CN113797389B - 一种人体皮肤美容除皱填充剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种人体皮肤美容除皱填充剂及其制备方法。该填充剂的组成成分包括：非动物源性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙和肉毒素。本发明制备的人体皮肤美容除皱填充剂的使用方式为在面部需进行填充部位的真皮层内进行注射。本发明提供的人体皮肤美容除皱填充剂具有美容除皱效果好、安全性高，维持时间长的特点。

Description

一种人体皮肤美容除皱填充剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种美容注射剂技术领域，具体涉及一种人体皮肤美容除皱填充剂及其制备方法。

背景技术

随着年龄的增长以及受外界环境影响，皮肤中胶原蛋白逐渐流失，弹力纤维逐渐老化，皮肤的水分和皮下脂肪减少，使皮肤松弛和生成皱纹。注射美容是将具有美容除皱功效的皮肤填充物注射入真皮层或皮下组织，消除或减轻皮肤的皱褶与松弛状态。

常用的具有美容除皱功效的皮肤填充物有玻尿酸、胶原蛋白等，单纯以某一种活性物质制备填充剂，存在效果不理想或者有效期短等问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种人体皮肤美容除皱填充剂及其制备方法，采用多种具有美容除皱功效的活性物质作为原料制备人体皮肤美容除皱填充剂，制得的填充剂具有美容除皱效果好、安全性高、效果维持时间长等特点。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种人体皮肤美容除皱填充剂，包括以下组分：透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙、肉毒素和溶剂；

所述透明质酸的质量与溶剂的体积比为1g-10g：100mL；

所述类人胶原蛋白的质量与溶剂的体积比为0.5g-10g：100mL；

所述鱼胶原蛋白肽的质量与溶剂的体积比为1g-5g：100mL；

所述抗氧化酶的质量与溶剂的体积比为0.1g-1g：100mL；

所述葡聚糖的质量与溶剂的体积比为0.1g-1g：100mL；

所述羟基磷灰石钙的质量与溶剂的体积比为0.1g-1g：100mL；

所述肉毒素的质量与溶剂的体积比为500-2000U：100mL。

优选地，所述透明质酸包括非动物源性稳定性透明质酸；

所述鱼胶原蛋白肽的分子量为1000-2500道尔顿；

所述抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(SOD酶)；

所述葡聚糖包括交联葡聚糖；

所述羟基磷灰石钙的粒径为20-50μm；

所述肉毒素为A型肉毒素。

优选地，所述溶剂包括注射用水、生理盐水中的任意一种。

优选地，所述生理盐水为质量分数为0.9％的氯化钠溶液。

优选地，所述人体皮肤美容除皱填充剂，还包括麻醉剂；

所述麻醉剂包括枸橼酸芬太尼、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因、依替卡因中的至少一种。

优选地，所述麻醉剂的质量与注射用水的体积比为0.1g-0.5g：100mL。

优选地，所述人体皮肤美容除皱填充剂的使用方式为在面部需进行填充部位的真皮层内进行注射。

优选地，一种人体皮肤美容除皱填充剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙、肉毒素、溶剂和麻醉剂；

(2)在搅拌条件下将透明质酸、葡聚糖加入溶剂中，搅拌至充分润湿溶胀，得到混合液1；

(3)向上述混合液中加入类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、羟基磷灰石钙、肉毒素，搅拌分散均匀，得到混合液2；

(4)灭菌，得到人体皮肤美容除皱填充剂。

优选地，人体皮肤美容除皱填充剂的制备方法，还包括以下步骤：

向步骤(3)制得的混合液2中加入PRP自体血清干细胞，分散均匀；

优选地，所述加入的PRP自体血清干细胞的质量与溶剂的体积比为0.1g-2g：100mL；

优选地，所述PRP自体血清干细胞是从人体血液中分离提取所得，具体包括以下提取步骤：

1)取人体血液；

2)对血液进行离心处理，使血液分层；

3)离心完成后，分层抽取，获得其中的PRP层，即PRP自体血清干细胞；

所述提取步骤均在无菌环境下进行；

所述血液经离心后分为三层，最上层是上清液层，最底层是沉降系数最大的红细胞层，中间较薄一层为PRP层，各层的颜色不同，上清液层的颜色为浅黄色，PRP层的颜色为乳白色，红细胞层的颜色为深红色。

本发明中各原料的功效如下：

非动物源性透明质酸，由细菌发酵生产的透明质酸经有限的交联或修饰反应(稳定化过程)生产出的交联透明质酸，具有传统的透明性酸的美容功效，没有来自异体动物源蛋白导致产生过敏反应或传染导致感染疾病的危险，有效性能时间长，在降解过程中，随着时间的推移，还没有发生降解的透明质酸分子会不断结合水分子，使在注射部位保持着原有体积，直到透明质酸分子完全降解。

类人胶原蛋白为水溶性蛋白，能促进细胞增殖迅速补充体内流失的胶原蛋白、修复断裂纤维框架，使皮肤更加红润光泽、富有弹性，维持肌肤的滋润状态，由人体胶原蛋白经筛选及修饰后构建，在进入人体后其免疫排异反应小，变性温度高，所以易于日常使用和保存。

鱼胶原蛋白肽的蛋白结构与人体的最接近，在人体内最容易被吸收的，不易产生过敏反应，可以增强人体的免疫力，可以抑制脂肪的合成、加速脂肪的分解，且维生素E含量比较丰富，能够对抗自由基，可以在一定程度上美白皮肤，缩小皮下黑色素细胞的体积、能够延缓衰老。

超氧化物歧化酶可以把有害的超氧自由基转化为过氧化氢，有效清除氧自由基，预防色素沉着的同时，清除皮肤中已有的色素沉积物，并增加肌肤的湿润度，使皮肤不绷紧。

葡聚糖，与组织反应产生自体胶原蛋白，可以提高受损皮肤细胞的再生能力，提高皮肤角质层的再生速率，具有帮助伤口复原的特性，功效维持时间长。

羟基磷灰石钙，被认为是一种有效的软组织填充剂，作为软组织内胶原生长的支架，持续时间长，生物适应性好，副作用少，无需作敏源测试。

A型肉毒素，是肉毒杆菌在繁殖中分泌的一种有毒性的蛋白质，注入导致皱纹的肌肉内，会阻断神经递质乙酰胆碱的释放，从而使肌肉张力下降或是肌肉瘫痪麻痹瘫痪，皱纹也随之而逐渐消失，从而达到治疗面部皱纹的效果。

PRP自体血清干细胞中富含血小板和多种生长因子，注入皮肤后能刺激大量胶原蛋白、弹性纤维、胶质等的产生，促进皮肤多个组织的生长及重新排列，从而达到全面提升肌肤状态，延缓衰老。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明的人体皮肤美容除皱填充剂是采用透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙、肉毒素多种具有美容除皱功效的活性物质制得，与人体组织相容性好，美容除皱效果好，能快速填平皱纹与皱褶，并刺激皮肤细胞产生新的胶原蛋白，使皮肤饱满水润，持续时间长，安全性能高。

2.本发明中使用的透明质酸为非动物源性稳定性透明质酸，没有来自异体动物源蛋白导致产生过敏反应或传染导致感染疾病的危险，安全性高。

3.本发明中加入类人胶原蛋白和鱼胶原蛋白肽，类人胶原蛋白具有无病毒隐患、低排异反应、酸碱度为中性、变性温度提高等特点，性质温度、效果好、安全性能高；鱼胶原蛋白肽的蛋白结构与人体的最接近，在人体内最容易被吸收的，不易产生过敏反应。

4.本发明中制备人体皮肤美容除皱填充剂时，还可以加入PRP自体血清干细胞，PRP自体血清干细胞是从人体自身的血液中提取，从根本上杜绝了异源排斥反应，含有多种生长因子，多种自体生长因子可深入整个皮肤组织，调整皮肤全层结构，修复老化、受损的皮肤组织，从而达到改善皮肤质地、收紧及提升面部皮肤、减轻皱纹、凹陷性疤痕、恢复皮肤年轻状态、延缓皮肤衰老的目的。

5.本发明中采用PRP高效分离提取设备提取PRP自体血清干细胞，由于人体自身的血液每次抽取量有限制，而PRP自体血清干细胞在血液中的含量也相对较小，利用该分离设备能确保离心时对称位置的两试管中重量的均衡，达到最高效的离心分层效果，同时通过图像分析，能准备判断分层界限，便于精确抽取各层的成分，提高血液中PRP自体血清干细胞的提取效率。

