX1 antibody and uses therefor
AU2008229990A1 (en) * 2001-06-14 2008-11-06 Cambridge Enterprise Limited Cd4-specific antibody trx1 and uses therefor
CN102586201A (zh) * 2012-01-18 2012-07-18 陶凌 重组人硫氧还蛋白的制备方法
CN106397581A (zh) * 2016-10-27 2017-02-15 滨州医学院 一种单克隆抗体及其制备方法
AU2016422911A1 (en) * 2016-09-13 2019-04-04 E&S Healthcare Co., Ltd. Monoclonal antibody specifically binding to thioredoxin 1, and use thereof
CN111315759A (zh) * 2017-10-12 2020-06-19 E&S医疗保健有限公司 硫氧还蛋白1表位及与其特异性结合的单克隆抗体
CN111574631A (zh) * 2020-06-25 2020-08-25 菲鹏生物股份有限公司 针对硫氧还蛋白的抗体、缀合物和检测试剂盒
CN111718416A (zh) * 2020-06-25 2020-09-29 菲鹏生物股份有限公司 抗硫氧还蛋白的抗体、其应用和诊断试剂盒
CN112920278A (zh) * 2021-02-18 2021-06-08 青岛硕景生物科技有限公司 一种新型冠状病毒特异性融合蛋白抗原及其制备方法和应用

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06261783A (ja) * 1993-03-16 1994-09-20 Toyota Central Res & Dev Lab Inc チオレドキシンに特異的に反応するモノクローナル抗体
US20030108518A1 (en) * 2001-06-14 2003-06-12 Mark Frewin TRX1 antibody and uses therefor
AU2008229990A1 (en) * 2001-06-14 2008-11-06 Cambridge Enterprise Limited Cd4-specific antibody trx1 and uses therefor
CN102586201A (zh) * 2012-01-18 2012-07-18 陶凌 重组人硫氧还蛋白的制备方法
AU2016422911A1 (en) * 2016-09-13 2019-04-04 E&S Healthcare Co., Ltd. Monoclonal antibody specifically binding to thioredoxin 1, and use thereof
CN109863176A (zh) * 2016-09-13 2019-06-07 E&S医疗保健有限公司 与硫氧还蛋白1特异性结合的单克隆抗体及其用途
CN106397581A (zh) * 2016-10-27 2017-02-15 滨州医学院 一种单克隆抗体及其制备方法
CN111315759A (zh) * 2017-10-12 2020-06-19 E&S医疗保健有限公司 硫氧还蛋白1表位及与其特异性结合的单克隆抗体
CN111574631A (zh) * 2020-06-25 2020-08-25 菲鹏生物股份有限公司 针对硫氧还蛋白的抗体、缀合物和检测试剂盒
CN111718416A (zh) * 2020-06-25 2020-09-29 菲鹏生物股份有限公司 抗硫氧还蛋白的抗体、其应用和诊断试剂盒
CN112920278A (zh) * 2021-02-18 2021-06-08 青岛硕景生物科技有限公司 一种新型冠状病毒特异性融合蛋白抗原及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PREPARATION AND IDENTIFICATION OF MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST RECOMBINANT HUMAN THIOREDOXINS: "Preparation and identification of monoclonal antibodies against recombinant human thioredoxins", 《HYBRIDOMA》, vol. 26, no. 05, pages 338 - 341 *
RICHARD R. DICKASON等: "Versatile E. coli thioredoxin specific monoclonal antibodies afford convenient analysis and purification of prokaryote expressed soluble fusion protein", 《JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS》, vol. 185, no. 02, pages 237 - 244, XP004021198, DOI: 10.1016/0022-1759(95)00119-U *
井金苗: "家蝇硫氧还蛋白2单克隆抗体的制备及抗氧化研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》, no. 2021 *
刘飞等: "抗细菌硫氧化还原蛋白Thioredoxin单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用", 《细胞与分子免疫学杂志》, vol. 15, no. 03, pages 221 - 224 *
唐文心等: "抗人硫氧还蛋白-1单克隆抗体的制备与鉴定及初步应用", 《细胞与分子免疫学杂志》, vol. 24, no. 06, pages 597 - 600 *
滕宗艳、于维汉: "硫氧还蛋白系统研究进展", 《微量元素与健康研究》, vol. 19, no. 02, pages 66 - 71 *
赵海燕等: "人硫氧还蛋白1多克隆抗体制备及对内毒素血症新生大鼠的保护作用", 《中国当代儿科杂志》, vol. 13, no. 10, pages 837 - 841 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115028691A (zh) * 2022-06-29 2022-09-09 青岛硕景生物科技有限公司 一种检测试纸用的独立质控系统、杂交瘤细胞株、质控线用包被单克隆抗体及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113999819B (zh) 2023-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110068688B (zh) 一种牛乳中乳铁蛋白竞争法纳米花免疫测流层析检测卡
CN114480298B (zh) 一株分泌抗tigit单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
CN106699884B (zh) 抗人c-反应蛋白抗体及其应用
CN113999819A (zh) 分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体
CN103509760B (zh) 可分泌抗β2-微球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及应用
CN115449512A (zh) 分泌抗犬dea1.1血型单抗的杂交瘤细胞株及应用
CN110196322A (zh) 有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留检测方法及其试纸条和制备方法
CN116333115B (zh) 一种抗孕酮的单克隆抗体、试剂盒及应用
CN114891103B (zh) 一种钙卫蛋白单克隆抗体及试剂盒
CN114195897B (zh) Pd-l1单克隆抗体、重链、轻链可变区、单克隆细胞株及运用和试剂盒
CN107607726B (zh) 人胱抑素c胶体金定量检测卡
CN107383198B (zh) 一种抗人CysC抗体及其应用
CN104749371B (zh) 人肾母细胞瘤过度表达基因编码蛋白酶联免疫试剂盒
CN114276456A (zh) 分泌鼠抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用
CN116396387A (zh) Pd-l1单克隆抗体、重链、轻链可变区、单克隆细胞株及运用和试剂盒
CN106749659B (zh) 一种抗人crp抗体及其应用
CN115340985A (zh) 分泌抗猫a型血型特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用
CN109725159B (zh) 人β2-微球蛋白的定量检测试纸卡与临床应用
CN109575133B (zh) 抗人β2-MG抗体及其应用
CN109666072B (zh) 抗人β2-微球蛋白抗体及其应用
CN112778420A (zh) 一种哒螨灵单克隆抗体及其应用
CN114574449B (zh) 一株分泌抗新型冠状病毒n蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
CN111018972A (zh) 抗mSEB蛋白抗体及其应用和包含其的试剂盒
CN109709340A (zh) 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白定量检测卡及其临床应用
CN116284425B (zh) 一种抗壬基酚聚氧乙烯醚的单克隆抗体、试剂盒及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant