CN113912716A - 针对α-突触核蛋白抗原的抗体及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了针对α‑突触核蛋白抗原的抗体及其应用，所述抗体具有如SEQ ID NO.1、2、3所示的重链的CDR1、CDR2、CDR3，和SEQ ID NO.11、12、13所示的轻链的CDR1、CDR2、CDR3。本发明进一步公开了所述抗体在检测对α‑突触核蛋白以及诊断/预防/治疗α‑突触核蛋白病中的应用。

Description

针对α-突触核蛋白抗原的抗体及其应用
技术领域
本发明属于细胞生物技术、免疫学领域，涉及针对α-突触核蛋白抗原的抗体及其应用。
背景技术
α-突触核蛋白是含有140个氨基酸残基的固有无序蛋白(除了N端区域的α螺旋结构，缺乏独特的构象)，它位于4号常染色体上由包含7个外显子的单基因(SNCA)编码，广泛存在于中枢神经元及周围神经元中。α-突触核蛋白在生理状态下的结构可塑性跟其功能不可分割。目前研究表明α-突触核蛋白主要有以下几种生理功能：抑制细胞凋亡、调节葡萄糖水平、调控钙调蛋白活性、伴侣蛋白活性、维持多不饱和脂肪酸水平、抗氧化活性、神经元分化以及多巴胺的生物合成（Emamzadeh, F.N., Alpha-synuclein structure ，functions,and interactions[J]. Journal of Research in Medical Sciences the OfficialJournal of Isfahan University of Medical Sciences.2016,21(2):29.）。病理状态下，α-突触核蛋白错误折叠聚集形成低聚体或淀粉样纤维可能通过失去或新增一些功能而导致神经毒性。α-突触核蛋白构成的病理性包涵体常见于帕金森病（Parkinson’s disease，PD）、路易体痴呆（dementia with Lewy bodies，DLB）、 多系统萎缩（multiplesystematrophy，MSA）以及一些罕见疾病，由于这些疾病中突触核蛋白的异常聚集，因此它们统称为α-突触核蛋白病。
α -突触核蛋白是开发α -突触核蛋白病(例如帕金森病)的治疗剂的靶标。主要的开发策略包括抑制聚集体形成、基因沉默和去除聚集体。目前针对α-syn的抗体有针对不同聚集状态的α-syn的抗体(抗单体，抗寡聚体，抗纤维化抗体)；α-syn分为三个结构域，N端，NAC区及C端，所以也有针对识别α-syn不同区域的抗体(抗N端，抗C端，抗NAC区抗体)，但是目前均没有应用到临床上。
发明内容
为了弥补现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种分泌抗α-突触核蛋白的杂交瘤细胞株和抗α-突触核蛋白的单克隆抗体及其应用。
本发明的第一方面提供了分离的抗α-突触核蛋白的单克隆抗体或其抗原结合部分，包含：CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区；及CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区；其中，重链可变区的CDR1包含SEQ ID NO.1所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR2包含SEQ ID NO.2所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR3包含SEQID NO.3所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR1包含SEQ ID NO.11所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR2包含SEQ ID NO.12所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR3包含SEQ ID NO.13所示或其保守修饰形式的氨基酸序列。
进一步，所述重链可变区还包含：重链可变区的FR1包含SEQ ID NO.4所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR2包含SEQ ID NO.5所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR3包含SEQ ID NO.6所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR4包含SEQ ID NO.7所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR1包含SEQ ID NO.14所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR2包含SEQ IDNO.15所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR3包含SEQ ID NO.16所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR4包含SEQ ID NO.17所示或其保守修饰形式的氨基酸序列。
进一步，所述重链可变区包含与SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列。
进一步，所述重链可变区的包含SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列。
进一步，所述单克隆抗体包含抗体重链恒定区和/或抗体轻链恒定区的全部或者部分。
本发明的第二方面提供了双特异性分子，包含与第二功能性模块相连的本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，该第二功能性模块具有与所述单克隆抗体或其抗原结合部分不同的结合特异性。
本发明的第三方面提供了如下任一项所述的物质：
1）核酸分子，其编码本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分；
2）重组表达载体，其包含1）中所述的核酸分子；
3）宿主细胞，其包含1）所述的核酸分子或2）所述的重组表达载体。
进一步，所述编码重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的核酸分子具有与SEQ ID NO.21、22、23所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列；编码轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3的核酸分子具有与SEQ ID NO.31、32、33所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列。
进一步，编码重链可变区框架区FR1、FR2、FR3和FR4的核酸分子具有与SEQ IDNO.24、25、26、27所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列；编码轻链可变区框架区FR1、FR2、FR3和FR4的核酸分子具有与SEQ ID NO.34、35、36、37所示的核苷酸序列至少90%，优选95%序列的同一性的序列。
进一步，编码重链可变区的核酸分子具有与SEQ ID NO.29所示的核苷酸序列至少85%，优选90%，更为优选95%序列同一性的序列；编码轻链可变区的核酸分子具有与SEQ IDNO.39所示的核苷酸序列至少85%，优选90%，更为优选95%序列同一性的序列。
进一步，编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示，编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO.39所示。
进一步，所述重组表达载体包含与所述重链可操作地连接的第一信号肽，和/或与轻链可操作地连接的第二信号肽。
进一步，所述第一信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述第二信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。
本发明的第四方面提供了一种检测产品，所述产品包括本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分。
进一步，所述产品包括利用酶联免疫吸附法、免疫荧光检测法、放射免疫法、发光免疫测定法、胶体金免疫层析法、凝集法、免疫比浊法检测抗原抗体结合的产品。
进一步，所述产品包括试剂盒。
进一步，所述试剂盒包括：胶体金免疫试剂盒、化学发光试剂盒、放射免疫试剂盒、酶联免疫试剂盒(ELISA)、荧光免疫试剂盒和微流体芯片。
本发明的第五方面提供了如下任一项所述的应用：
1）本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、本发明第二方面所述的双特异性分子、本发明第三方面所述的物质、本发明第四方面所述的产品在检测α-突触核蛋白中的应用；
2）本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、本发明第二方面所述的双特异性分子、本发明第三方面所述的物质、本发明第四方面所述的产品在制备诊断α-突触核蛋白病的试剂中的应用；
3）本发明第一方面所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、本发明第二方面所述的双特异性分子、本发明第三方面所述的物质在制备预防和/或治疗与α-突触核蛋白病的药物中的应用。
进一步，所述α-突触核蛋白病为神经退行性疾病。
进一步，所述神经退行性疾病包括帕金森病、路易体痴呆、弥漫性路易体疾病、阿兹海默氏病的路易体变型、合并型阿兹海默氏病和帕金森氏病、多系统萎缩、具有1型脑铁积聚的神经退化。
进一步，所述神经退行性疾病为帕金森病。
附图说明
图1是western检测免疫小鼠抗血清对重组抗原识别能力图；
图2是western检测3D4H7单克隆抗体培养上清对重组抗原识别能力图；
图3是纯化抗体53A2G6和3D4H7联合与抗原结合的特异性检测图。
具体实施方式
为了制备特异性强，亲和力高的抗α-突触核蛋白的抗体，本发明通过制备α-突触核重组蛋白来免疫动物，从而获得分泌阳性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，进而纯化得到特异性高的单克隆抗体。
在本发明中，“抗体”指包含通过二硫键相互连接的至少两条重(H)链和两条轻(L)链的糖蛋白。每条重链由重链可变区(本文中简写为VH)和重链恒定区构成。重链恒定区由三个结构域，CH1、CH2和CH3构成。每条轻链由轻链可变区(本文中简写为VL)和轻链恒定区构成。轻链恒定区由一个结构域，CL构成。VH和VL区可以进一步细分为高变性区域，称为互补决定区(CDR)，其散布在更保守的区域中，称为框架区(FR)。每条VH和VL由三个CDR和四个FR构成，其从氨基端到羧基端以下列顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白对宿主组织或因子的结合，其包括免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一组分(Clq)。
