CN113527384A - 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 - Google Patents
一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113527384A CN113527384A CN202010305752.4A CN202010305752A CN113527384A CN 113527384 A CN113527384 A CN 113527384A CN 202010305752 A CN202010305752 A CN 202010305752A CN 113527384 A CN113527384 A CN 113527384A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- formula
- reaction
- compound
- compound shown
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract description 11
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 title abstract description 6
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 title abstract description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 219
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 170
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 162
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 114
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 112
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 101
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 69
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 47
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 40
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 35
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 34
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 27
- 238000010791 quenching Methods 0.000 claims description 25
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 24
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 24
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 23
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 20
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 20
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl chloride Chemical group ClC(=O)OCC(Cl)(Cl)Cl LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 19
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 17
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 claims description 16
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 15
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 12
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical group [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 10
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 claims description 9
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- -1 amine organic base Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 8
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims description 8
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 7
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 7
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 6
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 claims description 6
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 4
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 claims description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910000288 alkali metal carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000008041 alkali metal carbonates Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L lithium carbonate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C([O-])=O XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910052808 lithium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 claims description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 8
- 230000003321 amplification Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 abstract description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 abstract description 3
- DZMOLBFHXFZZBF-UHFFFAOYSA-N prop-2-enyl dihydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OCC=C DZMOLBFHXFZZBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 54
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 33
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 18
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 16
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 14
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 11
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 9
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 9
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 8
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 8
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 8
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 6
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 6
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 6
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 6
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 5
- QPUYECUOLPXSFR-UHFFFAOYSA-N 1-methylnaphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(C)=CC=CC2=C1 QPUYECUOLPXSFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 4
- PYGSKMBEVAICCR-UHFFFAOYSA-N hexa-1,5-diene Chemical group C=CCCC=C PYGSKMBEVAICCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 4
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 4
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 3
- MUALRAIOVNYAIW-UHFFFAOYSA-N binap Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C(=C2C=CC=CC2=CC=1)C=1C2=CC=CC=C2C=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MUALRAIOVNYAIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 3
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 2
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N Phosphine Chemical compound P XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 2
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 1
- XXKHCFPQYSMGCI-LJQANCHMSA-N (3r)-3-hydroxyicosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)CC(O)=O XXKHCFPQYSMGCI-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DUWXVMIEMVFNGD-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethoxymethyl)naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(OC)OC)=CC=C21 DUWXVMIEMVFNGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJKVFARRVXDXAD-UHFFFAOYSA-N 2-naphthaldehyde Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C=O)=CC=C21 PJKVFARRVXDXAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010060804 Toll-Like Receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- GWAOFSOXGNJTAQ-UHFFFAOYSA-N benzyl phosphono hydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1=CC=CC=C1 GWAOFSOXGNJTAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 229940032077 cervical cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000012839 conversion disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052593 corundum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000006264 debenzylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- NQGIJDNPUZEBRU-UHFFFAOYSA-N dodecanoyl chloride Chemical compound CCCCCCCCCCCC(Cl)=O NQGIJDNPUZEBRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003602 elastase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N hepatitis b vaccine Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1N=CN=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N 0.000 description 1
- 229940124736 hepatitis-B vaccine Drugs 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940124735 malaria vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N meldrum's acid Chemical compound CC1(C)OC(=O)CC(=O)O1 GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- JDAKPBBWYIWXJF-UHFFFAOYSA-N n,n-diethyl-1,5-dihydro-2,4,3-benzodioxaphosphepin-3-amine Chemical compound C1OP(N(CC)CC)OCC2=CC=CC=C21 JDAKPBBWYIWXJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- BSCHIACBONPEOB-UHFFFAOYSA-N oxolane;hydrate Chemical compound O.C1CCOC1 BSCHIACBONPEOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229910000073 phosphorus hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N ruthenium(2+) Chemical compound [Ru+2] YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M sodium;hydrogen carbonate;hydrate Chemical class [OH-].[Na+].OC(O)=O XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound C[Si](C)(C)OS(=O)(=O)C(F)(F)F FTVLMFQEYACZNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 229910001845 yogo sapphire Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/12—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to a nitrogen atom of the saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
- C07F7/02—Silicon compounds
- C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
- C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
- C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
- C07F7/1872—Preparation; Treatments not provided for in C07F7/20
- C07F7/1892—Preparation; Treatments not provided for in C07F7/20 by reactions not provided for in C07F7/1876 - C07F7/1888
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。本发明提供的中间体以烯丙基磷酸配体为MPLA中磷酸基团来源，Nap为保护基，在后续操作中均可以方便的除去；合成的该中间体路线短，总收率明显增加。为MPLA的合成和放大提供了基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。
背景技术
MPLA是来自于革兰氏阴性细菌细胞壁中的内毒素(LPS)的最内层脂质体(lipidA)部分，单磷酰脂质A(Monophosphoryl Lipid A，以下简称MPL)。Lipid A是一个两亲结构，也是革兰氏阴性细菌具有毒性和免疫原性的关键结构，能引起机体的免疫反应。因此可将其作为佐剂添加在疫苗中以增加疫苗的免疫原性；一般来说，减毒活疫苗虽然免疫原性较强，但毒性也较大，可能会有致病风险；而无毒性的灭活疫苗，免疫原性较弱。佐剂的添加，可增强灭活疫苗的免疫原性，且不会对体质较弱者带来致病风险。同时减少抗原的使用量，增加疫苗供应量。MPL为铝盐之外的首个FDA通过的人用新型免疫佐剂物质。MPL作用于toll-like受体4(TLR4)，具有强免疫原性、机制明确、毒性小的优点。而现有的铝盐佐剂机制不明确，在注射部位发生红肿，疼痛的概率相比MPL大，且铝盐佐剂无法产生特异性细胞免疫。已有多个采用MPL佐剂系统的新疫苗品种在国内外获得上市，如乙肝疫苗Fendrix，宫颈癌疫苗Cerivix，带状疱疹疫苗Shingrix以及疟疾疫苗Mosquirix。并有二十余个处于临床阶段。
由于来源于不同细菌或同一细菌不同血清型的MPL其结构不同，基本差别在于脂肪链的数量/连接位置和脂肪链碳链长度，例如本专利合成的结构如下式所示；
n1和n3独立地为10、12或14，n2和n4独立地为8、10或12。
现有MPL来源依赖生物发酵提取，成本昂贵，且提取过程中，脂多糖糖类异质性问题难以解决，极易引发纯度问题，带来使用安全隐患。而基于特殊理化性质及复杂结构，化学方法合成MPL极为困难，难以替代生物发酵。已有的MPL及其Lipid A类似物的全合成报道也仅限于毫克级别，通常提供磷酸基团的配体一般为焦磷酸苄酯(di-O-benzyloxy(N,N-diisopropylamino)phosphine)或邻亚二甲苯基N,N-二乙基亚磷酰胺(N,N-diethyl-1,5-dihydro-3H-2,4,3-benzodioxaphosphepin-3-amine)作为磷酸基的来源，使用Bn为永久性保护基。以上这些保护基最后都必须使用氢化条件才能脱除。例如现有文献制备类似的lipid A及其衍生物时，使用苄基，需要用Pd/C在大气压或氢气加压条件下反应10-20 h，杂质多，收率在45％-68％之间。且纯化方式复杂，有提到需要使用再生纤维素过滤并超声除去催化剂；再使用DEAE-纤维素离子交换树脂分离，需要使用多个不同组分的混合溶剂作为流动相冲出产物。再反复分液浓缩得到终产物。(见ref 1：Alla Zamyatina,HaraldSekljic,Helmut Brade.Synthesis and purity assessment of tetra-and pentaacyllipid A of Chlamydiacontaining(R)-3-hydroxyicosanoic acid. Tetrahedron 60(2004)12113–12137。Ref 2：Kaustabh K.Maiti,Michael DeCastro,Abu-Baker M.Abdel-Aal El-Sayed.Chemical Synthesis and Proinflammatory Responses ofMonophosphoryl Lipid A Adjuvant Candidates.Eur.J.Org.Chem.2010,80–91)。
目前MPL类似物的全合成报道的合成路线均较长；除了使用的苄基保护基在后期脱保护时难以完全除去之外；为避免反应中产生副反应，通常需要一些临时性的保护基，导致涉及多个保护基，需要反复保护脱保护；并且在已报道的文献中四个脂肪链的链接连接次序各有不同，或在糖苷化后再连接四个脂肪链(0+4)，或3+1的方法，脂肪链链接连接选择性不强，或位阻较大，糖苷化时选择性较低等问题。([1]J.AM.CHEM.SOC.2007,129,5200-5216；[2]WO 2013072768；[3]The chemical record,Vol 6,333-343(2006))
由此可见，在目前的文献报道中，氢化的结果并不理想，收率低，杂质多，反应时间长(一般大于20h)，纯化条件繁琐复杂，难以规模化生产满足商业需求。
因此，目前急需一种路线短，总收率较高的新的制备方法，从而能够大量合成MPLA。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有的疫苗佐剂MPLA制备方法缺乏的缺陷，而提供了一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。本发明合成的该中间体路线短，总收率明显增加。采用该MPLA的关键中间体，在脱保护后即可得到MPLA，为MPLA的合成和放大提供了基础。
本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题的。
本发明提供了一种如式10所示的化合物的制备方法，其包括以下步骤：在有机溶剂中，在三乙基硅烷与PhBCl2存在下，将如式9所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式10所示的化合物即可；
所述的选择性还原开环反应的操作和反应条件可为本领域该类选择性还原开环反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
所述的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷。
所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式9所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为10g/L-100g/L(例如15g/L-30g/L，又例如25g/L)。
所述的三乙基硅烷与如式9所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如2:1-3:1，又例如2.5:1)。
所述的PhBCl2与所述的三乙基硅烷的摩尔比可为1:1-3:1(例如1.5:1-2:1，又例如1.6:1)。
所述的选择性还原开环反应的温度可为-80℃至-30℃(例如-78℃至-50℃)。
所述的选择性还原开环反应可在惰性气体保护下进行，所述的惰性气体可为氮气或氩气。
所述的选择性还原开环反应较佳地在分子筛存在下进行，以达到无水的状态；所述的分子筛可为
分子筛。
所述的选择性还原开环反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或 LCMS)，一般以所述的如式9所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的开环反应的时间优选0.2h-5h(例如0.5h-1h)。
所述的选择性还原开环反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的选择性还原开环反应结束后，淬灭，调pH至8，洗涤，有机相干燥浓缩，分离纯化，即可。所述的淬灭使用的溶剂可为甲醇。所述的调pH至8可采用胺类有机碱(例如三乙胺)调节得到。所述的洗涤可采用饱和NaHCO3溶液。所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的填料可为柱层析用硅胶；所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯的混合溶液(例如PE:EA＝6:1，体积比)。
所述的如式10所示的化合物的制备方法还可包括以下步骤：在有机溶剂中，在碱存在下，将如式8所示的化合物与FmocCl进行如下所示的Fmoc保护反应，得到所述的如式9所示的化合物即可；
所述的Fmoc保护反应中，所述的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷。
所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式8所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为10g/L-100g/L(例如50g/L-70g/L，又例如53g/L)。
所述的碱可为有机碱和/或无机碱，所述的有机碱可为N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、吡啶和三乙胺中的一种或多种；所述的无机碱可为碱金属碳酸盐(例如碳酸钠、碳酸钾和碳酸锂中的一种或多种) 和或碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠和/或碳酸氢钾)；较佳地为N,N-二异丙基乙胺。
所述的碱与所述的如式8所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如2:1-3:1)。
所述的FmocCl与所述的如式8所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如2:1-3:1)。
所述的Fmoc保护反应的温度可为10℃-50℃(例如10℃-30℃)。
所述的Fmoc保护反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式8所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的Fmoc保护反应的时间优选0.5-12h(例如1h-5h)。
所述的Fmoc保护反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的Fmoc保护反应结束后，洗涤，有机相干燥，浓缩，分离纯化，即可。所述的洗涤可采用饱和食盐水。所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶，所述的结晶的溶剂可为二氯甲烷与甲醇的混合溶液(例如二氯甲烷: 甲醇＝1:10，体积比)。
所述的如式10所示的化合物的制备方法还可包括以下步骤：在有机溶剂中，在脱保护剂存在下，将如式7所示的化合物进行如下所示的脱Troc保护基反应，得到所述的如式8所示的化合物即可；
所述的脱Troc保护基反应的操作和反应条件可为本领域该类脱Troc保护基反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
所述的脱Troc保护基反应中，所述的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷。
所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式7所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为50g/L-200g/L(例如60g/L-100g/L)。
所述的脱保护剂可为锌粉和醋酸。所述的醋酸与所述的锌粉的质量比可为1:1-4:1(例如1.5:1-2.5:1，又例如2:1)。所述的锌粉与所述的如式7所示的化合物的质量比可为0.1:1-5:1(例如0.5:1-1.5:1，又例如1:1)。
所述的脱Troc保护基反应的温度可为0℃-50℃(例如10℃-30℃)。
所述的脱Troc保护基反应可在惰性气体保护下进行，所述的惰性气体可为氮气或氩气。
所述的脱Troc保护基反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式7所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的脱Troc保护基反应的时间优选1-12h(例如1.5h-5h)。
所述的脱Troc保护基反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的脱Troc 保护基反应结束后，过滤，浓缩，分离纯化，或者，洗涤，分液干燥，浓缩，(不经分离纯化)直接用于下一步如式8所示的化合物的制备，即可。所述的洗涤的溶剂可依次为饱和碳酸氢钠和饱和食盐水。
所述的如式10所示的化合物的制备方法还可包括以下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式20所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式 7所示的化合物即可；
所述的酯化反应的操作和反应条件可为本领域该类酯化反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
所述的酯化反应中，所述的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷。
所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为5g/L-200g/L(例如60g/L-150g/L，又例如12g/L、85g/L、115 g/L)。
所述的催化剂可为本领域该类反应中常规的催化剂，例如有机碱，优选4-二甲氨基吡啶(DMAP)、三乙胺和吡啶中的一种或多种，较佳地为DMAP。
所述的缩合剂可为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、二环己基碳二亚胺(DCC)和N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)中的一种或多种，例如1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐。
所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如1:1-3:1，又例如1.2:1- 2:1)。
所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比可为0.01:1-1:1(例如0.01:1-0.5:1，又例如0.1:1、0.04:1、 0.025:1)。
所述的如式20所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比可为1:1-3:1(例如1:1-2.5:1，又例如1.2:1、1.4:1、2:1)。
所述的酯化反应的温度可为-10℃-50℃(例如10℃-30℃)。
所述的酯化反应中，可采用如下步骤：将所述的碱与所述的缩合剂加入到所述的如式1所示的化合物、所述的如式20所示的化合物与所述的溶剂的混合体系中，进行如上述所述的酯化反应。所述的加入温度可为-10℃至10℃(例如0±5℃)。
所述的酯化反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式1所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的酯化反应的时间优选1-24h (例如2h-12h)。
所述的酯化反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的酯化反应结束后，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液。所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶，所述的结晶的溶剂可为二氯甲烷与甲醇的混合溶液(例如二氯甲烷:甲醇＝1:12 至1:8，体积比，较佳地为1:12)。所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯(石油醚:乙酸乙酯的体积比＝7:1)。
本发明还提供了一种如式10、式9、如式8、式7所示的化合物；
本发明还提供了一种如上所述的如式9所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：在有机溶剂中，在碱存在下，将如式8所示的化合物与FmocCl进行如下所示的Fmoc保护反应，得到所述的如式9所示的化合物即可；
所述的如式9所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如上所述。
本发明还提供了一种如上所述的如式8所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：在有机溶剂中，在脱保护剂存在下，将如式7所示的化合物进行如下所示的脱Troc保护基反应，得到所述的如式8所示的化合物即可；
所述的如式8所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如上所述。
本发明还提供了一种如上所述的如式7所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式20所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式7所示的化合物即可；
所述的如式7所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如上所述。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：本发明以Nap为保护基，在后续操作中均可以方便的除去；合成的该中间体路线短，总收率明显增加。为MPLA的合成和放大提供了基础。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
化合物18-a系列实施例
原料化合物1的制备
向加入2-脱氧-1-氧-(1,1-二甲基乙基)二甲基硅烷基-2-[(2,2,2-三氯乙氧基)羰基]氨基-3,4,6-三乙酰基-β-D-葡萄糖(10g，16.8mmol)的反应瓶中缓慢加入胍啶盐酸盐缓冲溶液(100mL,pH＝8)，室温搅拌 3.5h,TLC检测原料消耗完后，反应液用阳离子树脂中和，过滤浓缩，用二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液萃取产物,收集有机层浓缩得到2-脱氧-1-氧-(1,1-二甲基乙基)二甲基硅烷基-2-[(2,2,2-三氯乙氧基) 羰基]氨基-β-D-葡萄糖(1-1,8.23g)。
在反应瓶中将1-1与2-(二甲氧基甲基)-萘(5.1g，25mmol，1.5eq)溶解在50mL乙腈中，加入樟脑磺酸(0.39g，1.69mmol，0.1eq)，室温下搅拌4h反应，加入三乙胺至中性，反应液用二氯甲烷与饱和碳酸氢钠溶液萃取，分液。有机相干燥旋干后得到黄色固体物。粗品过硅胶砂芯漏斗(PE:EA＝5:1) 得到产物1(浅黄色固体，6.97g)，两步收率为68.3％。
化合物1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96–7.50(m,7H),5.72(s,1H),5.17(d,J＝6.3Hz,1H), 4.88(d,J＝7.7Hz,1H),4.73(q,J＝12.0Hz,2H),4.36(dd,J＝10.5,5.0Hz,1H),4.13–4.01(m,1H),3.86 (t,J＝10.3Hz,1H),3.70–3.58(m,1H),3.52(td,J＝9.7,5.0Hz,1H),3.47–3.35(m,1H),2.96(s,1H),0.94 (d,J＝8.2Hz,9H),0.20–0.08(m,6H).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ154.54,134.52,133.78,132.87,128.41,128.29,127.75,126.69,126.41, 126.07,123.93,101.97,96.33,95.30,81.52,74.85,70.71,68.68,66.20,60.73,26.94,25.59,17.90,-4.14,- 5.26.
原料化合物23的制备
参考如下参考文献中方法进行制备化合物23，并使用相同方法测定ee值：BelmaHasdemir,Hülya 
Asymmetric synthesis of long chainβ-hydroxy fatty acid methyl esters as new elastase inhibitors.Tetrahedron:Asymmetry.(23)2012,1100-1105。文献标题不规范，已修改
步骤(1)化合物22的制备
将米氏酸(64.8g，0.45mol)和吡啶(48mL)溶于CH2Cl2(100mL)中，在0℃下加入月桂酰氯(21，65.6g，0.3mol)。室温搅拌2.5小时。原料完全消耗后，用1M HCl(100mL)和水(100mL) 洗涤。有机层干燥过滤并浓缩。将其溶于甲醇(250mL)回流过夜。中间体消耗完后浓缩并通过Al2O3柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝2∶1)，得到淡黄色固体22(59.3g，77％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.70(3H,d,J＝1.5),3.42(2H,s),2.50(2H,t,J＝7.4),1.28(18H,s), 0.90(3H,t,J＝6.6).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ202.51,167.58,137.67,128.96,128.15,125.25,52.02,48.84,42.90, 31.92,29.62,29.47,29.38,29.35,29.01,23.43,22.68,21.31,14.04.
步骤(2)化合物23的制备
钌催化剂的制备：将180mg(R)-Ru(OAc)2(BINAP)(二乙酸根[(R)-(+)-2,2'-二(二苯基膦基)-1,1'-联萘基]钌(II)，cas号：325146-81-4)溶于CH2Cl2(5mL)，加入1.42N HCl(0.35mL)，室温下搅拌1 小时后旋干备用。
将化合物22(15g)与制备好的钌催化剂溶于甲醇(50mL)。H2(1.5MPa)条件下65℃搅拌6 h。原料完全完后，将反应液浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)，得到化合物 23(白色固体，15g，98％，ee值＝98.7％))。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.01(1H,dq,J＝11.8,4.0),3.71(3H,s),2.90(1H,d,J＝4.0),2.46(2 H,ddd,J＝25.4,16.4,6.1),1.26(18H,s),0.88(3H,t,J＝6.8).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.41,67.99,51.63,41.18,36.57,31.89,29.60,29.56,29.51,29.32, 25.47,22.65,14.05.
对化合物23的制备进行反应条件筛选：
底物与催化剂比例(S/C)与ee值的关系：以S/C＝300催化剂量50℃大约4-6h反应完全，收率达到95％以上。为减少催化剂的使用，尝试了每20g底物，180mg催化剂的反应(S/C>300)，收率仅为71％。
将化合物22(20g)与制备好的180mg钌催化剂溶于甲醇(50mL)。H2(1.5MPa)条件下65℃搅拌6h。原料完全完后，将反应液浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)，得到化合物3(白色固体，10.7g，71％，ee值＝92.3％)。
对以上不同条件下的产物ee值进行分析，催化剂较少，收率下降的同时ee值也仅为92％。而 S/C＝300的几批产物，ee值均在98％以上。
实施例1化合物24的制备
将化合物23(10g，39mmol,1eq)与2-萘甲醛(18.14g，116mmol,3eq)溶于THF(100mL)，冰浴下加入TMSOTf(6.88g，31mmol,0.8eq)，(TMS)2O(37.68g，232mmol,6eq)和Et3SiH(15.7 g，135mmol,3.5eq)。0℃下反应1.5小时，将反应液用CH2Cl2(150mL)稀释，并用饱和NaHCO3洗涤。将有机层旋干并重结晶(得到甲基萘，室温下是白色固体)(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)，过滤以除去杂质(甲基萘)。收集滤液(含化合物24)并旋干，得到淡黄色油状液体的粗产物24，无需纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)0.89(3H,t，J6.7),1.27–1.64(18H,m),2.35(2H,dd,J 8.4)2.49 (1H,dd,J15.0,5.3),2.62(1H,dd,J15.0,7.3),3.68(3H,s),3.88(1H,m),4.54(2H,m),7.25–7.35(7H,m).
实施例2化合物20的制备
将实施例1中制备得到的化合物24溶于THF-H2O溶液(5：1，100mL)，加入氢氧化锂水溶液 (9.41g，224mmol，94mL)，回流12h。原料消失后，冷却至室温，加入1.5M HCl水溶液淬灭至 pH值为7。将混合物用CH2Cl2(150mL)稀释，用饱和NaHCO3洗涤。有机相干燥并旋干。硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)得到化合物20(11.6g，两步收率77.9％，无色糖浆)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.00(1H,s,OH),7.85(4H,dd,J＝14.5,10.8),7.53(3H,d,J＝4.2), 4.85–4.71(2H,m,NapCH2O),4.08–3.94(1H,m,H-3),2.76(1H,dd,J＝15.2,6.9,H-2),2.64(1H,dd,J ＝15.2,4.3,H-2),1.84–1.58(2H,m,H-4),1.57–1.31(18H,m),1.00(3H,t,J＝6.0).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ177.86,135.86,133.38,133.10,128.20,128.00,127.76,126.57,126.10, 125.99,125.89,75.94,71.71,39.81,34.37,32.05,29.77,29.71,29.48,25.27,22.82,14.26.
实施例3化合物2的制备
将化合物19-A(5g,11.7mmol)与EDC·HCl(2.25g,11.7mmol，1.2eq)溶于CH2Cl2(50mL)，室温搅拌15min后加入化合物1(5.93g,9.8mmol)和DMAP(0.06g,0.5mmol，0.05eq)，室温下搅拌10 h反应完，反应液依次用CH2Cl2(100mL)和饱和NaHCO3(60mL)洗涤。分液干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物2-a(8.6g,86.7％，无色糖浆)。TOF- MS:m/z:1036.46[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.91(1H,s),7.82(3H,dt,J 9.3,4.9),7.54(1H,d,J 8.5),7.50–7.44(2H,m), 5.65(1H,s,NapCH),5.40–5.29(2H,m,H-3,NH),5.17(1H,dd,J 12.2,6.2,lipid-H-3),4.88(1H,d,J 7.8, H-1),4.69(2H,dd,J 48.4,12.0,Troc),4.34(1H,dd,J 10.5,4.9,H-6),3.84(1H,t,J 10.3,H-6),3.75(1H,t, J 9.4,H-4),3.62(1H,dd,J16.8,7.7,H-2),3.54(1H,td,J 9.7,5.0,H-5),2.57(2H,ddd,J 20.5,15.2,6.3), 2.12(2H,t,J 7.4),1.56–1.41(4H,m),1.32–1.13(34H,m),0.92–0.85(15H,m),0.11(6H,d,J8.6).
δC(101MHz,CDCl3)173.41,170.19,154.12,134.29,133.71,132.85,128.38,128.11,127.67,126.47, 126.16,125.81,123.73,101.76,96.82(C-1),95.31,78.95(C-4),74.66,71.14(C-3),69.98,68.72(C-6), 66.47(C-5),59.11(C-2),39.26,34.31,33.83,31.93,29.63,29.50,29.35,29.29,29.06,25.53,25.07,24.93, 22.69,17.88,14.13,-4.21,-5.29.
实施例4化合物3-a的制备
将化合物2-a(2g,1.97mmol)溶于THF(20mL)，依次在冰浴条件下加入BH3·Me3N(0.57g,7.69 mmol，3.9eq)，AlCl3(1.52g,11.4mmol)，H2O(69mg,3.83mmol，1.9eq)反应液在室温下搅拌1.5h。加水(20mL)、1M HCl溶液(20mL)淬灭，反应液用CH2Cl2(30mL)分液，干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物3-a(1.72g,86％，无色油状液体)。TOF- MS:m/z:1038.52[M+Na]+.
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.75(4H,m),7.46(3H,dd,J 7.7,4.0),5.37(1H,d,J 9.2,NH),5.15(1H, s,lipid-H-3),5.03(1H,t,J 9.7,H-3),4.81–4.71(4H,m,H-1,NapCH2,Troc),4.63(1H,d,J 11.9,Troc), 3.81(2H,qd,J 10.5,3.8,H-6),3.69(1H,t,J 9.8,H-4),3.65–3.54(2H,m,H-2,H-5),3.47(1H,s,OH), 2.62–2.48(2H,m,lipid-H-2),2.28(2H,t,J 7.3,lipid’-H-2),1.57(4H,s,lipid’-H-3,lipid-H-4),1.25(34H, s),0.88(15H,s),0.12(6H,d,J 17.5).
δC(101MHz,CDCl3)174.35,171.77,154.27,135.54,133.29,133.02,128.20,127.89,127.71,126.29, 126.11,125.88,125.56,96.50(C-1),75.91(C-3),74.72(C-5),74.61,73.73,70.96,70.19(C-4),70.01(C-6), 60.43,57.85(C-2),40.10,34.58,34.50,31.94,29.65,29.56,29.52,29.37,29.30,29.14,25.61,25.16,24.99, 22.71,21.06,17.93,14.21,14.14,-4.06,-5.28.
实施例5化合物4的制备
(1)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺，0.24g,0.978mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完。
-40℃下将mCPBA(211mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入上述反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.53g,92％)。TOF- MS:m/z:1198.67[M+Na]+.
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.77(4H,m),7.50–7.44(3H,m),5.90–5.73(2H,m,CH2＝CH-CH2O-), 5.41–5.16(6H,m,NH,lipid-H-3,CH2＝CH-CH2O-),4.97(1H,d,J 7.9,H-1),4.79-4.63(4H,td,J 12.3,12.4,12.0,Troc,Nap-CH2),4.49–4.38(5H,m,H-4,CH2＝CH-CH2O-),3.85(1H,d,J 9.6,H-6),3.75(1 H,d,J 5.4,H-6),3.72–3.65(1H,m,H-5),3.50–3.40(1H,m,H-2),2.64–2.60(2H,m),2.28(2H,t,J 7.4),1.58(4H,br,J 7.3),1.25(34H,s),0.91–0.86(15H,m),0.13(6H,d,J 19.2).
δC(101MHz,CDCl3)173.57,170.37,153.95,135.65,133.27,132.98,132.27,132.21,132.14,128.09, 127.87,127.68,126.23,126.05,125.81,125.65,118.56,118.40,95.63(C-1),95.32,74.59,74.12(C-5), 74.06(C-4),73.61,72.42(C-3),70.06,68.70(C-6),68.62,68.56,68.46,68.41,58.67(C-2),39.59,34.51,34.24, 31.92,29.66,29.64,29.57,29.52,29.35,29.20,25.61,25.17,25.07,22.69,22.57,17.93,14.12,-4.15,-5.25.
(2)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(0.18g,0.73mmol,1.5eq)，室温下反应2h后原料未消耗完，补加0.5eq烯丙基配体， 30min后原料消耗完。-40℃下将mCPBA(211mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入反应体系，缓慢升至-10℃，30min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.49g,84.7％)。
(3)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(171mg,2.45mmol,5eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(0.24g,0.978mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完，-40℃下将mCPBA(211 mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.474g,82.3％)。
实施例6化合物5-a的制备
将化合物4-a(0.8g,0.68mmol)溶于THF(24mL)，–40℃加入稀释于15mL吡啶的HF/pyridine (2.4mL,65–70％)。缓慢升至室温反应12h，反应液用NaHCO3(40mL)淬灭，加入CH2Cl2(50mL)分液，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)得化合物5-a(0.657g,91％，白色固体)。TOF- MS:m/z:1084.48[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.77(4H,m),7.51–7.44(3H,m),5.91–5.65(2H,m,CH2＝CH-CH2O-), 5.61(1H,d,J 9.4,NH),5.42–5.26(3H,m,H-1,CH2＝CH-CH2O-),5.23–5.09(4H,m,H-3,CH2＝CH- CH2O-,lipid-H-3),4.80-4.69(4H,m,Troc,Nap-CH2),4.45–4.40(3H,m,H-4,CH2＝CH-CH2O-),4.36– 4.27(2H,m,CH2＝CH-CH2O-),4.25–4.19(1H,m,H-5),4.01–3.94(1H,m,H-2),3.84–3.75(2H,m,H- 6),2.60(2H,ddd,J 21.4,16.2,6.3),2.24(2H,t,J7.6),1.56(4H,d,J 7.0),1.25(34H,s),0.88(6H,t,J 6.8).
δC(101MHz,CDCl3)173.38,170.76,154.31,135.19,133.23,133.04,132.28,132.22,132.09,132.02, 128.23,127.92,127.70,126.67,126.15,125.95,125.81,118.66,118.38,95.37,91.50(C-1),74.65,73.63(C- 4),70.82(C-3),69.90,69.57,69.52(C-5),68.67,68.61,68.47,68.40,68.35(C-6),54.27(C-2),39.10,34.46, 34.15,31.92,29.64,29.57,29.53,29.36,29.32,29.18,25.18,25.01,22.69,14.12.
实施例7化合物6-a的制备
将化合物5-a(1.3g,1.22mmol)溶于超干(dry)CH2Cl2(20mL)，N2保护下加入2,2,2-三氟-N-苯乙酰亚胺氯(1.52g,7.32mmol，6eq)与DBU(371mg,2.44mmol，2eq)，室温反应30mins。将反应液浓缩柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1with 0.1％Et3N)得到化合物6-a(1.11g,74％，无色糖浆)。 TOF-MS:m/z:1255.48[M+Na]+。
实施例8化合物7的制备
(1)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL 二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后重结晶纯化(二氯甲烷：甲醇＝1：12)得到化合物7(5.08g,93.5％)。TOF-MS:m/z:994.41[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.81(1H,s),7.76–7.61(7H,m),7.48–7.35(5H,m),7.30(1H,d,J8.4),5.50 (1H,s,NapCH),5.39(1H,t,J 9.9,H-3),5.24(1H,d,J 9.1,NH),4.84(1H,d,J7.8,H-1),4.67–4.62(3H, m,NapCH2,-OCH2CCl3),4.52(1H,d,J 11.8,-OCH2CCl3),4.31(1H,dd,J 10.4,4.7,H-6),3.85–3.81(1H, m,Lipid-H-3),3.78(1H,d,J 10.3,H-6),3.71(1H,t,J 9.5,H-4),3.67–3.60(1H,m,H-2),3.53(1H,td,J 9.5,5.1,H-5),2.74(1H,dd,J 14.9,6.0,Lipid-H-2),2.55(1H,dd,J 14.8,5.6,Lipid-H-2),1.54(2H,m, Lipid-H-4),1.27(18H,s),0.91(12H,s),0.13(6H,d,J 12.0).
δC(101MHz,CDCl3)171.82,154.36,136.11,134.41,133.85,133.41,133.13,132.99,128.53,128.28, 128.23,128.11,127.88,127.85,126.60,126.51,126.31,126.20,126.04,125.96,125.91,123.85,101.88,97.14 (C-1),79.18(C-4),75.73(C-6),74.88,71.39(C-3),71.28,68.91(C-6),66.76(C-5),60.64,59.29(C-2),39.77, 34.71,32.15,29.87,29.86,29.80,29.77,29.58,25.74,25.45,22.92,21.28,18.08,14.43,14.37,-3.98,-5.08.
(2)
将EDC·HCl(1.087g,5.67mmol,1.2eq)，化合物20(2.18g,5.67mmol,1.2eq)加入反应瓶，加入25mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(2.87g,4.72mmol)，DMAP(29mg,0.237mmol, 0.05eq)，反应12h化合物1未消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(2.72g,59.23％)。
(3)
将EDC·HCl(1.81g,9.44mmol,2eq)，化合物20(2.54g,6.6mmol,1.4eq)加入反应瓶，加入 25mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(2.87g,4.72mmol)，DMAP(29mg,0.237mmol, 0.05eq)，反应12h化合物1未消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(3.27g,71.2％)。
(4)
将EDC·HCl(2.65g,13.8mmol,2eq)，化合物20(5.33g,13.8mmol,2eq)加入反应瓶，加入50 mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(4.12g,6.78mmol)，DMAP(170mg,1.39mmol,0.2 eq)，反应12h化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(5.22g,79.1％)。
(5)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL 二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(4.71g,86.7％)。
(6)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL 二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后重结晶纯化(二氯甲烷：甲醇＝1：8)得到化合物7(3.93g,72.4％)。
实施例9化合物8的制备
化合物7(6g,6.16mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，加入醋酸(12mL,2V)和锌粉(6g,1V)(V是指质量当量)，室温剧烈搅拌2h反应完，依次用饱和碳酸氢钠(60mL)，饱和食盐水(60mL)洗涤。分液干燥浓缩后得到化合物8(5.3g)。TOF-MS:m/z:821.134[M+Na]+。直接用于下一步反应。
实施例10化合物9的制备
(1)
将实施例9中制备得到的化合物8溶于二氯甲烷(100mL)，冰浴下加入FmocCl(3.2g,12.36 mmol,2eq)，DIPEA(1.6g,12.36mmol,2eq)，室温下搅拌2h反应完，加入饱和食盐水(100mL) 洗涤，分液干燥旋干后重结晶(二氯甲烷：甲醇＝1：10)得到化合物9(5.6g,89.1％)。TOF- MS:m/z:1042.7[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.83(1H,s),7.78–7.65(7H,m),7.64–7.44(5H,m),7.40(6H,ddd,J 15.3, 9.7,5.3),7.32–7.24(3H,m),5.53(1H,s,NapCH),5.44(1H,t,J 9.4,H-3),4.97(1H,d,J 8.7,NH),4.91 (1H,d,J 7.2,H-1),4.63(1H,d,J 11.8,Fmoc-CH2),4.51(1H,d,J 11.8,,Fmoc-CH2),4.32(1H,br,H-6), 4.28(2H,d,J 6.5,NapCH2),4.17(1H,d,J 6.4,,Fmoc-CH),3.82(2H,s,H-6,Lipid-H-3),3.78–3.71(1H, m,H-4),3.67(1H,d,J 8.9,H-2),3.58(1H,br,H-5),2.70(1H,dd,J 14.8,6.3),2.50(1H,dd,J 14.8,5.5), 1.55–1.37(2H,m),1.29–0.96(18H,m),0.91–0.81(12H,m),0.09(6H,d,J 13.5).
δC(101MHz,CDCl3)155.78,143.79,141.23,135.92,134.24,133.63,133.17,132.87,132.78,128.31, 128.05,127.92,127.86,127.63,127.04,126.34,126.26,126.06,125.93,125.81,125.69,125.15,123.64, 119.96,101.65,97.14(H-1),79.00(H-4),75.62(H-6),71.25(H-3),71.19,68.76(H-6),67.19,66.60(H-5), 58.98(H-2),47.04,39.74,34.53,31.92,29.61,29.53,29.34,25.49,25.16,22.69,17.86,14.14,-4.21,-5.36.
(2)
化合物7(6g,6.16mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，加入醋酸(12mL,2V)和锌粉(6g,1V)，室温剧烈搅拌2h反应完，依次用饱和碳酸氢钠(60mL)，饱和食盐水(60mL)。分液干燥浓缩后得到化合物8(5.3g)。将其溶于二氯甲烷(100mL)，冰浴下加入FmocCl(3.2g,12.36mmol,2eq)， DIPEA(1.6g,12.36mmol,2eq)，室温下搅拌2h反应完，加入饱和食盐水(100mL)洗涤，分液干燥旋干后重结晶(甲醇，5V)得到化合物9(4.91g,78.1％)。
实施例11化合物10的制备
将化合物9(1.5g,1.47mmol)与分子筛
溶于超干CH2Cl2(60mL)，N2保护下–78℃加入三乙基硅烷(0.55mL,3.67mmol,2.5eq)与PhBCl2(0.76mL,5.88mmol)，反应液在–78℃搅拌1h。反应结束后加入甲醇(6mL)淬灭，三乙胺调pH～8。将反应液过滤后饱和NaHCO3(10mL)洗涤。干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)得到化合物10(1.2g,80.1％，无色油状液体)。TOF- MS:m/z:1044.45[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.75–7.73(1H,m),7.70(7H,dd,J 14.7,5.4),7.66(2H,d,J5.3),7.62(2H,d, J 5.8),7.53(1H,d,J 3.9),7.44–7.38(6H,m),7.30–7.25(3H,m),5.32(1H,t,J 9.8,H-3),4.93(1H,d,J 9.3,NH),4.79(1H,d,J 6.6,H-1),4.73(2H,q,J 11.7,NapCH2),4.57(2H,dd,J 24.5,11.7,Fmoc-CH2), 4.24(2H,d,J 7.1,Lipid-NapCH2),4.17–4.10(1H,m,Fmoc-CH),3.85-3.80(2H,s,H-6,Lipid-H-3),3.74 (1H,d,J 3.9,H-4),3.73–3.69(1H,m,H-6),3.60(1H,dd,J 18.4,9.4,H-2),3.49(1H,d,J 8.3,H-5),2.55 (1H,dd,J15.6,7.1),2.39(1H,dd,J 15.5,4.9),1.55–1.39(2H,m),1.22–1.06(18H,m),0.87–0.82(12 H,m),0.08(6H,d,J 13.4).
δC(101MHz,CDCl3)172.00,155.84,143.86,141.23,135.99,135.05,133.23,133.15,132.98,132.92, 128.26,128.04,127.95,127.87,127.69,127.65,127.04,126.67,126.29,126.14,126.00,125.97,125.87, 125.79,125.74,125.22,119.96,96.66(H-1),75.72(H-4),75.28(H-5),74.64(H-3),71.47(Fmoc-CH2),67.24 (Lipid-NapCH2),62.00(H-6),58.48(H-2),53.46,47.06(Fmoc-CH),39.74,34.19,31.96,29.67,29.65,29.62, 29.60,29.38,25.52,25.15,22.73,17.90,14.17,-4.07,-5.25.
实施例12化合物11的制备
(1)
在反应瓶中加入受体化合物10(606mg,0.593mmol)，给体化合物6-a(1.1g,0.89mmol,1.5eq)分子筛
，N2条件下加入超干CH2Cl2(10mL)，在-20℃下加入二氯甲烷稀释100倍的TfOH (10μL,0.12mmol，0.2eq)，–20℃下搅拌40min；加入甲醇(5mL)淬灭，三乙胺调pH至8。反应液用 CH2Cl2(35mL)和饱和NaHCO3(10mL)洗涤。有机相干燥浓缩，经柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到糖苷化产物11-a(1.03g,84％)。TOF-MS:m/z 2088.14[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.80–7.21(29H,m),5.89–5.68(2H,m,diallyl),5.48(1H,d,J7.0,NH’),5.37 (1H,t,J 9.6,H-3’),5.32–5.10(6H,m,H-3,lipid-H-3,diallyl),4.87(1H,d,J 9.1,NH),4.80(1H,d,J 7.7, H-1’),4.74(1H,d,J 3.3,H-1),4.70(4H,d,J 12.8,Troc,Nap),4.64(2H,d,J 3.3,Nap-CH2),4.53(2H,dd, J 29.1,11.9,Fmoc),4.45(1H,s,H-4’),4.43–4.31(5H,m,H-4,diallyl),4.24(2H,d,J 6.8,acceptor-lipid- Nap),4.16–4.11(1H,m,Fmoc-CH),4.07(1H,d,J 10.3,H-6),3.83(2H,d,J 10.2,H-6,acceptor-lipid-H- 3’),3.72(2H,dd,J 10.3,6.0,H-6’),3.65–3.54(3H,m,H-2,H-5,H-5’),3.41(1H,dd,J17.7,8.4,H-2’), 2.61(2H,t,J 6.6),2.50(1H,dd,J 15.6,7.1),2.35(1H,dd,J 15.8,5.1),2.28(2H,t,J 7.4),1.59(6H,d,J 7.7),1.42(4H,ddd,J 14.5,10.8,6.1),1.32–1.21(52H,m),0.86(18H,dd,J 14.9,7.8),0.15–0.05(6H, m).
δC(101MHz,CDCl3)δ172.65,170.83,169.04,154.72,152.94,142.82,140.16,134.94,134.60,134.29, 132.19,132.15,132.08,131.91,131.84,131.82,131.29,131.22,131.13,131.06,129.85,127.80,127.12, 127.06,126.93,126.85,126.79,126.62,126.60,126.55,125.97,125.32,125.17,125.10,125.02,124.90, 124.85,124.78,124.70,124.67,124.61,124.18,118.86,117.44,117.27,99.00(C-1’),95.53(C-1),94.38, 75.08(C-5’),74.58(C-5)73.71(C-3),73.43(C-4’),73.31(C-4),73.11,73.05,72.96,72.91,72.60,71.37(C-3’), 70.37,69.10,67.55(C-6),67.49(C-6’),67.34,67.28,66.14,64.51,57.32(C-2),55.78(C-2’),46.00,38.78, 38.64,33.50,33.41,33.13,30.89,28.67,28.63,28.61,28.59,28.54,28.51,28.31,28.17,24.54,24.15,24.07, 24.03,21.66,18.16,16.82,13.12,13.10,-4.91,-6.31.
(2)
将化合物6-a(50mg,0.04mmol)与化合物10(51mg,0.049mmol,1.2eq)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.25mg,0.00167mmol，0.05eq)。1h后化合物6-a(给体)消耗完，化合物10(受体)未消耗完。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化 (甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(49mg,58.5％)。由于产物11-a与受体10极性接近，与给体6-a极性相差较大。因此，当受体10过量时，虽然反应转化率基本相当，但分离收率较低。
(3)
将化合物6-a(100mg,0.081mmol，1.2eq)与化合物10(69mg,0.067mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.5mg,0.0033mmol，0.05eq)。1h 后给体受体均未消耗完，延长反应时间无变化。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(58mg,0.0278mmol，41.7％)。
(4)
将化合物6-a(200mg,0.162mmol，1.5eq)与化合物10(110mg,0.107mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.8mg,0.0053mmol，0.05eq)。1h 后给体受体均未消耗完，延长反应时间无变化。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(107mg,48.2％)。
(5)
将化合物6-a(200mg,0.162mmol，1.5eq)与化合物10(110mg,0.107mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(2.43mg,0.0162mmol，0.15eq)。1h 后给体消耗完，。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11- a(192mg,86.48％)。TOF-MS:m/z:2088.14[M+Na]+。
实施例13化合物12-a的制备
在反应瓶中将化合物11-a(860mg,0.029mmol)溶于CH2Cl2(10mL)，N2条件下加入锌粉(2.7g， 40mmol)和醋酸(2.7mL，45mmol)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物12-a。TOF-MS:m/z 1912.06[M+Na]+。
实施例14化合物13-a(MPL-8)的制备
将实施例13中制备得到的化合物12-a溶于超干DCM(10mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl (2g,10.43mmol)和脂肪链19-A(1.48g,3.47mmol)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13-a(680mg,71％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2323.15[M+Na]+。
实施例15化合物14-a的制备
在反应瓶中将化合物13-a(580mg,0.252mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL, 86mmol)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-a。TOF-MS:m/z 2030.2[M+Na]+。
实施例16化合物15-a的制备
将实施例15中制备得到的化合物14-a溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl (295mg,1.53mmol)和脂肪链20(296mg,0.77mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1)得到化合物15-a(480mg,收率78％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2468.4[M+Na]+。
实施例17化合物16-a的制备
将化合物15-a(300mg，0.123mmol)溶于THF(10mL)，–40℃下加入溶于吡啶(9mL)的HF /Py(3mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1，MeOH依次洗脱)得到16-a(0.214g，75％，白色固体)。
δH(600MHz,CDCl3)7.77–7.24(28H,m),6.28(1H,d,J 9.5,NH),6.22(1H,d,J 7.4,NH’),5.77– 5.70(1H,m,allyl),5.67–5.59(1H,m,allyl),5.44–5.31(3H,m,H-3,H-1’,H-3’),5.22–5.03(6H,m, allyl,H-1,lipid-H-3),4.99(1H,t,J 5.8,lipid-H-3),4.67–4.57(5H,m,Nap),4.52–4.42(3H,m,Nap), 4.35–4.21(5H,m,H-4’,diallyl),4.17(1H,td,H-2),4.05(1H,d,J 7.2,H-5),3.87(1H,d,J 11.7,H-6’), 3.80–3.74(3H,m,lipid-H-3*2,H-6’),3.67–3.56(4H,m,H-4’,H-6*2,H-5’),3.32–3.28(1H,m,H-2’), 3.27(1H,t,J 11.6,7.7,H-4),2.55–2.43(3H,m),2.28–2.11(9H,m),1.45–1.37(8H,m),1.22–1.10 (108H,m),0.80(18H,dt,J 7.0,5.1).
δC(151MHz,CDCl3)173.28,172.55,170.87,170.29,169.85,168.98,135.06,134.48,133.92,132.31, 132.23,132.19,132.10,131.96,131.90,131.86,131.22,131.17,131.11,131.06,127.15,127.09,127.05, 126.91,126.83,126.66,126.57,125.46,125.41,125.36,125.24,125.06,124.99,124.93,124.88,124.85, 124.82,124.73,124.64,124.61,117.45,117.30,98.02(C-1’),90.43(C-1),75.46(C-4),74.52,73.50,73.23, 73.09,72.86(C-5’),72.51(C-3),71.64(C-3’),70.60(C-5),70.36,69.75,69.33,67.55(C-4’),67.51,67.28(C- 6’),67.24,66.43(C-6),59.37,55.37(C-2’),51.48(C-2),41.01,40.61,38.95,38.86,33.63,33.54,33.40,33.34, 30.92,28.64,28.56,28.35,28.21,24.17,24.06,23.89,21.67,13.09.
实施例18化合物17-a的制备
(1)
将化合物16-a(240mg，0.103mmol)，PPh3(25mg,0.095mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(10mL)，TEA(125μL,0.9mmol),HCOOH(75μL,1.957mmol),Pd(Ph3)4(25mg,0.02mmol， 0.2eq)。25℃反应5h未反应完全，继续反应12h后原料消失，MS显示有未脱完的allyl，旋干过C18 柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with 0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with0.1％TEA依次洗脱，得到化合物17-a(184mg，79.65％)。
(2)
将化合物16-a(240mg，0.103mmol)，PPh3(50mg,0.190mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入 THF(10mL)，TEA(250μL,1.8mmol),HCOOH(150μL,3.914mmol),Pd(Ph3)4(50mg,0.043mmol， 0.4eq)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOHwith 0.1％TEA, CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-a(225mg，97.4％)。TOF-M:m/z:2248.76[M-H]+。
由于每分子含有两当量allyl，当PPh3及其它试剂达到常规的用量(例如PPh3与allyl的摩尔比为 0.9:1-1.1:1左右)时，即可高收率的得到化合物17。
实施例19化合物18-a的制备
(1)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(1.1g,4.84mmol,220eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后结束反应。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH ＝3:1得到终产品化合物18-a(25mg，67.6％)。(由于DDQ大大超出了常规用量，在投料规模较小的情况下，虽然反应收率可达理论值，但是大量残留的DDQ影响了后处理纯化的收率)
(2)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(10mg,0.044mmol,2eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后结束反应。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH ＝3:1得到终产品化合物18-a(17mg，45.9％)。如(4)，通过延长反应时间，可大大提高收率。
(3)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(40mg,0.177mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH ＝3:1得到终产品化合物18-a(29mg，78.4％)。如(4)，通过延长反应时间，可大大提高收率。
(4)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(40mg,0.177mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH ＝3:1得到终产品化合物18-a(35.8mg，95.26％，HPLC纯度：98.5％)。TOF-MS:m/z:1689.36[M-H]+。
化合物18-b系列实施例
实施例20化合物13-b的制备
在反应瓶中将11-a(400mg,0.194mmol)溶于CH2Cl2(5mL)，N2条件下加入锌粉1.2g)和醋酸(1.2 mL)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物12-a(经 MS验证TOF-MS:m/z 1915.49[M+Na]+)
将化合物12-a溶于超干DCM(5mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl(0.892g,4.656mmol)和脂肪链19-C(749mg,1.552mmol)(cas:93390-37-5)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13-b(722.7mg,63.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2380.26[M+Na]+。
实施例21化合物14-b的制备
在反应瓶中将化合物13-b(600mg,0.254mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-b(经MS验证)。TOF-MS:m/z 2158.02[M+Na]+。
实施例22化合物15-b的制备
将化合物14-b溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl(390.35mg,2.036mmol) 和脂肪链20(390.7mg,1.016mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1) 得到化合物15-b(504mg,79.3％无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2524.56[M+Na]+。
实施例23化合物16-b的制备
将化合物15-b(500mg，0.2mmol)溶于THF(18mL)，–40℃下加入溶于吡啶(15mL)的HF /Py(5mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1,MeOH) 得到16-b(0.351g，73.5％，白色固体)。TOF-MS:m/z 2410.34[M+Na]+。
实施例24化合物17-b的制备
将化合物16-b(470mg，0.196mmol)，PPh3(90mg,0.370mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入 THF(20mL)，TEA(490μL,3.5mmol),HCOOH(290μL,7.8mmol),Pd(Ph3)4(90mg,0.08mmol)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-b(428mg，94.3％)。TOF-M:m/z:2330.16[M+Na]+。
实施例25化合物18-b的制备
将化合物17-b(90mg,0.039mmol)与DDQ(71mg,0.312mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(10mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去， CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-b(65mg，95.26％)。TOF-MS:m/z:1745.47[M-H]+。HPLC纯度：97.5％。
化合物18-c系列实施例
实施例26化合物2-c的制备
将化合物19-B(cas:163310-36-9)(2.613g,5.93mmol)与EDC·HCl(1.136g,5.93mmol，1.2eq)溶于CH2Cl2(25mL)，室温搅拌15min后加入化合物1(3g,4.94mmol)和DMAP(0.03g,0.247mmol，0.05eq)，室温下搅拌10h反应完，反应液依次用CH2Cl2(50mL)和饱和NaHCO3(30mL)洗涤。分液干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物2-c(4.29g,84.3％，无色糖浆)。 TOF-MS:m/z:1052.7[M+Na]+。
实施例27化合物3-c的制备
将化合物2-c(1g,0.97mmol)溶与THF(10mL)，依次在冰浴条件下加入BH3·Me3N(0.28g,3.783 mmol，3.9eq)，AlCl3(0.76g,5.7mmol)，H2O(35mg,1.92mmol，1.9eq)反应液在室温下搅拌1.5h。加水(10mL)、1M HCl溶液(10mL)淬灭，反应液用CH2Cl2(15mL)分液，干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物3-c(0.882g,87.6％，无色油状液体)。TOF- MS:m/z:1059.42[M+Na]+.
实施例28化合物4-c的制备
将化合物3-c(0.5g,0.482mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺，0.236g,0.964mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完。-40℃下将mCPBA(207.9mg,1.205mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入上述反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤 (40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-c(0.537g,93.3％)。TOF- MS:m/z:1214.8[M+Na]+.
实施例29化合物5-c的制备
将化合物4-c(1.5g,1.26mmol)溶于THF(45mL)，–40℃加入稀释于30mL吡啶的HF/pyridine(4.8 mL,65–70％)。缓慢升至室温反应12h，反应液用NaHCO3(80mL)淬灭，加入CH2Cl2(100mL)分液，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)得化合物5-c(1.26g,93.4％，白色固体)。TOF- MS:m/z:1100.53[M+Na]+。
实施例30化合物6-c的制备
将化合物5-c(1.3g,1.21mmol)溶于超干CH2Cl2(20mL)，N2保护下加入2,2,2-三氟-N-苯乙酰亚胺氯(1.50g,7.24mmol，6eq)与DBU(368mg,2.42mmol，2eq)，室温反应30mins。将反应液浓缩柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1with 0.1％Et3N)得到化合物6-c(1.19g,79％，无色糖浆)。TOF- MS:m/z:1271.65[M+Na]+。
实施例31化合物11-c的制备
在反应瓶中加入受体化合物10(700mg,0.684mmol)，给体化合物6-c(1.28g,1.026mmol,1.5eq) 分子筛
N2条件下加入超干CH2Cl2(10mL)，在-20℃下加入二氯甲烷稀释100倍的 TfOH(20μL,0.137mmol，0.2eq)，–20℃下搅拌40min；加入甲醇(5mL)淬灭，三乙胺调pH至8。反应液用CH2Cl2(35mL)和饱和NaHCO3(10mL)洗涤。有机相干燥浓缩，经柱层析纯化(PE:EA＝10:1) 得到糖苷化产物11-c(1.27g,89％)。TOF-MS:m/z 2104.9[M+Na]+。
实施例32化合物12-c的制备
在反应瓶中将11-c(500mg,0.24mmol)溶于CH2Cl2(5mL)，N2条件下加入锌粉1.5g)和醋酸(15mL)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物 12-c(经MS验证TOF-MS:m/z 1929.5[M+Na]+)。
实施例33化合物13-c的制备
将化合物12-c溶于超干DCM(5mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl(1.1g,5,76mmol)和脂肪链19-A(819mg,1.92mmol)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13- c(441mg,79.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2338.23[M+Na]+。
实施例34化合物14-c的制备
在反应瓶中将化合物13-c(600mg,0.259mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-c(经MS验证)。TOF-MS:m/z 2115.9[M+Na]+。
实施例35化合物15-c的制备
将化合物14-c溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl(397.2mg,2.072mmol)和脂肪链20(398.4mg,1.036mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1) 得到化合物15-c(518.8mg,81.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2482.47[M+Na]+。
实施例36化合物16-c的制备
将化合物15-c(400mg，0.162mmol)溶于THF(18mL)，–40℃下加入溶于吡啶(12mL)的HF /Py(4mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1,MeOH) 得到16-c(0.293g，76.9％，白色固体)。TOF-MS:m/z 2368.26[M+Na]+。
实施例37化合物17-c的制备
将化合物16-c(459mg，0.196mmol)，PPh3(90mg,0.370mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(20mL)，TEA(490μL,3.5mmol),HCOOH(290μL,7.8mmol),Pd(Ph3)4(90mg,0.08mmol)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-c(405mg，91.5％)。TOF-MS:m/z2288.05[M+Na]+。
实施例38化合物18-c的制备
将化合物17-c(100mg,0.044mmol)与DDQ(80mg,0.353mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(10mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去， CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-c(68mg，91.5％)。TOF-MS:m/z:1703.4[M-H]+。HPLC纯度：96.5％
对比实施例1
将化合物17(50mg,0.022mmol)与Pd(400mg)加入氢化釜中，溶于THF：H2O＝4:1(20mL), 1MPa,30℃反应24h。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液过滤旋干。使用C18填料的柱色谱中脱色纯化得到终产品化合物18(12mg，32.4％)。通过TLC板层显示，原料有剩余，杂质点多，延长时间原料未减少。收率和纯度明显差于上述实施例。
由上可见，(1)本发明使用烯丙基配体在后续避免了氢化反应，用四三苯基膦的条件1.5h即可反应完。同样使用C18填料柱简单脱色后即可得到终产品。避免了现有技术中采用氢化脱苄基保护基带来的杂质多，收率较低，且纯化方式复杂的问题。具有明显更优的效果。
(2)与现有技术需要使用钯碳氢化反应20h以上，再反复过滤过离子柱色谱，收率较低(仅能达到50％左右)相比较，本发明使用Nap保护基的方法简化了操作，优化后，脱保护步骤收率可达到 91.5％以上，纯度达到97％(测定方法参照：HPLC-ELSD法测定BLP25脂质体疫苗中MPL的含量，中国药事2012年第26卷第5期，王明娟，王琰，胡昌勤)。
Claims (10)
1.一种如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤；在有机溶剂中，在三乙基硅烷与PhBCl2存在下，将如式9所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式10所示的化合物即可；
2.如权利要求1所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；
和/或，所述的如式9所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为10g/L-100g/L；例如15g/L-30g/L；
和/或，所述的三乙基硅烷与如式9所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；例如2:1-3:1；
和/或，所述的PhBCl2与所述的三乙基硅烷的摩尔比为1:1-3:1；例如1.5:1-2:1；
和/或，所述的选择性还原开环反应的温度为-80℃至-30℃；例如-78℃至-50℃；
和/或，所述的选择性还原开环反应在惰性气体保护下进行，所述的惰性气体可为氮气或氩气；
和/或，所述的选择性还原开环反应在分子筛存在下进行；所述的分子筛可为例如
分子筛；
和/或，所述的选择性还原开环反应的后处理包括以下步骤：所述的选择性还原开环反应结束后，淬灭，调pH至8，洗涤，有机相干燥浓缩，分离纯化，即可；所述的淬灭使用的溶剂可为甲醇；所述的调pH至8可采用胺类有机碱调节得到，所述的胺类有机碱可为三乙胺；所述的洗涤可采用饱和NaHCO3溶液；所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的的填料可为柱层析用硅胶；所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯的混合溶液；例如PE:EA体积比＝6:1。
3.如权利要求1所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：在有机溶剂中，在碱存在下，将如式8所示的化合物与FmocCl进行如下所示的Fmoc保护反应，得到所述的如式9所示的化合物即可；
4.如权利要求3所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的Fmoc保护反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；
和/或，所述的如式8所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为10g/L-100g/L；例如50g/L-70g/L；
和/或，所述的碱为有机碱和/或无机碱，所述的有机碱可为N,N-二异丙基乙胺、吡啶和三乙胺中的一种或多种；所述的无机碱可为碱金属碳酸盐和或碱金属碳酸氢盐，所述的碱金属碳酸盐可为碳酸钠、碳酸钾和碳酸锂中的一种或多种，所述的碱金属碳酸氢盐可为碳酸氢钠和/或碳酸氢钾；
和/或，所述的碱与所述的如式8所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；例如2:1-3:1；
和/或，所述的FmocCl与所述的如式8所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；例如2:1-3:1；
和/或，所述的Fmoc保护反应的温度为10℃-50℃；例如10℃-30℃；
和/或，所述的Fmoc保护反应的后处理包括以下步骤：所述的Fmoc保护反应结束后，洗涤，有机相干燥，浓缩，分离纯化，即可；所述的洗涤可采用饱和食盐水；所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶，所述的结晶的溶剂可为二氯甲烷与甲醇的混合溶液；例如二氯甲烷:甲醇的体积比＝1:10。
5.如权利要求3所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，其还包括以下步骤：在有机溶剂中，在脱保护剂存在下，将如式7所示的化合物进行如下所示的脱Troc保护基反应，得到所述的如式8所示的化合物即可；
6.如权利要求5所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的脱Troc保护基反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂；所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；
和/或，所述的如式7所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为50g/L-200g/L；例如60g/L-100g/L；
和/或，所述的脱保护剂为锌粉和醋酸；所述的醋酸与所述的锌粉的质量比可为1:1-4:1；例如1.5:1-2.5:1；所述的锌粉与所述的如式7所示的化合物的质量比可为0.1:1-5:1；例如0.5:1-1.5:1；
和/或，所述的脱Troc保护基反应的温度为0℃-50℃；例如10℃-30℃；
和/或，所述的脱Troc保护基反应在惰性气体保护下进行；所述的惰性气体可为氮气或氩气；
和/或，所述的脱Troc保护基反应的后处理包括以下步骤：所述的脱Troc保护基反应结束后，过滤，浓缩，分离纯化，或者，洗涤，分液干燥，浓缩，直接用于下一步如式8所示的化合物的制备，即可；所述的洗涤的溶剂可依次为饱和碳酸氢钠和饱和食盐水。
7.如权利要求5所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，其还包括以下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式20所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式7所示的化合物即可；
8.如权利要求7所述的如式10所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的酯化反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷；
和/或，所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为5g/L-200g/L；例如60g/L-150g/L；
和/或，所述的催化剂为有机碱，例如4-二甲氨基吡啶、三乙胺和吡啶中的一种或多种；
和/或，所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺中的一种或多种，例如1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；
和/或，所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；例如1:1-3:1；
和/或，所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比为0.01:1-1:1；例如0.01:1-0.5:1；
和/或，所述的如式20所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-3:1；例如1:1-2.5:1；
和/或，所述的酯化反应的温度为-10℃-50℃；例如10℃-30℃；
和/或，所述的酯化反应采用如下步骤：将所述的碱与所述的缩合剂加入到所述的如式1所示的化合物、所述的如式20所示的化合物与所述的溶剂的混合体系中，进行如上述所述的酯化反应；所述的加入温度可为-10℃至10℃；
和/或，所述的酯化反应的后处理包括以下步骤：所述的酯化反应结束后，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可；所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液；所述的分离纯化优选柱层析分离或结晶，所述的结晶的溶剂可为二氯甲烷与甲醇的混合溶液；例如二氯甲烷:甲醇的体积比＝1:12至1:8；所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯；例如石油醚:乙酸乙酯的体积比＝7:1。
9.一种如式10、式9、如式8、式7所示的化合物；
10.一种如式9、式8、式7所示的化合物的制备方法，其特征在于，
其中，所述的如式9所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在碱存在下，将如式8所示的化合物与FmocCl进行如下所示的Fmoc保护反应，得到所述的如式9所示的化合物即可；
所述的如式9所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如权利要求3-8中任一项所述；
其中，所述的如式8所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在脱保护剂存在下，将如式7所示的化合物进行如下所示的脱Troc保护基反应，得到所述的如式8所示的化合物即可；
所述的如式8所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如权利要求5-8中任一项所述；
其中，所述的如式7所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式20所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式7所示的化合物即可；
所述的如式7所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如权利要求7或8中任一项所述。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010305752.4A CN113527384B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010305752.4A CN113527384B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113527384A true CN113527384A (zh) | 2021-10-22 |
| CN113527384B CN113527384B (zh) | 2023-10-27 |
Family
ID=78123292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010305752.4A Active CN113527384B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113527384B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090137793A1 (en) * | 2007-11-19 | 2009-05-28 | Academia Sinica | Disaccharide compounds |
| US20140328876A1 (en) * | 2011-11-18 | 2014-11-06 | Variation Biotechnologies Inc. | Synthetic derivatives of mpl and uses thereof |
-
2020
- 2020-04-17 CN CN202010305752.4A patent/CN113527384B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090137793A1 (en) * | 2007-11-19 | 2009-05-28 | Academia Sinica | Disaccharide compounds |
| US20140328876A1 (en) * | 2011-11-18 | 2014-11-06 | Variation Biotechnologies Inc. | Synthetic derivatives of mpl and uses thereof |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| GREENE T.W. 等: "《有机合成中的保护基》", 31 October 2004 * |
| SHANG-CHENG HUNG ET AL.: "Synthesis of heparin oligosaccharides and their interaction with eosinophil-derived neurotoxin", 《ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY》 * |
| YANGHUI ZHANG ET AL.: "Innate Immune Responses of Synthetic Lipid A Derivatives of Neisseria meningitidis", 《CHEMISTRY - A EUROPEAN JOURNAL》 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113527384B (zh) | 2023-10-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108101820B (zh) | 一种手性吡咯烷的合成工艺及中间体 | |
| WO2014059938A1 (zh) | 一种利拉列汀重要中间体的制备方法 | |
| KR100970434B1 (ko) | 아데포비어 디피복실의 정제방법 | |
| CN105418581A (zh) | 琥珀酸曲格列汀的制备方法 | |
| CN117120456A (zh) | 聚-吗啉代寡核苷酸缺口体 | |
| CN105732765A (zh) | 丙肝药物维帕他韦的新合成方法 | |
| WO2007111214A1 (ja) | トレハロース化合物および該化合物を含有する医薬 | |
| CN113683651A (zh) | 一种GalNAc中间体的制备方法 | |
| CN110183445A (zh) | 莫西沙星及其衍生物的合成方法 | |
| CN113527384A (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527396A (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| TWI445711B (zh) | 肝適能製備的改良方法 | |
| CN113527386A (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527382B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| KR20220010496A (ko) | GalNAc 포스포라미다이트 에피머 제조 방법 | |
| CN113527397A (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527050A (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| JPH03209393A (ja) | １‐（３‐アジド‐２，３‐ジデオキシ‐β‐Ｄ‐エリスロペントフラノシル）チミンおよびその関連化合物の合成方法 | |
| FI64354B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 2-hydroximetyl-3-hydroxi-6-(1-hydroxi-2-tert -butylaminoetyl)pyridin och dess dihydroklorid och vid foerfarandet som mellanprodukt anvaendbart maleinsyrasalt av 2-fenyl-6-(1-hydroxi-2-tert -butylaminoetyl)-4h-pyrido(3,2-d)-1,3-dioxin | |
| CN114573521B (zh) | 一种钆布醇及其中间体的制备方法 | |
| CN114805231B (zh) | 一种p-NH2-Bn-NOTA的合成方法 | |
| CN114195684B (zh) | 一种氨基保护基n-取代手性氨基酸的合成方法 | |
| CN117362375A (zh) | 用于合成3d-mpl的中间体、其制备方法及其应用 | |
| CN113648428B (zh) | 一种多肽偶联药物化合物及其制备与应用 | |
| CN111116655B (zh) | 一种高光学纯度替诺福韦苄酯膦酰胺前体药物的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |