CN113875464A - 一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，先施用EM菌微生物肥，使八角树有一定的自身免疫力，然后将抗菌液输入八角树的导管和/或喷施到八角树上，待八角炭疽病病原菌被杀灭后，再施用EM菌微生物肥。本发明的抗菌液可用作活的植物的系统性细菌感染的治疗剂，具体地针对革兰氏阴性菌，且更具体地针对炭疽病的病原菌如半知菌类孢目刺盘孢、黑链格孢杆菌、哈锐炭疽菌等，具有强穿透力、杀菌谱广、强抗菌力等特点。富含EM益生菌的有机肥，形成优势菌群，通过排斥等作用占据病原菌原空间位置，二者协同作用，可对八角炭疽病进行有效防治，保障我国八角产业的可持续发展，具有良好的社会效益和经济效益。

Description

一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法
技术领域
本发明涉及植物炭疽病防治技术领域，更具体的涉及一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法。
背景技术
八角又称八角茴香、大茴香等，具有很高的经济价值，用途广泛，是重要的香料和用材树种。目前，我国的八角种植地主要分布在南部沿海地区，共有18个省、直辖市、自治区的650多个县种植八角。
八角炭疽病是一种在八角茴香生产上毁灭性的病害，在广西普遍发生，该疾病是限制该地区八角茴香生产的主要限制因素之一，主要为害叶片和果实，引起叶片早落，影响果实产量和质量。幼苗受害可以致死。随着大面积连片的种植及不适当、不科学的管护措施，很多八角林都有炭疽病发生危害，情况比较严重。症状为病叶上初产生暗褐色小病斑，多发生在叶尖和叶缘。目前八角炭疽病的防治仍然是一项世界性难题。
八角炭疽病为潜伏侵染性病害。病菌以菌丝体和分生孢子在叶、果等病部内越冬。八角炭疽病有很强的传染性，不仅在八角林间传播，昆虫、风和雨水都可以传播，对八角的杀伤力很大。在八角栽培区均有发生，以高海拔地区及湿度大的林分发生严重。当年新叶3月初开始萌生，4-5月即可受到炭疽菌侵染。一般要到9-10月，随着叶片成熟老化才表现症状。往往林木在夏季生长正常，较少发现病斑，至秋季逐渐出现病害症状，后期感病植株的叶片会大量脱落，甚至全部落光，植株失去光合作用的能力，树上的花、小果也纷纷脱落，严重时全树叶片会在几天内全部落光，或一年多次连续落叶，以致植株枯死，可见八角炭疽病严重影响了八角产业的健康、可持续发展。
目前，八角炭疽病已在我国多个省、县不同程度的发生，经济损失达上亿元。市面上报道的八角炭疽病的防治方法虽然有一定效果，但仍难以达到彻底治愈八角炭疽病的效果。八角炭疽病在广西乃至全国各八角种植区的发生面积及范围逐年扩大，病菌逐年累积，病害逐年加重，所以市场迫切需要一种新技术去挽救八角产业，保障我国八角产业的可持续发展。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1)取纳米抗菌剂，加入1000-3000倍液的纯水，分散均匀后加入纳米抗菌剂质量0.015-0.05％的渗透剂以及1-5％的酶制剂，分散均匀，得到抗菌液；
(2)将上述抗菌液输入八角树的导管和/或喷施到八角树上；
(3)在抗菌液使用前和/或后，向八角树施用EM菌微生物肥，施肥时间与抗菌液使用时间间隔1-2个月。
上述纳米抗菌剂来源于“ZL201810184321.X，一种季铵盐-N-卤胺型纳米抗菌纤维的制备方法及应用”中的纳米抗菌成分，或者来源于“ZL201710391379.7，一种树棉抗菌纤维的制备方法”中的树棉抗菌成分或通过该成分进行改进的高分子季铵盐型抗菌成分。
优选地，所述纳米抗菌剂的粒径为50-200nm。
优选地，所述渗透剂为现有技术中任意一种农用渗透剂，以有机硅渗透剂为佳。
优选地，所述酶制剂为淀粉水解酶和/或蛋白水解酶。
优选地，步骤(3)中，在每年的3-11月使用1-2次抗菌液。
优选地，所述抗菌液的单次使用量按照植株的胸径计算，胸径5-10cm的植株使用50-100mL，胸径10-20cm的植株使用100-150mL，胸径20-30cm的植株使用150-200mL，胸径40cm以上则最少使用250mL。
优选地，所述EM菌微生物肥为液肥或固肥，该EM菌微生物肥内含有假丝酵母属、毛壳菌属、黑曲霉、芽孢杆菌属、酵母菌中的任意一种或一种以上的混合，其中芽孢杆菌属中包括蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、耐冷嗜冷芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌。
优选地，所述液肥形态的EM菌微生物肥由微生物菌剂原液加入其300-800体积的水稀释后得到。
优选地，所述固肥形态的EM菌微生物肥由微生物菌剂原液接种到任意一种有机底肥中，发酵7-40天后得到，微生物菌剂原液和有机底肥的质量比为1:500-1000。
优选地，所述微生物菌剂原液中活性菌含量不小于2亿/克。
本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
1、本发明通过利用具有抗菌性能的纳米抗菌材料，与酶制剂、渗透剂共同制备得到抗菌液，采用的纳米抗菌成分不含有其他任何抗菌剂，通过改性获得抗菌基团，避免天然生物抗菌材料容易被酶降解、或耐热性差等弊端。抗菌液通过树干滴灌或喷施，抗菌成分从导管或筛管进入患炭疽病的八角树内，利用纳米材料的强穿透性，穿透植株树皮系统进入八角韧皮部(普通农药即使通过打吊瓶输入到树干中，也难以达到韧皮部，且留有农药残留，而纳米材料无毒，可生物降解，对环境无污染)与炭疽病病原菌如半知菌类孢目刺盘孢、黑链格孢杆菌、哈锐炭疽菌等发生作用，使八角炭疽病病原菌的细胞壁、细胞膜破裂、死亡，有效全面清除炭疽病的病原菌，疏通导管和筛管，增强植株免疫力。
2、其次，本发明通过科学的筛选、适当的量比关系和合理的发酵工艺，把好氧微生物、厌氧微生物、兼性微生物有机地结合起来，形成一个稳定的多功能微生态系统。利用优选法得到的EM益生菌制备得到EM菌微生物肥，使用该生物肥后，生物肥中原有微生物会产生代谢产物，对其他有害菌株有拮抗作用，抑制其他菌株的生长繁殖，因此将EM活性菌施用在植物上，降低植物病害的发生率，降低植株的死亡率，使作物健康生长。
3、本发明通过使用含有纳米抗菌剂的抗菌液以及富含EM益生菌的有机肥，一方面抗菌液以生物材料为载体，由酶制剂、渗透剂、纳米抗菌剂组装而成，可用作活的植物的系统性细菌感染的治疗剂，具体地针对革兰氏阴性菌，且更具体地针对炭疽病的病原菌如半知菌类孢目刺盘孢、黑链格孢杆菌、哈锐炭疽菌等，具有强穿透力、杀菌谱广、强抗菌力等特点。另一方面富含EM益生菌的有机肥，形成优势菌群，通过排斥等作用占据病原菌原空间位置，二者协同作用，可对八角炭疽病进行有效防治。
综上所述，本发明的防治方法中可通过给八角树干输液，将纳米抗菌剂输入八角树干，与炭疽病病原菌发生作用，使八角炭疽病病原菌的细胞壁和细胞膜破裂、死亡，同时疏通导管和筛管，对人体无害，无农残，解决传统药物对韧皮部给药难难题。且经过测试，本发明的抗菌液室内测试杀虫率在95％以上，田间测试的整体防虫效率亦高于化学农药的防虫效率。
使用的抗菌液性能稳定、作用时间长，可持续有效杀害炭疽病病原菌，持久性强。对革兰氏阴性菌等多种细菌表现抗菌性，杀虫广谱。且采用的纳米抗菌剂由动、植物本身提取出的材料为载体，组装的酶为蛋白质，安全、无毒、可降解，EM菌为益生菌对人及哺乳动物无毒无害，安全性高。生物肥具有优势菌群，有助于降解植物体内的碳水化合物，并能产生维生素、微量元素等营养物质，还能完善微生物群，提高植物的抗虫能力，节省八角等植物对肥料多次施肥的劳动力。本发明的防治方法生产成本和喷施成本低于农药，一般为了预防八角炭疽病，八角树每年需喷洒1-3次农药，喷施量大，喷施范围需大面积覆盖，本发明每次喷洒费用100-200元/亩，且不需要再喷施其他药物，极大降低种植成本。本发明的防治方法不仅大大减少农民的经济损失，而且挽救了八角产业，保障我国八角产业的可持续发展，具有良好的社会效益和经济效益。
附图说明
图1为本发明的抗菌液在不同浓度梯度下对革兰氏阴性菌的抑菌效果。
图2为本发明的抗菌液对八角炭疽病病原菌的抗菌测试效果。
图3、图4为本发明的防治方法对八角炭疽病治疗前后的效果对比。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。
实施例1
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为2亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入500倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入5倍体积的水稀释，再加入等量的糖蜜，混合均匀后混入微生物菌剂原液500倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在40％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆2次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为0.2亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201810184321.X的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为50nm，加入1000倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.05％的农用有机硅渗透剂以及5％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的1-2月份，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施300mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在3月份以后，待八角树的春梢生长，树液流动，用4.5-5mm钻头在树干(距地面50cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树2个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行。
实施例2
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为2.8亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入300倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入10倍体积的水稀释，再加入等量的红糖，混合均匀后混入微生物菌剂原液1000倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在45％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆3次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为0.4亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201810184321.X的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为100nm，加入1500倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.03％的农用有机硅渗透剂以及1％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的1-2月份，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施320mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在3月份以后，待八角树的春梢生长，树液流动，用4.5-5mm钻头在树干(距地面40cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树2个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行。
实施例3
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为3.5亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入400倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入7倍体积的水稀释，再加入等量的红糖，混合均匀后混入微生物菌剂原液800倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在50％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆4次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为0.5亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201810184321.X的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为120nm，加入2000倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.02％的农用有机硅渗透剂、2％的淀粉水解酶以及2％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的2月份，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施340mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在5月份以后，用4.5-5mm钻头在树干(距地面30cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树1个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行；
(5)在步骤(4)实施30-60天后重复步骤(3)，将抗菌液灌入八角树，2次灌入的量相等，然后经过至少30天后可重复步骤(4)。
实施例4
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为3.7亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入600倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入8倍体积的水稀释，再加入等量的糖蜜，混合均匀后混入微生物菌剂原液700倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在50％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆5次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为0.7亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201710391379.7的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为150nm，加入2500倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.03％的农用有机硅渗透剂、1.5％的淀粉水解酶以及1.5％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的2月份，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施360mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在4月份以后，用4.5-5mm钻头在树干(距地面20cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树1个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行。
实施例5
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为4.0亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入700倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入6倍体积的水稀释，再加入等量的糖蜜，混合均匀后混入微生物菌剂原液600倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在45％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆4次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为0.8亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201710391379.7的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为180nm，加入2700倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.02％的农用有机硅渗透剂、1％的淀粉水解酶以及1％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的3月份，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施380mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在5月份以后，用4.5-5mm钻头在树干(距地面50cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树1个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行；
(5)在步骤(4)实施30-60天后重复步骤(3)，将抗菌液灌入八角树，2次灌入的量相等，然后经过至少30天后可重复步骤(4)。
实施例6
本实施例提供一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，包括如下步骤：
(1-1)取EM菌微生物制剂，按照常规方法进行活化、扩繁、浓缩后，得到活菌数量为4.0亿/克的微生物菌剂原液；
(1-2)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入800倍体积的水稀释得到EM菌微生物液肥；
(1-3)取步骤(1-1)的微生物菌剂原液，加入7倍体积的水稀释，再加入等量的糖蜜，混合均匀后混入微生物菌剂原液500倍质量的有机底肥中，充分搅拌后控制物料水分在40％，堆肥，料堆中心温度达50℃后每天翻堆1次，中心温度达65℃后每天翻堆3次，堆肥至料堆完全腐熟(料堆表面均布白色菌丝)后，调节水分，得到EM菌微生物固态肥，该固态肥中有效活菌数为1.0亿/克且水分不大于30％；由于不同季节环境温度有差异，不同季节所需的发酵时间各有不同，因此在本步骤中，控制堆肥总时间在7-40天范围内；
(1-4)取专利号为ZL201710391379.7的纳米抗菌成分，粉碎至粒径为200nm，加入3000倍液的水，分散均匀后加入纳米抗菌成分质量0.015％的农用有机硅渗透剂、1％的淀粉水解酶以及2％的淀粉水解酶，分散均匀，得到抗菌液；
(2)在每年的2月下旬至3月上旬中某一天，向八角树喷施步骤(1-2)的EM菌微生物液肥，均匀喷洒于八角树干、树叶两面以及果实上，喷施量以微生物菌剂原液计算，每亩林地喷施400mL微生物菌剂原液，使八角树有一定的自身免疫力；
(3)在4月份以后，用4.5-5mm钻头在树干(距地面50cm处)上钻孔，孔径与注射器针头相匹配，孔深3-7cm、孔向下与树干呈45°夹角，拔出钻头，掏尽孔内木屑，将步骤(1-4)的抗菌液灌入养护滴灌袋中，再将专用注射针插入小孔，接好输液管使抗菌液缓慢流入树干，滴完后关闭开关，拔出针头，树干的孔口用黄泥或棉团堵塞，以防药液蒸发和孔内感染，下次再灌入抗菌液时，可掏出孔内黄泥或拔出棉团，撬出新孔口，再次使用；
(4)在抗菌液灌入八角树1个月后，向八角种植园区施用步骤(1-3)的EM菌微生物固态肥，施用量与施用方法按照八角树常规种植管理进行；
(5)在步骤(4)实施30-60天后重复步骤(3)，将抗菌液灌入八角树，2次灌入的量相等，然后经过至少30天后可重复步骤(4)。
在上述所有实施例中，所用到的农用有机硅渗透剂/有机底肥均为目前市面上销售的任意一种农用有机硅渗透剂/有机底肥。所述EM菌微生物制剂则为采用常规方法获得的粉状的微生物制剂，该制剂含有假丝酵母属、毛壳菌属、黑曲霉、芽孢杆菌属、酵母菌等，其中芽孢杆菌属中包括蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、耐冷嗜冷芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌。
在使用抗菌液时，抗菌液的单次使用量依据八角树的大小而定，胸径5-10cm的八角树使用50-100mL，胸径10-20cm的八角树使用100-150mL，胸径20-30cm的八角树使用150-200mL，胸径40cm以上则使用250-500mL，若炭疽病病情较重，则根据实际情况施用相应数值范围中的较大或最大值。
实施例中其余未详尽描述之处均与现有技术相同或可采用现有技术加以实现。
此外，本发明提到的EM菌微生物肥(包括液肥和固态肥)除了可用于八角树之外，亦可用于其他的农作物，作物苗期或小株作物，每亩每次用100-200mL微生物菌剂原液，大株作物如果树等，每亩每次用300-400mL微生物菌剂原液。生长期短的如叶菜类作物，7-10天喷洒一次，生长期长的如粮食、果树、瓜菜等，15-20天喷洒一次。
