发明内容
为了克服背景技术中存在的问题,本发明的目的之一是提供了鼻腔护理电子 雾化液组合物。
为实现上述目的,本发明是通过如下技术方案实现的:
所述的鼻腔护理电子雾化液组合物包括工业大麻根提取物、重楼提取物、白 及提取物、三七花提取物以及蛇床子提取物、苦参提取物。
进一步的,所述的鼻腔护理电子雾化液组合物,按照重量份计包括1.0-10.5 份工业大麻根提取物、1.0-5.5份重楼提取物、1.0-3.5份白及提取物以及1.0-5.0 份三七花提取物,1.0-6.5份蛇床子提取物、1.0-6.5份苦参提取物。
进一步的,所述的工业大麻根提取物按照以下步骤制备得到:(1)制备工业 大麻根提取物:工业大麻根清洗,晾干,剪碎,加入8倍量85%乙醇,90±5℃ 加热回流提取8h,过滤,滤液备用;在滤渣中再加入5倍量85%乙醇,分别在 90±5℃加热回流提取3h,过滤,滤液合并,渣弃掉;滤液用单效浓缩器回收酒 精,酒精回收干净后得工业大麻根提取物,为比重是1.1的淡黄色浸膏。
更进一步的,所述的重楼提取物、白及提取物、三七花提取物、蛇床子提取 物以及苦参提取物的提取方法是将重楼、白及、三七花、蛇床子、苦参晒干,然 后破碎成粉状,用10倍量的50%乙醇回流提取3小时,连续提取三次,然后 将提取液减压浓缩成浸膏或干燥成粉状。
本发明的另一个目的是提供了鼻腔护理电子雾化液组合物在制备用于鼻腔 抗菌止痒以及抑制鼻腔肉芽增生的产品中的用途。
本发明的第三个目的是提供了一种护理产品,其包含上述技术方案任一项所 述的鼻腔护理电子雾化液组合物。
本发明的有益效果:
本发明为鼻腔护理电子雾化液组合物、其用途及所得的护理产品,可以使工 业大麻根提取物和其它植物提取物配制而成的鼻腔制品能通过超声电子雾化产 品发挥其抑菌止痒、抑制肉芽增生的作用。
工业大麻是指四氢大麻酚含量低于0.3%的大麻,我国将工业大麻称为汉麻, 是大麻科大麻属1年生草本植物,分为工业大麻和毒品大麻,现在国内外广泛应 用的大麻为工业大麻。
工业大麻全身都是宝,但是目前对工业大麻的根研究较少,根的利用很少见, 工业大麻的根具有非常多的纤维,粉碎处理起来极为困难,也限制了对工业大麻 根的研究利用。从工业大麻的根中分离得到的已知化合物已有数十种,工业大麻 根部五环三萜类化合物木栓酮(friedelin)和表木栓醇(friedelan)丰度较高,木 栓酮具有广泛的生物活性和医疗应用,如抗炎、镇痛以及良好的抑制致病细菌和 真菌作用,四氢大麻酚未检出。
重楼,中药名。为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎。其味苦, 性微寒;有小毒。有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊之功效,常用于疔疮痈肿, 咽喉肿痛,蛇虫咬伤,跌扑伤痛,惊风抽搐。重楼提取物的化学成分类型多样, 含有较大量的甾体皂苷,苷元主要为薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元,该成分能促进本 组合物的抗菌特证;
白及(学名:Bletilla striata(Thunb.ex A.Murray)Rchb.f.)是兰科、白及属 地生草本植物。植株高可达60厘米。假鳞茎扁球形,富粘性。白及的块茎具有 消毒止血以及预防伤口感染等诸多功效,杀菌抗癌的效果也比较良好。白芨具有 较好的收敛止血,消肿生肌功效。随着现代药理学的研究不断深入,发现其对结 核杆菌,肿瘤细胞等有明显抑制作用。临床发现,还对常见病有较好疗效。用于 内外出血诸证及痈肿、烫伤、手足皲裂、肛裂等。其假鳞茎为名贵的止血材料, 抗杆菌,真菌,治疗咳嗽。对阴虚咳嗽、肺热咳嗽、百日咳、肺结核咳嗽以及其 它难治性咳嗽都有良好止咳作用,治疗鼻窦炎。球茎含白及胶质、淀粉、挥发油 等药用成分,有收效、补肺止血、消肿等作用,外敷治创伤出血、痈肿、烫伤、 疔疮等;
三七花,中药名。为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen exC.Chow的花。分布于江西、湖北、广东、广西、四川、云南等地。三七花中 含有人参皂甙Rb3和人参皂甙Rc、胡萝卜苷、β-谷甾醇、绞股蓝皂苷-LX等, 对治疗咽喉炎、牙周炎有不错的效果,同时它也可以清热解毒,对治疗由血热、 湿毒引起的青春痘,嘴角起泡等症状有缓解作用;
