CN113912660A - 一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐、其制备方法和精制方法、以及鹅去氧胆酸制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐、其制备方法和精制方法、以及鹅去氧胆酸制备方法，涉及鹅去氧胆酸提取技术领域，以解决现有技术无法制备鹅去氧胆酸产品含量约98％的客户需求的问题，向鹅去氧胆酸溶液中加入a‑苯乙胺成盐结晶，过滤得到鹅去氧胆酸苯乙胺盐，a‑苯乙胺为消旋体或R‑(+)‑a‑苯乙胺；本发明鹅去氧胆酸与R‑(+)‑a‑苯乙胺成盐效果最好，选择性最高，鹅去氧胆酸苯乙胺盐打浆的母液中，以去除胆酸杂质为主，损失的鹅去氧胆酸最少，精制收率最高，纯度高，含量高，98％以上，批量大，适合工业化规模应用。

Description

一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐、其制备方法和精制方法、以及鹅去 氧胆酸制备方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，更具体的是涉及鹅去氧胆酸提取技术领域。
背景技术
鹅去氧胆酸(简称：CDCA)具有降低胆汁内胆固醇饱和度的作用，从而对胆囊结石病有较好的治疗效果。鹅去氧胆酸也是化学法合成熊去氧胆酸(3α，7β-二羟基-5-胆烷酸，简称：UDCA) 的重要原料；熊去氧胆酸是熊胆胆汁中的主要有效成分，对肝、胆等多种疾病有明确疗效。
鹅去氧胆酸主要从动物胆汁中提取或半合成，提取主要来源有：1、鸡、鹅胆；2、猪胆； 3、鸭胆。
申请号为CN200610046855.3的专利从猪胆汁中提取纯化鹅去氧胆酸的工业化制备方法。其过程包括：以猪胆汁提取胆红素后的母液为原料制成总胆酸，皂化调酸得鹅去氧胆酸粗品，脱色、脱脂后制备鹅去氧胆酸钡盐沉淀，碳酸钾脱钡调酸及硅胶柱纯化等步骤。该专利涉及有毒的重金属钡盐及不便大规模生产的硅胶过柱步骤。
申请号为CN201010288350.4的专利从新鲜或冷冻家禽胆汁中，利用皂化反应，得到粗胆汁酸或粗胆汁酸钙盐，再将粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物A水溶液共热，利用有机含氮化合物A来除去粗胆汁酸中的大部份亲水性杂质，得到的粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物B反应，析出沉淀，过滤，并进行脱色、精制等步骤后，可得纯度95％左右的鹅去氧胆酸。该发明步骤繁琐，精制周期长，需要成钙盐、需使用汽油除酯等缺点。
Figure BDA0003328676560000011
胆膏中含有大量杂质，鸡胆膏、鹅胆膏中鹅去氧胆酸含量就只有约26±6％。鸡胆膏、鹅胆膏中最大杂质——胆酸含量约7±2％，其他胆酸类有关杂质约1％，另外还有大量油脂、脂肪酸、色素、蛋白等非胆酸类杂质，杂质成分复杂。如上所示胆酸与鹅去氧胆酸的结构相近，选择性、低成本去除胆酸杂质是提取鹅去氧胆酸的难点之一；胆膏中杂质占比大、成分复杂，导致较难制备高含量鹅去氧胆酸。
申请号为CN201910502719.8的专利将胆膏溶于氢氧化钠水溶液，加入乙酸丁酯和双氧水，搅拌，得到脱色液；通过精准控制pH值，分液、碱水洗杂，去除部分杂质；鹅去氧胆酸洗杂液通过与仲丁胺或叔丁胺成盐结晶纯化，再解盐得到鹅去氧胆酸。该发明将鹅去氧胆酸与叔丁胺或仲丁胺成盐，能去除大量胆酸类杂质和色素杂质、油脂杂质等，鹅去氧胆酸产品含量可达到92％。但由于鹅去氧胆酸与胆酸均含有羧基，该羧基均会与该专利中保护的有机胺(叔丁胺、仲丁胺)成盐，胆酸杂质含量相对较高，不能通过成盐去除胆酸杂质，需要额外多次碱水洗涤去除胆酸杂质，且仍不能获得高含量鹅去氧胆酸。该发明得到的鹅去氧胆酸产品含量约92％，能满足部分客户的质量需求，但不能满足高含量(约98％)鹅去氧胆酸客户的需求。
发明内容
本发明的目的在于：提供一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐、其制备方法和精制方法、以及鹅去氧胆酸制备方法，以解决上述现有技术无法制备鹅去氧胆酸产品含量约98％的客户需求。
