CN113398053A - 一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，属于植物提取和微生物发酵及化妆品技术领域，以酵母菌进行微生物发酵后得到发酵液，以发酵液为提取溶剂，分别对枸桔果、芦荟、金黄洋甘菊、积雪草、葡萄皮、马齿苋、银耳进行提取纯化。以发酵液为溶剂，按一定比例添加上述植物提取物，加适量丁二醇，混合搅拌溶解完全，灭菌后，依次通过孔径为3um、1um、0.22um的滤芯过滤后即得本发明的产品。本发明的产品不额外添加一滴水，完全以酵母滤液为溶剂，营养更加丰富，功效更加强大，富含多种氨基酸、多糖、维生素、植萃精华，滋养呵护肌肤，抗炎舒缓，滋润保湿，是一款非常优异的化妆品原料。

Description

一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用
技术领域
本发明涉及植物提取和微生物发酵及化妆品技术领域，尤其涉及一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用。
背景技术
近年来，中国经济高速发展，人们生活水平显著提高，但随之而来的是环境被破坏，大气被污染，皮肤过敏患者急剧增加。当前化妆品市场上，抗敏成分主要以化学合成的比较多，容易造成肌肤敏感甚至引发炎症，得不偿失，具有抗炎抗敏功效的化妆品受到人们的重视，而植物抗敏成分则备受消费者的喜爱。
当下技术主要是将植物简单提取后直接使用，这个方式做出来的植物提取物大多是没是什么实际效果的，不仅浪费大量人力物力，最后还没有什么结果，急需温和效果更佳的植物提取物。
发明内容
为改善现有技术中的存在的植物提取物效果较差的问题，提出了一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，以酵母菌进行微生物发酵后得到发酵液，以发酵液为提取溶剂，分别对枸桔果、芦荟、金黄洋甘菊、积雪草、葡萄皮、马齿苋、银耳进行提取纯化。以发酵液为溶剂，按一定比例添加上述植物提取物，加适量丁二醇，混合搅拌溶解完全，灭菌后，依次通过孔径为3um、1um、0.22um的滤芯过滤后即得本发明的产品。本发明的产品不额外添加一滴水，完全以酵母滤液为溶剂，营养更加丰富，功效更加强大，富含多种氨基酸、多糖、维生素、植萃精华，滋养呵护肌肤，抗炎舒缓，滋润保湿，是一款非常优异的化妆品原料。
作为优选的，所述发酵液中的酵母菌为酿酒酵母菌，且将所述酿酒酵母菌放入培养基中培养，其中发酵条件为：pH值范围5.0～7.0，发酵温度25～35℃，摇床速度100～250rpm，发酵时间1～3d。
作为优选的，所述发酵用的培养基为蛋白胨1～3％，葡萄糖2～5％，磷酸二氢钾0.01～0.1％，七水硫酸镁0.01～0.1％，氯化钠0.1～1.0％。
作为优选的，所述的枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:2～8，50～70℃回流提取4～8小时，减压浓缩干后，加5～10倍浓缩粉末质量的10～20％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复3～5次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复3～5次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2～5倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40～50℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
作为优选的，所述的芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净，擦干。然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液，将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(5000～20000r/min)5～20min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁。将凝胶汁在60～75℃下真空浓缩到原体积的30～50％，然后加入5～10倍体积高浓度乙醇(体积分数70～95％)，于2～4℃下醇沉过夜，将混合沉淀物按2000～5000r/min转速离心5～20min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
作为优选的，所述的洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10～30，提取温度为50～70℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0～2.0mg/mL，上样体积流量为0.5～2.0BV/h；洗脱剂用50～80％乙醇，体积流量为0.5～2.0BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
作为优选的，所述的积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～4:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15～30，45～55℃超声辅助提取1～2h，60～75℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.3～0.8％、絮凝温度为35～45℃、絮凝时间为2～3h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.4～1ml/min，60～75％乙醇，4～8ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
作为优选的，所述的葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～4:1的混合液作为提取剂，料液比1:10～20，回流提取，且温度为50～65℃，提取时间为4～8h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.1～1ml/min，40～65％乙醇，0.1～1.0ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
