CN113854462A - 一种含有人体衰老baz2b基因抑制剂的固体饮料及其制备方法 - Google Patents

一种含有人体衰老baz2b基因抑制剂的固体饮料及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本申请涉及一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料及其制备方法。含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其各组分重量份数如下，柠檬酸钙150‑200份；L‑苹果酸镁100‑150份；牛初乳4‑20份；L‑丝氨酸15‑25份；黎豆粉40‑60份；海藻糖10‑50份；L‑多巴2‑6份，BAZ2B基因抑制剂0.01‑0.05份；酵母提取物20‑30份，维生素C 0.5‑1.5份；食用香精0.01‑0.02份；甜菊糖苷0.01‑0.05份。本申请通过BAZ2B基因抑制剂与酵母提取物的添加，使得固体饮料除能为新生细胞提供充足营养物质外，还可通过抑制BAZ2B基因的表达起到延缓衰老的功效。

Description

一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料及其制备 方法
技术领域
本申请涉及功能性饮料技术领域，更具体地说，它涉及一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料及其制备方法。
背景技术
随着人民生活水平的提高，人们对于自身的健康也日益重视，其中以功能性固体饮料为例，其外观呈粉末状、颗粒状或块状，因其食用方便、营养成分丰富等特点而备受消费者的青睐，可为人体提供充足的维生素、氨基酸和能量等，以保障人体的正常代谢及生长发育，长期饮用有利于维持人体的健康。
相关技术中的功能性固体饮料是以果糖、乳制品、蛋制品或植物提取物等为主要原料，添加适量的营养成分制成的含水量不高于5％的固体制品，冲服后，即可补充人体的营养所需。
但随着人口老龄化的加重，越来越多的老年人因年龄增长、脑血管疾病等原因，导致行为能力和记忆能力明显衰退，部分老年人甚至患上老年痴呆，给家庭带来了沉重的负担，因此迫切需要开发一种即能补充供给人体日常所需，又能延缓衰老，即改善行为、记忆能力衰退的功能性饮料。
发明内容
为解决上述技术问题，本申请提供一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料及其制备方法。
第一方面，本申请提供一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，采用如下的技术方案：
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，由如下重量份数的组分组成：
柠檬酸钙 150-200份；
L-苹果酸镁 100-150份；
牛初乳 4-20份；
L-丝氨酸 15-25份；
黎豆粉 40-60份；
海藻糖 10-50份；
L-多巴 2-6份；
BAZ2B基因抑制剂 0.01-0.05份；
酵母提取物 20-30份；
维生素C 0.5-1.5份；
食用香精 0.01-0.02份；
甜菊糖苷 0.01-0.05份。
通过采用上述技术方案，上述组分及配比的固体饮料除能为人体补充基本营养物质外，还可通过BAZ2B基因抑制剂与酵母提取物的添加，赋予固体饮料延缓人体衰老、改善行为能力和记忆能力下降的功效，长期饮用后，其效果更优；
其中BAZ2B基因抑制剂则是通过抑制体内BAZ2B基因的表达量，从而达到了延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的目的，且酵母提取物对BAZ2B基因抑制剂的抑制具有增效作用，其内富含的硒元素、氨基酸、B族维生素、核甘酸、多肽等，还可促进新生细胞的生长发育；
分析其原因可能是，由于BAZ2B基因是重要的调控衰老进程的因子，其表达量与阿尔兹海默氏症等病情进展呈正相关，且对线粒体的功能性起到调控作用，会加速线粒体功能的衰退，因此通过抑制BAZ2B基因的表达，即可维持衰老细胞及衰老细胞中线粒体的功能，从而达到了延缓衰老的功效，且通过实验表明BAZ2B基因的下调能够显著地缓解衰老以及改善衰老过程中的记忆退化、行为能力退化等。
优选的，所述酵母提取物为富硒酵母提取物，所述富硒酵母提取物中硒含量不低于 2000mg/kg。
通过采用上述技术方案，所选用富硒酵母无毒无害，相比无机硒，具有更高的生物活性和食用安全性，上述硒含量的富硒酵母提取物除能作硒营养添加剂延缓衰老，调节人体体内的血硒水平外，还可与BAZ2B基因抑制剂复配，增强其对BAZ2B基因的抑制效果。
优选的，所述富硒酵母提取物的提取方法如下：
A、酵母活化、扩大培养：先挑取啤酒酵母菌并按体积比1：(100-200)接种于活化培养基中以30℃恒温培养24-36h进行活化，再将活化后的酵母菌转接于种子培养基中进行扩培，即可得到活化种子液；
B、富硒酵母发酵培养：将活化种子液投入到灭菌后的发酵培养基中，并以30-35℃、发酵 16-32h，期间控制发酵培养基中还原糖浓度不低于1.2％，即可制得富硒酵母发酵液；
