CN113912720B - 一种抗人bcma单克隆抗体及应用 - Google Patents

一种抗人bcma单克隆抗体及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了抗人BCMA的单克隆抗体，其重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域如SEQ ID NO.1‑3所示，其轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域如SEQ ID NO.5‑7所示。本发明还提供了所述单克隆抗体在制备检测或治疗肿瘤药物中的用途。本发明具体提供的抗BCMA单克隆抗体69G8与BCMA蛋白具有高亲和性，Kd值为1.38x10‑8M，特异性强，能够特异性结合BCMA阳性细胞系H929，与BCMA阴性细胞系无交叉反应。且具有内化作用，可用于抗体药物偶联物(ADC)的制备，具有良好的临床应用前景。

Description

一种抗人BCMA单克隆抗体及应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及特异性结合人B细胞成熟抗原(BCMA)的抗体及用途，尤其是在治疗浆细胞介导的疾病如多发性骨髓瘤的用途。
背景技术
BCMA(CD269或TNFRSF17)是肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)的第17个成员。它的配体是BAFF和APRIL，涉及调节体液免疫、B细胞发育和内稳态。BCMA的配体还可以结合额外的受体：TACI以及BAFF-R。APRIL与BCMA相互作用具有较高的亲和力，而BAFF-R仅以高亲和力结合BAFF。负性调节因子TACI以相似的亲和力结合BAFF和APRIL。
BCMA在恶性浆细胞上高度表达，例如多发性骨髓瘤细胞、浆细胞白血病中的恶性浆细胞等。BCMA信号传递(通常与B细胞存活和增殖有关)在B细胞分化的晚期，以及长寿命骨髓浆细胞和浆母细胞的存活中是重要的。BAFF和APRIL通过BCMA的信号传导被认为是恶性浆细胞的促存活因子。
多发性骨髓瘤(MM)是克隆性B细胞恶性肿瘤。其通常表征为异常蛋白和破骨细胞的活性，以及高血钙症、血细胞减少症、肾功能不全、和外周神经病变的增加。正常抗体水平和中性粒细胞数的减少也很普遍，导致危及生命的对感染的易感性。目前治疗多发性骨髓瘤的方法主要包括蛋白酶抑制剂、化疗、放疗、干细胞移植等，临床上常组合使用，但最终由于基因组的进化和不稳定性，病人往往会复发。尽管存在多种疗法，但多发性骨髓瘤仍然是无法治愈的疾病。
经基因表达分析，BCMA基因在所有骨髓瘤样品中高表达。转基因过度表达BAFF或APRIL的小鼠模型具有B细胞淋巴瘤的显著增加。在人类B细胞恶性肿瘤以及其他B细胞异常的患者的血清和微环境中已检测到过量的BAFF和APRIL。针对BCMA的抗体例如在Oden,Felix,et al.Molecular oncology 9.7(2015):1348-1358中有所描述。针对BCMA的抗体及其用于多发性骨髓瘤的用途例如在Tai,Yu-Tzu,et al.Blood 123.20(2014):3128-3138中有所描述。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的抗原结合蛋白，其与BCMA亲和力高，特异性强，可应用于肿瘤免疫治疗中。
本发明采用的技术方案为：
一种抗原结合蛋白，具有SEQ ID NO.1-3所示的或具有与其80％以上同一性的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域。
作为优选，其还具有SEQ ID NO.5-7所示的或具有与其80％以上同一性的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域。
更优选地，所述抗原结合蛋白选自Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、dAb、互补决定区片段、单克隆抗体、单链抗体、单结构域抗体、人源化抗体、嵌合抗体或双特异性抗体。
作为优选，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的或具有与其80％以上同一性，和/或轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示的或具有与其80％以上同一性。
作为优选，所述的抗原结合蛋白，其重链可变区核苷酸序列如SEQ ID No.9所示或具有与其80％以上同一性，和/或其轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的或具有与其80％以上同一性。