作为优选的，所述的马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:3～2:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10-30，用1000～2000MHz的微波进行提取1～2小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5～2ml/min，60～80％乙醇，0.5～2ml/min。
作为优选的，所述的银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:40-60,95～100℃高温提取4～8h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液70～85℃减压蒸馏到原滤液质量的五分之一～三分之一，收集浓缩液，加入其质量的10～20倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40～55℃烘干。
作为优选的，得到发酵液和提取物后，按比例先将发酵液和丁二醇混合后，再依次加入其它提取物，50～60℃加热溶解，过滤后即得到本发明的产品。
一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物可应用于化妆品，所述化妆品剂型包括膏霜、乳液、水剂、洁面泡沫。
综上所述，本发明相对于现有技术具有以下优点和效果：产品生产整个过程都不额外添加一滴水，营养更加丰富，每种植物都有其独特的提取方法，植物活性成分含量高，功效强大，不含刺激性化学成分，性状温和，适合广大客户群体使用。
本发明将微生物发酵技术与植物提取技术相结合，以发酵液为溶剂，进行植物提取，产品营养更加丰富，植物精萃的搭配使用，增强了产品在抗敏方面的功效。与化工合成得到的产品相比较，植物提取物更安全。
附图说明
图1是一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用图。
图2是抗敏测试得分结果。
具体实施方式
以下结合附图和实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，具体步骤如图1所示：
1)将将预先摇床培养好的酿酒酵母菌接种到中含蛋白胨1％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.04％，七水硫酸镁0.03％，氯化钠0.3％的培养基中，发酵条件是：pH值范围5.0～6.0，发酵温度28℃，摇床速度100rpm，发酵时间1d。将发酵后的发酵液灭菌后，过滤收集滤液。
2)枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:3，50℃回流提取6小时，减压浓缩干后，加5倍浓缩粉末质量的10％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复3次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复5次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
3)芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净，擦干。然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液。将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(5000r/min)20min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁。将凝胶汁在60℃下真空浓缩到原体积的30％，然后加入5倍体积高浓度乙醇(体积分数70％)，于2℃下醇沉过夜。将混合沉淀物按2000r/min转速离心20min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
4)洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝1:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10，提取温度为50℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0mg/mL，上样体积流量为0.5BV/h；洗脱剂用50％乙醇，体积流量为0.5BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
5)积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15，45℃超声辅助提取2h，60℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.3％、絮凝温度为35℃、絮凝时间为3h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，5ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
6)葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1的混合液作为提取剂，料液比1:10，回流提取，且温度为50℃，提取时间为4h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.2ml/min，50％乙醇，0.2ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
7)马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:3的混合液作为提取剂，且料液比为1:10，用1000MHz的微波进行提取2小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，0.5ml/min。
8)银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:40,95℃高温提取6h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液70℃减压蒸馏到原滤液质量的五分之一，收集浓缩液，加入其质量的15倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40℃烘干。
