CN113577398B - 一种3d打印人工皮肤及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医用材料技术领域,尤其涉及一种3D打印人工皮肤及其制备方法,所述皮肤包括:表皮层和真皮层,所述表皮层覆设于所述真皮层的上表面,呈水凝胶状态,具有pH敏感性;所述表皮层的组分包括:第一明胶、单宁酸和铁盐,改善了表皮层的力学性能,具有长效稳定的抗菌和抗炎特性;解决了现有技术中表皮层的抗菌物质爆发性释放对正常细胞造成细胞毒性的问题。
Description
技术领域
本申请属于生物医用材料技术领域,尤其涉及一种3D打印人工皮肤及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体最大的器官,是保护内部组织、维持体液平衡、防止病原体入侵的基本屏 障。由烧伤、软组织损伤、疾病导致皮肤坏死等引起的大面积全层皮肤缺损在临床上仍是 尚未解决的重要难题。目前,临床上多采用自体皮肤移植,但容易受供皮来源限制,且伴随有肥厚性瘢痕或瘢痕疙瘩形成。全层皮肤移植通常不会产生瘢痕,但自体全层皮肤移植仅适用于2%体表面积的损伤部位。同时,细菌感染是伤口愈合的严重威胁,它会延长愈 合过程,延缓胶原合成,并造成额外的组织损伤。此外,当皮肤的真皮层被破坏时,自然 愈合困难,毛囊无法再生。
抗菌水凝胶因其能保持伤口湿润环境、防止细菌感染、允许氧气通过、易于去除而不 产生二次损伤而被开发用于创面修复。尽管抗菌药物包括抗生素,银纳米颗粒,抗菌肽和 金属离子可以通过物理或化学方法纳入水凝胶,但化学合成过程可能是低效和耗时,而物 理结合时,往往会在开始爆发性释放,进而对正常细胞造成细胞毒性。
天然皮肤真皮基质中,胶原束间相互交织形成三维网状结构。现有人工真皮支架制 备多以冷冻干燥为主,结构单一,受限于冻干技术,且结构仿生程度有限。且有人工真皮支架中没有可以有效作用于皮肤的外泌体。
外泌体是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结 构,内部含有micro-RNA以及mRNA、DNA、核酸中的至少一种,在细胞与细胞间的物质 和信息传递中起重要作用。与细胞相比,外泌体能在低氧和低营养的条件下保持活性,克 服细胞易凋亡的特点。其次,外泌体极易与受体细胞的细胞膜融合,融合后,micro-RNA 以及mRNA、DNA、核酸等生物活性物质作为物质和信号来源提供给受体细胞,从而促进 细胞再生和修复。
天然皮肤真皮基质中,胶原束间相互交织形成三维网状结构。现有人工真皮支架制备 多以冷冻干燥为主,结构单一,受限于冻干技术,且结构仿生程度有限。
发明内容
本申请提供了一种3D打印人工皮肤及其制备方法,以解决了现有技术中表皮层的抗菌 物质爆发性释放对正常细胞造成细胞毒性的技术问题。
第一方面,本申请提供了一种3D打印人工皮肤,所述皮肤包括:表皮层和真皮层,所 述表皮层覆设于所述真皮层的上表面,呈水凝胶状态,具有pH敏感性;所述表皮层的组分 包括:第一明胶、单宁酸和铁盐。
可选的,所述表皮层通过粘合剂覆设于所述真皮层,所述粘合剂包括硅橡胶、聚二甲 基硅氧烷和聚氨酯中任意一种。
可选的,以质量分数计,所述第一明胶的质量为所述表皮层的总质量的3.5-6.5%、所 述单宁酸的质量为所述表皮层的总质量的0.1-0.3%;所述铁盐中铁离子的质量为所述表皮 层的总质量的0.05-0.07%。
可选的,所述真皮层的组分包括:三维多孔结构并负载有外泌体,所述外泌体包括毛 乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体和血管内皮细胞外泌体。
可选的,所述三维多孔结构的组分包括:以质量分数计,所述第二明胶的质量为所述 真皮层的总质量的5-8%;以摩尔浓度计,所述真皮层的组分还包括:丝素,所述丝素在所 述真皮层中的摩尔浓度为0.5-1.5μmol/L。
可选的,所述第一明胶和所述第二明胶的溶解工艺均包括:将明胶与去离子水或纯净 水接触,以温度为45-55℃加热搅拌1-2h至完全溶解。
第二方面,本申请提供了一种3D打印人工皮肤的制备方法,所述方法包括下列步骤:
获取所述表皮层的组分,得到pH敏感性水凝胶;
将所述pH敏感性水凝胶倒入模具中成型,浸泡后得到表皮层;
获取所述真皮层的组分,得到真皮层生物墨水;
将所述真皮层生物墨水进行3D打印,后冷冻干燥,得到真皮层;
将所述表皮层和所述真皮层叠加粘合,得到人工皮肤。
可选的,以质量分数计,所述用于浸泡的溶液包括15-30%硫酸铵溶液,所述浸泡的温 度为20-30℃,所述浸泡的时间为12-24h。
可选的,所述3D打印的参数为:打印温度为35-37℃,打印的移动速度为5-20mm/s,打印纤维的直径50-200μm,打印纤维的间距为50-200μm,打印气压为5-50kPa,打印厚度 为2000-6000μm。
本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点:
本申请实施例中以类似细胞外基质的明胶为主要原料,结合单宁酸和铁盐,形成pH敏 感性水凝胶,是一种温度/pH响应的多功能生物活性水凝胶,单宁酸和铁盐形成络合物, 通过大分子链缠绕在一起,当表皮层的有菌时释放单宁酸,可以长效抗菌,无菌时为稳定 的物质,这使表皮层具有长效稳定的抗菌和抗炎特性;解决了现有技术中表皮层的抗菌物 质爆发性释放对正常细胞造成细胞毒性的问题,得到工艺简单、长效、抗菌,加速伤口愈合,促进毛细血管和毛囊再生的人工皮肤。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分,示出了符合本发明的实施例, 并与说明书一起用于解释本发明的原理。
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技 术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,对于本领域普通技术人员而言, 在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请实施例提供的一种3D打印人工皮肤的制备方法的流程示意图;
图2为实施例3中不同pH环境下的单宁酸释放曲线;
图3实施例3和对比例2中有无与铁离子络合的单宁酸在pH5.0环境下释放曲线。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本申请实施例中的 附图,对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本 申请的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人 员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。
本申请提供了一种3D打印人工皮肤,所述皮肤包括:表皮层和真皮层,所述表皮层覆 设于所述真皮层的上表面,呈水凝胶状态,具有pH敏感性;所述表皮层的组分包括:第一明胶、单宁酸和铁盐。
本申请实施例中,明胶由于其独特的温敏特性被广泛用于组织工程支架中;单宁酸具 有强烈的收敛性、抗氧化性、抗菌性和止血性,作为治疗皮肤溃疡、烧伤、牙痛的药物被 广泛应用于医疗领域。明胶是一种变性的胶原蛋白,类似于细胞外基质,具有良好的生物 相容性。通过氢键、离子键、配位键或疏水作用,得到pH敏感性水凝胶;pH敏感性水凝胶是一种温度/pH响应的多功能生物活性水凝胶,由其组分和配比浓度,决定了其具有长效稳定的抗菌和抗炎特性。
本申请实施例中,所述铁盐为六水合氯化铁、六水合硫酸铁和无水三氯化铁中至少一 种。
