CN113702373A - 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 - Google Patents
快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113702373A CN113702373A CN202111001352.5A CN202111001352A CN113702373A CN 113702373 A CN113702373 A CN 113702373A CN 202111001352 A CN202111001352 A CN 202111001352A CN 113702373 A CN113702373 A CN 113702373A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- indicator
- phenolphthalein
- methyl
- bromocresol green
- nitroyellow
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 13
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 27
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 239000002696 acid base indicator Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 6
- MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)phenol Chemical compound OC1=CC=C(CBr)C=C1 MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 52
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 27
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 23
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 22
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 17
- 229940075424 yellow phenolphthalein Drugs 0.000 claims description 15
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 claims description 13
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 claims description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 13
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 claims description 13
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 claims description 13
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 claims description 13
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 11
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 11
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical group CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 claims description 10
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 claims description 10
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 8
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 8
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 8
- 229940012189 methyl orange Drugs 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 claims description 6
- AYBSICMEDZIQTK-UHFFFAOYSA-K dipotassium sodium phosphoric acid phosphate Chemical compound [Na+].[K+].[K+].OP(O)(O)=O.[O-]P([O-])([O-])=O AYBSICMEDZIQTK-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 4
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims description 4
- STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M methyl orange Chemical compound [Na+].C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 STZCRXQWRGQSJD-GEEYTBSJSA-M 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- PCRBIPCFKLLDMK-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate hydrochloride Chemical compound Cl.[K+].[K+].OP([O-])([O-])=O PCRBIPCFKLLDMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- LMPDLIQFRXLCMO-UHFFFAOYSA-L dipotassium;hydrogen phosphate;phosphoric acid Chemical compound [K+].[K+].OP(O)(O)=O.OP([O-])([O-])=O LMPDLIQFRXLCMO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- FHUOTRMCFQTSOA-UHFFFAOYSA-M potassium;acetic acid;acetate Chemical compound [K+].CC(O)=O.CC([O-])=O FHUOTRMCFQTSOA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- IGHGOYDCVRUTSU-UHFFFAOYSA-M sodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O IGHGOYDCVRUTSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 claims description 2
- LVXHNCUCBXIIPE-UHFFFAOYSA-L disodium;hydrogen phosphate;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O LVXHNCUCBXIIPE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims description 2
- AKYUZBFQLWFNOB-UHFFFAOYSA-K trisodium 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate hydrochloride Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].Cl.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O AKYUZBFQLWFNOB-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 abstract description 19
- 229930182851 human metabolite Natural products 0.000 abstract description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 62
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 13
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 13
- 238000011161 development Methods 0.000 description 11
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 9
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 8
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 7
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 7
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 6
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 6
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- QALQXPDXOWOWLD-UHFFFAOYSA-N [N][N+]([O-])=O Chemical compound [N][N+]([O-])=O QALQXPDXOWOWLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 5
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 5
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 4
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 3
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 3
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 3
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 3
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N thymol blue Chemical compound C1=C(O)C(C(C)C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C(=CC(O)=C(C(C)C)C=2)C)=C1C PRZSXZWFJHEZBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 2
- 208000005223 Alkalosis Diseases 0.000 description 2
- 230000007950 acidosis Effects 0.000 description 2
- 208000026545 acidosis disease Diseases 0.000 description 2
- RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N alizarin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(O)=CC=C3C(=O)C2=C1 RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002340 alkalosis Effects 0.000 description 2
- -1 benzothiazole azo compound Chemical class 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- POCJOGNVFHPZNS-ZJUUUORDSA-N (6S,7R)-2-azaspiro[5.5]undecan-7-ol Chemical compound O[C@@H]1CCCC[C@]11CNCCC1 POCJOGNVFHPZNS-ZJUUUORDSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004229 Alkannin Substances 0.000 description 1
- NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N Alkannin Chemical compound C1=CC(O)=C2C(=O)C([C@@H](O)CC=C(C)C)=CC(=O)C2=C1O NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 235000009024 Ceanothus sanguineus Nutrition 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 240000003553 Leptospermum scoparium Species 0.000 description 1
- 235000015459 Lycium barbarum Nutrition 0.000 description 1