附图说明

图1为本发明的制备工艺流程图；

图2为本发明中PRP高效分离提取设备的立体结构示意图；

图3为本发明中PRP高效分离提取设备的支撑机构、伞状支架、分层抽取机构和注水机构结构示意图；

图4为本发明中PRP高效分离提取设备的分层抽取机构工作状态的局部剖面示意图；

图5为本发明中PRP高效分离提取设备的注水机构工作状态的局部剖面示意图；

图6为本发明中PRP高效分离提取设备的离心机爆炸示意图；

图7为本发明中PRP高效分离提取设备的试管支座和试管爆炸示意图；

图8为本发明中PRP高效分离提取设备的设备底座结构示意图；

图9为本发明中PRP高效分离提取设备的支撑机构结构示意图；

图10为本发明中PRP高效分离提取设备的分层抽取机构爆炸示意图；

图11为本发明中PRP高效分离提取设备的分层抽取机构局部剖面示意图。

图中：1、设备底座；2、离心机；3、支撑机构；4、支撑主轴；5、第一电机；6、支撑臂；7、连接架；8、第一电推杆；9、第二电推杆；10、离心机主体；11、机盖；12、试管支座；13、放置槽；14、试管；15、摄像头；16、第一齿条；17、第一转轴；18、第二电机；19、第二转轴；20、第二齿条；21、支撑台；22、滑块；23、侧部支板；24、轴座；25、放置槽；26、导向槽；27、螺杆；28、第三电机；29、注射器支座；30、第一连接板；31、通孔；32、凹槽；33、空筒；34、限位端部；35、U形压板；36、拉把；37、复位弹簧；38、套筒；39、滑道；40、第二连接板；41、水箱支架；42、水箱；43、注水管。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种人体皮肤美容除皱填充剂，包括以下组分：非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、生理盐水、麻醉剂盐酸利多卡因；

所述非动物源性稳定性透明质酸的质量与生理盐水的体积比为1.0g：100mL；

所述类人胶原蛋白的质量与生理盐水的体积比为0.5g：100mL；

所述鱼胶原蛋白肽的质量与生理盐水的体积比为1.0g：100mL；

所述超氧化物歧化酶的质量与生理盐水的体积比为0.1g：100mL；

所述交联葡聚糖的质量与生理盐水的体积比为0.1g：100mL；

所述羟基磷灰石钙的质量与生理盐水的体积比为0.1g：100mL；

所述A型肉毒素的质量与生理盐水的体积比为500U：100mL；

所述麻醉剂盐酸利多卡因的质量与注射用水的体积比为0.2g：100mL。

包括以下制备步骤：

(1)称取非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、生理盐水和麻醉剂盐酸利多卡因；

(2)在搅拌条件下将非动物源性稳定性透明质酸、交联葡聚糖加入溶剂中，搅拌至充分润湿溶胀，得到混合液1；

(3)向混合液1中加入类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、羟基磷灰石钙、A型肉毒素，搅拌分散均匀，得到混合液2；

(4)灭菌，得到人体皮肤美容除皱填充剂。

实施例2

一种人体皮肤美容除皱填充剂，包括以下组分：非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、注射用水、麻醉剂枸橼酸芬太尼；

所述非动物源性稳定性透明质酸的质量与注射用水的体积比为10g：100mL；

所述类人胶原蛋白的质量与注射用水的体积比为10g：100mL；

所述鱼胶原蛋白肽的质量与注射用水的体积比为5g：100mL；

所述超氧化物歧化酶的质量与注射用水的体积比为1g：100mL；

所述交联葡聚糖的质量与注射用水的体积比为1g：100mL；

所述羟基磷灰石钙的质量与注射用水的体积比为1g：100mL；

所述A型肉毒素的质量与注射用水的体积比为2000U：100mL；

所述麻醉剂枸橼酸芬太尼的质量与注射用水的体积比为0.5g：100mL。

包括以下制备步骤：

(1)称取非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、注射用水和麻醉剂枸橼酸芬太尼；

(2)在搅拌条件下将非动物源性稳定性透明质酸、交联葡聚糖加入溶剂中，搅拌至充分润湿溶胀，得到混合液1；

(3)向混合液1中加入类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、羟基磷灰石钙、A型肉毒素，搅拌分散均匀，得到混合液2；

(4)灭菌，得到人体皮肤美容除皱填充剂。

实施例3

一种人体皮肤美容除皱填充剂，包括以下组分：非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、注射用水、麻醉剂依替卡因、麻醉剂利多卡因；

所述非动物源性稳定性透明质酸的质量与注射用水的体积比为5g：100mL；

所述类人胶原蛋白的质量与注射用水的体积比为5g：100mL；

所述鱼胶原蛋白肽的质量与注射用水的体积比为3g：100mL；

所述超氧化物歧化酶的质量与注射用水的体积比为0.5g：100mL；

所述交联葡聚糖的质量与注射用水的体积比为0.5g：100mL；

所述羟基磷灰石钙的质量与注射用水的体积比为0.5g：100mL；

所述A型肉毒素的质量与注射用水的体积比为1000U：100mL；

所述麻醉剂麻醉剂依替卡因的质量为与注射用水的体积比为0.2g：100mL；麻醉剂利多卡因的质量与注射用水的体积比为0.2g：100mL。

包括以下制备步骤：

(1)称取非动物源性稳定性透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、超氧化物歧化酶、交联葡聚糖、羟基磷灰石钙、A型肉毒素、注射用水、麻醉剂依替卡因和麻醉剂利多卡因；