所述发酵培养基中含有亚硒酸钠；
C、富硒酵母提取物制备：
(1)先将B中制得的富硒酵母发酵液加热至70-80℃，自溶0.5-1h，再将温度调至40- 50℃、pH调至6.0-7.0，然后加入提取酶，所述提取酶的添加量按富硒酵母发酵液的重量计算，为100-160mg提取酶/g富硒酵母发酵液，进行水解反应12-16h，即可制得水解液；
所述提取酶为谷氨酰胺转氨酶、核酸酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或多种；
(2)将(1)中制得的水解液加热至90-100℃，灭活10-15min，再以3000-3500r/min离心分离15-20min后，去上清液，然后喷粉干燥，即可制得所述富硒酵母提取物。
通过采用上述技术方案，上述制备工艺制得的富硒酵母提取物，其富含硒元素的同时，氨基酸、B族维生素、核甘酸、多肽等营养成分的保有量较高，因而能较好的保障新生细胞的生长发育，且制得富硒酵母提取物对BAZ2B基因抑制剂的抑制具有增效作用。
优选的，所述A中所用的活化培养基为YPD培养基；
所述A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠组成，所述YPD培养基与亚硒酸钠按重量比计算，为1：(0.001-0.002)。
通过采用上述技术方案，上述组分及比例范围内的种子培养基，可通过初级筛选的方式，提升酵母细胞中的有机硒含量的同时，不会影响酵母菌的正常生长发育，继而保障了酵母提取物中各有效成分的保有量，增强了其与BAZ2B基因抑制剂的复配抑制效果，赋予了固体饮料较优的延缓衰老、养生保健效果。
优选的，B中采用流加还原糖溶液的方式，控制发酵培养基中还原糖浓度不低于1.2％；
所述还原糖溶液由质量百分比浓度为40-60％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：(0.2- 0.3)组成，所述还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为30-80mg/h。
通过采用上述技术方案，上述流加量和组分配比的还原糖溶液，不易影响到富硒酵母生长发育的同时，其在流加过程中还能保障酵母菌正常增殖生长的营养供给，且具有一定筛选作用，有利于富硒酵母的富集和增殖。
优选的，B中所述发酵培养基，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
酵母粉 3.5-4.5％
大豆蛋白胨 3.2-3.6％
葡萄糖 1.6-2.0％
海藻糖 1.0-1.6％
腺嘌呤 0.005-0.01％
亚硒酸钠 0.015-0.020％
余量为水。
通过采用上述技术方案，上述组分及配比的发酵培养基，除能在发酵过程中保障酵母菌正常增殖生长的营养供给外，还具筛选作用，有利于富硒酵母的富集和增殖，且亚硒酸钠含量适宜，不易因初期含量较高导致酵母菌培育初期大量死亡，继而影响发酵效果。
优选的，所述C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶组成。
通过采用上述技术方案，上述组分的提取酶，其配合效果较优，可将酵母提取物中有效成分充分提取出来，相比使用单一酶或其他酶组合，其制得酵母提取物与BAZ2B基因抑制剂的复配效果较优。
优选的，所述C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：(0.5-0.8)：(2-3)组成。
通过采用上述技术方案，上述组分及配比的提取酶，其对酵母提取物的提取效果最优，可有效将酵母提取物中的硒元素、氨基酸、核酸等营养物质均提取出来，保障了酵母提取物的功能价值。
第二方面，本申请提供一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料的制备方法，采用如下的技术方案：
S1、先将原料中各组分与去离子水按重量百分比1:(2-3)混合均匀，优选为1:2.5，然后升温至60-65℃继续搅拌，于50-60MPa的压力、60-65℃的温度下循环均质3-5次，即可制得混合料液；
S2、对S1中制得的混合料液杀菌后，投入喷雾冷冻干燥机中，控制进风温度为120-140℃，进风流量为200-260m3/h，出风温度为80-100℃，优选为控制进风温度为130℃，进风流量为230m3/h，出风温度为90℃，即可制得含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料。
通过采用上述技术方案，简化了工艺的同时，各项操作条件易于控制，且制得的酵母发酵固体饮料，其内有效成分的保有量较高，含水量较低，不易因其本身的酶或微生物引起的变质或腐败，有利于长时间的储藏和运输。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、本申请通过BAZ2B基因抑制剂与酵母提取物的添加，使得固体饮料除能为人体提供必要的营养物质之外，还可有效延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降，其反应机理如下：通过抑制BAZ2B基因的表达量，维持了衰老细胞及衰老细胞内线粒体的功能，从而赋予了固体饮料较优的保健养生功效；
