CN113662959B - 一种预防和/或修复皮肤受损的组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种预防和/或修复皮肤受损的组合物及其用途，本发明所述组合物包括葛根素和陈皮多糖，利用葛根素和陈皮多糖制备的凝胶剂外用可以显著加速伤口愈合，增加受损皮肤毛囊新生数量，降低新生皮肤增生程度，降低新生皮肤厚度，加快皮肤修复，减少修复时间；同时能够使新生的皮肤更平整，减少疤痕的产生。可将葛根素和陈皮多糖组合物用于制备预防和/或修复皮肤受损药物，用于预防和/或治疗皮肤受损相关疾病。

Description

一种预防和/或修复皮肤受损的组合物及其用途
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种预防和/或修复皮肤受损的组合物及其用途。
背景技术
随着国家经济水平的提高，人们对身体健康越来越重视，皮肤受损后引起的修复成为研究的热点。毛囊是参与毛发生长最主要的组织，当出现皮肤的损伤，如烧烫伤、冷冻伤、切割伤时，在愈合的组织中毛囊形成的数量最终将决定新生毛发的生长状态。目前已出现的以促进毛囊生长、抑制局部的炎症反应、维持毛囊结构和功能的完整性为治疗目标的药物，包括抗雄性激素药、抗炎药、自由基清除剂等。但由于这些化学药物毒副作用和耐药性的局限性，不易长期服药治疗。由此研究工作者对毒副作用小、特异性强、促进毛囊生长，修复受损皮肤的药物日益关注。
葛根素是葛根最重要的活性成分之一，具有典型的雌激素样生物活性，而且在体内和体外均有明显抗炎及抗氧化应激的作用，现在已有文章报道葛根素可有效延缓皮肤的衰老状态(郑伟.葛根及葛根素对衰老小鼠皮肤总抗氧化能力和羟自由基抑制率影响的实验研究[D].辽宁中医药大学,2012)；抑制皮肤氧化应激状态(李东子,吴景东,王培.葛根及葛根素对自然衰老小鼠GSH-PX活性变化的实验研究[J].中国美容医学,2011,20(12):1921-1922)；同时对瘢痕组织也有明显的治疗作用(岳冬梅,阎冰,马轶文.不同浓度葛根素溶液对人皮肤成纤维细胞生物学效应的影响[J].天津中医药,2016,33(05):311-313)。关于与葛根素的联合使用，现有技术已报道，例如，葛根素与盐酸万古霉素联合使用可提高伤口愈合作用，且效果优于葛根素单独使用(王琼.抗菌疝修复补片与创伤修复的研究[D].北京协和医学院,2013.)。但是，盐酸万古霉素是一种抗生素，抗生素的长期使用或滥用是导致耐药性产生的主要原因；在皮肤受损修复愈受重视的今天，皮肤受损修复药物的使用也将愈加频繁，盐酸万古霉素与葛根素的联合使用明显存在增大耐药性的风险。因此，研究非抗生素与葛根素联用的药物十分有必要。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有利用葛根素治疗皮肤受损的不足，提供一种预防和/或修复皮肤受损的组合物及其用途，利用葛根素和陈皮多糖促进受损皮肤愈合的组织中毛囊修复和/或抑制愈合的皮肤增生，进而修复皮肤，为治疗和预防皮肤损伤提供一种新的有效、安全、价廉的新型药物。
本发明的目的在于提供陈皮多糖在制备预防和/或修复皮肤受损的药物中的应用。
本发明的目的还在于提供一种预防和/或修复皮肤受损的组合物。
本发明的目的还在于提供所述组合物在制备预防和/或治疗皮肤受损药物中的应用。
本发明的目的还在于提供一种预防和/或修复皮肤受损的药物。
本发明的上述目的通过以下技术手段实现：
陈皮多糖在制备预防和/或修复皮肤受损的药物中的应用。
优选地，是在制备修复皮肤缺损的药物中的应用。
进一步优选地，是在制备加快伤口愈合的药物中的应用
进一步优选地，是在制备恢复受损皮肤毛囊数量的药物中的应用。
进一步优选地，是在制备降低受损皮肤愈合的组织新生皮肤增生程度和新生皮肤厚度的药物中的应用。
一种预防和/或修复皮肤受损的组合物，所述组合物含有葛根素和陈皮多糖。
优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为1～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～5：1～5。
最优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2：1。
所述组合物在制备预防和/或修复皮肤受损的药物中的应用也在本发明保护范围之内。
优选地，是在制备修复皮肤缺损的药物中的应用。
进一步优选地，是在制备加快伤口愈合的药物中的应用
进一步优选地，是在制备恢复受损皮肤毛囊数量的药物中的应用。
进一步优选地，是在制备降低受损皮肤愈合的组织新生皮肤增生程度和新生皮肤厚度的药物中的应用。
一种预防和/或修复皮肤受损的药物，含有陈皮多糖。
优选地，所述药物的每日用制剂量中陈皮多糖质量含量不小于为0.5％。
优选地，所述药物还含有葛根素。
优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为1～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～5：1～5。
