CN113748987A - 一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于诱变魔芋育种技术领域，具体涉及一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法。具体包括：将魔芋球茎消毒后，切块接种于愈伤组织诱导培养基，将愈伤组织，一部分切分转接至愈伤组织继代培养基，再将预培养长出的新愈伤切下转至质量分数0.2％‑0.8％的EMS溶液中培养；另一部分愈伤组织转接于丛生芽诱导分化培养基，将诱导长出的丛生芽按单芽进行切分，转至质量百分比0.4％‑1.2％EMS溶液中培养；将处理的愈伤组织继代培养2‑3次，处理的丛生芽单芽继代培养1‑2次，然后筛选获得耐硒及富硒能力强的诱变愈伤组织和诱变丛生芽，诱导分化获得富硒魔芋突变体。该富硒魔芋突变体经无性扩繁和大田富硒品比试验，成功选育系列富硒魔芋新品系，极大加快了魔芋新育种的进程。
Description
技术领域
本发明属于诱变魔芋育种技术领域，具体涉及一种诱变产生富硒魔芋突变 体的方法。
背景技术
甲基磺酸乙酯(ethy-methan-sulfonate，EMS)是一种常用且能有效改变DNA 结构的烷化剂，能诱发产生高密度的系列等位基因点突变，诱变具有操作简单、 突变频率高、突变专一性与多效性等优点。目前作为植物种质资源创制和新品 种培育的重要方法之一，已被广泛应用与大田作物及园林植物育种中。
地处秦岭腹地的安康市作为全国主要的硒源地之一，被誉为“中国硒谷”； 而魔芋作为安康市的农业五大主导产业之一，是陕南山区的特色优势产业之一。 因此，将两者进行有机结合，符合当前发展与应用的需要。但从目前已有的魔芋 品种及地方种的富硒情况来看，魔芋属于低聚硒作物，耐硒能力差，球茎及芋鞭 等主要器官富硒能力弱，加工后的精粉中硒含量更低，甚至检测不出硒。所以， 选育富硒魔芋品种势在必行。
发明内容
本发明目的是为克服已有技术的不足，提高一种分化率高，容易出现富硒 魔芋突变体的育种方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，包括以下步骤：
S1、将魔芋三龄球茎消毒、切块后接种于愈伤组织诱导培养基进行培养， 得愈伤组织；
S2、将一部分愈伤组织切分转接至愈伤组织继代培养基进行继代培养，将 培养长出的新愈伤组织切下，转至质量百分比0.2％-0.8％的EMS溶液中，于 室温、黑暗、无菌环境下振荡培养4-8h，除去EMS溶液得诱变愈伤组织；
将另一部分愈伤组织转接于丛生芽诱导分化培养基分化培养得丛生芽，将 丛生芽按单芽进行切分，转至质量百分比0.4％-1.2％的EMS溶液中，于室温、 黑暗、无菌环境下振荡培养6-18h，除去EMS溶液得诱变丛生芽；
S3、将诱变愈伤组织于愈伤组织继代培养基中重复继代培养2-3次，后转 接至含有16-64mg/L Na2SeO3的愈伤组织继代培养基中培养20-25天；将诱变丛 生芽单芽转接至芽分化继代培养基中重复继代培养1-2次，后转接至含 32-200mg/L Na2SeO3的芽分化继代培养基中培养15-20天；筛选获得耐硒及富 硒能力强的诱变愈伤组织和诱变丛生芽，诱导分化获得再生植株，即富硒魔芋 突变体。
进一步的，S1的消毒具体为：挑选球茎光滑完整、无疤痕、无伤口、芽头 饱满的魔芋三龄球茎，先用流水洗净球茎表面，质量分数0.1％的升汞浸泡处理 40-45min，倒净升汞，无菌水冲洗4-6次；然后质量分数75％的乙醇浸泡2-3min， 倾去乙醇，无菌水冲洗2-3次，无菌滤纸吸干球茎表面水分。
进一步的，S1的诱导培养条件为：暗培养30-35天，维持环境温度25℃±3℃， 相对湿度60％-80％。
进一步的，S2的愈伤组织继代培养基组成为：MS基础成分+1-3mg/L 6-BA+0.5-1mg/L KT+0.5-1.0mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5；
丛生芽诱导分化培养基组成为：MS基础成分+1-3mg/L 6-BA+0.5-1mg/L KT+0.5-1.0mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。
更进一步的，S2的继代培养条件为：暗培养20-25天，环境温度25℃±3℃， 相对湿度60％-80％；
分化培养条件为：培养40-50天，昼/夜光照时间比16h/8h、光照强度 1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％。
进一步的，S2的EMS溶液由由0.1mol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液配制。
进一步的，S3的芽分化继代培养基组成为：MS基础成分+0.5-1mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L KT+0.1-0.2mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。