- BSPUVYFGURDFHE-UHFFFAOYSA-N Nitramine Natural products CC1C(O)CCC2CCCNC12 BSPUVYFGURDFHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 244000000231 Sesamum indicum Species 0.000 description 1
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 1
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 1
- 208000003217 Tetany Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019232 alkannin Nutrition 0.000 description 1
- UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N alkannin Natural products CC(=CCC(O)c1cc(O)c2C(=O)C=CC(=O)c2c1O)C UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- ABIUHPWEYMSGSR-UHFFFAOYSA-N bromocresol purple Chemical compound BrC1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(Br)C(O)=C(C)C=2)=C1 ABIUHPWEYMSGSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 1
- OBRMNDMBJQTZHV-UHFFFAOYSA-N cresol red Chemical compound C1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(C)C(O)=CC=2)=C1 OBRMNDMBJQTZHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N cyclobenzothiazole Natural products C1=CC=C2SC=NC2=C1 IOJUPLGTWVMSFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- POCJOGNVFHPZNS-UHFFFAOYSA-N isonitramine Natural products OC1CCCCC11CNCCC1 POCJOGNVFHPZNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940107698 malachite green Drugs 0.000 description 1
- FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M malachite green Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](C)C)C=C1 FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
- G01N21/80—Indicating pH value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
Abstract
本发明提供了一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂，包括酸碱指示剂、等电点为3.0‑10.0、分子量为10kDa‑200kDa的稳定性蛋白质和缓冲溶液。本发明的指示剂的颜色突变区间可以控制在0.1‑0.2之间，变色明显，可以使用含有该指示剂的固态基质对不同人体代谢物进行快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及生物化学技术领域，具体涉及快速响应细微酸碱度变化的颜色指示剂及其制备方法和应用。
背景技术
酸碱指示剂是一类在特定pH范围内，通过颜色变化反应酸碱度变化的有机、无机化合物及其组合。目前常用的pH指示剂有：麝香草酚蓝指示剂，变色范围为pH1.2-2.8(红→黄)；溴酚蓝指示剂，变色范围为pH2.8-4.6(黄→蓝绿)；甲基橙指示剂，变色范围pH3.2-4.4(红→黄)；刚果红指示剂，变色范围为pH3.5-5.2(蓝→红)；溴甲酚绿指示液，变色范围为pH3.6-5.2(黄→蓝)；茜素磺酸钠指示剂，变色范围pH3.7-5.2(黄→紫)；甲基红指示剂，变色范围为pH4.2-6.3(红→黄)；石蕊指示剂，变色范围为pH4.2-8.0(红→蓝)；溴甲酚紫指示剂，变色范围pH5.2-6.8(黄→紫)；硝氮黄指示剂，变色范围为pH6.0-7.0(黄→蓝紫色)；溴麝香草酚蓝指示剂，变色范围为pH6.0-7.6(黄→蓝)；中性红指示剂，变色范围为pH6.8-8.0(红→黄)；甲酚红指示剂，变色范围pH7.2-8.8(黄→红)；姜黄素指示剂，变色范围为pH7.8-9.2(黄→红棕色)；酚酞指示液，变色范围为pH8.3-10.0(无色→红)；孔雀石绿指示剂，变色范围为pH11.0-13.5(绿→无色)等。
pH检测应用在各行各业，例如在医学领域，人体的血液pH范围在7.35-7.45的范围内，当pH低于7.35时会发生酸中毒，pH低于7.0会发生严重酸中毒昏迷致死；血液的pH高于7.45会发生碱中毒，pH高于7.8就会发生严重碱中毒导致的手足抽搐致死的严重后果；在农业上，土壤的pH关系到农作物的生长，有的作物如芝麻、油菜、萝卜等可以生长在较大的pH范围内，有的却对土壤的pH反应非常敏感，如，茶树适宜在pH约为4.0～5.5的土壤中生长；在污水处理中，pH值也是一项重要指标。
人们也在不断的寻找新型指示剂组分，对指示剂的检测范围进行调整优化，多数指示剂最初来源于植物，例如石蕊指示剂、麝香草酚蓝指示剂、姜黄素指示剂等。同时对指示剂进行组合，扩大指示范围，突变范围变窄，例如一定比例的中性红乙醇溶液和百里酚蓝乙醇溶液混合，变色范围在pH7.0-7.4(玫瑰色→暗绿色)；一定比例的溴甲酚绿指示剂-甲基橙指示剂混合，变色范围为pH3.5-4.3(黄色→蓝绿色)。然而细分领域的检测对于pH指示剂并不追求范围，而对具体的变色点更加关注，例如江苏耐雀生物工程技术有限公司(CN105784702A)利用姜黄素与紫草素按照一定比例混合，扩大了酸碱指示剂的指示范围，突变范围窄；四川大学(CN111896536A)公开发明了一种苯并噻唑类偶氮化合物酸碱指示剂，颜色的突变范围窄，颜色变化直观明显便于观察；太原跃鹏电子科技有限公司(CN108120796A)公开发明了一种检测铁路蓄电池CO3 2-时pH值突变点的测定计算方法。但以上发明中的配方是基于简单的指示剂组合和改变溶液的离子环境，而得到的近似于突变的显色，例如对于阴道分泌物检测的pH指示剂变色区间只能限制在4.5-5.0之间，范围较宽，不能有效指示变色区间，对于实际样本检测具有较大的限制。
发明内容
本发明要解决的技术问题是开发一种能够将变色范围区间缩小，快速响应细微酸碱度变化的指示剂。
基于上述问题，本发明提出的技术方案是一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂，包括酸碱指示剂、等电点为3.0-10.0、分子量为10kDa-200kDa的蛋白质和缓冲溶液。
