CN113527265A - 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途 - Google Patents

一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN113527265A
CN113527265A CN202110142856.2A CN202110142856A CN113527265A CN 113527265 A CN113527265 A CN 113527265A CN 202110142856 A CN202110142856 A CN 202110142856A CN 113527265 A CN113527265 A CN 113527265A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
deuterium
hydrogen
independently selected
added
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110142856.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113527265B9 (zh
CN113527265B (zh
Inventor
王永钢
林寨伟
崔柏成
廖辉
陈海杰
胡双华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan Nanxin Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Hunan Nanxin Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan Nanxin Pharmaceutical Co ltd filed Critical Hunan Nanxin Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN202110142856.2A priority Critical patent/CN113527265B9/zh
Publication of CN113527265A publication Critical patent/CN113527265A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113527265B publication Critical patent/CN113527265B/zh
Publication of CN113527265B9 publication Critical patent/CN113527265B9/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种氘代吡咯烷酮衍生物及其制备的方法，还涉及应用其及其药物组合物治疗和预防代谢紊乱相关疾病的用途，本发明属于医药领域。

Description

一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途
发明领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及氘代吡咯烷酮衍生物、药物 组合物及其用途。更具体地说，本发明涉及所述的化合物制备的方法、 包含其的药物组合物及使用其激活葡萄糖激酶作为治疗Ⅱ型糖尿病 药物。
背景技术
糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)是由于体内胰岛素绝对不足 或相对不足所引起的以慢性高血糖为主要特征，合并脂肪和蛋白质代 谢紊乱的综合征。随着糖尿病病程的延长，患者易并发心、脑、肾、 视网膜及神经系统慢性进行性病变。糖尿病引发多种并发症，严重影 响患者的生命健康和生活质量。长期的血糖升高导致糖尿病患者微血 管损伤，并引起外周神经损伤、视网膜病变、糖尿病肾病等。
Ⅱ型糖尿病又称为非胰岛素依赖型糖尿病，是由组织细胞的胰岛 素抵抗、胰岛β细胞功能衰退和其他多种原因引起的。在糖尿病患 者中，Ⅱ型糖尿病约占90％。目前，临床用于治疗Ⅱ型糖尿病的降糖 药物种类繁多，机制各异，但都无法阻止胰岛β细胞功能进行性衰 退，病程进展难以逆转。因此，临床上急需寻找一种既可以使血糖达 标，又能保护甚至修复残存胰岛β细胞的药物。
葡萄糖激酶(Glucokinase，GK)是一种己糖激酶，主要分布在 成熟肝细胞和胰岛β细胞中，参与葡萄糖代谢的第一步反应，催化 葡萄糖转变为葡萄糖-6-磷酸进入肝脏和胰腺，发挥重要的“葡萄糖 传感器”的作用，对于人体血糖稳态的调控意义重大(Ma Y,Ratnasabapathy R,Izzi-Engbeaya C,et al.Hypothalamic arcuate glucokinaseregulates insulin secretion and glucose homeostasis[J].Diabetes Obes Metab,2018,20(9): 2246-2254.DOI:10.1111/dom.13359)。葡糖激酶激活剂 (GlucokinaseActivator，GKA)是针对葡萄糖激酶这个靶点而开发 的新型化合物，能够通过葡萄糖浓度刺激胰岛素分泌，降低胰高血糖 素浓度和肝糖输出，促进肝糖原合成以及调控肠促胰素释放来稳定体 内血糖水平(余刚，葡萄糖激活剂研究进展[J]，药学进展，2016 年3月，第40卷，第3期，168-177页)。
自2003年GKA进入研究以来，GKA的研究不断深入，各制药公 司和研究机构都争相加入该研究领域。目前，以吡咯烷酮为基本结构 的GKA前景最为乐观，其代表化合物HMS5552已进入临床Ⅲ期研究。 研究表明，HMS5552是一种拥有全新作用机制的T2DM治疗药物，能 够激活人体GK的功能，提高人体对葡萄糖的敏感性，改善胰岛素分 泌；同时，可提高肝糖原合成的效率，使得肝脏、肌肉和脂肪对葡萄 糖的摄取及储存能力显著提高(胡玉玺，陈永收，任一鑫，曹爽，治 疗2型糖尿病的仔研新药—葡萄糖激酶激动剂HMS5552[J]，临床药 物治疗杂志，2020年6月，第18卷，第6期，1-5页)。简而言之， HMS5552通过激活肝脏和胰脏中的GK达到降糖控糖的目的。
与传统的降糖药相比，GKA以全新的作用机制为Ⅱ型糖尿病提供 了新的治疗方法。然而，关于GKA转化成为药物的研究仅仅只是开端， 此领域还需要进一步开发对葡萄糖激酶有激动作用或更好药效学/药 代动力学性能的化合物。
发明内容
本发明提供一种含氘代吡咯烷酮类化合物及其衍生物的葡萄糖激 酶激活剂，具有较好的药代动力学性能。一种式I所示的氘代吡咯烷 酮衍生物、其立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、活性代 谢物、多晶体、共晶体、药学上可接受的盐及其前药；
Figure BDA0002929912970000031
其中：
R1、R2、R3、R4独立地选自氢，氘；
R5可以为氢或者氘；
R6、R7独立地选自氢，氘；
R8、R9、R10独立地选自氢，氘；
R11、R12、R13独立地选自氢，氘；
R14可以为氢或者氘；
R15、R16独立地选自氢，氘；
R17可以为氢或者氘；
R18、R19独立地选自氢，氘；
且R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、 R16、R17、R18、R19中至少一个是氘。
当R5为氘原子时，其优选结构如下式II：
Figure BDA0002929912970000032
其中R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、 R19独立的选自氢或者氘。
当R5为氢原子时，其优选结构如下式III：
Figure BDA0002929912970000041
其中R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19独立的选自氢或氘，并且这其中至少有一个是氘。
如通式I所示的氘代吡咯烷酮衍生物、其立体异构体、互变异构 体、水合物、溶剂合物、活性代谢物、多晶体、共晶体、药学上可接 受的盐及其前药，其中所述的化合物优先选自以下化合物：
Figure BDA0002929912970000042