本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：向鹅去氧胆酸溶液中加入a-苯乙胺成盐结晶，过滤得到鹅去氧胆酸苯乙胺盐，a-苯乙胺为消旋体或R-(+)-a-苯乙胺。
本申请的技术方案中，针对鹅去氧胆酸结构中具有10个手性中心，空间构型复杂且独特的特点，筛选出R-(+)-a-苯乙胺，R-(+)-a-苯乙胺能与鹅去氧胆酸成盐析出结晶，过滤获得鹅去氧胆酸R-(+)-a-苯乙胺盐，滤液中能将脂肪酸、油脂、色素等杂质绝大部分去除，同时能去除部分胆酸类杂质；S-(-)-a-苯乙胺与R-(+)-a-苯乙胺化学结构极其相似，但手性碳原子空间构型相反，导致S-(-)-a-苯乙胺不能与鹅去氧胆酸成盐析出晶体由于消旋a-苯乙胺中含有50％R-(+)-a-苯乙胺，因此，a-苯乙胺也能起到成盐析晶纯化作用，鹅去氧胆酸与R-(+)-a- 苯乙胺成盐效果最好，选择性最高，鹅去氧胆酸苯乙胺盐打浆的母液中，以去除胆酸杂质为主，损失的鹅去氧胆酸最少，精制收率最高，纯度高，含量高，98％以上，批量大，适合工业化规模应用。增加鹅去氧胆酸打浆纯化次数，可相应降低胆酸杂质并提高含量。
优选的，R-(+)-a-苯乙胺与鹅去氧胆酸的物质的量比为1-4:1。
优选的，溶剂与鹅去氧胆酸的重量比为4-70:1。
优选的，鹅去氧胆酸溶液的溶剂为乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、丙醇、丁醇、水中的一种或几种。
优选的，鹅去氧胆酸与a-苯乙胺成盐反应中的温度为45-70℃。
优选的，在加入a-苯乙胺前或加入a-苯乙胺的过程中进行浓缩，将溶液浓缩至原重量 30％～70％。
一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐的制备方法制得的鹅去氧胆酸苯乙胺盐，鹅去氧胆酸苯乙胺盐的结构式如下
Figure BDA0003328676560000031
优选的，鹅去氧胆酸苯乙胺盐使用醇和水的混合液打浆精制。增加鹅去氧胆酸打浆纯化次数，可相应降低胆酸杂质并提高含量。
优选的，醇为甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、丁醇中的一种或几种。
优选的，醇与水的混合溶液中，醇与水的体积比为0.5-1.5:1。
优选的，醇与水的混合溶剂为鹅去氧胆酸铵盐的0.6～2倍重量。
一种鹅去氧胆酸的制备方法，将制备的鹅去氧胆酸苯乙胺盐与氢氧化钠水溶液混合搅拌溶解，有机溶剂萃取回收a-苯乙胺，分液，水层调酸，析出固体，过滤洗涤干燥，得到鹅去氧胆酸。
优选的，有机溶剂为乙酸丁酯或乙酸乙酯。
优选的，水层调酸前，通过浓缩去除有机溶剂残留。
优选的，水层调酸前加热至28-32℃，pH值最终调节至3.5-4.5，升温至38-48℃。
本发明的有益效果如下：
1.针对鹅去氧胆酸结构中具有10个手性中心的特点，筛选出R-(+)-a-苯乙胺，R-(+)-a- 苯乙胺能与鹅去氧胆酸成盐析出结晶，过滤获得鹅去氧胆酸R-(+)-a-苯乙胺盐，滤液中能将脂肪酸、油脂、色素等杂质绝大部分去除，同时能去除部分胆酸类杂质，鹅去氧胆酸与R-(+)-a- 苯乙胺成盐效果最好，选择性最高，鹅去氧胆酸苯乙胺盐打浆的母液中，以去除胆酸杂质为主，损失的鹅去氧胆酸最少，精制收率最高，纯度高，含量高，98％以上，批量大，适合工业化规模应用；
2.S-(-)-a-苯乙胺与R-(+)-a-苯乙胺化学结构极其相似,但S-(-)-a-苯乙胺不能与鹅去氧胆酸成盐析出晶体，由于消旋a-苯乙胺中含有50％R-(+)-a-苯乙胺，因此，a-苯乙胺也能起到成盐析晶纯化作用；
3.R-(+)-a-苯乙胺所成的盐，较CN201910502719.8中仲丁胺或叔丁胺所成的盐除杂效果更好，铵盐颜色更白，且无需引入较危险的双氧水脱色；
4.为了进一步提高鹅去氧胆酸的含量和纯度，获得含量98％的鹅去氧胆酸，本发明还开发了一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐的精制方法，将鹅去氧胆酸苯乙胺盐使用醇和水的混合液打浆精制能显著去除胆酸类杂质(如胆酸、石胆酸等杂质)，其中胆酸杂质能从约25％(HPLC 图谱中峰面积比：CA/CDCA＝25％)降低至约2％，并进一步将色素等杂质去除干净；此外，醇、水的混合溶剂中打浆的方法对鹅去氧胆酸分别与叔丁胺和仲丁胺形成的铵盐均有效。