术语 “抗原结合部分”在用于本文时指一个或多个保留了与抗原特异性结合的能力的抗体片段。已显示抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段行使。术语抗体的“抗原结合部分”所涵盖的结合片段的实例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab ')2片段，包含通过铰链区二硫桥连接的两个Fab 片段的二价片段；(iii)Fd片段，由VH和CH1结构域组成；(iv)Fv片段，由抗体单臂的VL和VH结构域组成；(v)dAb片段(Ward等人(1989)Nature 341:544-546)，由VH结构域组成；和(vi)分离的互补决定区(CDR)。此外，虽然Fv片段的两个结构域，VL和VH由分开的基因编码，但是可以使用重组方法通过合成的接头将它们连接，从而使它们能够制备成单个蛋白链，其中 VL和VH区配对形成单价分子(称为单链Fv (scFv) 。此类单链抗体也意图涵盖在术语抗体的“抗原结合部分”中。这些抗体片段可使用本领域技术人员公知的常规技术获得，可以以与完整抗体相同的方式对片段筛选功用。
“分离的单克隆抗体”在用于本文时意图指基本没有具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体。此外，分离的抗体可以基本没有其它细胞材料和/或化学药品。
“单克隆抗体”或“单克隆抗体组合物”在用于本文时指单一分子组合物的抗体分子的制备物。单克隆抗体组合物展现出对特定表位的单一结合特异性和亲和力。
同源抗体
本发明抗体包含的重链和轻链可变区所包含的氨基酸序列与本文所述的优选抗体的氨基酸序列同源，且其中所述抗体保留了本发明抗α-突触核蛋白抗体的期望的功能特性。
例如，本发明提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含重链可变区和轻链可变区，其中：
(a)所述重链可变区包含与SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列；
(b)所述轻链可变区包含与SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列。
在其它实施方式中，VH和/或VL氨基酸序列可以与上述序列具有91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的同源性。VH和VL区与上述序列的VH和VL区具有高同源性的抗体可以通过诱变(例如定点诱变或PCR介导的诱变)编码氨基酸序列的核酸分子获得。
在用于本文时，两氨基酸序列之间的百分比同源性等于两序列之间的百分比同一性。两序列间的百分比同一性为序列共有的相同位置数的函数(即％同源性＝相同位置数/位置总数x 100) ，其中需考虑产生两序列的最优比对需要引入的缺口数和每个缺口的长度。如下述非限制性实施例所示，可以使用数学算法完成序列的比较和两序列间百分比同一性的测定。
可以使用E .Meyers和W .Miller的算法(Comput .Appl .Biosci .,4:11-17(1988))测定两氨基酸序列间的百分比同一性，该算法已收入到ALIGN程序 (版本2 .0)中，其使用PAM120残基权重表，缺口长度罚分为12，缺口罚分为4。此外，可以使用Needleman和Wunsch的算法(J .Mol .Biol .48:444-453 (1970))测定两氨基酸序列间的百分比同一性，该算法已掺入到GCG软件包 (可在www .gcg .com获得)中的GAP程序中，其使用Blossum62矩阵或PAM250矩阵，缺口权重为16、14、12、10、8、6或4，长度权重为1、2、3、 4、5或6。
另外/或者，本发明的蛋白质序列可以进一步用作“查询序列”对公用数据库进行搜索以例如鉴定相关序列。此类搜索可以使用Altschul等人(1990)J . Mol .Biol .215:403-10的XBLAST程序(版本2 .0)进行。可以采用XBLAST程序以得分＝50，词长＝3进行BLAST蛋白质搜索以获得与本发明抗体分子同源的氨基酸序列。为获得用于比较的含缺口的比对结果，如Altschul等人(1997) Nucleic Acids Res .25 (17) :3389-3402所述使用Gapped BLAST。当使用BLAST 和Gapped BLAST程序时，可以使用各程序(例如XBLAST和NBLAST)的缺省参数。(参见www .ncbi .nlm .nih .gov)。
具有保守修饰的抗体
在某些实施方式中，本发明的抗体包含含有CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区和含有CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区，其中这些CDR 序列中的一个或多个包含基于本文所述优选抗体的特定氨基酸序列或其保守修饰，且其中所述抗体保留了本发明抗α-突触核蛋白抗体的期望的功能特性。
在用于本文时，术语“保守序列修饰”意图指氨基酸修饰不会显著影响或改变含有该氨基酸序列的抗体的结合特征。此类保守修饰包括氨基酸的取代、添加和缺失。修饰可以通过本领域已知的标准技术，例如定点诱变和PCR 介导的优点引入到本发明的抗体中。保守氨基酸取代指氨基酸残基用具有类似侧链的氨基酸残基替换。本领域中对具有类似侧链的氨基酸残基家族已有详细说明。这些家族包括具有碱性侧链(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如天冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷的极性侧链(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、非极性侧链(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、β-分支侧链(例如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳香侧链(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)的氨基酸。因此，可以用来自同一侧链家族的其它氨基酸残基替换本发明抗体CDR区中的一个或多个氨基酸残基。
工程改造的和修饰的抗体
本发明的抗体进一步可以使用具有一个或多个本文所公开的VH和/或VL序列的抗体作为起始材料来工程改造修饰后的抗体进行制备，其中所述修饰后的抗体可以具有与起始抗体不同的特性。抗体可以通过修饰一个或全部两个可变区(即VH和/或VL)中，例如一个或多个CDR区中和/或一个或多个框架区中的一个或多个残基来进行工程改造。另外/或者，抗体可以通过修饰恒定区中的残基以例如改变抗体的效应器功能来进行工程改造。
可以进行的一类可变区工程改造是CDR嫁接。抗体与靶抗原相互作用主要是通过位于六个重链和轻链互补决定区(CDR)中的氨基酸残基。因为这个原因，抗体个体间CDR中的氨基酸序列的差异比CDR外序列的大。因为CDR 序列负责大部分抗体－抗原相互作用，所以有可能通过构建表达载体来表达模拟特定天然存在抗体性质的重组抗体，该表达载体包含来自特定天然存在抗体的CDR序列，其嫁接到来自具有不同特性的不同抗体的框架序列上。
另一类可变区修饰是突变VH和/或VK CDR1、CDR2和/或CDR3区中的氨基酸残基以改进目的抗体的一种或多种结合特性(例如亲和力)。可以通过定点诱变或PCR介导的诱变来导入突变。优选导入(如上所述的)保守修饰。突变可以是氨基酸的取代、添加或缺失，但是优选为取代。此外，CDR区中残基变化通常不超过一个、两个、三个、四个或五个。
本发明的工程改造的抗体包括那些VH和/或VK中框架残基进行了修饰以例如改进抗体特性的抗体。通常进行此类框架修饰以降低抗体的免疫原性。例如，一种方法是“回复突变(backmutate)”一个或多个框架残基为相应的种系序列。更具体的说，发生体细胞突变的抗体可以含有与衍生该抗体的种系序列不同的框架残基。可以通过比较抗体框架序列和衍生该抗体的种系序列来鉴定此类残基。
在框架区或CDR区中进行的修饰的另外的或可选的，可以工程改造本发明的抗体以在Fc区中包含修饰，这通常用于改变抗体的一种或多种功能特性，诸如血清半衰期、补体固定、Fc受体结合和/或抗体依赖性细胞的细胞毒性。此外，本发明的抗体可以进行化学修饰(例如在抗体上附着一个或多个化学模块)或者进行修饰以改变其糖基化，再次用于改变抗体的一种或多种功能特性。Fc区中残基的编号方式为Kabat的EU索引的编号方式。
在一实施方式中，修饰CH1的铰链区以使铰链区中半胱氨酸残基的数目改变，例如增加或减少。改变CH1铰链区中半胱氨酸残基的数目以例如便于轻链和重链的组装或提高或降低抗体的稳定性。
在另一实施方式中，突变抗体的Fc铰链区以缩短抗体的生物学半衰期。更具体的说，向Fc－铰链片段的CH2－CH3结构域界面区引入一个或多个氨基酸突变，从而使得抗体具有相对于天然Fc－铰链结构域SpA结合而言削弱了的葡萄球菌蛋白A(SpA)结合。
在又一实施方式中，修饰抗体的糖基化。例如可以制备无糖基化的(aglycoslated)抗体(即抗体缺少糖基化)。可以改变糖基化以例如提高抗体对抗原的亲和力。此类碳水化合物修饰可以通过例如改变抗体序列中的一个或多个糖基化位点来实现。例如，进行一个或多个氨基酸的取代以除去一个或多个可变区框架糖基化位点，进而除去该位点的糖基化。此类无糖基化可以提高抗体对抗原的亲和力。
本发明所设想的本文抗体的另一修饰是PEG化。抗体可以PEG化以例如延长抗体的生物学(例如血清)半衰期。为PEG化抗体，通常在使得一个或多个PEG基团附着于抗体或抗体片段的条件下将抗体或其片段与聚乙二醇 (PEG)，诸如PEG的反应性酯或醛衍生物进行反应。优选的是，PEG化可以通过与反应性PEG分子(或类似的反应性水溶性聚合物)的酰化反应或烷化反应进行。在用于本文时，术语“聚乙二醇”意图包括任何形式的已经用于衍生化其它蛋白质的PEG，诸如单(C1-C10)烷氧基-或芳氧基-聚乙二醇或聚乙二醇-马来酰亚胺。在某些实施方式中，待PEG化的抗体是无糖基化的抗体。
本领域技术人员还将理解的是，本发明涵盖所述α-突触核蛋白抗体的氨基酸序列修饰。举例而言，可需要改良抗体之结合亲和力及/或其它生物学特性。α-突触核蛋白抗体之氨基酸序列变体是由向α-突触核蛋白抗体核酸中引入适当核苷酸变化或由肽合成制备。该等修饰包括（例如）α-突触核蛋白抗体氨基酸序列内之残基缺失及/或插入及/或取代。进行缺失、插入及取代之任何组合以达成最终构建体，其限制条件为该最终构建体具有所要特征。氨基酸变化亦可改变α-突触核蛋白抗体之转译后过程，诸如改变糖基化位点之数目或位置。
编码本发明抗体的核酸分子
本发明的另一方面涉及编码本发明抗体的核酸分子。核酸可以存在于完整的细胞中、存在于细胞溶胞物中、或者以部分纯化或基本纯的形式存在。当通过标准技术，包括碱/SDS处理、CsCl分带(banding)、柱层析、琼脂糖凝胶电泳和本领域众所周知的其它技术纯化除去其它细胞组分或其它污染物，例如其它细胞核酸或蛋白质时，核酸是“分离的”或“使得基本纯的”。本发明的核酸可以是例如DNA或RNA，而且可以含有或不含内含子序列。在一优选的实施方式中，核酸是 cDNA分子。
