CN113831380B - 一种人参皂苷Re和Rg1的制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种人参皂苷Re和Rg1的绿色制备工艺，具体步骤如下：步骤一，取人参茎叶总皂苷，加水溶解，静置，抽滤，分别收集富含人参皂苷Re的滤饼和富含人参皂苷Rg1的滤液；步骤二，滤饼水洗干燥，乙醇水溶液加热，室温冷却析晶即得人参皂苷Re；步骤三，滤液浓缩干燥，乙醇溶解，加入硅胶拌匀，挥发溶剂，用乙醇搅拌提取，过滤，滤液浓缩干燥，加入丙酮加热溶解，室温冷却析晶即得人参皂苷Rg1。本发明的制备过程没有使用有毒有害溶剂，工艺无环保压力，符合生态社会的发展要求，产品收率高，含量高，工艺简单安全，对设备要求低，生产成本低，适合工业化生产。

Description

一种人参皂苷Re和Rg1的制备工艺

技术领域

本发明属于中药提取领域，具体涉及一种人参皂苷Re和Rg1的制备工艺。

背景技术

人参，五加科多年生草本植物，据现存最早的中药学专著《神农本草经》记载“人参，味甘微寒，主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智，久服，轻身延年”等功效。现代药理学研究表明，人参中的主要活性成分为人参皂苷。到目前为止，发现的人参皂苷单体40余种，然而不同的人参皂苷单体具有不同的药理活性，比如人参皂苷Re在抗氧化应激损伤、提高免疫力、抗癌、益智等方面表现出较好的药理活性，人参皂苷Rg1是所有人参皂苷中抗疲劳活性最强的人参皂苷。只有将人参皂苷单体逐一进行分离，明确各单体的生理活性，才能对症下药，更好的利用人参资源。

由于人参皂苷结构复杂，对于人参皂苷的合成还存在难点，从植物中提取富集仍然是其主要的获得途径。目前国内外对于人参皂苷单体的制备主要还是通过树脂柱层析、硅胶/氧化铝柱层析、有机溶剂萃取、高效制备液相、HSCCC等手段，制备过程繁琐，收率低，成本高，并且不可避免的会使用一些有毒有机试剂，很难满足工业化生产的需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够适用于工业化生产的人参皂苷Re和Rg1的绿色制备方法，以便解决现有技术中人参皂苷单体制备存在的技术问题。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

本发明提供的人参皂苷Re和Rg1的制备工艺包括如下步骤；

步骤一：取人参茎叶总皂苷，加入纯水中，充分搅拌，静置6-10h，过滤，分别收集滤液一和滤饼一；

步骤二：滤饼一中再次加入与步骤一中等体积的纯水，搅拌，过滤，干燥即为人参皂苷Re粗品；

步骤三：人参皂苷Re粗品加入结晶溶剂一加热至50-90℃溶解，自然冷却后析出人参皂苷Re晶体；

步骤四：滤液一蒸干得黄色粉末，有机溶剂溶解后，加入硅胶，拌匀，挥干溶剂，乙醇搅拌提取2次，回收乙醇，得人参皂苷Rg1粗品；

步骤五：人参皂苷Rg1粗品中加入结晶溶剂二加热回流溶解，室温冷却后析出人参皂苷Rg1晶体。

优选地，在步骤一中，人参茎叶总皂苷与加水体积的质量体积比为：人参茎叶总皂苷(g)：水(mL)＝1：3-1：10；最优选地，人参茎叶总皂苷与加水体积的质量体积比为：人参茎叶总皂苷(g)：水(mL)＝1:6。

优选地，在步骤三中，所述结晶溶剂一为30％-80％的乙醇水溶液，人参皂苷Re粗品与结晶溶剂一的质量体积比为：人参皂苷Re粗品(g)：结晶溶剂一(mL)＝1：3-1：10；最优选地，结晶溶剂一为60％的乙醇水溶液，人参皂苷Re粗品与结晶溶剂一的质量体积比为：人参皂苷Re粗品(g)：结晶溶剂一(mL)＝1：5。

