CN113631175A - 以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂和肥胖抑制方法 - Google Patents

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Abstract

本发明所要解决的技术问题在于:提供一种经口组合物,其利用作为天然物的植物体本身的体脂肪蓄积抑制功能和/或总胆固醇值上升抑制功能,该植物体在该植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖即D‑阿洛酮糖和阿洛糖醇。本发明解决技术问题的方案为:提供一种体脂肪蓄积抑制剂或总胆固醇值上升抑制剂,其特征在于,含有植物体或该植物体提取物作为活性成分,其中,该植物体在植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖即D‑阿洛酮糖和阿洛糖醇。

Description

以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂和肥胖抑制方法
技术领域
本发明涉及一种抗肥胖活性剂和肥胖抑制方法,其以糖醇之一的阿洛糖醇、特别是鼠刺或华东山柳所含的阿洛糖醇作为有效成分。
本发明利用了鼠刺或华东山柳(因地域不同,有的地方将鼠刺称为华东山柳。在本发明中,华东山柳=鼠刺。以下,省略该说明。)的抗肥胖作用。
背景技术
随着预防医学知识的普及,人们尝试着在患病前的健康或半健康的状态下,通过摄取具有预防性的生理活性的天然食品来保持健康,作为健康食品,上市有各种天然原材料。其中,关于涉及抗肥胖的功能性食品原材料,在日本,多酚类已经得到了实用化、制品化,形成了一个市场。另外,在欧美,由于肥胖所产生的健康障碍,也提高了更强的健康意向,激化了功能性食品原材料的开发。然而,到现在为止,具有抗肥胖活性的功能性食品原材料的研究还只是开始阶段,如果能够简便且廉价地从资源丰富的物质中提取出抗肥胖活性剂,则能够进一步扩大功能性食品原材料的市场。
所谓稀少糖,定义为“自然界中其存在量少的单糖及其衍生物”(国际稀少糖学会),包含单糖的大部分,已知有50种以上。在这些稀少糖中,存在具有各种生理活性的单糖,这在最近的研究中已经明确。特别是,关于稀少糖之一的“D-阿洛酮糖”(英文名:D-allulose(D-阿卢糖)),根据现有的研究,已知能够发挥抗氧化作用、细胞保护作用、餐后血糖值上升抑制作用、抗动脉硬化作用、胰β细胞的改性抑制作用、脂肪蓄积抑制作用,并且是对人体没有副作用的安全物质,因此,利用这些作用,对于高血压、高脂血症、糖尿病等生活习惯病,能够同时应对,对摄取的人也没有限制。另外,D-阿洛酮糖是作为甜味剂利用的物质,因此在经口摄取时,没有困难性,进一步,即使添加在食品类中,也能够没有不适感地进行食用(专利文献1)。
另一方面,在20万种的植物中,作为落叶性灌木之一的鼠刺是唯一大量蓄积有稀少糖D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物,但是,尚未有报告验证不属于来自天然物的提取物的植物体本身具有改善血糖值、体重增加和内脏脂肪蓄积中的一种以上的特征性生理活性。
对于改善血糖值、体重增加和内脏脂肪蓄积中的一种以上的特征性生理活性优异并且安全的天然物本身出现了强烈的社会要求后,鉴于鼠刺或华东山柳的叶、茎等植物体含有具有生理活性的稀少糖,以及稀少糖是改善血糖值、体重增加和内脏脂肪蓄积中的一种以上的特征性生理活性物质(非专利文献7),在验证这些植物体本身是否具有与稀少糖相同的效果的迄今为止的研究中,取得了如下的成果并已经申请了专利:对大鼠长期给予添加了5%鼠刺干燥粉末的食物时,体脂肪蓄积被抑制,并且,该作用可能是因鼠刺所含有的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇而产生的(专利文献2)。
[现有技术文献]
专利文献
专利文献1:日本特许第6253451号公报
专利文献2:日本特愿2019-027338
专利文献3:日本特许第4381684号公报
专利文献4:日本特许第6437721号公报
非专利文献
非专利文献1:日本生物工学会大会演讲要旨集2007年度,108,2007-08-02
非专利文献2:《植物化学(Phytochemistry)》48(2):241-248
非专利文献3:《生物科学、生物技术、生物化学(Biosci.Biotechnol.Biochem.)》2006,70(9),2081-2085
非专利文献4:《生命科学(Life Sci.)》2007,81(7),592-599
非专利文献5:日本营养和粮食学会志Vol.59(2006)No.2,p119-121
非专利文献6:日本食品科学工学会志Vol.57(2010)No.6,p263-267
非专利文献7:《药理学与治疗学(Pharmacol Ther)》155,49-59(2015)
非专利文献8:《植物生理学(Z Pflanzenphysiol Bd)》82,S.301-309(1977)
非专利文献9:《应用生理学杂志(J Appl Physiol)》28,234-236(1970)
非专利文献10:《生物化学杂志(J Biol Chem)》226,497-509(1957)
非专利文献11:《营养学杂志(J Nutr)》108,1798-1805(1978)
非专利文献12:iMns:Excel中利用Tukey法的多重比较.Deus ex machina的日常http://imnstir.blogspot.com/2012/03/exceltukey.html(最终浏览日:2018年12月18日)
非专利文献13:日本食品科学工学会志57,268-267(2010)
非专利文献14:《临床生物化学与营养杂志(J Clin Biochem Nutr)》30,55-65(2001)
非专利文献15:《临床生物化学与营养杂志(J Clin Biochem Nutr)》45,271-277(2009)
非专利文献16:《亚太临床营养学杂志(Asia Pacific J Clin Nutr)》10,233-237(2001)
非专利文献17:《营养科学与维生素杂志(J Nutr Sci Vitaminol)》48,512-516(2002)
非专利文献18:《毒理药理学(Reg Toxicol Pharmacol)》29,S11-S28(1989)
非专利文献19:《欧洲临床营养学杂志(Eur J Clin Nutr)》48,286-292(1994)
非专利文献20:《生物技术生物化学(Biosci Biotechnol Biochem)》70,2081-2085(2006)
非专利文献21:《纯化学与应用化学(Pure Appl Chem)》74,1253-1261(2002)
发明内容
[发明所要解决的技术问题]
关于D-阿洛酮糖的抗肥胖作用等,已经得到了明确,但对于阿洛糖醇,还几乎没有营养学方面的研究。如图1的化学式所示,阿洛糖醇是将D-阿洛酮糖还原而得到的糖醇。
在上述在先申请中已经验证了作为含有阿洛糖醇的天然物的植物体本身、即在该植物体内生产而含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体本身的体脂肪蓄积抑制功能和/或总胆固醇值上升抑制功能,但本发明期待阿洛糖醇本身也具有与D-阿洛酮糖等同的抗肥胖作用,其目的在于:提供一种以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂和肥胖抑制方法。
[用于解决技术问题的技术方案]
本发明的要点涉及下述的(1)至(7)的抗肥胖活性剂。
(1)一种抗肥胖活性剂,其特征在于:将阿洛糖醇作为有效成分。
(2)如上述(1)所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:其是将阿洛糖醇添加在食品、肥料、农药、化妆品或医药品中而得到的。
(3)如上述(1)或(2)所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:上述阿洛糖醇是从植物体中提取的。
(4)如上述(1)或(2)所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:上述阿洛糖醇是包含在植物体中的形态。
(5)如上述(3)或(4)所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:上述植物体为鼠刺或华东山柳。
(6)如上述(1)至(5)中任一项所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:上述阿洛糖醇为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物。
(7)如上述(6)所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:在上述阿洛糖醇混合物中,调节了阿洛糖醇和/或D-阿洛酮糖的含量。
本发明的要点涉及下述的(8)至(14)的肥胖抑制方法。
(8)一种肥胖抑制方法,其特征在于:将阿洛糖醇用于肥胖的抑制。
(9)如上述(8)所述的肥胖抑制方法,其特征在于:将上述阿洛糖醇添加在食品、肥料、农药、化妆品或医药品中而使用。
(10)如上述(8)或(9)所述的肥胖抑制方法,其特征在于:上述阿洛糖醇是从植物体中提取的。
(11)如上述(8)或(9)所述的肥胖抑制方法,其特征在于:上述阿洛糖醇是包含在植物体中的形态。
(12)如上述(10)或(11)所述的肥胖抑制方法,其特征在于:上述植物体为鼠刺或华东山柳。