(2)在搅拌条件下将非动物源性稳定性透明质酸、交联葡聚糖加入溶剂中，搅拌至充分润湿溶胀，得到混合液1；

(3)向混合液1中加入类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、PRP自体血清干细胞、超氧化物歧化酶、羟基磷灰石钙、A型肉毒素，搅拌分散均匀，得到混合液2；

(4)灭菌，得到人体皮肤美容除皱填充剂。

实施例4

与实施例1相比，制备步骤中还包括向混合液2中加入PRP自体血清干细胞，加入的PRP自体血清干细胞的质量与生理盐水的体积比为0.1g：100mL，其他条件不变；

实施例1-4中的非动物源性稳定性透明质酸为瑞典Q-Med公司生产的瑞蓝二号；类人胶原蛋白由陕西嘉果肽生物工程有限公司提供(白色粉末，溶于水)；鱼胶原蛋白肽由西安全奥生物科技有限公司提供，分子量为1000道尔顿(白色粉末，溶于水)；超氧化物歧化酶由西安洛神生物科技有限公司提供，产品规格：20000IU/g(IU：酶活力国际单位)，产品性状：白色粉末，能快速溶解，溶液澄清透明；交联葡聚糖采用DEAE-Sephadex A-50(上海泽叶生物科技有限公司)。

对比例1

对比例1中，与实施例1相比较，不加入超氧化物歧化酶，其他条件不变。

对比例2

对比例2中，与实施例1相比较，不加入羟基磷灰石钙，其他条件不变。

对比例3

对比例1中，与实施例1相比较，不加入非动物源性透明质酸，其他条件不变。

实施例5

本实施例公开了一种PRP高效分离提取设备，上述实施例4中制备人体皮肤美容除皱填充剂时，加入的PRP自体血清干细胞，是将人体血液在该设备中分离提取所得。

如图2-11所示，该PRP高效分离提取设备，包括设备底座1、离心机2、支撑机构3、伞状支架、分层抽取机构和注水机构，设备底座1上设置有离心机2和支撑机构3，离心机2用于对血液进行离心处理，使血液分层；

伞状支架安装在支撑机构3上，伞状支架包括支撑主轴4、第一电机5、支撑臂6和连接架7，支撑主轴4和第一电机5驱动轴固定连接，支撑臂6通过连接架7固定安装在支撑主轴4四周，其中三个支撑臂6末端分别设置有分层抽取机构，另外一个支撑臂6末端设置有注水机构；

支撑臂6末端均开设有安装孔，安装孔上分别安装有第一电推杆8和第二电推杆9，第一电推杆8和第二电推杆9的活动端分别连接在分层抽取机构和注水机构上。

进一步地，离心机2包括离心机主体10、机盖11、试管支座12，离心机主体10和机盖11通过可拆卸结构装配，使得机盖11呈打开状态时能够完全从离心机主体10上端分离，试管支座12设置在离心机主体10内部，试管支座12上均匀开设有放置槽13，放置槽13分别用于放置试管14，试管支座12中间部分呈凹陷状，试管14位于凹陷位置的管身半侧裸露在试管支座12外部；离心机主体10内壁表面均匀开设有设备槽，设备槽与放置槽13的位置一一对应，设备槽内均设置有摄像头15，从而装在试管14内的血液经离心机2离心分层后，通过摄像头15分别对拍摄方向正前侧的试管14进行图像拍摄，能够拍摄出试管14内无视觉误差的分层图。此外，具体应用时，试管14的密封盖与管身通过螺纹装配，试管14的密封盖中间位置处设置有软橡胶层；设备底座1上设置有控制面板，通过控制面板对离心机2进行参数设定，且摄像头15的拍摄画面能够清晰显示在控制面板显示屏上，工作人员能够通过试管14外壁上的刻度值读取上清液层、PRP层、红细胞层相邻分层线的刻度值，并将数据输入控制面板的相应模块，系统通过对各组数值进行计算，能够将分层抽取机构对相应试管14内分别抽取上层的上清液层、中层的PRP层、下层的红细胞层时第一电推杆8的伸出距离设定出来。

