CN113637751A - Tnfaip3非编码序列突变检测试剂在制备预测t细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用 - Google Patents

Tnfaip3非编码序列突变检测试剂在制备预测t细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用 Download PDF

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tnfaip3
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cell lymphoma
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陈存特
陈政
黄玲
周玲玲
朱丽花
刘思初
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Abstract

本发明提供了TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用。是基于本发明发明人首次发现TCL患者外周血中TNFAIP3非编码序列突变情况与TCL患者的预后相关。当发生TNFAIP3非编码序列突变时，表明TCL患者临床预后好的可能性较大。TNFAIP3非编码序列突变情况对于TCL患者的预后判断和临床治疗方案的制定具有重要的指导意义，可为TCL患者的应用靶向药物提供更多的临床预后研究资料，具有广阔的应用前景。

Description

TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预 后试剂盒中的应用
技术领域
本发明属于生物医学领域，特别涉及TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用。
背景技术
T细胞淋巴瘤(T-cell lymphoma，TCL)起源于淋巴母细胞或成熟T细胞。这种疾病仅占非霍奇金淋巴瘤的10-15％，可进一步细分为许多相对罕见的亚型。与B细胞淋巴瘤患者相比，TCL患者的预后往往较差。目前，基于国际预后指数(international prognosisindex,IPI)的危险分层在预测TCL患者的预后方面取得了重大进展，这种精准化的危险分层可以为临床决策提供重要的参考，从而改善患者的预后。然而，基于IPI的危险分层仍不能对所有TCL患者的预后进行精准预测。因此，需要进一步探索改善TCL危险分层的新型生物标志物。
细胞内泛素编辑蛋白肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(tumor necrosis factor alphainducing protein 3,TNFAIP3)，也称为A20，通过肿瘤坏死因子和Toll样受体在多种途径中负调控NF-κB的活性。TNFAIP3基因位点位于染色体6q23，其缺失常发生于B细胞淋巴瘤，尤其是结外边缘区B细胞淋巴瘤和弥漫性大B细胞淋巴瘤。此外，之前的一些研究表明，TNFAIP3缺失常见于皮肤T细胞淋巴瘤和NK-T细胞淋巴瘤。但是，多个研究中心探讨了NK-T细胞淋巴瘤患者中TNFAIP3缺失的预后价值，发现其结果相互矛盾。在我们之前的研究中，在T细胞肿瘤中发现了TNFAIP3的非编码序列(non-coding sequence,non-CDS)区域发生了突变。然而，TNFAIP3的non-CDS突变对TCL患者的预后方面的评估仍然缺乏。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用。当检测到TNFAIP3非编码序列突变时，表明TCL患者的预后良好可能性大，可以作为预测TCL患者预后评估的指标。
本发明的另一目的在于提供一种预测T细胞淋巴瘤预后的试剂盒。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用，是基于本发明的发明人首次发现TCL患者外周血单个核细胞中TNFAIP3非编码序列突变情况与T细胞淋巴瘤患者的预后相关。
在所述的应用中，通过检测临床患者的外周血单个核细胞中TNFAIP3非编码序列突变情况，从而预测T细胞淋巴瘤预后。
进一步地，所述的突变的区域为如下区域的至少一个区域或多个区域的组合：
1)TNFAIP3基因5′-UTR的部分或全部区域；
2)TNFAIP3基因3′-UTR的部分或全部区域；
3)TNFAIP3基因内含子的部分或全部区域。
更进一步地，所述的突变的区域为TNFAIP3基因如下六个位点的至少一个位点或多个位点的组合：g.3918、g.3637、g.3869、g.13751、g.14244、g.11822。
更进一步地，所述的突变为如下突变情况的至少一种情况或多种情况的组合：g.3918C>T突变、g.3637T>A突变、g.3869C>G、g.13751A>C突变、g.14244C>T突变、g.11822T>C突变。
所述的预测具体指：
①当TNFAIP3非编码序列有突变时，TCL患者临床预后良好的可能性较大；
②当TNFAIP3非编码序列无突变时，TCL患者临床预后差的可能性较大。
所述的预后良好是指当TNFAIP3非编码序列有突变时，TCL患者的总体生存率大于83％；
所述的预后差是指当TNFAIP3非编码序列无突变时，TCL患者的总体生存率小于44％。
一种预测T细胞淋巴瘤预后的试剂盒，包括用于扩增包含TNFAIP3基因非编码序列的序列的引物中的一组或多组引物的组合。
进一步地，所述的试剂盒包括如下用于扩增TNFAIP3基因5′-UTR启动子序列片段的引物、用于扩增TNFAIP3基因3′-UTR序列片段的引物和用于扩增TNFAIP3基因外显子和内含子序列片段的引物中的一组或多组引物的组合：
(1)用于扩增TNFAIP3基因5′-UTR启动子序列片段的引物：
Promoter(g.2933-3687)(F):5'-TTTACAAAGGAGCACCAGCAGGAGA-3'；
Promoter(g.2933-3687)(R):5'-ATTACATTTAAGAATACTTGTCAGG-3'；
Promoter(g.3568-4249)(F):5'-AAGTGCCACCCTCCATCC-3'；
Promoter(g.3568-4249)(R):5'-AGCGGTGACAGCCTTTGG-3'；
Promoter(g.4110-4744)(F):5'-GGTGAGTGTTGTTCTGATTC-3'；
Promoter(g.4110-4744)(R):5'-TCACGTGACTCTCTGGGTCG-3'；
(2)用于扩增TNFAIP3基因3′-UTR序列片段的引物：
3’-UTR(g.18828-19347)(F):5'-CAACGGCTACTGCAACGAAT-3'；
3’-UTR(g.18828-19347)(R):5'-CTCGCTGCCATGAGGATCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(F):5'-GAGAAGCCAGAGCCATTCCACCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(R):5'-GCTCATGCCCCAACAACAACCA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(F):5'-GCTGCCCTAGAAGTACAATA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(R):5'-GACAGCAACCACAAAGCACAC-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(F):5'-CCCAGAGATAAAGGCTGCCAT-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(R):5'-GGAAGCACAGTCTTAATATC-3'；
(3)用于扩增TNFAIP3基因外显子和内含子序列片段的引物：
Exon2(F):5'-GGAGTCGTATTAAAGTCAGGCTAA-3'；
Exon2(R):5'-GGCAAAAGAAACACAACAGAAC-3'；
Exon3(F):5'-TTGCTGGGTCTTACATGCAG-3'；
Exon3(R):5'-CCCACCATGGAGCTCTGTTA-3'；
Exon4(F):5'-GGGAGTACAGGATACATTCAAGC-3'；
Exon4(R):5'-GCTGAAAGCATTTAAGTACAGATCC-3'；
Exon5(F):5'-ACCTAAGGGCCTCATTTTCC-3'；
Exon5(R):5'-AGCAAAAAGGAAAACCCTGA-3'；
Exon6(F):5'-TGAGATCTACTTACCTATGGCCTTG-3'；
Exon6(R):5'-CAGATGACACAGGAGAGAGCTG-3'；
Part1 of exon 7(F):5'-GGTTCTACAATTCTTGCCATAATCC-3'；
Part1 of exon 7(R):5'-CAAGTGCCTTGTGTGGTCTG-3'；
Part2 of exon 7(F):5'-CACAACGGATTTTGTGAACG-3'；
Part2 of exon 7(R):5'-AGGAACAAAACCCCTTCTGG-3'；
Exon8(F):5'-CTCTGTATCGGTGGGGTGAC-3'；
Exon8(R):5'-CAAAAAGCATCGAACACACG-3'；
Exon9(F):5'-TGATCTGCCTGTTCTTTCCA-3'；
Exon9(R):5'-GGGTTCAGAGGATAGCACCA-3'。
所述的试剂盒还包括用于DNA提取的试剂、用于聚合酶链式反应(polymerasechain reaction,PCR)的试剂、核苷酸序列测序的试剂、核苷酸序列分析的试剂中的任意一种或至少两种。
所述的用于DNA提取的试剂优选为TIANGEN的血液基因组DNA提取试剂盒。
上述预测TCL预后的试剂盒在非诊断检测TNFAIP3非编码序列突变中应用。
所述的应用包括如下步骤：
(1)在待测外周血样本中加入细胞裂解液，混匀，离心，向所得沉淀中加入缓冲液，混匀；
(2)加入蛋白酶溶液，混匀；加入缓冲液，混匀；静置；
(3)加入无水乙醇，混匀；
(4)将步骤(3)所得的溶液和絮状沉淀加入吸附柱中，离心，倒掉废液；
(5)向吸附柱中加入缓冲液，离心，倒掉废液；
(6)将吸附柱置于室温晾干；
(7)将吸附柱转入离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加洗脱缓冲液，静置，离心，将含有DNA的溶液收集到离心管中；
(8)将步骤(7)得到的DNA，利用所述的试剂盒进行PCR检测；
(9)将步骤(8)得到的PCR产物进行Sanger测序和分析，得到TNFAIP3非编码序列突变情况。
步骤(1)中所述的离心的条件优选为：10000rpm(～11500xg)离心1分钟。
步骤(2)中所述的静置的条件优选为：56℃静置10分钟。
步骤(4)中所述的离心的条件优选为：12000rpm(～13400xg)离心30秒。
步骤(5)中所述的离心的条件优选为：12000rpm(～13400xg)离心30秒。
步骤(6)中所述的室温晾干的条件优选为：室温(20～30℃)静置5分钟。
步骤(8)中所述的PCR检测通过用于PCR的试剂实现。
步骤(9)中所述的Sanger测序通过Invitrogen公司广州分公司实现。
步骤(9)中所述的分析方法为：将Sanger测序结果通过NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/和http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)基因库进行比对，以确定TNFAIP3非编码序列突变情况。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
1.本发明采用PCR和Sanger测序方法检测TCL患者外周血中TNFAIP3非编码序列突变情况，首次发现TNFAIP3非编码序列突变与TCL患者良好的临床预后有关。TNFAIP3非编码序列突变对于TCL患者的预后判断和临床治疗方案的制定具有重要的指导意义。
2.本发明可为TCL患者的应用靶向治疗提供更多的临床预后研究资料，在预测TCL患者预后评价及靶向药物应用方面具有广阔的应用前景。
3.本发明使用PCR和Sanger测序方法检测TCL患者外周血中TNFAIP3非编码序列突变情况，该方法简单易行，方法稳定。当检测到TNFAIP3非编码序列突变时，表明TCL患者良好的预后可能性大，可以作为预测TCL患者预后评估的指标。
附图说明
图1是TNFAIP3非编码序列突变对初发TCL患者预后的影响分析图。
图2是TNFAIP3非编码序列突变患者的具体突变情况图。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例中所用试剂信息具体如下：
血液基因组DNA提取试剂盒(购自TIANGEN)；
PCR试剂盒(购自Takara)；
Sanger测序(Invitrogen公司广州分公司)。
实施例1
(1)在与患者签署知情同意书的前提下采外周血。收集暨南大学附属第一医院血液内科41例初发TCL患者成人外周血样本，所有标本取自于入院时的外周血肝素抗凝，该部分研究方案已经获得本单位伦理委员会通过。同时收集TCL患者生存时间和生存状态等临床资料(如表1所示)。
(2)DNA提取
2.1参照血液基因组DNA提取试剂盒说明书，在血液样品中加入1-2.5倍体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm(～11500xg)离心1分钟，吸取上清，留下细胞核沉淀，向离心收集到的细胞核沉淀中加200μL缓冲液GS，振荡至彻底混匀；
2.2加入20μL蛋白酶K溶液，混匀；加200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，56℃放置10分钟，期间颠倒混匀数次，溶液应变清亮；
2.3加200μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀；
2.4将上一步所得的溶液和絮状沉淀加入一个吸附柱CB3中(吸附柱CB3放入收集管中)，12000rpm(～13400xg)离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中；
2.5向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD，12000rpm(～13400xg)离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中；
2.6向吸附柱CB3中加入600μL缓冲液GD，12000rpm(～13400xg)离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中；
2.7重复操作步骤2.6；
2.8 12000rpm(～13400xg)离心2分钟，倒掉废液，将吸附柱CB3置于室温放置5分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液；
2.9将吸附柱CB3转入1.5mL离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加50-200μL洗脱缓冲液TB，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13400xg)离心2分钟，将含有DNA的溶液收集到离心管中。
(3)PCR扩增TNFAIP3基因启动子序列
3.1扩增TNFAIP3启动子的PCR反应体系为20μL：DNA 1μL、Taq聚合酶0.2μL、5×PCRbuffer 4μL、dNTP 2μL、Mg2+2μL、上下游引物各1μL以及ddH2O 8.8μL。反应在PCR仪中进行；
3.2扩增TNFAIP3的PCR反应条件为：94℃，5min；94℃，1min，60℃，1min，72℃，1min，40个循环，72℃，10min，4℃保存；
3.3取PCR产物在100V，1.5％(w/v)琼脂糖凝胶中电泳检测。
(4)PCR扩增TNFAIP3基因非编码序列
4.1PCR反应体系为30μL：其中DNA 1μL、Taq聚合酶0.3μL、5×PCR buffer 6μL、dNTP3μL、Mg2+3μL、上下游引物各1.5μL以及超纯水13.7μL。反应在PCR仪中进行；
4.2PCR反应条件为：94℃，5min，94℃，1min，57℃，1min，72℃，1min，40个循环，72℃；10min，4℃保存；
4.3取PCR产物在100V，1.5％(w/v)琼脂糖凝胶中电泳检测。
其中，所用于扩增TNFAIP3基因启动子序列片段的引物如下：
Promoter(g.2933-3687)(F):5'-TTTACAAAGGAGCACCAGCAGGAGA-3'；
Promoter(g.2933-3687)(R):5'-ATTACATTTAAGAATACTTGTCAGG-3'；
Promoter(g.3568-4249)(F):5'-AAGTGCCACCCTCCATCC-3'；
Promoter(g.3568-4249)(R):5'-AGCGGTGACAGCCTTTGG-3'；
Promoter(g.4110-4744)(F):5'-GGTGAGTGTTGTTCTGATTC-3'；
Promoter(g.4110-4744)(R):5'-TCACGTGACTCTCTGGGTCG-3'；
所用于扩增TNFAIP3基因3′-UTR序列片段的引物如下：
3’-UTR(g.18828-19347)(F):5'-CAACGGCTACTGCAACGAAT-3'；
3’-UTR(g.18828-19347)(R):5'-CTCGCTGCCATGAGGATCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(F):5'-GAGAAGCCAGAGCCATTCCACCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(R):5'-GCTCATGCCCCAACAACAACCA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(F):5'-GCTGCCCTAGAAGTACAATA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(R):5'-GACAGCAACCACAAAGCACAC-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(F):5'-CCCAGAGATAAAGGCTGCCAT-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(R):5'-GGAAGCACAGTCTTAATATC-3'；
所用于扩增TNFAIP3基因外显子和内含子序列片段的引物如下：
Exon2(F):5'-GGAGTCGTATTAAAGTCAGGCTAA-3'；
Exon2(R):5'-GGCAAAAGAAACACAACAGAAC-3'；
Exon3(F):5'-TTGCTGGGTCTTACATGCAG-3'；
Exon3(R):5'-CCCACCATGGAGCTCTGTTA-3'；
Exon4(F):5'-GGGAGTACAGGATACATTCAAGC-3'；
Exon4(R):5'-GCTGAAAGCATTTAAGTACAGATCC-3'；
Exon5(F):5'-ACCTAAGGGCCTCATTTTCC-3'；
Exon5(R):5'-AGCAAAAAGGAAAACCCTGA-3'；
Exon6(F):5'-TGAGATCTACTTACCTATGGCCTTG-3'；
Exon6(R):5'-CAGATGACACAGGAGAGAGCTG-3'；
Part1 of exon 7(F):5'-GGTTCTACAATTCTTGCCATAATCC-3'；
Part1 of exon 7(R):5'-CAAGTGCCTTGTGTGGTCTG-3'；
Part2 of exon 7(F):5'-CACAACGGATTTTGTGAACG-3'；
Part2 of exon 7(R):5'-AGGAACAAAACCCCTTCTGG-3'；
Exon8(F):5'-CTCTGTATCGGTGGGGTGAC-3'；
Exon8(R):5'-CAAAAAGCATCGAACACACG-3'；
Exon9(F):5'-TGATCTGCCTGTTCTTTCCA-3'；
Exon9(R):5'-GGGTTCAGAGGATAGCACCA-3'。
(5)Sanger测序及TNFAIP3基因突变的鉴定
凝胶电泳检测质量较好的PCR产物送Invitrogen公司广州分公司进行Sanger测序。所获得的核苷酸序列通过NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/和http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)基因库进行比对，确定TNFAIP3基因突变。
TNFAIP3基因突变情况以及TCL患者临床预后资料如表1所示。
将TNFAIP3基因非编码突变情况结合TCL患者临床预后资料进行分析，在R语言软件(4.0.2版,https://www.r-project.org/)中通过输入TNFAIP3基因非编码突变状态、生存状态和生存时间，用“survival”R软件包绘制生存曲线。发现TNFAIP3基因非编码突变时的TCL患者的预后较好(图1)。
TNFAIP3非编码序列突变患者的突变情况图如图2所示。
上述实验结果表明TNFAIP3基因非编码突变在预测TCL临床预后的评估中具有重要意义，其为临床应用靶向药物提供预后研究资料。
表1 TCL患者TNFAIP3突变情况和临床资料
Figure BDA0003166009410000081
Figure BDA0003166009410000091
从上述测得的基因突变虽然不能直接得出将来诊断结果和健康状况，但其作为中间结果，可以作为患者临床治疗方案制定的参考信息之一。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
<110> 暨南大学
<120> TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用
<160> 32
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 2933-3687) (F)
<400> 1
tttacaaagg agcaccagca ggaga 25
<210> 2
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 2933-3687) (R)
<400> 2
attacattta agaatacttg tcagg 25
<210> 3
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 3568-4249) (F)
<400> 3
aagtgccacc ctccatcc 18
<210> 4
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 3568-4249) (R)
<400> 4
agcggtgaca gcctttgg 18
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 4110-4744) (F)
<400> 5
ggtgagtgtt gttctgattc 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Promoter (g. 4110-4744) (R)
<400> 6
tcacgtgact ctctgggtcg 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 18828-19347) (F)
<400> 7
caacggctac tgcaacgaat 20
<210> 8
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 18828-19347) (R)
<400> 8
ctcgctgcca tgaggatct 19
<210> 9
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 19272-19787) (F)
<400> 9
gagaagccag agccattcca cct 23
<210> 10
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 19272-19787) (R)
<400> 10
gctcatgccc caacaacaac ca 22
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 19717-20407) (F)
<400> 11
gctgccctag aagtacaata 20
<210> 12
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 19717-20407) (R)
<400> 12
gacagcaacc acaaagcaca c 21
<210> 13
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 20455-20938) (F)
<400> 13
cccagagata aaggctgcca t 21
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 3’-UTR (g. 20455-20938) (R)
<400> 14
ggaagcacag tcttaatatc 20
<210> 15
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon2 (F)
<400> 15
ggagtcgtat taaagtcagg ctaa 24
<210> 16
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon2 (R)
<400> 16
ggcaaaagaa acacaacaga ac 22
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon3 (F)
<400> 17
ttgctgggtc ttacatgcag 20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon3 (R)
<400> 18
cccaccatgg agctctgtta 20
<210> 19
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon4 (F)
<400> 19
gggagtacag gatacattca agc 23
<210> 20
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon4 (R)
<400> 20
gctgaaagca tttaagtaca gatcc 25
<210> 21
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon5 (F)