(13)如上述(8)至(12)中任一项所述的肥胖抑制方法,其特征在于:上述阿洛糖醇为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物。
(14)如上述(13)所述的肥胖抑制方法,其特征在于:在上述阿洛糖醇混合物中,调节阿洛糖醇和/或D-阿洛酮糖的含量。
[发明效果]
在专利文献2的先申请发明中,使大鼠摄食添加了鼠刺的干燥粉末的食物,关于鼠刺的生理作用,收集基础数据的结果,可知:在体脂肪蓄积抑制效果、总胆固醇值上升抑制中,与稀少糖D-阿洛酮糖的影响相比,鼠刺中的成分的影响更大。另外,在高脂肪、高蔗糖饮食条件下,进行了鼠刺干燥粉末的抗肥胖作用的验证、以及抗肥胖作用是否是由鼠刺干燥粉末中的稀少糖即D-阿洛酮糖和阿洛糖醇引起的验证,确认了鼠刺干燥粉末的抗肥胖作用,并确认了D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的协同效果。并且,紧接着,在本发明的实验中发现了阿洛糖醇具有体脂肪蓄积抑制作用。因此,根据本发明能够提供一种以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂和肥胖抑制方法。
附图说明
图1是表示实施例中所试验的糖类(D-阿洛酮糖、阿洛糖醇和赤藓糖醇)的结构式的图。
图2是表示实施例中的大鼠的体重变化的曲线图。
图3是表示实施例中的摄食量的经日性变动的曲线图。
具体实施方式
[稀少糖]
所谓稀少糖,定义为自然界中微量存在的单糖及其衍生物。关于六碳糖(己糖),当是醛糖的情况下,存在16种:L-阿洛糖、L-古洛糖、L-葡萄糖、L-半乳糖、L-阿卓糖、L-艾杜糖、L-甘露糖、L-塔罗糖、D-塔罗糖、D-甘露糖、D-艾杜糖、D-阿卓糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-古洛糖、D-阿洛糖;当是酮糖的情况下,存在8种:L-阿洛酮糖(L-阿卢糖(L-allulose))、L-山梨糖、L-果糖、L-塔格糖、D-塔格糖、D-果糖、D-山梨糖、D-阿洛酮糖。例如,尚未有D-阿洛酮糖对人具有毒性的报告,认为对动物的毒性低。
在稀少糖中,关于得到D-阿洛酮糖的方法,目前常见的是对D-果糖进行酶(差向异构酶)处理而得到的制法。
可以利用氢化反应,在含有选自元素周期表的第8族元素中的金属的催化剂的存在下,由选自D-阿洛酮糖、L-阿洛酮糖、D-塔格糖、L-塔格糖、D-山梨糖和L-山梨糖中的至少1种的已酮糖制造作为糖醇的塔罗糖醇、阿洛糖醇、艾杜糖醇等(专利文献3)。
山梨糖醇、甘露糖醇等碳原子数为6的糖醇已被用于各种用途。另外,塔罗糖醇、阿洛糖醇、艾杜糖醇等是自然界中几乎不存在的糖醇,是期待可以用于食品、化妆品、医药品、化学品、农药、植物成长调节剂等中的糖质。
如上所述,稀少糖D-阿洛酮糖(英文名:D-allulose)具有作为同化糖、优异的甜味剂、抗肥胖剂、食欲抑制剂、胰岛素抵抗性改善剂、低卡路里甜味剂的特性,尽管低卡路里,也具有引起食欲抑制等新的特性。另外,甜味也与砂糖接近,卡路里也低,因此作为能够广泛用作低卡路里甜味剂的糖而受到了关注。稀少糖是除了自然界中丰富存在的D-葡萄糖和D-甘露糖等以外的单糖,例如是D-阿洛酮糖、D-阿洛糖等自然界中极少量产生的单糖类,因此,关于其性质和利用,现在仍然在开拓中。目前,对于D-阿洛酮糖等稀少糖,可以利用酶等进行制造,但已经明确了其也包含在鼠刺和华东山柳的叶等植物体内,从而受到了关注。
所谓稀少糖,由国际稀少糖学会定义为“自然界中其存在量少的单糖及其衍生物”,包括单糖及作为其衍生物的糖醇在内,共有60种左右。D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖和能够由牛乳中的乳糖生产的D-半乳糖是在自然界中大量存在的物质,将其以外的糖分类为微量存在的稀少糖。根据DTE的发现可知,由D-葡萄糖能够制造D-果糖、D-阿洛酮糖,还能够制造D-阿洛糖、阿洛糖醇、D-塔罗糖醇。
如图1所示,阿洛糖醇为多元醇(糖醇),是稀少糖。具体而言,阿洛糖醇是将D-阿洛酮糖还原而得到的碳原子数6的糖醇,认为在鼠刺中与D-阿洛酮糖发生氧化还原而动态往复地存在。在本实施方式中,能够呈现出研究成果之一,其目的在于利用含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体即鼠刺,来阐明含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇两者的植物体的生理功能,其结果,虽然对于阿洛糖醇单体的生理功能尚有许多不明确之处,但是根据本发明的研究可以认为多少已经明确了一些。
[含有稀少糖的植物体]
对于作为自然界中几乎不存在的糖醇的阿洛糖醇,可以使用:在含有选自元素周期表的第8族元素中的金属的催化剂的存在下,由D-阿洛酮糖利用氢化反应制造而得到的阿洛糖醇;以及,包含在鼠刺属的植物体中的形态的阿洛糖醇。
鼠刺属的植物是在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体(非专利文献8)。即,是在其植物体内生产并含有存在于自然界中并被称为稀少糖的具有生理活性作用的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的唯一植物。鼠刺属的植物在日本已以苗木的方式销售,部分品种所属的植物由其长的穂和香味良好的头状花在观赏用庭院中培育,还用作篱笆,或者用作插花。虽然在日本已以苗木的方式销售,但通过其种子发芽而进行繁殖并不容易。已知鼠刺属的植物在其植物体内生产并含有具有生理活性作用的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇,从而迫切期望开发用于使种子高效发芽的方法。
作为鼠刺属的植物体,例如,可以列举野生的植物体、通过栽培而得到的植物体、或通过组织培养等培养而得到的植物体,例如,叶、花、枝、茎、果实、根、种子、培养得到的细胞或器官、愈伤组织(callus)等,可以列举对这些进行直接或物理-化学或生物处理得到的各种处理物等。
作为物理-化学处理方法,例如,可以列举晒干、风干、冻干等干燥处理,利用混合机、均质机、球磨机等的粉碎处理等;作为物理-化学处理物,可以列举干燥处理物、冻干处理物、粉碎处理物等。作为生物处理方法,可以列举发酵方法等;作为生物处理物,可以列举发酵处理物。
在鼠刺属的植物中,已开发了如下的方法:不利用植物的组织培养法,使作为野生种的鼠刺有性繁殖(种子繁殖),将从所得到的鼠刺植物体切取的植物体在植物培养培养基中培养,高效且经济地生产克隆苗(专利文献4)。
优选使用长成的树木的芽、叶、枝、花或根、或发芽的种子、通过继代培养或组织培养而成长的植物体。
含有稀少糖D-阿洛酮糖的植物只有鼠刺属(非专利文献1)。另外,已知D-阿洛酮糖阻碍大多植物的培育,除此以外,还已知D-阿洛酮糖具有胰岛素分泌作用(非专利文献2)、防止动脉硬化的作用(非专利文献3)等。虽然有砂糖的7成左右的甜味,但卡路里几乎为零。在利用大鼠的动物实验中,报告了“使餐后的血糖值上升变缓”(非专利文献4)、“抑制内脏脂肪的蓄积”(非专利文献5)、“不易动脉硬化”(非专利文献6)这样的研究结果。对于来自其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖D-阿洛酮糖和稀少糖的衍生物阿洛糖醇的植物体的提取物,期待体脂肪蓄积抑制或总胆固醇值上升抑制效果。
作为植物体提取物,可以列举利用各种提取方法由前述的植物体得到的提取物。作为提取方法,例如,可以列举各种溶剂提取、超临界流体提取等。可以利用沉降分离、滤饼过滤、澄清过滤、离心过滤、离心沉降、压榨分离、压滤等各种固液分离方法,各种浓缩方法、各种干燥方法、造粒或粉末化等制剂化方法、各种精制方法等处理提取物。作为精制方法,例如可以列举溶剂分配法、柱色谱法、再结晶法等。作为浓缩和干燥方法,可以列举冻结干燥、自然干燥、热风干燥、通风干燥、送风干燥、喷雾干燥、减压干燥、晒干、真空干燥、流动层干燥、泡沫层干燥、鼓式干燥等鼓式干燥法、超声波干燥、电磁波干燥等干燥方法,优选可以列举喷雾干燥方法、冻结干燥方法。
在进行提取和提取物处理时,例如也可以添加抗氧化剂和保存剂等。作为用于溶剂提取的溶剂,可以使用能够提取植物体的功能成分的任意种溶剂,例如,可以列举水、蒸馏水、去离子水、无机盐水溶液、缓冲液等水性介质,甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等一元醇,丙二醇、甘油等多元醇,己烷、甲苯、石油醚、苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、1,1,2-三氯乙烯、二甲亚砜、丙酮等有机溶剂等,优选水性介质、醇。
作为缓冲液,例如可以列举磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液等。作为无机盐水溶液的无机盐,例如可以列举氯化钠、氯化钾、氯化钙等。作为醇,优选一元醇;作为一元醇,优选乙醇。
对于这些溶剂,可以单独使用,或者多种混合使用。作为混合后的溶剂,优选含水醇,更优选含水一元醇,特别优选含水乙醇。作为含水率,优选70%以下,更优选40%以下。作为溶剂,也可以使用超临界流体化后的二氧化碳。
在进行提取时,例如,相对于植物体1重量份,使用溶剂0.1重量份~10000重量份、优选1重量份~100重量份。对于提取温度没有特别限制,优选0℃~100℃,更优选20℃~90℃。对于提取时间没有特别限制,优选1分钟~1周,更优选30分钟~1日。另外,作为从鼠刺或华东山柳进行提取的方法,可以在利用水性介质对前述的鼠刺或华东山柳、前述的鼠刺或华东山柳的物理化学处理物、前述的生物处理物进行提取后,对其残渣利用水、醇或含水醇进行提取。