附图说明
图1是本发明实施例6中鹅去氧胆酸乙酸丁酯萃取层HPLC图；
图2是本发明实施例6中鹅去氧胆酸苯乙胺盐粗品HPLC图；
图3本发明实施例6中CD盐二次精制品HPLC图；
图4本发明实施例6中鹅去氧胆酸成品HPLC图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
S1鹅去氧胆酸铵盐(简称CD盐)粗品的制备
反应釜中加入乙酸丁酯200kg(鸡胆膏重量2倍)，加入水50kg(鸡胆膏重量0.5倍)，搅拌下加入鸡胆膏100kg；升温至60-65℃，搅拌并调节pH至1～6，溶清物料；静置分液；水层用乙酸丁酯50kg(鸡胆膏重量0.5倍)反萃，保温50-55℃搅拌5分钟，静置分液；合并两次乙酸丁酯层，抽入水100kg，搅拌5分钟，静置分液，乙酸丁酯层(即为鹅去氧胆酸溶液)称重，取样送检，测CDCA(鹅去氧胆酸简称)和CA(胆酸简称)含量。
乙酸丁酯层加入a-苯乙胺17.5公斤，60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，抽入a-苯乙胺约12.5公斤，控制pH 8-9，a-苯乙胺加入量以pH值为准，保持温度60-65℃搅拌20-30分钟，降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌4小时，离心，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品放入双锥，保持真空度-0.08MPa以上，内温80-90℃干燥10小时左右，得干燥鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)粗品43.18kg。
S2鹅去氧胆酸铵盐精制
反应釜抽入95％(V/V)乙醇(乙醇重量为CD盐干重的0.5倍)，水(水重量为CD盐干重的0.5倍)，投入CD盐粗品43.18kg，升温至80-85℃回流搅拌1小时，降温至5-10℃，温度达到10℃后，继续搅拌4小时，离心，得CD盐一次精制品湿品。乙醇水母液去回收产品及溶剂。
CD盐一次精制品湿品用同样的精制方法再次精制，得CD盐二次精制品31.3kg(烘干)。
S3解盐制备鹅去氧胆酸
反应釜中加入2.5％氢氧化钠溶液93.9kg(CD盐二次精制品重量3倍)，搅拌下加入CD盐二次精制品31.3kg；25-30℃搅拌1小时，溶清物料，加入乙酸丁酯31.3kg(CD盐二次精制品重量1倍)，搅拌15-20分钟，静置分液，水层加入乙酸丁酯15.6kg(CD盐二次精制品重量0.5倍)，搅拌5-10分钟，静置分液；水层升温至60-90℃，浓缩水15.7kg(CD 盐二次精制品重量0.5倍)；浓缩完成后，加入水156.5kg(CD盐二次精制品重量5倍)，降温至25-30℃，缓慢加入浓盐酸6.9kg(CD盐二次精制品重量0.11倍)，待固体完全析出后，25-30℃搅拌1小时，离心，水洗涤，得CDCA粗品50.9kg，CDCA湿品干燥的CDCA 成品23.15kg，含量98.2％，水层回收套用。
该实施例中a-苯乙胺为消旋体。
对比例1
参考申请号CN201910502719.8专利的方法，
一种鹅去氧胆酸叔丁胺盐的制备方法，包括以下步骤：
S1制备脱色液
称取20g氢氧化钠溶于200g水中，加入鸡胆膏(其中胆酸含量25％)150g。升温至70℃以上，搅拌至胆膏溶解完全。待体系溶解完全，将体系降温至内温40℃。加入乙酸丁酯320ml (282g)，滴加入30％双氧水20g。滴加完毕，在温度为20～30℃条件下，搅拌3h，得脱色液。
S2制备萃取液
取S1得到的脱色液用60％硫酸调节pH至5.95～6.05，调节完毕后，在温度为20～30℃条件下搅拌0.5h。静置分液；分离水相和有机相，有机相为鹅去氧胆酸乙酸丁酯萃取液，向水相中加入乙酸丁酯80ml(70.5g)，用60％硫酸调节控制pH在6.00～6.10。调节完毕，于常温20～30℃搅拌0.5h，静置分液，得到有机层，合并两次有机层，得到鹅去氧胆酸萃取液。
