CN113717254B

CN113717254B - 一种抗菌肽及其应用

Info

Publication number: CN113717254B
Application number: CN202111118135.4A
Authority: CN
Inventors: 姜文韬; 林正梅; 谢茁; 黄舒恒; 黄绮婷; 陈玲玲; 高现灵
Original assignee: ORAL SUBSIDIARY SUN YAT-SEN UNIVERSITY HOSPITAL
Current assignee: ORAL SUBSIDIARY SUN YAT-SEN UNIVERSITY HOSPITAL
Priority date: 2021-09-23
Filing date: 2021-09-23
Publication date: 2022-03-22
Anticipated expiration: 2041-09-23
Also published as: CN113717254A

Abstract

本发明公开了一种抗菌肽及其应用，属于生物医药技术领域；本发明的一种抗菌肽，抗菌肽的氨基酸序列为Glu‑Leu‑Leu‑His‑Leu‑Leu‑His‑His‑Leu‑Leu‑His‑His；本发明还提供了抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物，本发明提供的抗菌肽、抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物以多肽为主体，具有良好的生物安全性，不易引起耐药性；能够有效的抑制龋齿中的致龋菌，对龋齿中的共生菌不敏感，因此具有选择性的抑菌效果，进而能够调节龋齿中菌落微生态平衡，提升共生菌在生物膜内的优势；同时还具有pH响应能力，可对酸性病理环境产生智能响应，发挥对龋齿酸性微环境的作用，也可以用于制备其他酸性病理环境疾病的药物。

Description

一种抗菌肽及其应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种抗菌肽及其应用。

背景技术

龋病是最为常见的口腔疾病，与心血管疾病和肿瘤一起被世界卫生组织列为人类三大重点防治疾病之一。第四次全国口腔健康流行病学调查显示我国龋病患病率呈上升态势。龋病如果不能得到及时控制可能会导致牙髓炎、根尖周炎、颌骨感染和牙缺失等后果，影响全身健康和生活质量，同时相关治疗加重了经济负担。因此，安全有效的防龋技术手段具有可观的健康和经济效益。

现代龋病病因学认为，正常状态下牙菌斑生物膜内致龋菌和共生菌处于平衡状态，高碳水化合物饮食和不良口腔卫生可促进生物膜累积和酸性代谢产物增多，生物膜微环境酸化对不耐酸的共生菌产生抑制，而进一步支持了具有产酸耐酸特性的致龋菌占据生态优势，从而导致微生态失衡及牙釉质脱矿。经典的防龋制剂氟化物可通过再矿化作用和细菌代谢抑制作用产生防龋效果，但其抗菌效果较差，且随之而来氟牙症和耐氟菌株等缺陷。而常见的口腔广谱抗菌药物如氯己定等，虽然有较强杀菌能力，但无差别的抗菌作用在杀伤致龋菌的同时也杀伤了对龋病有益处的共生菌，在抑制龋病位点失衡菌群的同时也抑制健康位点的正常菌群，破坏了口腔微生物生态平衡，存在造成菌群失调的风险；同时广谱抗菌剂的使用可能会加重细菌耐药情况的发生。因此，亟需具有良好抗菌效果且毒副作用低的防龋药物和制剂。

抗菌肽是一类具有抗菌活性的多肽及其衍生物，不易产生耐药性，具有应对细菌感染相关疾病的良好潜力；通过对抗菌肽的序列改造可以提升抗菌肽的抗菌能力、生物安全性，并使其具有靶向性、响应性等额外生物活性。许多研究提出由于抗菌肽的抗菌能力及序列变化带来的生物活性，抗菌肽用于龋病防治具有良好的研究和应用前景；同时也提出抗菌肽防治龋病需要面临的一个重要问题，即是否会因为广谱抗菌作用对口腔菌群生态平衡造成负面影响。已有相关技术证实多种抗菌肽的抗致龋菌作用，但多是基于其广谱抗菌能力，对共生菌也可产生明显的抑制作用；同时，缺少抗菌肽的菌种调节作用评价，对抗菌肽在致龋菌和共生菌混合体系中的作用不明，抗菌肽防龋仍存在破坏口腔菌群生态的风险，限制了抗菌肽防龋的临床应用。因此，一种安全有效的可以针对性作用于致龋菌的，而不干扰有益共生菌的防龋抗菌肽是抗菌防龋研究的技术难点和需求。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种安全有效、能调节龋齿中菌种微生态的一种抗菌肽及其应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种抗菌肽，其氨基酸序列为Glu-Leu-Leu-His-Leu-Leu-His-His-Leu-Leu-His-His。

本发明的技术方案提供的一种抗菌肽，其以多肽为主体，进行或不进行修饰，生物安全性好；与传统的非多肽类抗生素相比，不易引起耐药性；同时对致龋齿菌有选择性抑制性作用，从而调节龋齿中微生态。

作为本发明所述抗菌肽的优选实施方式，所述抗菌肽采用化学固相合成技术制备得到。

另外，本发明还提供了一种抗菌肽衍生物，所述衍生物为抗菌肽的氨基酸序列的碳端酰胺化产物Glu-Leu-Leu-His-Leu-Leu-His-His-Leu-Leu-His-His-NH₂。

作为本发明所述抗菌肽衍生物的优选实施方式，所述衍生物还可以为抗菌肽的氨基酸序列的碳端酯化产物。

另外，本发明还提供了一种抗菌肽配合物，所述抗菌肽配合物为抗菌肽与药学上可接受的盐配合得到的物质。

作为本发明所述抗菌肽配合物的优选实施方式，所述药学上可接受的盐为有机酸或无机酸的碱式盐。

作为本发明所述抗菌肽配合物的优选实施方式，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐、甲磺酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐或有机胺盐。

另外，本发明一种牙齿护理组合物，其包含了本发明所述的抗菌肽。

作为本发明所述牙齿护理组合物的优选实施方式，所述牙齿护理组合物中包含的抗菌肽还可以用本发明所述抗菌肽衍生物或抗菌肽配合物替代。

牙齿中的致龋菌会在牙齿表面产生菌斑，从而影响牙齿的美观，而本发明提供的牙齿护理组合物，其包含本发明所述抗菌肽、抗菌肽衍生物或抗菌肽配合物，因此能够有效的抑制牙齿中的致龋菌，从而减少菌斑，达到牙齿护理的作用。

另外，本发明还提供了一种抑菌药物组合物，其包含本发明所述的抗菌肽。

作为本发明所述抑菌药物组合物的优选实施方式，所述抑菌药物组合物中包含的抗菌肽还可以用本发明所述抗菌肽衍生物或抗菌肽配合物替代。

作为本发明所述抑菌药物组合物的优选实施方式，还包含药学上可接受的载体。

作为本发明所述抑菌药物组合物的优选实施方式，所述菌包括变异链球菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、粘性放线菌、内氏放线菌、血链球菌、格氏链球菌、轻唾链球菌、唾液链球菌中的至少一种。

另外，本发明还提供了本发明所述抗菌肽在调节龋齿中菌种微生态上的应用。

作为本发明所述应用的优选实施方式，抗菌肽还可以用本发明所述抗菌肽衍生物或抗菌肽配合物替代。

本发明的抗菌肽、抗菌肽衍生物或抗菌肽配合物能够对龋齿中的致龋菌有选择性抑制作用，而对龋齿中共生菌不敏感，从而能够降低龋齿中的致龋菌，对共生菌几乎没有抑制作用，从而达到调节龋齿中菌种微生态的作用。

另外，本发明还提供了抗菌肽在制备酸性病理环境的疾病的药物上的应用。

本发明提供的抗菌肽、抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物具有pH响应特性，可通过pH响应在酸性的环境下具有更强的膜电位影响能力，从而可以利用此特性进行一系列的应用，比如将其纳米化，用于制备pH响应特性的药物组合物，进一步将药物组合物用于酸性病理环境的疾病上。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

第一：本发明的技术方案提供的抗菌肽、抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物以多肽为主体，具有良好的生物安全性，不易引起耐药性；

第二：本发明的技术方案提供的抗菌肽、抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物能够有效的抑制龋齿中的致龋菌，对龋齿中的共生菌不敏感，因此具有选择性的抑菌效果，进而能够调节龋齿中菌落微生态平衡，提升共生菌在生物膜内的优势；

第三：本发明的技术方案提供的抗菌肽、抗菌肽衍生物和抗菌肽配合物具有pH响应能力，可对酸性病理环境产生智能响应，发挥对龋齿酸性微环境的作用，同时由于pH响应特性也可以用于其他表面酸性病理环境疾病的治疗中。

附图说明

图1为抗菌肽(LH12)的质谱确认图；

图2为抗菌肽(LH12)的液相纯度图；

图3为抗菌图(LH12)的pH响应能力检测结果图；

图4为抗菌肽(LH12)对人牙龈上皮细胞的影响作用结果图，

其中A为OD₄₅₀值随抗菌肽的浓度的变化图，B为在不同的抗菌肽浓度作用下的人牙龈上皮细胞显微镜图；

图5为抗菌肽(LH12)的生长抑制动力学测定的曲线图；

图6为抗菌肽(LH12)调节致龋菌-共生菌双菌种生物膜的能力测定结果图；

图7为抗菌肽(LH12)对变异链球菌生物膜的抑制作用的乳酸产量体现图，其中不同的小写字母表示存在统计学差异(P＜0.05)；

图8为抗菌肽(LH12)对变异链球菌生物膜的抑制作用的水不溶性胞外多糖合成量图，其中不同的小写字母表示存在统计学差异(P＜0.05)；

图9为抗菌肽(LH12)对变异链球菌生物膜厚度影响图，其中不同的小写字母表示存在统计学差异(P＜0.05)。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。

缩略词表

1、抗菌肽的固相合成

本发明的抗菌肽的制备采用化学固相合成技术，具体制备方法如下：

(1)以Fmoc-His(Trt)-Wang Resin作为起始原料，加入二氯甲烷使树脂充分溶胀，接着用六氢吡啶/N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液(DBLK溶液)脱除9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)保护基团，并用DMF洗涤数遍，将残余的DBLK溶液清洗干净；

(2)接着对构成抗菌肽的剩余11个氨基酸采用Fmoc策略辅以氨基酸活化剂组合以常规方法依次固相合成，其中氨基酸活化剂组合为苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)和N-甲基吗啡啉(NMM)，在每个氨基酸的偶联的过程中用茚三酮检测，确保偶联完全后再进行下一个氨基酸的偶联；

(3)所有的氨基酸偶联结束后，脱除Fmoc保护基团，用DMF清洗，接着用甲醇收缩树脂，得到抗菌肽树脂；

(4)裂解抗菌肽树脂，得到抗菌肽；

(5)纯化分离得到抗菌肽，将其命名为LH12。

得到的抗菌肽(LH12)的分子式为C₆₈H₁₀₆N₂₂O₁₃，分子量为1439.7088，其质谱信息如图1所示，液相纯度如图2所示。

2、抗菌肽的pH响应能力测试

抗菌肽的pH响应能力以DiSC3(5)荧光探针进行检测，DiSC3(5)是一种膜电位敏感探针，聚集在磷脂双分子层内，能够引起染料的自淬灭；当抗菌肽使膜去极化，膜电位变化，DiSC3(5)释放进入溶液引起荧光增强，荧光强弱与电位减少程度呈正比，从而可以用于检测抗菌肽的pH响应能力。

具体测试步骤如下：

(1)挑取保藏的变异链球菌(Streptococcus mutans UA159)单菌落于10mL BHI液体培养基中，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)过夜培养；

