CN113425666B - 一种祛痘、修复皮肤屏障组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于日用化妆品技术领域，公开了一种祛痘、修复皮肤屏障组合物及其制备方法和应用，组合物，按照质量份数包括：0.5‑5份胶态硫、1‑5份浮游生物提取物和1‑6份啤酒花提取物；本发明发现胶态硫、浮游生物提取物、啤酒花提取物三者在抗炎效果、抑菌效果、抑制5α‑还原酶活性、苦味受体激活上均具有协同作用；使用本发明的组合物制备的化妆品产品具有良好的祛痘效果，不会对皮肤产生刺激，安全性高，能够增强皮肤屏障。

Description

一种祛痘、修复皮肤屏障组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及日用化妆品技术领域，特别是一种祛痘、修复皮肤屏障组合物及其制备方法和应用。
背景技术
痤疮也称青春痘，是一种慢性炎症性皮肤病，主要刺激因素为二氢睾酮(DHT)。DHT促进毛囊角质形成细胞增殖以及皮脂的生成，造成毛孔堵塞、张大以及皮脂的过量分泌，毛囊内压力增加及皮脂氧化为痤疮丙酸杆菌的剧烈增殖创造条件。甘油三酯在脂肪酶的作用下被分解成脂肪酸为痤疮丙酸杆菌提供营养，痤疮丙酸杆菌的增殖破坏了微生物平衡，触发免疫系统，产生炎症级联反应。
目前市面上的祛痘产品，其中起祛痘效果的成分多为维A酸、水杨酸、果酸、壬二酸等，这些成分虽有比较好的祛痘效果，但也会给皮肤带来一定的刺激性。因此，有必要开发一种祛痘效果好、安全性高、不会对皮肤产生刺激同时可以增强皮肤屏障的祛痘、修复皮肤屏障组合物，本发明解决这样的问题。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种祛痘、修复皮肤屏障组合物及其制备方法和应用，用本发明得到的产品祛痘效果好，不会对皮肤产生刺激，安全性高，具有增强皮肤屏障的效果。
为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：
一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，按照质量份数包括：0.5-5份胶态硫、1-5份浮游生物提取物和1-6份啤酒花提取物；浮游生物提取物为干燥微藻的水提物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，按照质量份数包括：1-3份胶态硫、2-4份浮游生物提取物和2-5份啤酒花提取物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，按照质量份数包括：1份胶态硫、3份浮游生物提取物和3份啤酒花提取物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，胶态硫为质量百分数75％硫粉和质量百分数25％阿拉伯树胶组成的混合物；硫粉为S8硫粉。
一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，取胶态硫用溶剂预先分散均匀，得到胶态硫分散液；
步骤二，取干燥浮游生物进行水提取，减压浓缩，加入多元醇，混匀、过滤，得浮游生物提取物；
步骤三，将啤酒花晒干、粉碎，称取对应份数，进行水提取，经过二次过滤后的滤液减压浓缩，加入多元醇，混匀、过滤，得啤酒花提取物；
步骤四，将胶态硫分散液、浮游生物提取物、啤酒花提取物按照配方的质量份数混合均匀得祛痘、修复皮肤屏障组合物；
配方的质量份数包括：0.5-5份胶态硫、1-5份浮游生物提取物和1-6份啤酒花提取物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的制备方法，步骤二，取干燥浮游生物，加入10-20倍量的去离子水提取，提取温度为40-60℃，提取时间为2-4h，提取次数为1次；将提取液温度冷却至30℃及以下，用100-200目纱布过滤，收集滤液；将滤液减压浓缩至原重量的1/4-1/2，加入浓缩液重量1-10倍的多元醇，混匀、过滤，得浮游生物提取物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的制备方法，步骤三，将啤酒花晒干、粉碎，称取所需份数；加入10-20倍量的去离子水提取，提取温度为40-60℃，提取时间为2-4h，提取次数为2-3次，提取液冷却至小于等于30℃、过滤得初滤液，初滤液静置24h、离心、过滤得二次滤液，二次滤液减压浓缩至原重量的1/4-1/2得到浓缩液，加入浓缩液重量1-10倍的多元醇，混匀、过滤，得啤酒花提取物。