蛇床子为伞形科植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cusson的果实。蛇床 子提取物中主要有效成分含蒎烯、莰烯,异戊酸龙脑酯(bornyl isovalarate)、 异龙脑(isoborneol),甲氧基欧芹酚(osthole)、蛇床明素(cindimine)、蛇床定 (cnidiadin)、异虎耳草素(isopimpinelline)等。蛇床子素具有解痉、降血压、 抗心律失常、增强免疫功能及广谱抗菌作用。温肾壮阳,燥湿,祛风,杀虫。用 于阳痿、宫冷、不孕、寒湿带下、湿鼻腰痛;外治外阴湿疹,妇人阴痒,滴虫性 阴道炎。
苦参中药名。为豆科植物苦参的干燥根,春、秋二季采挖,除去根头和小支 根,洗净,干燥,或趁鲜切片,干燥。其苦,寒。含苦参碱(matrine)、氧化苦 参碱(oxymatrine)、羟基苦参碱(sophor-anol)、N-甲基金雀花碱(N- methylcytisine)、安那吉碱(anagyrine)、膺靛叶碱(bap-iifoline)、脱氢苦参 碱(sophocarpine)等多种生物碱类物质;苦参提取物性寒,有清热燥湿,杀虫 的功效,苦参浴能够清除下焦湿热,并且杀虫止痒,对皮肤瘙痒有很好的缓解作 用;苦参碱对小鼠巴豆油引起的耳廓肿胀、醋酸引起的小鼠腹腔渗出增加、大鼠 角叉菜胶性足垫肿胀,均有抑制作用。
这五种植物提取物的组合物有一定的抗菌止痒和抑制肉芽增生的作用,工业 大麻根提取物的添加对这五种植物提取物的组合物有明显的协同增效的作用。
本发明使用工业大麻根提取物、重楼提取物、白及提取物、三七花提取物、 蛇床子提取物以及苦参提取物制备鼻腔护理产品,能起到抑菌止痒、抑制肉芽增 生的作用。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚,下面将对本发明的优 选实施例进行详细的说明,以方便技术人员理解。
实施例1-3的组合物组份及重量份数如表1所示。
表1实施例1-3组合物组份及重量份数
对比例1-3的组合物组份及重量份数如表2所示。
表2对比例1-5的组合物组份及重量份数
效果验证部分
在效果验证部分中,需要将实施例或者对比例制得的鼻腔护理电子雾化液组 合物分别添加于相同的鼻腔护理电子雾化液基础液中,鼻腔护理电子雾化液基础 液按照重量份计包括保湿剂、增稠剂、增溶剂、香精、防腐剂、清凉剂、水,其 中保湿剂为透明质酸、甘油、丙二醇、葡聚糖的的一种或几种的混合物等,起到 润湿鼻腔的作用;增稠剂为纤维素胶、卡拉胶、黄原胶、瓜尔胶、无机凝胶的一 种或几种的混合物,起到增加配方稳定性,增加产品在鼻腔内部的附着力,增加 产品在鼻腔内部的停留给药时间;增溶剂为氢化蓖麻油,起到将脂溶性成分添加 到配方中;清凉剂为薄荷脑、冰片、乳酸薄荷酯中的一种或几种的混合物,起到 收缩血管,局部止痛的作用;防腐剂为苯甲酸钠、尼泊金复合酯钠的一种或两种 的混合物,起到产品保质期稳定的作用。在以下的检测或者效果验证试验中,均 使用以下组分制备的鼻腔护理电子雾化液,鼻腔护理电子雾化液各组分含量如下 表3。
表3鼻腔护理电子雾化液基础液的各组份及重量份数
铅、砷、汞的检测
将上述实施例1-3制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于制备好的鼻 腔护理电子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品。
进行铅、砷、汞的检测,具体检测器材及方法如下:
一、器材
1.样品:实施例1-3护理产品。
2.仪器设备:万分之一天平(EB02-03);电感耦合等离子体质谱仪(EA01-01)。
3.标准溶液:铅(浓度为1000mg/L)、砷(浓度为1000mg/L)、汞(浓度为 1000mg/L)。
4.试剂:硝酸(默克分析纯)、高氯酸(优级纯)和水(超纯水)。
二、方法
1.检测依据:《化妆品安全技术规范》(2015年版)。
2.检测环境:温度为24.5℃,相对湿度为55%。
三、结果
实施例1-3中铅、砷、汞含量如表4。
表4实施例1-3铅、砷、汞
多次完整皮肤刺激试验
将上述实施例1-3制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品,进行多次完整皮肤刺激试验, 具体检测器材及方法如下:
一、材料和动物
1.样品:实施例1-3护理产品。
2.动物:新西兰兔,由湖南太平生物科技有限公司提供,实验动物生产许可 证号:SCXK(湘)2020-0005。饲料由湖南太平生物科技有限公司提供,饲料 生产许可证号:SCXK(湘)2018-0008,动物购进后在本公司普通环境单笼饲 养,实验动物使用许可证号:SYXK(湘)2019-0016,检疫合格后使用。
3.环境:温度为22℃~26℃,相对湿度为54%-59%。
二、方法
1.检测依据:《消毒技术规范》(2002年版)2.33.3.3。
2.检测浓度:以实施例1-3护理产品的原液试验。
3.检测方法:
设置三组实验组,每组均有白色新西兰兔3只(雄性2只,雌性1只),三 组实验兔分别对应实施例1-3护理产品;体重2.0kg-2.5kg,试验前24h将新西兰 兔背部两侧的毛剪去,左右两侧去毛面积均约3cm×3cm,以右侧为涂药区,左 侧为空白对照区。分别量取0.5mL,直接滴入相对应组别的每只动物的涂药区皮 肤上,然后用一层无刺激塑料膜覆盖,再用无刺激胶布固定,敷贴时间为4h。 在涂抹4h后,用温水清洗涂药区,除去残留物。每天涂抹一次,连续14d。在 每次涂抹后24h管察皮肤局部反应,计算每天每只动物平均积分(刺激指数)(每 天每只动物平均积分=所有受试动物14d的红斑和水肿总积分/受试动物×14),并以《消毒技术规范》(2002年版)表2-12判定皮肤刺激强度。
三、结果
由表5-7可知,三组全部受试动物涂药区皮肤在染毒后14d观察期内均未见 红斑、水肿及其它异常;受试动物对照区皮肤在观察期内均无异常现象。每天每 只动物刺激反应的平均积分(刺激指数)为0。
表5实施例1护理产品新西兰兔多次完整皮肤刺激试验结果
表6实施例2护理产品新西兰兔多次完整皮肤刺激试验结果
表7实施例3护理产品新西兰兔多次完整皮肤刺激试验结果
微生物指标测定
将上述实施例1-3制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品,进行微生物指标测定,具体检 测器材及方法如下:
—、器材
样品:实施例1-3护理产品。
仪器:生物安全柜(EC18-01);隔水式恒温培养箱(EB28-02);霉菌菌培 养箱(EB30-01)。
3.营养琼脂培养基(批号:1100771)、沙氏培养基(批号:1096671)等培养 基。
二、方法
检测依据:GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录B。
检测环境:温度为22.3℃,相对湿度为55%。
三、结果
表8微生物指标检测结果
急性眼刺激试验
检验依据:《消毒技术规范》(2002年版)2.3.4。
评价依据:《消毒技术规范》(2002年版)。
将上述实施例1-3制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品,进行急性眼刺激试验,具体检 测器材及方法如下:
一、材料和动物
1.样品:实施例1-3护理产品。
2.动物:新西兰兔,由湖南太平生物科技有限公司提供,实验动物生产许可 证号:SCXK(湘)2020-0005。饲料由湖南太平生物科技有限公司提供,生产 许可证号SCXK(湘)2018-0008,动物购进后在本公司普通环境单笼饲养, 实验动物使用许可证号:SYXK(湘)2019-0016,检疫合格后使用。
3.环境:温度为23℃~26℃相对湿度为55%-57%。
二、方法
检测依据:《消毒支术规范》(2002年版)2.3.4。
检测浓度:以实施例1-3护理产品原液试验。
检验方法:
设置三组实验组,每组均有白色新西兰兔3只(雄性2只,雌性1只),三 组实验兔分别对应实施例1-3护理产品;体重2.0kg-2.5kg,以右眼为给药眼,左 眼为对照眼。分别量取受试物0.lmL实施例1-3护理产品,直接滴入相对应组别 的每只动物右眼结膜囊内,对照眼给予等量生理盐水,立即轻轻闭合眼睑约4s, 30s后用生理盐水冲洗,观察动物受药后lh、24h、48h、72h、7d、14d、21d眼 结膜、虹膜和角膜的刺激损伤和恢复情况。如果72h内未出现刺激反应,或第 7d或第14d,眼睛刺激反应完全恢复,即可提前终止试验。
三、结果
由表9-11可以自,给药后所有受试动物受药眼均可见结膜充血呈鲜红色; 24h、48h,三组所有受试动物受药眼均未见异常;继续观察至72h,三组所有受 试动物受药眼均未见异常。3只动物在24h、48h和72h的平均评分为:结膜充 血=0、结膜水肿=0、角膜损害=0、虹膜损害=0。对照眼无异常。