最优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2：1。
优选地，所述药物的每日用制剂量中葛根素质量含量不小于1％，陈皮多糖质量含量不小于0.5％。
最优选地，所述药物的每日用制剂量中葛根素质量含量为1％，陈皮多糖质量含量为0.5％。
优选地，所述药物的剂型为软膏剂、酊剂、醑剂、乳剂、油剂或凝胶剂。
优选地，所述药物的剂型为凝胶剂。
优选地，所述药物可作为医用材料。
一种预防和/或修复皮肤受损的凝胶剂，含有葛根素和陈皮多糖，
优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为1～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～10：1～10。
进一步优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2～5：1～5。
最优选地，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为2：1。
本发明通过以下方法研究葛根素联合陈皮多糖在预防和/或修复皮肤受损的中的应用：
建立皮肤损伤模型，经过葛根素和陈皮多糖组合物治疗之后，伤口愈合加快，受损皮肤毛囊新生数量增加，愈合的组织中新生皮肤增生程度降低，新生皮肤厚度降低，说明葛根素联合陈皮多糖具有促进受损皮肤恢复的作用。
相比现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明研究发现利用陈皮多糖制备得到的陈皮多糖凝胶剂能够加速伤口愈合，增加受损皮肤毛囊新生数量，降低新生皮肤增生程度，降低新生皮肤厚度，加快皮肤修复，减少修复时间；同时，利用葛根素联合陈皮多糖制备得到葛根素-陈皮多糖凝胶剂，该葛根素-陈皮多糖凝胶剂能够显著加速伤口愈合，增加受损皮肤毛囊新生数量，降低新生皮肤增生程度，降低新生皮肤厚度，加快皮肤修复，减少修复时间；新生皮肤厚度降低，皮肤可以更早的进入重塑期，同时能够使新生的皮肤更平整，减少疤痕的产生；可用于预防和/或修复皮肤受损障碍；本发明开辟了单独的陈皮多糖和葛根素联合陈皮多糖作为药物的新用途，也为治疗和预防皮肤受损提供一种新的有效、安全、价廉的新型药物，为患者带来福音。
附图说明
图1为本发明实施例2中不同凝胶剂涂抹的小鼠受损皮肤伤口愈合的情况。
图2为本发明实施例2中不同凝胶剂涂抹的小鼠受损皮肤伤口愈合率。
图3为本发明实施例3中不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的形态。
图4为本发明实施例3中不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的毛囊数量。
图5为本发明实施例3中不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的表皮层厚度。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
苏木素伊红染色试剂盒：北京索莱宝科技有限公司，批号：G1120；Sevage试剂：氯仿：正丁醇＝4:1，天津大茂化学试剂厂。
实施例1凝胶剂的制备
1.陈皮多糖和葛根素来源
陈皮多糖购置于四川省维克奇生物科技有限公司，产品货号为：wkq-08430，多糖纯度》90％。葛根素购置于成都普菲德生物科技有限公司，产品货号：3681-99-0，纯度》98％。
2.凝胶剂的制备
将1％透明质酸溶解在纯水中，然后用盐酸将溶液pH调到4，在冰浴条件下加入交联剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(终浓度2mM)搅拌0.5h，再缓慢滴加交联剂N-羟基琥珀酰亚胺溶液(终浓度2mM)搅拌2h，调节两种交联剂比例为1:1，搅拌均匀后得空白凝胶剂。
向空白凝胶剂中添加药物可得载药凝胶剂：添加葛根素，使葛根素质量含量为1％，即得葛根素凝胶剂；添加陈皮粗多糖，使陈皮粗多糖质量含量为0.5％，即得陈皮多糖凝胶剂；添加葛根素和陈皮粗多糖，使葛根素质量含量为1％，陈皮粗多糖质量含量0.5％，即得葛根素-陈皮多糖凝胶剂。
实施例2不同凝胶剂对受损皮肤伤口愈合的影响
将C57/BL小鼠32只随机分成4组：对照组，葛根素治疗组，陈皮多糖治疗组；葛根素-陈皮多糖治疗组，每组8只，正常饮食饮水，背部取走直径1cm皮肤组织，建立皮肤损伤模型，随后对照组涂抹空白凝胶剂，葛根素治疗组涂抹实施例1制备的葛根素凝胶剂，陈皮多糖治疗组涂抹实施例1制备的陈皮多糖凝胶剂，葛根素-陈皮多糖治疗组涂抹实施例1制备的葛根素-陈皮多糖凝胶剂，每天2次，持续9天。每隔两天观察受损皮肤伤口愈合情况，并计算伤口愈合率。
Figure BDA0003262010300000051
不同凝胶剂涂抹的小鼠受损皮肤伤口愈合的情况如图1所示。从图1可以看出，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组小鼠的伤口愈合速度均比对照组更快，且愈合速度为葛根素-陈皮多糖治疗组>葛根素治疗组>陈皮多糖治疗组。