9)得到发酵液和提取物后，按比例先将发酵液和丁二醇混合后，再依次加入其它提取物，50℃加热溶解，过滤后即得到本发明的产品。
实施例2
一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，具体步骤如图1所示：
1)将将预先摇床培养好的酿酒酵母菌接种到中含蛋白胨2％，葡萄糖4％，磷酸二氢钾0.05％，七水硫酸镁0.03％，氯化钠0.5％的培养基中，发酵条件是：pH值范围5.0～6.0，发酵温度30℃，摇床速度130rpm，发酵时间1.5d。将发酵后的发酵液灭菌后，过滤收集滤液。
2)枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:5，50℃回流提取6小时，减压浓缩干后，加5倍浓缩粉末质量的10％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复3次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复5次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
3)芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净，擦干。然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液。将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(10000r/min)10min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁。将凝胶汁在60℃下真空浓缩到原体积的40％，然后加入5倍体积高浓度乙醇(体积分数70％)，于2℃下醇沉过夜。将混合沉淀物按3000r/min转速离心10min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
4)洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝2:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15，提取温度为50℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0mg/mL，上样体积流量为0.5BV/h；洗脱剂用60％乙醇，体积流量为0.5BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
5)积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15，55℃超声辅助提取1h，60℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.5％、絮凝温度为35℃、絮凝时间为2h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，5ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
6)葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，料液比1:10，回流提取，且温度为60℃，提取时间为4h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.4ml/min，50％乙醇，0.4ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
7)马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10，用1000MHz的微波进行提取1小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，0.5ml/min。
8)银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:50,95℃高温提取8h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液75℃减压蒸馏到原滤液质量的五分之一，收集浓缩液，加入其质量的15倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40℃烘干。
9)得到发酵液和提取物后，按比例先将发酵液和丁二醇混合后，再依次加入其它提取物，50℃加热溶解，过滤后即得到本发明的产品。
实施例3
一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，具体步骤如图1所示：
1)将将预先摇床培养好的酿酒酵母菌接种到中含蛋白胨2％，葡萄糖4％，磷酸二氢钾0.05％，七水硫酸镁0.05％，氯化钠0.5％的培养基中，发酵条件是：pH值范围5.5～6.5，发酵温度30℃，摇床速度130rpm，发酵时间1.5d。将发酵后的发酵液灭菌后，过滤收集滤液。
2)枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:5，60℃回流提取6小时，减压浓缩干后，加5倍浓缩粉末质量的20％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复5次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复3次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
3)芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净，擦干。然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液。将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(10000r/min)5min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁。将凝胶汁在60℃下真空浓缩到原体积的30％，然后加入5倍体积高浓度乙醇(体积分数70％)，于4℃下醇沉过夜。将混合沉淀物按3000r/min转速离心10min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
4)洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:20，提取温度为50℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0mg/mL，上样体积流量为0.5BV/h；洗脱剂用65％乙醇，体积流量为0.5BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
5)积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝2:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15，55℃超声辅助提取2h，60℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.5％、絮凝温度为35℃、絮凝时间为3h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，5ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
6)葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝2:1的混合液作为提取剂，料液比1:15，回流提取，且温度为65℃，提取时间为4h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.6ml/min，50％乙醇，0.6ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
7)马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10，用1000MHz的微波进行提取1.5小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，0.5ml/min。
8)银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:55,98℃高温提取4h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液75℃减压蒸馏到原滤液质量的五分之一，收集浓缩液，加入其质量的20倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40℃烘干。
9)得到发酵液和提取物后，按比例先将发酵液和丁二醇混合后，再依次加入其它提取物，50℃加热溶解，过滤后即得到本发明的产品。
实施例4
一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法与应用，具体步骤如图1所示：
1)将将预先摇床培养好的酿酒酵母菌接种到中含蛋白胨2％，葡萄糖5％，磷酸二氢钾0.1％，七水硫酸镁0.05％，氯化钠0.5％的培养基中，发酵条件是：pH值范围5.5～6.5，发酵温度32℃，摇床速度130rpm，发酵时间1.0d。将发酵后的发酵液灭菌后，过滤收集滤液。
2)枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:8，60℃回流提取6小时，减压浓缩干后，加8倍浓缩粉末质量的20％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复3次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复3次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
3)芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净，擦干。然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液。将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(10000r/min)10min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁。将凝胶汁在65℃下真空浓缩到原体积的30％，然后加入5倍体积高浓度乙醇(体积分数70％)，于4℃下醇沉过夜。将混合沉淀物按3000r/min转速离心15min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
4)洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝4:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:20，提取温度为50℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0mg/mL，上样体积流量为0.5BV/h；洗脱剂用65％乙醇，体积流量为0.5BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
5)积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝4:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:20，50℃超声辅助提取2h，60℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.8％、絮凝温度为45℃、絮凝时间为2h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.6ml/min，70％乙醇，5ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
6)葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，料液比1:15，回流提取，且温度为65℃，提取时间为4h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.6ml/min，50％乙醇，0.6ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