当蛋白质所处缓冲体系的pH≠pI时，蛋白质属于解离状态，并带有净电荷，利用缓冲溶液改变蛋白质所带电荷量，即利用缓冲溶液的pH值调节蛋白质的净电荷，进而与酸碱指示剂发生协同作用，调节其pH显色区间。理论上蛋白质所处的缓冲溶液pH偏离其pI越多时，所带净电荷越多，溶解度越大，反之净电荷越少溶解度越小，pH＝pI时溶解度最小，但是偏离越大，电荷越多反而会影响离子平衡体系，使得酸碱指示剂偏离过大，变色范围难以控制，无法响应细微变化，因此所选蛋白质的等电点范围控制为3.0-10.0之间。蛋白质分子量过大或者过小都会影响到蛋白在缓冲溶液的稳定性，因此将分子量限定值10kDa-200kDa是为了保证其稳定性。
所述蛋白质为钙调蛋白、牛血清白蛋白、肌球蛋白、胶原蛋白或乳铁蛋白中的一种。优选为牛血清白蛋白，肌球蛋白、胶原蛋白、乳铁蛋白中的一种，最优选为肌球蛋白、乳铁蛋白、胶原蛋白的一种。
所述酸碱指示剂为溴甲酚绿、甲基橙、甲基红、硝氮黄、酚酞，溴甲酚绿-甲基橙、溴甲酚绿-甲基红、溴甲酚绿-硝氮黄、溴甲粉绿-酚酞、甲基橙-甲基红、甲基橙-硝氮黄、甲基橙-酚酞、甲基红-硝氮黄、甲基红-酚酞、硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红、溴甲酚绿-甲基橙-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基橙-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-酚酞、甲基橙-甲基红-硝氮黄、甲基橙-甲基红-酚酞、甲基红-硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞、甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞中的一种。优选为溴甲酚绿、硝氮黄、溴甲酚绿-甲基橙、溴甲酚绿-硝氮黄、甲基橙-甲基红、甲基红-硝氮黄、硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-酚酞、甲基橙-甲基红-酚酞、甲基红-硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞、甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞或溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞中的一种，最优选为溴甲酚绿-硝氮黄、甲基橙-甲基红、硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄、甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞中的一种。
缓冲溶液包括柠檬酸-柠檬酸钠、柠檬酸-氢氧化钠、柠檬酸钠-盐酸、磷酸二氢钠-磷酸氢二钾、磷酸二氢钠-氢氧化钠、磷酸氢二钾-盐酸、磷酸氢二钾-磷酸、醋酸-醋酸钠、醋酸-醋酸钾。优选为柠檬酸-柠檬酸钠、柠檬酸-氢氧化钠、磷酸二氢钠-磷酸氢二钾、磷酸氢二钾-盐酸、磷酸氢二钾-磷酸、醋酸-醋酸钠、醋酸-醋酸钾。最优选为柠檬酸-柠檬酸钠、磷酸二氢钠-磷酸氢二钾、醋酸-醋酸钠中的一种。
一种制备权利要求1所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)称取一定量蛋白质溶解于甘油中，制备质量分数为0.01％～0.05％的蛋白质母液；
2)称取一定量酸碱指示剂并使之溶解，制备质量分数为0.05％～0.5％的酸碱指示剂，溶剂可以为超纯水、乙醇或甲醇；
3)称取一定量缓冲溶液的各组分，制备0.1M的不同pH的缓冲溶液，pH范围为2.0-14.0；
4)将1)得到的蛋白质溶液与2)得到的酸碱指示剂以1:5～1:50的体积比混合；
5)将4)的混合液用3)得到的缓冲溶液定容。
将该指示剂附着于固体基质对人体代谢物，如唾液、血液、汗液、尿液、精液、羊水、乳汁、阴道黏液、宫颈黏液等进行检测，所述固体基质包括指示拭子、试纸、无尘布、纤维素敷料。
本发明的优点和有益效果：
本发明利用向常规指示剂中添加不同的等电点及分子量的蛋白质以及配套的缓冲溶液的组合，获得能够快速响应酸碱度变化的超敏感颜色指示剂，指示剂由于额外添加特殊的等电点和分子量的蛋白，使得指示剂的颜色突变区间可以控制在0.1-0.2之间，变色明显，可以使用含有该指示剂的固态基质对不同人体代谢物进行快速检测。
附图说明
图1是突变点为pH 6.2的超敏感指示剂显色。
图2是突变点为pH 3.8的超敏感指示剂显色。
图3是检测阴道粘液的超敏感指示拭子显色。
图4是检测尿液的超敏感指示试纸显色。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。
实施例1突变显色点为pH 6.2的超敏感指示剂的制备
配制0.015％乳铁蛋白溶液：称取1.5mg乳铁蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.2％硝氮黄指示剂：称取0.2g硝氮黄溶解并定容于100mL无水乙醇中；配制0.1mol/L柠檬酸溶液：取柠檬酸21.01g溶解并定容于1000mL纯水，配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液：取柠檬酸钠29.41g溶解并定容于1000mL纯水；将19.0mL柠檬酸溶液和81.0mL柠檬酸钠溶液混合，制成pH6.0的SSC缓冲溶液；将上述100μL乳铁蛋白溶液和1.5mL硝氮黄溶液混合均匀，并用pH6.0的SSC溶液定容至10mL，制成突变显色点为pH6.2的超敏感指示剂。
如图1所示，将制成的突变点为pH 6.2的超敏感指示剂浸润滤纸或者无尘布块烘干后，滴加不同pH的检测溶液，当pH≥6.2时，指示滤纸和布块由黄色突变为绿色。
实施例2突变显色点为pH 4.4的超敏感指示剂的制备
配制0.025％肌球蛋白溶液：称取2.5mg肌球蛋白溶解并定容于100mL甘油中；配制0.1％溴甲酚绿-硝氮黄指示剂：同时称取0.02g溴甲酚绿和0.08g硝氮黄试剂，溶解并定容于100mL无水乙醇中；配制0.1mol/L柠檬酸溶液：取柠檬酸21.01g溶解并定容于1000mL纯水，配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液：取柠檬酸钠29.41g溶解并定容于1000mL纯水；将65.5mL柠檬酸溶液和34.5mL柠檬酸钠溶液混合，制成pH 4.0的SSC缓冲溶液；将上述50μL肌球蛋白溶液和2mL溴甲酚绿-硝氮黄指示剂混合均匀，并用pH 4.0的SSC溶液定容至10mL，制成突变显色点为pH 4.4的超敏感指示剂。
实施例3突变显色点为pH 3.8的超敏感指示剂制备
配制0.02％牛血清白蛋白溶液：称取20mg乳铁蛋白溶解并定容于100mL甘油中；配制0.47％溴甲酚绿-甲基橙-甲基红指示剂：同时称取0.25g溴甲酚绿、0.1g甲基橙、0.12g甲基红试剂，溶解并定容于100mL无水乙醇中；配制0.1mol/L醋酸钠溶液：取醋酸钠8.2g溶解并定容于1000mL纯水；配制0.1mol/L醋酸溶液：2.86mL醋酸溶液用超纯水稀释至500mL；将15.0mL醋酸溶液和75.0mL醋酸钠溶液混合，制成pH 3.5的ABS缓冲溶液；将上述200μL牛血清白蛋白溶液和1.5mL溴甲酚绿-甲基橙-甲基红指示剂混合均匀，并用pH 3.5的ABS溶液定容至10mL，制成突变显色点为pH 3.8的超敏感指示剂。
如图2所示，将制成的突变点为pH 3.8的超敏感指示剂浸润滤纸或者无尘布块烘干后，滴加不同pH的检测溶液，当pH≥3.8时，指示滤纸和布块由黄色突变为绿色。
实施例4突变显色点为pH8.0的超敏感指示剂的制备