作为优选，其为单克隆抗体。
更优选地，其由SP2/0细胞系的细胞产生。
本发明还挺高抗原结合蛋白在制备检测或治疗肿瘤药物的用途。
作为优选，所述肿瘤为B细胞相关肿瘤。
更优选地，所述肿瘤为多发性骨髓瘤细胞、浆细胞白血病、弥漫性大B细胞淋巴瘤或浆母细胞瘤。
本发明提供了一种抗人BCMA单克隆抗体，所述重链可变区序列的CDR区中三个CDR区如下：
GYAFTNYLIE(CDRH1、SEQ ID NO:1)
VITPGRGDTKYNAKFAG(CDRH2、SEQ ID NO:2)
GTTAWFPY(CDRH3、SEQ ID NO:3)；
所述轻链可变区序列的CDR区如下：
RASKSVSTSGYSYMH(CDRL1、SEQ ID NO:5)
LASNLES(CDRL2、SEQ ID NO:6)
QHSRDLPYT(CDRL3、SEQ ID NO:7)。
具体地，本发明提供了一种抗人BCMA单克隆抗体，其重链可变区序列为如SEQ IDNO:4所示，其轻链可变区序列如SEQ ID NO:8所示。
本发明通过小鼠杂交瘤筛选技术及RT-PCR法克隆Ig可变区基因，获得1株稳定分泌特异性抗人BCMA抗体的杂交瘤细胞株，鉴定抗体的可变区序列，并通过流式细胞术对抗体特异性进行了检测。
上述杂交瘤细胞株69G8的编号为CGMCC No.17985，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为：2019年6月5日。
本发明提供的抗BCMA单克隆抗体69G8与BCMA蛋白具有高亲和性，Kd值为1.38x10- 8M，特异性强，能够特异性结合BCMA阳性细胞系H929，与BCMA阴性细胞系Jurkat、Raji、K562、HepG2、HL-60、MCF-7、NAMALWA均无交叉反应。与外周血单个核细胞(PBMC)无交叉反应。并且能特异性结合临床病人样本中的CD138阳性细胞,与CD138阴性病人标本无交叉反应。69G8还具有内化作用。鉴于这些特性，单克隆抗体69G8既可用于检测表达人BCMA的细胞，也能够单独或与其它方法联合应用在靶向人BCMA的肿瘤免疫治疗中，鉴于69G8能内化，也可以用于抗体药物偶联物(ADC)的制备。
附图说明
图1：PE标记抗体69G8与3T3-BCMA细胞的亲和常数分析图；
图2：FACS法检测抗体69G8与人BCMA阳性细胞系H929的结合结果图，其中，a为同型对照，b为BCMA商品抗体，c为69G8；
图3：FACS法检测抗体69G8与人BCMA阴性细胞系Jurkat、Raji、K562、HepG2、HL-60、MCF-7、NAMALWA的交叉反应结果图，图中，a(虚线)为BCMA商用抗体，b(实线)为69G8；
图4：FACS法检测PE标记抗体69G8与经CD138磁珠分选的多发性骨髓瘤病人样本的结合结果图，其中，图4A为CD138阳性病人标本，图4B为CD138阴性病人标本；
图5：FACS法检测抗体69G8与BCMA商品抗体结合3T3-BCMA细胞表面BCMA蛋白的竞争情况结果图；
图6：FACS法检测PE标记抗体69G8与正常人外周血标本的结合结果图，其中，a为BCMA商用抗体，b为69G8；
图7：FACS法检测H929细胞表面的BCMA受体与69G8抗体结合时，诱导发生受体介导的内吞作用结果图。
保藏说明：
杂交瘤细胞株69G8的编号为CGMCC No.17985，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为：2019年6月5日。
具体实施方式
本发明公开了一种鼠抗人BCMA单克隆抗体及应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。需要特别指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明，并且相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围的基础上对本文所述内容进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不限定本发明的保护范围。
实施例1：.小鼠杂交瘤单克隆抗体筛选
经慢病毒转染，3T3细胞的细胞膜上稳定表达人BCMA蛋白，经过多次阳性分选，建立了稳定表达BCMA蛋白的3T3-BCMA细胞系。所用到的慢病毒表达载体以pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP为空载，在其多克隆位点插入编码人BCMA胞外段基因构建而成。