7)马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10，用1000MHz的微波进行提取2小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5ml/min，60％乙醇，0.5ml/min。
8)银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:55,98℃高温提取6h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液75℃减压蒸馏到原滤液质量的三分之一，收集浓缩液，加入其质量的20倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40℃烘干。
9)得到发酵液和提取物后，按比例先将发酵液和丁二醇混合后，再依次加入其它提取物，50℃加热溶解，过滤后即得到本发明的产品。
上述说明描述了本发明的优选实施例，如前所述，应当理解本发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本发明的精神和范围，则都应在本发明所附权利要求的保护范围内。
效果实施例：
一、抗敏效果的检测：
被测者(平均年龄25岁，20-30岁)在小臂进行皮肤斑贴试验(斑贴试验)。但是银屑病(牛皮癣)，湿疹(皮疹)患者或其他皮肤损伤，正处在怀孕、哺乳期或服用避孕药、抗组织胺等人群不能参与这项研究。在测试部位用75％的乙醇擦拭，干燥后，分别涂抹A(85％纯水+15％组胺溶液)、B(85％丁二醇+15％组胺溶液)、C(85％随机实施例样品+15％组胺溶液)并在30分钟后，1小时后,3小时后再次观察测试部位并详细记录测试人员信息。
判定(Grade) MeanScore
无刺激(1) 0.00～0.75
微刺激(2) 0.76～1.50
轻刺激(3) 1.51～2.50
中刺激(4) 2.51～4.00
强刺激(5) ≥4.01
结果：
Figure BDA0003182885570000101
Figure BDA0003182885570000111
由图2可以看出，只有纯水和15％组胺溶液以及丁二醇和15％组胺溶液，他们两组明显有刺激，证明水和丁二醇不能起到抗敏的效果，而观察实施例组+15％组胺溶液，刺激性明显要小很多，因而可以得出结论，本发明产品有很好的抗敏效果。
二、保湿效果的检测：
1.实验过程
仪器：cornemeter CMB25(德国CK公司)
受试样品：1号(纯水)，2号(随机实施例样品)
2.实验条件
①室内环境
②无强烈阳光或灯光直射
③环境温度20℃±2℃，环境湿度40-60％
3.受试者条件
①年龄18-60岁正常受试者，男女均可，女士优先
②无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性病者
③无活动性过敏性疾病者
④既往对护肤类化妆品无过敏史
⑤近期一个月内未曾一直使用激素类药物及免疫抑制剂
⑥未参加其他临床实验者
⑦志愿参加并能按实验要求完成规定内容者
4.皮肤水分含量检测工作原理
采用世界公认的Cornemeter法—电容法，它的原理基于水(81)和其他物质的介电常数(＜7)变化相当大，按照含水量的不同，适当形状的测量用电容器会随着皮肤的电容量的变化而变化，而皮肤的电容量又是在测量的范围内，这样就可以测量出皮肤的水分含量。电容量的测量方法比其他方法更优越，由于被测试皮肤和测试探头没有不自然的接触，几乎没有电流通过被测试皮肤，因此测试结果实际上不受极化效应和离子导电率的影响。仪器探头和皮肤中水分建立平衡过程中没有惯性，可以实现快速测量，这样同时也消除了活性皮肤对测量结果的影响。
5.测试步骤
①测试区域：手前臂内侧
②测试前准备
受试部位前2-3天不能使用美白功效产品(化妆品、外用药品或内服保健品)，试验前，受试者需要统一清洁前臂内侧，用干的面巾纸擦拭干净，清洁后在受试者前臂内侧做好区域标记，正式测试前应该在符合标准的房间内静坐至少30min，前臂暴露，呈测试状态放置，保持轻松。
③测试过程
实验中前臂内侧标记3*4cm2实验区域，同一手臂可同时标记多个区域，区域间隔2cm。测试产品和空白对照均随机分布在手前臂上，先测量各测试区域清洁后30min的空白值，然后按2.0±0.1mg样品/cm2的用量，使用乳胶指套将受试样均匀涂布于实验区内，涂抹后分布测量0h、1h、2h、4h受试区域和对照区域的皮肤含水量。同一个志愿者的测量由同一个测量人员完成。
6.测定指标
皮肤含水量测定，测定两次，取均值
7.对照形式
采用自身进行不同处理对照
8.结果与分析
参与测试人员测量结果
Figure BDA0003182885570000121
Figure BDA0003182885570000122
Figure BDA0003182885570000123
Figure BDA0003182885570000124
结果：由表可以看出，空白组，4个小时内不同测试人员，皮肤水分含量基本不变。水组，皮肤测试部位涂抹纯水后，1小时内，皮肤水分含量有细微升高，但是后面就马上回归之前的水平了，表明涂抹纯水不能增加皮肤水分含量。样品组，皮肤测试部位涂抹样品后，皮肤水分含量明显上升，且4小时内含水量稳定，可以得出本发明的组合物具有保湿的效果。
应用实施例：
舒缓修护精华液
Figure BDA0003182885570000131
1.A相搅拌分散静置过夜，反应釜先用纯水煮一遍
2.A相投入釜中80℃加热搅拌溶解40min，40HZ搅拌速度
3.加热过程中，B相(粉末分散后再投)投入釜中搅拌溶解
4.灭菌完成后，降温到65℃，取样完全溶解后，C相加入釜中搅拌5min后
5.DEF提前半小时混合后，投入釜中搅拌溶解20min，取样检测
6.降温到45℃，G相(预处理)投入釜中搅拌20min，取样检测pH，粘度，外观，肤感，气味等指标合格后，不过滤包装
舒缓修护精华乳
Figure BDA0003182885570000132
Figure BDA0003182885570000141
1.A相搅拌分散静置过夜，反应釜先用纯水煮一遍
2.A相投入釜中80℃加热搅拌溶解40min，40HZ搅拌速度
3.加热过程中，B相(粉末分散后再投)投入釜中搅拌溶解
4.取样观察完全溶解后，C相投入釜中搅拌混匀10min
5.D相另一釜中80℃加热搅拌溶解
6.D相加入上面混合液中，搅拌混匀10min后，开乳化，45HZ搅拌速度，22HZ乳化速度，3min，分两次进行,间隔5min
7.乳化完成后，取样检测
8.合格后，250目纱布过滤包装
舒缓修护精华霜
Figure BDA0003182885570000142
Figure BDA0003182885570000151
1.反应釜先用纯水煮一遍,A相投入釜中70℃40HZ加热搅拌溶解。
2.B、C、D相(提前配好)依次投入釜中搅拌混匀。
3.E相乳化罐中单独加热溶解好后。
4.上面混合液非常缓慢加入E相中，搅拌速度45HZ，F相也加入乳化罐中，添加完毕3min后开启均质，搅拌速度45HZ,乳化速度35HZ，3min直至粘度提升，确保水分完全包裹，取样检测观察。
5.降温到50℃，80目纱布过滤包装。

Claims (10)

1.一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：该组合物原料按以下重量组份进行复配，包括：5～10％枸桔果提取物、2～10％芦荟提取物、5～10％金黄洋甘菊提取物、2～5％积雪草提取物、1～5％葡萄皮提取物、2～5％马齿苋提取物、3～10％银耳提取物、10～50％的酵母菌发酵液，以及40～65％丁二醇；按比例添加上述植物提取物，加适量丁二醇溶解后，再加剩余的酵母菌滤液混合搅拌溶解完全，灭菌后，依次通过孔径为3um、1um、0.22um的滤芯过滤后即得本发明的产品。
2.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述发酵液中的酵母菌为酿酒酵母菌，且将所述酿酒酵母菌放入培养基中培养，其中发酵条件为：pH值范围5.0～7.0，发酵温度25～35℃，摇床速度100～250rpm，发酵时间1～3d；所述发酵用的培养基为蛋白胨1～3％，葡萄糖2～5％，磷酸二氢钾0.01～0.1％，七水硫酸镁0.01～0.1％，氯化钠0.1～1.0％。
3.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的枸桔果提取物，以甲醇为提取剂，料液比为1:2～8，50～70℃回流提取4～8小时，减压浓缩干后，加5～10倍浓缩粉末质量的10～20％的乙醇溶液溶解，加溶液等体积的二氯甲烷进行萃取，重复3～5次，收集上层液体，继续用液体等体积的乙酸乙酯进行萃取，重复3～5次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩干后，用固体粉末质量的2～5倍的乙醇清洗，过滤收集残留物，40～50℃烘干即得本发明需要的枸桔果提取物。
4.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的芦荟提取物，依次用自来水、去离子水将库拉索芦荟鲜叶反复冲洗干净、擦干，然后剔除边刺，将表皮从透明的凝胶表面剥离，用清水洗去凝胶表面的黄色汁液，将干净的凝胶切成小块，用组织搅拌机搅成匀浆，匀浆液离心(5000～20000r/min)5～20min后除去沉淀，得到芦荟凝胶汁，将凝胶汁在60～75℃下真空浓缩到原体积的30～50％，然后加入5～10倍体积高浓度乙醇(体积分数70～95％)，于2～4℃下醇沉过夜，将混合沉淀物按2000～5000r/min转速离心5～20min，收集沉淀物，冷冻干燥即得芦荟提取物。
5.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的洋甘菊提取物，是以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～3:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10～30，提取温度为50～70℃回流提取，减压浓缩掉乙醇，以AB-8树脂对洋甘菊中总黄酮进行纯化，上样质量浓度为1.0～2.0mg/mL，上样体积流量为0.5～2.0BV/h；洗脱剂用50～80％乙醇，体积流量为0.5～2.0BV/h，收集所需的洗脱液，浓缩干即为洋甘菊提取物。
6.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的积雪草提取物，是将积雪草粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～4:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:15～30，45～55℃超声辅助提取1～2h，60～75℃浓缩掉乙醇，壳聚糖絮凝法进行除杂，其中絮凝液的添加量为0.3～0.8％、絮凝温度为35～45℃、絮凝时间为2～3h，D-4020树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.4～1ml/min，60～75％乙醇，4～8ml/min，收集所需的洗脱液，浓缩干即得到积雪草提取物。
7.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的葡萄皮提取物，是将葡萄皮粉碎后，以体积比为乙醇：发酵液＝1:1～4:1的混合液作为提取剂，料液比1:10～20，回流提取，且温度为50～65℃，提取时间为4～8h，过滤收集滤液，减压浓缩，D-101树脂分离纯化，进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.1～1ml/min，40～65％乙醇，0.1～1.0ml/min，减压浓缩分离液，得到葡萄皮提取物。
8.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的马齿苋提取物，是将马齿苋粉碎，以体积比为乙醇：发酵液＝1:3～2:1的混合液作为提取剂，且料液比为1:10-30，用1000～2000MHz的微波进行提取1～2小时，过滤收集滤液，D-101型号大孔树脂分离纯化得到提取物，其中进样速度、洗脱剂浓度和洗脱速度分别是0.5～2ml/min，60～80％乙醇，0.5～2ml/min。
9.根据权利要求1所述的一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的制备方法，其特征在于：所述的银耳提取物，是以发酵液为溶剂，且料液比为1:40-60,95～100℃高温提取4～8h，趁热纱布过滤，降温至室温，依次用3um、1um纸板过滤，滤液70～85℃减压蒸馏到原滤液质量的五分之一～三分之一，收集浓缩液，加入其质量的10～20倍的95％乙醇进行醇沉，收集析出的固体，40～55℃烘干。
10.一种具有舒敏保湿功效的润肤组合物的应用，其特征在于：应用于化妆品，所述化妆品剂型包括膏霜、乳液、水剂、洁面泡沫。
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