作为一种可选的实施方式,所述表皮层通过粘合剂覆设于所述真皮层,所述粘合剂为 硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、聚氨酯中任意一种。
作为一种可选的实施方式,以质量分数计,所述第一明胶的质量为所述表皮层的总质 量的3.5-6.5%、所述单宁酸的质量为所述表皮层的总质量的0.1-0.3%;所述铁盐中铁离子的 质量为所述表皮层的总质量的0.05-0.07%。
本申请实施例中,第一明胶浓度过高造成的不利影响是明胶粉末难以溶解,过低造成 的不利影响是明胶溶液无法成型,所述单宁酸过低的不利影响是无法达到抑菌效果,过高 造成的不利影响是产生毒副作用,杀死正常细胞;所述铁盐过低的不利影响是无法和单宁 酸产生完全配位作用,过高造成的不利影响是对人体产生有害作用。
作为一种可选的实施方式,所述真皮层的组分包括:三维多孔结构并负载有外泌体, 所述外泌体包括毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体和血管内皮细胞外泌体。
本申请实施例中,毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体及血管内皮细胞外泌体由毛 乳头细胞、脂肪干细胞、血管内皮细胞上清液经过细胞上清外泌体提取试剂提取得到。
本申请实施例中,毛乳头细胞外泌体能够刺激毛囊再生,脂肪干细胞外泌体能促进人 真皮成纤维细胞再生,促进了上皮化,提高了CK19、PCNA、I型胶原的表达,而血管细胞中提取的外泌体具有极大的成血管活性,不但可以促进一般情况下血管的再生、皮肤组织的修复,也可以加速皮肤创面的愈合。
本申请实施例中,三维打印技术具有可个性化定制、精准成型、快速制造、原料利用 度高等优点,可高度仿生真皮基质中的三维网状结构;所述真皮层为三维相互贯通孔洞结 构,冷冻干燥工艺也成形孔径,两种工艺的孔径共同作用,可以达到有效模拟人体真皮层 孔径的有益效果;人工皮肤支架工艺简单,通过3D打印技术可高效快速个性化定制真皮层,结构控制精准;负载的细胞外泌体通过调节蛋白质信号可有效促进毛细血管和毛囊再生,采用3D打印技术,高度仿生真皮基质中的三维网状结构,同时外泌体促进血管的再 生、皮肤组织的修复,同时可加速皮肤创面的愈合。
作为一种可选的实施方式,所述三维多孔结构的组分包括:以质量分数计,所述第二明 胶的质量为所述真皮层的总质量的5-8%;以摩尔浓度计,所述真皮层的组分还包括:丝素, 所述丝素在所述真皮层/三维多孔结构中的摩尔浓度为0.5-1.5μmol/L。
本申请实施例中,明胶由于其独特的温敏特性被广泛用于组织工程支架中。丝素是一 种性能优良的天然高分子材料,具有良好的生物相容性、细胞黏附性和生物降解性,和明 胶混合,可大幅度提高支架的力学性能和粘度,同时能防止外泌体位移,延缓外泌体沉 降。
本申请实施例中,真皮层通过调控打印模型,明胶溶液和丝素的浓度和配比,喷嘴直 径,打印间距,打印层高,可以控制真皮层的孔径、力学性能,以满足临床个性化需求。其中,丝素可大幅度提高支架的力学性能和粘度,同时能防止外泌体位移,延缓外泌体沉降。该制备方法简单,工艺成熟,易于工业化生产。
本申请实施例中,所述丝素为桑蚕蚕丝丝素。
本申请实施例中,选用桑蚕蚕丝丝素具有良好的机械性能和理化性质,生物相容性良 好。
作为一种可选的实施方式,所述第一明胶和所述第二明胶的溶解工艺均包括:将明胶 与去离子水或纯净水接触,以温度为45-55℃加热搅拌1-2h至完全溶解。
第二方面,本申请提供了一种3D打印人工皮肤的制备方法,如图1所示,所述方法包 括下列步骤:
S1.获取所述表皮层的组分,得到pH敏感性水凝胶;
S2.将所述pH敏感性水凝胶倒入模具中成型,浸泡后得到表皮层;
S3.获取所述真皮层的组分,得到真皮层生物墨水;
S4.将所述真皮层生物墨水进行3D打印,后冷冻干燥,得到真皮层;
S5.将所述表皮层和所述真皮层叠加粘合,得到人工皮肤。
本申请实施例中,明胶溶液、单宁酸、六水合氯化铁溶液按体积比在45-55℃下混合,倒入聚四氟乙烯模具在0-4℃下保持1h得到抗菌水凝胶。.将所述真皮层生物墨水进行3D打印,后冷冻干燥后真皮层呈水凝胶形式。
本申请实施例中,选用聚四氟乙烯模具的原因是安全且易于脱模,对材料结构无不良 影响。
作为一种可选的实施方式,以质量分数计,所述用于浸泡的溶液包括15-30%硫酸铵溶 液,所述浸泡的温度为20-30℃,所述浸泡的时间为12-24h。
本申请实施例中,用硫酸铵溶液浸泡的原因是增强表皮层的力学强度,便于使用时缝 合等,硫酸铵溶液浓度过高造成的不利影响是交联程度过高,导致表皮层萎缩,过低造成 的不利影响是交联程度过低,表皮层机械强度较低。
作为一种可选的实施方式,所述3D打印的参数为:打印温度为35-37℃,打印的移动 速度为5-20mm/s,打印纤维的直径50-200μm,打印纤维的间距为50-200μm,打印气压为5- 50kPa,打印厚度为2000-6000μm。
实施例1
配置5wt%的明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌20min,随后在45℃下,加热搅拌1h,配置0.5wt%单宁酸,0.8wt%六水合氯化铁溶液;
按明胶溶液、单宁酸、六水合氯化铁溶液按9∶3∶1体积在明胶溶液中加入单宁酸和六水合氯化铁溶液,在45℃混合搅拌均匀,倒入聚四氟乙烯模具中4℃下冷却成型,随 后,25℃下,将成型的水凝胶浸入15wt%硫酸铵溶液中12h,得到表皮层;
配置10wt%的明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌20mm,随后在50℃下,加热搅拌1h,配置2μmol/L丝素,在37℃等体积比搅拌混合均匀,加入 0.2wt%毛乳头细胞外泌体、0.2%脂肪干细胞外泌体及0.2wt%血管内皮细胞外泌体混合均 匀,转入打印针筒,真空脱泡,组装,构建三维结构模型,设置打印参数,打印得到三维 支架,冷冻干燥得到真皮层。具体的,打印参数如下:喷嘴打印温度37℃,打印平台的温 度0-4℃,纤维直径50μm,喷嘴移动速度为5-10mm/s,纤维间距为150μm,打印气压 为5-15kPa,打印厚度为3000μm;
提取毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体及血管内皮细胞外泌体:培养6代毛乳头 细胞、脂肪干细胞及血管内皮细胞,提取细胞上清液经过细胞上清外泌体提取试剂,按照 提取试剂说明书提取得到。
将上述得到的表皮层与真皮层通过液态硅橡胶粘合,得到人工皮肤。
实施例2
配置8wt%的明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌25min,随后在50℃下,加热搅拌1.5h,配置0.8wt%单宁酸,0.9wt%六水合氯化铁溶液;
按明胶溶液、单宁酸、六水合氯化铁溶液按10∶4∶1体积在明胶溶液中加入单宁酸和六水合氯化铁溶液,在50℃混合搅拌均匀,倒入聚四氟乙烯模具中4℃下冷却成型, 随后,25℃下,将成型的水凝胶浸入20wt%硫酸铵溶液中18h,得到表皮层;
配置12wt%明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌25min,随后在50 ℃下,加热搅拌1.5h,配置2.5μmol/L丝素,在37℃等体积比搅拌混合均匀,加入0.4wt%毛乳头细胞外泌体、0.4wt%脂肪干细胞外泌体及0.4wt%血管内皮细胞外泌体混合均 匀,转入打印针筒,真空脱泡,组装,构建三维结构模型,设置打印参数,打印得到三维支架,冷冻干燥得到真皮层。具体的,打印参数如下:喷嘴打印温度37℃,打印平台的温 度0-4℃,纤维直径150μm,喷嘴移动速度为10-20mm/s,纤维间距为100μm,打印气 压为30-50kPa,打印厚度为2500μm;
提取毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体及血管内皮细胞外泌体:培养6代毛乳头 细胞、脂肪干细胞及血管内皮细胞,提取细胞上清液经过细胞上清外泌体提取试剂,按照 提取试剂说明书提取得到。
将上述得到的表皮层与真皮层通过液态硅橡胶粘合,得到人工皮肤。
实施例3
配置10wt%的明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌30min,随后在 55℃下,加热搅拌2h,配置1wt%单宁酸,1wt%六水合氯化铁溶液;
按明胶溶液、单宁酸、六水合氯化铁溶液按11∶5∶1体积在明胶溶液中加入单宁酸和六水合氯化铁溶液,在55℃混合搅拌均匀,倒入聚四氟乙烯模具中4℃下冷却成型,随后,25℃下,将成型的水凝胶浸入25wt%硫酸铵溶液中24h,得到表皮层;
配置15wt%明胶溶液:将明胶粉末加入去离子水中,在室温下搅拌30min,随后在50 ℃下,加热搅拌2h,配置3μmol/L丝素,在37℃等体积比搅拌混合均匀,加入0.5wt% 毛乳头细胞外泌体、0.5wt%脂肪干细胞外泌体及0.5wt%血管内皮细胞外泌体混合均匀,转入打印针筒,真空脱泡,组装,构建三维结构模型,设置打印参数,打印得到三维支架, 冷冻干燥得到真皮层。具体的,打印参数如下:喷嘴打印温度50-55℃,打印平台的温度 0-4℃,纤维直径100μm,喷嘴移动速度为10-15mm/s,纤维间距为200μm,打印气压为 15-25kPa,打印厚度为3500μm;
提取毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体及血管内皮细胞外泌体:培养6代毛乳头 细胞、脂肪干细胞及血管内皮细胞,提取细胞上清液经过细胞上清外泌体提取试剂,按照 提取试剂说明书提取得到。
实施例4
将硫酸铵溶液的质量浓度变为30%,其他同实施例3。
对比例1
选用市售的普通的明胶水凝胶的人工皮肤,同时也不添加硫酸铵溶液等进行处理,采 用实施例的方法直接测量其理化参数。
对比例2
不添加六水合氯化铁,明胶溶液中只加入单宁酸溶液,其他同实施例3。
将上述得到的表皮层与真皮层通过液态硅橡胶粘合,得到人工皮肤。
实施例1-4和对比例1提供的人工皮肤制备方法中,制备表皮层时,明胶的浓度、单宁酸和铁盐的浓度与配比,硫酸铵溶液浓度与浸泡时间共同决定了凝胶的力学性能和抗菌活性,制备真皮层时,明胶与丝素的浓度与配比,打印参数,后处理工艺直接影响着三维 多孔支架的生物相容性、力学性能、空间结构的形成和稳定性,负载细胞外泌体的种类和 浓度,能有效刺激毛囊再生,促进上皮化,刺激毛细血管再生,加速皮肤创面愈合。
表1。
表1中对比例1硫酸铵溶液浓度为0的代表其他技术中普通的明胶水凝胶的机械强度, 普通明胶水凝胶作为表皮层,机械强度差,易碎,并不满足作为人工皮肤中表皮层所需要 的力学强度,起不到手术植入时抗缝合的效果,而硫酸铵溶液浸泡后,明胶水凝胶的机械 强度大幅度增加,杨氏模量和断裂伸长率都大幅度增加,具有很好的弹性和延展性,其中,20wt%~30wt%浓度的硫酸铵溶液浸泡效果最好。
附图的具体解释:
图1中的为实施例3中与铁离子络合的单宁酸释放曲线,具有pH敏感性,酸性越强,缓 释效果越好,释放率越高,释放时间越长。在有菌环境下(酸性环境,pH5.0)能够有效持续释放,而在无菌情况下(中性环境下,pH7.4)只有微量释放,且释放时间短,不损伤正 常细胞。
图2为对比例2的没有与铁离子络合的单宁酸释放曲线,相当于其他技术中普通的单宁 酸释放,无pH敏感性,并无缓释效果,与铁离子络合后的单宁酸在有菌环境下(酸性环境)能够有效持续释放,而在无菌情况下(中性环境下),类似图1中pH7.4的释放曲线, 只有微量释放,且释放时间短,不损伤正常细胞。
需要说明的是,在本文中,诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变 体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅 包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、 物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下,由语句“包括一个……”限定的 要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上所述仅是本发明的具体实施方式,使本领域技术人员能够理解或实现本发明。对 这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原 理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不 会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所申请的原理和新颖特点相一致的 最宽的范围。
Claims (5)
1.一种3D打印人工皮肤,其特征在于,所述皮肤包括:表皮层和真皮层,所述表皮层覆设于所述真皮层的上表面,呈水凝胶状态,具有pH敏感性;所述表皮层的组分包括:第一明胶、单宁酸和铁盐;
所述表皮层通过粘合剂覆设于所述真皮层,所述粘合剂包括硅橡胶、聚二甲基硅氧烷和聚氨酯中任意一种;
以质量分数计,所述第一明胶的质量为所述表皮层的总质量的3.5-6.5%、所述单宁酸的质量为所述表皮层的总质量的0.1-0.3%;所述铁盐中铁离子的质量为所述表皮层的总质量的0.05-0.07%;
所述真皮层的组分包括:三维多孔结构并负载有外泌体,所述外泌体包括毛乳头细胞外泌体、脂肪干细胞外泌体和血管内皮细胞外泌体;
所述三维多孔结构的组分包括:以质量分数计,第二明胶的质量为所述真皮层的总质量的5-8%;以摩尔浓度计,所述真皮层的组分还包括:丝素,所述丝素在所述真皮层中的摩尔浓度为0.5-1.5μmol/L;
以质量分数计,所述毛乳头细胞外泌体的质量分数为0.2-0.5%,所述脂肪干细胞外泌体的质量分数为0.2-0.5%,所述血管内皮细胞外泌体的质量分数为0.2-0.5%。
2.权利要求1所述的皮肤,其特征在于,所述第一明胶和所述第二明胶的溶解工艺均包括:将明胶与去离子水或纯净水接触,以温度为45-55℃加热搅拌1-2h至完全溶解。
3.一种如权利要求1-2任意一项所述的3D打印人工皮肤的制备方法,其特征在于,所述方法包括下列步骤:
获取所述表皮层的组分,得到pH敏感性水凝胶;
将所述pH敏感性水凝胶倒入模具中成型,浸泡后得到表皮层;
获取所述真皮层的组分,得到真皮层生物墨水;
将所述真皮层生物墨水进行3D打印,后冷冻干燥,得到真皮层;
将所述表皮层和所述真皮层叠加粘合,得到人工皮肤。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,以质量分数计,所述用于浸泡的溶液包括15-30%硫酸铵溶液,所述浸泡的温度为20-30℃,所述浸泡的时间为12-24h。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述3D打印的参数为:打印温度为35-37℃,打印的移动速度为5-20mm/s,打印纤维的直径50-200μm,打印纤维的间距为50-200μm,打印气压为5-50kPa,打印厚度为2000-6000μm。
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