配制0.04％牛血清白蛋白溶液：称取4.0mg牛血清白蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.48％溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞指示剂：同时称取0.1g溴甲酚绿、0.12g甲基红、0.16g硝氮黄、0.1g酚酞溶解并定容于100mL甲醇中；配制0.1mol/L磷酸二氢钠溶液：取磷酸二氢钠12.0g溶解并定容于1000mL纯水；配制0.1mol/L磷酸氢二钾溶液：取磷酸氢二钾17.4g溶解并定容于1000mL纯水；将16.0mL磷酸二氢钠溶液和84.0mL磷酸氢二钾溶液混合，制成pH 7.5的PBS缓冲溶液；将上述30μL牛血清白蛋白溶液和1.0mL溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞混合均匀，并用pH 7.5的PBS溶液定容至10mL，制成突变显色点为pH 8.0的超敏感指示剂，即检测物质pH≥8.0时，溶液由灰色突变为蓝紫色。
实施例5pH突变显色的检测阴道粘液的超敏感指示拭子的制备
配制0.025％肌球蛋白溶液：称取2.5mg乳铁蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.26％溴甲酚绿-硝氮黄指示剂：同时称取0.06g溴甲酚绿和0.2g硝氮黄试剂，溶解并定容于100mL无水乙醇中；配制0.1mol/L柠檬酸溶液：取柠檬酸21.01g溶解并定容于1000mL纯水，配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液：取柠檬酸钠29.41g溶解并定容于1000mL纯水；将65.5mL柠檬酸溶液和34.5mL柠檬酸钠溶液混合，制成pH 4.0的SSC缓冲溶液；将上述50μL肌球蛋白溶液和2mL溴甲酚绿-硝氮黄指示剂混合均匀，并用pH4.0的SSC溶液定容至10mL，得到突变显色点为pH 4.6的超敏感指示剂。将超敏感指示剂滴加在取样拭子上，使其完全浸湿之后置于真空干燥箱中，在30℃的条件下干燥1小时，制得超敏感检测阴道粘液的超敏感指示拭子。
阴道粘液的正产pH值为3.8～4.5，当pH值高于4.5时，是白带异常的表现之一。用超敏感检测阴道粘液的指示拭子沾取阴道分泌物样本，若拭子不变色为黄色，则说明分泌物pH正常；若拭子变色为绿色，则说明分泌物pH异常。如图3所示，将不同阴道粘液样本分别滴加在pH试纸和超敏感指示拭子上，根据pH试纸判断其实际pH值，其中pH≤4.6的拭子颜色为黄色，pH≥4.6的拭子为绿色。
实施例6pH突变显色的检测尿液用超敏感试纸的制备
配制0.015％乳铁蛋白溶液：称取1.5mg乳铁蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.2％硝氮黄-酚酞指示剂：称取0.12g硝氮黄指示剂和0.08g酚酞溶解并定容于100mL无水乙醇中；配制0.1mol/L柠檬酸溶液：取柠檬酸21.01g溶解并定容于1000mL纯水，配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液：取柠檬酸钠29.41g溶解并定容于1000mL纯水；将19.0mL柠檬酸溶液和81.0mL柠檬酸钠溶液混合，制成pH6.0的SSC缓冲溶液；将上述280μL乳铁蛋白溶液和1.5mL硝氮黄-酚酞指示剂溶液混合均匀，并用pH6.0的SSC溶液定容至10mL，得到突变显色点为pH 6.5的超敏感指示剂。
若将超敏感指示剂滴加在滤纸上，使其完全浸湿之后置于真空干燥箱中在30℃的条件下干燥20分钟，制得检测尿液的超敏感试纸。
尿液的正常pH值为5.5～6.5，当pH值高于6.5时，是身体预警的表现之一。用超敏感尿液检测沾取尿液样本，若试纸不变色为黄色，则说明尿液pH正常；若试纸变色为蓝绿色，则说明尿液pH异常。图4所示，将不同尿液样本分别滴加在pH试纸和超敏感试纸上，根据pH试纸判断其实际pH值，其中pH≤6.5的拭子颜色为黄色，pH>6.5的拭子为蓝绿色。
实施例7 pH突变显色的检测精液的超敏感试纸的制备
配制0.04％牛血清白蛋白溶液：称取4.0mg牛血清白蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.48％溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞指示剂：同时称取0.1g溴甲酚绿、0.12g甲基红、0.16g硝氮黄、0.1g酚酞溶解并定容于100mL甲醇中；配制0.1mol/L磷酸二氢钠溶液：取磷酸二氢钠12.0g溶解并定容于1000mL纯水；配制0.1mol/L磷酸氢二钾溶液：取磷酸氢二钾17.4g溶解并定容于1000mL纯水；将16.0mL磷酸二氢钠溶液和84.0mL磷酸氢二钾溶液混合，制成pH 7.5的PBS缓冲溶液；将上述30μL牛血清白蛋白溶液和1.0mL溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞混合均匀，并用pH 7.5的PBS溶液定容至10mL，制成突变显色点为pH 8.0的超敏感指示剂。
将超敏感指示剂滴加在吸水试纸上，使其完全浸湿之后置于真空干燥箱中在30℃的条件下干燥20分钟，制得检测精液的超敏感试纸。
精液的正产pH值为7.2～7.8，当pH值高于8.0时，则可能出现炎症。用超敏感精液检测试纸沾取精液样本，若试纸不变色为灰色，则说明精液pH正常；若试纸变色为蓝紫色，则说明精液pH偏高。
实施例8皮肤表面pH指示用的超敏感创面酸性敷料的制备
将超敏感颜色指示剂与纤维素敷料混合，作为伤口愈合指示剂的使用，具体配方如下：
配制0.025％胶原蛋白溶液：称取2.5mg胶原蛋白溶解并定容于10mL甘油中；配制0.13％硝氮黄-酚酞指示剂：同时称取0.05g硝氮黄和0.08g酚酞试剂，溶解并定容于100mL无菌水中；配制0.1mol/L柠檬酸溶液：取柠檬酸21.01g溶解并定容于1000mL纯水；将27.5mL柠檬酸溶液和72.5mL柠檬酸钠溶液混合，制成pH 5.5的SSC缓冲溶液；将上述50μL胶原蛋白溶液和2mL硝氮黄-酚酞指示剂混合均匀，并用pH 5.5的SSC溶液定容至10mL，得到突变显色点为pH 6.5的超敏感指示剂。
将1mL超敏感指示剂与一片纤维素敷料混合，当其渗透均匀之后置于真空干燥箱中在25℃的条件下干燥10分钟，制得超敏感创面酸性敷料。
正常皮肤的pH值范围在4.0～6.0，慢性创面pH范围在6.5～8.5。当在病人的皮肤创面敷上此酸性敷料，敷料为浅蓝色；当伤口愈合后，敷料可显示为无色或者淡黄色。
以上对发明的几个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
Claims (10)
1.一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂，包括酸碱指示剂，其特征在于：还包括等电点为3.0-10.0、分子量为10kDa-200kDa的稳定性蛋白质和缓冲溶液。
2.根据权利要求1所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：所述蛋白质为钙调蛋白、牛血清白蛋白、肌球蛋白、胶原蛋白或乳铁蛋白中的一种。
3.根据权利要求2所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：所述蛋白质优选为肌球蛋白、乳铁蛋白或胶原蛋白中的一种。
