CN113614061A - 肽化合物的制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供含有N‑烷基氨基酸的肽的制造方法,其包括下述工序(1)至(3)。工序(1)：将N末端保护氨基酸或N末端保护肽与羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯混合的工序；工序(2)：将N末端及C末端未保护的氨基酸或肽与三烷基甲硅烷基化剂混合的工序；及将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合的工序。

Description

肽化合物的制造方法
技术领域
本发明涉及具有N-烷基氨基酸的肽的制造方法。
背景技术
近年来，作为替代蛋白质制剂的下一代药剂，对分子量较低(1,000-3,000)且含有非天然型氨基酸的特殊肽的期待日渐高涨。作为特殊肽的例子，可举出含有通常的氨基酸以外的N-烷基氨基酸的肽。含有N-烷基氨基酸的肽与通常的肽相比，具有下述这样的特征：结构的自由度低，能够与靶标牢固地结合；具有膜透过性；免疫原性低；在生物体内稳定。因此，强烈期望开发出含有N-烷基氨基酸的肽的高效制造方法(例如，参见非专利文献1)。
就含有N-烷基氨基酸的肽的制造方法而言，例如已知以下的方法。
(1)产物的C末端被保护的肽
-利用新戊酰氯将N末端保护氨基酸的C末端活化，并与N-甲基氨基酸的苄基酯反应的方法(例如，参见专利文献1)。
(2)产物的C末端未保护的肽
-利用氯甲酸异丁酯将N末端保护氨基酸的C末端活化，并与经甲硅烷基化的N-甲基甘氨酸(肌氨酸)、脯氨酸反应的方法(例如，参见非专利文献2)。
-利用1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸酯(HATU)将N末端保护肽的C末端活化，并与N-甲基丙氨酸反应的方法(例如，参见专利文献2)。
另外，作为N-甲基氨基酸连续而成的肽的制造方法，已知下述方法：利用新戊酰氯将N-Boc-N-甲基亮氨酸的C末端活化，并与N-甲基苯基丙氨酸甲酯反应(例如，参见非专利文献3)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：美国专利第5739104号
专利文献2：国际公开公报第2009/134405号
非专利文献
非专利文献1：Pharmacia 2014年，50卷，751-755页
非专利文献2：Indian Journal of Chemistry 2004年，43B卷，1282页
非专利文献3：Tetrahedron 2012年，68卷，7070页
发明内容
发明要解决的课题
本申请的发明人确认了，在使用非专利文献2所记载的方法将在N末端具有烷基的氨基酸导入至N末端被保护的氨基酸的C末端时，根据导入的氨基酸类型的不同，反应并不一定以充分的转化率进行，特别是对于N-甲基甘氨酸这样的非环状的N-烷基氨基酸、肽而言，原料大量残留，无法以令人满意的收率得到目标物。原料的残留成为缺失了几个氨基酸的肽生成的原因，由于与目标肽的物性相近而难以除去，从而在品质上存在问题。另外，专利文献2所记载的方法使用包含具有爆炸性的三唑结构的HATU作为缩合剂，未必能够适用于肽的工业制造。
另一方面，专利文献1、非专利文献3所记载的方法中，生成的肽的C末端被保护，为了得到C末端未保护的肽，还需要进行脱保护工序。因此，除了缩合工序外，还必然发生脱保护工序，因此无法适用作肽的高效制造方法。
本发明提供含有N-烷基氨基酸且C末端未保护的肽的制造方法。另外，本发明提供下述制造肽的方法，其中，使用含有N-烷基且N末端及C末端未保护的氨基酸或肽、和N末端保护氨基酸或肽作为材料。
用于解决课题的手段
本申请的发明人进行了深入研究，结果发现，通过将含有N-烷基且N末端及C末端未保护的未保护氨基酸或肽与甲硅烷基化剂混合，进而将N末端保护氨基酸或肽与具有特定结构的羧酸活化剂混合，能够解决上述课题，从而完成了本发明。即，本发明的特征如下。
[1]肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(I)表示的N末端保护氨基酸或N末端保护肽、与选自由式(II)表示的羧酸卤化物及式(III)表示的卤代甲酸烷基酯组成的组中的活化剂混合，
式(I)：P-A1-OH
(式中，P为N末端保护基，A1表示来自氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)或来自肽的基团)
式(II)：
[化学式1]
Figure BDA0003256684440000031
(式中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上))
[化学式2]
Figure BDA0003256684440000032
(式中，X表示卤素原子，R2表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲脂肪族烃基)；
工序(2)，将式(IV)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂混合，式(IV)：H-A2-OH
(式中，A2表示来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)、或者来自肽的基团，所述肽中，N末端残基为N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
[2]肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(I)表示的N末端保护氨基酸、与选自由式(II)表示的羧酸卤化物及式(III)表示的卤代甲酸烷基酯组成的组中的活化剂混合，
式(I)：P-A1-OH
(式中，P为N末端保护基，A1表示来自氨基酸的基团或来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基))，
式(II)：
[化学式3]
Figure BDA0003256684440000041
(式中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上))
式(III)：
[化学式4]
Figure BDA0003256684440000042
(式中，X表示卤素原子，R2表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲脂肪族烃基)；
工序(2)，将式(IV)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂混合，式(IV)：H-A2-OH
(式中，A2表示来自N-甲基氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团、或者来自肽的基团，所述肽中，N末端残基为N-甲基氨基酸、N-C1-6烷基甘氨酸(C1-6烷基可具有取代基)、或4-6元的环状的仲氨基酸)；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
[3]肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(V)表示的N末端保护肽与式(II)表示的羧酸卤化物混合，
式(V)：P-A3-OH
(式中，P为N末端保护基，A3表示来自肽的基团)
式(II)：
[化学式5]
Figure BDA0003256684440000051
(式中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)；
工序(2)，将式(IV’)表示的氨基酸与甲硅烷基化剂混合，
式(IV’)：H-A2’-OH
(式中，A2’表示来自N-甲基氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团)；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
[4]如上述[1]至[3]中任一项所述的肽的制造方法，其包括将工序(3)中得到的肽的N末端保护基除去的工序。
[5]如上述[1]至[3]中任一项所述的肽的制造方法，其还包括重复一次以上的下述工序(4)及(5)，
工序(4)，将工序(3)或(5)中得到的肽的N末端的保护基除去；
工序(5)，使N末端保护氨基酸或N末端保护肽与工序(4)中得到的肽的N末端反应。
[6]如上述[1]或[3]所述的肽的制造方法，其中，位于式(I)P-A1-OH或式(V)P-A3-OH表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为除N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)以外的氨基酸，
(式(I)及式(V)中，P为N末端保护基，A1及A3各自表示来自肽的基团)。
[7]如上述[1]或[2]所述的肽的制造方法，其中，A1为来自氨基酸的基团。
[8]如上述[1]或[2]所述的肽的制造方法，其中，式(I)表示的N末端保护氨基酸或位于式(I)表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为α-氨基酸、β-氨基酸或γ-氨基酸。
[9]如上述[8]所述的肽的制造方法，其中，式(I)表示的N末端保护氨基酸或位于式(I)表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为α-氨基酸。
[10]如上述[1]所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或位于式(IV)表示的肽中的N末端的氨基酸为N-C1-6烷基-α-氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲-α-氨基酸。
[11]如上述[1]所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或位于式(IV)表示的肽中的N末端的氨基酸为N-甲基-α-氨基酸或N-乙基-α-氨基酸(N-甲基、N-乙基各自可具有取代基)或4-6元的环状的仲-α-氨基酸。
[12]如上述[1]至[11]中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，R1的碳原子数为5至20，X为氯原子。
[13]如上述[1]至[12]中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，选自下述的化合物组。
[化学式6]
Figure BDA0003256684440000071
[14]如上述[1]至[12]中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，选自下述的化合物组。
[化学式7]
Figure BDA0003256684440000072
[15]如上述[13]或[14]所述的肽的制造方法，其中，活化剂为下述的化合物。
[化学式8]
Figure BDA0003256684440000073
[16]如上述[1]或[2]所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，X为氯原子。
[17]如上述[1]或[2]所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，选自下述的化合物组。
[化学式9]
Figure BDA0003256684440000074
[18]如上述[1]或[2]所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，选自下述的化合物组。
[化学式10]
Figure BDA0003256684440000081
[19]如上述[1]至[18]中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为三甲基甲硅烷基化剂。
[20]如上述[1]至[19]中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、N,N’-双(三甲基甲硅烷基)脲或N,O-双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺。
[21]如上述[1]至[20]中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺。
[22]如上述[1]所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或肽分别是脯氨酸以外的氨基酸或者N末端残基为脯氨酸以外的氨基酸残基的肽。
[23]如上述[3]所述的肽的制造方法，其中，式(IV’)表示的氨基酸为脯氨酸以外的氨基酸。
[24]化合物，其由下式表示：
[化学式11]
Figure BDA0003256684440000082
发明的效果
通过本发明，能够提供C末端未保护的肽的新型制造方法，其使用含有N-烷基且N末端及C末端未保护的氨基酸或肽、和N末端保护氨基酸或肽作为材料。根据本发明的制造方法，无论导入的N-烷基氨基酸、以及导入的肽的N末端残基的N-烷基氨基酸的类型如何，均能够使用工业上可应用的试剂、经少的工序以令人满意的收率得到目标肽。
具体实施方式
以下，详细地对本发明进行说明。
本说明书中的“n-”表示正，“s-”表示仲，“t-”及“tert-”表示叔，“Me”表示甲基，“Et”表示乙基，“Pr”表示丙基，“Bu”表示丁基，“Ph”表示苯基，“Bn”表示苄基，“Boc”表示叔丁氧基羰基、“Cbz”表示苄氧基羰基，“Fmoc”表示9-芴基甲氧基羰基、“Trt”表示三苯甲基，“TMS”表示三甲基甲硅烷基，“TFA”表示三氟乙酸。
“卤素原子”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
本发明中，“烷基”是指直链或支链状的、饱和脂肪族烃的一价基团。“C1-6烷基”是指碳原子数为1至6个的直链或支链状的烷基，作为具体例，可举出甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、3-戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、正己基、3,3-二甲基丁烷-2-基等。
“仲或叔C5-40烷基”是指从碳原子数为5至40个且含有至少一个仲或叔碳原子的饱和脂肪族烃中除去该仲或叔碳原子上的氢而得到的一价基团，作为具体例，可举出2-甲基丁烷-2-基、3-甲基丁烷-2-基、3,3-二甲基丁烷-2-基、3-戊基、2,2,4-三甲基戊烷-3-基、2,4-二甲基戊烷-3-基、4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基、3-庚基、2,2,4,8,10,10-六甲基十一烷-5-基等。另外，“仲或叔C5-20烷基”是指碳原子数为5至20个的仲或叔烷基。
“伯C4-40烷基”是指从碳原子数为4至40个的直链或支链状的饱和脂肪族烃中除去伯碳原子上的氢而得到的一价基团，可举出正丁基、异丁基、正戊基、2-甲基丁基或3-甲基丁基、或者正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正二十烷基、正三十烷基、正四十烷基或作为它们的异构体的伯烷基等。另外，“伯C4-20烷基”是指碳原子数为4至20个的伯烷基。
本发明中，“链烯基”是指直链或支链状的、含有至少一个碳-碳双键的不饱和脂肪族烃的一价基团。“仲或叔链烯基”是指从包含至少一个仲或叔碳原子、和至少一个碳-碳双键的不饱和脂肪族烃中除去该仲或叔碳原子上的氢而得到的一价基团，作为具体例，可举出异丙烯基、1-甲基-1-丙烯基等。另外，“仲或叔C5-40链烯基”是指碳原子数为5至40个的仲或叔链烯基，“仲或叔C5-20链烯基”是指碳原子数为5至20个的仲或叔链烯基。
“伯C4-40链烯基”是指从碳原子数为4至40个的直链或支链状的、含有至少一个碳-碳双键的不饱和脂肪族烃中除去该伯碳原子上的氢而得到的一价基团，可举出2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基等。另外，“伯C4-20链烯基”是指碳原子数为4至20个的伯链烯基。
“C6-14芳基”是指碳原子数为6至14个的芳香烃基，作为其具体例，可举出苯基、1-萘基、2-萘基、1-蒽基、2-蒽基、9-蒽基、联苯基等。另外，“C6-14芳环”是指碳原子数为6至14个的芳香烃环。
“C6-14卤代芳基”是指被1个以上的卤素原子取代的碳原子数为6至14个的芳香烃基，作为其具体例，可举出4-氯苯基、2,4-二氯苯基、5-氟-1-萘基、6-溴-2-萘基、6,7-二碘-1-蒽基、10-溴-9-蒽基、4’-氯-(1,1’-联苯基)-2-基等。“C6-14卤代芳环”是指被1个以上的卤素原子取代的碳原子数为6至14个的芳香烃环。
“C6-14芳基氧基”是指碳原子数为6至14个的芳基氧基，作为具体例，可举出苯氧基、1-萘氧基、2-萘氧基、1-蒽氧基、2-蒽氧基、9-蒽氧基、联苯基氧基等。
“5-10元杂环基”是指：构成环的原子的数目为5至10个、并且在构成环的原子中含有1至4个独立地选自由氮原子、氧原子及硫原子组成的组中的杂原子的单环系或稠环系的杂环基。该杂环基可以为饱和、部分不饱和、不饱和中的任意，作为具体例，可举出吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、吖庚因基、氧杂环庚烯基、硫杂环庚烯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡嗪基、吗啉基、噻嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并咪唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、蝶啶基、色烯基、异色烯基等。
“C1-6烷氧基”是指碳原子数为1至6个的直链或支链状的烷氧基，作为具体例，可举出甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基等。
“C3-6环烷基”是指碳原子数为3至6个的环状的饱和脂肪族烃的一价基团，作为具体例，可举出环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
“C3-8环烷基”是指碳原子数为3至8个的环烷基，作为具体例，除了上述“C3-6环烷基”的例子外，还可举出环庚基、环辛基等。另外，“C5-8环烷基”是指碳原子数为5至8个的环烷基，“C5-6环烷基”是指碳原子数为5至6个的环烷基。“C3-8环烷基环”是指碳原子数为3至8个的环烷基环。
“C3-6环烷氧基”是指碳原子数为3至6个的环烷氧基，作为具体例，可举出环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
“单C1-6烷基氨基”是指1个上述“C1-6烷基”键合于氨基而成的基团，作为具体例，可举出单甲基氨基、单乙基氨基、单正丙基氨基、单异丙基氨基、单正丁基氨基、单异丁基氨基、单叔丁基氨基、单正戊基氨基、单正己基氨基等。
“二C1-6烷基氨基”是指相同或不同的2个上述“C1-6烷基”键合于氨基而成的基团，作为具体例，可举出二甲基氨基、二乙基氨基、二正丙基氨基、二异丙基氨基、二正丁基氨基、二异丁基氨基、二叔丁基氨基、二正戊基氨基、二正己基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正丙基氨基、N-异丙基-N-甲基氨基、N-正丁基-N-甲基氨基、N-异丁基-N-甲基氨基、N-叔丁基-N-甲基氨基、N-甲基-N-正戊基氨基、N-正己基-N-甲基氨基、N-乙基-N-正丙基氨基、N-乙基-N-异丙基氨基、N-正丁基-N-乙基氨基、N-乙基-N-异丁基氨基、N-叔丁基-N-乙基氨基、N-乙基-N-正戊基氨基、N-乙基-N-正己基氨基等。