以3T3-BCMA为免疫原，采用腹腔注射的方式免疫4-5周雌性Balb/c小鼠，1×107个3T3-BCMA细胞/500μL NS/只鼠，分别在初次免疫后的第3周和第5周进行加强免疫，加强免疫后的第8天取小鼠尾血10μL置于90μL NS中，室温静置1小时，4℃，12000rpm离心10分钟，收集血清,以PBS稀释成不同浓度：1:200，1:400，1:800，1:1600，1:3200，1:6400，1：12800，1：25600。分别收集3T3、3T3-BCMA细胞，PBS洗1次，细胞计数，将100μl不同稀释度的血清分别加入到1×106个检测细胞中，以未免疫小鼠血清作阴性对照，37℃孵育30分钟，PBS洗两次；分别加入APC标记抗小鼠IgG二抗0.2μl，37℃避光孵育30分钟；细胞重悬于200μl PBS缓冲液中，流式细胞仪检测血清中的抗体与细胞的结合百分率及荧光强度；以3T3-BCMA细胞平均荧光强度为3T3细胞两倍以上的稀释度为有效效价，效价高于6400时，方可进行融合。融合前3天，对免疫小鼠通过尾静脉注射免疫原的方式进行冲击免疫。
无菌状态下分离成功免疫的小鼠的脾脏细胞，用无血清1640培养基1200rpm，6min洗2遍后与处于对数生长期的骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合(以10：1比例)，融合过程在37℃水浴的环境下进行，将1mL预热的50％PEG在1min之内逐滴加入混匀且弃去上清的脾脏细胞与骨髓瘤细胞细胞团之中，再在5min之内缓慢滴入10ml预热无血清1640培养基。细胞悬液经800rpm，6min离心洗涤两次后，弃去上清，用含有HAT的1640培养基重悬细胞，并铺于96孔板(2.5x107细胞/板)。在37℃、5％CO2条件下培养细胞。
显微镜下观察细胞克隆足够大时，取对应孔的上清液100μl，3T3与3T3-BCMA细胞以1：1比例混合作为检测细胞，上清液与检测细胞共孵育，进行检测，方法与检测效价方法相同。当3T3-BCMA的平均免疫荧光强度高于3T3时将该孔作为阳性孔进行下一步扩大培养。将阳性的杂交瘤克隆从96孔板扩至24孔板培养3-5天，再次进行培养上清筛选检测，检测结果仍为阳性的克隆取一小部分细胞进行下一步的亚克隆，剩余细胞冻存。收集24孔板中杂交瘤细胞，细胞计数，将细胞密度调整为10个/mL，每孔100μl铺到96孔板中，37℃、5％CO2培养10天左右，可见克隆形成，只选取单克隆的孔，取培养上清进行检测，检测方法同前。检测结果为阳性的克隆，继续扩至24孔板培养，再次上清检测后，仍为阳性的克隆进行第二轮的亚克隆培养，一般进行多轮亚克隆培养后，直至所有检测孔均为阳性为止，即获得稳定的杂交瘤细胞株。选取阳性杂交瘤培养上清，采用抗体亚型检测试纸检测抗体的亚型，本发明中的单克隆抗体编号为69G8，为鼠源IgG1亚型，轻链为κ链。
69G8鼠源IgG1型
重链
QVQLQQSGAEVVRPGTSVKVSCKASGYAFTNYLIEWVKQRPGQGPEWIGVITPGRGDTKYNAKFAGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTFDDSAVYFCARGTTAWFPYWGQGTLVTVSA(SEQ ID NO:4)
CDRH1:GYAFTNYLIE(SEQ ID NO:1)
CDRH2:VITPGRGDTKYNAKFAG(SEQ ID NO:2)
CDRH3:GTTAWFPY(SEQ ID NO:3)
轻链
DIVLTQSPASLTVSLGQRATISCRASKSVSTSGYSYMHWYQQKPRQPPKLLIYLASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHSRDLPYT FGGGTKLEIKRA(SEQ ID NO:8)
CDRL1:RASKSVSTSGYSYMH(SEQ ID NO:5)
CDRL2:LASNLES(SEQ ID NO:6)
CDRL3:QHSRDLPYT(SEQ ID NO:7)
实施例2：腹水制备及纯化
无菌PBS溶液洗涤杂交瘤细胞，以5x106/0.5ml PBS/只的细胞量腹腔注射到液体石蜡预致敏的Balb/c小鼠体内。7至10天后收集腹水，室温3000rpm，10min离心取中间层。以45％饱和硫酸铵对抗体进行粗纯，方法为取1份腹水加1份PBS,滴加1.64份饱和硫酸铵，边加边搅拌，4℃过夜，10000rpm离心10min除去上清，用少量PBS溶解沉淀，在4℃环境下用PBS透析除盐24h，透析期间换液3次。粗纯后的抗体按照GE公司提供的纯化手册，利用AKTA蛋白纯化系统，经1ml ProteinG纯化预装柱进行进一步的纯化。所得抗体纯品用于后续的抗体检测及功能实验。
实施例3：单克隆抗体效价检测