四、结论
根据《消毒技术规范》(2002年版)中眼刺激强度分级标准,该样品原液经 急性眼刺激试验结果为无刺激性,符合《消毒技术规范》(2002年版)2.3.13.1 的安全性要求。
表9实施例1护理产品新西兰兔急性眼刺激试检结果
“—”表示未出现眼刺激反应。
表10实施例2护理产品新西兰兔急性眼刺激试检结果
“—”表示未出现眼刺激反应。
表11实施例3护理产品新西兰兔急性眼刺激试检结果
“—”表示未出现眼刺激反应。
稳定性试验
将上述实施例1制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1护理产品,进行稳定性试验,具体检测器材 及方法如下:
—、器材
1.样品:实施例1护理产品。
2.白色念珠菌ATCC 10231(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌悬液: 取经24h培养的新鲜斜面培养物(第5代),先用PBS洗下菌苔,混匀,再用PBS 稀释至所需浓度,使回收菌数达1×104CFU/mL~9×104CFU/mL。
3.沙氏琼脂培养基(批号:1096671)。
4.仪器设备:综合药品稳定性试验箱(EB19-05):生物安全柜(EC18-01); 隔水式恒温培养箱(EB28-02);两孔恒温水浴锅(EB09-04)。
二、方法
1.检测依据:GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。
2.检测环境:温度为22.61-23.9℃,相对湿度为54%-58%。
3.保存条件:密闭完好原包装,置温度37℃、相对湿度80%的恒温恒湿箱中 存放90天。
三、结果
在20±1℃恒温条件下,试验重复3次。该样品原液置温度37℃、相对湿度 80%的恒温恒湿箱90天后,样品无颜色变化、无沉淀,作用2min、5min、10min 和20min对白色念珠菌的平均抑菌率均为100.00%,见表12。
表12实施例1护理产品稳定性试验结果
金黄色葡萄球菌抑菌实验
将上述实施例1-3和对比例1-5制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加 于鼻腔护理电子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品和对比例1-5护理 产品,进行金黄色葡萄球菌抑菌实验,具体检测器材及方法如下:
—、器材
1.样品:实施例1-3护理产品以及对比例1-5护理产品。
2.金黄色葡萄球菌ATCC6538(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌悬 液:取经24h培养的新鲜斜面培养物(第5代),先用PBS洗下菌苔,混匀, 再用PBS稀释至所需浓度,使回收菌数达1×104CFU/mL~9×104CFU/mL。
3.营养琼脂培养基(批号:1100771)。
4.仪器:生物安全柜(EC18-01);隔水式恒温培养箱(EB28-02);两孔恒温 水浴锅(EB09-04)。
二、方法
1.检测依据:GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。
2.检验环境:温度为21.8℃~23.4℃,相对湿度为55%-57%。
3.检验方法:
将实验分为八组,分别对应实施例1-3护理产品和对比例1-5护理产品,分 别取八组样品原液5mL和对照液(PBS)置于灭菌试管内,置20℃±1℃恒温控 制器内预热5min,取上述菌悬液100μL,混匀。分别作用到2min、5min、l0min、 20min时,吸取0.5mL菌药混合液加入含4.5mLPBS的试管内混匀,作适当稀释 后,分别吸取1.0mL倾皿做活菌菌落计数。每组试验重复3次。
三、结果