作为水性介质,没有特别限制,优选水、纯水、去离子水。对于利用水性介质和醇或含水醇进行提取时的提取温度没有特别限制,优选0℃~100℃,更优选20℃~90℃。对于提取时间没有特别限制,优选1分钟~1周,更优选30分钟~1日。另外,作为鼠刺或华东山柳,优选使用干燥处理或发酵处理后的植物体。
作为用于提取的设备,没有特别限制,可以列举为了高效提取而制作的容器、搅拌机、回流冷却器、索格利特提取机、均质机、振荡机、超声波发生装置等等。本发明的肝功能保护剂或改善剂可以含有利用前述的方法调制的鼠刺或华东山柳或该提取物,并且根据需要含有药理学上容许的一种或者一种以上的载体,进一步,根据需要也可以含有其他的用于治疗的有效成分。
已知在鼠刺的叶中含有鲜重的约5%的稀少糖中的D-阿洛酮糖。在本发明中,以利用这些植物体中所含有的阿洛糖醇为目的,可以以包含在植物体中的形态利用阿洛糖醇,即,使包括鼠刺的叶、芽、茎、根等在内的植物体成为粉体而形成含有阿洛糖醇的粉体后利用。关于从鼠刺或华东山柳采取植物体的方式,例如,从长成的树木采取叶,或者采取包括由种子发芽得到的幼苗体、组织培养或继代培养得到的幼苗体的叶、茎、根在内的植物体整体后,进行冻结干燥,由此能够得到粉体。在对鼠刺植物体进行冻结干燥时,可以利用市售冻结干燥设备。与其他的干燥法相比,冻结干燥法是低温处理,因此不会破坏营养成分,复原性优异。防止因脱水所导致的组织破坏也是该干燥法的特征。食品的近90%是水分,因此,需要非常注意腐烂。与其他的干燥方法相比,冻结干燥的最终的干燥度格外良好,因此,能够用于保存食品的制造。另外,对于干燥后的食品而言,由于水分被除去,相应地减少了被除去的水那部分的重量,因此也适于搬运。能够在不损害鼠刺或华东山柳的植物体所具有的功能成分的情况下,由鼠刺或华东山柳的植物体制造鼠刺或华东山柳的植物体的粉末。例如,其特征在于,包括:将鼠刺或华东山柳的植物体粉碎而使其浆料化的工序;对该浆料细分后进行预冷冻成冻结型的工序;对该冷冻品实施水分降至3~5%的真空冻结干燥处理的工序;以及,对由上述工序所得到的干燥处理品进行粉末调制的工序。另外,作为干燥处理,其特征在于:适用真空干燥、喷雾干燥。
以下,以鼠刺为例,对其栽培和冻结干燥进行详细说明。
作为含有稀少糖的植物,目前已知有鼠刺和华东山柳,植物图鉴等中有以下的记载。
[鼠刺]
鼠刺是属于鼠刺属的植物。鼠刺属(鼠刺属、髓菜属、学名:Itea spp.)是虎耳草科的落叶灌木,是包括约10种灌木的植物的属。由于其嫩叶可以如马兰那样焯水后食用,因此也称为马兰木,树干高度1~2米,幼枝为淡绿色,叶互生,卵状长椭圆形,先端锐尖,边缘有细的锯齿。在叶面上能看到约8对平行的侧脉。在5~6月,枝头生长长度5~17厘米的向上的总状花序,盛开数朵白色的小花。花瓣为卵状披针形,5片直立,萼片、雄蕊的数量均与花瓣相同,雌蕊为1枚,柱头为头状,子房为半上位。鼠刺生长在温暖地区的山中,分布在近畿地方南部、四国、九州。已知鼠刺属是在植物体内产生属于稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的唯一植物。在日本已以苗木的方式销售。
[华东山柳]
华东山柳是属于桤叶树科的植物,植物图鉴中说明如下。
分布于北海道、本州、四国、九州和朝鲜半岛的济州岛,且生长在山林中的落叶小乔木,高度3~7m左右,树干光滑且为茶褐色,枝突出成轮状。幼枝上有星状毛。叶有柄且互生,宽的倒披针形,边缘有锯齿,集中在枝的先端,表面无毛或星状毛稀疏,背面脉上密生毛。夏天,枝的先端突出长度6~15cm的总状花序,密被小的白花。萼小形且5裂。花冠直径5~6mm、5深裂,似小的梅花。雄蕊为10枚,雌蕊为1枚。结球形且小形的蒴果。木材为上质的木炭,幼芽可以食用。华东山柳不含稀少糖D-阿洛酮糖,但因地域差异,有时将鼠刺称为华东山柳。本发明是关于鼠刺的华东山柳。
[由鼠刺种子的栽培]
鼠刺的种子处于休眠状态,因此只要不打破休眠,即使播种也不会发芽。打破种子的休眠需要在干燥气氛的阴暗处保存规定的时间,例如,在收获鼠刺的种子后,干燥气氛下、以4℃、在暗处保存2至6个月时间。作为干燥条件,水蒸气压越少越优选,例如,与大量的硅胶一起贮存在密闭的塑料容器内。作为贮存温度,可以列举4℃以下、优选4℃。另外,作为这样条件下的贮存期间,优选2周以上,优选2至6个月。鼠刺的种子是需光发芽种子,因此埋在土里不易发芽,发芽优选在明处,并选择25~30℃的温度条件,28℃下2周后的发芽率为60%左右。
使发芽后的种子成长时,例如可以使发芽种子在同一1/2MS培养基〔含有1%蔗糖(pH5.8)〕中成长,或者植于岩棉或土中,使其与通常的草木同样成长。无论是将发芽后的种子植于培养基的情况,还是土植的情况,之后的培育速度都毫不逊色,但土栽培有些木质化。与这些相比,利用岩棉栽培,栽培初期的发育早。关于发芽后的种子的移植,例如,可以在播种后经过约10日左右后进行。
[利用组织培养的培育]
鼠刺的栽培方法有:将鼠刺的第二~五叶展开后的幼苗、或通常的包括鼠刺幼木的茎顶部或茎部的鼠刺植物体直接、或去叶后直接置于或以扦插方式插入1/2MS培养基(添加1%蔗糖或不添加)等植物培养培养基中进行培养,由此能够使苗大量增殖。鼠刺植物体可以利用将通过杂交而改良了的种子的休眠打破而成幼苗的植物体。通过打破休眠后的种子的发芽及其继代培养得到的幼苗的量产,能够容易地大量得到鼠刺的植物体或苗。
[利用继代培养的鼠刺苗的培育]
使鼠刺苗量产时,可以取出植物体的一部分,在试管中等进行无菌培养的组织培养。例如,通过培养位于茎的先端的生长点附近的细胞,能够简便地生产大量的苗。例如,切取包括第二~五叶展开后的幼苗的茎顶部的植物体(约5-10mm左右),以扦插的方式插入1/2MS培养基中,或者只放置茎进行培养。从切断了茎顶部的植物体的下部(根和包括子叶或第一叶的植物)观察到多个腋芽。通过茎顶的切断而引起腋芽形成,因此能够简单地获得生长点。当没有叶只有茎时,只置于培养基中,全部观察到均质的幼叶。
准备1/2MS培养基中添加有3μM、5μM、10μM的吲哚丁酸(IBA)的培养基和无添加的培养基,在其中进行扦插后,在大概10日内,在添加IBA 3-10μM的任意培养基中都诱导了生根。然而,在无添加培养基中最早形成根,根的生长也良好,因此认为植物激素(IBA等)不是特别必要。
关于继代培养,可以是茎顶部的扦插及茎部的扦插(不含茎顶部)中的任意方式,移植至1/2MS培养基(含有1%蔗糖)后,大概10日以内生根。当没有叶只有茎时,只置于培养基,30日后全部观察到均质的幼叶并且部分观察到生根。
[鼠刺苗培育]
将在培养皿中进行了生根处理(生根1个月或1个月以上后培养)的植物移植在蛭石或培养土中,优选蒙上透明膜等罩。其中,利用幼苗进行培养时,如果使用培养土,则有发育被抑制的倾向,因此,与培养土相比,优选使用蛭石。然后,在2-3日后挪开罩,除去湿气,再在2-4日后,完全撤掉罩。关于该驯化步骤,如果使用带罩的容器,则即使是只有双叶的幼苗,也没有问题。另外,还可以利用使用岩棉等的水耕进行育苗。育苗期优选覆盖防虫网等来防止斜纹夜蛾的幼虫等虫害。将生根后的鼠刺植物体移植至穴盘的培养基或培养土中,以穴盘苗的形态进行培育。
培育中,外界气温变低(最低气温降低15度左右)时,叶子会变红。鼠刺不会落叶,但弗吉尼亚鼠刺会在冬季落叶。温度的影响大大左右苗木的生长,因此,在早春以后开始驯化步骤,到夏天时培育的效率高;冬天集中上述的继代作业,从早春开始着手育苗的安排是良好的。
[鼠刺幼苗的培育]
与鼠刺苗培育同样,从鼠刺的幼木切断包括茎部的鼠刺植物体,或者从鼠刺的第2-5叶展开后的幼苗切断包括茎顶部或茎部的鼠刺植物体,将切断得到的鼠刺植物体直接、或去叶后直接以扦插的方式插入生根培养基中,对其进行培养使其生根,将生根后的鼠刺植物体移植至培养基或培养土、栽培材料(岩棉等),培育至能够收获幼叶蔬菜和/或新叶蔬菜,收获该幼叶蔬菜和/或新叶蔬菜。生根培养基使用1/2MS培养基或Gamborg B5培养基。将生根后的鼠刺植物体育成鼠刺蔬菜时,通过使用培养基,能够无菌培育基于D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的功能的功能蔬菜。
[鼠刺冻结干燥]
(使用培养皿中无菌培养的鼠刺苗整体的情况)
对于继代培养(48日)得到的鼠刺苗,不切根而用手拔出每个根,利用牙签等尽量除去生根培养基(例如MS培养基)。然后,擦去水后,测定鼠刺苗的鲜重。其中,此时每1个培养皿得到鼠刺鲜重1~4g左右。例如,表1是表示培养皿个数和鼠刺苗的鲜重的测定结果的一个例子的图。
[表1]
Figure BDA0003279620770000131
(只使用田间培育的鼠刺成叶的情况)
用修剪刀只剪取田间培育的鼠刺的成叶并装袋。然后,测定鼠刺成叶的鲜重。
将鼠刺的成叶浸渍在液氮中冻结后,装入双层的袋中,以-80℃保存。将所保存的鼠刺的成叶适当破碎。
(通用方法)
在液氮中浸渍鼠刺,使其冻结,将冻结后的鼠刺放入用液氮冷却了的不锈钢杯中后,用双层纱布盖住杯子。将加入了鼠刺的5升的杯子放入真空冻结干燥机(FREEZONE12Plus、LABCONCO公司制造)中,或者将加入了鼠刺的2升的杯子放入真空冻结干燥机(FREEZE DRY SYSTEM/FREEZONE2.5、LABCONCO公司制造)中,偶尔搅拌并冻结干燥一定时间。其中,将鼠刺放入一个5升的杯子中时,也干燥一周左右。干燥后,测定重量,为鲜重的约10分之1。测定重量后,将鼠刺移至小型高速磨粉机(Mini Speed Mill,Labonext株式会社制)中。利用小型高速磨粉机(Mini Speed Mill)将鼠刺破碎10~20秒后,确认内容物,重复该操作直至鼠刺成为粉状。其中,连续破碎鼠刺时,磨粉机会成为高温,鼠刺粉末变色,因此优选采取冷却磨粉机、或更换磨粉机等应对措施。使用药匙或刮勺,尽量收集破碎后的鼠刺,并放入容器内。利用封口膜缠绕加入了鼠刺的容器的盖,利用铝箔遮光后,放入箱中,在室温黑暗下保存。
[抗肥胖活性剂或含有该抗肥胖活性剂的组合物]
本发明的以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂以经口给药的抗肥胖活性剂、含有该抗肥胖活性剂的组合物的形态,以包括人在内的哺乳类为对象,向该哺乳类例如经口给药。本发明的含有抗肥胖活性剂的组合物是具有抗肥胖活性作用的组合物,可以是食品、医药品、食品用添加物、肥料、农药、化妆品等。
作为有效成分的阿洛糖醇从植物体提取,可以是包含在植物体中的形态。植物体为鼠刺或华东山柳。作为有效成分的阿洛糖醇也可以为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物。在阿洛糖醇混合物中,可以调节阿洛糖醇和/或D-阿洛酮糖的含量。作为有效成分的阿洛糖醇为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物时,可以以植物体的形态利用虎耳草科鼠刺属的落叶灌木的鼠刺,该鼠刺在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇。关于该植物体,目前虽然没有见到营养学研究的报告,但由于是食用新叶的植物本身,因此能够合理地日常摄取,适合用作所谓的功能性食品等食品。
如上所述,本发明的含有抗肥胖活性剂的组合物以植物体的形态或该植物体提取物的方式含有,除此以外,还可以含有各种健康成分、作为食品或医药品所容许的各种的添加剂。作为其他的成分,例如可以例示作为经口给药剂的药学上或食品卫生上容许的各种载体,例如,赋形剂、润滑剂、稳定剂、分散剂、结合剂、稀释剂、香味料、甜味料、风味剂、着色剂等。只要能够实现本发明的效果,对于本发明的组合物的形态就没有特别限制,例如,可以列举片剂、丸剂、颗粒剂、细粒剂、咀嚼剂、胶囊剂、液剂、咀嚼片剂、饮料等。也可以是其他的食品形态。关于这些的给药形态,可以利用该领域公知的常用方法进行调制。
例如,在使含有抗肥胖活性剂的组合物成为颗粒时,对于其造粒方法没有特别限定,可以利用流动层造粒法、挤出造粒法等任意的方法进行。其中,能够适合使用可以得到分散性良好的造粒物的流动层造粒法。通常而言,在对粉末状的经口原材料进行造粒时,可以使用羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、普鲁兰多糖(Pullulan)、淀粉、糊精、瓜尔胶、半乳甘露聚糖等结合剂。
所得到的颗粒状的组合物对水的分散性良好,以微粉末的方式飞散的倾向小,容易以制品的方式分包。另外,通常从健康上和嗜好上的理由考虑,对于生物体内功能性成分的鼠刺,消费者不希望添加大量植物体以外的添加剂、例如上述的羟丙基纤维素那样的结合剂等。可以以不损害将颗粒状的组合物溶解在水中时的溶解性、分散性的范围的量使用结合剂。由于所使用的结合剂的强度,结合剂以溶液的方式使用时为3重量%以下,添加粉末时可以使用10重量%以下。
[含有食物纤维的原材料]
在本发明中,将阿洛糖醇作为抗肥胖活性剂或在肥胖抑制方法中使用时,其特征在于:将阿洛糖醇添加在食品、肥料、农药、化妆品或医药品中。即,可以以配合阿洛糖醇作为有效成分的食品、肥料、农药、化妆品或医药的形式使用。此时,有时也以包含在植物体的形态利用阿洛糖醇,此时还可以包含含有食物纤维的原材料。含有食物纤维的原材料的优选例子是选自日本茶、红茶和中国茶中的茶的粉末。另外,还可以以含有D-阿洛酮糖的形态利用阿洛糖醇,可以根据需要调节阿洛糖醇和D-阿洛酮糖的含量。
本发明的以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂也可以是片剂、胶囊、颗粒剂、粉末或含片(troche)等形态,在添加了与鼠刺的冻结干燥物的粉碎物或破碎物同样的例如含有食物纤维的原材料时,也能够良好地造粒。对于食物纤维的主要作用,在关于蛋白质代谢、脂质代谢、糖质代谢的领域进行了大量研究。另外,关于对肠内所存在的菌群的生理作用的研究也受到了关注。食物纤维大多包含在主要含有植物纤维的叶、芽、茎、花、实、根、穂、种子、果实等部分。含有食物纤维的原材料典型地是含有绿色植物的纤维的原材料。作为优选的例子,可以列举用于制造所谓的青汁的食品原材料。例如,可以列举明日叶、麦嫩叶、绿茶、甘蓝、甘薯嫩叶、西兰花、黄麻、芝麻嫩叶、桑叶、滨海前胡、艾叶等和它们的混合物。含有食物纤维的原材料的形状和制法没有特别限定,优选为粉末状,优选为75μm以下的粉末。
[抗肥胖作用]
根据实施例的实验,确认了阿洛糖醇具有抗肥胖作用。另外,与已知具有抗肥胖作用的D-阿洛酮糖相比,体脂肪蓄积量显示低值,因此提示了阿洛糖醇的抗肥胖作用比D-阿洛酮糖大的可能性。
除了上述以外,本发明的以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂还可以含有常用于食品或医药品的添加剂或者辅助成分。例如,可以进一步混合作为赋形剂的淀粉、乳糖、结晶纤维素、麦芽糖醇、糊精、普鲁兰多糖(Pullulan)、瓜尔胶、作为甜味剂的天冬甜素、三氯半乳蔗糖、安赛蜜K、甜叶菊、莫纳甜(Monatin)、应乐果甜蛋白(Monellin)、神秘果蛋白(Miraculin)等高甜度甜味料、山梨糖醇、木糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇等糖醇、酮糖、醛糖等甜味料,调节甜味,也可以含有作为增强剂的胡萝卜素、L-抗坏血酸、α-生育酚、叶黄素、番茄红素等。
医药品(也包括非药品)的剂形例如可以为注射剂、栓剂、吸入剂、经皮吸收剂、各种外用剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等的任意种,给药形态也可以为经口给药(内服)、非经口给药(外用、注射)中的任意种。调制这样的各种剂型的医药制剂时,例如可以使用本发明的在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体,或者适当组合其他的药学上容许的赋形剂、结合剂、增量剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、分散剂、缓冲剂、保存剂、矫味剂、香料、被膜剂、载体、稀释剂、其他的药效成分等而使用。
作为上述医药品(也包括非药品)中能够配合的药效成分,例如可以列举维生素类、已知有脂肪代谢促进作用的药物或天然物等。即,除了上述以外,本发明的经口用组合物还可以适当含有维生素、类维生素物质、蛋白质、氨基酸、油脂、有机酸、碳水化合物、来自植物的原料、来自动物的原料、微生物、食品用添加物、医药品用添加物等能够经口摄取的成分。
将在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体用作食品时,可以利用通常方法实施。具体而言,例如可以如以下所记载那样实施。作为食品,只要含有在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物提取物,并且动物能够经口摄取即可,食品的种类、形状等没有特别限制。作为食品,例如可以列举:水果糖、糖果、弹珠汽水(Ramune)、橡皮糖、口香糖等点心类;曲奇、薄脆饼干(cracker)、饼干、薯片、蛋糕、巧克力、甜甜圈、布丁、果冻等西式点心;煎饼、羊羹、大福、萩饼、馒头、卡斯提拉等日式点心;冰激凌、冰棒、冰冻果子露、意式冰淇淋等冷冻点心;白面包、法式面包、牛角面包等面包类;乌冬面、荞麦面、中国面条、扁面条等面条类;鱼板、圆筒状鱼糕、鱼肉香肠等鱼糜制品;火腿、香肠、汉堡牛肉饼、咸牛肉等畜肉制品;盐、胡椒、味噌、酱油、沙司、调味汁、蛋黄酱、番茄酱、甜味料(例如砂糖、蜂蜜、粉末饴糖、饴糖、果酱、橘子酱等)、辛味料(例如芥末、胡椒等)等调味料类;明石烧、章鱼烧、文字烧、御好烧、炒面、炒乌龙面等铁板烧食品;奶酪、黄油、人造黄油、酸奶等乳制品;纳豆、油炸豆腐、豆腐、魔芋、丸子、腌菜、佃煮、饺子、烧卖、可乐饼、三明治、比萨、汉堡包、色拉等各种菜肴;牛肉、猪肉、鸡肉等畜产品;虾、贝类、蚬、昆布等水产品;将蔬菜·果实类、植物、酵母、藻类等制成粉末得到的各种粉末;将油脂类·香料类(香草、柑橘类、鲣鱼等)粉末固体化得到的制品;饮料等。
作为饮料,可以列举:汤、味噌汁等饮食品;速溶咖啡、速溶红茶、速溶奶粉、速溶汤、速溶味噌汁等粉末饮食品;威士忌、波本威士忌、烈性酒、利口酒、葡萄酒、果子酒、日本酒、中国酒、烧酒、啤酒、酒精度数1%以下的无醇啤酒、气泡酒、碳酸酒等酒精饮料;兑果汁(例如苹果、柑橘、葡萄、香蕉、梨、梅子的果汁等)饮料、兑蔬菜汁(例如西红柿、胡萝卜、芹菜、黄瓜、西瓜的蔬菜汁等)饮料、兑果汁和蔬菜汁饮料、清凉饮料水、牛奶、豆奶、乳饮料、饮料型的酸奶、咖啡、可可、茶饮料(红茶、绿茶、大麦茶、玄米茶、煎茶、玉露茶、焙茶、乌龙茶、姜黄茶、普洱茶、路易博士(Rooibos)茶、玫瑰茶、菊花茶、草药茶(例如薄荷茶、茉莉花茶)等)、营养饮品、运动饮料、矿泉水等非酒精饮料等。
作为这样的食品组合物的优选例子:例如可以列举果冻、茶饮料、酒精饮料、水果糖、糖果、弹珠汽水、曲奇、薄脆饼干、饼干、巧克力、奶酪、黄油、人造黄油、口香糖等。
另外,本发明的食品可以调制为功能性食品、健康食品、特定保健用食品、营养功能食品等保健功能食品、特殊用途食品(例如患者用食品)、健康辅助食品、补品等,优选调制为特定保健用食品、特殊用途食品、健康辅助食品或补品。
作为这样的食品的形状,例如可以列举药片状、丸状、胶囊(包括硬胶囊、软胶囊、微胶囊)状、粉末状、颗粒状、细粒状、含片状、液状(包括糖浆状、乳状、悬浮状)等,优选为药片状、胶囊状。
作为本发明的食品,特别优选为药片状或胶囊状的特定保健用食品、特殊用途食品、健康辅助食品或补品。其中,所谓补品,不仅是指用于补充营养素等的营养辅助食品等,也是指具有有助于保持、恢复、增进健康等的功能(例如体重增加抑制、体脂肪蓄积抑制等抗肥胖作用或痩身作用)等的健康功能食品等。
本发明的食品例如可以通过利用公知的方法向食品中添加在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物而制造。具体而言,例如添加在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体、以及赋形剂(例如乳糖、白糖、甘露糖醇等)、甜味剂、着香剂等原料并混合,利用压片机等施加压力,将其成型为药片状,由此能够制造药片状的食品。根据需要,也可以添加其他的材料(例如,维生素C等维生素类、铁等矿物质类、食物纤维等)。例如将含有在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的液状、悬浮状、糊状、粉末状或颗粒状的食品组合物填充在胶囊中,或者利用胶囊基剂进行包衣成型,从而能够制造胶囊状的食品组合物。
只要不妨碍本发明的效果,除了常用的食品原材料、食品添加物、各种营养素、维生素类、风味物质(例如奶酪和巧克力等)等以外,还可以在本发明的食品中配合生理学上容许的载体等。作为生理学上容许的载体等,可以使用常用的各种有机或无机载体物质,可以列举赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、甜味剂、防腐剂、抗氧化剂、增粘剂、乳化剂等。另外,作为食品添加物,可以列举着色剂、甜味剂、防腐剂、抗氧化剂、着香剂等。另外,可以含有其他的材料、例如铁等矿物质类、果胶、角叉菜胶、甘露聚糖等食物纤维等。
作为赋形剂、结合剂、崩坏剂、润滑剂、溶剂、溶解辅助剂、悬浮化剂、缓冲剂、增粘剂、着色剂、甜味剂、防腐剂、抗氧化剂,可以分别列举与上述的本发明的制剂所使用的化合物相同的化合物。
作为维生素类,可以是水溶性,也可以是脂溶性,例如可以列举视黄醇棕榈酸酯、生育酚、双苯酰硫胺、核黄素、盐酸吡哆辛、氰钴胺、抗坏血酸钠、胆钙化醇、烟酰胺、泛酸钙、叶酸、生物素、酒石酸氢胆碱等。
关于药片状、颗粒状、细粒状的食品组合物等,出于掩蔽味道、提高光稳定性、提高外观或肠溶性等目的,也可以使用包衣基材,利用自身公知的方法进行包衣。作为该包衣基材,可以列举与上述的本发明的制剂所使用的基材相同的基材,可以同样实施。
将在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物添加至健康辅助食品、特定保健用食品等保健功能食品、患者用食品等特殊用途食品中时,对于在其植物体内生产并含有自然界极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的每一次的摄取量,优选包含在以一餐摄取量单位包装或填充的形态的饮料或食品中。其中,“以一餐摄取量单位包装或填充的形态的饮料或食品”是指,一次所应摄取的量的饮料或食品被包装或填充在1个袋、箱、瓶等容器中。
另外,本发明的食品可以单独使用,也可以与其他的具有抗肥胖效果或血中甘油三酯降低作用的医药组合物、食品组合物或饲料组合使用。通过组合使用,能够进一步提高体重增加抑制效果、体脂肪蓄积抑制效果等抗肥胖效果、痩身效果或高甘油三酯血症的预防、改善效果。
本发明的以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂可以在附加关于功能的显示后提供。功能显示的方法没有特別限制,可以例示在食品包装、容器表面、食品说明书、食品广告等中显示。本发明的以阿洛糖醇为有效成分的抗肥胖活性剂所具有的功能的例子可以列举体脂肪蓄积抑制功能。上述食品以体脂肪蓄积抑制功能为理念,根据需要可以包含表现其宗旨的患者用食品、营养功能食品、保健食品或特定保健用食品等功能性食品。其中,这些食品所附的功能显示可以是制品本身、容器、包装、说明书、附加文件或宣传物中的任意种。该食品的形态可以是固体、半固体或液状。
作为食品、医药品、食品用添加物等的用途可以是人或非人动物、或来自这些的被检测体的用途,还可以是治疗的用途,也可以是非治疗的用途。其中,“非治疗”是不包括医疗行为的概念、即不包括对人进行手术、治疗或诊断的方法的概念,更具体是不包括医师或接受医师的指示的人对人实施手术、治疗或诊断的方法的概念。
本发明的食品的摄取量只要在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的抑制体脂肪蓄积的有效量的范围内、或降低总胆固醇值的有效量的范围内即可。本发明的食品中的在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体的含量相对于全部食品,通常为约0.1~20质量%,优选为约0.5~10质量%,更优选为约1~5质量%。该植物体提取物的含量以植物体本身的10%左右为基准。在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的含量过少时,也不会显现效果。
例如出于体重增加抑制目的,成人摄取本发明的食品时,因所摄取的对象、摄取形态、摄食量等而不同,作为在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体的摄取量,通常每日每1kg体重,作为干燥重量,为1~400mg,优选为40~400mg。另外,上述的量可以1次摄取,也可以分多次摄取。其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的给药量过少时,也不会表现效果。另外,从不对嗜好性和摄食量产生影响而表现效果这样的观点考虑,也优选上述的各摄取量。为其他动物时,也可以摄取相同的量。
如此得到的食品是安全的,因此可以对脊椎动物、优选哺乳动物、特别优选人持续给药。
上述医药品(也包括非药品)中的在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的含量通常为制剂全部质量的0.1质量%以上,优选为1.0质量%以上,并且为95质量%以下,优选为80质量%以下,更优选为60质量%以下。
上述的食品中的在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物的含量因其使用形态而不同,通常为0.01质量%以上,并且为50质量%以下,优选为20质量%以下,更优选为10质量%以下。
将本发明的在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物用作医药品或补品时,或者与医药品或补品配合使用时,其给药量可以根据在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体的形态,并且根据对象者的状态、体重、性别、年龄或其他的主要因素进行变动,经口给药时,作为其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的植物体或该植物体提取物,成人每人每日的给药量通常为15mg以上,并且为10g以下,优选为5g以下,更优选为1g以下。
另外,上述制剂可以按照任意的给药计划进行给药,优选1日1次~数次、数周~数个月持续给药。
另外,作为给药或摄取对象,只要是需要或希望其的动物,就没有特别限定,可以列举需要或希望能量消耗促进、体脂肪蓄积抑制、或肥胖预防或改善的人。
以下,对本发明的实施例进行说明。
实施例
[实验方法]
(1)实验动物
1)实验动物和饲养条件
实验动物使用3周龄的Wistar系雄性大鼠(日本SLC株式会社)32只。大鼠饲养使用各自的不锈钢笼,以昼间节律为8:00~20:00、夜间节律为20:00~8:00的12小时的昼夜循环进行饲养。另外,将室温设为约25℃,将湿度设为约55%,进行饲养。进行10日预饲养,预饲养期间自由供给粉末饲料(MF、东方酵母工业株式会社)和水。预饲养结束后,以平均体重和标准偏差均等的方式,按照每组8只,将32只大鼠成分4组,分别为:供给对照餐的对照组(C组)、供给含有重量比5%的阿洛糖醇的食物的阿洛糖醇组(A组)、供给含有重量比5%的赤藓糖醇的食物的赤藓糖醇组(E组)、供给含有重量比5%的D-阿洛酮糖的食物的D-阿洛酮糖组(P组)。将供给各组的实验餐的组成示于下述表2。
Figure BDA0003279620770000231
向各组自由供给实验食和水,进行8周饲养。饲养期间记录每日体重和食物摄取量。关于食物效率,饲养开始日至饲养结束日的体重增加量(g)除以饲养期间中的总食物摄取量(g)而得到。
饲养结束后,不绝食,在上午9:00断头屠宰,进行解剖。采取血液,摘出心脏、肝脏、肾脏、脾脏、腹腔内脂肪组织(副睾丸脂肪、肾周围脂肪、肠间膜脂肪)并称量。以-80℃保存所采取的肝脏,对于血液,使用台式离心分离机(台式离心机5220、久保田商事株式会社),以3000rpm(1509×g)进行15分钟离心分离,将所得到的血清以-20℃保存至分析。
(2)血清成分分析
将以-20℃保存的血清在冰中融化约1小时后,进行下述的血清成分分析。
(i)血清葡萄糖浓度
使用葡萄糖CII-Test Wako(和光纯药工业株式会社),测定血清葡萄糖浓度。具体而言,向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各2μL。将试剂盒中的显色试剂300μL添加到各孔中,以37℃加温5分钟。加温后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA maxACK、Molecular Devices Japan株式会社),以505nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清葡萄糖浓度。
(ii)血清胰岛素浓度:ELISA法
使用LBIS胰岛素-大鼠T(株式会社Shibayagi),测定血清胰岛素浓度。具体而言,利用离子交换水将浓缩清洗液稀释10倍而作为清洗液,使用所调制的清洗液,充满试剂盒的抗体固相化板的各孔,清洗4次后,在厨房用纸上轻轻敲击,从而除去孔中所残留的液体。之后,向各孔中分别注入利用缓冲液稀释4000倍的试剂盒内的生物素结合抗胰岛素抗体100μL并搅拌。向孔中分别注入血清样品和标准胰岛素溶液10μL,搅拌后,利用封板膜密闭后,室温下静置2小时。静置后,舍弃反应液,将清洗液充满各孔,清洗4次。在厨房用纸上轻轻敲击,从而除去孔中所残留的液体。向各孔中分别注入利用缓冲液稀释2000倍的过氧化酶-己二酸结合物100μL并搅拌后,室温下静置30分钟。静置后,舍弃反应液,将清洗液充满各孔,清洗4次。之后,在厨房用纸上轻轻敲击,从而除去孔中所残留的液体。向各孔中分别注入显色液100μL,室温下静置30分钟。分别注入反应停止液100μL,停止显色反应。使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),测定450nm波长的吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清胰岛素浓度。
(iii)血清总胆固醇浓度
使用胆固醇E-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各2μL。将试剂盒中的显色试剂300μL添加中各孔中,以37℃加温5分钟。加温后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以600nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清总胆固醇浓度。
(iv)血清HDL-胆固醇浓度:磷钨酸镁盐沉淀法
使用HDL-胆固醇E-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向0.5mL管中装入血清20μL。然后,加入沉淀试剂20μL并搅拌。室温下静置10分钟后,使用微量高速冷却离心机(MX-300、株式会社Tomy精工),以3000rpm(1640×g)进行15分钟离心分离。采取分离得到的上清液,将其作为血清HDL-胆固醇浓度测定用样品。向96孔板中分别注入空白、标准液、样品(n=2)各5μL。将显色试剂300μL添加至各孔中,以37℃加温5分钟。加温后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以600nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清HDL-胆固醇浓度。
(v)血清非HDL-胆固醇浓度
算出血清总胆固醇浓度减去血清HDL-胆固醇浓度而得到的值作为血清非HDL-胆固醇浓度。
(vi)血清游离脂肪酸浓度:ACS-ACOD法
使用NEFA C-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各5μL。将试剂盒中的显色试剂A 100μL添加至各孔中,以37℃加温10分钟。加温后,将显色试剂B200μL添加至各孔中,以37℃反应10分钟。反应后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以550nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清游离脂肪酸浓度。
(vii)血清中性脂肪浓度
使用甘油三酯E-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各2μL。将显色试剂300μL添加至各孔中,以37℃加温5分钟。加温后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以600nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清中性脂肪浓度。
(viii)血清磷脂浓度:胆碱氧化酶-DAOS法
使用磷脂C-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各2μL。将显色试剂300μL添加至各孔中,以37℃加温5分钟。加温后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以600nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清磷脂浓度。
(ix)血清TNF-α浓度:EIA法
血清TNF-α浓度测定使用市售的试剂盒(Rat TNF-αAssay Kit-IBL、株式会社免疫生物研究所)。向抗体固相化板分别注入被检测体和各浓度的标准液。封板后,以4℃反应一夜。反应后,使用利用离子交换水稀释40倍的清洗液、和厨房用纸,将抗体固相化板清洗4次。接着,将利用缓冲液稀释30倍的标记抗体溶液各100μL分别注入各孔中后,封板,以4℃反应30分钟。反应结束后,使用清洗液和厨房用纸,将抗体固相化板清洗5次。之后,将显色液(TMB)各100μL分别注入各孔中,遮光下以常温反应30分钟。反应后,将反应停止液(1N的H2SO4)各100μL分别注入各孔中,搅拌后,将试剂盲检作为对照,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以450nm吸光波长测定被检测体和标准液的吸光度。利用标准曲线,测定血清TNF-α浓度。
(x)血清瘦素浓度:EIA法
血清瘦素浓度测定使用市售的试剂盒(小鼠/大鼠瘦素测定试剂盒、株式会社森永生科学研究所)。对于抗体固相化板,使用利用离子交换水稀释20倍的清洗液、和厨房用纸,将抗体固相化板清洗2次。向各孔中分别注入被检测体稀释液45μL后,分别注入豚鼠抗瘦素抗血清50μL。分别注入标准曲线用瘦素溶液和利用被检测体稀释液稀释4倍的被检测体各5μL后,封板,以4℃反应一夜。反应后,使用清洗液和厨房用纸,将抗体固相化板清洗5次。接着,分别注入酶标记抗豚鼠IgG抗体原液和混合了酶标记抗体稀释液的酶标记抗豚鼠IgG抗体溶液各100μL。分注后,封板,以4℃反应3小时。反应结束后,使用清洗液和厨房用纸,将抗体固相化板清洗7次。之后,将显色液(TMB)100μL分别注入各孔中,遮光下以常温反应30分钟。反应后,将反应停止液(1N的H2SO4)各100μL分别注入各孔中,搅拌后,将试剂盲检作为对照,使用酶标仪吸光测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以450nm吸光波长测定被检测体和标准液的吸光度。利用标准曲线,测定血清瘦素浓度。
(xi)血清总蛋白质浓度
使用A/GB-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各5μL。将总蛋白显色试剂250μL添加至各孔中,室温下反应30分钟。反应结束后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),以540nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清总蛋白质浓度。
(xii)血清白蛋白浓度
使用A/GB-Test Wako(和光纯药工业株式会社)。向96孔板中分别注入空白、标准液、血清样品(n=2)各1μL。将试剂盒中的白蛋白显色试剂250μL添加至各孔中,室温下反应10分钟。反应结束后,使用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular DevicesJapan株式会社),以630nm的波长测定吸光度。利用所得到的标准曲线求出血清白蛋白浓度。
(xiii)血清A/G比
算出血清白蛋白浓度除以血清球蛋白(总蛋白质-白蛋白)浓度得到的值作为A/G。
(3)肝脏成分分析
(i)肝脏糖原含量:Lo法(参照非专利文献9)
采取肝脏约0.05g至带盖的试管中并称量。加入30%KOH 1.0mL后盖上盖,使用加热块,以100℃加热10分钟后,搅拌,再次以100℃加热10分钟。之后,在冰中冷却5分钟,注入95%乙醇1.2mL,再次在冰中冷却5分钟,使糖原沉淀。使用台式离心分离机(台式离心机5220、久保田商事株式会社),以2500rpm(1139×g)进行15分钟离心分离,利用吸气器除去上清液。然后,加入离子交换水4mL,搅拌而形成样品溶液。分取标准液(由葡萄糖CII-TestWako·200mg/dL葡萄糖溶液调制)和样品溶液100μL至2.0mL管中。添加5%苯酚溶液100μL,再注入97%浓硫酸500μL并搅拌,室温下静置30分钟。静置后,向96孔板中注入300μL,利用酶标仪吸光度测定装置(VERSA max ACK、Molecular Devices Japan株式会社),测定490nm波长的吸光度。利用所得到的标准曲线求出溶液的葡萄糖浓度,算出肝脏糖原含量。
(ii)肝脏脂质提取:Folch法(参照非专利文献10)
称量肝脏约0.05g至2.0mL管中,注入甲醇0.5mL。然后,使用均质机(POLYTRON PT1200E、KINEMATICA AG),在冰上粉碎10秒。将其进行3次。之后,添加氯仿1.0mL,搅拌后,在冰箱中放置一晩。利用微量高速冷却离心机(MX-300、株式会社Tomy精工),对放置后的样品以3000rpm(1640×g)进行5分钟离心分离。接着,将利用离心分离得到的上清液800μL移至注入了生理食盐水200μL的1.5mL管中,并搅拌。接着,使用微量高速冷却离心机(MX-300、株式会社Tomy精工),以3000rpm(1640×g)进行5分钟离心分离。离心分离后,利用吸气器吸引除去上清液,将下层作为肝脏脂质提取液。
(iii)肝脏总脂肪含量
向测定重量后的0.5mL管中装入脂质提取液200μL。以打开管盖的状态在干燥器内进行2小时的减压干固。测定减压干固后的重量,将减去管的重量而算出的值作为肝脏总脂肪量。向总脂肪测定后的样品中添加脂质溶解液(1-丁醇:甲醇:Triton X-100=2:1:1(v/v)混合而成的溶液)200μL,将搅拌后的溶液作为肝脏脂质样品。
(iv)肝脏中性脂肪含量:GPO-DAOS法
与血清中性脂肪浓度同样,求出肝脏脂质样品的中性脂肪浓度,算出中性脂肪含量。
(v)肝脏胆固醇含量:胆固醇氧化酶-DAOS法
与血清总胆固醇浓度同样,求出肝脏脂质样品的总胆固醇浓度,算出胆固醇含量。
(4)屠体组成分析
(i)屠体脂肪量:索格利特法
将冷冻保存后的屠体在通风橱内自然解冻一晩。将解冻后的屠体放入一次性杯子中,从其上面用乙烯基袋覆盖后,再用铝箔包起来。利用高压釜,以120℃对其进行90分钟水蒸气加压后,散热3小时。测定水蒸气加压后的屠体的重量,利用食品加工机使其均质化。采取进行均质化后的试样,利用镊子去骨后作为屠体样品。称量屠体样品约2g在滤纸上,将其包起作为索格利特样品。利用干燥机,以105℃对索格利特样品进行6小时的干燥,在干燥器内放冷1小时。测定放冷后的重量,使用索格利特提取器,利用石油醚进行16小时的脂肪提取。从提取器中取出样品,使石油醚蒸发后,使用干燥机,以105℃干燥1小时,在干燥器内放冷1小时。测定放冷后的样品的重量,将根据提取前后的干燥重量差算出的值作为样品的粗脂肪量。算出高压釜后的屠体单位重量的粗脂肪量作为屠体脂肪量。
(ii)总体脂肪量
总脂肪量利用现有研究(参照非专利文献11)所使用的以下的式子算出。
总体脂肪量(g)=屠体脂肪量(g)+总腹腔内脂肪组织量(g)×0.85
(5)统计方法
利用平均值±标准误差表示数据。关于统计分析,利用Tukey法考查各组间的显著性差异,将p<0.05判定为有显著性差异(参照非专利文献12)。
[实验结果]
(1)将体重、食物摄取量和食物效率示于表3。
将平均体重变化示于图2,将平均食物摄取量的经日性变动示于图3中。关于最终体重、体重增加量、每日的食物摄取量和食物效率,在各组间没有看到差异。
[表3]
体重、食物摄取量和食物效率
初始体重(g) 最终体重(g) 体重增加量(g) 食物摄取量(g/日) 食物效率(g/g)
C 97.0±1.6 270.0±9.3 173.0±8.7 15.0±0.5 0.20±0.01
A 96.9±2.1 265.9±6.8 169.0±6.8 14.5±0.2 0.20±0.01
E 97.3±2.0 279.8±3.8 182.5±3.6 15.7±0.3 0.20±0.00
P 96.9±3.1 261.4±11.4 164.5±9.7 15.4±0.6 0.19±0.01
平均值±标准误差(n=8)
(2)将组织重量示于表4。
关于肝脏绝对重量,在各组间没有看到差异,但关于单位体重的相对重量,与其他的3组相比,D-阿洛酮糖组显著显示高值。关于肾脏重量绝对重量,与阿洛糖醇组相比,D-阿洛酮糖组显著显示高值,但关于单位体重的相对重量,与其他的3组相比,D-阿洛酮糖组显著显示高值。关于总腹腔内脂肪重量(副睾丸脂肪重量、肾周围脂肪重量、肠间膜脂肪重量)绝对重量、相对重量,与对照组相比,阿洛糖醇组都显著显示低值。另外,关于副睾丸脂肪和肾周围脂肪重量,绝对重量、相对重量,与对照组相比,阿洛糖醇组都显著显示低值。关于其他的组织重量,在各组间没有看到差异。
Figure BDA0003279620770000311
(3)将血清成分示于表5中。
关于血清葡萄糖浓度,与对照组相比,赤藓糖醇组和D-阿洛酮糖组显著显示低值。关于血清胰岛素浓度,与赤藓糖醇组相比,对照组和阿洛糖醇组显著显示低值。关于血清HDL-胆固醇浓度,与阿洛糖醇组相比,赤藓糖醇组和D-阿洛酮糖组显著显示高值。关于血清游离脂肪酸浓度,与D-阿洛酮糖组相比,对照组和阿洛糖醇组显著显示高值。关于血清磷脂浓度,与对照组相比,阿洛糖醇组显著显示低值。关于血清白蛋白浓度,与对照组和阿洛糖醇组相比,D-阿洛酮糖组显著显示高值。关于其他的血清成分浓度,在各组间没有看到差异。
Figure BDA0003279620770000331
(4)将肝脏成分示于表6。
关于糖原含量,与对照组和阿洛糖醇组相比,赤藓糖醇组显著显示低值,与D-阿洛酮糖组相比,阿洛糖醇组显著显示低值。关于胆固醇含量,与对照组和阿洛糖醇组相比,D-阿洛酮糖组显著显示高值。关于中性脂肪含量,在各组间没有看到显著性差异。
[表6]
肝脏脂肪和糖原含量
总脂肪(mg/g) 中性脂肪(mg/g) 胆固醇(mg/g) 糖原(mg/g)
C 107.4±2.4ab 88.0±3.7 19.7±0.7b 5.5±1.5a
A 100.5±3.2a 85.3±2.5 19.1±0.7b 6.4±1.2a
E 112.7±1.4b 89.4±5.0 22.0±0.9ab 1.2±0.4b
P 114.5±3.4b 94.4±12.0 29.4±3.9a 0.7±0.2b
平均值±标准误差(n=8)。
标有不同的上标拉丁文字的数值表示在组间p<0.05,有显著性差异。
(5)将屠体脂肪和总体脂肪示于表7。
关于总体脂肪量和总体脂肪率,与对照组相比,阿洛糖醇组显著显示低值。关于屠体脂肪量和屠体脂肪率,在各组间没有看到差异。
[表7]
屠体脂肪和总体脂肪
屠体脂肪量(g) 屠体脂肪率(%) 总体脂肪量(g) 总体脂肪率(%)
C 17.8±0.9 13.7±1.0 29.9±1.3a 11.1±0.5a
A 14.2±1.1 11.1±0.8 23.4±1.8b 8.7±0.6b
E 16.2±0.7 11.9±0.5 27.2±1.2ab 9.7±0.4ab
P 15.8±0.9 12.7±0.8 26.1±1.6ab 10.1±0.5ab
平均值±标准误差(n=8)。
标有不同的上标拉丁文字的数值表示在组间p<0.05,有显著性差异。
[考察]
在本研究中,关于大鼠的总体脂肪量和总体脂肪率、总腹腔内脂肪重量(副睾丸脂肪重量、肾周围脂肪重量、肠间膜脂肪重量),与对照组相比,阿洛糖醇组显著显示低值。因此,提示了阿洛糖醇具有抗肥胖作用。在现有研究中,山田等报告了,在将添加有D-阿洛酮糖1.3~5.2%的食物供给大鼠并饲养5周后,D-阿洛酮糖的食物添加量为2.6%以上时,看到了腹腔内脂肪组织重量下降(参照非专利文献13)。另外,北侧报告了,尽管D-阿洛酮糖的食物添加量稍微低于0.4%,也确认了抗肥胖作用,这是由于同时添加的阿洛糖醇(含有0.6%)的效果、或D-阿洛酮糖与阿洛糖醇的协同效果,具有能够发挥抗肥胖作用的可能性(专利文献2)。这些支持了本研究所发现的阿洛糖醇的抗肥胖作用。
另一方面,关于屠体脂肪量,虽然没有看到显著性差异,但与对照组相比,D-阿洛酮糖组显示低值。根据大量研究,D-阿洛酮糖的抗肥胖作用已经明确(参照非专利文献14~17),但根据本研究的结果,提示了阿洛糖醇的抗肥胖作用可能比D-阿洛酮糖大。
在D-阿洛酮糖组中,确认了肝脏和肾脏肥大,这在大量现有研究中也同样被确认了(参照非专利文献15~17),与该结果一致。Bar等报告了,通过添加D-塔格糖为5~20%的食物,能够增加肝脏糖原沉积,在未绝食大鼠中,能够增加相对肝重量(参照非专利文献18);关于大鼠的肝肥大的机理,Yagi等得出了D-阿洛酮糖和D-塔格糖作用不明的结论(参照非专利文献15)。在本研究中,D-阿洛酮糖组没有看到肝脏糖原的沉积,因此D-阿洛酮糖的肝脏肥大的机理可能与D-塔格糖不同。
关于血清葡萄糖浓度和血清胰岛素浓度,在对照组与阿洛糖醇组之间没有看到显著性差异。关于血清葡萄糖浓度,与对照组相比,赤藓糖醇组和D-阿洛酮糖组显著显示低值,能够再次确认已报告的赤藓糖醇和D-阿洛酮糖的血糖值上升抑制作用(参照非专利文献16、19、20)。关于血清胰岛素浓度,与对照组相比,赤藓糖醇组显示高值。赤藓糖醇不使血糖值上升,因此不刺激胰岛素分泌(参照非专利文献19),认为该结果受摄食时机左右。与对照组之间没有看到显著性差异,但与对照组相比,阿洛糖醇组看到了血清葡萄糖浓度变低的倾向,因此阿洛糖醇也能够期待血糖值上升抑制作用,但其作用机理不明。尽管如此,还是认为阿洛糖醇与D-阿洛酮糖相比,血糖值上升抑制作用不大。
关于血清胆固醇浓度,关于HDL-胆固醇浓度,与赤藓糖醇组和D-阿洛酮糖组相比,阿洛糖醇组显示低值。另外,关于血清HDL-胆固醇浓度和肝脏胆固醇含量,在各组间看到了相同的倾向。然而,在关于D-阿洛酮糖的现有研究(非专利文献15)中,关于总胆固醇、HDL-胆固醇,供给重量比3%的蔗糖餐的组和供给重量比3%的D-阿洛酮糖餐的组都没有看到差异。另外,已经明确赤藓糖醇不会影响胆固醇值(参照非专利文献19),从而不能断言阿洛糖醇具有使HDL-胆固醇值上升的效果。
另一方面,关于血清游离脂肪酸浓度、血清磷脂浓度和血清白蛋白浓度,在组间看到了差异,但关于它们的原因,还不太明确。
关于肝脏糖原含量,与对照组和阿洛糖醇组相比,赤藓糖醇组显著显示低值,D-阿洛酮糖组是更低的结果。这与Matsuo等的现有研究(参照非专利文献20)矛盾,但本研究的D-阿洛酮糖组的结果也不是异常值,因此考虑是摄食的时机所导致的。
关于肝脏总脂肪含量,与赤藓糖醇组和D-阿洛酮糖组相比,阿洛糖醇组显著显示低值。已知肝脏或脂肪组织中的脂质生成越多,越促进高脂血症或脂肪蓄积。教导了D-阿洛酮糖的腹腔内脂肪蓄积抑制作用起因于肝脏的脂肪合成酶活性抑制(参照非专利文献16),关于阿洛糖醇,也认为具有同样的作用。
在饲养初期,在阿洛糖醇组中看到了腹泻,但之后就看不到了。阿洛糖醇为难消化性的糖醇,在摄取期间,利用其的肠内微生物增加了,因此推断腹泻会在几日之内消失(参照非专利文献21)。本研究所使用的阿洛糖醇餐中含有重量比5%的阿洛糖醇。用于腹泻的发生,可能该添加量不合适。
根据以上说明,本发明中能够明确对于大鼠的稀少糖阿洛糖醇的抗肥胖作用。还显示阿洛糖醇的抗肥胖作用可能比D-阿洛酮糖大。
[产业上的可利用性]
利用本发明,能够将在其植物体内生产并含有自然界中极少量产生的稀少糖的阿洛糖醇的植物体本身制成经口剂而简便地摄取,并能够期待基于阿洛糖醇的抗肥胖活性的效果,因此本发明的产业上的有用性高。

Claims (14)

1.一种抗肥胖活性剂,其特征在于:
将阿洛糖醇作为有效成分。
2.如权利要求1所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
其是将阿洛糖醇添加在食品、肥料、农药、化妆品或医药品中而成的。
3.如权利要求1或2所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
所述阿洛糖醇是从植物体中提取的。
4.如权利要求1或2所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
所述阿洛糖醇是包含在植物体中的形态。
5.如权利要求3或4所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
所述植物体为鼠刺或华东山柳。
6.如权利要求1~5中任一项所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
所述阿洛糖醇为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物。
7.如权利要求6所述的抗肥胖活性剂,其特征在于:
在所述阿洛糖醇混合物中,调节了阿洛糖醇和/或D-阿洛酮糖的含量。
8.一种肥胖抑制方法,其特征在于:
将阿洛糖醇用于肥胖的抑制。
9.如权利要求8所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
将所述阿洛糖醇添加在食品、肥料、农药、化妆品或医药品而使用。
10.如权利要求8或9所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
所述阿洛糖醇是从植物体中提取的。
11.如权利要求8或9所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
所述阿洛糖醇是包含在植物体中的形态。
12.如权利要求10或11所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
所述植物体为鼠刺或华东山柳。
13.如权利要求8~12中任一项所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
所述阿洛糖醇为含有D-阿洛酮糖和阿洛糖醇的阿洛糖醇混合物。
14.如权利要求13所述的肥胖抑制方法,其特征在于:
在所述阿洛糖醇混合物中,调节阿洛糖醇和/或D-阿洛酮糖的含量。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023165354A1 (zh) * 2022-03-01 2023-09-07 南京中医药大学 D-阿拉伯糖醇在降脂保肝中的应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023136329A1 (ja) 2022-01-14 2023-07-20 国立大学法人 香川大学 細胞増殖遅延剤、それを含む化粧品、及び細胞増殖を遅延させる方法
EP4446421A1 (de) 2023-04-11 2024-10-16 Annikki GmbH Verfahren zur herstellung von allitol

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1471919A (zh) * 2002-07-30 2004-02-04 云南省微生物研究所 阿洛糖醇在制备糖尿病药物中的应用
CN1700924A (zh) * 2003-11-18 2005-11-23 独立行政法人产业技术综合研究所 降血压剂及其制备方法
US20100166678A1 (en) * 2006-11-10 2010-07-01 Matsutani Chemical Industry Co., Ltd. Noncarious material and anticarious agent containing rare sugar
CN105878074A (zh) * 2014-09-26 2016-08-24 王萍 一种防冻植物护手霜
JP2016154463A (ja) * 2015-02-23 2016-09-01 株式会社希少糖生産技術研究所 希少糖を含む植物粉体
CN106255502A (zh) * 2014-02-05 2016-12-21 学校法人自治医科大学 饱腹感持续剂以及使饱腹感持续的方法
MX2018008394A (es) * 2018-07-06 2019-03-13 Instituto Nac De Investigaciones Forestales Agricolas Y Pecuarias Composicion a base de basidiomas de pleurotus djamor para el control de haemonchus contortus y su proceso de obtencion.

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06253451A (ja) 1993-03-03 1994-09-09 Hitachi Ltd 直流電力供給装置
TW572878B (en) 2001-05-11 2004-01-21 Fushimi Pharmaceutical Co Ltd Method for production of sugar alcohol
JP6437721B2 (ja) 2013-05-17 2018-12-12 国立大学法人 香川大学 休眠打破ズイナ種およびズイナの栽培法
JP6573493B2 (ja) * 2015-07-06 2019-09-11 株式会社希少糖生産技術研究所 ズイナせんべい
JP2019027338A (ja) 2017-07-28 2019-02-21 パナソニック株式会社 ランキンサイクル装置

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1471919A (zh) * 2002-07-30 2004-02-04 云南省微生物研究所 阿洛糖醇在制备糖尿病药物中的应用
CN1700924A (zh) * 2003-11-18 2005-11-23 独立行政法人产业技术综合研究所 降血压剂及其制备方法
US20100166678A1 (en) * 2006-11-10 2010-07-01 Matsutani Chemical Industry Co., Ltd. Noncarious material and anticarious agent containing rare sugar
CN106255502A (zh) * 2014-02-05 2016-12-21 学校法人自治医科大学 饱腹感持续剂以及使饱腹感持续的方法
CN105878074A (zh) * 2014-09-26 2016-08-24 王萍 一种防冻植物护手霜
JP2016154463A (ja) * 2015-02-23 2016-09-01 株式会社希少糖生産技術研究所 希少糖を含む植物粉体
MX2018008394A (es) * 2018-07-06 2019-03-13 Instituto Nac De Investigaciones Forestales Agricolas Y Pecuarias Composicion a base de basidiomas de pleurotus djamor para el control de haemonchus contortus y su proceso de obtencion.

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HINAWI ABDO MUSTAFA HASSANIN(阿杜): "新型核糖醇脱氢酶的克隆表达、性质及其合成阿洛糖醇的应用研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)基础科学辑》 *
YAN ZENG,等: "Rare sugars and antioxidants in Itea virginica, Itea oblonga Hand.-Mazz., and Itea yunnanensis Franch leaves", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD PROPERTIES》 *
张龙涛,等: "新型甜味剂D-阿洛酮糖研究进展", 《食品与发酵工业》 *
沈雪梅,等: "D-阿洛酮糖的功能及其生物合成研究进展", 《生物工程学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023165354A1 (zh) * 2022-03-01 2023-09-07 南京中医药大学 D-阿拉伯糖醇在降脂保肝中的应用

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