“C1-6烷氧基羰基”是指碳原子数为1至6个的直链或支链状的烷氧基羰基，作为具体例，可举出甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、异丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、正戊氧基羰基、正己氧基羰基等。
“三C1-6烷基甲硅烷基”是指相同或不同的3个上述“C1-6烷基”键合于甲硅烷基而成的基团，作为具体例，可举出三甲基甲硅烷(TMS)基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二叔丁基异丁基甲硅烷基等。
“三C1-6烷基甲硅烷基氧基”是指相同或不同的3个上述“C1-6烷基”键合于甲硅烷基氧基而成的基团，作为具体例，可举出三甲基甲硅烷基氧基、三乙基甲硅烷基氧基、三异丙基甲硅烷基氧基、叔丁基二甲基甲硅烷基氧基、二叔丁基异丁基甲硅烷基氧基等。
“双环烷基”是指含有2个桥头碳、且具有2个环的饱和脂肪族烃的一价基团，作为具体例，可举出八氢茚-3-基、八氢萘-4-基、双环[2.2.1]庚烷-1-基或双环[2.2.1]庚烷-2-基等。另外，“C5-10双环烷基”是指碳原子数为5至10个的双环烷基，“C7-10双环烷基”是指碳原子数为7至10个的双环烷基。
“三环烷基”是指含有至少3个桥头碳、且具有3个环的饱和脂肪族烃的一价基团，作为具体例，可举出三环[3.3.1.13,7]癸烷-1-基(金刚烷-1-基)基或三环[3.3.1.13,7]癸烷-2-基(金刚烷-2-基)基等。另外，所谓“C5-15三环烷基”，是指碳原子数为5至15个的三环烷基，所谓“C7-15三环烷基”，是指碳原子数为7至15个的三环烷基。
“仲或叔脂肪族烃基”是指从在烃链上含有至少一个仲或叔碳原子的支链状或环状的饱和或不饱和的脂肪族烃中除去该仲或叔碳原子上的氢而得的一价基团，可举出仲或叔烷基、双环烷基、三环烷基、仲或叔链烯基等，作为具体例，可举出碳原子数为5以上的仲或叔烷基、双环烷基、三环烷基、仲或叔链烯基等，优选可举出仲或叔C5-40烷基、C5-10双环烷基、C5-15三环烷基、仲或叔C5-40链烯基等，更优选可举出仲或叔C5-20烷基、C7-10双环烷基、C7-15三环烷基、仲或叔C5-20链烯基等。
“仲脂肪族烃基”是指从在烃链上含有至少一个仲碳原子的支链状或环状的饱和或不饱和的脂肪族烃中除去该仲碳原子上的氢而得的一价基团，可举出仲烷基、环烷基、仲链烯基等，作为具体例，可举出碳原子数为5以上的仲烷基、环烷基、仲链烯基等，优选可举出仲C5-40烷基、C3-8环烷基、仲C5-40链烯基等，更优选可举出仲C5-20烷基、C3-6环烷基、仲C5-20链烯基等。
“伯脂肪族烃基”是指从直链状或支链状的饱和或不饱和的脂肪族烃中除去伯碳原子上的氢而得的一价基团，可举出伯烷基、伯链烯基等，作为具体例，可举出碳原子数为4以上的伯烷基、伯链烯基等，优选可举出伯C4-40烷基、伯C4-40链烯基等，更优选可举出伯C4-20烷基、伯C4-20链烯基等。
“可具有取代基”是指未取代、或被任意数目的任意取代基取代。
“具有取代基”是指被任意数目的任意取代基取代。
上述的“任意取代基”只要是不对以本发明为对象的反应造成不良影响的取代基即可，种类没有特别限定。
作为“C1-6烷基可具有取代基”时的“取代基”，例如，可举出C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C6-14芳基氧基、5-10元杂环基、羟基、C1-6烷氧基、C3-6环烷氧基、乙酰氧基、苯甲酰氧基、单C1-6烷基氨基、N-乙酰基氨基、二C1-6烷基氨基、卤素原子、C1-6烷氧基羰基、苯氧基羰基、N-甲基氨基甲酰基、N-苯基氨基甲酰基、三C1-6烷基甲硅烷基、三C1-6烷基甲硅烷基氧基、C3-8环烷基、氰基、硝基等，优选为C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、二C1-6烷基氨基、三C1-6烷基甲硅烷基、三C1-6烷基甲硅烷基氧基、C3-8环烷基，更优选为C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、三C1-6烷基甲硅烷基、C3-8环烷基，进一步优选为C6-14芳基或C3-8环烷基，特别优选为苯基或环己基。
作为“可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基”或“具有取代基的伯脂肪族烃基”中的“取代基”，例如，可举出C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C6-14芳基氧基、5-10元杂环基、羟基、C1-6烷氧基、C3-6环烷氧基、乙酰氧基、苯甲酰氧基、单C1-6烷基氨基、N-乙酰基氨基、二C1-6烷基氨基、卤素原子、C1-6烷氧基羰基、苯氧基羰基、N-甲基氨基甲酰基、N-苯基氨基甲酰基、三C1-6烷基甲硅烷基、三C1-6烷基甲硅烷基氧基、C3-8环烷基、氰基、硝基等，优选为C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、二C1-6烷基氨基、三C1-6烷基甲硅烷基、三C1-6烷基甲硅烷基氧基、C3-8环烷基，更优选为C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、三C1-6烷基甲硅烷基、C3-8环烷基，进一步优选为C6-14芳基或C3-8环烷基。需要说明的是，式(II)表示的羧酸卤化物的作为R1的“具有取代基的伯脂肪族烃基”中的“取代基”与键合于羰基碳的伯碳原子上的氢原子可替换。
所谓“N末端保护氨基酸”及“N末端保护肽”，分别是指N末端的氨基被保护、C末端的羧基未被保护的氨基酸及肽。另外，所谓“C末端保护氨基酸”及“C末端保护肽”，分别是指C末端的羧基被保护、N末端的氨基未被保护的氨基酸及肽。
所谓“N末端及C末端未被保护的氨基酸”及“N末端及C末端未被保护的肽”，分别是指N末端的氨基及C末端的羧基未被保护的氨基酸及肽。需要说明的是，N末端及C末端未被保护的氨基酸中，侧链等不参与肽的形成的反应性官能团存在的情况下，该官能团可以被保护，也可以未被保护。优选为侧链保护氨基酸。
本发明中使用的氨基酸为具有氨基和羧基这两类官能团的有机化合物，是指天然及非天然的氨基酸。优选为α-、β-或γ-氨基酸、或同型氨基酸，更优选为α-氨基酸。另外，在这些氨基酸中存在2个以上的氨基的情况下(例如，精氨酸、赖氨酸、2,3-二氨基丙酸(Dap)等)、存在2个以上的羧基的情况下(例如，谷氨酸、天冬氨酸等)、或存在反应性官能团的情况下(例如，半胱氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、色氨酸等)，本发明中使用的氨基酸也包括未参与肽的形成的氨基、羧基及/或反应性官能团经保护及/或修饰的氨基酸。
本发明中使用的“4-6元的环状的仲氨基酸”是指氨基的氮原子与、键合于氨基上的2个烷基一起形成4-6元环的氨基酸，作为具体例，可举出脯氨酸。4-6元环与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合的情况下，优选的环状化合物为C6-14芳环，更优选为苯。因此，作为4-6元的环状的仲氨基酸与环状化合物稠合时的具体例，可举出1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酸(Tic)。
本发明中使用的N-C1-6烷基氨基酸是氨基酸的氨基被可具有取代基的C1-6烷基取代的氨基酸，优选是氨基酸的氨基被可具有C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、二C1-6烷基氨基、三C1-6烷基甲硅烷基、三C1-6烷基甲硅烷基氧基、或C3-8环烷基的C1-6烷基取代的氨基酸，更优选是氨基酸的氨基被可具有C6-14芳基、C6-14卤代芳基、C1-6烷氧基、三C1-6烷基甲硅烷基、或C3-8环烷基的C1-6烷基取代的氨基酸，进一步优选是氨基酸的氨基被甲基、乙基、丙基、丁基、苄基或环己基甲基取代的氨基酸，更进一步优选是氨基酸的氨基被甲基或乙基取代的氨基酸，特别优选是氨基酸的氨基被甲基取代的氨基酸。
本发明中使用的“来自氨基酸的基团”、“来自N-C1-6烷基氨基酸的基团”是指从氨基酸的氨基或N-C1-6烷基氨基酸的N-C1-6烷基氨基的氮原子上除去氢原子、且从羧基中除去羟基而成的二价基团。同样地，“来自N-甲基氨基酸的基团”是指从N-甲基氨基酸的N-甲基氨基的氮原子上除去氢原子、且从羧基中除去羟基而成的二价基团，“来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团”是指从N-C1-6烷基甘氨酸的N-C1-6烷基氨基的氮原子上除去氢原子、且从羧基中除去羟基而成的二价基团，“来自环状的仲氨基酸的基团”是指从环状的仲氨基酸的仲氨基的氮原子上除去氢原子、且从羧基中除去羟基而成的二价基团，“来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团”是指从4-6元的环状的仲氨基酸的仲氨基的氮原子上除去氢原子、且从羧基中除去羟基而成的二价基团。
构成本发明中使用的肽的氨基酸为上述的氨基酸。
本发明中使用的“来自肽的基团”是指从构成N末端的各种氨基酸的伯或仲氨基中除去氢原子、并且从构成C末端的氨基酸的羧基中除去羟基而成的二价基团。
氨基酸的立体结构没有特别限定，优选为L型。
本发明中使用的、例如式(I)及(V)中由P表示的“N末端保护基”是指进行肽延伸反应(酰胺化反应)时的N末端侧的保护基，可以使用已知的保护基。作为其具体例，为氨基甲酸酯系保护基(9-芴基甲氧基羰基、叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、烯丙氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、2-(对联苯基)异丙氧基羰基等)、酰胺系保护基(乙酰基、三氟乙酰基等)、酰亚胺系保护基(邻苯二甲酰基等)、磺酰胺系保护基(对甲苯磺酰基、2-硝基苯磺酰基等)、苄基等，优选可举出9-芴基甲氧基羰基、叔丁氧基羰基、苄氧基羰基。
本说明书中使用的全部技术用语及科学用语具有与本发明所属技术领域的技术人员通常理解的含义相同的含义。与本说明书中记载的方法及材料同样或同等的任意方法及材料可以在本发明的实施或试验中使用，但优选的方法及材料记载于下文。对于本说明书中提及的全部刊物及专利都作为参照而并入本说明书，目的是记载及公开例如与记载的发明相关而可使用的刊物中所记载的构建体及方法论。
(本发明的肽的制造方法的具体说明)
以下对本发明的肽的制造方法的各工序(1)至(5)进行说明。
作为一个方式，本发明的肽的制造由作为以下的工序(1)至(5)而记载的各单元工序构成。
作为一个方式，本发明的肽的制造可以通过进行作为以下的工序(1)至(5)而记载的单元工序中的全部或适当的组合来实施。
需要说明的是，就该具体说明而言，基于以下内容进行说明。
(a)工序(1)至(5)的记载中的R1及R2与上述含义相同。
(b)就反应的具体条件而言，只要可实现本发明的肽的制造即可，没有特别限制。各反应中的优选条件适当进行详细陈述。
(c)各反应中记载的溶剂可以单独使用，也可以混合2种以上而使用。
工序(1)
本工序是将N末端保护氨基酸或N末端保护肽与羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯混合的工序。本工序是利用羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯将N末端保护氨基酸或N末端保护肽的C末端活化的工序。本发明的一个方式中，是将式(I)P-A1-OH(式中，P为N末端保护基，A1表示来自氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)或来自肽的基团。)表示的N末端保护氨基酸或N末端保护肽与羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯混合的工序。另外，本发明的另一方式中，是将式(V)P-A3-OH(式中，P为N末端保护基，A3表示来自肽的基团。)表示的N末端保护肽与羧酸卤化物混合的工序。
N末端保护氨基酸或N末端保护肽为N末端经保护的上述的氨基酸或肽，具体而言，为N末端经保护的氨基酸、N末端经保护的N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或N末端经保护的肽。需要说明的是，本工序的N末端保护肽优选是其C末端的氨基酸为N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)以外的氨基酸的、N末端保护肽。
羧酸卤化物由下述式(II)表示。
[化学式12]
Figure BDA0003256684440000171
(式中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)。)
式(II)表示的羧酸卤化物优选是R1为可具有取代基的仲或叔C5-40烷基、可具有取代基的C5-10双环烷基、可具有取代基的C5-15三环烷基、可具有取代基的仲或叔C5-40链烯基、或具有取代基的伯C4-40烷基或具有取代基的伯C4-40链烯基(其中，伯C4-40烷基或伯C4-40链烯基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)的羧酸卤化物，更优选是R1为可具有取代基的仲或叔C5-20烷基、可具有取代基的C7-10双环烷基、可具有取代基的C7-15三环烷基、可具有取代基的仲或叔C5-20链烯基、或具有取代基的伯C4-20烷基或具有取代基的伯C4-20链烯基(其中，伯C4-20烷基或伯C4-20链烯基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)的羧酸卤化物，进一步优选R1为可具有取代基的仲或叔C5-20烷基、可具有取代基的C7-10双环烷基、可具有取代基的C7-15三环烷基、可具有取代基的仲或叔C5-20链烯基、或具有取代基的异丁基的酰氯，进一步优选选自下述的化合物组。
[化学式13]
Figure BDA0003256684440000181
特别优选选自下述的化合物组。
[化学式14]
Figure BDA0003256684440000182
卤代甲酸烷基酯由下述式(III)表示。
[化学式15]
Figure BDA0003256684440000183
(式中，X表示卤素原子，R2表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲脂肪族烃基。)
式(III)表示的卤代甲酸烷基酯优选是R2为可具有取代基的仲C5-40烷基、可具有取代基的C5-8环烷基、可具有取代基的仲C5-40链烯基的卤代甲酸烷基酯，更优选是R2为可具有取代基的仲C5-20烷基、可具有取代基的C5-6环烷基、可具有取代基的仲C5-20链烯基的卤代甲酸烷基酯，进一步优选是R2为可具有取代基的仲C5-20烷基、可具有取代基的C5-6环烷基、可具有取代基的仲C5-20链烯基的氯甲酸烷基酯，特别优选选自下述的化合物组。
[化学式16]
Figure BDA0003256684440000184
R1或R2中的碳原子数是R1或R2各自具有的碳原子数的合计，R1或R2具有取代基的情况下，其取代基中的碳原子数也包括在内。
羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯、与N末端保护氨基酸或N末端保护肽的混合(活化反应)可根据需要在碱及/或溶剂的存在下实施。
本工序中使用的碱没有特别限制，作为其例子，可举出脂肪族胺(例如，三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、N-甲基吗啉)、芳香族胺(例如，吡啶、咪唑、N,N-二甲基-4-氨基吡啶)、脒(例如，二氮杂双环十一碳烯)、碱金属盐(例如，碳酸氢钠、碳酸钾)等。优选为脂肪族胺，更优选为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺或N-甲基吗啉。
本工序中使用的羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯的使用量相对于N末端保护氨基酸或N末端保护肽而言，优选为0.2当量至50当量，更优选为0.5当量至20当量，进一步优选为0.8当量至5当量。
本工序中使用的碱的使用量相对于羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯而言，优选为0.2当量至50当量，更优选为0.5当量至20当量，进一步优选为0.8当量至5当量。
本工序中使用的溶剂只要不妨碍活化反应即可，没有特别限定，作为其例子，可举出含卤素烃溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿)、芳香烃溶剂(例如，甲苯、二甲苯)、醚溶剂(例如，四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷、环戊基甲基醚、甲基叔丁基醚)、酰胺溶剂(例如，N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺)、腈溶剂(例如，乙腈)、酮溶剂(例如，丙酮、甲基乙基酮)、脂肪族烃溶剂(例如己烷、庚烷、环己烷)、酯溶剂(例如，乙酸乙酯)等。优选为腈溶剂、酰胺溶剂、或醚溶剂，更优选为乙腈、四氢呋喃、或N,N-二甲基乙酰胺。
本工序中使用的溶剂的使用量相对于羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯而言，优选为100质量倍以下，更优选为1质量倍至50质量倍，进一步优选为3质量倍至20质量倍。
如此，根据需要，在溶剂及/或碱的存在下，将N末端保护氨基酸或N末端保护肽与羧酸卤化物或卤代甲酸烷基酯混合。就得到的混合物而言，根据需要，使用油浴、冷却浴来控制温度。混合物的温度没有特别限制，优选为-40℃至混合物的回流温度，更优选为-20℃至50℃，进一步优选为-10℃至30℃。
通过本工序，形成C末端经活化的N末端保护氨基酸或N末端保护肽。因此，由本工序得到的产物是指C末端经活化的N末端保护氨基酸或N末端保护肽、或者包含它们中的任一者的混合物。以这样的方式得到的C末端经活化的N末端保护氨基酸或N末端保护肽可以在不经历纯化工序的情况下，以反应液的状态、或作为(粗)纯化物分离，继续用于工序(3)。
工序(2)
本工序是将N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽与甲硅烷基化剂混合的工序。需要说明的是，本工序中，“N-烷基氨基酸”是指N末端的氨基及C末端的羧基未被保护的N-烷基氨基酸，“在N末端具有N-烷基氨基酸的肽”是指在N末端具有N-烷基氨基酸、且N末端的氨基及C末端的羧基未被保护的肽。本工序是通过使N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽与甲硅烷基化剂反应，从而得到该氨基酸或肽的C末端、N末端及/或(存在的情况下)羟基等官能团中的至少一部分经三烷基甲硅烷基化的N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽(以下，也称为“经三烷基甲硅烷基化的氨基酸或肽”)的工序。本发明的一个方式中，是将由式(IV)H-A2-OH[式中，A2表示来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)、或者来自肽的基团，所述肽中，N末端残基为N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)]表示的、N末端的酰胺基及C末端的羧基未被保护的氨基酸或者N末端的酰胺基及C末端的羧基未被保护的肽与甲硅烷基化剂混合的工序。另外，本发明的另一方式中，是将由式(IV’)H-A2’-OH[式中，A2’表示来自N-甲基氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团]表示的、N末端的氨基及C末端的羧基未被保护的氨基酸与甲硅烷基化剂混合的工序。