S3制备洗杂液
鹅去氧胆酸萃取液加入配制的氢氧化钠溶液(0.8g溶于150g水)。常温20～30℃搅拌 0.5h。静置分液。收集上层有机层得到洗杂液。
S4制备鹅去氧胆酸乙酸丁酯提取液
将洗杂液加入配制的氢氧化钠溶液(0.5g溶于150g水中)，在常温20～30℃下搅拌0.5h，静置分液，分离有机相和水相。有机层为乙酸丁酯层，向得到的有机相中加入配制的氢氧化钠溶液(0.4g溶于150g水中)，在常温20～30℃下搅拌0.5h。静置分液，再次收集有机相得到鹅去氧胆酸乙酸丁酯提取溶液，采用HPLC检测胆酸与鹅去氧胆酸峰面积之比为1.6％。
S5成盐反应
得到的鹅去氧胆酸乙酸丁酯提取溶液，于60℃加入叔丁胺12g，搅拌1h，再降温至室温搅拌30min，过滤，滤饼用20ml乙酸丁酯淋洗。将滤饼鼓风干燥。得鹅去氧胆酸叔丁胺盐，成盐步骤摩尔收率95.1％，鹅去氧胆酸叔丁胺盐的纯度为91.1％。
解盐制备鹅去氧胆酸：将鹅去氧胆酸叔丁胺盐加入4g氢氧化钠溶于250ml水中搅拌溶清，加热至30℃用60％硫酸调节pH＝4，析出浆状固体。梯度升温内温41℃，直至静置后能快速明显分层，搅拌1h，将体系过滤用自来水洗涤至中性。将所得固体放入鼓风干燥箱中干燥，温度设定50℃。得鹅去氧胆酸，其含量92.1％。
本发明实施例1与对比文件1的优缺点如表1所示。
表1实施例1与对比例1的对比表
Figure BDA0003328676560000061
由表1可知，本发明所得产品含量更高，能满足的客户范围更广，产品附加值更高；废水量更少；主要除杂步骤批量大7倍，人工成本、设备投入成倍减少；表1中，a表示与胆膏重量比；b表示对应最终产品批量。
实施例2
S1鹅去氧胆酸铵盐(简称CD盐)粗品的制备
反应釜中加入乙酸丁酯200kg(鸡胆膏重量2倍)，加入水50kg(鸡胆膏重量0.5倍)，搅拌下加入鸡胆膏100kg。升温至60-65℃，搅拌并调节pH至5.0，溶清物料；静置分液；水层用乙酸丁酯50kg(鸡胆膏重量0.5倍)反萃，保温50-55℃搅拌5分钟，静置分液。合并两次乙酸丁酯层，抽入水100kg，搅拌5分钟，静置分液，乙酸丁酯层称重，取样送检，测CDCA(鹅去氧胆酸简称)和CA(胆酸简称)含量。
乙酸丁酯层加入12公斤叔丁胺，50-65℃搅拌1小时，降温至25-30℃，继续搅拌1小时，离心，用乙酸丁酯洗涤滤饼，得鹅去氧胆酸叔丁胺盐(CD盐)湿品44.65kg。
将CD盐湿品放入双锥，保持真空度-0.07MPa以上，内温70-90℃干燥10小时左右，得干燥CD盐39.83kg。
S2鹅去氧胆酸铵盐精制
反应釜抽入95％(V/V)乙醇(乙醇重量为CD盐干重的0.5倍)，水(水重量为CD盐干重的0.5倍)，投入CD盐粗品39.83kg，升温至80-85℃回流搅拌1小时，降温至5-10℃，温度达到10℃后，继续搅拌4小时，离心。得CD盐一次精制品29.57kg湿品(折干约为27.09)。乙醇水母液去回收产品及溶剂。
S3解盐制备鹅去氧胆酸
反应釜中加入2.5％氢氧化钠溶液81.27kg(CD盐一次精制品重量3倍)，搅拌下加入 CD盐一次精制品27.09kg。25-30℃搅拌1小时，溶清物料，加入乙酸丁酯27.09kg(CD盐一次精制品重量1倍)，搅拌15-20分钟，静置分液，水层加入乙酸丁酯13.55kg(CD盐一次精制品重量0.5倍)，搅拌5-10分钟，静置分液。水层升温至60-90℃，浓缩水13.55kg (CD盐一次精制品重量0.5倍)。浓缩完成后，加入水156.5kg(CD盐一次精制品重量5 倍)，降温至25-30℃，缓慢加入50％硫酸4.33kg(CD盐一次精制品重量0.16倍)，至 pH2-3,再升温至42～44℃搅拌1小时，离心，水洗涤，干燥得CDCA成品22.10kg，含量98.1％，水层回收套用。
实施例3
反应釜中加入乙酸丁酯200kg(鸡胆膏重量2倍)，加入水50kg(鸡胆膏重量0.5倍)，搅拌下加入鸡胆膏100kg。升温至60-65℃，搅拌并调节pH至1～6，溶清物料；静置分液；水层用乙酸丁酯50kg(鸡胆膏重量0.5倍)反萃，保温50-55℃搅拌5分钟，静置分液。合并两次乙酸丁酯层，抽入水100kg，搅拌5分钟，静置分液，得乙酸丁酯层A。
部分成盐有机碱筛选实验如下：