可以使用标准分子生物学技术来获得本发明的核酸。一旦获得编码VH和VL区段的DNA片段，进一步通过标准重组DNA技术操作这些DNA片段，以例如将可变区基因转变为全长抗体链基因、Fab片段基因或scFv基因。在这些操作中，将编码VL或VH的DNA片段可操作的连接至编码另一蛋白质，诸如抗体恒定区或柔性接头的另一DNA片段。术语“可操作的连接”在用于本文时意图表示连接两DNA片段从而使得这两个DNA 片段所编码的氨基酸序列保持在同一读码框中(in-frame)。
通过将编码VH的DNA可操作的连接至编码重链恒定区(CH1、CH2和 CH3)的另一DNA分子可以将编码VH区的分离的DNA转变为全长重链基因。人重链恒定区基因的序列是本领域已知的。
通过将编码VL的DNA可操作的连接至编码轻链恒定区CL的另一DNA 分子可以将编码VL区的分离的DNA转变为全长轻链基因(以及Fab轻链基因)。人轻链恒定区基因的序列是本领域已知的。
双特异性分子
本发明包含本发明的抗α-突触核蛋白抗体或其片段的双特异性分子。
本发明的抗体或其抗原结合部分可以进行衍生化或连接至另一功能性分子上，例如另一种肽或蛋白质(例如受体的另一种抗体或配体)以生成与至少两种不同结合位点或靶分子结合的双特异性分子。本发明的抗体事实上可以进行衍生化或连接至一个以上其它功能性分子以生成与两个以上不同结合位点和/或靶分子结合的多特异性分子；此类多特异性分子还意图为本文中所使用的术语“双特异性分子”所涵盖。为创建本发明的双特异性分子，可以将本发明的抗体在功能上连接(例如通过化学偶联、基因融合、非共价结合或其它方式)至一种或多种其它结合分子，诸如另一种抗体、抗体片段、肽或结合模仿物，从而产生双特异性分子。
本发明对表达载体没有特别的限制，但可以是能在包括哺乳动物细胞（例如，人、猴、兔、大鼠、仓鼠或小鼠细胞）、植物细胞、酵母细胞、昆虫细胞和细菌细胞（如大肠杆菌（E.coli））在内的真核或原核细胞内复制和/或表达多核苷酸的载体。较佳地，它可以是载体，包括至少一选择性标记，可操作地连接到合适的启动子，以致可以在宿主细胞内表达多核苷酸。例如，载体可以包括导入噬菌体、质粒、粘粒、微型染色体、病毒或反转录病毒载体的多核苷酸。
本发明中的用于导入载体的细胞包括原核细胞和真核细胞，上述细胞包含（但并不限于）细菌细胞，如大肠杆菌，链霉菌和鼠伤寒沙门氏菌；酵母细胞；真菌细胞如毕赤酵母；昆虫细胞如果蝇或夜蛾Sf9细胞；动物细胞，如中国仓鼠卵巢细胞，SP2/0，人淋巴样母细胞，COS，NSO，293T，Bowes黑素瘤细胞，HT-1080，BHK（幼仓鼠肾细胞），HEK（人胚肾细胞），PERC.6（人视网膜细胞）等；和植物细胞。在本领域中可使用本领域的技术人员已知的可用作哺乳动物宿主细胞的任何细胞。
检测产品
作为一种可选择的实施方式，本发明中的产品包括本发明所制备的抗体或其功能片段。作为另外一种可选择的实施方式，本发明的产品包括诊断组合物，所述诊断组合物包括至少一种可检测的标签，诸如可检测的部分/试剂。标签可非共价地缀合至本发明的单克隆抗体。标签还可通过共价键直接缀合至单克隆抗体。可选择地，标签可利用一种或多种连接化合物缀合至上述单克隆抗体。用于将标签缀合至单克隆抗体的技术对本领域的技术人员是公知的。作为标签的可检测的部分/试剂优选为选自由（但并不限于）酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料、放射性材料、正电子发射材料和非放射性的顺磁金属离子组成的组中的一种。合适的酶包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；合适的辅基包括抗生蛋白链菌素、抗生物素蛋白和生物素；合适的荧光物质包括伞形酮、荧光素、异硫氰酸荧光素、若丹明、二氯三嗪基胺荧光素、丹磺酰氯和藻红蛋白；合适的发光物质包括鲁米诺；合适的生物发光物质包括荧光素酶、荧光素和水母素；并且合适的放射性核素包括125I、131I、111In和99Tc。
药物
本发明中的药物包括本发明的单克隆抗体或其抗原结合部分，以及药学上可接受的载剂。药学上可接受的载剂可另外含有液体，诸如水、生理盐水、甘油和乙醇。另外，诸如湿润剂或乳化剂或pH缓冲物质的辅助物质可存在于所述组合物中。这些载剂使得药物组合物能够配制成片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊、液体、凝胶、糖浆、浆液和悬浮液，以便患者摄入。
合适的施用形式包括适用于肠胃外施用的形式，例如通过注射或输注，例如通过快速注射或连续输液、静脉内、可吸入或皮下形式。在产品用于注射或输注的情况下，其可采用在油性或水性媒介物中的悬浮液、溶液或乳液的形式并且其可含有配制试剂，诸如悬浮剂、防腐剂、稳定剂和/或分散剂。可替代地，根据本发明的抗体或其抗原结合片段可呈干燥形式，用于在使用之前用合适的无菌液体重构。还可制备适于在注射前溶解或悬浮于液体媒介物中的固体形式。
一旦配制，本发明的组合物可直接施用至受试者。因此，本文提供根据本发明的抗体或其抗原结合片段用于制造药剂的用途。
待治疗的受试者可以是动物。优选地，根据本发明的药物组合物经调整以用于向人受试者施用。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1 抗α-突触核蛋白抗体的制备
1、免疫原处理：免疫原为重组α-突触核蛋白，经SDS-PAGE鉴定蛋白纯度和分子量，经过ImmunoPlus技术处理，增强免疫原性。
2、动物免疫：选取BALB/c小鼠，常规方法免疫。经三次免疫后，用间接ELISA方法测试抗血清效价，选取效价高的小鼠进行后续实验，使用western测试抗血清对重组抗原的识别。
3、脾细胞制备：引颈处死小鼠，无菌条件下取出脾脏，置于已消毒的90~100目不锈钢网中。用注射器向脾脏内注入3 ml无血清培养液，反复抽吸数次获取细胞，再制成细胞悬液。把细胞悬液注入50ml离心管中，加10~20ml培养液，轻轻吹打数次，室温中静置5分钟。离心（800~1000转/分）计数，备用。
4、细胞融合：将小鼠骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞按1：5比例混合，离心弃去上清，并以消毒滤纸吸净多余上清。将1ml 40%的PEG溶液60秒内逐滴加入到细胞团中，同时并不断轻微转动离心管。在不断转动的离心管中，60秒内逐滴加入1ml无血清培养液。而后于5 分钟内缓慢加完20ml无血清培养基。离心（800 转/分，8 分钟），去上清，用完全培养液10ml悬浮，轻轻混匀。将细胞悬液加入96孔板内，每孔50微升。37℃ CO2培养箱中培养24小时后更换成HAT选择性培养液。
5、融合后细胞培养：融合后7~10天用HAT培养液半量换液，以后每隔2~3天半量换液一次。2~3周后出现杂交细胞集落。待集落增殖生长至1/3孔时，取培养上清用ELISA方法进行抗体检测。以重组蛋白作为抗原包被酶标板，包被抗原浓度为1μg/ml, 100μl/孔。包被缓冲液为PBS（PH=7.4）。4℃放置过夜。次日PBS洗涤3次，每次5分钟。以1% BSA封闭，每孔加入200μl。37℃恒温箱孵育2小时。弃去BSA，加入含有单克隆抗体的细胞培养上清，每孔100μl。以小鼠的阳性抗血清作为阳性对照，以空白培养上清作为阴性对照。37℃恒温箱孵育2小时。弃去一抗，洗涤液洗5次，加Peroxidase-AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG，37℃恒温箱孵育1小时。加入底物显色后，以酶标仪测定吸光值。
将检测的阳性细胞进行再一轮的克隆化培养，经验证后确定阳性细胞株，增殖后进行冻存和体外培养。
6、结果
经过三次免疫后，用间接ELISA方法对六只免疫小鼠（#4142~#4147）抗血清识别重组抗原的效价检测的结果如表1所示，结果表明重组ɑ-突触核蛋白具有较好的免疫原性，免疫小鼠后能产生较强的免疫应答反应。
表1 小鼠血清效价测定
Figure 641842DEST_PATH_IMAGE001
使用western检测免疫小鼠抗血清对重组抗原的识别，结果如图1所示，结果表明免疫小鼠抗血清对重组抗原具有较好的识别能力。
阳性细胞株经亚克隆后，得到多株稳定分泌单克隆抗体的阳性细胞株：53A2G6、22B5G6、25F5C5、34E10D8、3D4H7。杂交瘤细胞株3D4H7培养上清的ELISA检测结果如表2所示，说明杂交瘤细胞株3D4H7产生了针对重组α-突触核蛋白的抗体。
表2 杂交瘤细胞株的ELISA测定
Figure 401725DEST_PATH_IMAGE002
实施例2 单克隆抗体的纯化及测序
首先将产生单克隆抗体的培养液，应用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；再用亲和层析法进一步纯化。
1、硫酸铵溶液初步沉淀
用饱和硫酸铵溶液进行盐析。临用前取所需的量，用2mol/L NaOH调PH至7.8；将产生抗体的培养液移入烧杯中，边搅拌边滴加饱和硫酸铵溶液5ml，继续缓慢搅拌30分钟；10000rpm/min离心15分钟；弃去上清液，沉淀物用1/3饱和度硫酸铵悬浮，搅拌作用30分钟，同法离心；重复前一步1-2次；沉淀物溶于PBS（0.01mol/L PH7.2）缓冲液中。
用透析法对盐析样本进行脱盐。将透析袋于2% NaHCO3，1mmol/L EDTA溶液中煮10分钟，用蒸馏水清洗透析袋内外表面，再用蒸馏水煮透析袋10分钟，冷至室温即可使用。将盐析样品装入透析袋中，对50-100倍体积的PBS缓冲液透析（4℃）12-24小时，其间更换5次透析液，用萘氏试剂（碘化汞11.5g，碘化钾8g，加蒸馏水50ml，待溶解后，再加20% NaOH50ml）检测，直至透析外液无黄色物形成为止。
2、亲和层析法进行抗体纯化
将初步纯化的抗体溶液经过protein A/G亲和层析柱过滤，经过结合、洗脱、收集，得到高纯度的抗体。利用分光光度计测定抗体浓度。将纯化的抗体分装后在-80℃保存。
3、单克隆抗体序列的测定
取对数生长期的杂交瘤细胞3D4H7，采用Invitrogen公司的Trizol抽提总RNA，逆转录生成cDNA。然后利用特异性引物PCR分别扩增其重、轻链可变区基因。PCR产物经电泳纯化后，通过TA克隆插入载体，测序、进行序列分析。
4、结果
序列检测结果如表3所示，重链的CDR1-3以及轻链的CDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1-3和SEQ ID NO.11-13所示；重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.19所示。
表3 单克隆抗体序列
Figure 650304DEST_PATH_IMAGE003
Figure 638989DEST_PATH_IMAGE004
Figure 922203DEST_PATH_IMAGE005
实施例3 单克隆抗体的鉴定
1、以临床样本中的α-突触核蛋白作为抗原，以小鼠杂交瘤细胞3D4H7的单克隆培养上清进行检测，使用间接ELISA方法检测抗体识别抗原的能力。
2、以临床样本中的α-突触核蛋白作为抗原，以含有单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞3D4H7培养上清进行检测，使用western blot检测抗体抗原的结合能力。
3、应用双抗体夹心ELISA方法，以53A2G6为包被抗体，以如下抗体作为检测抗体：3D4H7-biotin、22B5G6-biotin、25F5C5-biotin、34E10D8-biotin、49B2G9-biotin、53A2G6-biotin、63E12C2-biotin、68E6D6-biotin、71G2F7-biotin、75G12C8-biotin、77G9C11-biotin，检测抗体对抗原的识别和捕获作用。
