CN113599496B - 一种多肽sjmhe1在治疗糖尿病药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用，所述SJMHE1来源于日本血吸虫虫卵或成虫抗原，由24个氨基酸组成，SJMHE1多肽治疗可以明显减少空腹血糖、糖化血清白蛋白的水平，但对血脂和肝功能没有影响；SJMHE1多肽治疗改善葡萄糖耐量异常，提高其胰岛素的敏感性，改善肝脏糖异生；抑制肝脏炎症细胞浸润，减轻肝细胞水泡样变性及脂肪变性；抑制肝脏糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子FOXO1的表达；抑制肝细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1‑α的表达；SJMHE1可通过抑制肝脏糖异生，调节血糖水平。本发明所述血吸虫多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用具有广阔的前景。

Description

一种多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用。
背景技术
糖尿病是21世纪最大的医疗保健挑战之一。除了导致多种微血管(视网膜病变和肾病)和大血管(心血管疾病和中风)疾病的首要原因外，最近的证据证实，糖尿病还增加了结直肠癌、乳腺癌、子宫内膜癌、肝脏癌、胰腺癌、膀胱癌的风险。国际糖尿病基金会报告称，“十分之一的成年人患有糖尿病”，预计到2040年，这些数字将增加到6.42亿患者。因此，迫切需要有效策略，预防或延迟糖尿病及其并发症的发生。1型(自身免疫性)糖尿病(T1DM)和2型(代谢性)糖尿病(T2DM)这两个主要的糖尿病类别之间存在一些差异。T1DM发病通常发生在儿童时期，是由于自身反应性T细胞选择性破坏产生胰岛素的胰岛β细胞，导致胰岛素缺乏所致。T2DM发病通常是在成年期间，主要是由于胰岛素敏感性的丧失。降低胰岛素敏感性最初由胰岛β细胞产生的胰岛素增加来补偿，但慢性应激最终导致胰岛β细胞凋亡和胰岛素不足。尽管T1DM和T2DM的发病机制不同，但炎症是这两种疾病的共同点。T1DM的特征是导致胰岛炎的自身免疫反应，T2DM会发生慢性低度炎症。在糖尿病分型中，2型糖尿病(T2DM)占95％。尽管目前针对T2DM的治疗手段很多，传统的降糖药和胰岛素只能对症处理，很难阻止胰岛β细胞功能的进行性下降和糖尿病并发症的发生与发展。因此，在现有基础上研发新的治疗方案具有重要意义。
“卫生假说”认为幼年时病毒、细菌，尤其是蠕虫感染的减少，导致工业化国家过敏和自身免疫性疾病的激增。蠕虫感染下调宿主的免疫反应，促进在宿主体内的长期存活。蠕虫与人类共进化，蠕虫和它们分泌的产物，可专职诱导2型免疫反应。研究表明，蠕虫感染或蠕虫来源的产物，可抑制小鼠过敏、自身免疫或代谢性疾病，包括糖尿病。但目前大多数已鉴定出的蠕虫来源的免疫调节抗原多为蛋白混合物、糖蛋白、糖脂混合物或整个蛋白大分子，具有潜在的免疫原性副反应。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供一种多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用，是小分子多肽SJMHE1的新用途。
申请人的前期研究发现，来自于日本血吸虫虫卵及成虫抗原中的小分子多肽SJMHE1由24个氨基酸组成，是人和小鼠HSP60分子共同的T细胞表位，以TLR2依赖的方式诱导CD4+CD25+ Treg细胞；抑制小鼠的迟发型超敏反应、胶原诱导的关节炎，以及哮喘的发生[CD4+CD25+Treg induction by an HSP60-derived peptide SJMHE1 from Schistosomajaponicum is TLR2 dependent.Eur J Immunol,2009,39(11):3052-3065]。[Schistosomajaponicum HSP60-derived peptide SJMHE1 suppresses delayed-typehypersensitivity in a murine model.Parasit Vectors,2016,9(1):147]；[Inhibitionof cytokine response to TLR stimulation and alleviation of collagen-inducedarthritis in mice by Schistosoma japonicum peptide SJMHE1.J Cell Mol Med,2017Mar；21(3):475-486][Schistosoma japonicum peptide SJMHE1 suppresses airwayinflammation of allergic asthma in mice.J Cell Mol Med,2019,23(11):819-7829]。