a-苯乙胺(R-(+)-a-苯乙胺：S-(+)-a-苯乙胺＝1:1的消旋体)：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，加入a-苯乙胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌2小时，过滤，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品80-90℃减压干燥至恒重，得类白色鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)43.10kg。
R-(+)-a-苯乙胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入R-(+)-a-苯乙胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌2小时，过滤，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品80-90℃减压干燥至恒重，得类白色鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)43.05kg。
S-(-)-a-苯乙胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入S-(-)-a-苯乙胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌2小时，无固体析出。
三乙胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入三乙胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌 2小时，无固体析出。
二乙胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入二乙胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌 2小时，无固体析出。
正丁胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入正丁胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌 2小时，析出的固体为胶粘状，无法过滤。
叔丁胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入叔丁胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌 2小时，过滤，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品80-90℃减压干燥至恒重，得棕色鹅去氧胆酸叔丁胺盐39.63kg。
仲丁胺：乙酸丁酯层A 60-90℃浓缩出乙酸丁酯140升，调整温度至60-65℃，再加入仲丁胺至pH达到9。保温搅拌20-30分钟，再降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌 2小时，过滤，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品80-90℃减压干燥至恒重，得棕色鹅去氧胆酸仲丁胺盐38.34kg。
有机碱成盐实验结果统计如下表2，R-(+)-a-苯乙胺、叔丁胺、仲丁胺能与鹅去氧胆酸成盐析晶，其中R-(+)-a-苯乙胺、叔丁胺析晶收率高，R-(+)-a-苯乙胺与鹅去氧胆酸成盐得到的产品颜色更好。由于a-苯乙胺消旋体中含有50％R-(+)-a-苯乙胺，a-苯乙胺也能起到成盐析晶纯化作用。
表2有机碱成盐结果统计表
Figure BDA0003328676560000081
Figure BDA0003328676560000091
实施例4
S1鹅去氧胆酸铵盐(简称CD盐)粗品的制备