4.根据权利要求1所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：所述酸碱指示剂为溴甲酚绿、甲基橙、甲基红、硝氮黄、酚酞，溴甲酚绿-甲基橙、溴甲酚绿-甲基红、溴甲酚绿-硝氮黄、溴甲粉绿-酚酞、甲基橙-甲基红、甲基橙-硝氮黄、甲基橙-酚酞、甲基红-硝氮黄、甲基红-酚酞、硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红、溴甲酚绿-甲基橙-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基橙-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-酚酞、甲基橙-甲基红-硝氮黄、甲基橙-甲基红-酚酞、甲基红-硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄-酚酞、甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞或溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞中的一种。
5.根据权利要求4所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：酸碱指示剂优选为溴甲酚绿-硝氮黄、甲基橙-甲基红、硝氮黄-酚酞、溴甲酚绿-甲基红-硝氮黄、溴甲酚绿-甲基红-酚酞、溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄、甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞或溴甲酚绿-甲基橙-甲基红-硝氮黄-酚酞中的一种。
6.根据权利要求1所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：缓冲溶液包括柠檬酸-柠檬酸钠、柠檬酸-氢氧化钠、柠檬酸钠-盐酸、磷酸二氢钠-磷酸氢二钾、磷酸二氢钠-氢氧化钠、磷酸氢二钾-盐酸、磷酸氢二钾-磷酸或醋酸-醋酸钠或醋酸-醋酸钾中的一种。
7.根据权利要求6所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂，其特征在于：缓冲溶液优选柠檬酸-柠檬酸钠、磷酸二氢钠-磷酸氢二钾或醋酸-醋酸钠中的一种。
8.一种制备权利要求1～7任一所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)称取一定量蛋白质溶解于甘油中，制备质量分数为0.01％～0.05％的蛋白质母液；
2)称取一定量酸碱指示剂并使之溶解，制备质量分数为0.05％～0.5％的酸碱指示剂；
3)称取一定量缓冲溶液的各组分，制备0.1M的不同pH的缓冲溶液，pH为2.0～14.0；
4)将1)得到的蛋白质溶液与2)得到的酸碱指示剂以1:5～1:50的体积比混合；
5)将4)的混合液用3)得到的缓冲溶液定容。
9.权利要求1所述的一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂在检测人体代谢物中的应用。
10.根据权利要求9所述的快速响应细微酸碱度变化的指示剂在检测人体代谢物中的应用，其特征在于：将指示剂附着于固体基质对人体代谢物进行检测，固体基质包括指示拭子、试纸、纤维素敷料。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111001352.5A CN113702373A (zh) | 2021-08-30 | 2021-08-30 | 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 |
| US17/910,733 US20240201092A1 (en) | 2021-08-30 | 2021-11-30 | Indicator rapidly responding to subtle ph change |
| PCT/CN2021/134257 WO2023029251A1 (zh) | 2021-08-30 | 2021-11-30 | 一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111001352.5A CN113702373A (zh) | 2021-08-30 | 2021-08-30 | 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113702373A true CN113702373A (zh) | 2021-11-26 |
Family
ID=78656519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111001352.5A Pending CN113702373A (zh) | 2021-08-30 | 2021-08-30 | 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240201092A1 (zh) |
| CN (1) | CN113702373A (zh) |
| WO (1) | WO2023029251A1 (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023029251A1 (zh) * | 2021-08-30 | 2023-03-09 | 苏州图灵微生物科技有限公司 | 一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116042785B (zh) * | 2023-03-22 | 2023-07-14 | 翌圣生物科技(上海)股份有限公司 | 用于rt-lamp扩增试剂的缓冲剂及rt-lamp扩增试剂 |
Citations (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3395082A (en) * | 1964-07-20 | 1968-07-30 | Miles Lab | Test composition device and method for detecting urea in aqueous fluids |
| US3438737A (en) * | 1965-10-01 | 1969-04-15 | Miles Lab | Protein test composition,device and method |
| US4481296A (en) * | 1983-02-15 | 1984-11-06 | Great Lakes Chemical Corporation | Color indicator system for pH measurement |
| CN1269507A (zh) * | 2000-03-24 | 2000-10-11 | 青岛海洋化工有限公司 | 彩色变色指示剂及其生产方法 |
| JP2002228590A (ja) * | 2000-10-27 | 2002-08-14 | Ethicon Inc | 二重緩衝剤システムを有する滅菌処理用の生物学的指示装置 |
| CN1501072A (zh) * | 2002-11-19 | 2004-06-02 | 上海三爱思试剂有限公司 | 一种用于检测溶液酸碱度的试纸 |
| US20040219620A1 (en) * | 2003-04-29 | 2004-11-04 | Mayer Brent A. | Chromogenic substrate with a pH indicator dye |
