CN113730461A - 血必净注射液在制备抑制IP-10和RANTES的mRNA表达的药物中的应用 - Google Patents

血必净注射液在制备抑制IP-10和RANTES的mRNA表达的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了血必净注射液在制备抑制IP‑10和RANTES炎症因子mRNA表达的药物的应用，属于药物技术领域。该应用中炎症因子还包括TNF‑α和MIP‑1β。药物治疗的疾病包括冠状病毒感染引起的疾病，例如因感染新冠病毒SARS‑CoV‑2引发的新冠肺炎。实验证明，利用SARS‑CoV‑2感染细胞模型，通过血必净注射液干预不同时间后，检测细胞上清中IP‑10、RANTES等炎症因子的mRNA的表达情况，与对照组相比，能有效抑制TNF‑α、IP‑10、MIP‑1β和RANTES炎症因子的mRNA的表达情况，且抑制效果呈剂量依赖关系。同时临床结果表明，血必净注射液安全有效，具有良好新冠肺炎治疗前景。

Description

血必净注射液在制备抑制IP-10和RANTES的mRNA表达的药物 中的应用
技术领域
本发明属于药物技术领域，具体涉及血必净注射液在制备抑制IP-10和RANTES的mRNA表达的药物中的应用。
背景技术
炎症因子风暴也称细胞因子风暴(cytokine storm)，或系统性炎症反应综合征(system inflammatory response syndrome，SIRS)，其机制是免疫细胞过度的活化，细胞内炎性因子包括白细胞介素、TNF-α，补体蛋白分子等大量释放，对感染源及被感染的细胞进行暴风雨般的自杀式攻击，造成自身组织细胞的旁观者损伤伴随血管通透性增加及循环障碍，最坏的结果是多器官功能衰竭(MOF)。
炎症本是一种保护性免疫反应，有利于清除感染源，但机体内非可控的过度炎症反应会带来自身免疫损伤，是一种过度的机体保护性反应。在重症监护室中，炎症因子风暴是导致脓毒症患者高死亡率的主要机制，因此如何预测或预防炎症因子风暴的形成一直是重症医学研究领域的难点。
在众多炎症细胞因子中，起主要作用的是TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-10、IL-1β、IL-6、IL-8，MCP-1等。
TNF-α是炎症反应过程中出现最早、最重要的炎性介质，能激活中性粒细胞和淋巴细胞，使血管内皮细胞通透性增加，调节其他组织代谢活性并促使其他细胞因子的合成和释放。
MIP-1α和Recombinant Rat MIP-1β/CCL4可以趋化T淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)、单核细胞和未成熟树突状细胞(DC)，在炎症部位和肿瘤局部发挥作用。研究表明，MIP-1α和MIP-1β在病毒性肝炎感染过程中可促进肝纤维化，还可以介导高表达CCR5的T细胞进入门脉区，发挥免疫功能，导致免疫损伤，最终发展为慢性持续性肝炎。
调节激活正常T细胞表达和分泌因子(regulated activation normal T cellexpressed and secreted，RANTES/CCL5)，RANTES通过与相应受体综合而发挥多种生物学功能，RANTES主要功能是特异性趋化T细胞、单核细胞和嗜酸性细胞，在免疫应答中对杀伤T细胞的活化发挥重要作用。
干扰素诱生蛋白10(Interferon-inducible protein-10,IP-10)是由IFN-γ诱导产生的一个分子量为10kD的趋化因子，通过与受体CXCR3作用，发挥趋化作用与多种生物学功能。IP-10作为Th1型促炎趋化因子,招募多种细胞到达炎症部位,在炎症中发挥作用。同时IP-10在包括危害人类较大的病毒性疾病如乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)、人类免疫缺陷病毒(Human immuno-deficiency virus,HIV)、H7N9禽流感病毒、呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)等感染所致的炎症中也发挥重要作用。
IL-1β可由多种细胞分泌合成，如角质化细胞、成纤维细胞、滑膜细胞、内皮细胞、神经元细胞、多种免疫细胞(如肥大细胞、巨噬细胞)以及各种神经胶质细胞(如施万细胞、小胶质细胞、星形胶质细胞等)。其中小胶质细胞和巨噬细胞被认为是IL-1β最主要的来源。在生理条件下，IL-1β的含量非常低，但是在许多疾病状态下，它的含量就会增加，如类风湿性关节炎、神经变性疾病[阿尔兹海默病(Alzheimer disease)和多发性硬化(multiplesclerosis)]等都与IL-1β的上调有着密切的关系。IL-1β作为一种致炎细胞因子，在炎性疼痛中主要介导炎性痛敏。