在20±1℃温度为条件下,试验重复3次。实施例1-3护理产品三组样品原 液作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率均为100.00%, 见表13-15;对比例1护理产品样品原液作用2min、5min、10min和20min对金 黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为84.68%、84.13%、83.04%、81.69;对比例2 护理产品样品原液作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均 抑菌率分别为85.87%、85.28%、84.29%、82.42%;对比例3护理产品样品原液 作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为85.85%、 85.31%、84.32%、82.47%;对比例4护理产品样品原液作用2min、5min、10min 和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为85.70%、85.07%、84.20%、 82.37%;对比例5护理产品样品原液作用2min、5min、10min和20min对金黄 色葡萄球菌的平均抑菌率分别为85.70%、85.00%、83.25%、82.33%,见表16-20。
由上述可知,实施例1-3的鼻腔护理产品,对金黄色葡萄球菌的抑菌率均达 到100%;而对比例1-5护理产品抗菌效果极显著低于实施例1-3的鼻腔护理产 品,表明本申请组合物合使用能显著提高抗菌、抑菌效果。
表13实施例1产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表14实施例2产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表15实施例3产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表16对比例1产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表17对比例2产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表18对比例3产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表19对比例4产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
表20对比例5产品金黄色葡萄球菌的抑菌效果
大肠杆菌菌抑菌实验
将上述实施例1-3和对比例1-5制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加 于鼻腔护理电子雾化液基础液中,制备成实施例1-3护理产品和对比例1-5护理 产品,进行大肠杆菌菌抑菌实验,具体检测器材及方法如下:
一、器材
1.样品:实施例1-3护理产品以及对比例1-5护理产品。
2.大肠杆菌8099(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌悬液:取经24h 培养的新鲜斜面培养物(第5代),先用PBS洗下菌苔,混匀,再用PBS稀释至 所需浓度,使回收菌数达1×104CFU/mL~9×104CFU/mL。
3.营养琼脂培养基(批号:1100771)。
4.仪器:生物安全柜(EC18-01);隔水式恒温培养箱(EB28-02);两孔恒温 水浴锅(EB09-04)。
二、方法
1.检测依据:GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。
2.检验环境:温度为21.8℃~23.4℃,相对湿度为55%-57%。
3.检验方法:
将实验分为八组,分别对应实施例1-3护理产品和对比例1-5护理产品,分 别取八组样品原液5mL和对照液(PBS)置于灭菌试管内,置20℃±1℃恒温控 制器内预热5min,取上述菌悬液100μL,混匀。分别作用到2min、5min、l0min、 20min时,吸取0.5mL菌药混合液加入含4.5mLPBS的试管内混匀,作适当稀释 后,分别吸取1.0mL倾皿做活菌菌落计数。每组试验重复3次。
三、结果