2、本申请通过富硒酵母提取物的添加，进一步保障了固体饮料延缓衰老及改善行为能力和记忆能力下降的功效，分析其原因可能是，由于其内所含的硒元素等除能作硒营养添加剂延缓衰老，调节人体体内的血硒水平外，还可与BAZ2B基因抑制剂复配，以增强其对BAZ2B 基因的抑制效果；
3、本申请中的制备方法较为简易，各项操作条件易于控制，所制得的固体饮料中有效成分的保有量较高的同时，易于储藏和运输，期间不易发生变质，因而适用于产业化生产。
具体实施方式
以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
本申请的各实施例和对比例中所用的原料，除下述特殊说明之外，其他均为市售。
原料/设备 规格/型号 采购厂家
BAZ2B基因抑制剂 CAS 1619994-68-1 上海陶术生物科技有限公司
YPD培养基 货号：J903-100G 上海艾研生物科技有限公司
酵母粉 CAS NO：8013-01-2 湖北宏瀚生物科技有限公司
啤酒酵母菌 CMCC(F)98007 北京博研科创生物技术有限公司
木瓜蛋白酶 货号FDG-4003 夏盛(北京)生物科技开发有限公司
谷氨酰胺转氨酶 货号FDG-3901 夏盛(北京)生物科技开发有限公司
核酸酶 货号FDG-2253 夏盛(北京)生物科技开发有限公司
注：上表中BAZ2B基因抑制剂为GSK2801
制备例
制备例1-6
一种发酵培养基，各组分及相应重量份数如下表所示：
表：制备例1-6中各组分及相应重量(kg)
Figure BDA0003315559630000051
Figure BDA0003315559630000061
制备例7
一种富硒酵母提取物，其提取方法如下：
A、酵母活化、扩大培养：将甘油管保藏后的啤酒酵母菌自然解冻后，挑取0.5mL的啤酒酵母菌按体积比1:200接种至装有100mL活化培养基的500mL三角烧瓶中，以30℃恒温培养 24h进行活化，再将活化后的酵母菌按体积比1:20转接于装有2L种子培养基中的培养罐中，并以30℃恒温培养36h进行扩培，即可得到活化种子液；
A中所用的活化培养基为YPD培养基；
A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠组成，YPD培养基与亚硒酸钠按重量比计算，为1：0.0005；
B、富硒酵母发酵培养：将活化种子液按体积比1:10投入到灭菌后的20L发酵培养基中，并以30℃、发酵16h，期间采用流加还原糖溶液的方式控制发酵培养基中还原糖浓度不低于 1.2％，即可制得富硒酵母发酵液；
还原糖溶液由质量百分比浓度为30％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.1组成，所述还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为20mg/h；
发酵培养基为制备例1中制得；
C、富硒酵母提取物制备：
(1)先将B中制得的富硒酵母发酵液加热至70℃，自溶0.5h，再将温度调至40℃、pH调至6.0，然后加入提取酶，所述提取酶的添加量按富硒酵母发酵液的重量计算，为100mg提取酶/g富硒酵母发酵液，进行水解反应12h，即可制得水解液；
提取酶为谷氨酰胺转氨酶；
(2)将(1)中制得的水解液加热至90℃，灭活10min，再以3000r/min离心分离15min后，去上清液，然后以160℃的条件，喷粉干燥，即可制得所述富硒酵母提取物。
制备例8
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，其提取方法如下：
A、酵母活化、扩大培养：将甘油管保藏后的啤酒酵母菌自然解冻后，挑取1.0mL的啤酒酵母菌按体积比1:100接种至装有100mL活化培养基的500mL三角烧瓶中，以30℃恒温培养 30h进行活化，再将活化后的酵母菌按体积比1:20转接于装有2L种子培养基中的培养罐中，并以30℃恒温培养36h进行扩培，即可得到活化种子液；
B、富硒酵母发酵培养：将活化种子液按体积比1:10投入到灭菌后的20L发酵培养基中，并以30℃、发酵24h，期间采用流加还原糖溶液的方式控制发酵培养基中还原糖浓度不低于 1.2％，即可制得富硒酵母发酵液；
C、富硒酵母提取物制备：
(1)先将B中制得的富硒酵母发酵液加热至75℃，自溶0.75h，再将温度调至45℃、pH调至6.5，然后加入提取酶，所述提取酶的添加量按富硒酵母发酵液的重量计算，为130mg提取酶/g富硒酵母发酵液，进行水解反应14h，即可制得水解液；
(2)将(1)中制得的水解液加热至95℃，灭活12min，再以3200r/min离心分离18min后，去上清液，然后以160℃的条件，喷粉干燥，其他条件均与制备例7相同，即可制得所述富硒酵母提取物。
制备例9
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，其提取方法如下：
A、酵母活化、扩大培养：将甘油管保藏后的啤酒酵母菌自然解冻后，挑取1.0mL的啤酒酵母菌按体积比1:200接种至装有200mL活化培养基的500mL三角烧瓶中，以30℃恒温培养 36h进行活化，再将活化后的酵母菌按体积比1:20转接于装有4L种子培养基中的培养罐中，并以30℃恒温培养36h进行扩培，即可得到活化种子液；
B、富硒酵母发酵培养：将活化种子液按体积比1:10投入到灭菌后的20L发酵培养基中，并以35℃、发酵32h，期间采用流加还原糖溶液的方式控制发酵培养基中还原糖浓度不低于 1.2％，即可制得富硒酵母发酵液；
C、富硒酵母提取物制备：
(1)先将B中制得的富硒酵母发酵液加热至80℃，自溶1.0h，再将温度调至50℃、pH调至7.0，然后加入提取酶，所述提取酶的添加量按富硒酵母发酵液的重量计算，为160mg提取酶/g富硒酵母发酵液，进行水解反应16h，即可制得水解液；
(2)将(1)中制得的水解液加热至100℃，灭活15min，再以3500r/min离心分离20min 后，去上清液，然后以160℃的条件，喷粉干燥，其他条件均与制备例7相同，即可制得所述富硒酵母提取物。
制备例10
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：0.001组成，其他条件均与制备例7相同。
制备例11
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：0.0015组成，其他条件均与制备例7相同。
制备例12
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：0.002组成，其他条件均与制备例7相同。
制备例13
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：0.003组成，其他条件均与制备例7相同。
制备例14
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除B中还原糖溶液由质量百分比浓度为40％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.2组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为30mg/h外，其他条件均与制备例7相同。
制备例15
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除B中还原糖溶液由质量百分比浓度为50％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.25组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为55mg/h外，其他条件均与制备例7相同。
制备例16
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除B中还原糖溶液由质量百分比浓度为60％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.3组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为80mg/h外，其他条件均与制备例7相同。
制备例17
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除B中还原糖溶液由质量百分比浓度为70％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.4组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为90mg/h外，其他条件均与制备例7相同。
制备例18-22
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除B中所用发酵培养基的使用情况不同外，其他条件均与制备例7相同，具体对应关系如下表所示。
表：实施例18-22中发酵培养基使用情况对照表
组别 发酵培养基
制备例18 由制备例2制得
制备例19 由制备例3制得
制备例20 由制备例4制得
制备例21 由制备例5制得
制备例22 由制备例6制得
制备例23
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：0.3：1组成外，其他条件均与制备例7相同。
制备例24
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：0.5：2组成外，其他条件均与制备例7相同。
制备例25
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：0.65：2.5组成外，其他条件均与制备例7相同。
制备例26
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：0.8：3组成外，其他条件均与制备例7相同。
制备例27
一种富硒酵母提取物，与制备例7的不同之处在于，除C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：1：4组成外，其他条件均与制备例7相同。
性能检测试验
取各实施例和对比例中制得的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料进行分组检测，每组试验对象均为10只24月大的老年C57/BL6裸小鼠，通过Barnesmaze实验检测老年小鼠的空间学习记忆能力，具体检测步骤和标准如下：
先将含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料与温水按1:1冲兑搅拌，制成含有BAZ2B 基因抑制剂的酵母发酵饮料，再将含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵饮料按0.2mL/只，每日三次进行灌喂，灌喂30d后，开始Barnesmaze实验，其中对照组小鼠不进行灌喂，小鼠其他生存条件均保持一致；
连续四天训练老年小鼠找到目标洞，每天训练4次，每次间隔15分钟；第五天检测小鼠寻找目标洞的能力来反应其空间学习记忆能力，记录小鼠首次找到目标洞所需的时间和目标洞探索次数，取平均值进行记入，行为实验为双盲实验，符合实验动物伦理。
注：巴恩斯迷宫实验(Barnes maze test)是2019年全国科学技术名词审定委员会公布的阿尔茨海默病名词，可用于检测动物的空间参考记忆能力和工作记忆能力，因此对是否达到延缓衰老、改善行为和/或记忆能力衰退的功效具有参考价值。
实施例
实施例1
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，各组分及其相应的重量如表1所示，并通过如下制备方法制得：
S1、先将原料中各组分与去离子水按重量百分比1:2混合均匀后，升温至60℃搅拌均匀后，于60MPa的压力、65℃的温度下循环均质4次，即可制得混合料液；
原料中酵母提取物由制备例7中制得；
S2、对S1中制得的混合料液杀菌后，投入喷雾冷冻干燥机中，控制进风温度为130℃，进风流量为220m3/h，出风温度为90℃，即可制得含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料。
实施例2-6
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，各组分及其相应的重量如下表所示。
表：实施例1-6中各组分及相应重量(kg)
Figure BDA0003315559630000101
Figure BDA0003315559630000111
对比例1
一种酵母发酵固体饮料，与实施例1的不同之处在于，其组成中不含BAZ2B基因抑制剂和酵母提取物，其他条件均与实施例1相同。
对比例2
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，其组成中不含酵母提取物，其他条件均与实施例1相同。
抽取上述实施例1-6和对比例1-2中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000112
Figure BDA0003315559630000121
从上表中可以看出，实施例1-6中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为22.8-30.8s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.3-3.7次。
进一步，实施例3和实施例4为较优实施例，其首次找到目标洞的时间为22.8-30.8s，对目标洞的探索次数为3.3-3.7次，可见BAZ2B基因抑制剂在用量为0.04kg时，其延缓衰老、改善行为能力与记忆能力下降的效果较优。
当BAZ2B基因抑制剂的用量增加至0.06kg时，其抗衰老、改善效果并不在预期内进行持续增强，而是效果无明显变化，甚至小幅度降低，分析其原因可能是，抑制剂用量较高，超出小鼠承受上限后，小鼠体内产生一定应激反应，BAZ2B基因的表达反而增加，继而导致抗衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果减弱。
特别是，实施例3中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力与记忆能力下降效果最优，其首次找到目标洞的时间仅为22.8s，对目标洞的探索次数高达3.7次，分析其原因可能是，由于上述配比下的组分，除BAZ2B基因抑制剂能对BAZ2B基因起到抑制效果外，富硒酵母提取物中的硒元素、氨基酸、B族维生素、核甘酸、多肽等对BAZ2B基因抑制剂的抑制起到了一定程度的增效作用，且有利于促进新生细胞的生长发育，因此适当的增加富硒酵母提取物的用量，有利于保障固体饮料的延缓衰老、改善行为能力与记忆能力下降的功效。
从上表中还可以看出，对比例1相对于实施例1和对照组，由于未加入BAZ2B基因抑制剂和酵母提取物，其基本不具备延缓衰老和改善行为能力与记忆能力下降的功效，其首次找到目标洞的时间高达58.1s，相比于实施例1提高了89％；对目标洞的探索次数仅为1.7次，相比于实施例1下降了48％。