对抗体纯品进行荧光标记，PE直接标记69G8抗体。标记后的抗体以终浓度400nM、200nM、100nM、50nM、25nM、12.5nM、6.25nM、3.2nM、1.6nM、0.8nM、0.4nM、0.2nM、0.1nM、0.05nM、0.025nM分别与2×1053T3-BCMA室温共孵育30min，注意避光。1800rpm，10min离心，弃上清，PBS洗细胞，重复三次，将细胞重悬于200μl的PBS中，FACS测定荧光强度，统计Mean值。用数据分析软件GraphPad Prism 7计算抗体的Kd值。69G8抗体的Kd值为1.38×10-8M。(见图1)
实施例4：RT-PCR法克隆Ig可变区基因
提取总RNA，合成cDNA文库：
用Trizol试剂(购自Invitrogen)提取69G8杂交瘤细胞株的的总RNA,用M-MLV逆转录酶(购自Invitrogen)将总RNA逆转为cDNA文库。
RT-PCR扩增抗人BCMA抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因片段：
重链骨架区上游引物
P1：5‘-SAG GTG MAG CTK CAS SAR TCW GG(SEQ ID NO:11)
重链可变区下游引物
P2：5’-TGG GGS TGT YGT TTT GGC TGM RGA GAC RGT GA3(SEQ ID NO:12)
轻链骨架区上游引物
P3：5’-GAC ATT GTS ATG ACC CAG WCT CCA(SEQ ID NO:13)
轻链可变区下游引物
P4：5’-GGA TAC AGT TGG TGC AGC ATC AGC CCG TTT(SEQ ID NO:14)
配制PCR反应体系(50μl)如下：
cDNA:2μl；上游引物(10μM):2μl；下游引物(10μM):2μl；d NTP mixture:2μl；pfuDNA聚合酶(5U/μl):1μl；10X pfu BufferⅡ:5μl；ddH2O:补足至50μl。反应条件：95℃预变性5min；重复如下循环35次：95℃30s，58℃30s，72℃1min；最后，72℃延伸10min。琼脂糖凝胶电泳分离并回收VL、VH片段。将回收后的VL、VH片段与pMD19-T(simple)载体(Takara公司)通过T4连接酶(Takara公司)进行连接，连接体系如下：VL PCR产物/VH PCR产物各70ng，pMD19-T(simple)载体1μl，Solution I连接反应液5μl；ddH2O补足至10μl，4℃连接过夜。
连接产物转化入E.coli DH5α感受态细菌中，37℃过夜培养后，挑取单个菌落，37℃震摇2小时后进行菌液PCR鉴定，以对应抗体的cDNA为阳性对照。配制反应体系(25μl)如下：菌液：1μl，上游引物(10μM)：1μl；下游引物(10μM)：1μl；dNTP Mixture(各2.5Mm)2μl；Taq DNA聚合酶(5U/μl)：0.5μl；10×Taq Buffer(Mg2+plus)：2.5μl；补水至25μl。反应条件同前。选取菌液PCR阳性的克隆扩大培养，用质粒提取试剂盒(Takara公司)提取阳性克隆质粒，送检测序。每个抗体的每条链至少送检5个克隆样品，至少三个样品测序结果相同为止。成功克隆得到69G8的重链、轻链可变区序列，符合典型抗体可变区序列特征。
实施例5：与高表达BCMA的H929细胞特异性结合
FACS检测抗体69G8与H929表面BCMA蛋白的结合：1μl抗体(200μg/ml)与1×106H929细胞进行孵育，室温孵育30分钟，PBS洗两次；100ul重悬细胞，加入APC标记的抗小鼠IgG二抗0.2μl，室温避光孵育30分钟，PBS洗两次。同时设置同型阴性对照管，及以BCMA商品抗体(Biolegend：B258546)作为阳性对照管，使用浓度为0.2μg/test。细胞重悬于200μlPBS缓冲液中，FACS检测。结果见图2，可见69G8能有效结合H929，亲和性强。
实施例6：.与BCMA阴性细胞的交叉反应
1μl抗体(200μg/ml)分别与2x105个Jurkat、Raji、K562、HepG2、HL-60、MCF-7、NAMALWA细胞(BCMA阴性)进行孵育，以BCMA商品抗体(Biolegend：B258546)作为对照，使用浓度为0.2μg/test。室温孵育30min，PBS洗两次；100ul重悬细胞，加入APC标记抗小鼠IgG二抗0.2μl，室温避光孵育30分钟，PBS洗两次；细胞重悬于200μl PBS缓冲液中，FACS检测。结果见图3，抗体69G8与Jurkat、Raji、K562、HepG2、HL-60、MCF-7、NAMALWA细胞均无交叉反应。
实施例7：抗体69G8与多发性骨髓瘤病人标本的结合