(2)配置pH值为5.5及7.2的柠檬酸/磷酸缓冲液模拟龋病酸性微环境及正常生理缓冲pH；

(3)吸取20μL菌液于10mL BHI液体培养基中于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)传代培养2代后，取对数生长中期菌液，3000rpm/min离心，用pH值为5.5和pH值为7.2的柠檬酸/磷酸缓冲液重悬至菌浓度为1×10⁸CFU/mL；

(4)缓冲液重悬的菌液加入DiSC3(5)，使探针浓度为4μmol/L；接着往96孔板中加入90μL的菌液于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养30min，使探针与细菌结合；

(5)往96孔板中每孔加入10μL抗菌肽，使抗菌肽终浓度分别为为8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL，阴性对照组加入无菌水，置于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养1h；MIC为板内澄清孔的最低抗菌肽浓度；

(6)用荧光分光光度计分别于0min、30min、40min、50min、60min、70min、80min、90min测量622nm和670nm处的荧光强度。

测试结果如图3所示，未加入抗菌肽时pH值为5.5和pH值为7.2时的变化一致，而加入抗菌肽后，8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL抗菌肽在pH值为5.5引起的荧光强度升高明显高于在pH值为7.2时，说明抗菌肽具有pH响应性，可通过pH响应在酸性为环境下具有更强的膜电位影响能力。

3、抗菌肽对人牙龈上皮细胞的影响

CCK-8细胞毒性检测是常用的检测药物安全性的方法，本方案以抗菌肽对人牙龈上皮细胞的毒性检测来表示抗菌肽的生物安全性。

具体检测步骤如下：

(1)将人牙龈上皮细胞接种96孔板中，每孔约5000个细胞，使用含双抗、10％胎牛血清的DMEM/F-12培养基，在CO₂培养箱中(5％CO₂，95％空气，100％湿度，37℃)恒温培养48h；

(2)将抗菌肽用培养基进行梯度稀释至浓度范围在4-128μg/mL后，处理细胞30min；阴性对照组使用不含抗菌肽的培养基处理；处理后弃去上清液，用PBS缓冲液缓慢漂洗后加入新鲜的含双抗、10％胎牛血清的DMEM/F-12培养基继续培养；

(3)往多肽处理组的和阴性对照组的细胞每个孔内加入10μL CCK-8溶液，继续孵育2h，在CO₂培养箱中(5％CO₂，95％空气，100％湿度，37℃)恒温培养；使用酶标仪在450nm处读取数值；并对细胞使用显微镜进行拍照，观察细胞生长情况。

检测结果如图4所示，从A中可以看出，CCK-8在450nm的的吸光度可以表征细胞的活性，抗菌肽处理后与阴性对照组相比在浓度范围为4-128μg/mL间对人牙龈上皮细胞均未表现出明显的吸光度下降和细胞活性抑制；其中，抑制率％＝(OD_{450阴性对照组}-OD_450处理组)/OD_{450阴性对照组}×100％，相同的小写字母及罗马数字表示不存在统计学差异(P＞0.05)；

同时，从B中可以看出，对较高浓度(32-128μg/mL)处理的细胞显微镜观察，相比于阴性对照组也没有发现明显的贴壁细胞形态变化；这些结果说明抗菌肽细胞毒性低，有良好的生物安全性。

4、抗菌肽的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定

最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)是药物抗菌活性的指标，表示药物抑制和杀伤病原微生物的能力；本测试方案采用的致龋菌为变异链球菌(Streptococcusmutans UA159)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei ATCC393)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum A1753)、粘性放线菌(Actinomycetes viscosus ATCC15987)、内氏放线菌(Actinomycetes naeslundii JCM8349)，采用的共生菌为血链球菌(Streptococcus sanguinis JCM5708)、格氏链球菌(Streptococcus gordonii DL1)、轻唾链球菌(Streptococcus mitis ATCC6249)、唾液链球菌(Streptococcus salivariusATCC27945)，并采用微孔板稀释法药物敏感性试验检测抗菌肽对致龋菌及共生菌的抗菌能力。

具体测定步骤如下：

(1)挑取保藏的上述单菌落于10mL BHI液体培养基中，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)过夜培养；