IL-6能诱导B细胞分化和产生抗体，并诱导T细胞活化增殖、分化，参与机体的免疫应答，是炎性反应的促发剂。IL-8能刺激中性粒细胞、T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的趋化，促进中性粒细胞脱颗粒，释放弹性蛋白酶，损伤内皮细胞，使微循环血流淤滞，组织坏死，造成器官功能损伤。
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)属于CC趋化因子家族的一个小细胞因子。近年来研究表明，MCP-1是重要的促炎细胞因子，在机体发生炎症时单核细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、B细胞、平滑肌细胞等都能分泌产生，且MCP-1对单核/巨噬细胞具有特异性趋化激活作用。尤其在类风湿性关节炎、肾小球肾炎、动脉粥样硬化、急性冠状动脉综合征、深静脉血栓等疾病的发生和发展过程中发挥重要作用。
血必净注射液是依据“三证三法”的辨证原则，在“菌毒炎并治”的理论指导下，以清代王清任《医林改错》所载“血府逐瘀汤”为基础，研制而成的一种静脉注射液，由红花、赤芍、川芎、丹参、当归五味药材经提取、精制、干燥、调配等现代工艺制备而成，属于化瘀解毒类中药，用于温热类疾病，症见发热、喘促、心悸、烦躁等瘀毒互结症；适用于因感染诱发的全身炎症反应综合征；也可配合治疗多器官功能失常综合征的脏器功能受损期。血必净注射液具有拮抗细菌内毒素(中国危重病急救医学，2006，18(11)：643-4.)、抑制炎症因子过度释放(中国危重病急救医学，2006,18(11)：643-4、Evid Based Complement AlternatMed.2015；2015:860259和Chin J Integr Med.2009,15(1):13-5.)、克服凝血功能障碍(中华实验外科杂志,2010,27(1):32-4和中国中西医结合急救杂志,2009,16(4):218-22.)、保护血管内皮细胞(中国中西医结合急救杂志,2009,16(4)：218-22.)、改善组织微循环(JSurg Res.2016May 1；202(1):147-54]、改善免疫功能紊乱(中华外科杂志,2009,47(1)：58-61.和Evid Based Complement Alternat Med,2015:352642.)等药理作用，充分体现了中药多成分、多环节、多渠道、多靶点的整合调节作用。大量样本临床研究和荟萃分析(Meta)分析结果表明，在常规综合治疗基础上联合使用血必净注射液能降低脓毒症患者28d病死率、并发症发生率，缩短平均住院时间，有效改善患者全身炎症反应、凝血功能和急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分等临床指标，保护器官功能，显著提高临床疗效(中华危重病急救医学,2015,27(6):465-76；中华急诊医学杂志,2013,22(2):130-5.；解放军医学杂志,2010,35(1):9-12)。但目前还没有关于血必净注射液对引起炎症反应的具体种类炎症因子相关mRNA起作用的报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供血必净注射液在制备抑制IL-1βmRNA表达的药物的应用，为血必净注射液提供一种新用途。
本发明提供了血必净注射液在制备抑制IP-10 mRNA和RANTES mRNA表达的药物的应用。
优选的，IP-10 mRNA和RANTES mRNA的表达的疾病包括冠状病毒感染引起的疾病。
优选的，IP-10 mRNA和RANTES mRNA的表达的疾病包括因感染新冠病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎。
本发明提供了血必净注射液在制备抑制TNF-αmRNA、MIP-1βmRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA表达的药物的应用。
优选的，TNF-αmRNA、MIP-1βmRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA的表达的疾病包括冠状病毒感染引起的疾病。
优选的，TNF-αmRNA,,MIP-1βmRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA的表达的疾病包括因感染新冠病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎。
优选的，血必净注射液的浓度不小于2.455mg/mL。
本发明提供了血必净注射液在制备抑制IP-10 mRNA和RANTES mRNA的表达的药物的应用。所述血必净注射液具有化瘀解毒作用，用于温热类疾病，症见发热、喘促、心悸、烦躁等瘀毒互结证；适用于因感染诱发的全身炎症反应综合征；也可配合治疗多器官功能失常综合征的脏器功能受损期。实验证明，利用新型冠状病毒SARS-CoV-2感染VERO细胞模型，通过血必净注射液干预不同时间(6h，12h，24h)后，检测细胞上清中IP-10和RANTES炎症因子的mRNA的表达情况，与对照组(血必净未干预的VERO细胞模型)相比，能有效抑制IP-10mRNA和RANTES mRNA的表达，且抑制效果呈剂量依赖关系。
本发明还提供了血必净注射液在制备抑制TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-10炎症因子的mRNA的表达的药物中的应用。检测冠状病毒感染后的细胞上清液中四种炎症因子的mRNA表达情况，结果表明：与对照组(血必净未干预的VERO细胞模型)相比，能有效抑制TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-10炎症因子的mRNA的表达，且抑制效果呈剂量依赖关系。
进一步的，本发明提供的应用，为了评价血必净注射液对初步药效学研究发现，通过体外观察VeroE6细胞病变(CPE)，血必净注射液对新型冠状病毒SARS-CoV-2体外抗病毒药效，利用Reed-Muench法及GraphPadPrism5.0软件计算其半数有效浓度(IC50)。初步研究发现，血必净注射液(含0.1g生药/mL)具有一定的体外抗病毒作用。同时临床治疗结果表明，重症新冠肺炎患者常规治疗联合使用血必净注射液，可明显改善患者肺部感染严重指数(PSI)风险评级；明显提高患者的28天存活率。明显改善SPFA评分和氧合指数等指标；明显改善核酸转阴率、出院率，缩短住院时间等临床结局指标。
附图说明
图1为血必净注射液对病毒感染的细胞中TNF-α炎症因子的mRNA的表达的抑制结果图；
图2为血必净注射液对病毒感染的细胞中IP-10炎症因子的mRNA的表达的抑制结果图；
图3为血必净注射液对病毒感染的细胞中MIP-1β炎症因子的mRNA的表达的抑制结果图；
图4为血必净注射液对病毒感染的细胞中RANTES炎症因子的mRNA的表达的抑制结果图；
图5为血必净注射液对新型冠状病毒的药效实验。
具体实施方式
本发明提供了血必净注射液在制备抑制IP-10 mRNA和RANTES mRNA表达的药物的应用。
在本发明中，所述血必净注射液的药效成份为红花、赤芍、川芎、丹参和当归，辅料为葡萄糖和聚山梨酯80。所述血必净注射液为棕黄色的澄明液体。功能主治：化瘀解毒，用于温热类疾病，症见发热、喘促、心悸、烦躁等瘀毒互结证；适用于因感染诱发的全身炎症反应综合征；也可配合治疗多器官功能失常综合征的脏器功能受损期。所述血必净注射液国药准字Z20040033，优选购自天津红日药业股份有限公司。血必净注射液的浓度为0.1g生药/mL。
本发明还提供了血必净注射液在制备抑制TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-104种炎症因子的mRNA表达的药物的应用。血必净注射液的浓度不小于2.455mg/mL。
在本发明中，IP-10 mRNA和RANTES的表达或TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-104种炎症因子的mRNA的表达的疾病优选包括冠状病毒感染引起的疾病。本发明对所述冠状病毒的种类没有特殊限制，对本领域所熟知的冠状病毒引起的炎症疾病均可适用。所述疾病优选包括因感染新冠病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎。通过血必净注射液治疗新型冠状病毒感染的肺炎疗效的前瞻性表明，研究结果证实，血必净注射液能有效用于治疗新型冠状病毒引起的肺炎，通过降低TNF-α、MIP-1β、RANTES和IP-104种炎症因子的mRNA的过度表达，降低炎症因子风暴的作用，对各器官起到一定的保护作用。