另外，本工序的N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽中的N末端的氨基酸优选为N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可以被环己基或苯基取代)，更优选为N-甲基氨基酸、N-乙基氨基酸、N-丙基氨基酸、N-丁基氨基酸、N-戊基氨基酸、N-环己基甲基氨基酸或N-苄基氨基酸，进一步优选为N-甲基氨基酸或N-乙基氨基酸，特别优选为N-甲基氨基酸。
作为本工序的甲硅烷基化剂，没有特别限制，作为其例子，可举出三甲基甲硅烷基氯化物、三甲基甲硅烷基氰化物、1,1,1,3,3,3-六甲基二硅氮烷、N-三甲基甲硅烷基乙酰胺、N,N’-双(三甲基甲硅烷基)脲、N-甲基-N-三甲基甲硅烷基三氟乙酰胺、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、N,O-双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺等三甲基甲硅烷基化剂、N-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺等。优选为三甲基甲硅烷基氯化物、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、N,N’-双(三甲基甲硅烷基)脲或N,O-双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺，更优选为N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺。
使用的甲硅烷基化剂的使用量相对于N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽而言，优选为0.01当量至50当量，更优选为0.1当量至20当量，进一步优选为0.2当量至5当量。
N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽、与甲硅烷基化剂的混合(甲硅烷基化反应)可根据需要在碱及/或溶剂的存在下实施。
使用的碱没有特别限制，作为其例子，可举出脂肪族胺(例如，二环己基胺、哌啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、N-甲基吗啉)、芳香族胺(例如，吡啶、咪唑、N,N-二甲基-4-氨基吡啶)、碱金属盐(例如，碳酸氢钠、碳酸钾)等。优选为脂肪族胺，更优选为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺。
使用的碱的使用量相对于N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽而言，优选为0.01当量至50当量，更优选为0.1当量至20当量，进一步优选为0.2当量至5当量。
本工序中使用的溶剂只要不妨碍甲硅烷基化反应即可，没有特别限定，作为其例子，可举出含卤素烃溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿)、芳香烃溶剂(例如，甲苯、二甲苯)、醚溶剂(例如，四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷、环戊基甲基醚、甲基叔丁基醚)、酰胺溶剂(例如，N,N-二甲基甲酰胺)、腈溶剂(例如，乙腈)等。优选为腈溶剂、酰胺溶剂、或醚溶剂，更优选为乙腈、四氢呋喃、或N,N-二甲基乙酰胺。
本工序中使用的溶剂的使用量相对于N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽而言，优选为100质量倍以下，更优选为1质量倍至50质量倍，进一步优选为3质量倍至20质量倍。
如此，根据需要，在溶剂及/或碱的存在下，将N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽与甲硅烷基化剂混合。就得到的混合物而言，根据需要，使用油浴、冷却浴来控制温度。混合物的温度没有特别限制，优选为从0℃至混合物的回流温度，更优选为10℃至100℃，进一步优选为20℃至80℃。另外，可以对混合物施加微波照射。
通过本工序，形成经三烷基甲硅烷基化的N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽。因此，由本工序得到的产物是指包含经三烷基甲硅烷基化的N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽的混合物。以这样的方式得到的经三烷基甲硅烷基化的氨基酸或肽可以在不经历纯化工序的情况下，以反应液的状态、或作为(粗)纯化物分离，继续用于工序(3)中。另外，经三烷基甲硅烷基化的N-烷基氨基酸或在N末端具有N-烷基氨基酸的肽也可以通过NMR等分析设备进行分析。
工序(3)
本工序是将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合的工序。本工序为使工序(1)中得到的C末端经活化的N末端保护氨基酸或N末端保护肽、与工序(2)中得到的经三烷基甲硅烷基化的氨基酸或肽反应的肽延伸工序，优选可通过将工序(1)中得到的反应液与工序(2)中得到的反应液混合、搅拌来实施。本发明的一个方式中，是使工序(1)中得到的C末端经活化的N末端保护氨基酸、与工序(2)中得到的经三烷基甲硅烷基化的氨基酸或肽反应的肽延伸工序。本发明的另一方式中，是使工序(1)中得到的C末端经活化的N末端保护肽、与工序(2)中得到的经三烷基甲硅烷基化的氨基酸反应的肽延伸工序。
就得到的混合物而言，根据需要，使用油浴、冷却浴来控制温度。混合物的温度没有特别限制，优选为从-40℃至反应混合物的回流温度，更优选为-20℃至50℃，进一步优选为-10℃至30℃。
另外，本发明的肽的制造方法中，通过对工序(3)中得到的肽重复进行下述工序(4)至(5)所期望的次数，从而能够将肽链进一步延伸。
工序(4)，将工序(3)或(5)中得到的肽的N末端的保护基除去。
工序(5)，使N末端保护氨基酸或N末端保护肽与工序(4)中得到的肽的N末端反应。
工序(5)可以通过与上述工序(1)、(2)及(3)同样的操作、或通常的肽合成反应来实施。
本发明的肽的制造方法中，也可以在不对后续工序的反应造成影响的范围内适当省略工序(1)至(5)的纯化工序。
工序(4)：N末端的脱保护工序
本工序是从上述工序(3)或(5)所得到的肽中除去N末端的保护基而得到N末端及C末端未保护的肽的工序。
本工序中使用的脱保护试剂根据使用的保护基而适当选择。作为其例子，可举出酸(例如，三氟乙酸、盐酸、路易斯酸)、仲或叔胺(例如，吡咯烷、哌啶、吗啉、三乙胺)、氢化分解(例如，钯催化剂/氢化)等。
本工序中使用的脱保护条件根据N末端保护基的种类而适当选择，例如，为9-芴基甲氧基羰基的情况下，通过以碱进行处理来实施，为叔丁氧基羰基的情况下，通过以酸进行处理来实施，为苄氧基羰基、烯丙氧基羰基的情况下，通过以中性、在例如金属催化剂的存在下进行氢化来实施。
各反应中，在反应底物具有羟基、巯基、氨基、羧基或羰基的情况下(特别是在氨基酸或肽的侧链具有官能团的情况下)，可以向这些基团导入肽化学等中通常使用的保护基，并在反应后根据需要除去保护基，由此得到目标化合物。
保护及脱保护可以通过使用通常已知的保护基、进行保护·脱保护反应(例如，Protective Group in Organic Synthesis,Fourth edition第4版，T.W.Greene著，JohnWiley&Sons Inc.(2006年)等)来实施。
关于工序(1)中使用的N末端保护氨基酸或N末端保护肽中的N末端氨基酸(以下，称为氨基酸A)、与工序(2)中使用的氨基酸或肽中的N末端氨基酸(以下，称为氨基酸B)的组合，没有特别限定，优选氨基酸A、B各自为α-、β-或γ-氨基酸，更优选氨基酸A或氨基酸B中的任一者为α-氨基酸，进一步优选氨基酸A为α-氨基酸、氨基酸B为α-氨基酸、β-氨基酸或γ-氨基酸、或者氨基酸A为α-氨基酸、β-氨基酸或γ-氨基酸、氨基酸B为α-氨基酸，特别优选氨基酸A为α-氨基酸、氨基酸B为α-氨基酸、β-氨基酸或γ-氨基酸。
另外，工序(2)中使用的肽中的N末端氨基酸优选为α-氨基酸。
实施例
以下，示出作为参考例、比较例及实施例的合成例，更详细地说明本发明，但本发明并不限于这些实施例。
本说明书中，以缩写来表示氨基酸等的情况下，各表述基于IUPAC-IUBCommission on Biochemical Nomenclature的缩写或基于该领域中的惯用缩写。
需要说明的是，合成例中，“(v/v)”是指(体积/体积)，“M”是指mol/L。
以下的合成例中，微波反应装置使用Initiator+(Biotage制)。
在没有特别记载的情况下，合成例的质子核磁共振(1H-NMR)使用日本电子(JEOL)公司制JNM-ECP300、或日本电子(JEOL)公司制JNM-ECX300、或Bruker公司制AscendTM500，在氘代氯仿或氘代二甲基亚砜溶剂中测定，化学位移以将四甲基硅烷作为内标(0.0ppm)时的δ值(ppm)来表示。
在NMR谱的记载中，“s”表示单峰，“d”表示二重峰，“t”表示三重峰，“q”表示四重峰，“dd”表示双二重峰，“dt”表示双三重峰，“sept”表示七重峰，“m”表示多重峰，“br”表示宽峰，“J”表示偶合常数，“Hz”表示赫兹，“CDCl3”表示氘代氯仿，“DMSO-d6”表示氘代二甲基亚砜。
就高效液相色谱/质谱而言，在没有特别记载的情况下，使用Waters公司制ACQUITY UPLC H-Class/QDa、Waters公司制ACQUITY UPLC H-Class/SQD2、或Shimadzu公司制LC-20AD/Triple Tof 5600中的任一者进行测定。
在高效液相色谱/质谱的记载中，ESI+是电喷雾离子化法的正离子模式，M+H是指质子加成物，M+Na是指钠加成物。
在高效液相色谱/质谱的记载中，ESI-为电喷雾离子化法的负离子模式，M-H是指去质子离子。
就原料与产物的比而言，在合成例8至50中，通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件1＞至＜分析条件3＞中的任一者而算出。
＜分析条件1＞
高效液相色谱：Waters制ACQUITY UPLD H-Class/SQD2
色谱柱：Phenomenex公司制Kinetex EVO C18(1.7μm,2.1×50mm)
柱温箱温度：60℃
洗脱液：乙腈：0.025vol％三氟乙酸水溶液
5：95(0-2.1分钟)、95：5(2.1-2.84分钟)(v/v)
洗脱液速度：0.6mL/分钟
检测波长：220nm
＜分析条件2＞
高效液相色谱：Waters制ACQUITY UPLD H-Class/SQD2
色谱柱：Waters公司制ACQUITY BEH C18(1.7μm,2.1×100mm)
柱温箱温度：60℃
洗脱液：乙腈：0.025vol％三氟乙酸水溶液
5：95(0-3.7分钟)、95：5(3.7-4.81分钟)(v/v)
洗脱液速度：0.6mL/分钟
检测波长：220nm
＜分析条件3＞
高效液相色谱：Waters制ACQUITY UPLD H-Class/SQD2
色谱柱：Waters公司制ACQUITY BEH C18(1.7μm,2.1×100mm)
柱温箱温度：40℃
洗脱液：乙腈：0.025vol％三氟乙酸水溶液
5：95(0-5.56分钟)、95：5(5.56-7.22分钟)(v/v)
洗脱液速度：0.4mL/分钟
检测波长：220nm
就利用硅胶柱色谱的纯化而言，在没有特别记载的情况下，使用山善制Hi-Flash柱、Biotage制SNAP Ultra Silica Cartridge、Merck制硅胶60或富士SILYSIA化学制PSQ60B中的任一者。
以下，在没有特别记载的情况下，N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺使用纯度98％的市售品。
需要说明的是，以下的实施例中，有时收率或定量收率超过100％。这些均是由于测定误差、原料或产物的纯度的影响、或基于其他技术常识的因素而超过100％。以下的实施例中，关于收率超过100％时的原因，虽然没有单独提及，但本领域技术人员可充分地理解这些实施例的科学合理性。
合成例1：4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-醇的合成
[化学式17]
Figure BDA0003256684440000261
使2-乙基丁醛(3.69g，36.8mmol)与环戊基甲基醚(40mL)混合，于-78℃加入叔丁基锂戊烷溶液(1.53M，26.5mL，40.5mmol)，搅拌5分钟。将得到的反应液升温至25℃后，加入乙醇(1.0mL)，依次用20质量％氯化铵水溶液(25mL)、饱和氯化钠水溶液(25mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以无色透明液体的形式得到4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-醇(5.22g，收率90％)。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.88-0.94(9H+4H,m)，1.06-1.16(1H,m)，1.27(1H，d，J＝6.0Hz)，1.29-1.38(2H，m)，1.40-1.48(1H，m)，1.52-1.58(1H，m)，3.24(1H，d，J＝6.0Hz).
合成例2：氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯的合成
[化学式18]
Figure BDA0003256684440000271
使4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-醇(5.21g，32.9mmol)、吡啶(2.99g，37.9mmol)与四氯化碳(50mL)混合，冷却至0℃。向该溶液中，加入另行混合了三光气(4.00g，13.5mmol)、四氯化碳(10mL)的溶液，进而加热至60℃，搅拌8小时。针对得到的反应液，依次地，用水(50mL)清洗两次，然后用饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以无色透明液体的形式得到氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(6.56g，收率90％)。本化合物不经进一步纯化即用于下一工序。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.90-0.94(6H，m)，0.97(9H，s)，1.10-1.20(1H，m)，1.25-1.35(1H，m)，1.45-1.53(2H，m)，1.59-1.67(1H，m)，4.72(1H，d，J＝2.0Hz).
合成例3：2,2,4-三甲基戊烷-3-醇的合成
[化学式19]
Figure BDA0003256684440000272
使异丁醛(3.61g，50.0mmol)与环戊基甲基醚(50mL)混合，于-78℃加入叔丁基锂戊烷溶液(1.52M，36.2mL，55.0mmol)，搅拌5分钟。将得到的反应液升温至25℃后，加入乙醇(1.0mL)，依次用20质量％氯化铵水溶液(25mL)、饱和氯化钠水溶液(25mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以无色透明液体的形式得到2,2,4-三甲基戊烷-3-醇(5.25g，收率81％)。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.91(3H，d，J＝7.0Hz)，0.94(9H，s)，1.01(3H，d，J＝7.0Hz)，1.32(1H，d，J＝6.5Hz)，1.91-1.99(1H，m)，3.11(1H，dd，J＝6.5Hz，2.0Hz).
合成例4：氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯的合成
[化学式20]
Figure BDA0003256684440000281
使2,2,4-三甲基戊烷-3-醇(5.25g，40.3mmol)、吡啶(3.67g，46.3mmol)与四氯化碳(40mL)混合，冷却至0℃。向该溶液中，加入另行混合了三光气(4.90g，16.5mmol)、四氯化碳(20mL)的溶液，进而加热至60℃，搅拌8小时。针对得到的反应液，依次地，用水(50mL)清洗两次，然后用饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以无色透明液体的形式得到氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(6.06g，收率78％)。本化合物不经进一步纯化即用于下一工序。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.97(3H，d，J＝7.0Hz)，0.99(9H，s)，1.02(3H，d，J＝7.0Hz)，2.04-2.13(1H，m)，4.58(1H，d，J＝3.0Hz).
合成例5：氯甲酸3,3-二甲基丁烷-2-基酯的合成
[化学式21]
Figure BDA0003256684440000282
使3,3-二甲基丁烷-2-醇(3.36g，32.9mmol)、吡啶(2.99g，37.8mmol)与四氯化碳(40mL)混合，冷却至0℃。向该溶液中，加入另行混合了三光气(4.00g，13.5mmol)、四氯化碳(15mL)的溶液，进而加热至60℃，搅拌8小时。针对得到的反应液，依次地，用水(50mL)清洗两次，然后用饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，得到作为无色透明液体的氯甲酸3,3-二甲基丁烷-2-基酯(4.50g，收率83％)。本化合物不经进一步纯化即用于下一工序。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.96(9H，s)，1.29(3H，d，J＝6.5Hz)，4.74(1H，q，J＝6.5Hz).
合成例6：氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯的合成
[化学式22]
Figure BDA0003256684440000291
使2,4-二甲基戊烷-3-醇(3.49g，30.0mmol)、吡啶(2.73g，34.5mmol)与四氯化碳(40mL)混合，冷却至0℃。向该溶液中，加入另行混合了三光气(3.65g，12.3mmol)、四氯化碳(15mL)的溶液，进而加热至60℃，搅拌8小时。针对得到的反应液，依次地，用水(50mL)清洗两次，然后用饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以无色透明液体的形式得到氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(5.10g，收率95％)。本化合物不经进一步纯化即用于下一工序。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.94(6H，d，J＝2.5Hz)，0.95(6H，d，J＝2.5Hz)，1.94-2.04(2H，m)4.60(1H，t，J＝6.0Hz).