在其它方面中，本发明还提供药物组合物，其包含药学上可 接受的载体和本发明的化合物；治疗或预防病症或病况的方 法，所述病症或病况选自以下的代谢紊乱、减缓该代谢紊乱的进 展、或治疗该代谢紊乱：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、 高血糖症、餐后高血糖症、空腹血糖异常、超重、肥胖症、高血压症、 胰岛素抵抗和/或代谢综合征；或改善血糖控制和/或降低空腹血浆葡 萄糖；或预防、减缓、延迟或逆转糖尿病并发症。
本发明中提供的含氘代吡咯烷酮类化合物及其衍生物的葡萄糖 激酶激活剂及可以与其组合其它药剂包括治疗II型糖尿病的药物： GLP-1受体激动剂，艾塞那肽、利拉鲁肽、索马鲁肽、度拉鲁肽、洛 塞那肽、阿必鲁肽；α-葡萄糖苷酶抑制剂，伏格列波糖、阿卡波糖； SGLT-2抑制剂，坎格列净(Canagliflozin)、达格列净 (Dapagliflozin)、恩格列净(Empagliflozin)、依格列净 (Ipragliflozin)、鲁格列净(Luseogliflozin)以及托格列净(Tofogliflozin)；DPP-4抑制剂，西格列汀(sitagliptin)、维格列 汀(vildagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、阿格列汀(alogliptin)、 利格列汀(linagliptin)、吉格列汀(gemigliptin)和替格列汀 (teneligliptin)和二甲双胍中的一种或多种。其药物组合物可用 于预防一种或多种选自以下的代谢紊乱、减缓该代谢紊乱的进展、或 治疗该代谢紊乱：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、高血 糖症、餐后高血糖症、空腹血糖异常、超重、肥胖症、高血压症、胰 岛素抵抗和/或代谢综合征；或改善血糖控制和/或降低空腹血浆葡萄 糖；或预防、减缓、延迟或逆转糖尿病并发症。
本发明化合物或其药学上可接受的盐的纯净形式或适当药物组 合物可通过任何可接受的投予起类似效用的药剂的模式投予。本发明 药物组合物可通过将本发明化合物与适当药学上可接受的载剂、稀释 剂或赋形剂组合而制成，并且可调配成固体、半固体、液体或气体形 式制剂，例如片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、溶液、注射剂、吸入剂、 凝胶、微球体和气雾剂。投予所述药物组合物的典型途径包括(但不 限于)经口、局部、透皮、吸入、不经肠、舌下、颊、直肠、和鼻 内投药。如本文中所使用，术语不经肠包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术。本发明药物组合物经调配，以允许在对患者 投予组合物后，其中所含活性成分是生物可利用的。将被投予个体或 患者的组合物里一种或多种剂量单位的形式，其中，例如片剂可为单 剂量单位，而含气雾剂形式的本发明化合物的容器可容纳多个剂量单 位。制备所述剂型的实际方法为所属领域技术人员已知，或将为其所 知悉。欲投予的组合物在任何情况下都将含有治疗有效量的本发明化 合物或其药学上可接受的盐，以便根据本发明的示教治疗所关注的疾 病或病状。
本发明药物组合物可呈固体或液体形式。一方面，载剂为微粒， 以致组合物例如呈片剂或散剂形式。载剂可为液体，而组合物为例如 口服糖浆、可注射液体，或适用于例如吸入投药的气雾剂。当欲口服 时，药物组合物优选自固体或液体形式，其中半固体、半液体、悬 浮液和凝胶形式包括在本文中视为固体或液体的形式中。对于口服固 体组合物，可将药物组合物调配成散剂、颗粒剂、压缩片剂、丸剂、 胶囊、咀嚼片、粉片等形式。此类固体组合物通常含有一种或多种惰 性稀释剂或可食用载剂。此外，还可存在一种或多种以下物质粘合剂， 例如羧甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、黄瓦胶或明胶； 赋形剂，例如淀粉、乳糖或糊精；崩解剂，例如海藻酸、海藻酸纳、 Primogel、玉米淀粉等；润滑剂，例如硬脂酸镁或氢化植物油 (Sterotex)；助流剂，例如胶状二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精； 调味剂，例如薄荷、水杨酸甲酌或甜橙调味剂；和着色剂。
药物组合物为胶囊形式，例如为明胶胶囊时，除上述类型的物质 以外，其还可含有液体载剂，例如聚乙二醇或植物油。药物组合物可 为液体形式，例如酊剂、糖浆、溶液、乳液或悬浮液。此液体可口服， 或通过注射递送，作为两个实例。当欲口服时，优选组合物除含有本 发明化合物以外，还含有甜味剂、防腐剂、染料/着色剂和风味增强 剂中的一种或多种。在打算通过注射投予的组合物中，可包括表面活 性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲剂、稳定剂和等渗剂 中的一种或多种。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，提供本申请中所述的 合成实施例和生物学实施例以说明本文所提供的化合物、药物组合物、 以及方法。以下实施例仅用于对本发明进行示例性说明，但不用于限 制本发明，在本发明保护范围内所做的修改、改变、变型等都在本发 明的保护范围内。
本文所提供的化合物可以使用下文所阐述的特定合成方案的将为 本领域技术人员公知的操作方案，由容易获得的起始物质来制备。下 列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，可以 由本领域技术人员通过常规的优化程序来确定。
下述实施例中，缩写解释：
PE：石油醚；
EA：乙酸乙酯；
DMF：N,N-二甲基甲酰胺；
DCM：二氯甲烷；
THF：四氢呋喃
MeOH：甲醇
Boc2O：二叔丁基二碳酸酯；
DIEA：N,N-二异丙基乙胺
DMSO：二甲基亚砜
NBS：N-溴代丁二酰亚胺
CCl4：四氯化碳
TEA：三乙胺
Dabco:三乙烯二胺
TosCl：4-甲基苯磺酰氯
H-Leu-OMe.HCl：L-亮氨酸甲酯盐酸盐
1H NMR：核磁共振氢谱
TLC：薄层层析
Chiral HPLC：手性高效液相色谱
Prep-HPLC:高压制备液相色谱
LC-MS：液相色谱-质谱联用
Rf：比移值；
min：分钟
g；克
mg：毫克
rt：室温
mol：摩尔
mmol：毫摩尔
mL：毫升
M：摩尔/升
实施例1：(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基- 戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-1,1,2,3,3-五氘代-丙基)-1-氢-吡唑-3-基]-酰胺 (化合物1)的制备：
Figure BDA0002929912970000081
Figure BDA0002929912970000091
(E)-3-(2-氯-苯氧基)-2-丁烯酸乙酯(1c)的制备：将2-氯苯酚(1a) (10.9mL，107mmol)溶解于400mL MeCN中，依次加入Dabco(9.8 g，87.4mmol)、2-丁炔酸乙酯(1b)(10.4mL，89.2mmol)，反应混 合物加热至70℃搅拌3小时。反应混合物冷却至室温，用二氯甲烷 和水萃取2次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残 留物经柱层析纯化获得化合物1c(17.0g,产率：90％)。MS(ESI):m/z 240.9[M+1]+
(E)-4-溴-3-(2-氯-苯氧基)-2-丁烯酸乙酯(1d)的制备：将化合 物1c(16.0g，66.7mmol)溶解于300mL四氯化碳中，依次加入 NBS(13.0g，87.4mmol)、过氧化苯甲酰(170mg，0.7mmol)，反 应混合物加热至回流，反应过夜。反应混合物冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化获得化合物1d(21.0g,产率：99％)。 MS(ESI):m/z 319.0[M+1]+，321.0[M+1]+(溴同位素).
(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸甲酯 (1e)的制备：在室温下，将化合物1d(3.2g，10mmol)和L-亮氨 酸甲酯盐酸盐(1.45g，10mmol)溶解于50mL乙腈中，加入DIEA (3.9g，30mmol)，反应混合物加热至80℃，反应过夜。反应混合物冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化获得化合 物1e(1.4g,产率：42％)。MS(ESI):m/z 338.2[M]+