<400> 21
acctaagggc ctcattttcc 20
<210> 22
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon5 (R)
<400> 22
agcaaaaagg aaaaccctga 20
<210> 23
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon6 (F)
<400> 23
tgagatctac ttacctatgg ccttg 25
<210> 24
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon6 (R)
<400> 24
cagatgacac aggagagagc tg 22
<210> 25
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Part1 of exon 7 (F)
<400> 25
ggttctacaa ttcttgccat aatcc 25
<210> 26
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Part1 of exon 7 (R)
<400> 26
caagtgcctt gtgtggtctg 20
<210> 27
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Part2 of exon 7 (F)
<400> 27
cacaacggat tttgtgaacg 20
<210> 28
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Part2 of exon 7 (R)
<400> 28
aggaacaaaa ccccttctgg 20
<210> 29
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon8 (F)
<400> 29
ctctgtatcg gtggggtgac 20
<210> 30
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon8 (R)
<400> 30
caaaaagcat cgaacacacg 20
<210> 31
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon9 (F)
<400> 31
tgatctgcct gttctttcca 20
<210> 32
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Exon9 (R)
<400> 32
gggttcagag gatagcacca 20

Claims (10)

1.TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用，其特征在于：通过检测临床患者的外周血中TNFAIP3非编码序列突变情况，从而预测T细胞淋巴瘤预后。
3.根据权利要求1所述的TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用，其特征在于：
所述的突变的区域为如下区域的至少一个区域或多个区域的组合：
1)TNFAIP3基因5′-UTR的部分或全部区域；
2)TNFAIP3基因3′-UTR的部分或全部区域；
3)TNFAIP3基因内含子的部分或全部区域。
4.根据权利要求1所述的TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用，其特征在于：
所述的突变的区域为TNFAIP3基因如下六个位点的至少一个位点或多个位点的组合：g.3918、g.3637、g.3869、g.13751、g.14244、g.11822。
5.根据权利要求1所述的TNFAIP3非编码序列突变检测试剂在制备预测T细胞淋巴瘤预后试剂盒中的应用，其特征在于：所述的预测具体指：
①当TNFAIP3非编码序列有突变时，T细胞淋巴瘤患者临床预后良好的可能性较大；
②当TNFAIP3非编码序列无突变时，T细胞淋巴瘤患者临床预后差的可能性较大。
6.一种预测T细胞淋巴瘤预后的试剂盒，其特征在于：包括如下用于扩增TNFAIP3基因5′-UTR启动子序列片段的引物、用于扩增TNFAIP3基因3′-UTR序列片段的引物和用于扩增TNFAIP3基因外显子和内含子序列片段的引物中的一组或多组引物的组合：
(1)用于扩增TNFAIP3基因5′-UTR启动子序列片段的引物：
Promoter(g.2933-3687)(F):5'-TTTACAAAGGAGCACCAGCAGGAGA-3'；
Promoter(g.2933-3687)(R):5'-ATTACATTTAAGAATACTTGTCAGG-3'；
Promoter(g.3568-4249)(F):5'-AAGTGCCACCCTCCATCC-3'；
Promoter(g.3568-4249)(R):5'-AGCGGTGACAGCCTTTGG-3'；
Promoter(g.4110-4744)(F):5'-GGTGAGTGTTGTTCTGATTC-3'；
Promoter(g.4110-4744)(R):5'-TCACGTGACTCTCTGGGTCG-3'；
(2)用于扩增TNFAIP3基因3′-UTR序列片段的引物：
3’-UTR(g.18828-19347)(F):5'-CAACGGCTACTGCAACGAAT-3'；