不同凝胶剂涂抹的小鼠受损皮肤伤口愈合率如图2所示。从图2可以看出，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组小鼠的伤口愈合率均高于70％，分别为78.02％，76.36％和91.36％，显著高于对照组67.60％；同时葛根素-陈皮多糖治疗组的伤口愈合率为91.36％，显著高于葛根素治疗组和陈皮多糖治疗组。
综上可知，葛根素和陈皮多糖对受损皮肤伤口愈合均具有促进作用，与单独使用相比，葛根素-陈皮多糖联合使用可更加显著的促进受损皮肤伤口愈合。
实施例3不同凝胶剂对皮肤伤口愈合中毛囊新生及皮肤表皮层厚度的影响
将C57/BL小鼠32只随机分成4组：对照组，葛根素治疗组，陈皮多糖治疗组；葛根素-陈皮多糖治疗组，每组8只，正常饮食饮水，背部取走直径1cm皮肤组织，建立皮肤损伤模型，随后对照组涂抹空白凝胶剂，葛根素治疗组涂抹实施例1制备的葛根素凝胶剂，陈皮多糖治疗组涂抹实施例1制备的陈皮多糖凝胶剂，葛根素-陈皮多糖治疗组涂抹实施例1制备的葛根素-陈皮多糖凝胶剂，每天2次，持续9天。然后采用颈椎脱臼法处死实验小鼠，收集各组小鼠背部伤口愈合的皮肤组织，通过多聚甲醛固定之后，进行石蜡包埋并做组织切片。使用苏木素伊红染色试剂盒进行组织染色，方法参照试剂盒说明书，随后观察伤口愈合的皮肤组织的形态学状态。
不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的形态如图3所示，从图3毛囊新生程度中可以看出，与对照组相比，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组愈合的组中毛囊数量均显著增加(箭头所指为新生毛囊组织)，且毛囊数量的增加为葛根素-陈皮多糖治疗组>葛根素治疗组>陈皮多糖治疗组。从图3表皮层增生程度可以看出，与对照组相比，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组愈合的组织中表皮层增生程度降低，厚度降低(箭头所指为表皮层厚度)。
不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的毛囊数量如图4；不同凝胶剂涂抹的小鼠皮肤伤口愈合的组织的表皮层厚度如图5。从图4可以看出，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组愈合的组织中毛囊数量均高于140个/mm2，分别为161.0个/mm2，149.3个/mm2和199.3个/mm2，显著高于对照组的65.1个/mm2，同时，葛根素-陈皮多糖治疗组的毛囊数量达199.3个/mm2，显著高于葛根素治疗组和陈皮多糖治疗组。从图5可知，葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组愈合的组织中上皮厚度均低于50μm，分别为49.9μm，41.6μm和49.7μm，显著低于对照组80.5μm，同时，葛根素-陈皮多糖治疗组愈合的组织中上皮厚度的降低与葛根素治疗组和陈皮多糖治疗组无显著差异。
在新生的皮肤组织中，更多的新生毛囊组织和更少的表皮层厚度增生代表着愈合的组织更早进入重塑期，进而达到更快恢复的效果。综合上述数据证明，葛根素和陈皮多糖对受损皮肤伤口愈合的组织中毛囊数量的恢复均具有促进作用，与单独使用相比，葛根素-陈皮多糖联合使用可更加显著的促进受损皮肤伤口愈合的组织中毛囊数量的恢复，促进毛囊的新生。同时葛根素、陈皮多糖和葛根素-陈皮多糖治疗组治疗后均可以让表皮层增生程度下降，使新生皮肤厚度降低。
本发明还对葛根素和陈皮多糖不同质量比制备的各载药凝胶剂进行了实验。按照实施例1空白凝胶的制备方法先制备空白凝胶剂，然后按照葛根素和陈皮多糖不同质量比分别制备各载药凝胶剂，不同质量比的葛根素和陈皮多糖的质量含量如表1所示。
表1不同质量比的葛根素和陈皮多糖的质量含量
Figure BDA0003262010300000061
Figure BDA0003262010300000071
利用实施例2和3的方法测试各凝胶剂对受损皮肤伤口愈合的影响及对皮肤伤口愈合中毛囊新生及皮肤表皮层厚度的影响，结果表明：
葛根素和陈皮多糖质量比为1:10、1:5、2:5、5:1和10:1时葛根素-陈皮多糖治疗组伤口愈合率均高于80％；愈合的组织中毛囊数量均高于175个/mm2，显著高于对照组、葛根素组和陈皮多糖组；愈合的组织中表皮厚度均低于50μm，显著低于对照组。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.陈皮多糖作为唯一的活性成分在制备恢复受损皮肤毛囊数量的药物中的应用。
2.一种组合物在制备恢复受损皮肤毛囊数量的药物中的应用，其特征在于，所述组合物由葛根素和陈皮多糖组成，所述葛根素与陈皮多糖的重量比为1～10：1～10。
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