CN113874383A - 具有抗炎活性的寡核苷酸 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种具有抗炎活性的寡核苷酸，以及一种包含该寡核苷酸的用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物。

Description

具有抗炎活性的寡核苷酸
技术领域
本发明涉及一种合成寡核苷酸以及包含该合成寡核苷酸的用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，该合成寡核苷酸具有抗炎活性并且可以减轻由炎症刺激引起的细胞毒性。
背景技术
炎症是人体对抗感染或组织损伤的一种初始防御机制，并且是这样的生物防御机制中的一种：当活体组织受到外部刺激时，通过清除有害因素以及使损伤部位恢复正常，来意图达到局部效应。各种介质在从炎症开始到炎症消退的一系列过程中调节炎症反应。一般来说，通过称为消退(Resolution)的生理防御，可使急性炎症引起的初始组织损伤正常化。然而，如果炎症持续，则引起组织损伤和构成组织的细胞的功能丧失。
炎症的原因包括：物理因素，例如，外伤、冻伤、烧伤、辐射；化学因素，如化学品，例如，酸；和免疫因素，例如抗体反应。此外，炎症由血管或荷尔蒙失调引起。受到外部刺激而损伤的细胞会分泌各种生物介质，例如，促炎细胞因子和趋化因子、白细胞介素和干扰素，这导致血管舒张和通透性增加。作为结果，抗体、补体、血浆和诸如吞噬细胞的免疫细胞涌向炎症部位。
当作为人体初始防御机制的炎症反应变得过度时，不仅病变组织中的细胞被破坏，而且正常组织中的细胞也被破坏。因此，当大量嘌呤基核苷(例如三磷酸腺苷(ATP)、三磷酸鸟苷(GTP)、脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)形式的腺苷和鸟苷)被释放到细胞中时，它们通过降解炎症化免疫细胞中大量存在的酶，例如核苷酸酶、CD39和CD73，分别分解为腺苷和鸟苷，并且腺苷和鸟苷直接作为对炎症化免疫细胞的负反馈来调节过度炎症反应。然而，在炎症反应严重的情况下，如果腺苷和鸟苷的反馈过程不能正常工作，就会由于过度炎症反应而继续产生副作用，例如疼痛和败血性休克。
去除炎症源并减少生物反应和症状以解决这种炎症的药物被称为抗炎剂。迄今为止，已被用于抗炎目的的物质包括：非甾体，例如布洛芬(ibuprofen)和吲哚美辛(indomethacin)；和甾体，例如地塞米松(dexamethasone)。这些物质表现出快速的抗炎作用，但当停止使用这些物质时症状会恶化。尤其是，甾体不能被长期使用，因为它们存在若干问题，例如，肝肾功能异常、血糖障碍、糖尿病、高血脂以及免疫力下降。因此，需要开发可替代现有抗炎剂的物质。
此前，已有研究证实，将嘌呤基核苷(例如腺苷和鸟苷)施用至人体时，该嘌呤基核苷通过参与调节过度炎症反应的负反馈反应，展现出抗炎作用。然而，当直接施用腺苷和鸟苷时，腺苷也会作用于心肌细胞，从而引起副作用，例如心脏骤停和心动过缓。此外，即使将少量腺苷与鸟苷联合施用，鸟苷也会促进腺苷的作用，进一步增加副作用。由于上述问题，直接施用腺苷和鸟苷是危险的。
(专利文献1)韩国专利申请公开第10-2018-0021856号。
发明内容
技术问题
在此背景下，本发明人发现，当以腺苷和鸟苷彼此结合的寡核苷酸形式施用腺苷和鸟苷时，该寡核苷酸仅在释放寡核苷酸降解酶(例如核苷酸酶)的具有许多炎症反应激活的免疫细胞的组织中局部降解为腺苷和鸟苷，因此可以安全使用而不会产生全身副作用。此外，当腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1时，合成寡核苷酸表现出抗炎活性而没有较多副作用。基于此，本发明人完成了本发明。
因此，本发明的一个目的是提供一种具有抗炎活性并且可以减轻由炎症刺激引起的细胞毒性的寡核苷酸。
本发明的另一个目的是提供一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，该药物组合物包含该寡核苷酸作为活性成分。
然而，本申请所要解决的问题不限于上述问题，本领域普通技术人员通过以下描述将清楚地理解未提及的其他问题。
解决方案
根据本申请的一个实施方式，提供一种寡核苷酸，该寡核苷酸具有抗炎活性并且由腺苷和鸟苷组成，其中腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1。
根据一方面，该寡核苷酸的长度可以为10bp至78bp。
根据一方面，该寡核苷酸可以由选自由以下组成的组中的核苷酸序列组成：SEQID NO：2至SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：7至SEQ ID NO：14。
根据一方面，该寡核苷酸可以减轻由LPS引起的细胞毒性。
根据一方面，该寡核苷酸可以抑制一氧化氮(NO)的产生。
根据一方面，该寡核苷酸可以抑制炎性细胞因子的产生。
根据本申请的另一个实施方式，提供一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，该药物组合物包含具有抗炎活性的寡核苷酸作为活性成分。
根据一方面，炎性疾病可以为脑炎性疾病或骨关节炎。
根据一方面，脑炎性疾病可以包括中风、亨廷顿病(Huntington's disease)、视神经脊髓炎谱系障碍、运动神经元病、帕金森病(Parkinson's disease)、阿尔茨海默病(Alzheimer's disease)和多发性硬化症。
发明效果
本申请的寡核苷酸不仅展现出优异的抗炎作用，而且可减轻由LPS引起的细胞毒性，并且其可局部应用于存在大量的将寡核苷酸分别降解为腺苷和鸟苷的物质的炎症细胞，以尽量减少副作用。
因此，本发明的寡核苷酸可以替代甾体用作抗炎物质，并且可以有效地用于预防或治疗炎性疾病，例如脑炎性疾病和骨关节炎。
应当理解，本发明的效果不限于上述效果，并且包括可以从本发明的详细描述或权利要求中描述的本发明的组成推断出的所有效果。
附图说明
图1示出了通过用具有不同腺苷和鸟苷比例的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的RAW细胞(小鼠巨噬细胞系)来确认一氧化氮(NO)产生程度而获得的结果；
图2示出了通过用具有不同腺苷和鸟苷比例的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的RAW细胞(小鼠巨噬细胞系)通过MTT分析来确认细胞毒性程度而获得的结果；
在图1和图2的图形中，x轴中描述的那些表示以下内容：con(RAW细胞)、LPS(10ng/mL，24小时处理)、PDRN(LPS+PDRN)、地塞米松(LPS+地塞米松)、Oligo 100(腺苷100％)、Oligo 73(腺苷73.3％+鸟苷26.7％)、Oligo 50(腺苷50％+鸟苷50％)、Oligo 27(腺苷26.7％+鸟苷73.3％)、Oligo 10(腺苷50％+鸟苷73.3％)、Oligo 10(腺苷50％+鸟苷50％)、Oligo 0(鸟苷100％)、Oligo C(胞苷100％)和Oligo T(胸苷100％)；
图3示出了通过用腺苷和鸟苷的比例为1:3并且具有不同的序列或长度的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的RAW细胞(小鼠巨噬细胞系)来确认一氧化氮(NO)产生量而获得的结果；
图4示出了通过用SEQ ID NO:11的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的小胶质细胞系来确认一氧化氮(NO)产生量而获得的结果；
图5示出了通过用SEQ ID NO:11的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的小胶质细胞系来确认促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达量而获得的结果；
图6示出了通过用SEQ ID NO:11的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的小鼠星形胶质细胞来确认一氧化氮(NO)产生量而获得的结果；
图7示出了通过用SEQ ID NO:11的寡核苷酸处理由LPS诱导了炎症反应的小鼠星形胶质细胞来确认细胞因子生产量而获得的结果；
图8示出了用SEQ ID NO:11的寡核苷酸和IL-1β依次处理小鼠软骨细胞后，确认细胞因子的表达量而获得的结果。
具体实施方式
以下将参照附图详细描述实施方式。然而，由于可以对实施方式进行各种变化，因此本专利申请的权利的范围不是有限的或者不受这些实施方式的限制。应当理解，实施方式的所有修改、等同和替代都被包括在权利范围内。
实施方式中使用的术语仅用于描述的目的，不应被解释为限制。除非上下文另有明确规定，否则单数表达包括复数表达。在本说明书中，应理解的是，例如“包括”或“具有”等术语旨在表示说明书中描述的特征、数量、步骤、操作、组分、部件或其组合的存在，但这不排除存在或添加一个或多个其他特征、数量、步骤、操作、组分、部件或其组合的可能性。
除非另有定义，否则本文使用的所有术语，包括技术术语或科学术语，具有与本实施方式所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。诸如在常用词典中定义的术语应理解为具有与相关技术的背景下的含义相一致的含义，除非在本申请中明确定义，则不应理解为理想的或过于形式上的含义。
另外，在参照附图的描述中，无论图号，对相同的部件赋予相同的附图标记，并将省略对此的重复说明。在对实施方式的描述中，如果确定相关已知技术的详细描述可能不必要地模糊实施方式的要点，则将省略该详细描述。
本发明人为了解决简单混合腺苷和鸟苷时出现的副作用，通过合成具有不同比例的腺苷和鸟苷的寡核苷酸，从而证实了抗炎作用。结果发现，腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1的寡核苷酸展现出减轻细胞毒性的作用以及抗炎活性，并且特别地，抗炎活性在比例为约1:3(26.7:73.3)时最大。基于此，本发明人完成了本申请。
因此，根据本申请的一个实施方式，提供一种寡核苷酸，该寡核苷酸具有抗炎活性并且由腺苷和鸟苷组成，其中腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1。腺苷和鸟苷的比例可以在例如1:3、2:3、1:1、3:2、3:1的范围内，但不限于此。
当腺苷和鸟苷的比例超出该范围时，不表现出抗炎活性，或减轻由LPS引起的细胞毒性的作用降低(参见实施例2和实施例3)。此外，从同时满足抗炎活性和减轻细胞毒性的作用的角度考虑，腺苷和鸟苷的比例最优选为1:3。
另一方面，寡核苷酸的长度可以为10bp(碱基对)至78bp，优选为15bp至78bp，但不限于此。如果寡核苷酸长度超过78bp，可能会降低合成的准确性。反之，如果寡核苷酸的长度小于10bp，则不可取，因为它在人体内更容易降解为腺苷和鸟苷，从而增加引起例如心脏骤停、心动过缓等副作用的可能性。
本发明的寡核苷酸可以由选自由以下组成的组中的核苷酸序列组成：SEQ ID NO：2至SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：7至SEQ ID NO：14。然而，如下面的实施例所证实的，当腺苷和鸟苷的比例在1:3至3:1的范围内时，无论序列如何，寡核苷酸都可以表现出抗炎活性。
本发明的寡核苷酸减轻由LPS引起的细胞毒性，抑制一氧化氮(NO)的产生，并且抑制炎性细胞因子(例如，IL-1β、IL-6、TNF-α)的产生，从而表现出优异的抗炎作用。
根据本申请的另一个实施方式，提供一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，该药物组合物包含具有抗炎活性的寡核苷酸作为活性成分。
炎性疾病是主要病变为炎症的疾病的总称，可以优选为特应症、牛皮癣、皮炎、过敏、关节炎、鼻炎、中耳炎、喉咙痛、扁桃体炎、膀胱炎、肾炎、盆腔炎、克罗恩病(Crohn'sdisease)、溃疡性结肠炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮(Systemic lupuserythematodes，SLE)、哮喘、水肿、迟发型过敏(IV型过敏)、移植排斥、移植物抗宿主病、自身免疫性脑脊髓炎、多发性硬化、炎症性肠病、囊性纤维化、糖尿病性视网膜病变、缺血性再灌注损伤、血管再狭窄、肾小球炎或胃肠道过敏，但不限于此。这里，关节炎是指由于例如细菌、外伤、自身免疫性疾病等各种原因引起关节发生炎症变化而导致的疾病，优选脑炎性疾病或骨关节炎。
脑炎性疾病可以包括中风、亨廷顿病、视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)、运动神经元病、帕金森病、阿尔茨海默病和多发性硬化症，但不限于此。
如本文所用，术语“预防”是指通过施用本发明的药物组合物来抑制或延迟炎性疾病发作的任何作用。
如本文所用，术语“治疗”可以被解释为包括通过施用本发明的药物组合物来改善或有益于炎性疾病的症状的任何作用，但不特别限于此。
本发明的药物组合物还可以包含制备药物组合物常用的合适的载体、赋形剂和稀释剂，并且载体可以是非天然载体。
载体、赋形剂和稀释剂可以包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟苯甲酯、羟苯丙酯、滑石粉、硬脂酸镁以及矿物油。
在另一方面，本申请的药物组合物可以根据常规方法配制成诸如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂和气雾剂的口服剂型、外用制剂、栓剂和无菌注射用溶液的形式。当配制该药物组合物时，使用诸如通常使用的填充剂、增量剂、粘结剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂的稀释剂或赋形剂来制备。
口服固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这些固体制剂是通过将至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等混合进干细胞提取物制备而成的。除了简单的赋形剂外，还可以使用润滑剂，例如硬脂酸镁和滑石粉。口服液体制剂包括混悬剂、内服剂、乳剂、糖浆剂等，并且除了常用的简单稀释剂水和液体石蜡外，还可以包含各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、调味剂、和防腐剂等。
用于肠胃外给药的制剂包括无菌水溶液、非水溶液、混悬剂、乳剂、冷冻干燥制剂和栓剂。可使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、和可注射的酯(例如油酸乙酯)作为非水溶剂和悬浮剂。可以使用witepsol、macrogol、吐温61、可可脂、月桂脂(laurinbutter)、甘油明胶等作为栓剂基质。
本申请的药物组合物可以以药学有效量施用。如本文所用，术语“药学有效量”是指足以以适用于医学治疗的合理收益/风险比来治疗疾病的量。可根据包括对象的类型、严重程度、年龄和性别、药物的活性、对药物的敏感性、施用时间、施用途径和排泄率、治疗的持续时间、同时使用的药物在内的因素以及医学领域众所周知的其他因素来确定有效剂量水平。
本发明的药物组合物可以作为单独的治疗剂施用或者可以与其他治疗剂一起联合施用，并且可以与常规治疗剂依次施用或同时施用。此外，本申请的药物组合物可以单剂量或多剂量施用。考虑以上所有因素，施用能够以最少的量获得最大的效果而没有副作用的量是重要的。
另一方面，如本文所用，术语“施用”是指通过任何合适的方法将本发明的药物组合物引入对象，并且施用途径可以是各种途径，只要其可以到达靶组织即可。
施用途径的实例可以包括口服、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内和鼻内施用；并且肠胃外注射包括肌内、关节内、脊柱内、脊柱硬膜外腔内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。对于该组合物的肠胃外施用，可以优选通过混合药学上可接受的载体，即在所用浓度和剂量下对受体无毒且在所需的纯度下可与其他制剂成分混溶的那些药学上可接受的载体，来制备单位剂型。
下文中将通过实施例详细描述本发明。仅出于说明本发明的目的描述以下实施例，但本发明的范围不受其限制。
实施例1：寡核苷酸的合成
以分别为100:0、26.7:73.3、50:50、73.3:26.7、10:90和0:100的腺苷和鸟苷的比例合成了长度为30bp的寡核苷酸。该寡核苷酸是通过以下方法合成的：在专用合成仪(Mermade 192(Bioautomation，USA))上通过如下的四步循环从3'末端到5'末端进行合成：1)脱保护；2)偶联；3)封端；和4)氧化。然后，使用高亲和纯化(High affinitypurification，HAP)去除未完全合成的寡核苷酸。
合成的寡核苷酸的具体序列如下。
[表1]
Figure BDA0003260345450000101
实施例2：对LPS处理诱导的一氧化氮(NO)产生的抑制作用
用10ng/mL浓度的炎症反应诱导物质LPS(脂多糖)处理RAW细胞(Sigma-Aldrich)，2小时后，用浓度为1μg/ml、10μg/ml和100μg/ml的上述实施例1中制备的寡核苷酸进行处理，比较了产生的一氧化氮(NO)的量。通过比较未处理的RAW细胞(con)中产生的NO量与用LPS处理的RAW细胞中产生的NO量，抑制NO产生的程度评估对NO产生的抑制作用。
结果，如图1所示，发现仅包含腺苷的寡核苷酸(Oligo 100)反而使炎症恶化，而且尽管图中未示出，但在腺苷90％+鸟苷10％的寡核苷酸中炎症也恶化了。从腺苷73.3％+鸟苷26.7％的寡核苷酸(Oligo 73)开始显示出抗炎活性；在腺苷26.7％+鸟苷73.3％的寡核苷酸(Oligo 27)中作用最大；甚至在腺苷10％+鸟苷90％的寡核苷酸(Oligo 10)和仅包含鸟苷的寡核苷酸(Oligo 0)中也显示出作用。
也就是说，发现仅当寡核苷酸中包含至少26.7％或更大的比例的鸟苷时才显示抗炎活性，并且当鸟苷的含量低于该比例时，巨噬细胞中由LPS引起的炎症反而恶化了。
实施例3：减轻由LPS治疗引起的细胞毒性的作用
用LPS(脂多糖)以10ng/mL的浓度处理RAW细胞(Sigma-Aldrich)以诱导炎症反应，然后用上述实施例1中制备的寡核苷酸以1μg/mL、10μg/ml和100μg/ml的浓度进行处理，培养24小时。通过MTT分析测量细胞毒性。