下面结合实施例对本发明提供的血必净注射液在制备抑制IL-1βmRNA表达的药物的应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
血必净体外对病毒SARS-Cov-2感染诱导炎症药效
1、实验方法
1.1、实时荧光定量PCR检测血必净对SARS-Cov-2病毒诱导炎症因子的影响
1.1.1细胞样本的准备
取生长状态良好HUH7细胞(人肝癌细胞)，消化后调整细胞密度，接种于6孔板中，使接种细胞密度为4×105个细胞/mL，培养18～24h，待其贴壁长满后，弃培养基，PBS洗涤2次，加入含有病毒的无血清培养基，37℃、5％CO2培养作用2h，弃病毒液，PBS清洗2次，加入不同浓度的血必净，实验设血必净高剂量组(50mg/mL)、中剂量组(25mg/mL)、低剂量组(12.5mg/mL)三个剂量组、病毒对照组、瑞德西韦(Remdesivir)对照组、正常对照组，37℃、5％CO2继续培养24h。弃去细胞上清液，用PBS洗涤细胞两次，加入Trizol液1mL/样，在室温下孵育5min。
1.1.2RNA的提取
分别向细胞和细胞上清液中加入氯仿200μL，震荡15s，在室温中孵育5min，4℃，10000rpm离心10min；离心后，取上清至新的1.5mL EP管中，加入异丙醇500μL，孵育10min，4℃，10000rpm离心10min；离心后加入75％乙醇水溶液1000μL混匀，4℃，10000rpm离心10min；弃上清，室温中放置5min，加入无RNA酶的ddH2O溶解RNA，并进行逆转录成cDNA；测定总RNA浓度(ng/μL)，计算出提取总RNA的浓度，并计算所需取总RNA的体积。
1.1.3样本RNA的逆转录
将RNA逆转录之前先进行去基因组DNA反应，反应体系如下表1：
试剂 使用量
5×gDNAEraser Buffer 2.0μL
gDNA Eraser 1.0μL
总RNA 1.0μL
ddH<sub>2</sub>O 添加至10μL
反应条件：42℃2min，4℃保存。
mRNA逆转录成cDNA；配置逆转录反应体系如下表2：
Figure BDA0002515859000000061
逆转录反应条件如下：37℃15min；85℃5s；4℃∞。
1.1.4实时荧光定量PCR检测
反应体系如下表3：
Figure BDA0002515859000000062
PCR反应条件如下表4：
Figure BDA0002515859000000071
TNF-α、IP-10、MIP-1β和RANTES的mRNA的扩增引物及探针见表5：
Figure BDA0002515859000000072
1.1.5数据处理
采用ABI7500软件对各组检测出的Ct值进行数据分析，采用△△Ct的方法进行相对定量。
TNF-α、IP-10、MIP-1β和RANTES的mRNA的表达情况依次见图1～图4。由图1～图4结果表明，血必净注射液(含0.1g生药/mL)能显著抑制SARS-CoV-2诱导炎症因子TNF-α、IP-10、MIP-1β和RANTES的mRNA的过度表达，具剂量依赖关系。
实施例2
血必净对病毒SARS-Cov-2的体外抗病毒活性实验
1、实验方法
1.1、VERO E6细胞(非洲绿猴肾细胞系)毒性试验(MTT法)
96孔板单层细胞用PBS洗涤1次，弃上清，每孔加入100μL 2倍梯度稀释的血必净。空白对照组和正常细胞组每孔加入等体积培养液，34℃、5％CO2条件下培养2-5d。随后每孔加入浓度为5mg/mL的MTT溶液20μL，继续孵育4h。弃上清，每孔加入100μL DMSO，低速振荡5min，使结晶物充分融解。在490nm酶联免疫仪上测定吸光值，计算抑制率。
用Prismnon-regression analysis软件计算出药物半数毒性浓度(TC50)。
1.2、抗病毒药效试验(MTT法)
96孔板单层细胞用PBS清洗1次，加入100TCID50的病毒稀释液100μL/孔，37℃、5％CO2培养箱中孵育2h，弃去病毒液，加入2倍梯度稀释的血必净，每个浓度设置4个复孔，以最大无毒浓度为药物起始浓度，在34℃、5％CO2培养箱中孵育2d。每天记录细胞病变(CPE)。用MTT染色，进行OD值测定(同步骤1.1)。用Prism non-regression analysis软件计算药物半数有效浓度(IC50)，计算选择指数SI，SI＝TC50/IC50)。[参照《药理实验方法学，徐叔云主编》，治疗指数(SI)>1表示有效]。
1.3、空斑试验