3’-UTR(g.18828-19347)(R):5'-CTCGCTGCCATGAGGATCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(F):5'-GAGAAGCCAGAGCCATTCCACCT-3'；
3’-UTR(g.19272-19787)(R):5'-GCTCATGCCCCAACAACAACCA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(F):5'-GCTGCCCTAGAAGTACAATA-3'；
3’-UTR(g.19717-20407)(R):5'-GACAGCAACCACAAAGCACAC-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(F):5'-CCCAGAGATAAAGGCTGCCAT-3'；
3’-UTR(g.20455-20938)(R):5'-GGAAGCACAGTCTTAATATC-3'；
(3)用于扩增TNFAIP3基因外显子和内含子序列片段的引物：
Exon2(F):5'-GGAGTCGTATTAAAGTCAGGCTAA-3'；
Exon2(R):5'-GGCAAAAGAAACACAACAGAAC-3'；
Exon3(F):5'-TTGCTGGGTCTTACATGCAG-3'；
Exon3(R):5'-CCCACCATGGAGCTCTGTTA-3'；
Exon4(F):5'-GGGAGTACAGGATACATTCAAGC-3'；
Exon4(R):5'-GCTGAAAGCATTTAAGTACAGATCC-3'；
Exon5(F):5'-ACCTAAGGGCCTCATTTTCC-3'；
Exon5(R):5'-AGCAAAAAGGAAAACCCTGA-3'；
Exon6(F):5'-TGAGATCTACTTACCTATGGCCTTG-3'；
Exon6(R):5'-CAGATGACACAGGAGAGAGCTG-3'；
Part1 of exon 7(F):5'-GGTTCTACAATTCTTGCCATAATCC-3'；
Part1 of exon 7(R):5'-CAAGTGCCTTGTGTGGTCTG-3'；
Part2 of exon 7(F):5'-CACAACGGATTTTGTGAACG-3'；
Part2 of exon 7(R):5'-AGGAACAAAACCCCTTCTGG-3'；
Exon8(F):5'-CTCTGTATCGGTGGGGTGAC-3'；
Exon8(R):5'-CAAAAAGCATCGAACACACG-3'；
Exon9(F):5'-TGATCTGCCTGTTCTTTCCA-3'；
Exon9(R):5'-GGGTTCAGAGGATAGCACCA-3'。
7.根据权利要求6所述的预测T细胞淋巴瘤预后的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括用于DNA提取的试剂、用于PCR的试剂、核苷酸序列测序的试剂、核苷酸序列分析的试剂中的任意一种或至少两种。
8.权利要求6或7所述的预测T细胞淋巴瘤预后的试剂盒在非诊断检测TNFAIP3非编码序列突变中应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：包括如下步骤：
(1)在待测外周血样本中加入细胞裂解液，混匀，离心，向所得沉淀中加入缓冲液，混匀；
(2)加入蛋白酶溶液，混匀；加入缓冲液，混匀；静置；
(3)加入无水乙醇，混匀；
(4)将步骤(3)所得的溶液和絮状沉淀加入吸附柱中，离心，倒掉废液；
(5)向吸附柱中加入缓冲液，离心，倒掉废液；
(6)将吸附柱置于室温晾干；
(7)将吸附柱转入离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加洗脱缓冲液，静置，离心，将含有DNA的溶液收集到离心管中；
(8)将步骤(7)得到的DNA，利用所述的试剂盒进行PCR检测；
(9)将步骤(8)得到的PCR产物进行Sanger测序和分析，得到TNFAIP3非编码序列突变情况。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：
步骤(1)中所述的离心的条件为：10000rpm离心1分钟；
步骤(2)中所述的静置的条件为：56℃静置10分钟；
步骤(4)中所述的离心的条件为：12000rpm离心30秒；
步骤(5)中所述的离心的条件为：12000rpm离心30秒；
步骤(6)中所述的室温晾干的条件为：室温静置5分钟；
步骤(8)中所述的PCR检测通过用于PCR的试剂实现；
步骤(9)中所述的分析方法为：将Sanger测序结果通过NCBI基因库进行比对，以确定TNFAIP3非编码序列突变情况。
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Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060008825A1 (en) * 2004-06-18 2006-01-12 Ronald Levy Methods and compositions for determining responsiveness to antibody therapy
CN102186995A (zh) * 2008-10-17 2011-09-14 奎斯特诊断投资公司 无细胞体液中npm1核酸的检测