合成例7：氯甲酸3-甲基丁烷-2-基酯的合成
[化学式23]
Figure BDA0003256684440000292
使3-甲基丁烷-2-醇(3.97g，45.0mmol)、吡啶(4.09g，51.8mmol)与四氯化碳(40mL)混合，冷却至0℃。向该溶液中，加入另行混合了三光气(5.47g，18.5mmol)、四氯化碳(20mL)的溶液，进而加热至60℃，搅拌8小时。针对得到的反应液，依次地，用水(50mL)清洗两次，然后用饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以无色透明液体的形式得到氯甲酸3-甲基丁烷-2-基酯(5.10g，收率95％)。本化合物不经进一步纯化即用于下一工序。
1H-NMR(CDCl3)
δppm：0.95(3H，d，J＝4.0Hz)，0.97(3H，d，J＝4.0Hz)，1.31(3H，d，J＝6.5Hz)，1.87-1.94(1H，m)，4.80(1H，sept，J＝6.5Hz).
合成例8：Boc-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式24]
Figure BDA0003256684440000301
使Boc-Phe-OH(0.066g，0.25mmol)、三乙胺(0.033g，0.32mmol)与四氢呋喃(5mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.040g，0.30mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.067g，0.38mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.161g，0.750mmol)、乙腈(4mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌3分钟而制备的溶液，于0℃搅拌2小时，进一步于25℃搅拌16小时(原料：目标物＝1：70(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次地，用10质量％柠檬酸水溶液(10mL)清洗2次，然后用5质量％氯化钠水溶液(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Boc-Phe-MePhe-OH(0.125g，收率117％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+427.3
合成例9：Fmoc-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式25]
Figure BDA0003256684440000302
使Fmoc-Phe-OH(0.097g，0.25mmol)、N-甲基吗啉(0.033g，0.33mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(0.066g，0.30mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.058g，0.33mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.141g，0.67mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌20分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌5小时(原料：目标物＝1：13(分析条件3))。用乙酸乙酯(20mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、10质量％氯化钠水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-Phe-MePhe-OH(0.137g，收率100％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+549.3
合成例10：Fmoc-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式26]
Figure BDA0003256684440000311
使Fmoc-Phe-OH(0.097g，0.25mmol)、N-甲基吗啉(0.033g，0.33mmol)与N,N-二甲基乙酰胺(5.0mL)混合，于0℃加入氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(0.066g，0.30mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.058g，0.33mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.141g，0.67mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌20分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌5小时(原料：目标物＝1：31(分析条件3))。用乙酸乙酯(30mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(50mL)、10质量％氯化钠水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-Phe-MePhe-OH(0.137g，收率100％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+549.3
合成例11：Fmoc-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式27]
Figure BDA0003256684440000321
使Fmoc-Phe-OH(0.194g，0.500mmol)、三乙胺(0.0607g，0.60mmol)与四氢呋喃(10mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.074g，0.550mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.108g，0.600mmol)、N,N’-双(三甲基甲硅烷基)脲(0.250g，1.20mmol)、乙腈(4.0mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌67小时(原料：目标物＝1：20(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(80mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(50mL)、5质量％氯化钠水溶液(50mL)、饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-Phe-MePhe-OH(0.322g，收率117％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+549.4
合成例12：Fmoc-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式28]
Figure BDA0003256684440000322
使Fmoc-Phe-OH(0.097g，0.250mmol)、三乙胺(0.0304g，0.300mmol)与四氢呋喃(5mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.0371g，0.275mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.0538g，0.300mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.155g，0.601mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌30分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌16小时(原料：目标物＝4.4：95.6(分析条件1；其中，在搅拌4小时的时刻))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-Phe-MePhe-OH(0.135g，收率98％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+549.4
合成例13：Boc-MePhe-MePhe-OH的合成
[化学式29]
Figure BDA0003256684440000331
使Boc-MePhe-OH(0.070g，0.250mmol)、三乙胺(0.033g，0.32mmol)与四氢呋喃(5mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.040g，0.30mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.067g，0.38mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.161g，0.774mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌3分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌16小时(原料：目标物＝7：93(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以无色油的形式得到Boc-MePhe-MePhe-OH(0.127g，收率116％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+441.4
合成例14：Boc-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式30]
Figure BDA0003256684440000332
使Boc-MePhe-OH(1.40g，5.00mmol)、N-甲基吗啉(0.556g，5.50mmol)与四氢呋喃(50mL)混合，于0℃加入氯甲酸异丙酯(0.643g，5.25mmol)，搅拌15分钟。向该溶液中，加入另行将H-Phe-OH(0.991g，6.00mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(2.57g，12.4mmol)、乙腈(15mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌60分钟而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌30分钟，进一步于25℃搅拌1.5小时(原料：目标物＝0：100(分析条件1))。将得到的反应液用乙酸乙酯(200mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(75mL)、5质量％氯化钠水溶液(75mL)、饱和氯化钠水溶液(75mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-Phe-OH(2.20g，收率103％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+427.3
合成例15：Fmoc-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式31]
Figure BDA0003256684440000341
使Fmoc-MePhe-OH(2.00g，5.00mmol)、N-甲基吗啉(0.556g，5.50mmol)与四氢呋喃(30mL)混合，于0℃加入氯甲酸异丙酯(0.663g，5.25mmol)，搅拌30分钟。向该溶液中，加入另行使H-Phe-OH(0.991g，6.00mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(2.68g，12.9mmol)、乙腈(15mL)混合并于75℃搅拌30分钟而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌50分钟，进一步于25℃搅拌1小时(原料：目标物＝3：97(分析条件1))。将得到的反应液用乙酸乙酯(75mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(50mL)、5质量％氯化钠水溶液(50mL)、饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-MePhe-Phe-OH(2.85g，收率98％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+549.4
合成例16：H-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式32]
Figure BDA0003256684440000351
使Fmoc-MePhe-Phe-OH(0.137g，0.250mmol)、三乙胺(0.505g，4.99mmol)与乙腈(4.4mL)混合，于80℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入四氢呋喃(1.0mL)、二异丙基醚(3.0mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚(5mL)进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MePhe-Phe-OH(0.071g，收率87％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+327.3
合成例17：H-MePhe-Phe-OH·HCl的合成
[化学式33]
Figure BDA0003256684440000352
使Boc-MePhe-Phe-OH(0.213g，0.500mmol)与4M-HCl/乙酸乙酯(10mL)混合，于25℃搅拌1小时。将得到的反应液浓缩，加入二异丙基醚使其悬浮，用桐山漏斗滤取生成的固体，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MePhe-Phe-OH·HCl(0.164g，收率91％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+327.3
合成例18：Boc-MePhe-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式34]
Figure BDA0003256684440000353
溶液A
使Boc-MePhe-OH(0.280g，1.00mmol)、N-甲基吗啉(0.112g，1.10mmol)与四氢呋喃(10mL)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(0.203g，1.05mmol)，搅拌1小时。
溶液B
使Boc-MePhe-Phe-OH(0.449g，1.05mmol)与4M-HCl/环戊基甲基醚(5mL)混合，于25℃搅拌30分钟。将得到的反应液浓缩，加入乙酸乙酯(20mL)并浓缩，加入N,N-二异丙基乙胺(1.30g，10.0mmol)和乙腈(8mL)并浓缩。在得到的残余物中混合乙腈(10mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.644g，3.11mmol)，于25℃搅拌20分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌18小时(原料：目标物＝1：21(分析条件3))。用乙酸乙酯(40mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Phe-MePhe-MePhe-MePhe-OH(0.532g，收率90％)。MASS(ESI+)m/z；(M+H)+588.4
合成例19：Boc-Phe-MePhe-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式35]
Figure BDA0003256684440000361
溶液A
使Boc-Phe-OH(0.177g，0.669mmol)、N-甲基吗啉(0.744g，0.736mmol)与四氢呋喃(10mL)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(0.135g，0.702mmol)，搅拌1小时。
溶液B
使Boc-MePhe-MePhe-Phe-OH(0.413g，0.702mmol)与4M-HCl/环戊基甲基醚(10mL)混合，于25℃搅拌1小时。将得到的反应液浓缩，加入乙酸乙酯(20mL)并浓缩，加入N,N-二异丙基乙胺(0.865g，6.69mmol)和乙腈(8mL)并浓缩。在得到的残余物中混合乙腈(10mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.430g，2.07mmol)，于25℃搅拌20分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌18小时(原料：目标物＝0：100(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、10质量％氯化钠水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Phe-MePhe-MePhe-Phe-OH(0.453g，收率92％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+735.5
合成例20：Boc-MePhe-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式36]
Figure BDA0003256684440000371
溶液A
使Boc-MePhe-OH(0.324g，1.16mmol)、三乙胺(0.141g，1.39mmol)与四氢呋喃(10mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.172g，1.28mmol)，搅拌1小时。
溶液B
使Boc-MePhe-Phe-OH(0.544g，1.28mmol)与4M-HCl/环戊基甲基醚(20mL)混合，于25℃搅拌1小时。将得到的反应液浓缩，加入环戊基甲基醚(20mL)并浓缩，加入N,N-二异丙基乙胺(1.50g，11.6mmol)和乙腈(8mL)并浓缩。在得到的残余物中混合乙腈(10mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.621g，2.99mmol)，于25℃搅拌20分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌48小时(原料：目标物＝1：37(分析条件3))。用乙酸乙酯(40mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以褐色固体的形式得到Boc-MePhe-MePhe-Phe-OH(0.701g，收率103％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+588.4
合成例21：Boc-MePhe-Pro-OH的合成
[化学式37]
Figure BDA0003256684440000381
使Boc-MePhe-OH(1.40g，5.00mmol)、N-甲基吗啉(0.556g，5.50mmol)与四氢呋喃(30mL)混合，于0℃加入氯甲酸3,3-二甲基丁烷-2-基酯(0.864g，5.25mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(0.691g，6.00mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(3.85g，18.6mmol)、乙腈(12mL)混合并于70℃搅拌10分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌15分钟(原料：目标物＝0：100(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(40mL)稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-Pro-OH(1.94g，收率94％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+377.3
合成例22：Boc-MePhe-MePhe-Pro-OH的合成
[化学式38]
Figure BDA0003256684440000382
溶液A
使Boc-MePhe-OH(0.838g，3.00mmol)、三乙胺(0.364g，3.60mmol)与四氢呋喃(60mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.444g，3.30mmol)，搅拌30分钟。
溶液B
使Boc-MePhe-Pro-OH(1.24g，3.30mmol)与4M-HCl/环戊基甲基醚(20mL)混合，于25℃搅拌1小时。将得到的反应液浓缩，加入乙腈(20mL)并浓缩，加入N,N-二异丙基乙胺(0.865g，6.69mmol)和乙腈(20mL)并浓缩。在得到的残余物中混合乙腈(20mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(2.31g，11.1mmol)，于25℃搅拌20分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌48小时(原料：目标物＝1：24(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(40mL)稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-MePhe-Pro-OH(1.71g，收率90％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+538.5
合成例23：H-MePhe-MePhe-Pro-OH·HCl的合成
[化学式39]
Figure BDA0003256684440000391
使Boc-MePhe-MePhe-Pro-OH(1.61g，3.00mmol)与4M-HCl/乙酸乙酯(15mL)混合，于25℃搅拌90分钟。将得到的反应液浓缩，加入乙酸乙酯(5mL)、二异丙基醚(20mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚(10mL)进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MePhe-MePhe-Pro-OH·HCl(1.30g，收率91％)。将得到的固体用于下一工序。
合成例24：Boc-Tyr-MePhe-MePhe-Pro-OH的合成
[化学式40]
Figure BDA0003256684440000392
溶液A
使Boc-Tyr-OH(0.282g，1.00mmol)、三乙胺(0.122g，1.20mmol)与四氢呋喃(10mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.148g，1.10mmol)，搅拌1小时。
溶液B
使H-MePhe-MePhe-Pro-OH·HCl(0.482g，1.02mmol)与N,N-二异丙基乙胺(2mL)混合，于25℃搅拌2分钟。将得到的反应液浓缩。在得到的残余物中混合乙腈(6mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.773g，3.74mmol)，于25℃搅拌20分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌1小时。用乙酸乙酯(40mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Tyr-MePhe-MePhe-Pro-OH(0.698g，收率99％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+701.5
合成例25：Boc-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式41]
Figure BDA0003256684440000401
溶液A
使Boc-MePhe-OH(0.894g，3.20mmol)、三乙胺(0.389g，3.84mmol)与四氢呋喃(25mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.474g，3.52mmol)，搅拌45分钟。
溶液B
在H-MeAla-Tyr-OH(0.937g，3.52mmol)中混合乙腈(10mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(2.28g，10.9mmol)，于25℃搅拌15分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌2小时(原料：目标物＝0：100(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(30mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液对得到的有机层进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-MeAla-Tyr-OH(1.67g，收率94％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+528.3
合成例26：H-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式42]
Figure BDA0003256684440000411
使Boc-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.474g，0.898mmol)与4M-HCl/乙酸乙酯(5mL)混合，于25℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入乙腈(5mL)、N,N-二异丙基乙胺(1.74g，13.5mmol)使其悬浮，用桐山漏斗滤取生成的固体。用N,N-二异丙基乙胺(1.74g，13.5mmol)和二异丙基醚(5mL)的溶液进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.370g，收率96％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+428.8
合成例27：Boc-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式43]
Figure BDA0003256684440000412
使Boc-Phe-OH(0.125g，0.470mmol)、三乙胺(0.057g，0.564mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.070g，0.52mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.221g，0.517mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.332g，1.60mmol)、乙腈(5.0mL)混合并于25℃搅拌15分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌2小时(原料：目标物＝1：80(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.295g，收率93％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+675.5
合成例28：H-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式44]
Figure BDA0003256684440000421
使Boc-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.317g，0.470mmol)与三氟乙酸(1.45mL)混合，于25℃搅拌15分钟。将得到的反应液浓缩，加入乙腈(7mL)、三乙胺(0.476g，4.70mmol)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用乙酸乙酯(2mL)、二异丙基醚(8mL)进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.268g，收率99％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+575.4
合成例29：Boc-MePhe-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式45]
Figure BDA0003256684440000422
使Boc-MePhe-OH(0.092g，0.33mmol)、三乙胺(0.040g，0.396mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.0489g，0.363mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.209g，0.363mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.233g，1.12mmol)、乙腈(5.0mL)混合并于25℃搅拌15分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌1小时(原料：目标物＝0：100(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-Phe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.282g，收率87％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+836.5
合成例30：Cbz-MeAla-Phe-OH的合成
[化学式46]
Figure BDA0003256684440000431
使Cbz-MeAla-OH(1.19g，5.00mmol)、三乙胺(0.607g，6.00mmol)与四氢呋喃(50mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.740g，5.50mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-Phe-OH(0.991g，6.00mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(2.57g，12.4mmol)、乙腈(17mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌60分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌1小时(原料：目标物＝1：62(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(60mL)、水(60mL)、饱和氯化钠水溶液(30mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(30mL)、饱和氯化钠水溶液(30mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以无色透明浆液的形式得到Cbz-MeAla-Phe-OH(1.76g，收率91％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+385.3
合成例31：H-MeAla-Phe-OH的合成
[化学式47]
Figure BDA0003256684440000432
使Cbz-MeAla-Phe-OH(1.76g，4.57mmol)、三乙胺(0.023g，0.229mmol)、甲酸铵(1.44g，22.9mmol)、10质量％钯-碳(0.486g)与甲醇(50mL)混合，于60℃搅拌1小时。对反应溶液进行硅藻土过滤，用甲醇(20mL)清洗三次。将得到的滤液浓缩，以白色固体的形式得到H-MeAla-Phe-OH(1.03g，90％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+251.2
合成例32：Boc-MePhe-MeAla-Phe-OH的合成
[化学式48]
Figure BDA0003256684440000441
使Boc-MePhe-OH(0.559g，2.00mmol)、三乙胺(0.243g，2.40mmol)与四氢呋喃(30mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.296g，2.20mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-MeAla-Phe-OH(0.601g，2.40mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.03g，4.95mmol)、乙腈(20mL)混合并于25℃搅拌40分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌2小时(原料：目标物＝1：55(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)、水(30mL)、饱和氯化钠水溶液(15mL)各清洗2次。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-MeAla-Phe-OH(1.08g，收率105％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+512.3
合成例33：H-MePhe-MeAla-Phe-OH·HCl的合成
[化学式49]
Figure BDA0003256684440000442
使Boc-MePhe-MeAla-Phe-OH(1.06g，2.08mmol)与4M-HCl/乙酸乙酯(20mL)混合，于25℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入二异丙基醚(20mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚(10mL)进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MePhe-MeAla-Phe-OH·HCl(0.886g，收率95％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+411.5
合成例34：Fmoc-Trp(Boc)-MePhe-MeAla-Phe-OH的合成
[化学式50]
Figure BDA0003256684440000451
使Fmoc-Trp(Boc)-OH(0.439g，0.833mmol)、三乙胺(0.101g，1.00mmol)与四氢呋喃(30mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.123g，0.917mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-MeAla-Phe-OH·HCl(0.448g，1.00mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.428g，2.06mmol)、N,N-二异丙基乙胺(1.08g，8.33mmol)、乙腈(20mL)混合并于25℃搅拌40分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌3小时(原料：目标物＝1：12(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)、水(30mL)、饱和氯化钠水溶液(12mL)各清洗2次。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，将残余物溶解于乙酸乙酯(5.0mL)中，注入至己烷(95mL)中。滤取所析出的固体，以白色固体的形式得到Fmoc-Trp(Boc)-MePhe-MeAla-Phe-OH(0.657g，收率86％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+920.5
合成例35：Fmoc-Gln(Trt)-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式51]
Figure BDA0003256684440000452
溶液A
使Fmoc-Gln(Trt)-OH(0.204g，0.333mmol)、三乙胺(0.040g，0.40mmol)与四氢呋喃(20mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.049g，0.37mmol)，搅拌45分钟。
溶液B
使H-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.171g，0.400mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.431g，3.33mmol)、乙腈(20mL)混合，将溶液浓缩，除去溶剂。在得到的残余物中混合乙腈(10mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.343g，1.65mmol)，于25℃搅拌40分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌23小时(原料：目标物＝1：5(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)、水(15mL)、饱和氯化钠水溶液(7.5mL)各清洗2次。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-Gln(Trt)-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.209g，收率62％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+1020.6
合成例36：Fmoc-BnGly-Phe-OH的合成
[化学式52]
Figure BDA0003256684440000461
使Fmoc-BnGly-OH(0.387g，1.00mmol)、N-甲基吗啉(0.111g，1.10mmol)与四氢呋喃(20mL)混合，于0℃加入氯甲酸异丙酯(0.129g，1.05mmol)，搅拌5分钟。向该溶液中，加入另行使H-Phe-OH(0.198g，1.20mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.519g，2.48mmol)、乙腈(5mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌60分钟而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15分钟，进一步于25℃搅拌20小时(原料：目标物＝1：55(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(80mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(50mL)、10质量％氯化钠水溶液(50mL)、饱和氯化钠水溶液(50mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-BnGly-Phe-OH(0.570g，收率107％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+535.3
合成例37：H-BnGly-Phe-OH的合成
[化学式53]
Figure BDA0003256684440000471
使Fmoc-BnGly-Phe-OH(0.535g，1.00mmol)、三乙胺(2.02g，20.0mmol)与乙腈(20mL)混合，于60℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入二异丙基醚(50mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-BnGly-Phe-OH(0.293g，收率94％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+313.2
合成例38：Boc-Phe-BnGly-Phe-OH的合成
[化学式54]
Figure BDA0003256684440000472
使Boc-Phe-OH(0.066g，0.25mmol)、三乙胺(0.030g，0.30mmol)与四氢呋喃(5mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.037g，0.28mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-BnGly-Phe-OH(0.093g，0.30mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.129g，0.616mmol)、乙腈(4mL)混合并于25℃搅拌20分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌14小时(原料：目标物＝1：93(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液(20mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Phe-BnGly-Phe-OH(0.139g，收率100％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+560.4
合成例39：Fmoc-n-PrGly-Phe-OH的合成
[化学式55]
Figure BDA0003256684440000481
使Fmoc-n-PrGly-OH(0.339g，1.00mmol)、三乙胺(0.121g，1.20mmol)与四氢呋喃(15mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.148g，1.10mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-Phe-OH(0.198g，1.20mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.519g，2.48mmol)、乙腈(4.5mL)混合并在微波照射下于75℃搅拌60分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌1小时(原料：目标物＝1：32(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(20mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(20mL)、饱和氯化钠水溶液(20mL)各清洗2次。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-n-PrGly-Phe-OH(0.538g，收率111％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+487.3
合成例40：H-n-PrGly-Phe-OH的合成
[化学式56]
Figure BDA0003256684440000482
使Fmoc-n-PrGly-Phe-OH(0.487g，1.00mmol)、三乙胺(2.02g，20.0mmol)与乙腈(20mL)混合，于60℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入二异丙基醚(50mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-n-PrGly-Phe-OH(0.245g，收率93％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+265.2
合成例41：Boc-Phe-n-PrGly-Phe-OH的合成
[化学式57]
Figure BDA0003256684440000491
使Boc-Phe-OH(0.066g，0.25mmol)、三乙胺(0.030g，0.300mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.037g，0.27mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-n-PrGly-Phe-OH(0.066g，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.118g，0.564mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于25℃搅拌30分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌1小时以上(原料：目标物＝1：85(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Phe-n-PrGly-Phe-OH(0.125g，收率98％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+512.4
合成例42：Fmoc-MePhe-n-PrGly-Phe-OH的合成
[化学式58]
Figure BDA0003256684440000492
使Fmoc-MePhe-OH(0.080g，0.20mmol)、三乙胺(0.024g，0.24mmol)与四氢呋喃(5mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.030g，0.22mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-n-PrGly-Phe-OH(0.063g，0.24mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.104g，0.50mmol)、乙腈(2mL)混合并于0℃搅拌30分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌2小时(原料：目标物＝1：18(分析条件1))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液(30mL)、5质量％氯化钠水溶液(30mL)、饱和氯化钠水溶液(30mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-MePhe-n-PrGly-Phe-OH(0.153g，收率118％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+648.4
合成例43：Boc-MePhe-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式59]
Figure BDA0003256684440000501
使Boc-MePhe-OH(0.084g，0.30mmol)、三乙胺(0.036g，0.36mmol)与四氢呋喃(6.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.044g，0.331mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.141g，0.305mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.215g，1.023mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.086g，0.662mmol)、乙腈(5.0mL)混合并于0℃搅拌60分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌16小时(原料：目标物＝1：59(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-MePhe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.177g，收率85％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+689.5
合成例44：Fmoc-Glu(tBu)-MePhe-MePhe-MeAla-Tyr-OH的合成
[化学式60]
Figure BDA0003256684440000511
溶液A
使Fmoc-Glu(tBu)-OH(0.091g，0.21mmol)、三乙胺(0.026g，0.257mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.032g，0.24mmol)，搅拌1小时。
溶液B
使Boc-MePhe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.177g，0.257mmol)、三氟乙酸(3.0mL)混合，进而在25℃的状态下搅拌30分钟。将溶液浓缩，除去三氟乙酸，使乙腈(20mL)混合并浓缩。向得到的残余物中加入乙腈(8.0mL)、三乙胺(0.026g，0.257mmol)，将溶液浓缩，除去溶剂和三乙胺。在得到的残余物中混合乙腈(5.0mL)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.167g，0.80mmol)，于25℃搅拌5分钟，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在25℃的状态下搅拌17小时(原料：目标物＝1：5(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(30mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-Glu(tBu)-MePhe-MePhe-MeAla-Tyr-OH(0.192g，收率90％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+730.4，+996.5
合成例45：Fmoc-Cys(Trt)-MePhe-OH的合成
[化学式61]
Figure BDA0003256684440000512
使Fmoc-Cys(Trt)-OH(0.147g，0.251mmol)、三乙胺(0.031g，0.30mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.037g，0.28mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.054g，0.30mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.130g，0.62mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌20分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌1小时(原料：目标物＝1：28(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液、水、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-Cys(Trt)-MePhe-OH(0.187g，收率100％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+243.2(三苯甲基阳离子)、+747.2
合成例46：Boc-Arg(Cbz)2-MePhe-OH的合成
[化学式62]
Figure BDA0003256684440000521
使Boc-Arg(Cbz)2-OH(0.136g，0.250mmol)、三乙胺(0.030g，0.30mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.037g，0.28mmol)，搅拌45分钟。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.054g，0.30mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.128g，0.62mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于75℃搅拌10分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌1小时以上(原料：目标物＝1：25(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Arg(Cbz)2-MePhe-OH(0.175g，收率99％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+704.5
合成例47：Boc-Arg(Cbz)2-MeAla-Phe-OH的合成
[化学式63]
Figure BDA0003256684440000531
使Boc-Arg(Cbz)2-OH(0.136g，0.251mmol)、三乙胺(0.030g，0.30mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.037g，0.28mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeAla-Phe-OH(0.075g，0.30mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.130g，0.621mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于25℃搅拌20分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌14小时(原料：目标物＝1：13(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(20mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Boc-Arg(Cbz)2-MeAla-Phe-OH(0.192g，收率99％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+775.5
合成例48：Fmoc-His(Boc)-MePhe-OH的合成
[化学式64]
Figure BDA0003256684440000532
使Fmoc-His(Boc)-OH(0.120g，0.251mmol)、N-甲基吗啉(0.033g，0.33mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(0.067g，0.30mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.058g，0.33mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.141g，0.679mmol)、乙腈(4mL)混合并于75℃搅拌20分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌13小时(原料：目标物＝1：6(分析条件2))。用乙酸乙酯(40mL)将得到的反应液稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-His(Boc)-MePhe-OH(0.131g，收率82％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+539.6，+639.4
合成例49：Fmoc-MeHis(Trt)-Leu-OH的合成
[化学式65]
Figure BDA0003256684440000541
溶液A
使Fmoc-MeHis(Trt)-OH(1.27g，2.00mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(0.015g，0.20mmol)与四氢呋喃(30mL)混合，于0℃加入氯化亚砜(1.19g，10.0mmol)，于25℃搅拌1小时。将溶液浓缩，除去氯化亚砜和溶剂，混合四氢呋喃(10mL)并浓缩。向得到的残余物中加入四氢呋喃(10mL)，得到浅黄色透明的酰氯溶液。
溶液B
使Leu-OH(0.315g，2.40mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.30g，6.26mmol)、乙腈(5mL)混合，于80℃搅拌1小时，得到无色透明溶液。
缩合工序
将溶液A冷却至0℃后直接与溶液B混合，进而在0℃的状态下搅拌1小时(原料：目标物＝1：25(分析条件3))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用硅胶柱色谱进行纯化，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-MeHis(Trt)-Leu-OH(1.37g，收率92％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+747.4
合成例50：H-MeHis(Trt)-Leu-OH的合成
[化学式66]
Figure BDA0003256684440000551
使Fmoc-His(Trt)-Leu-OH(0.202g，0.270mmol)、三乙胺(0.564g，5.40mmol)与乙腈(4.0mL)、四氢呋喃(4.0mL)混合，于80℃搅拌60分钟。将得到的反应液浓缩，加入四氢呋喃(3.0mL)、二异丙基醚(9.0mL)使其悬浮，用桐山漏斗滤取所生成的固体。用二异丙基醚(10mL)进行清洗，并进行干燥，以白色固体的形式得到H-MeHis(Trt)-Leu-OH(0.130g，收率92％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+525.8
合成例51：Fmoc-Phe-MeHis(Trt)-Leu-OH的合成
[化学式67]
Figure BDA0003256684440000552
使Fmoc-Phe-OH(0.078g，0.20mmol)、三乙胺(0.024g，0.24mmol)与四氢呋喃(5.0mL)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.030g，0.22mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeHis(Trt)-Leu-OH(0.116g，0.221mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.096g，0.46mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于25℃搅拌30分钟而制备的溶液，进而在25℃的状态下搅拌5小时(原料：目标物＝1：5(分析条件2))。将得到的反应液浓缩后，用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用10质量％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液、水、饱和氯化钠水溶液进行清洗。将得到的有机层浓缩，以白色固体的形式得到Fmoc-Phe-MeHis(Trt)-Leu-OH(0.154g，收率86％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+894.5
合成例52：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
[化学式68]
Figure BDA0003256684440000561
使Fmoc-Val-OH(0.101g，0.298mmol)、三乙胺(0.053mL，0.383mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入新戊酰氯(0.043mL，0.354mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.080g，0.446mmol)、三甲基氯硅烷(0.070mL，0.554mmol)、三乙胺(0.082mL，0.592mmol)、乙腈(0.80g)混合并于50℃搅拌1.5小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌70小时(原料：目标物＝3.5：1)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(3.0g)及饱和食盐水溶液(2.0g)清洗2次。使用得到的有机层进行HPLC分析，结果，定量收率为11％。
以下，在没有特别记载的情况下，原料Fmoc-Val-OH与产物Fmoc-Val-MePhe-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件4＞而算出。
＜分析条件4＞
高效液相色谱：SHIMADZU制HPLC LC-20A
色谱柱：Agilent制Poroshell 120EC-C18(2.7μm，3.0×100mm)
柱温箱温度：40℃
洗脱液：乙腈：0.05vol％磷酸水溶液
50:50(0-15分钟)、50:50-95:5(15-18分钟)、95:5(18-22分钟)(v/v)
洗脱液速度：0.7mL/分钟
检测波长：210nm
以下，在没有特别记载的情况下，Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率利用基于＜分析条件4＞的定量分析法算出。
标准物质：利用硅胶色谱法将合成例57所记载的方法中得到的Fmoc-Val-MePhe-OH纯化，作为标准物质。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+501.22
定量方法：绝对标准曲线法
合成例53：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.38mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入新戊酰氯(0.043mL，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.44mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.81g)混合并于50℃搅拌1.5小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌70小时(原料：目标物＝1：7)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为79％。
合成例54：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、N-甲基吗啉(0.042mL，0.383mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入氯甲酸异丁酯(0.046mL，0.35mmol)，搅拌5分钟。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.44mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌21小时(原料：目标物＝3.5：1)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为18％。
合成例55：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.38mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入2-乙基丁酰氯(0.048mL，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.44mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌110小时(原料：目标物＝1：13)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为87％。
合成例56：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.38mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(0.049mL，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.44mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌95小时(原料：目标物＝1：18)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为89％。
合成例57：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.058mL，0.32mmol)与乙腈(1.0g)混合，于0℃加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(0.107g，0.354mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.442mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌67小时、于20℃搅拌7小时(原料：目标物＝1：35)。将得到的反应液用甲醇(0.5mL)、N,N-二异丙基乙胺(0.05mL)淬灭后，用乙酸乙酯(5.0g)进行稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为96％。
2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯参考日本专利第3406093号来合成。
合成例58：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、N-甲基吗啉(0.071mL，0.648mmol)与N,N-二甲基乙酰胺(5.9mL)混合，于0℃加入氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(0.105g，0.589mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.106g，0.589mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.288mL、1.179mmol)、乙腈(7.9mL)混合并于75℃搅拌15分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌114小时、于20℃搅拌4小时(原料：目标物＝1：11)。将得到的反应液用甲醇(5.0mL)、N,N-二异丙基乙胺(0.50mL)淬灭后，用乙酸乙酯(30.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(18.0g)及饱和食盐水溶液(6.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为85％。
合成例59：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、N-甲基吗啉(0.071mL，0.648mmol)与N,N-二甲基乙酰胺(5.9mL)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三苯甲基戊烷-3-基酯(0.114g，0.589mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.106g，0.589mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.288mL、1.179mmol)、乙腈(7.9mL)混合并于75℃搅拌15分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌91小时、于20℃搅拌7小时(原料：目标物＝1：10)。将得到的反应液用甲醇(5.0mL)、N,N-二异丙基乙胺(0.50mL)淬灭后，用乙酸乙酯(30.0g)进行稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(18.0g)及饱和食盐水溶液(6.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为88％。
合成例60：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.065mL，0.38mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入1-金刚烷甲酰氯(0.070g，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.44mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌96小时(原料：目标物＝1：10)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为90％。
合成例61：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)、N-甲基吗啉(0.071mL，0.65mmol)与N,N-二甲基乙酰胺(5.9mL)混合，于0℃加入氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(0.13g，0.59mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.106g，0.59mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.29mL、1.18mmol)、乙腈(7.9mL)混合并于75℃搅拌15分钟而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌164小时(原料：目标物＝1：9)。将得到的反应液用甲醇(5.0mL)、N,N-二异丙基乙胺(0.50mL)淬灭后，用乙酸乙酯(30.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(18.0g)、饱和食盐水溶液(10.0g)及饱和食盐水溶液(6.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为83％。
合成例62：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.383mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入2-乙基己酰氯(0.061mL，0.354mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.442mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌111小时(原料：目标物＝1：11)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为90％。
合成例63：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.383mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入2-(4-氯苯基)-3-甲基丁酰氯(0.070mL，0.354mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.442mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌66小时(原料：目标物＝1：10)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Fmoc-Val-MePhe-OH的定量收率为84％。
合成例64：Fmoc-Val-MePhe-OH的合成
[化学式69]
Figure BDA0003256684440000611
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.295mmol)、三乙胺(0.053mL，0.383mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入3,5,5-三甲基己酰氯(0.067mL，0.354mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.079g，0.442mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.135mL，0.552mmol)、乙腈(0.79g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌68小时(原料：目标物＝16：1)。
合成例65：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式70]
Figure BDA0003256684440000612
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、三乙胺(20mg，0.20mmol)混合，于0℃加入新戊酰氯(24mg，0.20mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌3小时(原料：目标物＝1：10(分析条件5))。用乙酸乙酯(2.5g)将得到的反应液稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为77％(分析条件5)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+608.44
以下，在没有特别记载的情况下，原料Cbz-Phe-OH与产物Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件5＞而算出。
＜分析条件5＞
高效液相色谱：SHIMADZU制HPLC-20A
色谱柱：Agilent制Poroshell 120EC-C18(2.7μm，3.0×100mm)
柱温箱温度：50℃
洗脱液：0.2vоl％磷酸乙腈溶液：0.2vоl％磷酸水溶液
12：88-95：5(0-15分钟)、95：5(15-19分钟)、(v/v)
洗脱液速度：0.7mL/分钟
检测波长：214nm
以下，在没有特别记载的情况下，Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率利用基于＜分析条件5＞的定量分析法算出。
标准物质：利用硅胶色谱法将由合成例71中记载的方法合成的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH纯化，作为标准物质。
示出标准物质的NMR及MASS。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：
δppm：2.64(3H，s)，2.67-3.33(6H，m)，4.27-4.45(3H，m)，4.89(2H，s)，5.21(1H，m)，7.04-7.33(20H，m)
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+608.44
定量方法：绝对标准曲线法
合成例66：H-MePhe-Phe-OH的合成
[化学式71]
Figure BDA0003256684440000621
使Cbz-MePhe-OH(2.0g，6.38mmol)、二氯甲烷(20.0g)、N,N-二异丙基乙胺(2.9g，22.3mmol)、H-Phe-OBn(2.2g，7.66mmоl)混合，于22℃加入N-[1-(氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基(吗啉代)]脲六氟磷酸盐(3.28g，7.66mmol)，搅拌1小时30分钟。向得到的反应液中加入10质量％盐酸(16g)、水(16g)并进行分液后，对有机层进行2次水洗。然后，加入10质量％碳酸氢钾水溶液(16g)、水(16g)，进行2次分液后，对有机层进行水洗。将得到的有机层减压浓缩，用硅胶柱色谱进行纯化，用三氟乙醇(40g)进行稀释。向得到的溶液中加入10质量％Pd-C(0.4g)后，在氢气气氛下，于室温搅拌14小时30分钟。将反应液减压浓缩，用甲醇(300g)进行稀释，过滤后，针对得到的过滤物，再次用甲醇(300g)稀释，并进行过滤，将上述操作重复3次，将得到的滤液全部浓缩，用乙腈(100g)进行稀释，并再次浓缩，以白色固体的形式得到H-MePhe-Phe-OH(1.35g，收率65％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+327.2
合成例67：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、N-甲基吗啉(20mg，0.20mmol)混合，于0℃加入氯甲酸异丁酯(27mg，0.20mmol)，搅拌3小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌3小时(原料：目标物＝1：1.6)。用乙酸乙酯(2.5g)将得到的反应液稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为43％。
合成例68：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、三乙胺(20mg，0.20mmol)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(27mg，0.20mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌21小时(原料：目标物＝1：24)。用乙酸乙酯(2.5g)将得到的反应液稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为95％。
合成例69：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、三乙胺(20mg，0.20mmol)混合，于0℃加入2-乙基丁酰氯(27mg，0.20mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌27小时(原料：目标物＝1：30)。将得到的反应液用乙酸乙酯(2.5g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为102％。
合成例70：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、三乙胺(20mg，0.20mmol)混合，于25℃加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(124mg，0.20mmol)，搅拌9小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌14小时(原料：目标物＝1：80)。将得到的反应液用乙酸乙酯(2.5g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为100％。
合成例71：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(99mg，0.33mmol)、乙腈(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(52mg，0.40mmol)混合，于室温加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(250mg，0.41mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(164mg，0.50mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(195mg，0.96mmol)、乙腈(1.6g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，于25℃搅拌21小时(原料：目标物＝1：335)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0g)稀释，利用10质量％柠檬酸水溶液(3.0g)进行分液，然后，用饱和氯化钠水溶液(2.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为100％。
合成例72：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(0.5g)、N-甲基吗啉(22mg，0.22mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(39mg，0.20mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌3小时(原料：目标物＝1：32)。将得到的反应液用乙酸乙酯(2.5g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为99％。
合成例73：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(0.5g)、N-甲基吗啉(22mg，0.22mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(39mg，0.20mmol)，搅拌1.5小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌29小时(原料：目标物＝1：15)。将得到的反应液用乙酸乙酯(2.5g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(1.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为83％。
合成例74：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、四氢呋喃(0.5g)、N,N-二异丙基乙胺(30mg，0.23mmol)混合，于0℃加入1-金刚烷甲酰氯(51mg，0.26mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(110mg，1.0mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(129mg，0.63mmol)、乙腈(1.1g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，于0℃搅拌28小时(原料：目标物＝1：58)。将得到的反应液用乙酸乙酯(3.0g)稀释，利用10质量％柠檬酸水溶液(3.0g)进行分液，然后，用饱和氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。对得到的有机层进行定量，以98％的定量收率得到Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH。
合成例75：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(0.050g，0.17mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(3.0mL)、N-甲基吗啉(0.040mL，0.37mmol)混合，于0℃加入氯甲酸4-乙基-2,2-二甲基己烷-3-基酯(0.074g，0.33mmol)，搅拌1小时30分钟。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(0.109g，0.334mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.16mL，0.67mmol)、乙腈(4.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至室温，搅拌21小时(原料：目标物＝1：43)。将得到的反应液用乙酸乙酯(15g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(9.0g)及饱和食盐水溶液(5.0g)进行分液，然后，用饱和食盐水溶液(3.0g)清洗2次。得到的有机层的Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的定量收率为92％。
合成例76：Cbz-Phe-MePhe-Phe-OH的合成
使Cbz-Phe-OH(50mg，0.17mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(0.5g)、N-甲基吗啉(22mg，0.22mmol)混合，于0℃加入氯甲酸3,3-二甲基丁烷-2-基酯(39mg，0.20mmol)，搅拌1.5小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-Phe-OH(82mg，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(97mg，0.48mmol)、乙腈(0.82g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，升温至25℃，搅拌16小时(原料：目标物＝1：1.2)。
合成例77：Boc-Val-Pro-OH的合成
[化学式72]
Figure BDA0003256684440000661
使Boc-Val-OH(128mg，0.59mmol)、四氢呋喃(1.3g)、N-甲基吗啉(60mg，0.59mmol)混合，于0℃加入氯甲酸异丁酯(72mg，0.59mol)，搅拌2.5小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(71mg，0.62mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.16g，1.2mmol)、三甲基氯硅烷(0.13g，1.2mmol)、二氯甲烷(3mL)混合并于40℃搅拌2小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15小时，得到Boc-Val-Pro-OH(原料：目标物＝1：15)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+315.20
以下，在没有特别记载的情况下，原料Boc-Val-OH与产物Boc-Val-Pro-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件5＞而算出。
合成例78：Boc-Val-Pro-OH的合成
使Boc-Val-OH(128mg，0.59mmol)、乙腈(1.3g)、N,N-二异丙基乙胺(91mg，0.71mmol)混合，于25℃加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(0.43g，0.71mol)，搅拌4小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(71mg，0.62mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.22g，1.1mmol)、乙腈(1.3g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在25℃的状态下搅拌15小时(原料：目标物＝1：731)。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，用水(2mL)、10质量％柠檬酸水溶液(2mL)进行分液，然后，依次用5质量％氯化钠水溶液(5mL)、水(5mL)进行清洗。得到的有机层的Boc-Val-Pro-OH的定量收率为94％。
以下，在没有特别记载的情况下，Boc-Val-Pro-OH的定量收率利用基于＜分析条件5＞的定量分析法算出。
标准物质：将以Indian Journal of Chemistry 2004年、43B卷、1282页为参考而另行分离纯化的Boc-Val-Pro-OH作为标准物质。
示出标准物质的MASS。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+315.20
定量方法：绝对标准曲线法
合成例79：Boc-Val-Pro-OH的合成
使Boc-Val-OH(50mg，0.23mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(1.0g)、N-甲基吗啉(30mg，0.30mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(53mg，0.28mmol)，搅拌2.5小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(34mg，0.77mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.80g，1.0mmol)、乙腈(0.50g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15小时(原料：目标物＝1：99)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层及水层的Boc-Val-Pro-OH的定量收率为90％。
合成例80：Boc-Val-Pro-OH的合成
使Boc-Val-OH(100mg，0.46mmol)、四氢呋喃(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(77mg，0.60mmol)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(74mg，0.55mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(64mg，0.55mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18g，0.87mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌21小时(原料：目标物＝1：520)。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，用水(2mL)、10质量％柠檬酸水溶液(2mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2mL)清洗2次。得到的有机层的Boc-Val-Pro-OH的定量收率为99％。
合成例81：Boc-Val-Pro-OH的合成
使Boc-Val-OH(100mg，0.46mmol)、四氢呋喃(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(77mg，0.60mmol)混合，于0℃加入2-乙基丁酰氯(74mg，0.55mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(64mg，0.55mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18g，0.87mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌21小时(原料：目标物＝1：248)。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，用水(2mL)、10质量％柠檬酸水溶液(2mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2mL)清洗2次。得到的有机层的Boc-Val-Pro-OH的定量收率为99％。
合成例82：Boc-Val-Pro-OH的合成
使Boc-Val-OH(100mg，0.46mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(1.0g)、N-甲基吗啉(61mg，0.60mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(99mg，0.55mol)，搅拌2.5小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(64mg，0.55mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18g，0.88mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌21小时(原料：目标物＝1：179)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层及水层的Boc-Val-Pro-OH的定量收率为89％。
合成例83：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
[化学式73]
Figure BDA0003256684440000691
使Fmoc-Val-OH(200mg，0.59mmol)、四氢呋喃(2.0g)、N-甲基吗啉(60mg，0.59mmol)混合，于0℃加入氯甲酸异丁酯(72mg，0.59mmol)，搅拌2.5小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(55mg，0.62mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.16g，1.2mmol)、三甲基氯硅烷(0.13g，1.2mmol)、二氯甲烷(3mL)混合并于40℃搅拌2小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15小时，得到Fmoc-Val-MeGly-OH(原料：目标物＝1：1.9)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+411.28
以下，在没有特别记载的情况下，原料Fmoc-Val-OH与产物Fmoc-Val-MeGly-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件5＞而算出。
合成例84：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(200mg，0.59mmol)、乙腈(2.0g)、N,N-二异丙基乙胺(91mg，0.71mmol)混合，于25℃加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(0.43g，0.71mol)，搅拌4小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(79mg，0.88mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.22g，1.1mmol)、乙腈(2.0g)混合并于75℃搅拌1小时而制备的溶液，在25℃的状态下搅拌15小时(原料：目标物＝1：61)。将得到的反应液用乙酸乙酯(3.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。得到的有机层的Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率为97％。
以下，在没有特别记载的情况下，Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率利用基于＜分析条件5＞的定量分析法算出。
标准物质：将以Indian Journal of Chemistry 2004年、43B卷、1282页为参考而另行分离纯化的Fmoc-Val-MeGly-OH作为标准物质。
示出标准物质的MASS。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+411.28
定量方法：绝对标准曲线法
合成例85：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(200mg，0.59mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(2.0g)、N-甲基吗啉(78mg，0.77mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(0.14g，0.71mol)，搅拌2.5小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(79mg，0.88mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.22g，1.1mmol)、乙腈(2.0g)混合并于75℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15小时(原料：目标物＝1：64)。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，用水(5mL)、10质量％柠檬酸水溶液(5mL)进行分液，然后，用乙酸乙酯(10mL)将水层萃取。将有机层混合，用10质量％氯化钠水溶液清洗。得到的有机层的Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率为97％。
合成例86：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(100mg，0.29mmol)、四氢呋喃(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(50mg，0.38mmol)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(48mg，0.35mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(32mg，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.11g，0.55mmol)、乙腈(1.0g)混合并于75℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌20小时(原料：目标物＝1：48)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0mL)清洗2次。得到的有机层的Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率为95％。
合成例87：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(100mg，0.29mmol)、四氢呋喃(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(50mg，0.38mmol)混合，于0℃加入2-乙基丁酰氯(48mg，0.35mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(32mg，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.11g，0.55mmol)、乙腈(1.0g)混合并于75℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌20小时(原料：目标物＝1：20)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0mL)清洗2次。得到的有机层的Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率为92％。
合成例88：Fmoc-Val-MeGly-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(100mg，0.29mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(1.0g)、N-甲基吗啉(39mg，0.38mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(63mg，0.35mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGly-OH(32mg，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.11g，0.55mmol)、乙腈(1.0g)混合并于75℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌20小时(原料：目标物＝1：33)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0mL)清洗2次。得到的有机层及水层的Fmoc-Val-MeGly-OH的定量收率为88％。
合成例89：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
[化学式74]
Figure BDA0003256684440000711
使Boc-Cys(Bn)-OH(200mg，0.64mmol)、氯仿(1.3mL)、三乙胺(67mg，0.66mmol)混合，于-20℃加入新戊酰氯(81mg，0.67mol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(96mg，0.84mmol)、三乙胺(0.16g，1.6mmol)、三甲基氯硅烷(0.11g，1.0mmol)、二氯甲烷(1.6mL)、N,N-二甲基甲酰胺(0.32mL)混合并于40℃搅拌2小时而制备的溶液，在-20℃的状态下搅拌3小时，得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH(原料：目标物＝1：2.2)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+409.26
以下，在没有特别记载的情况下，原料Boc-Cys(Bn)-OH与产物Boc-Cys(Bn)-Pro-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件6＞而算出。
＜分析条件6＞
高效液相色谱：SHIMADZU制HPLC-20A
色谱柱：Agilent制Poroshell 120EC-C18(2.7μm，3.0×100mm)
柱温箱温度：50℃
洗脱液：0.2vоl％磷酸乙腈溶液：0.2vоl％磷酸水溶液
35：65(7分钟)，35：65-95：5(7-14分钟)，95：5(14-18分钟)、(v/v)
洗脱液速度：0.7mL/分钟
检测波长：214nm
合成例90：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
使Boc-Cys(Bn)-OH(100mg，0.32mmol)、乙腈(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(50mg，0.39mmol)混合，于25℃加入2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯的50质量％甲苯溶液(231mg，0.39mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(48mg，0.42mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12g，0.59mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在25℃的状态下搅拌23小时(原料：目标物＝1：265)。将得到的反应液用乙酸乙酯(3.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。对得到的有机层及水层进行定量，以定量收率97％得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH。