取经磁珠分选后的CD138阴性、阳性(阴性1例，阳性2例)多发性骨髓瘤病人骨髓标本2.8x104分别与1μl PE直标的69G8抗体(200μg/ml)室温孵育30min，PBS洗两次；细胞重悬于200μl PBS缓冲液中，FACS检测。以BCMA商品抗体(Biolegend：B258546)为阳性对照，使用浓度为0.2μg/test。结果见图4A和图4B，69G8与病人样本的结合分群与商品BCMA抗体一致，说明69G8能够特异性识别出病人标本中的BCMA阳性细胞(图4A)，并且与病人样本中的CD138阴性细胞无交叉反应(图4B)。
实施例8：FACS法检测抗体69G8与BCMA商品抗体19F2的竞争关系
分别取69G8抗体0.012μg、0.06μg、0.3μg、1.5μg，同时每孔加入0.2μg BCMA商品抗体(Biolegend：B258546),用PBS将每孔终体积调节至200ul，分别与2×105个3T3-BCMA细胞室温避光孵育30min。1200rpm，6min离心，弃上清，PBS洗细胞，重复三次，将细胞重悬于200μl的PBS中，FACS测定荧光强度。结果见图5.可见随着69G8用量的增加，与商品抗体竞争的程度也随之增加。
实施例9：.抗体69G8与正常人外周血标本的结合
取正常人外周血标本，用Ficoll密度梯度离心法分离得到人外周血单个核细胞(PBMC)。取2x105个PBMC与1μl PE直标的69G8抗体(200μg/ml)室温孵育30min，PBS洗两次；细胞重悬于200μl PBS缓冲液中，FACS检测。以BCMA商品抗体(Biolegend：B258546)为对照，使用浓度为0.2μg/test。结果见图6，69G8与人外周血单个核细胞没有非特异结合，说明了69G8的高特异性。
实施例10：.H929细胞表面的BCMA受体与69G8抗体结合介导产生的内吞作用
取1x106个H929细胞与0.3μg 69G8抗体冰上孵育30min，预冷PBS洗涤细胞，并用培养基重悬。细胞分为两组，一组置于4度，另一组转移到37度培养箱，分别在0h、1h、2h、3h、4h收等量样品，加入APC标记抗小鼠IgG二抗0.2μl，室温避光孵育30分钟，PBS洗两次；细胞重悬于200μl PBS缓冲液中，FACS检测。结果见图7，在4度条件下，不同时间点的样品的平均荧光强度MFI没有明显变化，而37度条件下，随着时间的增加，样品的平均荧光强度逐渐降低，说明H929细胞表面的BCMA受体在37度条件下与69G8抗体结合介导其内化，而4度条件下不发生内化。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所） 克拉玛依市中心医院
<120> 一种抗人BCMA的单克隆抗体及其应用
<130> NZ190499
<160> 10
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 1
Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr Leu Ile Glu
1 5 10
<210> 2
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 2
Val Ile Thr Pro Gly Arg Gly Asp Thr Lys Tyr Asn Ala Lys Phe Ala
1 5 10 15
Gly
<210> 3
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 3
Gly Thr Thr Ala Trp Phe Pro Tyr
1 5
<210> 4
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 4
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Thr Pro Gly Arg Gly Asp Thr Lys Tyr Asn Ala Lys Phe
50 55 60
Ala Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Thr Thr Ala Trp Phe Pro Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ala
115
<210> 5
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 5
Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His
1 5 10 15
<210> 6
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 6
Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 7
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 7