进一步地，离心机主体10外壁表面设置有第一齿条16，离心机主体10底端设置有第一转轴17，设备底座1上表面开设有圆槽和第一圆孔，第一转轴17和圆槽的内壁转动配合且配合处设置有第一轴承，第一圆孔下侧开设有第一电机箱，第一电机箱内部设置有第二电机18，第一电机箱一侧设置有第一箱门，第一箱门上开设有第一散热孔，第二电机18上端设置有第二转轴19，第二转轴19与第一圆孔内壁转动配合且配合处设置有第二轴承，第二转轴19上端部分的外壁表面设置有第二齿条20，第一齿条16和第二齿条20相互啮合，从而通过第二电机18带动第二转轴19转动，在第一齿条16和第二齿条20的啮合传动下带动离心机主体10转动，进而带动离心机2整体转动，使得试管支座12上放置的试管14能够调节位置。

进一步地，支撑机构3包括支撑台21、滑块22、侧部支板23和轴座24，滑块22设置在支撑台21底部，第一电机5固定安装在支撑台21上侧的中间位置，侧部支板23下端分别与支撑台21两端固定连接，侧部支板23上端分别与轴座24外壁两侧固定连接，支撑主轴4和轴座24内壁转动配合且配合处设置有第三轴承；设备底座1上表面开设有放置槽25，放置槽25底面开设有导向槽26，滑块22滑动装配在导向槽26内部，导向槽26两侧分别开设有第二圆孔，两个第二圆孔之间转动装配有螺杆27且两者配合处分别设置有第四轴承，螺杆27与滑块22通过螺纹配合，设备底座1内部设置有第二电机箱，其中一个第二圆孔与第二电机箱连通，第二电机箱内固定安装有第三电机28，第二电机箱一侧设置有第二箱门，第二箱门上开设有第二散热孔，第三电机28的驱动轴与螺杆27一端固定连接，从而通过第三电机28带动螺杆27转动，使得与螺杆27螺接的滑块22沿着导向槽26滑动，滑块22带动支撑台21移动，使得安装在支撑台21上的第一电机5移动，进而带动整个伞状支架及安装在伞状支架上的分层抽取机构和注水机构移动。

进一步地，分层抽取机构包括注射器支座29、第一连接板30、注射器，第一连接板30设置在注射器支座29一端，第一电推杆8活动端分别固定连接在第一连接板30上，注射器支座29表面开设有通孔31和凹槽32，凹槽32位于通孔31上端位置，注射器包括空筒33和限位端部34，限位端部34设置在空筒33顶端，通孔31与空筒33的口径尺寸一致，凹槽32和限位端部34形状尺寸一致，从而注射器直接套设在通孔31上，便于更换；注射器还包括针头、活塞、活塞轴和活塞柄，针头设置在空筒33底端，活塞设置在空筒33内部，活塞柄位于空筒33外部，活塞轴连接在活塞和活塞柄之间。

进一步地，分层抽取机构还包括U形压板35、拉把36和复位弹簧37，拉把36设置在U形压板35的封闭端上侧，复位弹簧37分别设置在U形压板35的封闭端侧壁上，注射器支座29上端设置有套筒38，套筒38上表面开设有滑道39，U形压板35与套筒38内壁滑动配合，拉把36贯穿滑道39，复位弹簧37末端分别与套筒38内壁固定连接，从而通过拉动拉把36带动U形压板35缩回套筒38内，复位弹簧37被压缩，将注射器套设在通孔31上后，松开拉把36，复位弹簧37弹出复位，带动U形压板35从套筒38内弹出并压在限位端部34上，使得注射器固定在注射器支座29；在第三电机28带动伞状支架移动至靠近离心机2时，通过第一电推杆8带动第一连接板30下降先前设定的距离，第一连接板30带动注射器支座29下降，进而带动注射器沿着对应的试管14的倾斜方向下降，注射器的针头刺破试管14密封盖上的软橡胶层并伸至试管14内，直至到达上清液与PRP或PRP与红细胞的分层界限处，通过拉动活塞柄带动活塞上升，通过针头将试管14内位于针头液面以上的血液成分抽取出来。进一步地，注水机构包括第二连接板40、水箱支架41、水箱42和注水管43，第二电推杆9活动端与第二连接板40固定连接，水箱支架41与第二连接板40固定连接，水箱42设置在水箱支架41上，水箱42底端设置有注水管43，注水管43上设置有电磁阀；放置槽13内部底端设置有压力传感器，试管14放置在放置槽13内部时压力传感器的压力检测面与试管14底端接触，从而通过第二电推杆9能够带动第二连接板40升降，第二连接板40带动水箱支架41及设置在水箱支架41上的水箱42升降，注水管43伸至未盖盖的空试管14管口处，即可控制电磁阀开启将水箱42内的水注入该试管14内；试管14分别对放置槽13底部的压力传感器施压，且压力传感器所检测到的压力值能够在控制面板显示屏上显示，对需要配重的放置槽13内空的试管14注水，在该放置槽13对应的压力传感器检测到的压力值达到所需的压力值范围时，通过控制电磁阀关闭停止注水，即可保证试管支座12上放置的试管14重量均衡。此外，具体应用时，试管14密封盖重量极轻。