以下，在没有特别记载的情况下，Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的定量收率利用基于＜分析条件6＞的定量分析法而算出。
标准物质：将以Chemistry of Nature Compounds 1992年、28卷、344页为参考而另行分离纯化的Boc-Cys(Bn)-Pro-OH作为标准物质。
示出标准物质的MASS。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+409.26
定量方法：绝对标准曲线法
合成例91：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
使Boc-Cys(Bn)-OH(100mg，0.32mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(1.0g)、N-甲基吗啉(42mg，0.42mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,2,4-三甲基戊烷-3-基酯(74mg，0.39mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(48mg，0.42mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12g，0.59mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌15小时(原料：目标物＝1：461)。将得到的反应液用乙酸乙酯(3.0g)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(1.0g)清洗2次。对得到的有机层及水层进行定量，以定量收率96％得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH。
合成例92：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
使Boc-Cys(Bn)-OH(100mg，0.32mmol)、乙腈(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(54mg，0.41mmol)混合，于0℃加入2,2-二甲基丁酰氯(52mg，0.38mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(44mg，0.38mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12g，0.61mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌19小时(原料：目标物＝1：31)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0mL)清洗2次。对得到的有机层进行定量，以定量收率97％得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH。
合成例93：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
使Boc-Cys(Bn)-OH(100mg，0.32mmol)、乙腈(1.0g)、N,N-二异丙基乙胺(54mg，0.41mmol)混合，于0℃加入2-乙基丁酰氯(52mg，0.38mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(44mg，0.38mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12g，0.61mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌19小时(原料：目标物＝1：30)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0mL)清洗2次。对得到的有机层进行定量，以定量收率97％得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH。
合成例94：Boc-Cys(Bn)-Pro-OH的合成
使Boc-Cys(Bn)-OH(100mg，0.32mmol)、N,N-二甲基乙酰胺(1.0g)、N-甲基吗啉(42mg，0.42mmol)混合，于0℃加入氯甲酸2,4-二甲基戊烷-3-基酯(69mg，0.38mol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-Pro-OH(48mg，0.42mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12g，0.59mmol)、乙腈(1.0g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，在0℃的状态下搅拌19小时(原料：目标物＝1：60)。将得到的反应液用乙酸乙酯(5.0mL)稀释，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0mL)进行分液，然后，用10质量％氯化钠水溶液(2.0g)清洗2次。对得到的有机层进行定量，以定量收率98％得到Boc-Cys(Bn)-Pro-OH。
合成例95：Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH的合成
[化学式75]
Figure BDA0003256684440000741
使Cbz-Phe-Phe-OH(0.100g，0.224mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.050mL，0.291mmol)与四氢呋喃(1.0g)混合，于0℃加入1-金刚烷甲酰氯(0.0534g，0.269mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.060g，0.336mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.103mL，0.420mmol)、乙腈(0.60g)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进而在0℃的状态下搅拌22小时(原料：目标物＝1：32)。用2％正丙胺/乙腈溶液将得到的反应液淬灭，用乙酸乙酯(5.0g)稀释后，用10质量％柠檬酸水溶液(2.0g)及饱和食盐水溶液(1.0g)清洗2次。收集的有机层的Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH的定量收率为89％。
原料Cbz-Phe-Phe-OH与产物Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH之比通过使用了高效液相色谱的分析＜分析条件7＞而算出。
＜分析条件7＞
高效液相色谱：SHIMADZU制HPLC LC-20A
色谱柱：Agilent制Poroshell120EC-C18(2.7μm，3.0×100mm)
柱温箱温度：50℃
洗脱液：0.2vоl％TFA/乙腈：甲醇＝1：1
0.2vоl％TFA水溶液
55：45(0-20分钟)，55：45-95：5(20-20.1分钟)，95：5(20.1-24分钟)，平衡时间(Post time)5分钟(v/v)
洗脱液速度：0.7mL/分钟
检测波长：214nm
Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH的定量收率利用基于＜分析条件7＞的定量分析法而算出。
标准物质：以合成例96中合成的Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH作为标准物质。
示出标准物质的MASS。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+608.4
定量方法：绝对标准曲线法
合成例96：Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH的合成
向2-氯三苯甲基氯化物树脂(200-400目)(0.10g，0.13mmol)中加入二氯甲烷(1.0mL)、Fmoc-MePhe-OH(0.062g，0.15mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.61mmol)，搅拌整夜。向得到的悬浮液中依次加入下述溶液，每次进行过滤：(1)(二氯甲烷/甲醇/N,N-二异丙基乙胺＝17/2/1)的混合溶液3次，(2)二氯甲烷3次，(3)N-甲基吡咯烷酮2次，(4)二氯甲烷2次，(5)甲醇5次。以过滤后的树脂充分浸渍的方式加入N-甲基吡咯烷酮，搅拌15分钟。然后进行过滤，以树脂充分浸渍的方式加入20％哌啶/N-甲基吡咯烷酮溶液，搅拌20分钟。继续实施过滤，将树脂用N-甲基吡咯烷酮清洗10次。向得到的树脂(0.10g，0.050mmol)中，加入0.5M氰基(羟亚胺基)乙酸乙酯/N-甲基吡咯烷酮溶液0.80mL、Fmoc-Phe-OH(0.078mg，0.20mmol)、N-[1-(氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基(吗啉代)]脲六氟磷酸盐(0.086g，0.20mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.085mL，0.50mmol)，搅拌2小时。将反应溶液过滤，将树脂用N-甲基吡咯烷酮清洗10次。然后，再次实施上述缩合·清洗操作，在添加20％哌啶/N-甲基吡咯烷酮后，将20分钟的搅拌和利用N-甲基吡咯烷酮进行的清洗实施10次。向得到的树脂中，加入0.5M氰基(羟亚胺基)乙酸乙酯/N-甲基吡咯烷酮溶液0.400mL、Cbz-Phe-OH(0.060mg，0.20mmol)、N,N-二异丙基碳二亚胺(0.032mL，0.20mmol)，搅拌整夜。将反应液过滤后，用N-甲基吡咯烷酮清洗10次，用甲醇清洗10次，以树脂充分浸渍的方式加入30％六氟异丙醇，搅拌10分钟后进行过滤，将上述操作实施5次。对收集的溶液进行减压浓缩，结果，得到Cbz-Phe-Phe-MePhe-OH(0.031g，100％)。
MASS(ESI+)m/z；(M+H)+608.4
上述合成例中，合成例1至7、66及96为实施例中使用的原料的合成所涉及的参考例，合成例1至2及合成例3至4也是本申请的化合物涉及的发明的实施例。另外，合成例8至13、18至28、32至35、38、41至48、51、55至63、68至76、78至82、84至88、90至95为本申请的肽的制造方法涉及的发明的实施例，合成例14至17、29至31、36至37、39至40、49至50、52至54、64至65、67、77、83、89及96为其比较例。
合成例97：Fmoc-Val-MeTyr(tBu)-OH的合成
[化学式76]
Figure BDA0003256684440000761
使Fmoc-Val-OH(0.102g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)、新戊酰氯(0.041mL，0.33mmol)，于0℃搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeTyr(tBu)-OH(0.090g，0.36mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.19mL，0.72mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌20小时(原料：目标物＝1：7(分析条件3))。用乙酸乙酯(20mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-MeTyr(tBu)-OH(0.18g，收率106％)。
合成例98：Fmoc-Val-MeTyr(tBu)-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeTyr(tBu)-OH(0.090g，0.36mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.185mL，0.72mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌24小时(原料：目标物＝1：20(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeTyr(tBu)-OH(0.170g，收率99％)。
合成例99：Fmoc-Val-MeVal-OH的合成
[化学式77]
Figure BDA0003256684440000771
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)、新戊酰氯(0.041mL，0.33mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeVal-OH(0.047g，0.36mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.19mL，0.72mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝2.4：1(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)、10质量％柠檬酸水溶液(5mL)、水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-MeVal-OH(0.16g，收率116％)。
合成例100：Fmoc-Val-MeVal-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeVal-OH(0.032g，0.24mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12mL，0.48mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌2小时，然后于25℃搅拌36小时(原料：目标物＝1：16(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeVal-OH(0.092g，收率92％)。
合成例101：Fmoc-Val-MeSer(tBu)-OH的合成
[化学式78]
Figure BDA0003256684440000781
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)、新戊酰氯(0.041mL，0.33mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeSer(tBu)-OH(0.063g，0.36mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.19mL，0.72mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌15小时。(原料：目标物＝1：19(分析条件3))。用乙酸乙酯(5mL)将得到的反应液稀释，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-MeSer(tBu)-OH(0.14g，收率94％)。
合成例102：Fmoc-Val-MeSer(tBu)-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeSer(tBu)-OH(0.045g，0.26mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.13mL，0.52mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：25(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeSer(tBu)-OH(0.095g，收率96％)。
合成例103：Fmoc-Val-MeDap(Boc)-OH的合成
[化学式79]
Figure BDA0003256684440000791
使Fmoc-Val-OH(0.034g，0.1mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.017mL，0.12mmol)、新戊酰氯(0.014mL，0.11mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使Nα-Boc-Nβ-甲基-2,3-二氨基丙酸(H-MeDap(Boc)-OH)(0.026g，0.12mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.62mL，0.24mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌24小时。(原料：目标物＝1：2.4(分析条件3))。
合成例104：Fmoc-Val-MeDap(Boc)-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeDap(Boc)-OH(0.052g，0.24mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12mL，0.48mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌36小时(原料：目标物＝1：20(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeDap(Boc)-OH(0.107g，收率99％)。
合成例105：Fmoc-Val-MeGln(Trt)-OH的合成
[化学式80]
Figure BDA0003256684440000801
使Fmoc-Val-OH(0.33g，0.10mmol)与四氢呋喃(0.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.017mL，0.12mmol)、新戊酰氯(0.014mL，0.11mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGln(Trt)-OH(0.048g，0.12mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.062mL，0.24mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌30分钟，然后于25℃搅拌24小时(原料：目标物＝1：8(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGln(Trt)-OH(0.75g，收率105％)。
合成例106：Fmoc-Val-MeGln(Trt)-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGln(Trt)-OH(0.097g，0.24mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.12mL，0.48mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌44小时(原料：目标物＝1：21(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGln(Trt)-OH(0.151g，收率104％)。
合成例107：Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH的合成
[化学式81]
Figure BDA0003256684440000811
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.050mL，0.36mmol)、新戊酰氯(0.041mL，0.33mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGlu(OtBu)-OH(0.098g，0.45mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.23mL，0.90mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌30分钟，然后于25℃搅拌18小时(原料：目标物＝1：18(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH(0.16g，收率100％)。
合成例108：Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH的合成
使Fmoc-Val-OH(0.068g，0.20mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.033mL，0.24mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.66g，0.22mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGlu(OtBu)-OH(0.078g，0.36mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.185mL，0.72mmol)、乙腈(1.5mL)混合、并于50℃搅拌1小时而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌24小时(原料：目标物＝1：25(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(5mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，搅拌1小时后，依次用水(5mL)、饱和氯化钠水溶液(5mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH(0.176g，收率109％)。
合成例109：Fmoc-Val-EtAla-OH的合成
[化学式82]
Figure BDA0003256684440000821
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.11g，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-EtAla-OH(0.041g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌22小时(原料：目标物＝1：19(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙腈(2.0mL)稀释后，加入己烷(2.0mL)进行清洗。用乙酸乙酯(6.0mL)将乙腈溶液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(5.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以浅黄色固体的形式得到Fmoc-Val-EtAla-OH(0.13g，收率104％)。
合成例110：Fmoc-Ala-BnAla-OH的合成
[化学式83]
Figure BDA0003256684440000822
使Fmoc-Ala-OH(0.10g，0.32mmol)与四氢呋喃(1.6mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.054mL，0.39mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.13g，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-BnAla-OH(0.069g，0.39mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.19mL，0.77mmol)、乙腈(1.6mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌12小时(原料：目标物＝1：1(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙酸乙酯(8.0mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(6.0mL)、水(6.0mL)、饱和氯化钠水溶液(6.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Ala-BnAla-OH(0.13g，收率82％)。
合成例111：Fmoc-Ala-BnAla-OH的合成
[化学式84]
Figure BDA0003256684440000831
使Fmoc-Ala-OH(0.10g，0.32mmol)与四氢呋喃(1.6mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.054mL，0.39mmol)、新戊酰氯(0.44mL，0.35mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-BnAla-OH(0.069g，0.39mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.19mL，0.77mmol)、乙腈(1.6mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌12小时(原料：目标物＝3：1(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙酸乙酯(8.0mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(6.0mL)、水(6.0mL)、饱和氯化钠水溶液(6.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Ala-BnAla-OH(0.12g，80％)。
合成例112：Fmoc-Gly-EtAla-Phe-OH的合成
[化学式85]
Figure BDA0003256684440000832
使Fmoc-Gly-OH(0.020g，0.067mmol)与四氢呋喃(0.42mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.011mL，0.080mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.026g，0.074mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-EtAla-Phe-OH(0.022g，0.080mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.039mL，0.16mmol)、乙腈(0.84mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌6小时(原料：目标物＝1：33(分析条件3))。用乙酸乙酯(5.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(5.0mL)、水(5.0mL)、饱和氯化钠水溶液(5.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Gly-EtAla-Phe-OH(0.040g，收率109％)。
合成例113：Fmoc-Gly-EtAla-Phe-OH的合成
[化学式86]
Figure BDA0003256684440000841
使Fmoc-Gly-OH(0.025g，0.084mmol)与四氢呋喃(0.42mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.014mL，0.10mmol)、新戊酰氯(0.011mL，0.092mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-EtAla-Phe-OH(0.027g，0.10mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.049mL，0.20mmol)、乙腈(0.42mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌6小时(原料：目标物＝1：9(分析条件3))。用乙酸乙酯(5.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(5.0mL)、水(5.0mL)、饱和氯化钠水溶液(5.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Gly-EtAla-Phe-OH(0.050g，收率109％)。
合成例114：Fmoc-Val-cHexmGly-OH的合成
[化学式87]
Figure BDA0003256684440000851
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.098g，0.32mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使N-(环己基甲基)甘氨酸(H-cHexmGly-OH)(0.061g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：32(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙腈(6.0mL)稀释后，加入己烷(11mL)进行清洗。用乙酸乙酯(10mL)将乙腈溶液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)、1M盐酸(10mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(12mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-cHexmGly-OH(0.15g，收率104％)。
合成例115：Fmoc-Val-cHexmGly-OH的合成
[化学式88]
Figure BDA0003256684440000852
使Fmoc-Val-OH(0.030g，0.088mmol)与四氢呋喃(0.44mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.015mL，0.11mmol)、新戊酰氯(0.012mL，0.097mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-cHexmGly-OH(0.018g，0.11mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.052mL，0.21mmol)、乙腈(0.44mL)混合并于50℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：3(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙酸乙酯(5.0mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(5.0mL)、1M盐酸(5.0mL)、水(6.0mL)、饱和氯化钠水溶液(6.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-cHexmGly-OH(0.048g，收率109％)。
合成例116：Fmoc-Val-Tic-OH的合成
[化学式89]
Figure BDA0003256684440000861
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2,2-二甲基丁酰氯(0.045mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使1,2,3,4-四氢异喹啉-3-甲酸(H-Tic-OH)(0.063g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌4小时(原料：目标物＝1：99(分析条件3))。用乙酸乙酯(10mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、10质量％柠檬酸水溶液(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-Tic-OH(0.15g，收率100％)。
合成例117：Fmoc-Val-Tic-OH的合成
[化学式90]
Figure BDA0003256684440000862
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-Tic-OH(0.063g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌4小时(原料：目标物＝1：32(分析条件3))。用乙酸乙酯(10mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、10质量％柠檬酸水溶液(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-Tic-OH(0.14g，收率97％)。
合成例118：2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰溴的合成
[化学式91]
Figure BDA0003256684440000871
将2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酸(3.0g，10.6mmol)与三溴化磷(0.94g，3.48mmol)混合，于50℃搅拌24小时。将得到的混合物用己烷(30mL)稀释，用水(20mL)进行清洗。将有机层浓缩后，以无色液体的形式得到2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰溴(3.7g，10.6mmol)。
合成例119：Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH的合成
[化学式92]
Figure BDA0003256684440000872
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰溴(0.13g，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGlu(OtBu)-OH(0.077g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于50℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌20小时(原料：目标物＝＜1：99(分析条件3))。将得到的反应液浓缩，用乙腈(8.0mL)稀释后，加入己烷(8.0mL)清洗2次。用乙酸乙酯(8.0mL)将乙腈溶液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(7.0mL)、1M盐酸(7.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGlu(OtBu)-OH(0.16g，收率98％)。