更进一步的，S3的丛生芽单芽继代培养条件为：昼/夜光照时间比12h/12h、 光照强度1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明的方法可明显提高魔芋愈伤组织和丛生芽单芽的分化率，降低褐化 死亡率，并且容易出现富硒魔芋突变体，将富硒魔芋突变体进行连续3-4代的 无性扩繁和3年的大田富硒品比试验，成功选育系列富硒魔芋新品系。本发明 操作简便，方法成熟、稳定，易于推广，对加快富硒魔芋新品种的选育起到了 极大的促进作用。
附图说明
图1为本发明实施例1所育的富硒魔芋新品系AM-19-02的照片。
图2为本发明实施例2所育的富硒魔芋新品系AM-20-04的照片。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明 的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟 知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商 业途径得到。
本发明提供的一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，具体包括以下步骤：
1、愈伤组织诱变产生富硒魔芋突变体
1.1材料筛选消毒：挑选球茎光滑完整、无疤痕、无伤口、芽头饱满的魔芋 三龄球茎，先用流水洗净球茎表面，质量分数0.1％的升汞浸泡处理40-45min， 倒净升汞，无菌水冲洗4-6次；然后质量分数75％的乙醇浸泡2-3min，倾去乙 醇，无菌水冲洗2-3次，无菌滤纸吸干球茎表面水分。
1.2愈伤组织诱导：于超净台上将球茎均分成1cm3大小接种于愈伤组织诱 导培养基中，愈伤组织诱导培养基为MS基础成分+2-4mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L NAA+0.05-0.1mg/L2,4-D+30-50g/L蔗糖，pH5.8-6.5。暗培养30-35天，维持环 境温度25℃±3℃，相对湿度60％-80％。
1.3预培养(继代)：挑选结构紧实、组织松散、颜色鲜艳且表面呈颗粒状 的愈伤组织于超净台上均分成1cm3大小，接种于愈伤组织继代培养基。继代培 养基为MS基础成分+1-2mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L NAA+20-40g/L蔗糖， pH5.8-6.5。暗培养20-25天，维持环境温度25℃±3℃，相对湿度60％-80％。
1.4EMS浸泡处理：
(1)将预培养长出的新愈伤组织切下，确保每个新切分的愈伤组织大小及 生长势等基本一致。
(2)将切下的新愈伤组织转至装有质量百分比0.2％-0.8％EMS溶液的无 菌三角瓶中，于室温、黑暗、无菌环境下120rpm/min振荡培养4-8h。
(3)倾去诱变剂，用无菌水冲洗6-8次,无菌滤纸吸去多余水分，将处理 的愈伤组织重新转接至继代培养基上，继续暗培养，维持环境温度25℃±3℃， 相对湿度60％-80％。
(4)将继代2-3次的愈伤组织切分转接至含有16-64mg/L的Na2SeO3继代 培养基上暗培养20-25天，维持环境温度25℃±3℃，相对湿度60％-80％，每 天观察记录不同硒浓度下愈伤组织生长及褐化死亡情况。
(5)挑选不同硒浓度下生长良好的愈伤组织进行硒含量检测，根据耐硒及 富硒能力的强弱对愈伤组织进行初步标记，然后再反复继代筛选2-3次，经不 断选择，最终确定各愈伤组织突变体材料的耐硒和富硒能力，接着诱导丛生芽 分化，获得再生植株，移栽，收获原原种。
2、丛生芽单芽诱变产生富硒魔芋突变体
2.1材料筛选消毒：同1.1。
2.2愈伤组织诱导：同1.2。
2.3诱导分化培养：挑选结构紧实、组织松散、颜色鲜艳且表面呈颗粒状的 新愈伤组织于超净台上均分成1cm3大小，接种于丛生芽诱导分化培养基。丛生 芽诱导分化培养基为：MS基础成分+1-3mg/L 6-BA+0.5-1mg/L KT+0.5-1.0mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。培养40-50天，光照时间(昼/夜)16h/8h、 光照强度1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％，得到丛生芽。
2.4EMS浸泡处理：
(1)将诱导长出的丛生芽按单芽进行切分，确保每个新切分的单芽基部保 留有部分愈伤组织，每个单芽重1.10-1.45g。
(2)将切分的单芽转至装有质量百分比0.4％-1.2％EMS溶液的无菌三角 瓶中，于室温、黑暗、无菌环境下120rpm/min振荡培养6-18h。
(3)倾去诱变剂，用无菌水冲洗6-8次,无菌滤纸吸去多余水分，将处理 的单芽转接至芽分化继代培养基上，继代培养基为MS基础成分+0.5-1mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L KT+0.1-0.2mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。光照时间 (昼/夜)12h/12h、光照强度1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％。
(4)将继代1-2次的丛生芽继续切分成单芽，转接至含有32-200mg/L的 Na2SeO3芽分化继代培养基上培养15-20天，维持环境温度25℃±3℃，相对湿 度50％-60％，光照时间(昼/夜)12h/12h、光照强度1500-2000lx，每天观察记 录不同硒浓度下单芽的生长及褐化死亡情况。
(5)挑选不同硒浓度下生长良好的单芽进行硒含量检测，根据耐硒及富硒 能力的强弱对各单芽进行初步标记，然后再反复继代筛选2-3次，经不断选择， 最终确定各单芽突变体材料的耐硒和富硒能力，诱导分化获得再生植株，移栽， 收获原原种。
优选的，本发明提供的一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，包括以下预 实验。
预实验1：筛选诱变魔芋愈伤组织的EMS溶液浓度及诱变处理时间
(1)以下预实验涉及如下植物品种：岚皋花魔芋。
(2)以上品种为安康当地主栽花魔芋品种，可市购，或向育种单位购买。
(3)EMS溶液由0.1mol/L(pH7.0)NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液配制， 具体设置的梯度为：0、0.1％、0.2％、0.4％、0.8％和1.2％，诱导处理时间为 2h、4h、8h、12h。研究结果表明，随着EMS溶液浓度的增加和处理时间的延 长，愈伤组织褐化死亡率逐渐上升，而分化率逐渐降低。其中采用0.1％处理2-12h时，褐化死亡率均较低，大部分愈伤均能正常分化；采用1.2％EMS溶液 处理2h-12h时，愈伤组织褐化死亡率均达到65％以上，分化率极低(表1)。因此，EMS溶液诱变浓度为0.2％-0.8％，处理4-8h时，均能有效诱变。
表1 EMS溶液浓度和处理时间对魔芋愈伤组织褐化死亡率和分化率的影 响
预实验2：筛选诱变丛生芽单芽的EMS溶液浓度及诱变处理时间
(1)以下预实验涉及如下植物品种：安魔128。
(2)以上品种为安康市农科院自主选育的杂交魔芋品种，可市购，或向育 种单位购买。
(3)EMS溶液由0.1mol/L(pH7.0)NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液配制， 具体设置的梯度为：0、0.2％、0.4％、0.8％、1.2％和1.6％，诱导处理时间为 3h、6h、12h、18h、24h。研究结果表明，随着EMS溶液浓度的增加和处理时 间的延长，单芽褐化死亡率逐渐上升，而成苗率逐渐降低。其中采用0.2％处理 3-24h时，褐化死亡率均较低，大部分单芽均能正常分化成苗；采用1.6％EMS 溶液处理3h-24h时，单芽褐化死亡率均达到74.2％以上，成苗率极低(表2)。因此，EMS溶液诱变浓度为0.4％-1.2％，处理6-18h时，均能有效诱变。
表2 EMS溶液浓度和处理时间对魔芋单芽褐化死亡率和成苗率的影响
优选的，本发明提供的一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，包括以下实 施例。
实施例1选育富硒魔芋新品系AM-19-02
(1)从岚皋花魔芋中挑选球茎光滑完整、无疤痕、无伤口、芽头饱满的三 龄球茎，先用流水洗净球茎表面，0.1％升汞浸泡处理45min，倒净升汞，无菌 水冲洗4-6次；然后75％乙醇浸泡2min，倾去乙醇，无菌水冲洗3次，无菌滤 纸吸干球茎表面水分。于超净台上将球茎均分成1cm3大小接种于愈伤组织诱导 培养基(MS基础成分+2mg/L 6-BA+0.5mg/LNAA+0.05mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖， pH5.8)，暗培养30-35天后，挑选结构紧实、组织松散、颜色鲜艳且表面呈颗 粒状的愈伤组织于超净台上均分成1cm3大小，接种于愈伤组织继代培养基(MS 基础成分+1mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+20g/L蔗糖，pH5.8)。暗培养20-25天， 将预培养长出的新愈伤组织切下，转至装有质量百分量0.4％EMS溶液的无菌 三角瓶中，于室温、黑暗、无菌环境下120rpm/min振荡培养8h。倾去诱变剂,用 无菌水冲洗8-10次,无菌滤纸吸去多余水分，将处理的愈伤组织重新转接至继 代培养基上。将继代2次的愈伤组织切分转接至含有48mg/L的Na2SeO3继代 培养基上暗培养20-25天，挑选生长良好的愈伤组织进行硒含量检测，初步标 记后再反复继代筛选3次，最终确定该批愈伤组织各突变体材料的耐硒和富硒 能力，接着诱导丛生芽分化，获得再生植株，移栽收获原原种。采用雾培法， 在魔芋生长刚进入换头期时，在雾培架各配肥桶中依次加入16-64mg/L的的亚 硒酸钠水溶液进行培养，观察记录植株对不同硒浓度的耐受情况，并测定植株 球茎硒含量、生理生化和农艺性状；单株标记收获，并在温棚中连续进行3-4 代无性扩繁，培育成不同富硒能力的优良株系；并将扩繁的优良株系于大田进 行3年的连续品比试验，选育出性状表现稳定、一致的系列富硒魔芋新品系， 编号AM-19-02的单株材料即为其中之一。