(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸(1f) 的制备：将化合物1e(1.4g，4.1mmol)溶解于30mL甲醇中，加 入水30mL，反应混合物冷却至0℃。加入氢氧化锂(344mg，8.2 mmol)，反应3小时。减压蒸去甲醇。用1M HCl调节pH至3，二 氯甲烷抽提2次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥， 过滤，滤液减压蒸干，得化合物1f(900mg,产率：67％)。MS(ESI): m/z 322.2[M-H]-
2,2-二甲基-4-(1,1-二氘代)-羟甲基-4,5,5-三氘代-1,3-二氧环戊烷(1h) 的制备：将1,1,2,3,3-五氘代丙三醇(1g)(1.0g，10.3mmol)溶解于 150mL四氢呋喃中，依次加入2,2-二甲氧基丙烷(4.3g，41.2mmol)、 磷钨酸(100mg)，反应混合物在室温下搅拌过夜。TLC检测反应完 毕，减压蒸去溶剂，得粗产物1h(1.5g,产率：100％)直接用于下一 步反应。
4-甲基苯磺-[1,1-二氘代-1-(4,5,5-三氘代-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)]甲酯(1i)的制备：将化合物1h(1.4g，10.3mmol)溶解于100 mL二氯甲烷中，加入TEA(4.2g，41.2mmol)，反应混合物冷却至 0℃。加入TosCl(3.9g，20.6mmol)，加毕，撤去冰浴，室温下搅拌 3小时。TLC检测反应完毕后，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。有 机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干， 经柱层析纯化获得化合物1i(1.8g,产率：60％)。
N-[1,1-二氘代-1-(4,5,5-三氘代-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲 基]-1H-吡唑-3-胺(1k)的制备：将化合物1j(500mg，6mmol)溶 解于10mL DMSO中，加入KOH(1.0g，18mmol)，反应混合物冷 却至0℃。加入化合物1i(1.8g，6mmol)，加毕，撤去冰浴，室温 下反应过夜。TLC检测反应完毕，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。 有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸 干，经柱层析纯化获得化合物1k(490mg,产率：41％)。
N-[1,1-二氘代-1-((R)-4,5,5-三氘代-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基]-1H-吡唑-3-胺(1l)的制备：将化合物1k(490mg)经Chiral HPLC 分离后获得化合物1l(220mg，产率：90％)。
(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1,1-二氘代-1-((R)-4,5,5-三氘代-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基-1H-吡唑 -3-基)]-酰胺(1m)的制备：将化合物1f(150mg，0.46mmol)溶解 于10mL二氯甲烷中，依次加入EDCI(178mg，0.93mmol)和HOBt (125mg，0.93mmol)，室温下搅拌30min。加入化合物1l(112mg，0.56mmol)，室温下反应过夜。TLC检测反应毕，加入适量水，二氯 甲烷抽提3次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过 滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获得化合物1m(210mg,产率：89％)。 (S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸 [1-((R)-2,3-二羟基-1,1,2,3,3-五氘代-丙基)-H-吡唑-3-基]-酰胺(1)的 制备：将化合物1m(210mg，0.41mmol)溶解于5mL乙腈中，加 入水1mL和磷钨酸30mg，混合物在36℃下搅拌2小时。LC-MS检 测反应完毕，经prep-HPLC(acetonitrile/H2O+0.1％NH3H2O)获得化 合物1(101mg,产率：52％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):9.7 (br,1H),7.49-7.47(m,1H),7.36-7.34(m,1H),7.32-7.30(m,1H), 7.29-7.22(m,2H),6.64(d,J＝2.4Hz,1H),4.88-4.81(m,2H),4.45(d,J ＝18.4Hz,1H),4.15(d,J＝18.0Hz,1H),1.87-1.72(m,2H),1.58-1.51 (m,1H),0.99-0.94(m,6H)；HPLC purity:99.8％(214nm),99.9％(254 nm)；MS(ESI):m/z 468.2[M+H]+；氘代率97.4％
实施例2：(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1- 基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-丙基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺(化合物 2)的制备
Figure BDA0002929912970000121
2-氘代-2-氨基-4-甲基戊酸(2b)的制备：将化合物2a(5.0g，38mmol) 溶解于50mLCH3COOD中，加入水杨醛(0.5mL)，混合物加热至 110℃，反应2小时。冷却至室温，减压蒸去溶剂后，重新加入 CH3COOD(50mL)和水杨醛(0.5mL)，混合物加热至110℃，反 应2小时。重复4次这项操作，减压蒸去溶剂，加入D2O(100mL), 室温下搅拌30min，过滤，滤液减压浓缩，获得黄色油状物2b(4.1g, 粗产物)。
2-氘代-2-氨基-4-甲基戊酸甲酯(2c)的制备：将化合物2b(4.1g， 粗产物，31mmol)溶解于50mL无水甲醇中，冷却至0℃，加入SOCl2 (7.3g，62mmol)，加毕，撤去冰浴，室温下反应过夜。减压蒸去溶 剂，加入适量水，饱和NaHCO3调节pH至8，乙酸乙酯抽提3次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸 干，得黄色油状物2c(1.6g,粗产物)。
2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸甲 酯(2d)的制备：将化合物1d(3.8g，12.1mmol)和化合物2c(1.6 g，11mmol)溶解于50mL乙腈中，加入DIEA(4.3g，33mmol)， 反应混合物加热至80℃，反应过夜。反应混合物冷却至室温，过滤， 滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化获得化合物2d(600mg,产率： 16％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):7.49-7.47(m,1H), 7.34-7.30(m,1H),7.24-7.21(m,1H),4.85(s,1H),4.42(d,J＝17.6Hz, 1H),4.04(d,J＝17.6Hz,1H),3.72(s,3H),1.78-1.70(m,2H),1.53-1.50 (m,1H),0.98(t,J＝6.8Hz,6H).
2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸 (2e)的制备：
将化合物2d(600mg，1.8mmol)溶解于30mL甲醇中，加入水30 mL，反应混合物冷却至0℃。加入氢氧化锂(151mg，3.6mmol)， 反应3小时。减压蒸去甲醇。用1M HCl调节pH至3，二氯甲烷抽 提2次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤 液减压蒸干，得化合物2e(390mg,产率：67％)。
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1-基]-4-甲基-戊 酸(2f)的制备：将化合物2e(390mg)经Chiral HPLC分离后获得 化合物2f(100mg，产率：51％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm): 7.50-7.48(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.25-7.22(m,2H),4.88(s,1H), 4.39(d,J＝17.6Hz,1H),4.04(d,J＝17.6Hz,1H),1.85-1.72(m,2H),1.60-1.56(m,1H),0.98(t,J＝6.4Hz,6H)；HPLC purity:99.63％ (214nm),99.82％(254nm)；MS(ESI):m/z 325.1[M+H]+
N-(1H-吡唑-3-基)-乙酰胺(2h)的制备：将化合物1j(9.0g，108.3mmol) 溶解于120mL乙酸乙酯中，室温下搅拌30min，缓慢加入Ac2O (10.23mL，108.3mmol)，混合物加热至60℃，搅拌6小时。冷却 至室温，过滤，滤饼用适量乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得化合物2h(13.5g,产率：87％)。MS(ESI):m/z 125.1[M+1]+
N-[1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基]乙酰胺 (2j)的制备:将化合物2h(6.0g，48mmol)溶解于100mL DMF中， 依次加入叔丁醇钠(9.2g，96mmol)和氯化锂(2.0g，48mmol)， 室温下搅拌30min。加入化合物2i(8.0g，53mmol)，混合物加热 至100℃反应6小时。冷却至室温，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。 有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸 干，经柱层析纯化获得化合物2j(4.5g,产率：41％)。
1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基)-1H-吡唑-3-胺(2k)的制 备:将化合物2j(4.5g，18.8mmol)溶解于100mL水中，混合物冷 却至0℃。缓慢加入氢氧化钠(1.5g，37.6mmol)，加毕，升温至90℃ 反应过夜。加入适量水，二氯甲烷抽提2次。有机相用饱和食盐水洗 涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获得 化合物2k(3.6g,产率：97％)。
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺(2l) 的制备:将化合物2f(100mg，0.31mmol)溶解于10mL二氯甲烷中， 依次加入EDCI(118mg，0.62mmol)和HOBt(83mg，0.62mmol)， 室温下搅拌30min。加入化合物2k(91mg，0.46mmol)，室温下反 应过夜。TLC检测反应完毕后，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。有 机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干， 经柱层析纯化获得化合物2l(140mg,产率：90％)。
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-丙基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺(2)的制备:将化合物 2l(140mg，0.28mmol)溶解于5mL乙腈中，加入水1mL和磷钨 酸30mg，混合物在36℃下搅拌2小时。LC-MS检测反应完毕，经 prep-HPLC(acetonitrile/H2O+0.1％NH3H2O)获得化合物2(72mg,产 率：56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):7.49-7.47(m,1H), 7.40(br,1H),7.35-7.30(m,1H),7.29-7.22(m,2H),6.63(s,1H),4.88(s, 1H),4.47(d,J＝17.6Hz,1H),4.24-4.13(m,4H),3.69-3.65(m,1H), 3.60-3.56(m,1H),1.87-1.72(m,2H),1.57-1.53(m,1H),0.98(t,J＝6.8 Hz,6H)；HPLC purity:99.5％(214nm),99.8％(254nm)；MS(ESI):m/z 464.1[M+H]+；氘代率96.5％
Figure BDA0002929912970000151
实施例3：(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1- 基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-1,1,2,3,3-五氘代-丙基)-1-氢-吡唑 -3-基]-酰胺(化合物3)的制备:
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1,1-二氘代-1-((R)-4,5,5-三氘代-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基 -1H-吡唑-3-基)]-酰胺(3a)的制备:将化合物2f(120mg，0.37mmol) 溶解于10mL二氯甲烷中，依次加入EDCI(141mg，0.74mmol) 和HOBt(100mg，0.74mmol)，室温下搅拌30min。加入化合物1f(112mg，0.56mmol)，室温下反应过夜。TLC检测反应完毕，加入 适量水，二氯甲烷抽提3次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫 酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获得化合物3a(100 mg产率：53％)。
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-1,1,2,3,3-五氘代-丙基)-H-吡唑-3-基]-酰胺(3)的 制备:将化合物3a(100mg，0.2mmol)溶解于5mL乙腈中，加入 水1mL和磷钨酸30mg，混合物在36℃下搅拌2小时。LC-MS检测 反应完毕，经prep-HPLC(acetonitrile/H2O+0.1％NH3H2O)获得化合 物3(74mg,产率：80％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):9.7(br, 1H),7.49-7.47(m,1H),7.36-7.34(m,1H),7.32-7.30(m,1H),7.29-7.22 (m,2H),6.64(d,J＝2.4Hz,1H),4.86(s,1H),4.45(d,J＝18.4Hz,1H), 4.15(d,J＝18.4Hz,1H),1.87-1.72(m,2H),1.58-1.51(m,1H),0.99-0.94 (m,6H)；HPLC purity:99.9％(214nm),100％(254nm)；MS(ESI):m/z 469.2[M+H]+；氘代率97.3％
实施例4：(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1-基]-4-甲基- 戊酸[1-((R)-1,1–二氘代-2,3-二羟基-丙基)-1-氢-吡唑-3-基]-酰胺(化 合物4)的制备
Figure BDA0002929912970000171
1,1-二氘代-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-基)甲醇(4b)的制备:在无 水无氧条件下，将化合物4a(0.5mL，3.46mmol)溶解于18mL无 水四氢呋喃中，加入CH3OD(5.3mL)，反应混合物冷却至0℃。硼 氘化钠(1.0g，23.9mmol)分3次加入。加毕，撤去冰浴，室温下 反应过夜。往反应混合物加入冰水(0.5mL)，待没有气泡冒出后再 加入水(20mL)和甲基叔丁基醚(20mL)。二氯甲烷抽提3次，有 机相用饱和食盐水洗涤2次。无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干， 得淡黄色液体4b(396mg,粗产物)。
4-氯-苯磺[1,1-二氘代-1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-基)甲酯(4d) 的制备:将化合物4b(396mg，2.95mmol)溶解于6.5mL乙酸乙酯 中，加入Dabco(414mg，3.69mmol)，反应混合物冷却至0℃。加 入4-氯苯磺酰氯(4c)(654mg，3.1mmol)，保持0℃反应3小时， 撤去冰浴，室温下反应过夜。往反应混合物加入冰水(3mL)，搅拌 15min。加入水(17mL)和乙酸乙酯(10mL)，分出有机相，水相 用乙酸乙酯抽提2次。合并有机相，用饱和食盐水洗涤2次，无水硫 酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获得化合物4d(665mg,产率：62.7％，两步合计)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):7.87 (d,J＝7.2Hz,2H),7.54(d,J＝7.2Hz,2H),4.28(t,J＝4.8Hz,1H), 4.05(m,1H),3.77(m,1H),13.4(s,3H),1.31(s,3H).
N-[(1,1-二氘代-1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基)-1H-吡唑 -3-基]乙酰胺(4e)的制备:将化合物2i(250mg，2mmol)溶解于5 mL DMF中，加入叔丁醇钠(231mg，2.4mmol)，室温下搅拌30min。 加入化合物4d(741mg，2.4mmol)，混合物加热至80℃，反应过夜。 冷却至室温，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。有机相用饱和食盐水 洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获 得化合物4e(383mg，产率：80％)。MS(ESI):m/z 242.2[M+H]+,264.2 [M+Na]+
[1,1-二氘代-1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲基]-1H-吡唑-3- 胺(4f)的制备:将化合物4e(920mg，3.81mmol)溶解于4mL甲 醇中，加入水(4mL)，混合物冷却至0℃。缓慢加入氢氧化钠(611 mg，15.25mmol)，加毕，升温至90℃反应过夜。加入适量水，乙酸 乙酯抽提3次。有机相用饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过 滤，滤液减压蒸干，得化合物4f(620mg,产率：81.7％)。
MS(ESI):m/z 200.3[M+H]+
(S)-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1,1-二氘代-1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺 (4g)的制备:将化合物1f(178mg，0.55mmol)溶解于5.5mL二 氯甲烷中，依次加入EDCI(116mg，0.61mmol)和HOBt(82mg， 0.61mmol)，室温下搅拌30min。加入化合物4f(131mg，0.66mmol) 和TEA(61.2mg，0.61mmol)，室温下反应过夜。LC-MS检测反应 完毕，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。有机相用饱和食盐水洗涤2 次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化获得化合 物4g(103mg,产率：37％)。MS(ESI):m/z 505.0[M+H]+
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-丙基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺(4)的制备:将化合物 4g(103mg，0.2mmol)溶解于0.4mL异丙醇中，加入2M HCl 0.4mL， 混合物在室温下搅拌2小时。LC-MS检测反应完毕，加入水(4mL) 和甲基叔丁基醚(10mL)，分出有机相，水相用甲基叔丁基醚抽提2 次。合并有机相，依次用1M NaOH溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫 酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经DCM-PE沉淀，获得化合物4 (84mg,产率：89％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):9.68(s,1H),7.48-7.46 (m,1H),7.32-7.29(m,2H),7.24-7.21(m,2H),6.63(s,1H), 4.87-4.85(m,2H),4.46(d,J＝14.4Hz,1H),4.14(d,J＝14.4Hz, 1H),4.05(t,J＝4.0Hz,1H),3.66-3.63(m,1H),3.54-3.51(m,1H), 1.85-1.79(m,1H),1.77-1.71(m,1H),1.57-1.51(m,1H),0.97(d,J ＝5.2Hz,3H),0.94(d,J＝5.2Hz,3H)；HPLC purity:97.3％ (214nm),98.0％(254nm)；MS(ESI):m/z 465.2[M+H]+；氘代率99％
实施例5：(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢-吡咯-1- 基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-1,1,2,3,3-五氘代-丙基)-1-氢-吡唑 -3-基]-酰胺(化合物1)的制备
Figure BDA0002929912970000201
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊 酸[1,1-二氘代-1-((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基甲基)-1H-吡唑-3- 基]-酰胺(5a)的制备:将化合物2f(40mg，0.123mmol)溶解于1.6 mL二氯甲烷中，依次加入EDCI(35.4mg，0.185mmol)和HOBt (25mg，0.185mmol)，室温下搅拌20min。加入化合物4f(37mg，0.185mmol)和TEA(18.7mg，0.185mmol)，室温下反应过夜。TLC 检测反应完毕，加入适量水，二氯甲烷抽提3次。有机相用饱和食盐 水洗涤2次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经柱层析纯化 获得化合物5a(35mg,产率：56％)。
(S)-2-氘代-2-[4-(2-氯-苯氧基)-2-氧代-2,5-二氢吡咯-1-基]-4-甲基-戊酸[1-((R)-2,3-二羟基-丙基)-1H-吡唑-3-基]-酰胺(5)的制备:将化合物 4g(35mg，0.2mmol)溶解于0.3mL异丙醇中，加入2M HCl 0.3mL， 混合物在室温下搅拌2小时。LC-MS检测反应完毕，加入水(4mL) 和甲基叔丁基醚(10mL)，分出有机相，水相用甲基叔丁基醚抽提2 次。合并有机相，依次用1M NaOH溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫 酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干，经DCM-PE沉淀，获得化合物4 (26mg,产率：80.6％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ(ppm):9.70(s, 1H),7.49-7.46(m,1H),7.33-7.28(m,2H),7.25-7.21(m,2H),6.62(s,1H),4.88-4.85(m,2H),4.46(d,J＝14.4Hz,1H),4.14(d,J＝14.4Hz, 1H),3.67-3.64(m,1H),3.53-3.50(m,1H),1.85-1.80(m,1H),1.77-1.70 (m,1H),1.58-1.51(m,1H),0.98(d,J＝5.2Hz,3H),0.94(d,J＝5.2Hz, 3H)；HPLC purity:95.3％(214nm),98.2％(254nm)；MS(ESI):m/z 466.0[M+H]+；氘代率96.5％
实施例6：
体外葡萄糖激酶激动活性测试
葡萄糖激酶(GCK)实验步骤：
1)准备100X梯度稀释的化合物：用DMSO(Sigma,D8418)将参 比化合物(MK-0941(MCE,HY-19843))和待测化合物从1mM起3倍 稀释，每个化合物稀释10个浓度。
2)准备3X梯度稀释化合物：在96孔稀释板(Nunc,249944)中 加32.3ul的1X反应缓冲液，向每孔中转移1μL(1)中已梯度稀 释好的100X化合物。
3)准备3X阳性对照(30μM MK-0941)和3X阴性对照(3％ DMSO)稀释在1X反应缓冲液中。
4)向384孔反应板(Corning,3702)中加入6μL(2)和(3)中准 备好的化合物及阳性对照和阴性对照。
5)酶溶液的配制：用1X的反应缓冲液配制3X葡萄糖激酶 (Recombinant HumanGlucokinase/GCK Protein,R&D, 7840-GK-020)溶液。
6)向(4)中的反应板每孔加入6μL 3X葡萄糖激酶稀释液。
7)反应底物的配制：用1X的反应缓冲液配制3X的反应底物，使 其包含3X葡萄糖(D-(+)-Glucose,Sigma,G5767)，3XATP (ATP/Adenosine 5′-triphosphate disodiumsalt hydrate, Sigma,A7699)，3X葡萄-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphateDehydrogenase,Sigma,G6378)和3X NADP+(β-Nicotinamide adenine dinucleotidephosphate hydrate,Sigma,N5755-100MG)。
8)向(6)中的反应板中每孔加入6μL的3X反应底物。
9）使用Victor Nivo 35 监测每孔在340nm处的吸光度，连读1小时，每次读数间隔为1分钟。
10）
Figure RE-DEST_PATH_IMAGE010
结果分析：不同浓度化合物对葡萄糖激酶激动活性的计算。
Figure RE-DEST_PATH_IMAGE011
: 阳性对照吸光度随检测时间变化的斜率的平均值。
Figure RE-DEST_PATH_IMAGE012
: 阴性对照吸光度随检测时间变化的斜率的平均值。
Figure RE-DEST_PATH_IMAGE013
: 化合物在相同浓度下吸光度随检测时间变化的斜率的平均值。
11)结果分析：EC50值的计算
使用Graphad 8.0，利用以下非线性拟合公式来得到化合物的EC50。 Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogEC50-X)*HillSlope)) X:化合物浓度log值；Y:化合物活性率。测试结果如下:
表1.化合物GK激动活性测试结果
化合物编号 EC<sub>50</sub>
Dorzagliatin 353
化合物1 406.2
化合物2 335
化合物3 463.8
化合物4 372
化合物5 363
实施例7：体外肝微粒体代谢稳定性试验
1)人肝微粒体(20mg蛋白/ml)和SD大鼠肝微粒体(20mg蛋白/ml) 采购于供应商Corning。
2)取化合物适量，先用DMSO配制成5mM的储备液，再用50％甲醇 -水稀释成100μM的测试化合物工作溶液，待用。
3)从-80℃冰箱中取出肝微粒体(20mg蛋白/ml)，置于37℃水浴恒 温振荡器上预温孵3min，融化待用。
4)按照MgCl2-PB溶液(6mM)，肝微粒体(2.0mg蛋白/ml)，0.8mg 蛋白/ml(咪达唑仑)的比例，制备温孵体系混合溶液(不含β -NADPH)。
5)制备100μM的测试化合物工作溶液，备用。
6).对照组(不含β-NADPH)：分别取25μL PB溶液到75μL(4) 所述温孵体系混合液中，涡旋30s，混匀，反应总体积100μL， 复样。放入到37℃水浴恒温振荡器中进行孵育，并开始计时， 取样时间点为0min和60min。
7)样品组：分别取25μLβ-NADPH溶液(4mM)加入75μL(2) 所述反应体系中，涡旋30s，混匀，反应总体积100μL，复样。 放入到37℃水浴恒温振荡器中进行孵育，并开始计时，取样时 间点为0min,5min,15min,30min,60min。
8)于各个时间点将样品管中取出，加入300μL冷的终止剂(含内 标)，终止反应。
9)涡旋5min后，离心10min(5500×g)。
10)取上清液150μL加入150μL水，涡旋混匀，LC-MS/MS进样 分析。
11)数据分析
用下列一级动力学公式计算半衰期(t1/2)和清除率(CL)
Ct＝C0*e-kt
Ct＝(1/2)*C0
t1/2＝ln2/k＝0.693/k
Vd＝1/肝微粒体中蛋白含量
CLint(liver)＝CLint(mic)×肝重体重比×每克肝脏中的肝微粒体
蛋白浓度
测试结果如下:
表2.化合物肝微粒体稳定性测试结果
Figure BDA0002929912970000231
Figure BDA0002929912970000241
实施例8：体外肝细胞代谢稳定性试验
1)人肝细胞(存活率92％)购于上海权阳，大鼠肝细胞(存活率90％) 购于瑞德肝脏疾病研究(上海)有限公司。
2)称取适量取化合物，用DMSO配制成5mM的储备液，再用50％甲 醇-水稀释成100μM的测试化合物工作溶液，待用。
3)从液氮生物容器中取出细胞，复苏细胞，采用台盼蓝染色法对 细胞进行计数，然后将其稀释为活细胞数为2.0X106 cell/mL。
4)制备2μM的测试化合物工作溶液，备用。
5)预热给药工作液和肝细胞溶液。
6)0分钟时间点试验方法：取25μL 2μM给药溶液，加入到样品 稀释板(96孔透明深孔板)相应孔中，再加入300μL含内标的 ACN，然后加入25μL预热的肝细胞溶液，涡旋混匀，置于4℃ 冰箱保存。
7)剩余时间点试验方法：分别将150μL给药工作溶液和150μL 预热的肝细胞溶液加入到已标记好的孵育管中，孵育体系活细 胞数为1.0X106 cell/mL，轻轻吹打，并放入二氧化碳培养箱 中的摇床上，转速200rpm，立即计时。分别于15分钟、30 分钟、60分钟、120分钟时，取50uL反应液加入含300μL的 ACN(含格列本脲内标)的样品稀释板中相应位置，涡旋混匀。
8)取上清液150μL加入150μL水，涡旋混匀，LC-MS/MS进样 分析。
9)数据分析
用下列一级动力学公式计算半衰期(t1/2)和清除率(CL)
Ct＝C0*e-kt
Ct＝(1/2)*C0
t1/2＝ln2/k＝0.693/k
CLint(hep)＝ke/肝细胞量(million cells/mL)
CLint(liver)＝CLint(hep)×肝重体重比×每克肝脏中 的肝细胞数量
测试结果如下：
表3.化合物肝细胞稳定性测试结果
Figure BDA0002929912970000251
实施例9：大鼠体所内药代动力学试验
<口服吸收性的研究实验材料和方法>
1)使用动物使用SD大鼠。
2)饲养条件使SD大鼠自由摄取固形饲料和纯净水。
3)施与量、分组的设定利用规定的给药量进行口服给药、静脉给 药。如以下这定组。(各化合物的给药量有变化) 口服给药10mg/kg(n＝5-6)静脉给药1mg/kg(n＝5-6)
4)给药溶液的制备口服给药为悬浮液、灌胃给药。静脉给药为溶液、 尾静脉给药。
5)评价项目经时地采血，使用LC/MS/MS测定血浆中药物浓度。
6)统计分析对于血浆中浓度变化，使用非线性最小二乘法程序算出 血浆中浓度时间曲线下面积(AUC),由口服给药组和静脉给药组的 AUC算出生物利用度(BA),和并统计静脉给药血药浓度消除半衰期 T1/2。
测试结果如下：
表4.化合物大鼠PK测试结果
Figure BDA0002929912970000261
对于本领域技术人员，本公开不只局限于前述说明性实施例，在 不脱离其必要属性的情况下能以其它特定形式体现。因此期望认为， 所有方面均作为说明性而不是限制性、对所附权利要求进行参考的实 施例而不是前述实施例，引用文献只是针对附加的权利要求而不是 上述的实例，以及落入权利要求等效性的含义和范围之内的所有变 化因此预期包含于此。
本说明书中列举的所有专利、专利申请和文献参考均在此以其全 部内容引入作为参考。在不一致的情况下，包括定义的本公开将是有 说服力的。

Claims (8)

1.一种式I所示的氘代吡咯烷酮衍生物，
Figure RE-802602DEST_PATH_IMAGE001
其中：
R1、R2、R3、R4独立地选自氢，氘；
R5可以为氢或者氘；
R6、R7独立地选自氢，氘；
R8、R9、R10独立地选自氢，氘；
R11、R12、R13独立地选自氢，氘；
R14可以为氢或者氘；
R15、R16独立地选自氢，氘；
R17可以为氢或者氘；
R18、R19独立地选自氢，氘；
附加条件是R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19中至少一个是氘。
2.权利要求1所述的化合物，其具有如以下式II结构：
Figure RE-994549DEST_PATH_IMAGE002
其中 R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19独立的选自氢或者氘。
3.权利要求1所述的化合物，其具有以下如式III结构：
Figure RE-107124DEST_PATH_IMAGE003
其特征在于R6、R7、R8、R9、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19独立的选自氢或氘，并且这其中至少有一个是氘。
4.如权利要求1-3所述的氘代吡咯烷酮衍生物，其中所述的化合物包括但不限于以下化合物。
Figure RE-460745DEST_PATH_IMAGE004
5.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1至4中任一项所述的化合物和其对映异构体或非对映异构体或其混合物、其药学上可接受的盐、溶剂合物、阻转异构体、结晶形式或前药、以及药学上可接受的辅料、稀释剂或载体。
6.如权利要求5中任一项所述的组合物，其中所述组合物可以结合独立地选自以下各项的一种或多种其它的药剂使用，其它的药剂包括治疗II型糖尿病的药物：GLP-1受体激动剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、SGLT-2抑制剂、DPP-4抑制剂和二甲双胍。
7.根据权利要求1-4所述的化合物或权利要求5和6任一项所述的药物组合物在制备其用于预防一种或多种选自以下的代谢紊乱、减缓该代谢紊乱的进展、或治疗该代谢紊乱：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、高血糖症、餐后高血糖症、空腹血糖异常、超重、肥胖症、高血压症、胰岛素抵抗和/或代谢综合征；或改善血糖控制和/或降低空腹血浆葡萄糖；或预防、减缓、延迟或逆转糖尿病并发症。
8.治疗或预防一种或多种选自以下的代谢紊乱、减缓该代谢紊乱的进展或治疗该代谢紊乱的方法：I型糖尿病、II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、空腹血糖异常、高血糖症、餐后高血糖症、超重、肥胖症、高血压症、胰岛素抵抗和/或代谢综合征；或改善血糖控制和/或降低空腹血浆葡萄糖；或预防、减缓、延迟或逆转糖尿病并发症，包括向受试者给予治疗有效量的权利要求1-6中任一项所述的药物组合或药物组合物的复方制剂。
CN202110142856.2A 2021-02-02 2021-02-02 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途 Active CN113527265B9 (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110142856.2A CN113527265B9 (zh) 2021-02-02 2021-02-02 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110142856.2A CN113527265B9 (zh) 2021-02-02 2021-02-02 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途

Publications (3)

Publication Number Publication Date
CN113527265A true CN113527265A (zh) 2021-10-22
CN113527265B CN113527265B (zh) 2022-05-31
CN113527265B9 CN113527265B9 (zh) 2022-07-19

Family

ID=78094359

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110142856.2A Active CN113527265B9 (zh) 2021-02-02 2021-02-02 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113527265B9 (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102007118A (zh) * 2008-04-16 2011-04-06 霍夫曼-拉罗奇有限公司 吡咯烷酮葡糖激酶激活剂
CN110548146A (zh) * 2018-05-31 2019-12-10 华领医药技术（上海）有限公司 含葡萄糖激酶激活剂和双胍类降糖药物的药物组合、组合物和复方制剂及其制备方法和用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102007118A (zh) * 2008-04-16 2011-04-06 霍夫曼-拉罗奇有限公司 吡咯烷酮葡糖激酶激活剂
CN110548146A (zh) * 2018-05-31 2019-12-10 华领医药技术（上海）有限公司 含葡萄糖激酶激活剂和双胍类降糖药物的药物组合、组合物和复方制剂及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN113527265B9 (zh) 2022-07-19
CN113527265B (zh) 2022-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021078312A1 (zh) 环烷基类和杂环烷基类抑制剂及其制备方法和应用
EP4349840A2 (en) Pyrazolopyridine derivative having glp-1 receptor agonist effect
ES2533833T3 (es) Formas cristalinas de sal de clorhidrato de (4a-R,9a-S)-1-(1H-benzoimidazol-5-carbonil)-2,3,4,4a,9,9a-hexahidro-1H-indeno[2,1-b]piridin-6-carbonitrilo y su uso como inhibidores de HSD 1
CN105518008B (zh) 氨基吡喃环衍生物及其组合物和应用
CN112159401B (zh) 偏向性激动剂及其医药用途
CN115315427A (zh) Hpk1抑制剂及其制备方法和用途
US20050049312A1 (en) Novel adamantane derivatives with neuroprotective, antidepressant and anti-ischaemic activities,and process for preparing them
EP3712139A1 (en) Anti-hbv tetrahydroisoxazolo[4,3-c]pyridine compounds
CN113527265B (zh) 一种氘代吡咯烷酮衍生物、药物组合物及其用途
US10793573B2 (en) First-in-class of SHMT2 and MTHFD2 inhibitors as antitumor agents
WO2023196517A1 (en) Cdk9 inhibitors
WO2020187292A1 (zh) 2-取代吡唑氨基-4-取代氨基-5-嘧啶甲酰胺类化合物、组合物及其应用
CN110372638A (zh) 哌嗪类ampk激动剂及其医药用途
EP4163287A1 (en) A class of aryl glucoside derivatives, preparation method therefor and application thereof
CN111039880B (zh) 咪康唑及其衍生物作为tgr5激动剂的应用
EP3189060B1 (fr) Derives de n-aryl-2-amino-4-aryl-pyrimidines polyethers macrocycliques comme inhibiteurs de la ftl3 and jak
CN112851583A (zh) 新型苯并氮杂䓬类化合物、组合物及其用途
EP4155304A1 (en) Compound used as ret kinase inhibitor and application thereof
CN111233820B (zh) 含有冠醚和二(2-甲氧基乙氧基)结构的芬戈莫德衍生物
CN111825608A (zh) 四氢喹啉类与四氢异喹啉类化合物及其用途
TW202039457A (zh) 一類含氟取代的苯并噻吩類化合物及其藥物組合物及應用
CN110256420B (zh) 四氢吡啶并嘧啶衍生物及其制备方法和用途
WO2018179343A1 (ja) アダマンタン誘導体およびその医薬としての使用
CN112608315B (zh) 三唑并二氮杂卓类化合物及其制备方法及医药用途
CN105622511B (zh) 一种减肥药物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CI03 Correction of invention patent

Correction item: Claims|Description

Correct: Claims 1-4 submitted on June 24, 2022|Paragraphs 0119-0124 of the instructions submitted on June 24, 2022

False: Claims 1-4 submitted on April 11, 2022|Paragraphs 0119-0124 of the instructions submitted on June 1, 2021

Number: 22-01

Page: ??

Volume: 38

CI03 Correction of invention patent