在使用时，将装有自身血液并拧紧密封盖的试管14分别放置在放置槽13内，且保证各个试管14在试管支座12上的位置重量均衡，若装有血液的试管14无法分布均匀，在需要配重的放置槽13内放置空的试管14，通过第一电机5带动支撑主轴4转动，支撑主轴4带动支撑臂6转动，使注水机构转动至最靠近离心机2的位置；通过第二电推杆9带动注水机构下降，注水管43伸至未盖盖的空试管14管口处，控制电磁阀开启将水箱42内的水注入该试管14内，直至该试管14对应的压力传感器检测到的压力值达到所需的压力值范围，控制电磁阀关闭停止注水，对该注水的试管14盖盖，即可保证试管支座12上放置的试管14重量均衡；

通过第三电机28带动螺杆27转动，使得滑块22沿着导向槽26滑动，滑块22带动支撑台21移动，使得安装在支撑台21上的第一电机5移动，进而带动整个伞状支架移动至远离离心机2的一端；将机盖11安装在离心机主体10上端并锁定，通过控制面板对离心机2进行参数设定，启动离心机2对试管14内的血液进行离心，离心完成后，试管14内的血液形成上清液层、PRP层、红细胞层；通过摄像头15分别对拍摄方向正前侧的试管14进行拍摄，拍摄画面清晰显示在控制面板显示屏上，工作人员读取上清液层、PRP层、红细胞层相邻分层线对应的刻度值，并将数据输入控制面板的相应模块；

打开机盖11，通过第三电机28带动伞状支架移动至靠近离心机2的一端，通过第二电机18带动第二转轴19转动，在第一齿条16和第二齿条20的啮合传动下带动离心机2整体转动，使试管支座12上放置的装有分层的血液的其中一个试管14位于最靠近伞状支架的位置；通过第一电机5带动与注水机构相邻的一个分层抽取机构转动至最靠近该试管14的位置，通过相应的第一电推杆8带动该分层抽取机构下降，注射器的针头刺破试管14密封盖上的软橡胶层并伸至试管14内，直至到达上清液层与PRP层的分层界限处，拉动活塞柄即可将上清液抽取出来；

上清液抽取完毕后，通过第一电推杆8带动分层抽取机构上升复位，通过其他两个分层抽取机构，重复如上述对上清液层的抽取操作，依次分别将该试管14内的PRP层和红细胞层抽取出来；完成对该试管14的PRP分离提取后，将装有上清液层、PRP层、红细胞层的注射器一一取下并更换新的注射器，通过第二电机18带动离心机2转动，使其他装有分层的血液的试管14依次转动至最靠近伞状支架的位置，重复上述分层抽取操作，将各个装有分层的血液的试管14内的上清液层、PRP层、红细胞层分别抽取出来。

进一步地，通过摄像头分别对正前侧的试管进行拍摄，拍摄出无视觉误差的血液分层图像，通过图像读取上清液层、PRP层、红细胞层相邻分层线对应的刻度值，在控制面板输入数据，系统对各组数据进行计算来设定第一电推杆的伸缩长度，通过第一电推杆带动分层抽取机构下降，使注射器针头能够精准位于上清液层与PRP层或PRP层与红细胞层的分层界限处，工作人员只需拉动活塞柄就能够通过注射器将试管内位于针头液面以上的血液成分抽取出来，操作方便且抽取出来的PRP成分精度高。

进一步地，通过第一电推杆带动分层抽取机构下降时，注射器沿着对应的试管的倾斜方向下降，注射器的针头刺破试管密封盖上的软橡胶层并伸至试管内，能够在试管不从离心机中取出且试管密封盖不打开的情况下对血液的各成分进行抽取，有效防止血液成分暴露在空气中造成细菌感染。

进一步地，通过拉动拉把带动U形压板缩回套筒内，复位弹簧被压缩，将注射器套设在通孔上后，松开拉把，复位弹簧弹出复位，带动U形压板从套筒内弹出并压在限位端部上，使得注射器固定在注射器支座，在操作注射器时只需拉动活塞柄就能通过针头将血液中的各成分抽取出来，且注射器便于更换，提高了操作的便利性。

进一步地，通过第二电机带动第二转轴转动，在第一齿条和第二齿条的啮合传动下带动离心机整体转动，使得试管支座上放置的试管能够调节位置。

进一步地，通过第三电机带动螺杆转动，使得与螺杆螺接的滑块沿着导向槽滑动，滑块带动支撑台移动，进而带动伞状支架及分层抽取机构和注水机构移动，以便于配合设备其他组件的运转。