以2.5μg/ml的纯化抗体包被酶标板，包被液为PBS（pH=7.4），4℃放置过夜。洗涤液洗涤3次，加入重组蛋白作为抗原，抗原浓度分别为0、1、10、100ng/ml。37℃孵育1小时。洗涤3次，加入生物素标记的检测抗体，浓度为1μg/ml。37℃孵育1小时。洗涤3次，加入HRP标记的链酶亲和素，与检测抗体结合，浓度为1mg/ml，1:10,000稀释，每孔加入100μl。37℃孵育30分钟。加底物显色，酶标仪测定吸光值。
4、将单克隆抗体53A2G6与抗体3D4H7-biotin配对组合，检测纯化抗体与抗原结合的特异性，将抗原进行倍比稀释，根据抗原浓度与吸光值进行绘图。
5、结果
间接ELISA法检测结果如表4所示，抗体的吸光值>3，远远大于阴性对照值0.154，说明抗体对α-突触核蛋白有很好的亲和力。
表4 单克隆抗体的ELISA检测
Figure 88873DEST_PATH_IMAGE006
Western法检测结果如图2所示，在14KD左右的位置，出现强阳性条带，说明抗体对临床样本中的抗原有很强的结合力。
双抗夹心ELISA检测结果如表5所示，抗体53A2G6与抗体3D4H7-biotin、配对成功，随着抗体含量的增加，吸光值随之上升。抗原浓度为100ng/ml 时，吸光值>3，明显高于阴性对照。说明该抗体对抗原有很强的识别和捕获作用。
表5 纯化抗体对抗原的识别
Figure 90327DEST_PATH_IMAGE007
单克隆抗体53A2G6与抗体3D4H7-biotin配对组合检测抗原抗体的特异性结合如图3所示，随着抗原浓度升高，吸光值也随之升高，说明抗体与抗原结合具有特异性。
上述实施例的说明只是用于理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也将落入本发明权利要求的保护范围内。
序列表
<110> 北京凯祥弘康生物科技有限公司
<120> 针对α-突触核蛋白抗原的抗体及其应用
<141> 2021-11-22
<160> 38
<170> SIPOSequenceListing 1.0
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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Gly Thr Gly Ala Cys Ala Cys Ala Thr Cys Thr Ala Ala Gly Ala Ala
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Cys Cys Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Cys Cys Thr Gly Ala Gly Gly
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Cys Gly Thr Thr Cys Gly Gly Thr Gly Gly Ala Gly Gly Cys Ala Cys
305 310 315 320
Cys Ala Ala Gly Cys Thr Gly Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala
325 330 335

Claims (10)

1.分离的抗α-突触核蛋白的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于，包含：CDR1、CDR2和CDR3序列的重链可变区；及CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变区；其中，重链可变区的CDR1包含SEQ ID NO.1所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR2包含SEQID NO.2所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的CDR3包含SEQ ID NO.3所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR1包含SEQ ID NO.11所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR2包含SEQ ID NO.12所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的CDR3包含SEQ ID NO.13所示或其保守修饰形式的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于，所述重链可变区还包含：重链可变区的FR1包含SEQ ID NO.4所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR2包含SEQ ID NO.5所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR3包含SEQ ID NO.6所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；重链可变区的FR4包含SEQ ID NO.7所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR1包含SEQ ID NO.14所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR2包含SEQ ID NO.15所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR3包含SEQ ID NO.16所示或其保守修饰形式的氨基酸序列；轻链可变区的FR4包含SEQ ID NO.17所示或其保守修饰形式的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于，所述重链可变区包含与SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列至少90%同源的氨基酸序列。