不同浓度抗菌液抗菌试验数据分析
为测试本发明抗菌液中的纳米抗菌剂在不同浓度下的抗菌性能，申请人设计5个浓度梯度的纳米抗菌剂分散液(纳米抗菌剂选自上述的季铵盐-N-卤胺型纳米抗菌纤维)，以金黄色葡萄球菌为试验对象，测试金黄色葡萄球菌在600nm处的吸收变化曲线。结果见表1和图1。
表1金黄色葡萄球菌在600nm处吸收变化情况
Figure BDA0003282173480000111
Figure BDA0003282173480000121
由表1和图1可以看出，在C1、C2、C3、C4、C5等5个浓度下的纳米抗菌剂分散液对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌都具有抑菌抗菌性能，随着纳米抗菌剂浓度的增加，吸光度值整体呈现下降趋势；在同一浓度下抗菌效果也随着试验时间的增加而增加，吸光度值呈整体下降趋势。说明随着纳米抗菌剂浓度的增大和抗菌时间增加，抗菌性能越优异。(C＝0.0018mg/L，C2＝0.0036mg/L，C3＝0.0054mg/L，C4＝0.0065mg/L，C5＝0.009mg/L)
八角炭疽病病原菌抗菌测试
为测试本发明的抗菌液对八角炭疽病病原菌的抗菌效果，申请人采用实施例2的抗菌液对八角炭疽病病原菌进行抗菌效果测试，结果见图2。由图可见，图2中左部的培养皿在加入抗菌液前，菌落聚集明显，在培养皿中加入实施例2的抗菌液并培养一段时间后，培养皿变化情况结果如图2右部所示，培养皿内的菌落几乎消失，仅在培养皿边缘残余部分病原菌且生长情况差，说明加入的抗菌液对八角炭疽病病原菌有显著的抗菌抑菌作用。
田间试验
申请人采用实施例1的防治方法对某一八角园林内患有炭疽病的八角树进行吊瓶输液，治疗前后对比见图3和图4。由图可见，治理后受感染八角树转绿，果实正常，落叶落果现象明显减少。检测植株无淀粉堆积现象，表明本发明的防治方法对治疗八角炭疽病有显著效果。并且采用EM益生菌有机肥喷施八角树，在试验期间该园林无新增病株，证明本发明的防治效果极佳。本申请人经过面积为100亩的八角种植园区内的田间试验，统计试验结果表明95％以上的八角树由近五年的绝收转变为每株年产400kg以上，说明本发明的防治方法利用纳米抗菌剂与EM菌微生物肥协同防治八角炭疽病，不仅可以有效根治八角炭疽病，而且可以改善八角树生长情况，促进八角树增加产量，保障我国八角产业的可持续发展，具有良好的社会效益和经济效益。

Claims (10)

1.一种利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)向八角树施用EM菌微生物肥，使八角树有一定的自身免疫力；
(2)取纳米抗菌剂，加入1000-3000倍液的纯水，分散均匀后加入纳米抗菌剂质量0.015-0.05％的渗透剂以及1-5％的酶制剂，分散均匀，得到抗菌液；
(3)将上述抗菌液输入八角树的导管和/或喷施到八角树上；
(4)在抗菌液使用前和/或后，向八角树施用EM菌微生物肥，施肥时间与抗菌液使用时间间隔1-2个月。
2.根据权利要求1所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述纳米抗菌剂的粒径为50-200nm。
3.根据权利要求1所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述渗透剂为农用有机硅渗透剂或其他任意一种类型的农用渗透剂。
4.根据权利要求1所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述酶制剂为淀粉水解酶和/或蛋白水解酶。
5.根据权利要求1所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，步骤(3)中，在每年的3-11月使用1-2次抗菌液。
6.根据权利要求5所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述抗菌液的单次使用量按照植株的胸径计算，胸径5-10cm的植株使用50-100mL，胸径10-20cm的植株使用100-150mL，胸径20-30cm的植株使用150-200mL，胸径40cm以上则最少使用250mL。
7.根据权利要求1所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述EM菌微生物肥为液肥或固肥，该EM菌微生物肥内含有假丝酵母属、毛壳菌属、黑曲霉、芽孢杆菌属、酵母菌中的任意一种或一种以上的混合，其中芽孢杆菌属中包括蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、耐冷嗜冷芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌。
8.根据权利要求7所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述液肥形态的EM菌微生物肥由微生物菌剂原液加入其300-800体积的水稀释后得到。
9.根据权利要求7所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述固肥形态的EM菌微生物肥由微生物菌剂原液接种到任意一种有机底肥中，发酵7-40天后得到，微生物菌剂原液和有机底肥的质量比为1:500-1000。
10.根据权利要求8或9所述的利用纳米抗菌剂联合生物防治八角炭疽病的方法，其特征在于，所述微生物菌剂原液中活性菌含量不小于2亿/克。
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