前述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的应用，祛痘、修复皮肤屏障组合物应用于化妆品中，化妆品为祛痘精华、乳液、啫喱、凝胶或膏霜中的一种。
本发明的有益之处在于：
本发明配方中的胶态硫无毒、低致敏，性质温和，可以软化角质层，帮助肌肤清理老废角质，具有祛痘、除粉刺的效果；浮游生物提取物可以显著下调参与皮脂分泌的主要介质的基因表达和减少炎症因子的合成，并调控皮肤屏障相关基因的表达，具有控油、抗炎、增强皮肤屏障的功能；啤酒花提取物的苦味可以激活皮肤中苦味感受器—苦味受体，苦味受体是一种G蛋白偶联受体，它的激活可以调节表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的平衡，减少致病菌金黄色葡萄球菌的比例，还可以抑制炎症过程中的基因表达，增强反应性皮肤的保护能力；
本发明发现胶态硫、浮游生物提取物、啤酒花提取物三者在抗炎效果、抑菌效果、抑制5α-还原酶活性、苦味受体激活上均具有协同作用；
由本发明的组合物制备得到的产品具有优秀的安全性能，在调节菌群平衡、祛痘效果、皮肤屏障修复上具有优秀的表现。
附图说明
图1是本发明实验四组合物激活苦味受体的结果示意图；
图2是本发明组合物制备得到的祛痘精华乳在调节菌群平衡实验的结果示意图；
图3是本发明组合物制备得到的祛痘精华乳祛痘实验的结果示意图。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本发明作具体的介绍。
一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，按照质量份数包括：0.5-5份胶态硫、1-5份浮游生物提取物和1-6份啤酒花提取物；浮游生物提取物为干燥微藻的水提物。作为一种优选，组合物按照质量份数包括：1-3份胶态硫、2-4份浮游生物提取物和2-5份啤酒花提取物；作为进一步优选，组合物按照质量份数包括：1份胶态硫、3份浮游生物提取物和3份啤酒花提取物。
作为一种优选，胶态硫为质量百分数75％硫粉和质量百分数25％阿拉伯树胶组成的混合物；硫粉为S8硫粉。
一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，取胶态硫用溶剂预先分散均匀，得到胶态硫分散液；作为一种实施例，溶剂包括：水、丙二醇、乙醇等，需要说明的是：溶剂不受限制，只要是能够分散胶态硫的溶剂都能适用于本发明。
步骤二，取干燥浮游生物进行水提取，减压浓缩，加入多元醇，混匀、过滤，得浮游生物提取物；
作为一种实施例，多元醇包括：甘油或丙二醇，多元醇不受限制，只要是能运用于提取物的都适用于本发明。
步骤二具体包括如下内容：取干燥浮游生物，加入10-20倍量的去离子水提取，提取温度为40-60℃，提取时间为2-4h，提取次数为1次；将提取液温度冷却至30℃及以下，用100-200目纱布过滤，收集滤液；将滤液减压浓缩至原重量的1/4-1/2，加入浓缩液重量1-10倍的多元醇，混匀、过滤，得浮游生物提取物。需要说明的是提取方法的条件和方式不受限制，只要是能够得到干燥浮游生物的提取物都在本发明的保护范围内。
步骤三，将啤酒花晒干、粉碎，称取对应份数，进行水提取，经过二次过滤后的滤液减压浓缩，加入多元醇，混匀、过滤，得啤酒花提取物；
作为一种实施例，多元醇包括：甘油或丙二醇，多元醇不受限制，只要是能运用于提取物的都适用于本发明。
步骤三具体包括如下内容，将啤酒花晒干、粉碎，称取所需份数；加入10-20倍量的去离子水提取，提取温度为40-60℃，提取时间为2-4h，提取次数为2-3次，提取液冷却至小于等于30℃、过滤得初滤液，初滤液静置24h、离心、过滤得二次滤液，二次滤液减压浓缩至原重量的1/4-1/2得到浓缩液，加入浓缩液重量1-10倍的多元醇，混匀、过滤，得啤酒花提取物。需要说明的是提取方法、过滤方法的条件和方式不受限制，只要是能够得到啤酒花提取物都在本发明的保护范围内。
步骤四，将胶态硫分散液、浮游生物提取物、啤酒花提取物按照配方的质量份数混合均匀得祛痘、修复皮肤屏障组合物；
配方的质量份数包括：0.5-5份胶态硫、1-5份浮游生物提取物和1-6份啤酒花提取物。
本发明祛痘、修复皮肤屏障组合物应用于化妆品中，化妆品为祛痘精华、乳液、啫喱、凝胶或膏霜中的一种，需要说明的是：这里化妆品的品类不受限制，只要是添加本发明组合物的化妆品均在本发明的保护范围内。
以下通过以下实施例配方得到的样品，进行效果验证实验。
实施例1-14及对比例1-6中各组合物的组分及份数如表1所示。
表1
胶态硫 浮游生物提取物 啤酒花提取物
实施例1 0.5 1 1
实施例2 0.5 2 2
实施例3 0.5 3 2
实施例4 0.5 4 2
实施例5 0.5 5 2
实施例6 1 3 1
实施例7 1 3 2
实施例8 1 3 3
实施例9 1 3 5
实施例10 1 3 6
实施例11 3 3 2
实施例12 3 4 5
实施例13 5 3 2
实施例14 5 5 6
对比例1 5 0 0
对比例2 0 5 0
对比例3 0 0 6
对比例4 5 5 0
对比例5 0 5 6
对比例6 5 0 6
以上配方的实施例均通过如下方法得到，制备方法，包括如下步骤：
步骤一，取胶态硫用乙醇预先分散均匀，得到胶态硫分散液；
步骤二，取干燥浮游生物，加入20倍量的去离子水提取，提取温度为50℃，提取时间为3h，提取次数为1次；将提取液温度冷却至30℃及以下，用200目纱布过滤，收集滤液；将滤液减压浓缩至原重量的1/2，加入浓缩液重量10倍的甘油，混匀、过滤，得浮游生物提取物。
步骤三，将啤酒花晒干、粉碎，称取所需份数；加入20倍量的去离子水提取，提取温度为50℃，提取时间为3h，提取次数为3次，提取液冷却至30℃、过滤得初滤液，初滤液静置24h、离心、过滤得二次滤液，二次滤液减压浓缩至原重量的1/2得到浓缩液，加入浓缩液重量10倍的甘油，混匀、过滤，得啤酒花提取物。
步骤四，将胶态硫分散液、浮游生物提取物、啤酒花提取物按照实施例的配方克数混合均匀得祛痘、修复皮肤屏障组合物。
实验一，抗炎效果测试：
白细胞介素-6(IL-6)是一种促炎细胞因子，可用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定人永生化角质形成细胞(HaCaT)中IL-6的分泌水平，通过ELISA检测结果可以评价样品的抗炎效果。实验步骤如下：
(1)空白对照组：在96孔板中按照每孔1×104个细胞的密度接种含有20％牛血清的DMEM培养基和HaCaT细胞各100μL，培养24小时后换成无血清培养基，收集细胞培养上清，用人白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒检测HaCat细胞中IL-6的分泌量；
(2)阴性对照组：用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激HaCat细胞6小时，收集细胞培养上清，检测LPS诱导的HaCat细胞中IL-6的分泌量；
(3)实验组：在细胞中分别加入100μL实施例1-14及对比例1-6中制备的祛痘、修复皮肤屏障组合物，于37℃，5％CO2培养箱中培养24h，用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激HaCat细胞6h，收集细胞培养上清，检测HaCat细胞中IL-6的分泌量，结果如表2。
表2
Figure BDA0003149367650000061
Figure BDA0003149367650000071
实验结论：从表2的结果可知，祛痘、修复皮肤屏障组合物中各组分都能降低LPS诱导的HaCat细胞中IL-6的分泌量，但三者复配使用可以显著降低，说明三者复配使用抗炎效果更好。
实验二，抑菌效果测试：
根据《QB/T 2738-2012-日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》中的抑菌环法评价实施例1-14及对比例1-6中制备的祛痘、修复皮肤屏障组合物的抑菌效果，具体实验方法如下：
取无菌干燥滤纸片，每片滴加20μL实际使用浓度的样品溶液或无菌蒸馏水(对照)，干燥后备用；用无菌棉拭子蘸取菌悬液在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次，室温干燥5分钟；将试验样片紧贴染菌平板表面，37℃培养16-18h后观察结果，记录抑菌环直径。
实施例1-14及对比例1-6的抑菌环直径见表3(抑菌环直径＞20mm，极敏；15-20mm，高敏；10-15mm，中敏；7-9mm，低敏；＜7mm，不敏感)。
表3
Figure BDA0003149367650000072
Figure BDA0003149367650000081
实验结论：从表3的结果可知，实施例1-14及对比例1-6的祛痘、修复皮肤屏障组合物中各组分复配使用后对金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌的抑菌活性更好。
实验三，抑制5α-还原酶活性测定：
5α-还原酶在还原型辅酶II(NADPH)的参与下可以将睾酮转化为DHT从而引发痤疮。根据紫外-可见分光光度法，NADPH在340nm处有特征吸收峰而参与反应后的产物在340nm处特征吸收峰消失，通过测定溶液的吸光度判断各样品对5α-还原酶活性的抑制情况。具体实验方法如下：
按表4所示依次向试管中加入pH为7.4的磷酸盐缓冲液、5α-还原酶、睾酮、NADPH，混合均匀后测定其吸光度，37℃下孵育60分钟后再次测定其吸光度，计算得空白对照NADPH吸光度下降值△A0；
依次向试管中加入pH为7.4的磷酸盐缓冲液、5α-还原酶、睾酮、非那雄胺或实施例1-14及对比例1-6制备的祛痘、修复皮肤屏障组合物，混合均匀后测定其吸光度，37℃下孵育60分钟后再次测定其吸光度，计算得阳性对照、实验组NADPH吸光度下降值△A。
表4
Figure BDA0003149367650000082
Figure BDA0003149367650000091
5α-还原酶抑制率＝[(△A0-△A)/△A0]×100％，实施例1-14及对比例1-6对5α-还原酶的抑制率见表5。
表5
5α-还原酶抑制率(％) 5α-还原酶抑制率(％)
非那雄胺 56.37 实施例11 49.42
实施例1 16.15 实施例12 51.06
实施例2 25.89 实施例13 52.79
实施例3 34.61 实施例14 54.78
实施例4 37.54 对比例1 14.53
实施例5 38.27 对比例2 12.14
实施例6 33.12 对比例3 11.59
实施例7 41.03 对比例4 13.22
实施例8 47.38 对比例5 11.93
实施例9 48.65 对比例6 12.37
实施例10 48.91 / /
从表5的结果，可以得出以下结论：①实施例1-14及对比例1-6的祛痘、修复皮肤屏障组合物都能抑制5α-还原酶的活性，且各组分之间存在协同作用，复配使用效果更好；②对比实施例2-5的结果发现，实施例5较实施例4效果提升不显著，实施例3、4效果接近，因此组合物中浮游生物提取物的添加量优选为3份或4份；③对比实施例6-10的结果发现，实施例10较实施例9效果提升不显著，实施例8、9效果接近，因此组合物中啤酒花提取物的添加量优选为3份或5份；④对比实施例3、7、11、13的结果发现，胶态硫添加量越高，5α-还原酶抑制率越高，但配方中高含量胶态硫的存在容易引起气味重、稳定性变差的问题。综合上述结论，结合配方稳定性、各组分协同等因素，组合物中胶态硫的添加量优选为1份，浮游生物提取物和啤酒花提取物的添加量都优选为3份，实施例8为本发明优选。
实验四，苦味受体激活表征：
苦味受体TAS2R20和TAS2R31可在角质形成细胞和成纤维细胞中表达，其被激活的过程中伴随着钙的激活和释放，钙是在激活信号转导过程中释放的信使，因此将钙离子的释放作为激活苦味受体的表征。钙的释放通过钙离子检测试剂盒荧光探针的方法检测，激发波长488nm，发射波长526nm。实施例1、8、14及对比例1-6制备的祛痘、修复皮肤屏障组合物激活苦味受体的结果如图1所示。
实验五，采用本发明的组合物制备得到祛痘精华乳，验证各方面性能：
本发明还制备了包含上述实施例8制备的祛痘、修复皮肤屏障组合物的祛痘精华乳的样品，其各组分的组成及份数如表6所示。
制备方法如下：a.将水、螯合剂、保湿剂混合，加热至70-80℃溶解得到A相，保温备用；b.将润肤剂、乳化剂混合，加热至70-80℃溶剂得到C相，保温备用；c.将防腐剂、祛痘、修复皮肤屏障组合物混合，搅拌均匀得到D相，备用；d.将作为增稠剂的B相投入A相，均质3分钟，控制温度为70-80℃，确认分散状态；e.向步骤d所得内容物中加入C相，均质乳化5分钟，控制温度为70-80℃，确认乳化状态；f.将步骤e所得内容物冷却至40-45℃，加入D相，均质3分钟，得到祛痘精华乳。
表6
Figure BDA0003149367650000101
实验5-1：安全性斑贴测试
取实验例5制备的祛痘精华乳样品于斑试器中，对照孔为空白对照；将加有受试物的斑试器贴到受试人员前臂屈侧，用手掌轻压使之均匀地贴敷于皮肤上，持续24小时；分别于去除受试物斑试器后30min、24小时、48小时后按表7观察皮肤刺激性和致敏性，并记录观察结果。
表7
Figure BDA0003149367650000111
实验结果：对样品进行人体皮肤斑贴测试，结果见表8。人体皮肤斑贴试验结果显示，30人中无皮肤不良反应。
表8
Figure BDA0003149367650000112
实验5-2：调节菌群平衡
选取15名面部有痤疮的志愿者(妊娠或哺乳妇女除外)，使用祛痘精华乳样品，每天早晚各使用一次，用DNA测序技术分别在产品使用前、使用后4周分析面部菌种组成情况。实验结果如图2，使用样品4周后，志愿者面部痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的占比减少了27.9％，表皮葡萄球菌的占比增加了114.3％。
实验5-3：祛痘效果测试
(1)测试人数：15人；
(2)受试部位：面部；
选取15名年龄在18-30岁、面部有痘痘的志愿者(妊娠或哺乳妇女除外)，使用祛痘精华乳样品，每天早晚各使用一次，分别在产品使用前、使用后1天、2天、3天用C-CUBE(PIXIENCE,France)对目标痘痘进行拍照，实验结果如图3，样品能有效改善痘痘问题。
实验5-4：皮肤屏障修复测试
选取5名年龄在18-30岁、面部皮肤屏障受损的志愿者(妊娠或哺乳妇女除外)，使用祛痘精华乳样品，每天早晚各使用一次，分别在产品使用前、使用后2周、使用后4周用经表皮失水率测试探头Tewameter(CK,Germany)测量面部经表皮失水率,同一个点测定5次，排除最大值和最小值后取3次的平均值记录。
经皮水分散失(Trans Epidermal Water Loss,TEWL)反应角质层的屏障功能，可用来评价化妆品对皮肤屏障的修复能力。在测试条件下，得到的TEWL值越高，代表单位时间、单位横截面积的经表皮水分流失量越多，皮肤屏障功能较差，反之皮肤屏障功能较好，即TEWL值降低越多，产品对皮肤屏障的修复能力越强。
Tewl值增减率＝(产品使用后Tewl值-使用前Tewl值)÷使用前Tewl值×100％。
实验结果：结果见表9经表皮水分流失Tewl值增减率(％)，样品可有效修复皮肤屏障。
表9
使用前 2周 4周
样品 0 -24.3 -36.9
由以上实验可知：胶态硫、浮游生物提取物、啤酒花提取物三者在抗炎效果、抑菌效果、抑制5α-还原酶活性、苦味受体激活上均具有协同作用；由本发明的组合物制备得到的产品具有优秀的安全性能，在调节菌群平衡、祛痘效果、皮肤屏障修复上具有优秀的表现。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。

Claims (2)

1.一种祛痘、修复皮肤屏障组合物，其特征在于，按照质量份数包括：5份胶态硫、5份浮游生物提取物和6份啤酒花提取物；所述浮游生物提取物为干燥微藻的水提物；所述胶态硫为质量百分数75%硫粉和质量百分数25%阿拉伯树胶组成的混合物；所述硫粉为S8硫粉；
所述组合物通过如下方法制备：
步骤一，取胶态硫用乙醇预先分散均匀，得到胶态硫分散液；
步骤二，取干燥浮游生物，加入20倍量的去离子水提取，提取温度为50℃，提取时间为3h，提取次数为1次；将提取液温度冷却至30℃及以下，用200目纱布过滤，收集滤液；将滤液减压浓缩至原重量的1/2，加入浓缩液重量10倍的甘油，混匀、过滤，得浮游生物提取物；
步骤三，将啤酒花晒干、粉碎，称取所需份数；加入20倍量的去离子水提取，提取温度为50℃，提取时间为3h，提取次数为3次，提取液冷却至30℃、过滤得初滤液，初滤液静置24h、离心、过滤得二次滤液，二次滤液减压浓缩至原重量的1/2得到浓缩液，加入浓缩液重量10倍的甘油，混匀、过滤，得啤酒花提取物；
步骤四，将胶态硫分散液、浮游生物提取物、啤酒花提取物按照所述的质量份数混合均匀得祛痘、修复皮肤屏障组合物。
2.根据权利要求1所述的一种祛痘、修复皮肤屏障组合物的应用，其特征在于，所述祛痘、修复皮肤屏障组合物应用于化妆品中，所述化妆品为祛痘精华、乳液、啫喱、凝胶或膏霜中的一种。
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