本发明经过实施例验证，SJMHE1多肽治疗可以明显减少空腹血糖、糖化血清白蛋白的水平，但对血脂和肝功能没有影响；SJMHE1多肽治疗改善葡萄糖耐量异常，提高其胰岛素的敏感性，改善肝脏糖异生；抑制肝脏炎症细胞浸润，减轻肝细胞水泡样变性及脂肪变性；抑制肝脏糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子FOXO1的表达；抑制肝细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α的表达；SJMHE1可通过抑制肝脏糖异生，调节血糖水平。小分子多肽SJMHE1用于糖尿病治疗，规避了蠕虫感染、蠕虫分泌产物或全长蛋白的各种弊端和免疫原性问题。多肽类药物具备药效高、易代谢、不易蓄积中毒、副作用低等众多优点。本发明所述血吸虫多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用具有广阔的前景。
本发明的技术方案是：
一种多肽SJMHE1在治疗糖尿病药物中的应用。
所述SJMHE1来源于日本血吸虫虫卵或成虫抗原，由24个氨基酸组成，其氨基酸序列为VPGGGTALLRCIPVLDTLSTKNED(Val ProGlyGlyGlyThr AlaLeuLeuArgCys Ile ProValLeu Asp ThrLeuSerThr Lys AsnGlu Asp)。
进一步的，所述多肽SJMHE1降低空腹血糖和糖化血清白蛋白的水平。
所述多肽SJMHE1制备治疗糖尿病药物对血脂和肝功能没有影响。
所述多肽SJMHE1能提高葡萄糖耐量、提高其胰岛素的敏感性、改善肝脏糖异生。
所述多肽SJMHE1能减轻糖尿病肝脏炎症及脂肪变性。
所述多肽SJMHE1能减少肝脏组织糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子FOXO1的表达水平。
所述多肽SJMHE1能减少肝原代细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1的表达水平。
所述多肽SJMHE1能减少HepG2细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1表达水平。
本发明还提供一种治疗糖尿病的药物，该药物包括多肽SJMHE1，还包括药学上可以接受的辅料。优选的，辅料为不完全福氏佐剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过一系列的实验证实SJMHE1多肽治疗可以明显减少高脂喂养和链脲佐菌素(STZ)诱导的T2DM小鼠的空腹血糖、糖化血清白蛋白的水平；但对糖尿病小鼠血脂和肝功能没有影响；SJMHE1多肽治疗改善糖尿病小鼠的葡萄糖耐量异常，提高其胰岛素的敏感性，改善肝脏糖异生；抑制糖尿病小鼠肝脏炎症细胞浸润，减轻肝细胞水泡样变性及脂肪变性；抑制糖尿病小鼠肝脏糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子FOXO1的表达；抑制肝细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α的表达；SJMHE1可通过抑制糖尿病小鼠肝脏糖异生，调节糖尿病小鼠的血糖水平。这种与人类共进化的、血吸虫来源小分子多肽SJMHE1治疗糖尿病，造福患者和社会具有重要意义。
附图说明
图1是小鼠血糖水平检测结果图；其中，图1A是小鼠体重改变图；图1B是小鼠空腹血糖水平改变图；图1C是小鼠糖化血清白蛋白的改变图；
图2是小鼠血脂和肝功能检测结果图；其中，图2A是小鼠胆固醇水平(TC)图；图2B是小鼠甘油三脂水平(TG)图；图2C是小鼠丙氨酸转氨酶(ALT)水平图；图2D是小鼠门冬氨酸转氨酶(AST)水平图；
图3是小鼠葡萄糖耐量实验(GTT)、胰岛素耐量实验(ITT)、丙酮酸耐量实验(PTT)血糖变化图；其中，图3A是小鼠GTT血糖变化及曲线下面积(AUC)图；图3B是小鼠ITT血糖变化及曲线下面积(AUC)图；图3C是小鼠PTT血糖变化及曲线下面积(AUC)图；
图4是小鼠肝脏病理改变对比图；
图5是小鼠肝脏糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子FOXO1的表达结果图；其中，图5A是小鼠肝脏PEPCK mRNA的表达；图5B是小鼠肝脏G6Pase mRNA的表达；图5C是小鼠肝脏FOXO1 mRNA的表达；
图6是小鼠肝原代细胞中糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1的表达结果图；其中，图6A是小鼠肝细胞中PEPCK mRNA的表达；图6B是小鼠肝细胞中G6Pase mRNA的表达；图6C是小鼠肝细胞中PGC1-αmRNA的表达；图6D是小鼠肝细胞FOXO1mRNA的表达；
图7是人HepG2细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1的表达结果图；其中，图7A是人HepG2细胞中PEPCK mRNA的表达；图7B是人HepG2细胞中G6PasemRNA的表达；图7C是人HepG2细胞中PGC1-αmRNA的表达；图7D是人HepG2细胞FOXO1 mRNA的表达。
具体实施方式
下面结合附图详细描述本发明的实施例，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1：T2DM动物模型的构建
(1)模型构建及分组：
五周龄雄性C57BL/6J小鼠(购买于南京集萃药康生物科技股份有限公司)，高脂饮食(HFD)和链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠糖尿病模型。小鼠予以高脂饲料D12492(南京协同制药生物工程有限公司)，高脂饲料D12492含60％Kcal脂肪，喂养8周后，STZ(60mg/kg)配制于pH值为4.5的0.1M柠檬酸盐缓冲液中，腹腔注射。注射一周后，针刺尾静脉取血，使用血糖仪(德国拜耳公司)测量血糖，以空腹血糖≥16.7mmol/L为标准选择造模成功的2型糖尿病小鼠，随机分为数量相等的空白对照组(Control)和实验组(SJMHE1)，每组小鼠各11只；实验组小鼠腹腔注射SJMHE1多肽溶液(每100μL PBS缓冲液中含10μg的SJMHE1多肽)，对照组中小鼠注射100μL PBS缓冲液作为对照。PBS和SJMHE1每周注射一次，共注射8次。
(2)小鼠体重血糖检测：
小鼠在注射SJMHE1(苏州强耀生物科技有限公司合成)、PBS前测量体重及空腹血糖，随后每周固定时间测量随机血糖和体重。测量结果如图1A所示，与Control组相比，SJMHE1组小鼠体重无明显差异；然而从第4周开始，SJMHE1组小鼠空腹血糖开始降低，与Control相比，第四周SJMHE1组小鼠空腹血糖平均下降了10.25％；到第八周，SJMHE1组空腹血糖平均下降了24.61％，如图1B所示。
(3)糖化血清白蛋白检测
PBS和SJMHE1注射8周后，用1％戊巴比妥钠(50mg/kg)处死小鼠，摘除眼球，采集血样，在4℃条件下3000rpm离心20min获得血清，检测糖化血清白蛋白(GA)。如图1C所示，与Control组相比，SJMHE1组小鼠GA平均下降了35.61％。
实施例2：小鼠血脂及肝功能检测
(1)小鼠血脂检测
PBS和SJMHE1注射8周后，用1％戊巴比妥钠(50mg/kg)处死小鼠，摘除眼球，采集血样，在4℃条件下3000rpm离心20min获得血清，检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。结果如图2A、2B所示，SJMHE1对糖尿病模型小鼠的血脂含量并无明显影响。
(2)小鼠肝功能检测
PBS和SJMHE1注射8周后，1％戊巴比妥钠(50mg/kg)处死小鼠，摘除眼球，采集血样，在4℃条件下3000rpm离心20min获得血清，检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)(美国贝克曼生化分析仪)。结果如图2C、2D所示，SJMHE1对糖尿病模型小鼠的肝功能并没有明显影响。
实施例3：小鼠GTT、ITT及PTT检测
(1)葡萄糖耐量实验(GTT)
PBS和SJMHE1注射8周，各组小鼠禁食16h后，灌胃给予1g/kg葡萄糖，尾静脉针刺取血测量糖负荷前及给药后15、30、60、90、120分钟后血糖。血糖测量使用拜耳Contour TS血糖仪测量血糖。结果如图3A所示，与Control组相比，SJMHE1组小鼠在注射葡萄糖后血糖显著下降，曲线下面积(AUC)也显著降低，平均下降了23％。本实施例结果表明，SJMHE1多肽处理可明显改善糖尿病小鼠的糖耐量水平。
(2)胰岛素耐量实验(ITT)
PBS和SJMHE1注射8周后，各组小鼠在禁食4小时后腹腔注射0.75U/kg胰岛素，尾静脉针刺取血测量给药前及给药后15分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟后血糖。测量使用拜耳Contour TS血糖仪测量血糖。结果如图3B所示，与Control组相比，SJMHE1组小鼠在注射胰岛素后血糖显著下降，曲线下面积(AUC)也显著降低，平均下降了18％。本实施例结果表明，SJMHE1处理可明显提高糖尿病小鼠胰岛素的敏感性。
(3)丙酮酸耐量实验(PTT)
PBS和SJMHE1注射8周后，各组小鼠在禁食16小时后腹腔注射1g/kg丙酮酸，尾静脉针刺取血测量给药前及给药后15分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟后血糖。测量使用拜耳Contour TS血糖仪测量血糖。结果如图3C所示，与Control组相比，SJMHE1组小鼠在注射丙酮酸后血糖显著下降，曲线下面积(AUC)也显著降低，平均下降了23.46％。本实施例结果表明，SJMHE1处理可明显改善糖尿病小鼠肝脏糖异生。
实施例4：SJMHE1多肽对糖尿病小鼠肝脏病理改变的影响
PBS和SJMHE1注射8周后，用1％戊巴比妥钠(50mg/kg)处死小鼠，收集小鼠肝脏用福尔马林固定，常规石蜡包埋，4μm切片，放入二甲苯中脱残留石蜡2次，15min/次；酒精梯度脱水(梯度分别为100％乙醇、85％乙醇、75％乙醇)各5min，蒸馏水1min；苏木素染色5min，流水1-3s；盐酸乙醇分色5s，水洗10s；水洗蓝化20min；70％乙醇、80％乙醇各5min；伊红乙醇液20s；95％乙醇2次，5min/次；100％乙醇2次，5min/次；二甲苯2次，5min/次；中性树胶封片；用Eclipse E100正置显微镜采集图像，观察肝脏病理改变。结果如图4所示，与Control组相比，SJMHE1组肝脏炎症细胞浸润明显减少，肝细胞水泡样变性和脂肪变性明显减轻。可见，SJMHE1处理可减轻糖尿病小鼠肝脏炎症及脂肪变性。
实施例5：SJMHE1多肽对小鼠肝脏糖异生关键基因的影响
PBS和SJMHE1注射8周后，1％戊巴比妥钠(50mg/kg)处死小鼠后，收集小鼠肝脏，取30mg的肝脏组织剪碎PBS清洗后加入500μL的Trizol(美国英杰生命技术有限公司)，于冰上研磨直至组织与Trizol充分混匀，漩涡震荡5s，室温静置5min。每管快速加入100μl的氯仿漩涡震荡15s后，室温静置3min，于4℃，10000g,离心10min。离心后分三层，吸上清液至一新的1.5ml EP管。每管加入250μl的异丙醇，上下颠倒10-15次，置-80℃冰箱10-30min后于4℃，12000g离心10min后倒掉异丙醇。每管加入500μl的70％酒精，上下颠倒10-15次以清洗蛋白。于4℃，12000g离心5min。倒掉70％酒精，室温晾10min，至管壁干即可。向样品中加入50μl ddH2O进行溶解，充分混匀，水浴锅55-60℃，10min，测RNA浓度(ng/μl)，逆转录后，qRT-PCR检测糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子FOXO1的表达水平(上海生工生物工程有限公司)。如图5所示，与Control组相比，SJMHE1组糖尿病小鼠肝脏组织糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子FOXO1的表达水平明显降低，其中，PEPCK表达水平平均减少了45.36％，G6Pase表达水平平均减少了60.75％，FOXO1mRNA的表达水平平均减少59.03％。
实施例6：SJMHE1多肽对小鼠肝原代细胞中糖异生关键基因的影响
(1)小鼠肝原代细胞的分离培养
D-Hanks+0.2％EDTA、Hanks+0.5mg/ml胶原酶Ⅳ、原代专用培养基置于37℃水浴；小鼠麻醉后，肌注肝素抗凝，70％酒精喷洗，固定于板上。腹部正中切口打开腹腔，以棉签拨开肠管，暴露门静脉；分离门静脉，并于门静脉上下端穿线以备结扎固定。由门静脉注入10ml D-Hanks+EDTA冲洗肝脏。然后剪开下腔静脉，使液体流出，继续冲洗，直至肝脏完全变白。小心分离肝脏，分离下的肝脏置于10cm培养皿盖上，继续以D-Hanks+0.2％EDTA冲洗一遍。冲洗干净的肝脏，转移至10cm培养皿，20ml Hanks+0.5mg/ml胶原酶Ⅳ开始消化，重复消化4-5遍。消化下的肝细胞以100微米筛网过滤，室温下70g离心5分钟。吸去上层液体，细胞沉淀以4℃冷PBS+双抗(青霉素(100U/ml)，链霉素(100μg/ml))(美国Sigma公司)，重悬清洗2-3遍(室温100g离心5分钟，吸去上层液体)。血球计数板计数：先以1-2ml原代培养基重悬细胞，然后吸取20μl重悬细胞加入180μl的原代培养基中稀释，充分混匀后，吸取10-20μl稀释后的细胞，进行计数。根据计数结果，加入适当培养基，按4×105种板。台盼蓝(20μl台盼蓝+80μl细胞)染色粗略检测细胞状态。
(2)小鼠肝原代细胞的糖异生模型构建及多肽刺激
肝原代细胞置于37℃，5％CO2恒温培养箱中培养6-8小时贴壁后，于普通DMEM培养基换液过夜，之后于含有0.25％BSA的5mM糖的DMEM培养基+100nM地塞米松(美国Sigma公司)预处理6小时，PBS洗一遍，使用含有0.25％BSA+糖异生底物(糖异生底物包括1μM丙酮酸钠、10μM乳酸钠、100nM地塞米松)+不同浓度的SJMHE1(SJMHE1的浓度为0.1μg/ml、0.5μg/ml)的无糖无酚培养基(美国Gibco公司)处理12小时后，胰酶消化收细胞。
(3)小鼠肝原代细胞糖异生关键基因的表达
每管加入0.5ml的Trizol，按上述实验方法提细胞RNA，qRT-PCR检测糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子PGC1-α、FOXO1的表达水平，结果如图6所示，与环磷酸腺苷+地塞米松(cAMP+DEX)组相比，SJMHE1组肝原代细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α(上海生工生物工程有限公司)、FOXO1的表达水平明显减少，0.5μg/ml SJMHE1处理，PEPCK的表达水平平均减少了15.33％、G6Pase的表达水平平均减少了35.03％、PGC1-α的表达水平平均减少了21.13％、FOXO1mRNA的表达水平平均减少了32.72％。
实施例7：SJMHE1多肽对人HepG2细胞糖异生关键基因的影响
(1)人HepG2细胞胰岛素抵抗模型的构建及多肽刺激
HepG2细胞(中国科学院上海细胞库)在温度37℃，5％CO2的环境中，于含10％胎牛血清、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM培养基培养。在达到70％-80％贴壁后，用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤2次，用含0.25％BSA的无血清培养基饥饿过夜后，用0.25％BSA的无血清培养基+棕榈酸(0.2mM)在没有或存在不同浓度的SJMHE1(SJMHE1的浓度为0.1μg/ml、0.5μg/ml)中处理24小时后，胰酶消化收细胞。
(2)人HepG2细胞糖异生关键基因的表达
每管加入0.5ml的Trizol，按实施例5中的方法提细胞RNA，qRT-PCR检测糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子PGC1-α、FOXO1的表达水平，结果如图7所示，与PA组相比，SJMHE1组HepG2细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1的表达水平明显减少,0.5μg/ml的SJMHE1处理，PEPCK的表达水平平均减少了36.08％，G6Pase的表达水平平均减少了37.43％，PGC1-α的表达水平平均减少了50.87％，FOXO1mRNA的表达水平平均减少了25.43％。
本发明通过一系列的实验证实SJMHE1多肽治疗可以明显减少高脂喂养和链脲佐菌素(STZ)诱导的T2DM小鼠的空腹血糖、糖化血清白蛋白的水平；但对糖尿病小鼠血脂和肝功能没有影响；SJMHE1多肽治疗改善糖尿病小鼠的葡萄糖耐量异常，提高其胰岛素的敏感性，改善肝脏糖异生；抑制糖尿病小鼠肝脏炎症细胞浸润，减轻肝细胞水泡样变性及脂肪变性；抑制糖尿病小鼠肝脏糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子FOXO1的表达；抑制肝细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α的表达；SJMHE1可通过抑制糖尿病小鼠肝脏糖异生，调节糖尿病小鼠的血糖水平，并取得明显优越的技术效果。
本发明不限于这些公开的实例方案，本发明将覆盖在专利书中所描述的范围，以及权利要求范围的各种变型和等效变化。

Claims (8)

1.一种多肽SJMHE1在制备治疗糖尿病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SJMHE1来源于血吸虫虫卵或成虫抗原，其氨基酸序列为VPGGGTALLRCIPVLDTLSTKNED。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述多肽SJMHE1能降低空腹血糖和糖化血清白蛋白的水平。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述血吸虫多肽SJMHE1能提高葡萄糖耐量、提高其胰岛素的敏感性、改善肝脏糖异生。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述血吸虫多肽SJMHE1能减轻糖尿病肝脏炎症及脂肪变性。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述血吸虫多肽SJMHE1能减少肝脏组织糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及转录因子FOXO1的表达水平。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述血吸虫多肽SJMHE1能减少肝原代细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1的表达水平。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述血吸虫多肽SJMHE1能减少HepG2细胞糖异生关键基因PEPCK、G6Pase及其转录因子PGC1-α、FOXO1表达水平。
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CN101580539A (zh) * 2008-11-04 2009-11-18 南京医科大学 一种诱导cd4+cd25+调节性t细胞的多肽及应用
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