| US20050276769A1 (en) * | 2004-06-15 | 2005-12-15 | The Procter & Gamble Company | System for evaluating the pH and buffering capacity of moisture containing cleansing articles |
| JP2008058033A (ja) * | 2006-08-29 | 2008-03-13 | Kanto Chem Co Inc | カルシウム濃度測定試薬および測定方法 |
| US20090185956A1 (en) * | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Michael Carl Junger | pH SENSITIVE INDICATOR DEVICE |
| CN105784702A (zh) * | 2016-05-23 | 2016-07-20 | 江苏耐雀生物工程技术有限公司 | 一种酸碱指示剂及其制备方法 |
| CN106370646A (zh) * | 2016-08-16 | 2017-02-01 | 南阳师范学院 | 检测待测样品中蛋白质的方法 |
| CN108051580A (zh) * | 2017-12-04 | 2018-05-18 | 南京祥中生物科技有限公司 | 一种同时检测α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法 |
| EP3469353A1 (en) * | 2016-06-13 | 2019-04-17 | Insignia Technologies Limited | Indicator device |
| KR20190091121A (ko) * | 2018-01-26 | 2019-08-05 | 고려대학교 산학협력단 | 카제인 나트륨과 펙틴을 이용한 식품 포장용 이산화탄소 인디케이터 |
| CN111896536A (zh) * | 2019-05-06 | 2020-11-06 | 四川大学 | 一种苯并噻唑类偶氮酸碱指示剂及其合成方法 |
| US20210096080A1 (en) * | 2019-09-30 | 2021-04-01 | Chungdo Pharm. Co., Ltd | Test strip for detecting microalbumin in urine with high sensitivity |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2797037B2 (ja) * | 1991-07-30 | 1998-09-17 | 株式会社大貴 | 酸塩基性指示体を含むインキが印刷されている雨具及びビニルハウス |
| JPH05196578A (ja) * | 1991-12-12 | 1993-08-06 | Nec Corp | バイオセンサ用有機薄膜の評価方法 |
| JP2005257513A (ja) * | 2004-03-12 | 2005-09-22 | Tokuyama Corp | 唾液緩衝能検査試薬 |
| US8623292B2 (en) * | 2010-08-17 | 2014-01-07 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Dehydration sensors with ion-responsive and charged polymeric surfactants |
| JP5542888B2 (ja) * | 2011-10-17 | 2014-07-09 | アークレイ株式会社 | 蛋白質濃度評価方法、分析用具、及び分析装置 |
| WO2018196802A1 (zh) * | 2017-04-28 | 2018-11-01 | 利多(香港)有限公司 | 一种检测装置和可直观读取检测结果的样本检测方法 |
| CN107827850B (zh) * | 2017-11-17 | 2021-03-30 | 山西大学 | 一种酸碱指示剂及其制备方法和应用 |
| CN109060798A (zh) * | 2018-08-23 | 2018-12-21 | 杭州元研细胞生物科技有限公司 | 一种用于阴道内感染的诊断试剂 |
| CN112625460A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-04-09 | 江南大学 | 一种pH敏感染料的制备方法 |
| CN113702373A (zh) * | 2021-08-30 | 2021-11-26 | 北京图灵微研生物科技有限公司 | 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 |
-
2021
- 2021-08-30 CN CN202111001352.5A patent/CN113702373A/zh active Pending
- 2021-11-30 WO PCT/CN2021/134257 patent/WO2023029251A1/zh active Application Filing
- 2021-11-30 US US17/910,733 patent/US20240201092A1/en active Pending
Patent Citations (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3395082A (en) * | 1964-07-20 | 1968-07-30 | Miles Lab | Test composition device and method for detecting urea in aqueous fluids |
| US3438737A (en) * | 1965-10-01 | 1969-04-15 | Miles Lab | Protein test composition,device and method |
| US4481296A (en) * | 1983-02-15 | 1984-11-06 | Great Lakes Chemical Corporation | Color indicator system for pH measurement |
| CN1269507A (zh) * | 2000-03-24 | 2000-10-11 | 青岛海洋化工有限公司 | 彩色变色指示剂及其生产方法 |
| JP2002228590A (ja) * | 2000-10-27 | 2002-08-14 | Ethicon Inc | 二重緩衝剤システムを有する滅菌処理用の生物学的指示装置 |
| CN1501072A (zh) * | 2002-11-19 | 2004-06-02 | 上海三爱思试剂有限公司 | 一种用于检测溶液酸碱度的试纸 |
| US20040219620A1 (en) * | 2003-04-29 | 2004-11-04 | Mayer Brent A. | Chromogenic substrate with a pH indicator dye |
| US20050276769A1 (en) * | 2004-06-15 | 2005-12-15 | The Procter & Gamble Company | System for evaluating the pH and buffering capacity of moisture containing cleansing articles |