(2)吸取20μL菌液于10mL BHI液体培养基中于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)传代培养2代后，取对数生长中期菌液并将其用BHI培养基稀释至1×10⁶CFU/mL备用；

(3)抗菌肽采用2倍稀释法加入96孔板，每孔10μL，每孔加入90μL的菌浓度为1×10⁶CFU/mL的BHI培养基使抗菌肽最终浓度为2-128μg/mL，其中无菌水作为阴性对照；

(4)将96孔板置于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养24h；

(5)MIC为板内澄清孔的最低抗菌肽浓度；

(6)吸取澄清孔内50μL菌液涂布于BHI琼脂平板，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)过夜培养24h；MBC为平板上无菌落生长的最低多肽浓度。

测试结果如表1所示；

表1：抗菌肽对致龋菌和共生菌的MIC和MBC值

从表1可以看出，抗菌肽对致龋菌具有更低的MIC(≤16μg/mL)和MBC(≤32μg/mL)，而对于共生菌有更高的MIC(＞32μg/mL)和MBC(≥64μg/mL)，说明了抗菌肽对致龋菌具有选择性抗菌活性，而对共生菌不敏感。

5、抗菌肽的生长抑制动力学曲线的测定

生长抑制动力学曲线可以反应抗菌药物作用下，细菌生长的抑制情况，本测定方案采用致龋菌变异链球菌(Streptococcus mutans UA159)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei ATCC393)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum A1753)、粘性放线菌(Actinomycetes viscosus ATCC15987)、内氏放线菌(Actinomycetes naeslundiiJCM8349)，及共生菌血链球菌(Streptococcus sanguinis JCM5708)、格氏链球菌(Streptococcus gordonii DL1)、轻唾链球菌(Streptococcus mitis ATCC6249)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius ATCC27945)进行测定。

具体测定步骤如下：

(2)吸取20μL菌液于10mL BHI液体培养基中于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)传代培养2代后，取对数生长中期菌液并将其用BHI培养基稀释至1×106CFU/mL备用；

(3)往96孔板中每孔种10μL抗菌肽，每孔加入90μL的菌浓为1×10⁶CFU/mL的BHI培养基使抗菌肽最终浓度为8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL，阴性对照组为无菌水；

(4)将96孔板置于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养；

(5)分别于0h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、16h用酶标仪测量600nm处的吸光。

测定结果如图5所示，从图5可以看出，抗菌肽在16μg/mL时即可完全抑制检测的致龋菌的生长，而不会抑制检测的共生菌的生长，说明抗菌肽对致龋菌具有选择性生长抑制作用，而不会明显干扰共生菌的生长。

6、抗菌肽调节致龋菌-共生菌双菌种生物膜的能力测定

选择主要致龋菌变异链球菌(Streptococcus mutans UA159)和共生菌格氏链球菌(Streptococcus gordonii DL1)构建双菌种生物膜模型，该模型是讨论致龋菌-共生菌种间关系的经典生物膜模型。

测定的具体步骤如下：

(1)挑取保藏的单菌落于10mL BHI液体培养基中，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)过夜培养；

(2)吸取20μL菌液于10mL BHI液体培养基中于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)传代培养2代后，取对数生长中期菌液并将其用含1％蔗糖的BHIS培养基稀释至2×10⁶CFU/mL备用；

(3)往24孔板中加入100μL的抗菌肽和450μL的变异链球菌菌液和450μL的格氏链球菌菌液，使抗菌肽浓度为8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL，对照组为无菌水，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养24h；

(4)吸出培养基，PBS缓冲液轻柔漂洗生物膜以洗涤浮游菌，将生物膜用1mL的PBS缓冲液收集，充分涡旋离散，进行10倍梯度稀释，取100μL稀释菌液分别于BHI琼脂平板和MSB变异链球菌选择性平板上涂布，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养48h；