4.双特异性分子，其特征在于，包含与第二功能性模块相连的权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，该第二功能性模块具有与所述单克隆抗体或其抗原结合部分不同的结合特异性。
5.如下任一项所述的物质：
1）核酸分子，其编码权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分；
2）重组表达载体，其包含1）中所述的核酸分子；
3）宿主细胞，其包含1）所述的核酸分子或2）所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的物质，其特征在于，所述重组表达载体包含与所述重链可操作地连接的第一信号肽，和/或与轻链可操作地连接的第二信号肽。
7.根据权利要求6所述的物质，其特征在于，所述第一信号肽的氨基酸序列如SEQ IDNO.8所示；所述第二信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。
8.一种检测产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分。
9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，所述产品包括利用酶联免疫吸附法、免疫荧光检测法、放射免疫法、发光免疫测定法、胶体金免疫层析法、凝集法、免疫比浊法检测抗原抗体结合的产品。
10.如下任一项所述的应用：
1）权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、权利要求4所述的双特异性分子、权利要求5-7任一项所述的物质、权利要求8或9所述的产品在检测α-突触核蛋白中的应用；
2）权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、权利要求4所述的双特异性分子、权利要求5-7任一项所述的物质、权利要求8或9所述的产品在制备诊断α-突触核蛋白病的试剂中的应用；
3）权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分、权利要求4所述的双特异性分子、权利要求5-7任一项所述的物质在制备预防和/或治疗与α-突触核蛋白病的药物中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114853887A (zh) * 2022-03-08 2022-08-05 广州乐康生物医药科技有限公司 一种特异性结合α-突触核蛋白的抗体及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109475616A (zh) * 2016-06-02 2019-03-15 麦迪穆有限责任公司 针对α-突触核蛋白的抗体及其用途
CN110114088A (zh) * 2016-12-22 2019-08-09 H.隆德贝克有限公司 用于预防τ蛋白聚集的单克隆抗α-突触核蛋白抗体
CN110172098A (zh) * 2019-05-27 2019-08-27 长春工业大学 抗α-突触核蛋白的单克隆抗体及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109475616A (zh) * 2016-06-02 2019-03-15 麦迪穆有限责任公司 针对α-突触核蛋白的抗体及其用途
CN110114088A (zh) * 2016-12-22 2019-08-09 H.隆德贝克有限公司 用于预防τ蛋白聚集的单克隆抗α-突触核蛋白抗体
CN110172098A (zh) * 2019-05-27 2019-08-27 长春工业大学 抗α-突触核蛋白的单克隆抗体及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANDREAS W等: "Development of an aggregate-selective,human-derived a-synuclein antibody BIIB054 that ameliorates disease phenotypes in Parkinson"s disease models", 《NEUROBIOLOGY OF DISEASE》 *
DORIT T等: "soluble a-synuclein-antibody complexes activates the NLRP3 inflammasome in hiPSC-derived microglia", 《PNAS》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114853887A (zh) * 2022-03-08 2022-08-05 广州乐康生物医药科技有限公司 一种特异性结合α-突触核蛋白的抗体及其应用

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