进一步地，通过第二电推杆带动注水机构下降，注水管伸至未盖盖的空试管管口处，控制电磁阀开启将水箱内的水注入该试管内，直至该试管对应的压力传感器检测到的压力值达到所需的压力值范围，控制电磁阀关闭停止注水，即可保证试管支座上放置的试管重量均衡。

试验例

(1)选取年龄在35-45岁的60名志愿者，随机分成6组，分别标记为测试1组、测试2组、测试3组、测试4组、测试5组、测试6组，每组10人，分别对实施例1-3与对比例1-3制备的人体皮肤美容除皱填充剂进行性能测试。

测试方法：将填充剂注射于志愿者的左侧眼角部位，测试1组注射实施例1中制备的填充剂，测试2组注射实施例2中制备的填充剂，测试3组注射实施例3中制备的填充剂，测试4组注射对比例1中制备的填充剂，测试5组注射对比例2中制备的填充剂，测试6组注射对比例3中制备的填充剂，注射量均为0.2mL。

记录分析左侧眼角部位的皱纹变化情况，评价标准分为：(1)显著有效：皱纹明显减少，皮肤光滑平整、滋润不紧绷；(2)有效：皱纹有所减少，皮肤褶皱变浅；(3)无效：无明显变化；(4)不良反应：肿胀、硬块结节；

于注射后1个月、6个月、12个月各记录一次。

观察测试效果，结果如表1所示。

(2)对按实施例4的制备方法制得的人体皮肤美容除皱填充剂进行性能测试，具有方法为：

1)从测试1组的10名志愿者分别标记为志愿者1号、志愿者2号、志愿者3号、志愿者4号、志愿者5号、志愿者6号、志愿者7号、志愿者8号、志愿者9号、志愿者10号，分别从他们的血液中分离提取PRP自体血清干细胞，并分别按实施例4的方法制备人体皮肤美容除皱填充剂；

2)将加入从志愿者1号血液中分离提取的PRP自体血清干细胞制得的人体皮肤美容除皱填充剂注射于志愿者1号的右侧眼角部位，将加入从志愿者2号血液中分离提取的PRP自体血清干细胞制得的人体皮肤美容除皱填充剂注射于志愿者2号的右侧眼角部位，依次类推，分别将加入从对应的志愿者血液中分离提取的PRP自体血清干细胞制得的人体皮肤美容除皱填充剂注射于该志愿者的右侧眼角部位，注射量均为0.2mL，即测试1组中的志愿者均是左侧眼角部位注射了实施例1中制备的填充剂，测试1组中的志愿者均是左侧眼角部位注射了实施例1中制备的填充剂，右侧眼角部位等量注射了实施例4方法制备的填充剂。

观察10名志愿者两侧眼角部位的测试效果，记录分析右侧眼角部位的皱纹变化情况，评价标准分为：(1)显著有效：皱纹明显减少，皮肤光滑平整、滋润不紧绷；(2)有效：皱纹有所减少，皮肤褶皱变浅；(3)无效：无明显变化；(4)不良反应：肿胀、硬块结节，于注射后1个月、6个月、12个月各记录一次，并与试验例(1)中注射实施例1的测试结果相对比，测试结果如表2所示。

表1

从表1中可以看出，本发明制备的人体皮肤美容除皱填充剂具有较好的美容除皱效果，无不良反应发生，且功效维持时间长。实施例2中各有效组分含量相对较高，美容除皱效果最好；与实施例1相比较，对比例1中不加入超氧化物歧化酶，清除皮肤中自由基的能力降低，美容除皱效果略有降低；与实施例1相比较，对比例2中不加入羟基磷灰石钙，缺少皮肤组织内胶原生长的支架，美容除皱效果有所降低；与实施例1相比较，对比例3中不加入非动物源性透明质酸，美容除皱效果有所降低，且美容除皱的效果维持的时间短。