96孔板单层Vero E6细胞用PBS清洗1次，并用100个斑块形成单元(PFU)的SARS-CoV-2病毒液孵育2h后，弃去病毒液，用含有0.8％琼脂和血必净的不同浓度。然后在37℃下孵育48h，然后在4％福尔马林中固定30min。然后取出琼脂并用0.1％结晶紫染色3min，观察并计数斑块。计算血必净的IC50。
药效学研究发现，通过体外观察VEROE6细胞病变(CPE)，血必净注射液对新型冠状病毒SARS-CoV-2体外抗病毒药效，利用Reed-Muench法及GraphPadPrism5.0软件计算其半数有效浓度(IC50)，IC50为2.455mg/mL。
血必净注射液对新型冠状病毒药效见图5。初步发现血必净注射液(含0.1g生药/mL)具有一定的体外抗病毒作用。
实施例3
血必净注射液治疗新型冠状病毒感染的肺炎疗效的前瞻性队列研究
一、研究目的
评价血必净注射液对重症新冠肺炎患者肺炎严重指数(PS1)的改善作用，28天临床结局的影响以及临床安全性。
二、研究设计
1.采用非随机对照的前瞻性队列研究设计，在新冠肺炎常规治疗的基础上加载血必净。样本量200例。
2.血必净组：使用血必净治疗的新冠肺炎确诊住院患者，100例。
3.对照组：未使用血必净的新冠肺炎确诊住院患者，100例。
4.研究周期：血必净治疗期7天，随访28天临床结局。
三、入排标准
1.入选标准：
1)经病原学检测确诊的新冠肺炎；
2)符合社区获得性肺炎诊断标准(依据2019ATS/IDSA诊断标准)；
3)肺炎严重指数(PS1)1V级或氧合指数(PF)S00mmHg；
4)18≤年龄s75周岁；5)签署知情同意书。
2.排除标准：
1)孕妇、哺乳期妇女；
2)过敏体质，或对血必净及其成分过敏者；
3)影响生存的严重基础疾病，包括：未控制已经多处转移不能切除的恶性肿瘤血液病、恶液质、活动性出血、严重营养不良、HIV等；
4)肺部肿瘤致阻塞性肺炎、严重肺间质纤维化、肺泡蛋白沉积症、过敏性肺泡炎者；
5)近6个月内持续使用免疫抑制剂，或器官移植者；
6)使用体外生命支持(ECMO、ECCO2R、RRT)；
7)预计48小时内死亡者。
四、疗效指标
1.主要疗效指标：肺炎严重指数(PS1)风险评级改善程度。
2.次要疗效指标：1)SOFA评分；2)氧合指数；3)新冠病毒核酸转阴率；4)28天出院率；5)28天住院时间；6)28天生存率等。
五、安全性指标生命体征、尿常规、便隐血、肝肾和凝血功能、心电图、不良事件记录。
六、治疗方案
1.血必净组：在新冠肺炎常规治疗的基础上加载血必净100ml，使用0.9％氯化钠注射液100ml稀释，80分钟滴毕，一天2次，疗程7天
2.对照组：依据国家卫健委和中医药管理局发布的《新冠肺炎诊疗方案(试行第四一第七版)》推荐的治疗方案治疗。
七、项目计划进度
1.研究启动时间：2020年1月31日。
2.病例随访完成时间：2020年4月5日。
3.数据审核完成时间：2020年4月30日。
4.统计分析完成时间：2020年5月15日。
八、研究总结
共15个省市的28家分中心参与研究，累计入组276例，其中血必净组165例，对照组11例。全部病例己完成28天临床结局随访。
根据本研究的入选标准和“血必净治疗重症社区获得性肺炎随机对照试验”的经验，将符合分析标准的人群定义为PSI评级为V级，在此类人群中对主要评价指标、次要评价指标和安全性指标进行统计分析。在276例中，血必净组有72例符合此标准，与对照组符合同样标准的病例1:1配对后，对两组共144例进行了对照分析。结果如下：
1.基线比较：两组患者人口学资料，既往病史，生命体征，PSI，SOFA，氧合指数，呼吸支持等指标基线均衡，无统计学差异；
2.合并用药：两组治疗前和治疗期间的抗病毒药、抗菌药、抗凝药等合并用药无统计学差异。
3.主要评价指标
1)肺炎严重指数(PS1)分值比较：用药后第8天，血必净组肺炎严重指数(PSI)均值低于对照组24.5分[183.7(34.75)vs.108.2(25.55)，P<0.001]。
2)肺炎严重指数(PS1)评级改善程度：用药后第8天，血必净组肺炎严重指数(PSI)风险评级改善率高于对照组4.4％(64.19％vs.19.7％，P<0.001)。
4.次要评价指标
1)序贯器官衰竭评分(SOFA)改善情况：用药后第8天，血必净组SOFA评分均值低于对照组3.6分[3.5(3.99)vs.7.1(3.72)，P<0.001]。
2)氧合指数改善情况：两组氧合指数的基线均衡，无统计学差异。用药后第8天，血必净组氧合指数均值高于对照组100.9mmHg[289.4(111.57)vs.188.5(98.12)，P<0001]。
3)核酸转阴率：用药后第8天，血必净组核酸转阴率高于对照组28％(47.7％vs.19.79％，P<0.001)；
4)28天出院率：血必净组28天内出院率高于对照组44.5％(66.7％vs P<0.001)。
5)28天内住院时间：血必净组28天内住院时间均值少于对照组4.3天(19.0天vs 3天，P<0.001)。
6)28天生存率：血必净组28天生存率高于对照组9.8％(91.7％vs.81.99％，P<0.001)。
5.不良事件比较
144例患者中发生不良事件比例为：血必净组30例(41.7％)和对照组31例(43.1％)不良事件发生频次127次(血必净组62次vs.对照组65次)，P＝0.866。
研究结果显示，重症新冠肺炎常规治疗联合使用血必净注射液，可明显改善患者肺部感染严重指数(PSI)风险评级；明显提高患者的28天生存率。明显改善SOFA评分和氧合指数等指标；明显改善核酸转阴率、出院率，缩短住院时间等临床结局指标两组不良事件情况比较显示，使用血必净注射液未增加药物安全风险研究结果显示出血必诤注射液能够明确改善新冠肺炎患者的肺部感染症状和临床结局，对于新冠肺炎导致的获得性肺炎、脓毒症和器官功能暲碍具有明确的治疗作用。研究结果与血必净注射液治疗重症肺炎、脓毒症和多器官功能障碍综合征的疗效和循证医学证据一致。再次证明血必净注射液是安全有效，具有良好应用前景的治疗药。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 天津红日药业股份有限公司
<120> 血必净注射液在制备抑制IP-10和RANTES的mRNA表达的药物中的应用
<160> 12
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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aacatccaac cttcccaaac g 21
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<212> DNA
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<212> DNA
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ccccctcctt cagacaccct caacc 25
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<212> DNA
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tcacccttct ttttcattgt agca 24
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Claims (7)

1.血必净注射液在制备抑制IP-10 mRNA和RANTES mRNA表达的药物的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，IP-10 mRNA和RANTES mRNA的表达的疾病包括冠状病毒感染引起的疾病。
3.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，IP-10 mRNA和RANTES mRNA的表达的疾病包括因感染新冠病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎。
4.血必净注射液在制备抑制TNF-α mRNA、MIP-1β mRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA表达的药物的应用。
5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，TNF-α mRNA、MIP-1β mRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA的表达的疾病包括冠状病毒感染引起的疾病。
6.根据权利要求4或5所述应用，其特征在于，TNF-α mRNA、MIP-1β mRNA、RANTES mRNA和IP-10 mRNA的表达的疾病包括因感染新冠病毒SARS-CoV-2引发的新冠肺炎。
7.根据权利要求1或4所述应用，其特征在于，血必净注射液的浓度不小于2.455mg/mL。
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