从上表中还可以看出，对比例2相对于实施例1，由于未加入酵母提取物进行复配，其延缓衰老和改善行为能力与记忆能力下降的功效小幅度降低，其首次找到目标洞的时间高达34.1s，相比于实施例1提高了11％；对目标洞的探索次数仅为2.9次，相比于实施例1下降了12％。
综上所述，上述组分及配比的BAZ2B基因抑制剂和酵母提取物在掺入固体饮料内后，有助于延缓人体衰老，且具有改善行为能力与记忆能力下降的功效，BAZ2B基因抑制剂与酵母提取物间具有一定复配效果，饮品营养价值更高的同时，赋予了饮品的更优的养生抗衰老功效。
实施例7-8
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，所用酵母提取物的使用情况不同，具体对应关系下表所示。
表：实施例7-8中酵母提取物使用情况对照表
组别 酵母提取物
实施例7 由制备例8制得
实施例8 由制备例9制得
抽取上述实施例7-8中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000131
从上表中可以看出，实施例1、实施例7-8中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为29.3-30.8s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.3-3.4次。
特别是，实施例7中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果最好，其首次找到目标洞的时间仅为29.3s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数高达3.4次，可见该工艺为最优工艺。
综上所述，经上述提取工艺提取的酵母提取物，其硒含量、氨基酸、B族维生素、核甘酸、多肽等含量较高，对BAZ2B基因抑制剂的复配效果最好，能保障新生细胞的生长发育的同时，对BAZ2B基因抑制剂的抑制表达起到了增效作用。
实施例9-12
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，所用酵母提取物的使用情况不同，具体对应关系下表所示。
表：实施例9-12中酵母提取物使用情况对照表
组别 酵母提取物
实施例9 由制备例10制得
实施例10 由制备例11制得
实施例11 由制备例12制得
实施例12 由制备例13制得
抽取上述实施例9-12中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000141
从上表中可以看出，实施例1、实施例9-12中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为26.3-30.8s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.3-3.5次。
进一步，实施例9-11中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果较好，其首次找到目标洞的时间为26.3-27.7s，对目标洞的探索次数为3.4-3.5次。可见A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：(0.001-0.002)组成时，其酵母提取物的提取效果较优，其硒元素、氨基酸、核酸等有效成分的保有量较高。
特别是，实施例10中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果最好，其首次找到目标洞的时间仅为26.3s，对目标洞的探索次数高达3.5次。可见A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠按重量比1：0.0015组成时，其酵母提取物的提取效果最优，其硒元素、氨基酸、核酸等有效成分的保有量最高，对BAZ2B基因抑制剂的抑制具有最强的增效作用。
综上所述，上述组分及比例的种子培养基，可通过初级筛选的方式，提升酵母细胞中的硒含量的同时，不会影响酵母菌的正常生长发育，继而保障了酵母提取物中各有效成分的保有量，增强了其与BAZ2B基因抑制剂的复配抑制效果。
实施例13-16
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，所用酵母提取物的使用情况不同，具体对应关系下表所示。
表：实施例13-16中酵母提取物使用情况对照表
组别 酵母提取物
实施例13 由制备例14制得
实施例14 由制备例15制得
实施例15 由制备例16制得
实施例16 由制备例17制得
抽取上述实施例9-12中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000151
Figure BDA0003315559630000161
从上表中可以看出，实施例1、实施例13-16中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为25.8-30.8s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.3-3.5次。
进一步，实施例13-15中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果较好，其首次找到目标洞的时间为25.8-27.2s，对目标洞的探索次数为3.5次。可见B中还原糖溶液由质量百分比浓度为50％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.25组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为55mg/h时，其酵母提取物中硒元素、氨基酸、核酸等有效成分的保有量较高，其对BAZ2B基因抑制剂具有较优的复配效果。
特别是，实施例15中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果最好，其首次找到目标洞的时间仅为25.8s，对目标洞的探索次数高达3.5次。可见B中还原糖溶液由质量百分比浓度为60％葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：0.3组成，还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为80mg/h时，该工艺为最优工艺。
综上所述，上述组分及配比的还原糖溶液，其在流加过程中除能保障酵母菌正常增殖生长的营养供给外，还具有一定筛选作用，有利于富硒酵母的富集和增殖，且上述浓度及流加量的亚硒酸钠不易影响到富硒酵母的生长发育，从而赋予了固体饮料较优的抗衰老、保健养生功效。
实施例17-21
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，所用酵母提取物的使用情况不同，具体对应关系下表所示。
表：实施例17-21中酵母提取物使用情况对照表
Figure BDA0003315559630000162
Figure BDA0003315559630000171
抽取上述实施例17-21中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000172
从上表中可以看出，实施例1、实施例17-21中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为30.1-30.8s，且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.2-3.4次。
特别是，实施例19中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果最好，其首次找到目标洞的时间仅为30.1s，对目标洞的探索次数高达3.4次。可见该组分及配比下的发酵培养基，利于富硒酵母的生长提取；当发酵培养基中亚硒酸钠用量超过 0.015kg时，其延缓衰老改善行为能力和记忆能力下降，分析其原因可能是，亚锡酸钠在初期浓度较高，不利于酵母菌种的生长。
综上所述，上述组分及配比的发酵培养基，其在发酵过程中除能保障酵母菌正常增殖生长的营养供给外，还具筛选作用，有利于富硒酵母的富集和增殖，当亚硒酸钠含量较高时，则不利于酵母初期的生长发育。
实施例22-26
一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，与实施例1的不同之处在于，所用酵母提取物的使用情况不同，具体对应关系下表所示。
表：实施例22-26中酵母提取物使用情况对照表
组别 酵母提取物
实施例22 由制备例23制得
实施例23 由制备例24制得
实施例24 由制备例25制得
实施例25 由制备例26制得
实施例26 由制备例27制得
抽取上述实施例22-26中制得的固体饮料，对其进行性能检测，分别测得每组小鼠首次找到目标洞的时间(s)和对目标洞的探索次数(次)，测试结果记入下表：
Figure BDA0003315559630000181
从上表中可以看出，实施例22-26中制得的固体饮料除能供给补充营养成分外，均具有较优的延缓衰老功效，且能有效改善因衰老导致的行为能力与记忆能力下降，试验组中的老年小鼠均能较快的找到目标洞，其首次找到目标洞的时间为26.6-28.4s，相比实施例1降低了8- 14％；且行为能力较高，其对目标洞的探索次数为3.4-3.6次，相比实施例1提升了3-9％。
进一步，实施例23-25中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果较好，其首次找到目标洞的时间为26.6-27.2s，对目标洞的探索次数为3.5-3.6次。可见C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶组成，且按重量比1：(0.5-0.8)：(2-3)组成时，其对酵母的提取效率较高，所得酵母提取物中硒元素、氨基酸、核酸等有效成分的保有量较高，因而赋予了其对BAZ2B基因抑制剂较优的复配效果，保障了固体饮料的延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的功效。
特别是，实施例24中制得的固体饮料，其延缓衰老、改善行为能力和记忆能力下降的效果最好，其首次找到目标洞的时间仅为26.6s，对目标洞的探索次数高达3.6次，可见该提取酶配比为最优配比。
综上所述，上述组分及配比的提取酶，其提取效果较优，所得酵母提取物中各营养成分及有效成分的保有量最高，有利于提升酵母提取物对BAZ2B基因抑制剂的复配效果。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (9)

1.一种含有人体衰老BAZ2B基因抑制剂的固体饮料，其特征在于，
由如下重量份数的组分组成：
柠檬酸钙150-200份；
L-苹果酸镁100-150份；
牛初乳4-20份；
L-丝氨酸15-25份；
黎豆粉40-60份；
海藻糖10-50份；
L-多巴2-6份；
BAZ2B基因抑制剂 0.01-0.05份；
酵母提取物20-30份；
维生素C 0.5-1.5份；
食用香精0.01-0.02份；
甜菊糖苷0.01-0.05份。
2.根据权利要求1所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，所述酵母提取物为富硒酵母提取物，所述富硒酵母提取物中硒含量不低于2000mg/kg。
3.根据权利要求2所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，所述富硒酵母提取物的提取方法如下：
A、酵母活化、扩大培养：先挑取啤酒酵母菌并按体积比1：（100-200）接种于活化培养基中以30℃恒温培养24-36h进行活化，再将活化后的酵母菌转接于种子培养基中进行扩培，即可得到活化种子液；
B、富硒酵母发酵培养：将活化种子液投入到灭菌后的发酵培养基中，并以30-35℃、发酵16-32h，期间控制发酵培养基中还原糖浓度不低于1.2%，即可制得富硒酵母发酵液；
所述发酵培养基中含有亚硒酸钠；
C、富硒酵母提取物制备：
（1）先将B中制得的富硒酵母发酵液加热至70-80℃，自溶0.5-1h，再将温度调至40-50℃、pH调至6.0-7.0，然后加入提取酶，所述提取酶的添加量按富硒酵母发酵液的重量计算，为100-160mg提取酶/g富硒酵母发酵液，进行水解反应12-16 h，即可制得水解液；
所述提取酶为谷氨酰胺转氨酶、核酸酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或多种；
（2）将（1）中制得的水解液加热至90-100℃，灭活10-15min，再以3000-3500r/min离心分离15-20min后，去上清液，然后喷粉干燥，即可制得所述富硒酵母提取物。
4.根据权利要求3所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，所述A中所用的活化培养基为YPD培养基；
所述A中所用种子培养基由YPD培养基和亚硒酸钠组成，所述YPD培养基与亚硒酸钠按重量比计算，为1：（0.001-0.002）。
5.根据权利要求3所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，B中采用流加还原糖溶液的方式，控制发酵培养基中还原糖浓度不低于1.2%；
所述还原糖溶液由质量百分比浓度为40-60%葡萄糖水溶液和亚硒酸钠按重量比1：（0.2-0.3）组成，所述还原糖水溶液的流加量，以每升富硒酵母发酵液为基准，为30-80mg/h。
6.根据权利要求3所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，B中所述发酵培养基，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
酵母粉 3.5-4.5%
大豆蛋白胨 3.2-3.6%
葡萄糖 1.6-2.0%
海藻糖 1.0-1.6%
腺嘌呤 0.005-0.01%
亚硒酸钠0.015-0.020%
余量为水。
7.根据权利要求3所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，所述C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶组成。
8.根据权利要求7所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料，其特征在于，所述C中提取酶由谷氨酰胺转氨酶、核酸酶和木瓜蛋白酶按重量比1：（0.5-0.8）：（2-3）组成。
9.权利要求1-8任一所述的含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、先将原料中各组分与去离子水按重量百分比1:（2-3）混合均匀，优选为1:2.5，然后升温至60-65℃继续搅拌，于50-60MPa的压力、60-65℃的温度下循环均质3-5次，即可制得混合料液；
S2、对S1中制得的混合料液杀菌后，投入喷雾冷冻干燥机中，控制进风温度为120-140℃，进风流量为200-260m3/h，出风温度为80-100℃，即可制得含有BAZ2B基因抑制剂的酵母发酵固体饮料。
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