在温度为20℃±1℃条件下,试验重复3次该样品原液作用2min、5min、 10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率均为100.00%,见表21-23;对比例1 护理产品样品原液作用2min、5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率 分别为86.92%、86.12%、85.13%、83.94%;对比例2护理产品样品原液作用2min、 5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为87.60%、86.63%、85.25%、 83.87%;对比例3护理产品样品原液作用2min、5min、10min和20min对大肠 杆菌的平均抑菌率分别为86.89%、85.86%、84.31%、83.00%;对比例4护理产 品样品原液作用2min、5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为 87.28%、85.82%、84.72%、82.78%;对比例5护理产品样品原液作用2min、5min、 10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为87.07%、86.24%、85.71%、83.49%, 见表24-28。
由上述可知,实施例1-3的鼻腔护理产品,对大肠杆菌的抑菌率均达到100%; 而对比例1-5护理产品抗菌效果极显著低于实施例1-3的鼻腔护理产品,表明本 申请组合物合使用能显著提高抗菌、抑菌效果。
表21实施例1产品大肠杆菌的抑菌效果
表22实施例2产品大肠杆菌的抑菌效果
表23实施例3产品大肠杆菌的抑菌效果
表24对比例1产品大肠杆菌的抑菌效果
表25对比例2产品大肠杆菌的抑菌效果
表26对比例3产品大肠杆菌的抑菌效果
表27对比例4产品大肠杆菌的抑菌效果
表28对比例5产品大肠杆菌的抑菌效果
局部毒性实验
将上述实施例1制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1护理产品,进行局部毒性实验,具体检测器 材及方法如下:
白化豚鼠,用实施例1护理产品局部多次滴鼻给药,使之接触四小时。给药 7天后麻醉处死,立即观察鼻腔黏膜情况。观察指标包括:动物存活率,活动饮 食情况,鼻黏膜颜色,有无水肿,有无喷嚏、流涕症状等。
一、实验材料
实施例1护理产品;乌来糖(上海金穗生物科技有限公司,货号J31282-500g); 多聚甲醛(宝如亿(北京)生物技术有限公司,4%PFA,DF0135-500mL);醋 酸氟轻松乳膏(天津太平洋制药有限公司,国药准字H12020838,生产批号: 8420157);琼脂粉(上海麦克林生化科技有限公司,A800730-250g,BR, Lot#:C12230032);薇婷丝滑沁香脱毛膏;乙醚(北京市通广精细化工公司委托 制造,AR,批号:20200925);蒸馏水。
白化豚鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,品系Hartley Guinea Pig,动物实验编号:LAP11213980225154015,伦理审查号:SLXD-20210225026,许 可证号:SCXK(京)2016-011。
二、实验操作
白化豚鼠(品系Hartley Guinea Pig)10只,雌性5只雄性5只,均购自北 京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2016-011。实施例 1护理产品从冰箱中取出,恢复至室温,将药液注入豚鼠的右鼻孔,4h内给药 3-4次,每次1-3滴,左鼻孔为对照组,不做处理。给药前观察记录豚鼠状态, 给药7天后观察豚鼠状态。豚鼠使用20%乌来糖溶液麻醉处死,取出鼻中隔, 使用适量多聚甲醛固定。
HE染色观察鼻黏膜:使用多聚甲醛固定鼻中隔,脱钙7日,对切片进行HE 染色,观察鼻黏膜组织形态。样品固定、切片与染色委托西安联易共享信息科技 有限公司完成。
三、实验结果
给药前豚鼠状态活跃,饮食及排泄情况正常,鼻腔呈淡粉色。给药7天后, 豚鼠无死亡,豚鼠鼻腔颜色如图1所示(以1号和2号两只豚鼠图片为例),无 鼻涕流出,无喷嚏,未见右侧鼻孔水肿,观测时未见明显异常。取鼻中隔进行观 测,未见水肿。对组织进行HE染色观察,结果如图2和图3所示,图2和图3 显示豚鼠左右鼻孔鼻黏膜无明显差异,未见异常。
抗慢性肉芽肿增生实验
将上述实施例1和对比例1-5制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于 鼻腔护理电子雾化液基础液中,制备成实施例1护理产品和对比例1-5护理产品, 进行抗慢性肉芽肿增生实验,具体检测器材及方法如下:
SD大鼠,雄性,80-100g,随机分为模型组、醋酸氟轻松组、实施例1护 理产品低、中、高剂量组、对比例1-5护理产品组。取大鼠于乙醚浅表麻醉下, 无菌操作,于鼠杯中先皮下注射2%琼脂溶液2mL,药物外涂于鼠背注药处, 在致炎当日给药,连续7天,每天1次,在末次给药24h后,乙醚麻醉处死, 剥离出肉芽肿琼脂块,称取湿重。监测指标为肉芽肿质量。
乌来糖(上海金穗生物科技有限公司,货号J31282-500g);氯化钠注射液(石 家庄四药有限公司);多聚甲醛(宝如亿(北京)生物技术有限公司,4%PFA, DF0135-500mL);醋酸氟轻松乳膏(天津太平洋制药有限公司,国药准字 H12020838,生产批号:8420157);琼脂粉(上海麦克林生化科技有限公司, A800730-250g,BR,Lot#:C12230032);薇婷丝滑沁香脱毛膏;乙醚(北京市通 广精细化工公司委托制造,AR,批号:20200925);蒸馏水。
SD大鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司,品系SD大鼠,雄性,体 重80-120g,订单号0000155590,动物实验编号:LAP11213980225153712,伦 理审查号:SLXD-20210225024,许可证号:SCXK(京)2020-0004。
SD大鼠购自北京华阜康生物科技股份有限公司,雄性,共80只,体重80-120 g,许可证号:SCXK(京)2020-0004。适应性喂养3天后,分为8组,每组10 只。称定4g琼脂粉,加入200mL双蒸水,高压蒸汽灭菌(104kPa,120℃) 30min,略微放冷后取出,摇匀,放至室温。将脱毛的大鼠乙醚麻醉,快速吸取 2.0mL2%琼脂溶液,沿背中线注射,进行肉芽肿的接种。造模当日给药。模型 组用生理盐水处理,醋酸氟轻松组均匀涂抹适量醋酸氟轻松乳膏,实施例3护理 产品低、中、高剂量组给予0.25、0.5和0.75mL的实施例3护理产品,对比例 1-5护理产品组给予配制原液,均匀涂抹。给药结束后使用20%乌来糖溶液麻醉 处死,剥离肉芽肿块,称重。
肉芽肿质量变化检测
肉芽肿块的质量以平均值±SD的形式表示,使用SPSS25软件,采用one-way ANOVA进行分析,分析方式为LSD比较,当P<0.05时认为差异具有显著性。
对各组大鼠的肉芽肿肿块质量进行比较。如图3所示,与模型对照组相比, 醋酸氟轻松组肉芽肿质量显著下降(p<0.05),实施例1护理产品低剂量组、对 比例1-5护理产品组无明显改善,实施例1护理产品中、高剂量组的肉芽肿质量 显著下降(p<0.05),该结果表明本申请的护理产品具有一定的抗慢性肉芽肿增 生的活性。
鼻腔分泌物指标评分调查
50例受试者,其中女30例,男20例;年龄15-58岁,平均年龄28岁;具 有鼻疖﹑鼻前庭炎或鼻腔和鼻窦的炎症时间1年-3年。患者在年龄、性别、病程 及症状等方面的差异无统计学意义。人选标准:处于鼻疖﹑鼻前庭炎或鼻腔和鼻 窦的炎症发作期的患者,表现有鼻痒,流涕,鼻塞。
将上述实施例1制得的鼻腔护理电子雾化液组合物分别添加于鼻腔护理电 子雾化液基础液中,制备成实施例1护理产品。
使用方法:所有受试患者停用其他治疗药物7天以上,给予制备成实施例1 护理产品50ug,3次/d。使用中注意观察有患者各类症状的发生,并做好记录。
评价方法指标:鼻痒、流涕,鼻塞,由临床医生分别评分;指标分4个等级: 0级:无(症状均无);1级:轻度(鼻痒);2级:中度(鼻痒、流涕);3级:重度(鼻 痒、流涕、鼻塞)。
分别于治疗前、第15d、第30d对鼻腔症状评估分级,并统计各级人数, 见表28。在治疗第15d,中度、重度患者的数量已减少;治疗第30d,患者有6 人痊愈,重度患者仅有1人,绝大部分患者仅有鼻痒的症状,见表29。
表29在试用实施例1护理产品前后的受试者敏感指标各等级人数表
最后说明的是,以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制,尽 管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述,但本领域技术人员应当 理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离本发明权利要 求书所限定的范围。