结果，如图2所示，当用10％腺苷+90％鸟苷的寡核苷酸(Oligo 10)处理时，与用甾体地塞米松处理的情况相比，由LPS引起的细胞毒性显著减轻。证实腺苷26.7％+鸟苷73.3％的寡核苷酸(Oligo 27)显示出减轻细胞毒性的作用，但是当腺苷的比例高于该比例时，减轻细胞毒性的作用降低。
当综合考虑上述实施例2和实施例3的结果时，如表2所示，能够在减轻由炎症刺激引起的细胞毒性的同时表现出抗炎活性的寡核苷酸对应于腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1的寡核苷酸。
[表2]
Figure BDA0003260345450000111
实施例4：根据寡核苷酸的序列和长度的差异比较抗炎作用
为了确认抗炎作用是否因寡核苷酸的序列或长度而不同，另外制备了腺苷和鸟苷的比例为1:3的寡核苷酸。使用上述实施例1所述的方法制备寡核苷酸，制备的核苷酸的具体序列如下。
[表3]
Figure BDA0003260345450000112
Figure BDA0003260345450000121
接下来，用10ng/mL浓度的炎症反应诱导物质LPS(脂多糖)处理RAW细胞(Sigma-Aldrich)，2小时后，用浓度为1μg/ml、10μg/ml和100μg/ml的上述SEQ ID NO:7-14的寡核苷酸进行处理，比较了产生的一氧化氮(NO)的量。结果，如图3所示，证实了与未进行任何处理的对照相比，产生NO的量随用寡核苷酸处理的细胞中的浓度成比例地减少。这些结果表明，如果腺苷和鸟苷的比例在特定范围内，无论序列或长度如何，寡核苷酸的抗炎活性都可表现出类似的抗炎作用。
实施例5：小胶质细胞中的抗炎作用
为了确认在小胶质细胞中是否也表现出相同的抗炎作用，用LPS(100ng/ml)+干扰素-γ(50单位/ml)处理小鼠小胶质细胞系BV2细胞以进行炎症刺激，静置2小时，然后用寡核苷酸(15bp Oligo 25，SEQ ID NO：11)处理以确认产生的NO量以及促炎细胞因子的表达量。
细胞因子的表达量通过使用常规PCR分析测量BV2细胞中细胞因子基因的表达水平来确定，具体方法如下。使用TRIZOL试剂(Invitrogen，Carlsbad，CA，美国)从处理过的细胞中提取总核糖核酸(RNA)。使用Superscript II逆转录酶(Invitrogen)和oligo(dT)引物进行逆转录(Reverse transcription，RT)。PCR扩增在C1000 Touch Thermal Cycler(Bio-Rad，Richmond，CA，美国)中在55℃至60℃的退火温度下使用特定引物组进行25个至32个循环。将具有溴化乙锭的PCR产物在1％琼脂糖凝胶上电泳并用紫外线照射以观察条带。
结果，如图4和图5所示，NO的产生随寡核苷酸的处理浓度成比例地减少(图4)，由LPS处理增加的促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的基因表达水平显著减少(图5)。
实施例6：星形胶质细胞中的抗炎作用
为了确认在星形胶质细胞中是否也表现出相同的抗炎作用，制备了小鼠原代星形胶质细胞(通过培养来自出生后2天至3天的新生小鼠的脑的星形胶质细胞制成)。用LPS(100ng/ml)+干扰素-γ(50单位/ml)处理制备的星形胶质细胞以进行炎症刺激，静置2小时，然后用寡核苷酸(15bp Oligo 25，SEQ ID NO：11)处理以确认产生的NO量以及细胞因子的表达量。
细胞因子的表达量通过使用上述实施例5中描述的常规PCR分析测量细胞因子基因的表达水平以及使用蛋白质印迹法测量细胞培养物中细胞因子蛋白的浓度来确认。
结果，如图6和图7所示，NO的产生随寡核苷酸的处理浓度成比例地减少(图6)；促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的基因表达水平显著降低；以及抗炎细胞因子IL-10的基因的表达水平也显著增加(图7)。
实施例7：软骨细胞中的抗炎作用
为了确认在软骨细胞中是否也表现出相同的抗炎作用，用浓度为10ng/mL的寡核苷酸(15bp Oligo 25，SEQ ID NO:11)处理小鼠原代软骨细胞并静置2小时。然后用IL-1β进行处理，6小时后，通过PCR分析确认细胞因子的表达量。