表2

从表2中可以看出，按实施例4的制备方法制得的人体皮肤美容除皱填充剂较实施例1中制得人体皮肤美容除皱填充剂，具有更好的美容除皱效果。由表1可知，测试1组中注射后1个月“显著有效”的是7人，即表2中的志愿者1号、志愿者3号、志愿者4号、志愿者6号、志愿者7号、志愿者9号、志愿者10号；“有效”的是3人，即表2中的志愿者2号、志愿者5号、志愿者8号；测试1组中注射后6个月“显著有效”的是7人，即表2中的志愿者1号、志愿者3号、志愿者4号、志愿者6号、志愿者7号、志愿者9号、志愿者10号；“有效”的是3人，即表2中的志愿者2号、志愿者5号、志愿者8号；测试1组中注射后12个月“显著有效”的是6人，即表2中的志愿者1号、志愿者3号、志愿者4号、志愿者7号、志愿者9号、志愿者10号；“有效”的是4人，即表2中的志愿者2号、志愿者5号、志愿者6号、志愿者8号。由表可知，使用按实施例4的制备方法制得的人体皮肤美容除皱填充剂，注射后1个月，10名志愿者的美容除皱效果均为“显著有效”，注射后6个月，除了志愿者2号，美容除皱效果均为“显著有效”，注射后12个月，除了志愿者2号和志愿者6号，美容除皱效果均为“显著有效”。由此可见，加入了PRP自体血清干细胞，制备的除皱填充剂不仅美容除皱效果更好，且维持更长。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (6)

1.一种人体皮肤美容除皱填充剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）称取透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙、肉毒素、溶剂和麻醉剂；

（2）在搅拌条件下将透明质酸、葡聚糖加入溶剂中，搅拌至充分润湿溶胀，得到混合液1；

（3）向混合液1中加入类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、羟基磷灰石钙、肉毒素，搅拌分散均匀，得到混合液2；

（4）向步骤（3）制得的混合液2中加入PRP自体血清干细胞，分散均匀；

（5）灭菌，得到人体皮肤美容除皱填充剂；

所述PRP自体血清干细胞是从人体血液中分离提取所得，通过如下分离提取设备提取，包括设备底座（1）、离心机（2）、支撑机构（3）、伞状支架、分层抽取机构和注水机构，其特征在于：所述设备底座（1）上设置有所述离心机（2）和所述支撑机构（3），所述离心机（2）用于对血液进行离心处理，使血液分层；

所述伞状支架安装在所述支撑机构（3）上，所述伞状支架包括支撑主轴（4）、第一电机（5）、支撑臂（6）和连接架（7），所述支撑主轴（4）和所述第一电机（5）驱动轴固定连接，所述支撑臂（6）通过所述连接架（7）固定安装在所述支撑主轴（4）四周，其中三个所述支撑臂（6）末端分别设置有所述分层抽取机构，另外一个所述支撑臂（6）末端设置有注水机构；

所述支撑臂（6）末端均开设有安装孔，所述安装孔上分别安装有第一电推杆（8）和第二电推杆（9），所述第一电推杆（8）和所述第二电推杆（9）的活动端分别连接在所述分层抽取机构和所述注水机构上；

具体包括以下提取步骤：

1）取人体血液；

2）对血液进行离心处理，使血液分层；

3）离心完成后，分层抽取，获得其中的PRP层，即PRP自体血清干细胞。

2.一种人体皮肤美容除皱填充剂，通过如权利要求1所述的制备方法得到，其特征在于，包括以下组分：透明质酸、类人胶原蛋白、鱼胶原蛋白肽、抗氧化酶、葡聚糖、羟基磷灰石钙、肉毒素和溶剂；

所述透明质酸的质量与溶剂的体积比为1 g-10 g：100 mL；

所述类人胶原蛋白的质量与溶剂的体积比为0.5 g-10 g：100 mL；

所述鱼胶原蛋白肽的质量与溶剂的体积比为1 g-5 g：100 mL；

所述抗氧化酶的质量与溶剂的体积比为0.1 g-1 g：100 mL；

所述葡聚糖的质量与溶剂的体积比为0.1 g-1 g：100 mL；

所述羟基磷灰石钙的质量与溶剂的体积比为0.1 g-1 g：100 mL；

所述肉毒素的质量与溶剂的体积比为500-2000 U：100 mL。

3.根据权利要求2所述的一种人体皮肤美容除皱填充剂，其特征在于，所述透明质酸包括非动物源性稳定性透明质酸；

所述鱼胶原蛋白肽的分子量为1000-2500道尔顿；

所述抗氧化酶包括超氧化物歧化酶；

所述葡聚糖包括交联葡聚糖；

所述羟基磷灰石钙的粒径为20-50 μm；

所述肉毒素为A型肉毒素。

4.根据权利要求3所述的一种人体皮肤美容除皱填充剂，其特征在于，所述溶剂包括注射用水、生理盐水中的任意一种。

5.根据权利要求4所述的一种人体皮肤美容除皱填充剂，其特征在于，还包括麻醉剂；

所述麻醉剂包括枸橼酸芬太尼、盐酸丁卡因、盐酸利多卡因、依替卡因中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的一种人体皮肤美容除皱填充剂，其特征在于，所述麻醉剂的质量与注射用水的体积比为0.1 g-0.5 g：100 mL。

Images