反应釜中加入乙酸乙酯200kg(鸡胆膏重量2倍)，加入水50kg(鸡胆膏重量0.5倍)，搅拌下加入鸡胆膏100kg；升温至60-65℃，搅拌并调节pH至1～6，溶清物料；静置分液；水层用乙酸乙酯100kg(鸡胆膏重量0.5倍)反萃，保温50-55℃搅拌5分钟，静置分液；合并两次乙酸乙酯层，抽入水100kg，搅拌5分钟，静置分液，乙酸乙酯层(即为鹅去氧胆酸溶液)称重，取样送检，测CDCA(鹅去氧胆酸简称)和CA(胆酸简称)含量。
乙酸乙酯层加入R-(+)-a-苯乙胺9.0公斤，50-60℃浓缩出乙酸乙酯210升，调整温度至 50-60℃，抽入R-(+)-a-苯乙胺约6.5公斤，保持温度50-60℃搅拌20-30分钟，降温室温，继续搅拌4小时，离心，用乙酸乙酯洗涤滤饼，湿品放入双锥，保持真空度-0.08MPa以上，内温80-90℃干燥10小时左右，得干燥鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)粗品42.30kg。
S2鹅去氧胆酸铵盐精制
反应釜抽入95％(V/V)乙醇(乙醇重量为CD盐干重的0.5倍)，水(水重量为CD盐干重的0.5倍)，投入CD盐粗品42.30kg，升温至80-85℃回流搅拌1小时，降温至5-10℃，温度达到10℃后，继续搅拌4小时，离心，得CD盐一次精制品湿品。乙醇水母液去回收产品及溶剂。
CD盐一次精制品湿品用同样的精制方法再次精制，得CD盐二次精制品30.68kg(烘干)。
S3解盐制备鹅去氧胆酸
反应釜中加入2.5％氢氧化钠溶液92.04kg(CD盐二次精制品重量3倍)，搅拌下加入 CD盐二次精制品30.68kg；25-30℃搅拌1小时，溶清物料，加入乙酸乙酯31.3kg(CD盐二次精制品重量1倍)，搅拌15-20分钟，静置分液，水层加入乙酸乙酯15.6kg(CD盐二次精制品重量0.5倍)，搅拌5-10分钟，静置分液；水层升温至60-90℃，浓缩水15.7kg(CD 盐二次精制品重量0.5倍)；浓缩完成后，加入水156.5kg(CD盐二次精制品重量5倍)，降温至25-30℃，缓慢加入浓盐酸6.9kg(CD盐二次精制品重量0.11倍)，待固体完全析出后，25-30℃搅拌1小时，离心，水洗涤，得CDCA粗品49.9kg，CDCA湿品干燥的CDCA 成品22.69kg，含量98.2％。
实施例5
反应釜中加入50kg乙醇溶液(乙醇：水＝6:4)，再加入28kg市售90％含量的鹅去氧胆酸，搅拌加热至70℃，加入a-苯乙胺30公斤，搅拌1小时，降温至5-10℃，温度达到 10℃后，继续搅拌4小时，离心，得CD盐精制品湿品(折干29.37kg)。乙醇水母液去回收产品及溶剂。
反应釜中加入2.5％氢氧化钠溶液90kg，搅拌下加入CD盐精制品；25-30℃搅拌1小时，溶清物料，加入乙酸丁酯30kg，搅拌15-20分钟，静置分液，水层加入乙酸丁酯1kg，搅拌5-10分钟，静置分液；水层升温至60-90℃，浓缩水16kg；浓缩完成后，加入水150kg，降温至25-30℃，缓慢加入20％硫酸调节pH至3～4，待固体完全析出后，25-30℃搅拌1 小时，离心，水洗涤，CDCA湿品干燥的CDCA成品21.72kg，含量98.8％。
实施例6
如图1到4所示，S1鹅去氧胆酸铵盐(简称CD盐)粗品的制备
反应釜中加入乙酸丁酯200kg(鸡胆膏重量2倍)，加入水50kg(鸡胆膏重量0.5倍)，搅拌下加入鸡胆膏100kg。升温至60-65℃，搅拌并调节pH至2，溶清物料；静置分液；水层用乙酸丁酯100kg(鸡胆膏重量1倍)反萃，保温50-55℃搅拌5分钟，静置分液。合并两次乙酸丁酯层，抽入水100kg，搅拌5分钟，静置分液，得鹅去氧胆酸乙酸丁酯萃取层，取样HPLC检测(示差检测器)，HPLC检测结果见图1和表3，胆酸峰面积/鹅去氧胆酸峰面积＝25.1％。
鹅去氧胆酸乙酸丁酯萃取层加入a-苯乙胺17.5公斤，60-90℃浓缩出乙酸丁酯190升，调整温度至60-65℃，抽入a-苯乙胺约12.5公斤，控制pH 8-9，a-苯乙胺加入量以pH值为准，保持温度60-65℃搅拌20-30分钟，降温至25-30℃，温度达到30℃后，继续搅拌4 小时，离心，用乙酸丁酯洗涤滤饼，湿品放入双锥，保持真空度-0.08MPa以上，内温80-90℃干燥10小时左右，得干燥鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)粗品43.2kg，取样HPLC检测(示差检测器)，HPLC检测结果见图2和表4，胆酸峰面积/鹅去氧胆酸峰面积＝23.7％。