Gln His Ser Arg Asp Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 8
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 8
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Thr Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Asp Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Ala
<210> 9
<211> 351
<212> DNA
<213> Artificial
<400> 9
caggtccagc tgcagcagtc tggagctgag gtggtaaggc ctgggacttc agtgaaggtg 60
tcctgcaagg cttctggata cgccttcact aattacttga tagagtgggt aaagcagagg 120
cctggacagg gccctgagtg gattggagtg attactcctg gacgtggtga tactaaatac 180
aatgcgaaat tcgcgggcaa ggcaacactg actgcagaca aatcctccag cactgcctac 240
atgcagctca gcagcctgac atttgatgac tctgcggttt atttctgtgc aagagggact 300
acggcctggt ttccttactg gggccaaggg actctggtca ctgtctccgc a 351
<210> 10
<211> 339
<212> DNA
<213> Artificial
<400> 10
gacattgtgc tgacacagtc tcctgcttcc ttaactgtat ctctggggca gagggccacc 60
atctcatgca gggccagcaa aagtgtcagt acatctggct atagttatat gcactggtac 120
caacagaaac caagacagcc acccaaactc ctcatctatc ttgcatccaa cctagaatct 180
ggggtccctg ccaggttcag tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240
cctgtggagg aggaggatgc tgcaacctat tactgtcagc acagtaggga ccttccgtac 300
acgttcggag gggggaccaa gctggaaata aaacgggct 339

Claims (8)

1.一种抗人BCMA的抗原结合蛋白，其特征在于，具有SEQ ID NO.1-3所示的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域和SEQ ID NO.5-7所示的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区域。
2.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其特征在于，所述抗原结合蛋白选自Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、dAb、互补决定区片段、单克隆抗体、单链抗体、单结构域抗体、人源化抗体、嵌合抗体或双特异性抗体。
3.根据权利要求1或2所述的抗原结合蛋白，其特征在于，其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，其轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
4.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其特征在于，其为单克隆抗体。
5.根据权利要求4所述的抗原结合蛋白，其特征在于，其由SP2/0细胞系的细胞产生。
6.根据权利要求1-5所述的抗原结合蛋白在制备检测或治疗肿瘤的产品中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为B细胞相关肿瘤。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为多发性骨髓瘤细胞、浆细胞白血病、弥漫性大B细胞淋巴瘤或浆母细胞瘤。
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