细胞因子的表达量通过使用常规PCR分析测量细胞因子基因的表达水平来确定，具体方法如下。使用TRIZOL试剂(Invitrogen，Carlsbad，CA，美国)从处理过的细胞中提取总核糖核酸(RNA)。使用Superscript II逆转录酶(Invitrogen)和oligo(dT)引物进行逆转录(Reverse transcription，RT)。使用One Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit(TakaraBio，Otsu，Shiga，日本)进行实时PCR，然后使用ABI Prism 7000序列检测系统(AppliedBiosystems，California，CA，美国)进行检测。使用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GADPH)作为内部对照。
结果，如图8所示，已知在骨关节炎中增加的MMP13、MMP12、MMP9和MMP3基因的表达水平降低，而已知在骨关节炎中减少的ADAMTS5基因的表达水平增加。综上所述，发现骨关节炎的标志物得到显著改善。
从上述实施例5至实施例7的结果可以看出，本发明的寡核苷酸不仅在巨噬细胞系中表现出优异的抗炎作用，而且在小胶质细胞、星形胶质细胞和软骨细胞中也表现出优异的抗炎作用。该寡核苷酸可有效地用于治疗由于炎症反应诱发颅神经损伤的脑炎性疾病和骨关节炎。
如上所述，虽然已经参考有限的附图描述了实施例，但本领域普通技术人员可以基于上文进行各种技术修改和变化。例如，即使所描述的技术以不同于所描述的方法的顺序执行，和/或所描述的组件以不同于所描述的方法的形式关联或组合，或者被其他组件或等效物替换或替代，适当的结果也可以实现。
因此，本专利权利要求的其他实现方式、其他实施方式和等同物也在所附权利要求的范围内。
序列表
<110>大邱布教本笃修女院
<120>具有抗炎作用的寡核苷酸
<130>FPC-2019-0151PCT
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aggggggggg agggagaggg aagaggggga 30
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<223>15bp Oligo25
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agggagggag ggagggaggg agggagggag ggagggaggg aggggaggga gggagggagg 60
gagggaggga gggag 75
序列表
<110> 朴东辉
<120> 具有抗炎活性的寡核苷酸
<130> SPO21-026/CTP
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gagggaggga gggag 75

Claims (9)

1.一种寡核苷酸，所述寡核苷酸具有抗炎活性并且由腺苷和鸟苷组成，其中腺苷和鸟苷的比例为1:3至3:1。
2.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中，所述寡核苷酸的长度为10bp至78bp。
3.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中，所述寡核苷酸由选自由以下组成的组中的核苷酸序列组成：SEQ ID NO：2至SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：7至SEQ ID NO：14。
4.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中，所述寡核苷酸减轻由LPS引起的细胞毒性。
5.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中，所述寡核苷酸抑制一氧化氮(NO)的产生。
6.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其中，所述寡核苷酸抑制炎性细胞因子的产生。
7.一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1的具有抗炎活性的所述寡核苷酸作为活性成分。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中，所述炎性疾病为脑炎性疾病或骨关节炎。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中，所述脑炎性疾病包括中风、亨廷顿病、视神经脊髓炎谱系障碍、运动神经元病、帕金森病、阿尔茨海默病和多发性硬化症。
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