(2)魔芋AM-19-02(图1)的特征特性：1年生植物，3龄植株高108-117cm， 叶柄高92-105cm，叶柄直径4.3-5.2cm，叶幅宽93.2-107.4cm；叶柄底色呈黑褐 色，附有不规则白色斑点；小叶呈长椭圆形且数量多；球茎近似圆形，表皮土 黄色，切开内部乳白色，芋鞭12-15条，长9.5-16.2cm；佛焰苞外表黄绿色， 内为紫色，雄花序长6.5-11.2cm，雌花序长8.6-19.4cm；生育期135-154天，干 物质含量19.4％-23.5％，干物质中葡甘露聚糖含量53.7％-62.2％；植株耐硒浓度 ≤48mg/L，其中植株在硒浓度为48mg/L时，球茎硒含量达到最大值，为1.032-1.217mg/L，达到富硒标准；适种于秦巴山区海拔550-1200m区域。
实施例2选育富硒魔芋新品系AM-20-04
(1)从安康农科院自主选育的杂交魔芋品种“安魔128”中，挑选球茎光 滑完整、无疤痕、无伤口、芽头饱满的三龄球茎，先用流水洗净球茎表面，0.1％ 升汞浸泡处理45min，倒净升汞，无菌水冲洗4-6次；然后75％乙醇浸泡2min， 倾去乙醇，无菌水冲洗3次，无菌滤纸吸干球茎表面水分。于超净台上将球茎 均分成1cm3大小接种于愈伤组织诱导培养基(MS基础成分+2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.05mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖，pH5.8)，暗培养30-35天后， 挑选结构紧实、组织松散、颜色鲜艳且表面呈颗粒状的愈伤组织于超净台上均 分成1cm3大小，接种于接种于丛生芽诱导分化培养基(MS基础成分+2mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+20g/L蔗糖，pH6.0)，培养35-45天。将诱导 长出的丛生芽按单芽进行切分，确保每个新切分的单芽基部保留有部分愈伤组 织，每个单芽重1.10-1.45g。将切分的单芽转至装有质量百分比0.8％EMS溶液 的无菌三角瓶中，于室温、黑暗、无菌环境下120rpm/min振荡培养12h。倾去 诱变剂，用无菌水冲洗6-8次,无菌滤纸吸去多余水分，将处理的单芽转接至 继代培养基(MS基础成分+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L KT+0.1mg/L NAA+20g/L蔗 糖，pH6.0)。将继代2次的丛生芽继续切分成单芽，转接至含有128mg/L的 Na2SeO3继代培养基上培养15-20天，挑选生长良好的单芽进行硒含量检测， 根据耐硒及富硒能力的强弱对各单芽进行初步标记，然后再反复继代筛选2-3 次，最终确定该批单芽各突变体材料的耐硒和富硒能力，诱导分化获得再生植 株，移栽，收获原原种。采用雾培法，在魔芋生长刚进入换头期时，在雾培架 各配肥桶中依次加入32-200mg/L的的亚硒酸钠水溶液进行培养，观察记录植株 对不同硒浓度的耐受情况，并测定植株球茎硒含量、生理生化和农艺性状；单 株标记收获，并在温棚中连续进行3-4代无性扩繁，培育成不同富硒能力的优 良株系；并将扩繁的优良株系于大田进行3年的连续品比试验，选育出性状表 现稳定、一致的系列富硒魔芋新品系，编号AM-20-04的单株材料为其中之一。
(2)魔芋AM-20-04(图2)的特征特性：1年生植物，3龄植株高65-82cm， 叶柄高47-76cm，叶柄直径4.2-5.5cm，叶幅宽72-95cm；叶柄底色呈浅绿色， 附有不规则黑褐色斑点；小叶呈长椭圆形且叶型紧凑；球茎近似圆形，表皮土 黄色，切开内部乳白色，芋鞭10-15条，长6.7-8.4cm；佛焰苞外表嫩绿色，内 为紫色，雄花序长6.2-9.5cm，雌花序长5.5-7.9cm；生育期126-135天，干物质 含量16.7-20.3％，干物质中葡甘露聚糖含量52.5％-56.7％；植株耐硒浓度 ≤128mg/L，其中植株在硒浓度为64mg/L时，球茎硒含量达到最大值，为 1.329-1.473mg/L，达到富硒标准；适种于秦巴山区海拔300-800米区域。
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值 范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本 发明描述了优选的实施例。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基 本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要 求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发 明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及 其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将魔芋三龄球茎消毒、切块后接种于愈伤组织诱导培养基进行培养，得愈伤组织；
S2、将一部分愈伤组织切分转接至愈伤组织继代培养基进行继代培养，将培养长出的新愈伤组织切下，转至质量百分比0.2％-0.8％的EMS溶液中，于室温、黑暗、无菌环境下振荡培养4-8h，除去EMS溶液得诱变愈伤组织；
将另一部分愈伤组织转接于丛生芽诱导分化培养基分化培养得丛生芽，将丛生芽按单芽进行切分，转至质量百分比0.4％-1.2％的EMS溶液中，于室温、黑暗、无菌环境下振荡培养6-18h，除去EMS溶液得诱变丛生芽；
S3、将诱变愈伤组织于愈伤组织继代培养基中重复继代培养2-3次，后转接至含有16-64mg/L Na2SeO3的愈伤组织继代培养基中培养20-25天；将诱变丛生芽单芽转接至芽分化继代培养基中重复继代培养1-2次，后转接至含32-200mg/L Na2SeO3的芽分化继代培养基中培养15-20天；筛选获得耐硒及富硒能力强的诱变愈伤组织和诱变丛生芽，诱导分化获得再生植株，即富硒魔芋突变体。
2.根据权利要求1所述的一种诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S1的消毒具体为：挑选球茎光滑完整、无疤痕、无伤口、芽头饱满的魔芋三龄球茎，先用流水洗净球茎表面，质量分数0.1％的升汞浸泡处理40-45min，倒净升汞，无菌水冲洗4-6次；然后质量分数75％的乙醇浸泡2-3min，倾去乙醇，无菌水冲洗2-3次，无菌滤纸吸干球茎表面水分。
3.根据权利要求1所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S1的愈伤组织诱导培养基组成为：MS基础成分+2-4mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L NAA+0.05-0.1mg/L2,4-D+30-50g/L蔗糖，pH5.8-6.5。
4.根据权利要求3所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S1的诱导培养条件为：暗培养30-35天，维持环境温度25℃±3℃，相对湿度60％-80％。
5.根据权利要求1所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S2的愈伤组织继代培养基组成为：MS基础成分+1-3mg/L 6-BA+0.5-1mg/L KT+0.5-1.0mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5；
丛生芽诱导分化培养基组成为：MS基础成分+1-3mg/L 6-BA+0.5-1mg/L KT+0.5-1.0mg/L NAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。
6.根据权利要求5所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S2的继代培养条件为：暗培养20-25天，环境温度25℃±3℃，相对湿度60％-80％；
分化培养条件为：培养40-50天，昼/夜光照时间比16h/8h、光照强度1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％。
7.根据权利要求1所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S2的EMS溶液由由0.1mol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液配制。
8.根据权利要求1所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S3的芽分化继代培养基组成为：MS基础成分+0.5-1mg/L 6-BA+0.2-0.5mg/L KT+0.1-0.2mg/LNAA+20-40g/L蔗糖，pH5.8-6.5。
9.根据权利要求8所述的一种利用诱变产生富硒魔芋突变体的方法，其特征在于，S3的丛生芽单芽继代培养条件为：昼/夜光照时间比12h/12h、光照强度1500-2000lx，温度25±3℃、相对湿度50％-60％。
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