CN102352356A (zh) * 2011-09-28 2012-02-15 暨南大学 抑制BCL11A表达和肿瘤性B细胞增殖的Bcl11a siRNA-2292及其应用
CN103215259A (zh) * 2012-12-31 2013-07-24 卫生部北京医院 一种预测强直性脊柱炎易感性的方法和试剂盒
US20150167088A1 (en) * 2003-09-03 2015-06-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health & Human Services Methods for identifying, diagnosing, and predicting survival of lymphomas
CN105907851A (zh) * 2016-04-26 2016-08-31 暨南大学 rs77191406位点在制备预测RA和SLE继发恶性肿瘤的试剂盒中的用途
CN106460070A (zh) * 2014-04-21 2017-02-22 纳特拉公司 检测染色体片段中的突变和倍性
CN108823640A (zh) * 2018-06-06 2018-11-16 珠海铂华生物工程有限公司 一种构建基于淋巴瘤基因检测的高通量测序文库的方法及其应用
CN109735621A (zh) * 2019-02-13 2019-05-10 上海交通大学医学院附属瑞金医院 一种淋巴瘤相关基因检测试剂盒及扩增子文库的构建方法
CN109880910A (zh) * 2019-04-25 2019-06-14 南京世和基因生物技术有限公司 一种肿瘤突变负荷的检测位点组合、检测方法、检测试剂盒及系统
CN111584001A (zh) * 2020-02-13 2020-08-25 上海交通大学医学院附属瑞金医院 一种用于淋巴瘤预后判断的方法、试剂盒及应用

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150167088A1 (en) * 2003-09-03 2015-06-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health & Human Services Methods for identifying, diagnosing, and predicting survival of lymphomas
US20060008825A1 (en) * 2004-06-18 2006-01-12 Ronald Levy Methods and compositions for determining responsiveness to antibody therapy
CN102186995A (zh) * 2008-10-17 2011-09-14 奎斯特诊断投资公司 无细胞体液中npm1核酸的检测
CN102352356A (zh) * 2011-09-28 2012-02-15 暨南大学 抑制BCL11A表达和肿瘤性B细胞增殖的Bcl11a siRNA-2292及其应用
CN103215259A (zh) * 2012-12-31 2013-07-24 卫生部北京医院 一种预测强直性脊柱炎易感性的方法和试剂盒
CN106460070A (zh) * 2014-04-21 2017-02-22 纳特拉公司 检测染色体片段中的突变和倍性
CN105907851A (zh) * 2016-04-26 2016-08-31 暨南大学 rs77191406位点在制备预测RA和SLE继发恶性肿瘤的试剂盒中的用途
CN108823640A (zh) * 2018-06-06 2018-11-16 珠海铂华生物工程有限公司 一种构建基于淋巴瘤基因检测的高通量测序文库的方法及其应用
CN109735621A (zh) * 2019-02-13 2019-05-10 上海交通大学医学院附属瑞金医院 一种淋巴瘤相关基因检测试剂盒及扩增子文库的构建方法
CN109880910A (zh) * 2019-04-25 2019-06-14 南京世和基因生物技术有限公司 一种肿瘤突变负荷的检测位点组合、检测方法、检测试剂盒及系统
CN111584001A (zh) * 2020-02-13 2020-08-25 上海交通大学医学院附属瑞金医院 一种用于淋巴瘤预后判断的方法、试剂盒及应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FANG LIU等: "Activation of the NF-κB Pathway and Heterozygous Deletion of TNFAIP3(A20) Confer Superior Survival in Extranodal Natural Killer/T-Cell Lymphoma，Nasal Type", 《AMERICAN JOURNAL OF CLINICAL PATHOLOGY》 *
LINGLING ZHOU等: "Different genetic alteration of A20 in a Sézary syndrome case with Vα2-Jα22 T cell clone", 《ASIA-PACIFIC JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY》 *
李其辉等: "结外NK/T细胞淋巴瘤患者的临床特征及预后分析", 《 中国实验血液学杂志》 *

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