(5)对BHI琼脂平板和MSB变异链球菌选择性平板上的菌落进行计数，计算生物膜内细菌数量。

BHI琼脂平板上的菌落数表示生物膜内包括变异链球菌和格氏链球菌在内的总菌落，而MSB平板是变异链球菌选择性平板，其菌落数表示变异链球菌数量，BHI平板菌落减MSB平板菌落即可得格氏链球菌菌落数，测定结果如图6所示，用浓度分别为8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL抗菌肽处理后的变异链球菌-格氏链球菌生物膜内的致龋菌格氏链球菌相比对照组受到选择性清除，而共生菌格氏链球菌占据生态主导地位，说明了抗菌肽具有致龋菌选择性抑制能力，能发挥生物膜的菌种调节作用。

7、抗菌肽对变异链球菌生物膜的抑制作用

选择主要致龋菌变异链球菌(Streptococcus mutans UA159)构建龋病生物膜模型，该模型是探究抗菌防龋药物致龋毒力抑制作用的常用生物膜模型。

具体探究步骤如下所示：

(1)挑取保藏的变异链球菌单菌落于10mL BHI液体培养基中，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)过夜培养；

(2)吸取20μL菌液于10mL BHI液体培养基中于37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)传代培养2代后，取对数生长中期菌液并将其用含1％蔗糖的BHIS培养基稀释至1×10⁶CFU/mL备用；

(3)24孔板中加入1mL变异链球菌的BHIS菌液，37℃恒温厌氧培养罐(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养16h形成变异链球菌生物膜；

(4)已形成的生物膜于8：00、13：00、18：00每天三次模拟口腔卫生措施使用8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL的抗菌肽溶液及无菌水短期处理5min，在第四天早上8：00即第十次处理后检测生物膜的乳酸产量、水不溶性胞外多糖产量和生物膜厚度；

(5)在最后一次5min短期处理后，生物膜加入1mL含0.2％的BPW培养基37℃恒温厌氧(80％N₂，10％H₂，10％CO₂)培养2h，乳酸产量使用碧云天乳酸试剂盒(A019-2)进行检测；

(6)在最后一次5min短期处理后，收集生物膜，无菌水充分洗涤去除可溶性糖，水不溶性胞外多糖使用蒽酮法进行检测；

(7)在最后一次5min短期处理后，生物膜使用SYTO-9标记细菌，TRITC-ConA标记多糖，使用激光共聚焦显微镜观察测量生物膜厚度。

经抗菌肽模拟口腔卫生时相的多次短期处理后，变异链球菌生物膜的乳酸产量如图7所示、水不溶性胞外多糖产量如图8所示、生物膜厚度如图9所示，可受到不同程度的抑制，说明短期应用抗菌肽具有生物膜致龋菌抑制潜力。

最后应当说明的是，以上实施例以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims

1.一种抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列为Glu-Leu-Leu-His-Leu-Leu-His-His-Leu-Leu-His-His。

2.一种抗菌肽衍生物，其特征在于，所述抗菌肽衍生物为在如权利要求1所述的抗菌肽的氨基酸序列的碳端酰胺化的产物Glu-Leu-Leu-His-Leu-Leu-His-His-Leu-Leu-His-His-NH₂。

3.一种抗菌肽配合物，其特征在于，所述抗菌肽配合物为如权利要求1所述的抗菌肽与药学上可接受的盐配合得到的物质。

4.根据权利要求3所述的抗菌肽配合物，其特征在于，所述药学上可接受的盐为有机酸或无机酸的碱式盐。

5.一种牙齿护理组合物，其特征在于，包含如权利要求1所述的抗菌肽。

6.一种抑菌药物组合物，其特征在于，包含如权利要求1所述的抗菌肽。

7.根据权利要求6所述的抑菌药物组合物，其特征在于，还包含药学上可接受的载体。

8.根据权利要求6所述的抑菌药物组合物，其特征在于，所述菌包括变异链球菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、粘性放线菌、内氏放线菌、血链球菌、格氏链球菌、轻唾链球菌、唾液链球菌中的至少一种。

9.如权利要求1所述的抗菌肽在制备调节龋齿中菌种微生态的药物上的应用。