S2鹅去氧胆酸铵盐精制
反应釜抽入35％(V乙醇/V水)乙醇水溶液35kg，投入CD盐粗品43.2kg，升温至80-85℃回流搅拌0.5小时，降温至5-10℃，温度达到5℃后，继续搅拌4小时，离心。得CD盐一次精制品湿品。乙醇水母液去回收产品及溶剂。
CD盐一次精制品湿品用同样的精制方法精制两次，得CD盐二次精制品27.29kg(烘干)，取样HPLC检测(示差检测器)，HPLC检测结果见图3和表5，胆酸峰面积/鹅去氧胆酸峰面积＝0.86％。
S3解盐制备鹅去氧胆酸
反应釜中加入2.5％氢氧化钠溶液95.1kg，搅拌下加入CD盐二次精制品31.7kg。25-30℃搅拌1小时，溶清物料，加入乙酸丁酯31.7kg，搅拌15-20分钟，静置分液，水层加入乙酸丁酯15.9kg，搅拌5-10分钟，静置分液。水层升温至60-90℃，浓缩水15.9kg，浓缩完成后，加入水158.5kg，降温至25-30℃，缓慢加入50％硫酸至pH4.0，待固体完全析出后，25-30℃搅拌1小时，离心，水洗涤，得CDCA粗品51.9kg，CDCA湿品干燥的CDCA成品20.25kg，取样HPLC检测(示差检测器)，HPLC检测结果见图4和表6，胆酸峰面积/鹅去氧胆酸峰面积＝0.21％，含量99％。
表3为图1鹅去氧胆酸乙酸丁酯萃取层图对应的峰表
Figure BDA0003328676560000111
表4为图2鹅去氧胆酸苯乙胺盐(CD盐)粗品图对应的峰表
Figure BDA0003328676560000112
表5为图3 CD盐二次精制品图对应的峰表
Figure BDA0003328676560000113
Figure BDA0003328676560000121
表6为图4鹅去氧胆酸成品图对应的峰表
Figure BDA0003328676560000122
该实施例中a-苯乙胺为消旋体。

Claims (10)

1.一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐的制备方法，其特征在：向鹅去氧胆酸溶液中加入a-苯乙胺成盐结晶，过滤得到鹅去氧胆酸苯乙胺盐，a-苯乙胺为消旋体或R-(+)-a-苯乙胺。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：R-(+)-a-苯乙胺与鹅去氧胆酸的物质的量比为1-4:1。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：溶剂与鹅去氧胆酸的重量比为4-70:1。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：鹅去氧胆酸溶液的溶剂为乙酸丁酯、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、丙醇、丁醇、水中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：鹅去氧胆酸与a-苯乙胺成盐反应中的温度为45-70℃。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在加入a-苯乙胺前或加入a-苯乙胺的过程中进行浓缩，将溶液浓缩至原重量30％～70％。
7.如权利要求1-6任一项所述的一种鹅去氧胆酸苯乙胺盐的制备方法制得的鹅去氧胆酸苯乙胺盐，鹅去氧胆酸苯乙胺盐的结构式如下
Figure FDA0003328676550000011
8.根据权利要求7所述的鹅去氧胆酸苯乙胺盐的精制方法，其特征在：鹅去氧胆酸苯乙胺盐使用醇和水的混合液打浆精制。
9.根据权利要求8所述的精制方法，其特征在于：醇与水的混合溶剂为鹅去氧胆酸铵盐的0.6～2倍重量。
10.一种鹅去氧胆酸的制备方法，其特征在于：将权利要求7制备的鹅去氧胆酸苯乙胺盐与氢氧化钠水溶液混合搅拌溶解，有机溶剂萃取回收a-苯乙胺，分液，水层调酸，析出固体，过滤洗涤干燥，得到鹅去氧胆酸。
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