优选地，在步骤四中，所述有机溶剂为乙醇；所述硅胶为100-200目或200-300目，加入的硅胶与滤液一蒸干所得黄色粉末的质量比为：1：2-1：5；硅胶及样品总重与乙醇的质量体积比为(g)：乙醇(mL)＝1：6-1：12；最优选地，所述硅胶为100-200目，加入的硅胶与滤液一蒸干所得黄色粉末的质量比为：1：3；硅胶及样品总重与乙醇的质量体积比为(g)：乙醇(mL)＝1：9。

优选地，在步骤五中，所述结晶溶剂二为丙酮，人参皂苷Rg1粗品与结晶溶剂二的质量体积比为：人参皂苷Rg1粗品(g)：结晶溶剂二(mL)＝1：4-1：8；最优选地，人参皂苷Rg1粗品与结晶溶剂二的质量体积比为：人参皂苷Rg1粗品(g)：结晶溶剂二(mL)＝1：6。

本发明提供的人参皂苷Re和Rg1的制备工艺包括如下步骤：

步骤一：取人参茎叶总皂苷，加入6倍纯水中，充分搅拌，静置6h，过滤，分别收集滤液一和滤饼一；

步骤二：向步骤一所得的滤饼一中再次加入与步骤一中等体积的纯水，搅拌，过滤，干燥即为人参皂苷Re粗品；

步骤三：向步骤二所得的人参皂苷Re粗品中加入5倍的60％醇水溶液，加热至80℃，溶解后室温冷却析晶，得人参皂苷Re晶体；

步骤四：滤液一蒸干得黄色粉末，乙醇溶解后，拌入3倍的100-200目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量9倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品；

步骤五：向步骤四所得的人参皂苷Rg1粗品中加入6倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1。

本发明所涉及到的人参皂苷Re和Rg1的制备方法与现有技术相比，主要的优点在于：

1.制备过程所用溶剂以水、乙醇、丙酮为主，不涉及毒性大，对环境有影响的乙腈、甲醇、正丁醇、氯仿、二氯化碳等有机试剂的使用，该工艺无环保压力，符合生态社会的发展要求；

2.本发明绕过了传统的萃取、层析等繁琐的制备操作，制备工艺简单，周期短，易操作，对设备要求低，该工艺制备的人参皂苷Re和Rg1可作为医药原料，杂质少，易于精制，并且制备过程中的乙醇可以回收再利用，工艺成本低，可以适应工业化生产的需要。

3.用本制备方法得到的人参皂苷纯度、收率高，分别可达到98％及70％以上。

具体实施方式

为了使本领域技术人员充分了解本发明，以下通过具体的实施例进一步说明本发明，但本领域技术人员应该知晓，本发明实施例并不以任何方式限制本发明。

实施例1人参皂苷Re和Rg1的制备

取人参茎叶总皂苷50g，加入6倍纯化水，充分搅拌，静置6h，抽滤，分别收集滤液和滤饼，滤饼再次加入6倍纯水，搅拌，过滤，干燥，得人参皂苷Re粗品，向粗品中加入5倍的60％醇水溶液，加热至80℃，溶解后室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物人参皂苷Re，含量为99.58％，收率为86.12％。

滤液蒸干，加入乙醇溶解，拌入3倍得100-200目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量9倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品，向粗品中加入6倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1，含量为99.17％，收率为77.61％。

实施例2人参皂苷Re和Rg1的制备

取人参茎叶总皂苷50g，加入10倍纯化水，充分搅拌，静置8h，抽滤，分别收集滤液和滤饼，滤饼再次加入10倍的纯水，搅拌，过滤，干燥，得人参皂苷Re粗品，向粗品中加入3倍的80％醇水溶液，加热至50℃，溶解后室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物人参皂苷Re，含量为98.80％，收率为82.61％。

滤液蒸干，加入乙醇溶解，拌入3倍的100-200目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量6倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品，向粗品中加入4倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1，含量为98.46％，收率为76.73％。

实施例3人参皂苷Re和Rg1的制备

取人参茎叶总皂苷50g，加入3倍纯化水，充分搅拌，静置8h，抽滤，分别收集滤液和滤饼，滤饼再次加入3倍的纯水，搅拌，过滤，干燥，得人参皂苷Re粗品，向粗品中加入5倍的80％醇水溶液，加热至60℃，溶解后室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物人参皂苷Re，含量为98.14％，收率为83.52％。

滤液蒸干，加入乙醇溶解，拌入5倍得100-200目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量12倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品，向粗品中加入6倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1，含量为98.56％，收率为75.28％。

实施例4人参皂苷Re和Rg1的制备

取人参茎叶总皂苷50g，加入6倍的纯化水，充分搅拌，静置8h，抽滤，分别收集滤液和滤饼，滤饼再次加入6倍的纯水，搅拌，过滤，干燥，得人参皂苷Re粗品，向粗品中加入10倍的30％醇水溶液，加热至80℃，溶解后室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物人参皂苷Re，含量为99.08％，收率为84.20％。

滤液蒸干，加入乙醇溶解，拌入3倍得200-300目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量6倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品，向粗品中加入8倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1，含量为98.89％，收率为74.61％。

实施例5人参皂苷Re和Rg1的制备

取人参茎叶总皂苷50g，加入10倍的纯化水，充分搅拌，静置10h，抽滤，分别收集滤液和滤饼，滤饼再次加入10倍的纯水，搅拌，过滤，干燥，得人参皂苷Re粗品，向粗品中加入5倍的60％醇水溶液，加热至90℃，溶解后室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物人参皂苷Re，含量为98.43％，收率为86.17％。

滤液蒸干，加入乙醇溶解，拌入2倍得200-300目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量6倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品，向粗品中加入8倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1，含量为98.39％，收率为72.22％。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (7)

1.一种人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

步骤一：取人参茎叶总皂苷，加入纯水中，充分搅拌，静置6-10h，过滤，分别收集滤液一和滤饼一；

步骤二：滤饼一中再次加入与步骤一中等体积的纯水，搅拌，过滤，滤饼干燥即为人参皂苷Re粗品；

步骤三：人参皂苷Re粗品加入30％-80％的乙醇水溶液加热至50-90℃溶解，室温冷却后析出人参皂苷Re晶体；

步骤四：滤液一蒸干得黄色粉末，乙醇溶解后，加入硅胶，拌匀，挥干溶剂，乙醇搅拌提取2次，回收乙醇，得人参皂苷Rg1粗品；

步骤五：人参皂苷Rg1粗品中加入丙酮加热回流溶解，室温冷却后析出人参皂苷Rg1晶体。

2.根据权利要求1所述的人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，在步骤一和步骤二中，人参茎叶总皂苷与加水体积的质量体积比为：人参茎叶总皂苷：水＝1：3-1：10。

3.根据权利要求1所述的人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，在步骤三中，所述人参皂苷Re粗品与30％-80％的乙醇水溶液的质量体积比为：人参皂苷Re粗品：30％-80％的乙醇水溶液＝1：3-1：10。

4.根据权利要求1所述的人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，在步骤四中，所述硅胶为100-200目或200-300目，加入的硅胶与滤液一蒸干所得黄色粉末的质量比为：1：2-1：5。

5.根据权利要求1所述的人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，在步骤四中，硅胶及样品总重与乙醇的质量体积比为：乙醇＝1：6-1：12。

6.根据权利要求1所述的人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，在步骤五中，所述人参皂苷Rg1粗品与丙酮的质量体积比为：人参皂苷Rg1粗品：丙酮＝1：4-1：8。

7.一种人参皂苷Re和Rg1的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

步骤一：取人参茎叶总皂苷，加入6倍纯水中，充分搅拌，静置6h，过滤，分别收集滤液一和滤饼一；

步骤二：向步骤一所得的滤饼一中再次加入与步骤一中等体积的纯水，搅拌，过滤，干燥即为人参皂苷Re粗品；

步骤三：向步骤二所得的人参皂苷Re粗品中加入5倍的60％醇水溶液，加热至80℃，溶解后室温冷却析晶，得人参皂苷Re晶体；

步骤四：滤液一蒸干得黄色粉末，乙醇溶解后，拌入3倍的100-200目的硅胶，挥干溶剂，加入总重量9倍的乙醇搅拌提取2次，每次1h，过滤，减压回收乙醇溶液，干燥，得人参皂苷Rg1粗品；

步骤五：向步骤四所得的人参皂苷Rg1粗品中加入6倍的丙酮，加热回流溶解，室温冷却析晶，滤出固体得单体化合物Rg1。