合成例120：Fmoc-Val-(Me)βAla-OH的合成
[化学式93]
Figure BDA0003256684440000881
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.058mL，0.41mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.12g，0.38mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.058g，0.41mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.40mL、1.6mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌7小时(原料：目标物＝1：24(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βAla-OH(0.125g，收率94％)。
合成例121：Fmoc-Val-(Me)βAla-OH的合成
[化学式94]
Figure BDA0003256684440000882
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.049g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.35mL、1.4mmol)、乙腈(1.4mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌1小时(原料：目标物＝1：1(分析条件3))。用乙酸乙酯(3.0mL)将得到的反应液稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βAla-OH(0.13g，收率102％)。
合成例122：Fmoc-Val-MeGABA-OH的合成
[化学式95]
Figure BDA0003256684440000891
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.058mL，0.41mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.12mL，0.38mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGABA-OH盐酸盐(0.063g，0.41mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.38mL、1.5mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌7小时后，于10℃搅拌12小时(原料：目标物＝1：19(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGABA-OH(0.135g，收率104％)。
合成例123：Fmoc-Val-MeGABA-OH的合成
[化学式96]
Figure BDA0003256684440000892
使Fmoc-Val-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGABA-OH盐酸盐(0.054g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.35mL，1.4mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌1小时后，于25℃搅拌1小时(原料：目标物＝1：4(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGABA-OH(0.125g，收率97％)。
合成例124：Fmoc-Val-(Me)βAla-MePhe-OH的合成
[化学式97]
Figure BDA0003256684440000901
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.12g，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-MePhe-OH(0.093g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合、并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：48(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βAla-MePhe-OH(0.18g，收率107％)。
合成例125：Fmoc-Val-(Me)βAla-MePhe-OH的合成
[化学式98]
Figure BDA0003256684440000902
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-MePhe-OH(0.093g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：24(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βAla-MePhe-OH(0.19g，收率109％)。
合成例126：Fmoc-Val-MeGABA-MePhe-OH的合成
[化学式99]
Figure BDA0003256684440000911
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.12g，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGABA-MePhe-OH(0.098g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：16(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGABA-MePhe-OH(0.18g，收率107％)。
合成例127：Fmoc-Val-MeGABA-MePhe-OH的合成
[化学式100]
Figure BDA0003256684440000912
使Fmoc-Val-OH(0.100g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MeGABA-MePhe-OH(0.098g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：3(分析条件3))。用乙酸乙酯(4.0mL)将得到的反应液稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-MeGABA-MePhe-OH(0.19g，收率108％)。
合成例128：Fmoc-Val-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH的合成
[化学式101]
Figure BDA0003256684440000921
使Fmoc-Val-OH(0.030g，0.11mmol)与四氢呋喃(0.44mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.015mL，0.11mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.035g，0.097mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH盐酸盐(0.030g，0.11mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.10mL，0.42mmol)、乙腈(0.44mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：24(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH(0.056g，收率111％)。
合成例129：Fmoc-Val-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH的合成
[化学式102]
Figure BDA0003256684440000922
使Fmoc-Val-OH(0.070g，0.21mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.035mL，0.11mmol)、新戊酰氯(0.028mL，0.23mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH盐酸盐(0.070g，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.24mL，0.99mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌15小时后，进一步于25℃搅拌4小时(原料：目标物＝1：8(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βhomoTrp(1-Me)-OH(0.090g，收率77％)。
合成例130：Fmoc-Val-βhomoTrp(1-Me)-OH的合成
[化学式103]
Figure BDA0003256684440000931
使Fmoc-Val-OH(0.050g，0.15mmol)与四氢呋喃(0.74mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.025mL，0.18mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.049g，0.16mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-βhomoTrp(1-Me)-OH盐酸盐(0.048g，0.18mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(0.74mL)混合并于50℃搅拌60分钟而制备的溶液，于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：99(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-βhomoTrp(1-Me)-OH(0.11g，收率130％)。
合成例131：Fmoc-Val-βhomoTrp(1-Me)-OH的合成
[化学式104]
Figure BDA0003256684440000941
使Fmoc-Val-OH(0.050g，0.15mmol)与四氢呋喃(0.74mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.025mL，0.18mmol)、新戊酰氯(0.020g，0.16mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-βhomoTrp(1-Me)-OH盐酸盐(0.048g，0.18mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(0.74mL)混合并于50℃搅拌60分钟而制备的溶液，于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：19(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-βhomoTrp(1-Me)-OH(0.079g，收率97％)。
合成例132：Fmoc-Val-(Me)βhomoLeu-OH的合成
[化学式105]
Figure BDA0003256684440000942
使Fmoc-Val-OH(0.030g，0.088mmol)与四氢呋喃(0.44mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.015mL，0.11mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.035g，0.097mmol)，搅拌2小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βhomoLeu-OH盐酸盐(0.021g，0.11mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.10mL，0.42mmol)、乙腈(0.44mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：24(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，用己烷与10％异丙基醚/己烷的混合溶液进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βhomoLeu-OH(0.045g，收率106％)。
合成例133：Fmoc-Val-(Me)βhomoLeu-OH的合成
[化学式106]
Figure BDA0003256684440000951
使Fmoc-Val-OH(0.070g，0.21mmol)与四氢呋喃(1.0mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.035mL，0.25mmol)、新戊酰氯(0.028mL，0.23mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βhomoLeu-OH盐酸盐(0.048g，0.25mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.24mL，0.99mmol)、乙腈(1.0mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，于0℃搅拌15小时后，进一步于25℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：5(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(4.0mL)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液(4.0mL)、水(3.0mL)后，于25℃搅拌1小时。针对得到的有机层，依次用10质量％柠檬酸水溶液(4mL)、水(3.0mL)、饱和氯化钠水溶液(3.0mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，用己烷进行清洗，以白色固体的形式得到Fmoc-Val-(Me)βhomoLeu-OH(0.095g，收率96％)。
合成例134：Fmoc-(Me)βAla-MePhe-OH的合成
[化学式107]
Figure BDA0003256684440000952
使Fmoc-(Me)βAla-OH(1.0g，3.1mmol)与四氢呋喃(15mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.51mL，3.7mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(1.2g，3.4mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.66g，3.7mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.8mL、7.4mmol)、乙腈(15mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌3小时(原料：目标物＝1：48(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用水(15mL)、饱和氯化钠水溶液(15mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，通过柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-(Me)βAla-MePhe-OH(1.3g，收率85％)。
合成例135：Fmoc-(Me)βAla-MePhe-OH的合成
[化学式108]
Figure BDA0003256684440000961
使Fmoc-(Me)βAla-OH(0.10g，0.31mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.051mL，0.37mmol)、新戊酰氯(0.041mL，0.34mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.066g，0.37mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18mL，0.74mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌6小时(原料：目标物＝1：33(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、1M盐酸(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-(Me)βAla-MePhe-OH(0.16g，收率107％)。
合成例136：Fmoc-MeGABA-MePhe-OH的合成
[化学式109]
Figure BDA0003256684440000962
使Fmoc-MeGABA-OH(1.0g，3.0mmol)与四氢呋喃(15mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.50mL、3.5mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(1.2g，3.2mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.63g，3.5mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.7mL、7.1mmol)、乙腈(15mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌3小时(原料：目标物＝1：48(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(40mL)进行稀释，依次用水(15mL)、饱和氯化钠水溶液(15mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，通过柱色谱进行纯化，以白色固体的形式得到Fmoc-MeGABA-MePhe-OH(1.3g，收率88％)。
合成例137：Fmoc-MeGABA-MePhe-OH的合成
[化学式110]
Figure BDA0003256684440000971
使Fmoc-MeGABA-OH(0.10g，0.30mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.049mL，0.35mmol)、新戊酰氯(0.040mL，0.32mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-MePhe-OH(0.063g，0.35mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.17mL，0.71mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌6小时(原料：目标物＝1：12(分析条件3))。将得到的反应液用乙酸乙酯(10mL)稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、1M盐酸(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将收集的有机层浓缩后，以白色固体的形式得到Fmoc-MeGABA-MePhe-OH(0.15g，收率105％)。
合成例138：Fmoc-(2SMe)βAla-(Me)βAla-OH的合成
[化学式111]
Figure BDA0003256684440000972
使Fmoc-(2SMe)βAla-OH(0.050g，0.15mmol)与四氢呋喃(0.42mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.026mL，0.18mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.051g，0.17mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.026g，0.18mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18mL，0.74mmol)、乙腈(0.84mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：7(分析条件3))。将得到的反应液用乙腈(6.0mL)进行稀释，用己烷(8.0mL)进行清洗。将得到的乙腈溶液用乙酸乙酯(8.0mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、10％柠檬酸水溶液(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以无色油状物质的形式得到Fmoc-(2SMe)βAla-(Me)βAla-OH(0.069g，收率109％)。
合成例139：Fmoc-(2SMe)βAla-(Me)βAla-OH的合成
[化学式112]
Figure BDA0003256684440000981
使Fmoc-(2SMe)βAla-OH(0.050g，0.15mmol)与四氢呋喃(0.42mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.026mL，0.18mmol)、新戊酰氯(0.021mL，0.17mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.026g，0.18mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.18mL，0.74mmol)、乙腈(0.84mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于25℃搅拌2小时(原料：目标物＝1：3(分析条件3))。将得到的反应液用乙腈(6.0mL)进行稀释，用己烷(8.0mL)进行清洗。将得到的乙腈溶液用乙酸乙酯(8.0mL)进行稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(8.0mL)、10％柠檬酸水溶液(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以无色油状物质的形式得到Fmoc-(2SMe)βAla-(Me)βAla-OH(0.070g，收率110％)。
合成例140：Fmoc-GABA-(Me)βAla-OH的合成
[化学式113]
Figure BDA0003256684440000982
使Fmoc-GABA-OH(0.10g，0.31mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.051mL，0.37mmol)、2-(4,4-二甲基戊烷-2-基)-5,7,7-三甲基辛酰氯(0.12g，0.34mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.052g，0.37mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.36mL、1.5mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：99(分析条件3))。将得到的反应液用乙腈(6.0mL)进行稀释，用己烷(10mL)进行清洗。将得到的乙腈溶液用乙酸乙酯(10mL)稀释，依次用1M盐酸(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以无色油状物质的形式得到Fmoc-GABA-(Me)βAla-OH(0.14g，收率108％)。
合成例141：Fmoc-GABA-(Me)βAla-OH的合成
[化学式114]
Figure BDA0003256684440000991
使Fmoc-GABA-OH(0.10g，0.31mmol)与四氢呋喃(1.5mL)混合，于0℃加入三乙胺(0.051mL，0.37mmol)、新戊酰氯(0.042mL，0.34mmol)，搅拌1小时。向该溶液中，加入另行使H-(Me)βAla-OH盐酸盐(0.052g，0.37mmol)、N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(0.36mL、1.5mmol)、乙腈(1.5mL)混合并于25℃搅拌60分钟而制备的溶液，进一步于0℃搅拌15小时(原料：目标物＝1：49(分析条件3))。用乙腈(8.0mL)将得到的反应液稀释，用己烷(15mL)进行清洗。将得到的乙腈溶液用乙酸乙酯(10mL)稀释，依次用1M盐酸(8.0mL)、水(10mL)、饱和氯化钠水溶液(10mL)进行清洗。将得到的有机层浓缩后，以无色油状物质的形式得到Fmoc-GABA-(Me)βAla-OH(0.13g，收率104％)。
上述合成例中,合成例118为实施例中使用的原料的合成所涉及的参考例。另外,合成例98、100、102、104、106、108至110、112、114、116、119、120、122、124、126、128、132、134、136、138及140为本申请的肽的制造方法涉及的发明的实施例,合成例97、99、101、103、105、107、111、113、115、117、121、123、125、127、129、133、135、137、139及141为其比较例,合成例130及131为参考例。

Claims (24)

1.肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(I)表示的N末端保护氨基酸或N末端保护肽、与选自由式(II)表示的羧酸卤化物及式(III)表示的卤代甲酸烷基酯组成的组中的活化剂混合，
式(I)：P-A1-OH
式(I)中，P为N末端保护基，A1表示来自氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)或来自肽的基团，
式(II)：
Figure FDA0003256684430000011
式(II)中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)，
式(III)：
Figure FDA0003256684430000012
式(III)中，X表示卤素原子，R2表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲脂肪族烃基；
工序(2)，将式(IV)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂混合，
式(IV)：H-A2-OH
式(IV)中，A2表示来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)、或者来自肽的基团，所述肽中，N末端残基为N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
2.肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(I)表示的N末端保护氨基酸、与选自由式(II)表示的羧酸卤化物及式(III)表示的卤代甲酸烷基酯组成的组中的活化剂混合，
式(I)：P-A1-OH
式(I)中，P为N末端保护基，A1表示来自氨基酸的基团或来自N-C1-6烷基氨基酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)，
式(II)：
Figure FDA0003256684430000021
式(II)中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)，
式(III)：
Figure FDA0003256684430000022
式(III)中，X表示卤素原子，R2表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲脂肪族烃基；
工序(2)，将式(IV)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂混合，
式(IV)：H-A2-OH
式(IV)中，A2表示来自N-甲基氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团、或者来自肽的基团，所述肽中，N末端残基为N-甲基氨基酸、N-C1-6烷基甘氨酸(C1-6烷基可具有取代基)、或4-6元的环状的仲氨基酸；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
3.肽的制造方法，其包括下述工序(1)至(3)，
工序(1)，将式(V)表示的N末端保护肽与式(II)表示的羧酸卤化物混合，
式(V)：P-A3-OH
式(V)中，P为N末端保护基，A3表示来自肽的基团，
式(II)：
Figure FDA0003256684430000031
式(II)中，X表示卤素原子，R1表示碳原子数为5以上且可具有取代基的仲或叔脂肪族烃基、或者表示碳原子数为4以上且具有取代基的伯脂肪族烃基(其中，伯脂肪族烃基的取代基存在于与羰基碳键合的碳原子上)；
工序(2)，将式(IV’)表示的氨基酸与甲硅烷基化剂混合，
式(IV’)：H-A2’-OH
式(IV’)中，A2’表示来自N-甲基氨基酸的基团、来自N-C1-6烷基甘氨酸的基团(C1-6烷基可具有取代基)、或来自4-6元的环状的仲氨基酸的基团；
工序(3)，将工序(1)中得到的产物与工序(2)中得到的产物混合。
4.如权利要求1至3中任一项所述的肽的制造方法，其包括将工序(3)中得到的肽的N末端保护基除去的工序。
5.如权利要求1至3中任一项所述的肽的制造方法，其还包括重复一次以上的下述工序(4)及(5)，
工序(4)，将工序(3)或(5)中得到的肽的N末端保护基除去；
工序(5)，使N末端保护氨基酸或N末端保护肽与工序(4)中得到的肽的N末端反应。
6.如权利要求1或3所述的肽的制造方法，其中，位于式(I)P-A1-OH或式(V)P-A3-OH表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为除N-C1-6烷基氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲氨基酸(4-6元环可以与选自由C6-14芳环、C6-14卤代芳环及C3-8环烷基环组成的组中的环状化合物稠合)以外的氨基酸，
式(I)及式(V)中，P为N末端保护基，A1及A3各自表示来自肽的基团。
7.如权利要求1或2所述的肽的制造方法，其中，A1为来自氨基酸的基团。
8.如权利要求1或2所述的肽的制造方法，其中，式(I)表示的N末端保护氨基酸或位于式(I)表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为α-氨基酸、β-氨基酸或γ-氨基酸。
9.如权利要求8所述的肽的制造方法，其中，式(I)表示的N末端保护氨基酸或位于式(I)表示的N末端保护肽中的C末端的氨基酸为α-氨基酸。
10.如权利要求1所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或位于式(IV)表示的肽中的N末端的氨基酸为N-C1-6烷基-α-氨基酸(C1-6烷基可具有取代基)或4-6元的环状的仲-α-氨基酸。
11.如权利要求1所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或位于式(IV)表示的肽中的N末端的氨基酸为N-甲基-α-氨基酸或N-乙基-α-氨基酸(N-甲基、N-乙基各自可具有取代基)或4-6元的环状的仲-α-氨基酸。
12.如权利要求1至11中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，R1的碳原子数为5至20，X为氯原子。
13.如权利要求1至12中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，选自下述的化合物组，
Figure FDA0003256684430000051
14.如权利要求1至12中任一项所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(II)表示的羧酸卤化物，选自下述的化合物组，
Figure FDA0003256684430000052
15.如权利要求13或14所述的肽的制造方法，其中，活化剂为下述的化合物，
Figure FDA0003256684430000053
16.如权利要求1或2所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，X为氯原子。
17.如权利要求1或2所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，选自下述的化合物组，
Figure FDA0003256684430000054
18.如权利要求1或2所述的肽的制造方法，其中，活化剂为式(III)表示的卤代甲酸烷基酯，选自下述的化合物组，
Figure FDA0003256684430000055
19.如权利要求1至18中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为三甲基甲硅烷基化剂。
20.如权利要求1至19中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、N,N’-双(三甲基甲硅烷基)脲或N,O-双(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺。
21.如权利要求1至20中任一项所述的肽的制造方法，其中，甲硅烷基化剂为N,O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺。
22.如权利要求1所述的肽的制造方法，其中，式(IV)表示的氨基酸或肽分别是脯氨酸以外的氨基酸或者N末端残基为脯氨酸以外的氨基酸残基的肽。
23.如权利要求3所述的肽的制造方法，其中，式(IV’)表示的氨基酸为脯氨酸以外的氨基酸。
24.化合物，其由下式表示：
Figure FDA0003256684430000061
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