CN113736723A - 基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，步骤为：S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；S2.制备优化培养基，将选取好的植物乳杆菌放入优化培养基中培养；S3.二次优化培养，将已经进行过培养的植物乳杆菌，进行第二次优化培养；S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养；S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养；S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；S7.循环上述步骤S1‑S6，直至培养结束，多次优化培养，可以促使每一次的反应充分，每一次的反应作用可以充分发挥，最终保证菌落长势良好。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其涉及基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法。
背景技术
发酵是食品领域中常用的一种加工方式，是在原料中选择性的添加发酵剂，进而控制整个发酵过程，降低发酵失败率、缩短发酵时间，最终提高产品的整体价值，可降低发酵失败率和缩短发酵时间，同时提高最终产品的价值。
现有技术中，在进行火锅用的乳杆菌发酵中，普遍采用单一的培养环境进行培养，在培养过程中会采用改变培养温度或者培养时间进行，培养后的乳杆菌的菌落数量不好，最终影响火锅调料的辛辣度。
发明内容
本发明的目的在于提供基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，解决现有技术中培养后菌落数不足导致辛辣的问题。
本发明通过以下技术方案实现：包括以下步骤：S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；S2.制备优化培养基，将选取好的所述植物乳杆菌放入优化培养基中培养；S3.二次优化培养，将已经进行过培养的所述植物乳杆菌，进行第二次优化培养；S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的所述植物乳杆菌进行第三次优化培养；S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的所述植物乳杆菌进行第四次优化培养；S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的所述植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；S7.循环上述步骤S1-S6，直至培养结束。
需要说明的是，本方案中加入区别现有技术的多次优化培养，将一次性集中培养的方法优化进步为多次培养，保证了发酵培养后的植物乳杆菌的菌落数，同时提高了发酵后植物乳杆菌对于火锅底料的辛辣度的提高。
所述S2具体包括以下内容：在培养基中加入质量分数为1％的硝酸钠氮源保持氮源环境，保持培养基环境的pH为6.5，保持温度为35℃，进而加入所述植物乳杆菌进行培养，培养时间42h-50h。
需要说明的是，本方案中加入保证氮源的硝酸钠可以提高培养基中的氮含量，区别于现有技术的是，现有技术中通常会采用持续的温度改变，进而是培养液中的成分进行自我反应，这样的方法低效且菌落数不易控制，申请人在实际实验中发现，加入质量分数为1％的硝酸钠可以很快提高菌落的衍生能力，同时设定pH为6.5，可以最大程度保证培养环境为中性适宜环境。
所述S3具体包括以下内容：将已经进行过培养的所述植物乳杆菌进行第二次优化培养，在培养基中加入质量比1:1的葡萄糖与乳糖，维持温度为35℃，持续培养48h。
需要说明的是，申请人在培养基中加入了通常使用在有机物中进行活性培养的葡萄糖和乳糖，加快了植物乳杆菌的衍生能力，为菌落数的增加提供较好的支持，同时可以缓解后期培养混合后的辛辣度。
所述S4具体包括以下内容：将已经进行过二次优化培养的所述植物乳杆菌进行第三次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的醋酸钠作为缓冲盐，按照接种量为5％接种种子液，同时保持温度为35℃，持续培养24h。
需要说明的是，申请人在培养基内加入醋酸钠进行缓冲作业，同时接入种子液进行进一步的复合反应，提高培养基中的培养环境的活性。
所述S5具体包括以下内容：将已经将进行过三次优化培养的所述植物乳杆菌进行第四次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的VC为生长因子，保持温度为35℃，进行24h-48h的持续培养。
需要说明的是，加入VC生长因子，可以最大程度促进培养基的活性，保证植物乳杆菌的菌落活性以及菌落数量。
所述S6具体包括以下内容：将已经进行第四次优化培养的所述植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理，静置时间为24h-36h，保持温度为35℃，pH为6.5。
需要说明的是，静置处理，位置环境为6.5的中性，可以保证培养基中的植物乳杆菌充分在混合培养液中培养发酵，区别于现有技术的直接反应，省略静置处理的过程，本申请可以保证植物乳杆菌的充分反应以及活性活跃度。
本发明的有益技术效果如下：
1.多次优化培养，可以促使每一次的反应充分，每一次的反应作用可以充分发挥，最终保证菌落数以及辛辣度；
2.加入氮源，可以保证培养基中活性提高，减少培养的时间，提高培养的效果；
3.经历多次优化培养后还进行静置处理，可以保培养的植物乳杆菌得到充分的活性释放，提高菌落数的数量。
附图说明
图1是本发明的发酵流程示意图。
具体实施方式
请一并参考说明附图1，本实施例提供了基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，该基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法主要用于解决现有技术中培养后菌落数不足导致辛辣的问题，该方法已经处于实际使用阶段。
本发明的具体实施例方式如下，需要说明的是，本实施例中的实施数据为实际实验结果得出，其中植物乳杆菌选自中国工业微生物菌种保藏管理中心，同时需要说明的是，现有技术中采用多次多级处理时，通常采用单一步骤，多次重复，没有在新的步骤中加入新的组分进行，因而步骤与本发明有实质不同。
实施例1
本发明通过以下内容实现：S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；S2.制备优化培养基，将选取好的植物乳杆菌放入优化培养基中培养；S3.二次优化培养，将已经进行过培养的植物乳杆菌，进行第二次优化培养；S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养；S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养；S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；S7.循环上述步骤S1-S6，直至培养结束。
其中，在培养基中加入质量分数为1％的硝酸钠氮源保持氮源环境，保持培养基环境的pH为6.5，保持温度为35℃，进而加入植物乳杆菌进行培养，培养时间42h后，将已经进行过培养的植物乳杆菌进行第二次优化培养，在培养基中加入质量比1:1的葡萄糖与乳糖，维持温度为35℃，持续培养48h后，将已经进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的醋酸钠作为缓冲盐，按照接种量为5％接种种子液，同时保持温度为35℃，持续培养24h后，将已经将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的VC为生长因子，保持温度为35℃，进行24h的持续培养后，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理，静置时间为24h，保持温度为35℃，pH为6.5。
实施例2
本发明通过以下内容实现：S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；S2.制备优化培养基，将选取好的植物乳杆菌放入优化培养基中培养；S3.二次优化培养，将已经进行过培养的植物乳杆菌，进行第二次优化培养；S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养；S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养；S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；S7.循环上述步骤S1-S6，直至培养结束。
其中，在培养基中加入质量分数为1％的硝酸钠氮源保持氮源环境，保持培养基环境的pH为6.5，保持温度为35℃，进而加入植物乳杆菌进行培养，培养时间48h后，将已经进行过培养的植物乳杆菌进行第二次优化培养，在培养基中加入质量比1:1的葡萄糖与乳糖，维持温度为35℃，持续培养48h后，将已经进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的醋酸钠作为缓冲盐，按照接种量为5％接种种子液，同时保持温度为35℃，持续培养24h后，将已经将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的VC为生长因子，保持温度为35℃，进行36h的持续培养后，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理，静置时间为30h，保持温度为35℃，pH为6.5。
实施例3
本发明通过以下内容实现：S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；S2.制备优化培养基，将选取好的植物乳杆菌放入优化培养基中培养；S3.二次优化培养，将已经进行过培养的植物乳杆菌，进行第二次优化培养；S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养；S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养；S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；S7.循环上述步骤S1-S6，直至培养结束。
其中，在培养基中加入质量分数为1％的硝酸钠氮源保持氮源环境，保持培养基环境的pH为6.5，保持温度为35℃，进而加入植物乳杆菌进行培养，培养时间50h后，将已经进行过培养的植物乳杆菌进行第二次优化培养，在培养基中加入质量比1:1的葡萄糖与乳糖，维持温度为35℃，持续培养48h后，将已经进行过二次优化培养的植物乳杆菌进行第三次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的醋酸钠作为缓冲盐，按照接种量为5％接种种子液，同时保持温度为35℃，持续培养24h后，将已经将进行过三次优化培养的植物乳杆菌进行第四次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的VC为生长因子，保持温度为35℃，进行48h的持续培养后，将已经进行第四次优化培养的植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理，静置时间为36h，保持温度为35℃，pH为6.5。
根据上述实施例，在pH为6.5的环境中，经过实际生产实验对比，得到以下表1的数据的对比结果，
表1因素对比结果
根据以上数据，申请人得出以下数据结论：乳酸菌选择植物乳杆菌，最适生长温度为35℃，最适pH 6.5，在加入氮源，葡萄糖和乳糖，生长因子VC的培养基中，可以得到菌落数较多且质量较好的植物乳杆菌，同时申请人实际生产使用发现还能产生抗菌物质，在一定程度上延长食品的保存时间。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.适配选取，选择具有厌氧性的植物乳杆菌进行培养；
S2.制备优化培养基，将选取好的所述植物乳杆菌放入优化培养基中培养；
S3.二次优化培养，将已经进行过培养的所述植物乳杆菌，进行第二次优化培养；
S4.三次优化培养，将进行过二次优化培养的所述植物乳杆菌进行第三次优化培养；
S5.四次优化培养，将进行过三次优化培养的所述植物乳杆菌进行第四次优化培养；
S6.混合静置，将已经进行第四次优化培养的所述植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理；
S7.循环上述步骤S1-S6，直至培养结束。
2.根据权利要求1所述的基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，所述S2具体包括以下内容：在培养基中加入质量分数为1％的硝酸钠氮源保持氮源环境，保持培养基环境的pH为6.5，保持温度为35℃，进而加入所述植物乳杆菌进行培养，培养时间42h-50h。
3.根据权利要求1所述的基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，所述S3具体包括以下内容：将已经进行过培养的所述植物乳杆菌进行第二次优化培养，在培养基中加入质量比1:1的葡萄糖与乳糖，维持温度为35℃，持续培养48h。
4.根据权利要求1所述的基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，所述S4具体包括以下内容：将已经进行过二次优化培养的所述植物乳杆菌进行第三次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的醋酸钠作为缓冲盐，按照接种量为5％接种种子液，同时保持温度为35℃，持续培养24h。
5.根据权利要求1所述的基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，所述S5具体包括以下内容：将已经将进行过三次优化培养的所述植物乳杆菌进行第四次优化培养，在培养基中加入质量分数为0.5％的VC为生长因子，保持温度为35℃，进行24h-48h的持续培养。
6.根据权利要求1所述的基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法，其特征在于，所述S6具体包括以下内容：将已经进行第四次优化培养的所述植物乳杆菌进行混合培养液培养静置处理，静置时间为24h-36h，保持温度为35℃，pH为6.5。
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| CN202111004744.7A CN113736723A (zh) | 2021-08-30 | 2021-08-30 | 基于发酵糍粑辣椒用乳杆菌制备方法 |
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|---|---|---|---|---|
| CN102899262A (zh) * | 2012-05-31 | 2013-01-30 | 浙江正味食品有限公司 | 一种植物乳杆菌及其快速降解发酵过程中亚硝酸盐的方法 |
| CN107446841A (zh) * | 2017-07-13 | 2017-12-08 | 华南理工大学 | 一种直投式植物乳杆菌高密度培养方法及制得的冻干粉和应用 |
| CN112220029A (zh) * | 2020-10-09 | 2021-01-15 | 湖南省农产品加工研究所 | 利用辣椒盐坯制备辣椒酱的方法 |
-
2021
- 2021-08-30 CN CN202111004744.7A patent/CN113736723A/zh active Pending
Patent Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN102899262A (zh) * | 2012-05-31 | 2013-01-30 | 浙江正味食品有限公司 | 一种植物乳杆菌及其快速降解发酵过程中亚硝酸盐的方法 |
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