| JP2008058033A (ja) * | 2006-08-29 | 2008-03-13 | Kanto Chem Co Inc | カルシウム濃度測定試薬および測定方法 |
| US20090185956A1 (en) * | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Michael Carl Junger | pH SENSITIVE INDICATOR DEVICE |
| CN105784702A (zh) * | 2016-05-23 | 2016-07-20 | 江苏耐雀生物工程技术有限公司 | 一种酸碱指示剂及其制备方法 |
| EP3469353A1 (en) * | 2016-06-13 | 2019-04-17 | Insignia Technologies Limited | Indicator device |
| CN106370646A (zh) * | 2016-08-16 | 2017-02-01 | 南阳师范学院 | 检测待测样品中蛋白质的方法 |
| CN108051580A (zh) * | 2017-12-04 | 2018-05-18 | 南京祥中生物科技有限公司 | 一种同时检测α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法 |
| KR20190091121A (ko) * | 2018-01-26 | 2019-08-05 | 고려대학교 산학협력단 | 카제인 나트륨과 펙틴을 이용한 식품 포장용 이산화탄소 인디케이터 |
| CN111896536A (zh) * | 2019-05-06 | 2020-11-06 | 四川大学 | 一种苯并噻唑类偶氮酸碱指示剂及其合成方法 |
| US20210096080A1 (en) * | 2019-09-30 | 2021-04-01 | Chungdo Pharm. Co., Ltd | Test strip for detecting microalbumin in urine with high sensitivity |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JINJIANG LI 等: "Acid-base characteristics of bromophenol blue-citrate buffer systems in the amorphous state", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES》, vol. 93, no. 03, 31 March 2004 (2004-03-31), pages 697 - 712 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023029251A1 (zh) * | 2021-08-30 | 2023-03-09 | 苏州图灵微生物科技有限公司 | 一种快速响应细微酸碱度变化的指示剂 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20240201092A1 (en) | 2024-06-20 |
| WO2023029251A1 (zh) | 2023-03-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113702373A (zh) | 快速响应细微酸碱度变化的指示剂及其制备方法和应用 | |
| Robertson et al. | Calcium measurements in serum and plasma—total and ionized | |
| US3438737A (en) | Protein test composition,device and method | |
| US3485587A (en) | Protein indicator | |
| Kenny | The determination of cholesterol by the Liebermann-Burchard reaction | |
| US20080086060A1 (en) | Secretion-monitoring article | |
| US10383564B2 (en) | Indicator panels for incontinence products | |
| JPH0244256A (ja) | 微量の蛋白質を試験するための組成物及び方法 | |
| CA1338588C (en) | Composition and method of assaying liquids for specific gravity | |
| US3814586A (en) | Composition,method and device for determining bilirubin and urobilinogen | |
| US20070134740A1 (en) | Compositions and articles for detection of analytes exceeding a pre-set threshold | |
| CN103901034A (zh) | 一种检测尿液中微量白蛋白的检测试剂条及其制备方法 | |
| EP0097472B1 (en) | Method of determining calcium in a fluid sample | |
| CN108593633A (zh) | 一种用于快速检测唾液尿酸的检测试纸 | |
| US3558278A (en) | Determination of albumin | |
| CA2215958C (en) | Method and apparatus for evaluating estrogen dependent physiological conditions | |
| Sandhu | Serum phospholipids determined without acid digestion. | |
| CA1076009A (en) | Reagent and method for determination of phosphorous | |
| US5922613A (en) | Method for evaluating estrogen dependent physiological conditions | |
| US6852541B2 (en) | Rapid assay for testing overall oxidative stress | |
| CN112240931A (zh) | 一种免疫比浊试剂盒 | |
| DK169415B1 (da) | Fremgangsmåde og reagens til kvantitativ fotometrisk bestemmelse af fosfor i legemsvæsker | |
| Bradbury | A simplified method for the estimation of sodium | |
| Tarnoky | Apparent protein'in human urine: some surface film measurements | |
| JPH043828B2 (zh) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |