CN113396331A - 心房颤动的评定中以及用于脑卒中预测的循环fgfbp-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1) - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于评定受试者的心房颤动的方法，所述方法包括以下步骤：测定来自所述受试者的样品中FGFBP‑1的量，以及将所述FGFBP‑1的量与参考量进行比较，由此评定心房颤动。此外，本发明涉及基于所述FGFBP‑1的量预测脑卒中的方法。

Description

心房颤动的评定中以及用于脑卒中预测的循环FGFBP-1(成纤 维细胞生长因子结合蛋白1)
技术领域
本发明涉及一种用于评定受试者的心房颤动的方法，所述方法包括以下步骤：测定来自所述受试者的样品中FGFBP-1的量，以及将所述FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此评定心房颤动。此外，本发明涉及基于所述FGFBP-1的量预测脑卒中的方法。
背景技术
心房颤动(AF)是心脏心律失常的最常见类型，并且是老年人群中最普遍的病症之一。心房颤动的特征是不规则的心脏跳动并且通常以短暂的异常跳动开始，该短暂的异常跳动会随着时间的推移增加并且可能成为永久性病症。估计270-610万美国人患有心房颤动，并且全球约有3300万人患有心房颤动(Chugh S.S.等人，Circulation 2014；129：837-47)。
心脏心律失常(诸如心房颤动)的诊断通常涉及确定心律失常的原因以及心律失常的分类。根据美国心脏病学会(ACC)、美国心脏协会(AHA)和欧洲心脏病学会(ESC)的心房颤动分类指南主要基于简单性和临床相关性。第一类别称为“首次检测到的AF”。此类心房颤动患者最初被诊断患有AF，并且可能出现或可能未出现先前未检测到的发作。如果首次检测到的发作在少于一周内自行停止，但随后出现另一次发作，则类别将变为“阵发性AF”。尽管此类心房颤动患者的发作持续长达7天，但在大多数阵发性AF的病例中，发作将在少于24小时内停止。如果发作持续超过一周，则将其分类为“持续性AF”。如果不能停止这种发作(即，通过电击心脏复律或药物心脏复律)并且持续时间超过一年，则将分类改变为“永久性AF”。心房颤动的早期诊断是高度期望的，因为心房颤动是脑卒中和全身性栓塞的重要风险因素(Hart等人，Ann Intern Med 2007；146(12)：857-67；Go AS等人，JAMA 2001；285(18)：2370-5)。脑卒中作为高收入国家中损失失能调整的寿命年数的原因和作为全球范围内的死亡原因而排在缺血性心脏病之后的第二位。为了降低脑卒中的风险，抗凝治疗似乎是最合适的治疗。
允许评定心房颤动和预测脑卒中的生物标记物是高度期望的。
Latini R.等人(J Intern Med.2011Feb；269(2)：160-71)测量了患有心房颤动的患者中的各种循环生物标记物(hsTnT、NT-proBNP、MR-proANP、MR-proADM、和肽素，以及CT-内皮素原-1)。
成纤维细胞生长因子结合蛋白1(FGFBP-1)属于成纤维细胞生长因子结合蛋白家族。FGFBP-1充当载体蛋白，该载体蛋白从细胞外基质储存中释放成纤维细胞结合因子(FGF)，从而增强FGF的促有丝分裂活性。FGFBP-1在组织修复、血管生成和肿瘤生长中起作用。
FGFBP-1在血管生成和肿瘤生长中的作用已由Tassi等人(Hypertension.2018；71：160-167)描述。Tomazewski等人描述了FGFBP1 mRNA水平与高血压之间的弱相关性(Journal of the American Society of Nephrology，2011，22(5)，pp 947-55)。但是，FGFBP-1尚未与心房颤动相关联。
需要评定心房颤动的可靠方法，包括诊断心房颤动，对心房颤动患者进行风险分层(诸如脑卒中的发生)以及对心房颤动严重程度的评定。此外，用于预测脑卒中的改进方法是高度期望的。
本发明的技术问题可以看作是提供满足上述需要的方法。本技术问题由权利要求书及下文所表征的实施例解决。
有利的是，在本发明的研究背景下发现，对来自受试者的样品中FGFBP-1的量的测定允许对心房颤动的改进评定。由于本发明，可以例如诊断受试者是否患有心房颤动或有患脑卒中的危险。
发明内容
本发明涉及用于评定受试者心房颤动的方法，该方法包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将所述生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将所述至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此评定心房颤动。
本发明进一步涉及辅助心房颤动的评定的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供来自受试者的至少一份样品，
b)在步骤a)中提供的所述至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
c)向医师提供关于测定的所述生物标记物FGFBP-1的量以及任选地关于测定的所述至少一种另外的生物标记物的量的信息，由此辅助所述心房颤动的评定。
此外，本发明设想了辅助心房颤动的评定的方法，该方法包括：
a)提供对所述生物标记物FGFBP-1的测定，以及任选地对选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的另外的生物标记物的至少一种另外的测定，以及
b)提供关于在心房颤动的评定中使用通过所述测定获得或可获得的测定结果的说明。
本发明还涵盖用于评定心房颤动的计算机实现的方法，该方法包括：
a)在处理单元处接收FGFBP-1的量的值，以及任选地接收选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量的至少一个另外的值，其中所述FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量已经在来自受试者的样品中测定，
b)通过所述处理单元，将在步骤(a)中接收到的一个或多个值与一个或多个参考值进行比较，以及
c)基于所述比较步骤b)评定心房颤动。
本发明进一步涉及预测受试者的脑卒中风险的方法，该方法包括以下步骤：
(a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
(b)评定所述受试者的临床脑卒中风险评分，以及
(c)基于步骤a)和b)的结果预测所述脑卒中风险。
本发明进一步涉及一种提高受试者的临床脑卒中风险评分的预测准确性的方法，该方法包括以下步骤
a)在来自所述受试者至少一份的样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，其中所述受试者具有已知的临床脑卒中风险评分，以及
b)将所述FGFBP-1的量和/或所述一种或多种包括利钠肽、ESM-1、ANGT2、IGFBP7的生物标记物的量的值与临床脑卒中风险评分相组合，由此提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
本发明进一步涉及试剂盒，该试剂盒包含与FGFBP-1特异性地结合的试剂和选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂。
此外，本发明涉及：
i)生物标记物FGFBP-1以及任选地选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物，和/或
ii)与FGFBP-1特异性地结合的至少一种试剂，以及任选地，选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂，
用于a)评定心房颤动，b)预测受试者的脑卒中风险，以及用于c)提高临床脑卒中风险评分的预测准确性的体外用途。
具体实施方式
本发明涉及用于评定受试者心房颤动的方法，该方法包括以下步骤：
a)在来自受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，由此评定心房颤动。
在根据本发明的方法的实施例中，该方法还进一步包括在步骤a)中测定来自受试者的样品中选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及在步骤b)中比较至少一种另外的生物标记物的量与参考量。
因此，本发明涉及用于评定受试者心房颤动的方法，该方法包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将所述生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将所述至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此评定心房颤动。
心房颤动(AF)的评定应基于比较步骤b)的结果。
因此，本发明优选地包括以下步骤：
a)在来自受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，以及
c)基于比较步骤b)的结果评定心房颤动。
根据本发明的方法包括基本上由上述步骤组成的方法或包括其他步骤的方法。此外，本发明的方法优选地是离体方法，更优选地是体外方法。此外，它还可以包括除上述明确提及的步骤之外的步骤。例如，其他步骤可涉及测定进一步的标记物和/或样品预处理或评估通过该方法获得的结果。该方法可以手动执行或由自动化辅助。优选地，步骤(a)、(b)和/或(c)可全部或部分地由自动化辅助，例如通过合适的机器人和感觉设备进行步骤(a)中的测定或步骤(b)中由计算机实现的计算。
根据本发明，应评定心房颤动。如本文所用，术语“评定心房颤动”优选地是指心房颤动的诊断，阵发性和持续性心房颤动之间的区分，与心房颤动相关的不良事件(诸如脑卒中)的风险的预测，应当接受心电描记术(ECG)的受试者的鉴别，或心房颤动的治疗的评定。
如本领域技术人员应理解的，根据本发明的评定通常不旨对于待测受试者是100％正确的。该术语优选地要求能够对受试者的具有统计显著性的部分进行正确的评定(诸如本文所述的治疗的诊断、区别、预测、鉴别或评定)。可以由本领域技术人员使用各种众所周知的统计评估工具(例如，确定置信区间、p值确定、学生t检验、Mann-Whitney检验等)在无需费力的情况下测定某一部分是否是统计上显著的。详情见Dowdy和Wearden，Statistics for Research，John Wiley&Sons，New York 1983。优选的置信区间为至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％。p值优选地为0.4、0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。
根据本发明，表述“心房颤动的评定”被理解为对于心房颤动的评定的辅助，并且因此被理解为对于心房颤动的诊断的辅助，对于区分阵发性和持续性心房颤动的辅助，对于预测与心房颤动相关的不良事件的风险的辅助，对于鉴别应接受心电描记术(ECG)的受试者的辅助，或被理解为对于评定心房颤动的治疗的辅助。原则上，最终诊断将由医师进行。
在本发明的优选实施例中，心房颤动的评定是心房颤动的诊断。因此，诊断出受试者是否患有心房颤动。
因此，本发明设想了用于诊断受试者的心房颤动的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此诊断出心房颤动。
在一个实施例中，上述方法包括以下步骤：
(a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
(b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此诊断出心房颤动。
优选地，与心房颤动的诊断方法相关的待测受试者是怀疑患有心房颤动的受试者。然而，还可以预期，先前已经诊断出受试者患有AF，并且可以通过实施本发明的方法来确认先前的诊断。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是在阵发性和持续性心房颤动之间进行区分。因此，确定受试者是否患有阵发性或持续性心房颤动。
因此，本发明设想了用于在受试者的阵发性和持续性心房颤动之间进行区分的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此在阵发性和持续性心房颤动之间进行区分。
在一个实施例中，上述方法包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此在阵发性和持续性心房颤动之间进行区分。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是对与心房颤动(例如脑卒中)相关的不良事件的风险的预测。因此，预测受试者是否处于所述不良事件的风险。
因此，本发明设想了用于预测受试者的与心房颤动相关的不良事件的风险的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此预测与心房颤动相关的不良事件的风险。
在一个实施例中，上述方法包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此预测与心房颤动相关的不良事件的风险。
设想到可以预测各种不良事件。待预测的优选不良事件是脑卒中。
因此，本发明特别考虑到预测受试者的脑卒中风险的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此预测脑卒中的风险。
前述方法可进一步包括基于步骤b)的比较结果来预测脑卒中的步骤c)。因此，步骤a)、b)、c)优选地如下所述：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)比较FGFBP-1的量与参考量，以及
c)基于步骤b)的比较结果来预测脑卒中
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是对心房颤动的治疗的评定。
因此，本发明设想了一种用于评定受试者的心房颤动的治疗的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此评定心房颤动的治疗。
在一个实施例中，上述方法包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此评定心房颤动的治疗。
优选地，与前述区分、前述预测和用于心房颤动的治疗的评定相关的受试者是患有心房颤动的受试者，特别是已知患有心房颤动(并且因此具有心房颤动的已知病史)的受试者。然而，关于前述预测方法，还设想受试者没有心房颤动的已知病史。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是鉴别应当接受心电描记术(ECG)的受试者。据此，鉴别受试者是否应当接受心电描记术。
该方法可包括以下步骤：
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此鉴别应当接受心电描记术的受试者。
优选地，与前述鉴别应接受心电描记术的受试者的方法有关的受试者是没有心房颤动病史的受试者。表述“没有心房颤动的已知病史”在本文别处定义。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是对受试者抗凝治疗的功效的评定。因此，评定了所述治疗的功效。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是对受试者脑卒中风险的预测。因此，预测本文所指的受试者是否处于脑卒中的风险中。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是鉴别受试者适合于施用至少一种抗凝药物或适合于增加至少一种抗凝药物的剂量。因此，评定受试者是否适合于所述施用和/或所述剂量增加。
在本发明的另一优选实施例中，心房颤动的评定是抗凝治疗的监测。因此，评定受试者是否对所述治疗有响应。
术语“心房颤动”(缩写为“AF”或“AFib”)在本领域中是众所周知的。如本文所用，该术语优选地指以心房不协调激活和随之导致心房机械功能恶化为特征的室上性快速心律失常。特别地，该术语指以快速且不规则的跳动为特征的不正常的心律。它涉及心脏的两个上腔室。在正常的心律中，窦房结产生的脉冲通过心脏传播，并引起心肌收缩和血液泵送。在心房颤动时，窦房结的规则电脉冲被无组织、快速的电脉冲所取代，该无组织、快速的电脉冲导致不规则的心跳。心房颤动的症状是心悸、晕厥、呼吸急促或胸痛。然而，大多数发作都没有症状。在心电图上，心房颤动的特征是用在振幅、形状和定时上变化的快速振荡或纤维波代替一致的P波，该振荡或纤维波与房室传导完整时的不规则、频繁的快速心室响应有关。
美国心脏病学会(ACC)、美国心脏病协会(AHA)和欧洲心脏病学会(ESC)提出了以下分类体系(参见Fuster V.等人，Circulation 2006；114(7)：e257-354，本文件的全部内容通过引用合并于此，参见例如文件中的图3)：首次检测到AF、阵发性AF、持续性AF和永久性AF。
所有有AF的人最初都属于被称为第一次检测到AF的类别。然而，该受试者可能有或可能没有先前未被检测到的发作。如果AF已持续超过一年，则受试者患有永久性AF，并且具体地讲，不会发生转换回窦性心律(或仅在医学干预下转换回窦性心律)。如果AF持续超过7天，则受试者患有持续性AF。该受试者可能需要药物或电干预来终止心房颤动。优选地，持续性AF在发作时发生，但心律失常不会自发(即在没有医学干预的情况下)转换回窦性心律。阵发性心房颤动优选地是指持续至多7天的间歇性心房颤动发作。在大多数阵发性AF的病例中，发作持续小于24小时。心房颤动的发作是自发终止的，即在没有医学干预的情况下。因此，虽然阵发性心房颤动的发作优选地自发终止，但是持续性心房颤动优选地不会自发终止。优选地，持续性心房颤动需要电击心脏复律或药物心脏复律来终止，或需要其他手术，诸如消融术(Fuster V.等人，Circulaion 2006；114(7)：e257-354)。持续性和阵发性AF均可能复发，由此通过ECG记录提供阵发性和持续性AF的区别：当患者发生2次或更多发作时，AF被认为是复发性的。如果心律失常自发终止，则将AF，特别是复发性AF认定为阵发性。如果AF持续7天以上，则被指定为持续性AF。
在本发明的优选实施例中，术语“阵发性心房颤动”定义为自发终止的AF发作，其中所述发作持续少于24小时。在替代实施例中，自发终止的发作期长达七天。
这里所指的“受试者”优选地是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养的动物(例如牛、绵羊、猫、犬和马)、灵长类动物(例如人和非人灵长类动物，诸如猴)、兔以及啮齿类动物(例如小鼠和大鼠)。优选地，该受试者是人受试者。
优选地，待测受试者为任何年龄，更优选地，待测受试者为50岁或更高年龄，更优选60岁或更高年龄，且最优选65岁或更高年龄。进一步地，设想待测受试者为70岁或更高年龄。
此外，设想待测受试者为75岁或更高年龄。同样，该受试者可能在50岁与90岁之间。
在评定心房颤动的方法的优选实施例中，待测受试者应患有心房颤动。因此，受试者应具有心房颤动的已知病史。因此，受试者在获得测试样品之前应经历过心房颤动发作，并且心房颤动的先前发作中的至少一次应通过例如ECG进行诊断。例如，设想到如果心房颤动的评定是阵发性和持续性心房颤动之间的区分，或者如果心房颤动的评定是预测与心房颤动相关的不良事件的风险，或者如果心房颤动的评定是对于心房颤动的治疗的评定，则受试者患有心房颤动。
在评定心房颤动的方法的另一优选实施例中，例如，如果心房颤动的评定是诊断心房颤动或鉴别应当接受心电描记术(ECG)的受试者，怀疑待测受试者患有心房颤动。
优选地，怀疑患有心房颤动的受试者是在实施用于评定心房颤动的方法之前已经显示心房颤动的至少一种症状的受试者。所述症状通常是短暂的并且可能在几秒钟内出现并且可能同样快速地消失。心房颤动的症状包括头晕、昏厥、呼吸短促，并且特别是心悸。优选地，受试者在获得样品之前的六个月内已显示心房颤动的至少一种症状。
替代地或另外地，怀疑患有心房颤动的受试者应当为70岁或更老的受试者。
优选地，怀疑患有心房颤动的受试者应没有心房颤动的已知病史。
根据本发明，没有心房颤动的已知病史的受试者优选地是先前未被诊断患有心房颤动的受试者，即在实施本发明的方法之前(具体而言在从受试者获得样品之前)。然而，受试者可能有或可能没有先前未诊断的心房颤动的发作。
优选地，术语“心房颤动”是指所有类型的心房颤动。因此，该术语优选地涵盖阵发性、持续性或永久性心房颤动。
然而，在本发明的实施例中，待测受试者不患有永久性心房颤动。在该实施例中，术语“心房颤动”仅是指阵发性和持续性心房颤动。
然而，在本发明的另一实施例中，待测受试者不患有阵发性和永久性心房颤动。在该实施例中，术语“心房颤动”仅是指持续性心房颤动。
当获得样品时，待测试的受试者可能经历或可能未经历心房颤动发作。因此，在评定心房颤动(诸如在心房颤动的诊断中)的优选实施例中，在采集样品时，受试者没有经历心房颤动发作。在该实施例中，当获得样品时，受试者应具有正常窦性心律(并且因此应当处于窦性心律)。因此，心房颤动的诊断是可能的，甚至在(暂时)不存在心房颤动的情况下。根据本发明的方法，本文所述的生物标记物的升高应在心房颤动发作后得以保留，从而提供对患有心房颤动的受试者的诊断。优选地，在实施本发明的方法之后(或者更精确地说在已经获得样品之后)约三天内、约一个月内、约三个月内或约6个月内诊断AF。在优选实施例中，在发作后约六个月内诊断心房颤动是可行的。在优选实施例中，在发作后约六个月内诊断心房颤动是可行的。因此，如本文提及的心房颤动的评定，特别是如本文提及的与心房颤动的评定相关的诊断、风险预测或区分优选地在心房颤动的最后一次发作之后约三天之后、更优选地约一个月之后、甚至更优选地约三个月之后、并且最优选约地六个月之后实施。因此，设想待测样品优选地在心房颤动的最后一次发作之后约三天之后、更优选地约一个月之后、甚至更优选地约三个月之后且最优选地约六个月之后获得。因此，心房颤动的诊断优选地还涵盖在获得样品之前优选地约三天内、更优选地约三个月内且最优选地约六个月内发生的心房颤动发作的诊断。
然而，还设想当获得样品时(例如关于脑卒中的预测)，受试者经历心房颤动的发作。
术语“样品”是指体液样品、分离细胞样品或组织或器官样品。体液样品可以通过众所周知的技术获得，并且包括血液、血浆、血清、尿液、淋巴液、痰、腹水，或任何其他身体分泌物或其衍生物的样品。组织或器官样品可以通过例如活检从任何组织或器官获得。分离细胞可以通过诸如离心或细胞分选等分离技术从体液或组织或器官中获得。例如，可以从表达或产生生物标记物的那些细胞、组织或器官中获得细胞、组织或器官样品。样品可以是冷冻、新鲜、固定(例如福尔马林固定)、离心和/或包埋(例如石蜡包埋)的等。在评定估样品中一种或多种生物标记物的量之前，细胞样品当然可以接受各种众所周知的收集后制备和贮存技术(例如核酸和/或蛋白质提取、固定、贮存、冷冻、超滤、浓缩、蒸发、离心等)。
在本发明的一个优选实施例中，样品是血液(即全血)、血清或血浆样品。血清是在使血液凝固后所获得的全血的液体级分。为了获得血清，通过离心去除血块并收集上清液。血浆是血液中无细胞的流体部分。为了获得血浆样品，将全血收集在抗凝处理过的试管(例如柠檬酸盐处理过的试管或EDTA处理过的试管)中。通过离心将细胞从样品中取出，并获得上清液(即血浆样品)。
如上所述，受试者在获得样品时可能处于窦性心律或可能患有AF节律发作。
根据本发明，应确定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白-1)的量。生物标记物在本领域是众所周知的。其他名称是FGFBP、HBP17、FGF-BP和FGF-BP1。FGFBP-1蛋白通过与成纤维细胞生长因子结合并增强其对靶细胞的生物学作用，在细胞增殖、分化和迁移中起关键作用。编码的蛋白质还可以作为血管生成转换分子在肿瘤生长中起作用，并且该基因的表达已经与几种类型的癌症相关，包括胰腺癌和结肠直肠腺癌(参见例如Beer等人，Oncogene 24：5269-5277(2005))。
在优选实施例中，测定了人FGFBP-1多肽的量。FGFBP-1的序列在本领域中是众所周知的。例如，可以经由Uniprot评定序列，请参见具有条目Q14512-1的序列。人FGFBP-1的前体长度为234个氨基酸，并包含短的N末端信号肽(氨基酸1至23)，该肽在翻译后被切割以释放成熟形式的FGFBP-1多肽(氨基酸24至234)。优选地，确定成熟形式，即加工形式的量。
术语“利钠肽”包括心钠素(ANP)型和脑钠素(BNP)型肽。因此，根据本发明的利钠肽包括ANP型和BNP型肽及其变体(参见例如，Bonow RO.等人，Circulation 1996；93：1946-1950)。
ANP型肽包括pre-proANP、proANP、NT-proANP和ANP。
BNP型肽包括pre-proBNP、proBNP、NT-proBNP和BNP。
前原肽(在pre-proBNP的情况下为134个氨基酸)包含短信号肽，其被酶促切割以释放原肽(在proBNP的情况下为108个氨基酸)。原肽进一步切割为N末端原肽(NT-原肽，在NT-proBNP的情况下为76个氨基酸)和活性激素(在BNP的情况下为32个氨基酸，在ANP的情况下为28个氨基酸)。
根据本发明的优选的利钠肽是NT-proANP、ANP、NT-proBNP、BNP。ANP和BNP是活性激素，并且具有比它们各自的非活性对应物NT-proANP和NT-proBNP更短的半衰期。BNP在血液中代谢，而NT-proBNP作为完整分子在血液中循环，并且因此在肾脏消除。
根据本发明的最优选的利钠肽是NT-proBNP和BNP，特别是NT-proBNP。如上面所简要讨论，如根据本发明所提及的人NT-proBNP是多肽，其优选地包含长度为76个氨基酸，对应于人NT-proBNP分子的N末端部分。人BNP和NT-proBNP的结构已经在现有技术中详细描述，例如WO 02/089657、WO 02/083913，以及Bonow RO.等人，New Insights into thecardiac natriuretic peptides.Circulation 1996；93：1946-1950。优选地，如本文所用的人NT-proBNP是如EP 0 648228B1中所公开的人NT-proBNP。
IGFBP-7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)是由内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌的30kDa模块化糖蛋白(Ono，Y.等人，Biochem Biophys Res Comm 202(1994)1490-1496)。优选地，术语“IGFBP-7”是指人IGFBP-7。蛋白质的序列在本领域中是众所周知的，并且例如可通过UniProt(Q16270，IBP7 HUMAN)或通过GenBank(NP_001240764.1)获得。生物标记物IGFBP-7的详细定义如WO2008/089994中所提供，该专利的全部内容以引用方式并入本文。IGFBP-7有两种同种型：同种型1和同种型2，它们是通过选择性剪接产生的。在本发明的一个实施例中，测量两种同种型的总量(关于序列，参见UniProt数据库条目(Q16270-1和Q16270-2))。
生物标记物内皮细胞特异性分子1(缩写为ESM-1)是本领域众所周知的。生物标记物通常也被称为endocan。ESM-1是分泌蛋白，其主要在人肺和肾组织的内皮细胞中表达。公共领域数据表明，甲状腺、肺和肾中也表达，但在心脏组织中也表达，参见例如蛋白Atlas数据库中ESM-1的条目(Uhlén M.等人，Science 2015；347(6220)：1260419)。该基因的表达受细胞因子调节。ESM-1是由20kDa成熟多肽和30kDa O-连接的聚糖链构成的蛋白聚糖(Bechard D等人，J Biol Chem 2001；276(51)：48341-48349)。在本发明的优选实施例中，在来自受试者的样品中测定人ESM-1多肽的量。人ESM-1多肽的序列是本领域众所周知的(参见例如Lassale P.等人，J.Bio1.Chem.1996；271：20458-20464)并且可例如经由Uniprot数据库评定，参见条目Q9NQ30(ESM1_HUMAN)。通过选择性剪接产生ESM-1的两种同种型，同种型1(具有Uniprot标识符Q9NQ30-1)和同种型2(具有Uniprot标识符Q9NQ30-2)。同种型1具有184个氨基酸的长度。在同种型2中，同种型1的氨基酸101至150缺失。氨基酸1至19形成信号肽(其可能被切除)。
在优选实施例中，测定ESM-1多肽的同种型1的量，即具有如UniProt登录号Q9NQ30-1下所示的序列的同种型1。
在另一优选的实施例中，测定ESM-1多肽的同种型2的量，即具有如UniProt登录号Q9NQ30-2下所示的序列的同种型2。
在另一优选的实施例中，测定ESM-1多肽的同种型1和同种型2的量，即总ESM-1。
例如，ESM-1的量可以用针对ESM-1多肽的氨基酸85至184的单克隆抗体(诸如小鼠抗体)和/或用山羊多克隆抗体测定。
生物标记物血管生成素-2(缩写为“Ang-2”，通常也称为ANGPT2)在本领域中是众所周知的。它是Ang-1和TIE2两者的天然存在的拮抗剂(参见例如Maisonpierre等人，Science 277(1997)55-60)。在没有ANG-1的情况下，该蛋白可诱导TEK/TIE2的酪氨酸磷酸化。在没有血管生成诱导因子(如VEGF)的情况下，ANG2介导的细胞基质接触的松动可诱导内皮细胞凋亡以及随之发生的血管退行。与VEGF协同作用，其可促进内皮细胞的迁移和增殖，从而作为允许的血管生成信号。人类血管生成素的序列在本领域中是众所周知的。Uniprot列出了血管生成素-2的三种同种型：同种型1(Uniprot标识符：O15123-1)、同种型2(标识符：O15123-2)和同种型3(O15123-3)。在一个优选实施例中，测定血管生成素-2的总量。总量优选地为复合和游离血管生成素-2的量之和。
术语“测定”如本文所述的生物标记物(诸如FGFBP-1或利钠肽)的量是指生物标记物的量化，例如使用本文别处描述的适当检测方法来测量样品中生物标记物的水平。术语“测量”和“测定”在本文中可互换使用。
在一个实施例中，生物标记物的量是通过以下方式来测定的：使样品与特异性地结合生物标记物的试剂接触，从而在该试剂与所述生物标记物之间形成复合物，检测所形成的复合物的量，并由此测量所述生物标记物的量。
本文提及的生物标记物(诸如FGFBP-1)可以使用本领域中一般已知的方法来检测。检测方法通常包括量化样品中生物标记物的量的方法(定量方法)。本领域技术人员通常已知以下方法中的何种适合于生物标记物的定性和/或定量检测。可以使用商购可得的Western和免疫分析，如ELISA、RIA、基于荧光和发光的免疫测定和邻近延伸测定法来方便地测定样品中的例如蛋白质。检测生物标记物的其他合适方法包括测量肽或多肽特有的物理或化学性质，诸如其精确的分子质量或NMR谱。所述方法包括，例如生物传感器、耦联到免疫测定的光学装置、生物芯片、分析装置(诸如质谱仪、NMR分析仪或色谱装置)。进一步地，方法包括基于微板ELISA的方法、全自动或机器人免疫测定(例如在ElecsysTM分析仪上可用)、CBA(例如在Roche-HitachiTM分析仪上可用的酶钴结合测定)和乳胶凝集测定(例如在Roche-HitachiTM分析仪上可用)。
对于本文所述的生物标记物蛋白的检测，可以使用这种测定形式的各种免疫测试技术，参见例如美国专利号4016043、4424279和4018653。这些技术包括非竞争性类型的单位点和双位点或“夹心”测定，以及传统的竞争性结合测定。这些测定还包括标记抗体与靶标生物标记物的直接结合。
采用电化学发光标签的方法是众所周知的。此类方法利用特殊金属复合物的借助于氧化实现激发态的能力，所述特殊金属复合物从该激发态衰变为基态，从而发出电化学发光。关于综述请参见Richter，M.M.，Chem.Rev.2004；104：3003-3036。
在一个实施例中，用于测量生物标记物的量的检测抗体(或其抗原结合片段)被钌化或铱化。因此，抗体(或其抗原结合片段)应包含钌标签。在一个实施例中，所述钌标签是联吡啶钌(II)复合物。或抗体(或其抗原结合片段)应包含铱标签。在一个实施例中，所述铱标签是如WO2012/107419中所公开的复合物。
在用于测定FGFBP-1的夹心测定的实施例中，该测定包括特异性地结合FGFBP-1的生物素化的第一单克隆抗体(作为捕获抗体)以及特异性地结合FGFBP-1的第二单克隆抗体(作为检测抗体)的钌化F(ab′)2片段)。两种抗体与样品中的FGFBP-1形成夹心免疫测定复合物。
在用于测定利钠肽的夹心测定的实施例中，该测定包括特异性地结合利钠肽的生物素化的第一单克隆抗体(作为捕获抗体)以及特异性地结合利钠肽的第二单克隆抗体(作为检测抗体)的钌化F(ab′)2片段)。两种抗体与样品中的利钠肽形成夹心免疫测定复合物。
测量多肽(诸如FGFBP-1或利钠肽)的量可优选地包括以下步骤：(a)使多肽与特异性地结合所述多肽的试剂接触，(b)(任选地)移除未结合的试剂，(c)测量结合的结合试剂的量，即在步骤(a)中形成的试剂的复合物。根据一个优选实施例，所述接触、移除和测量步骤可由分析器单元执行。根据一些实施例，所述步骤可由所述系统的单个分析器单元或由彼此可操作通信的多于一个分析器单元来执行。例如，根据一个特定实施例，本文所公开的所述系统可包括用于执行所述接触和移除步骤的第一分析器单元；以及第二分析器单元，所述第二分析器单元通过传输单元(例如，机械臂)可操作地连接到所述第一分析器单元，所述第二分析器单元执行所述测量步骤。
特异性地结合生物标记物的试剂(在本文中也称为“结合试剂”)可以共价或非共价地偶联到标签，从而允许检测和测量结合的试剂。可通过直接或间接方法进行标记。直接标记涉及将标签直接(共价或非共价)耦联到结合试剂。间接标记涉及二级结合试剂与第一结合试剂的结合(共价或非共价)。该二级结合试剂应特异性地与第一结合试剂结合。所述二级结合试剂可以与适当的标签耦联，并且/或者是三级结合试剂的与二级结合试剂结合的靶标(受体)。合适的二级和更高阶的结合试剂可包括抗体、二抗和众所周知的链霉亲和素-生物素体系(Vector Laboratories，Inc.)。结合试剂或底物也可以用本领域已知的一个或多个标签“标记”。此类标签可以是更高阶的结合试剂的靶标。合适的标签包括生物素、洋地黄毒苷、His标签、谷胱甘肽-S-转移酶、FLAG、GFP、myc标签、甲型流感病毒血凝素(HA)、麦芽糖结合蛋白等。在肽或多肽的情况下，该标签优选地位于N-末端和/或C-末端。合适的标签是可通过合适的检测方法检测到的任何标签。典型的标签包括金颗粒、乳胶珠粒、吖啶酸酯、鲁米诺、钌复合物、铱复合物、酶活性标签、放射性标签、磁性标签(“例如磁珠”，包括顺磁标签和超顺磁标签)和荧光标签。酶活性标签包括例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、荧光素酶，以及它们的衍生物。用于检测的合适底物包括二氨基联苯胺(DAB)、3，3′-5，5′-四甲基联苯胺、NBT-BCIP(4-硝基蓝四唑氯化物和5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐，可作为现成储备溶液从Roche Diagnostics购得)、CDP-StarTM(Amersham Bio-sciences)、ECFTM(Amersham Biosciences)。合适的酶-底物组合可产生有色反应产物、荧光或化学发光，所述有色反应产物、荧光或化学发光可根据本领域已知的方法(例如使用感光胶片或合适的摄像系统)来测定。对于酶反应的测量，上述给定的标准类似地适用。典型的荧光标记包括荧光蛋白(诸如GFP及其衍生物)、Cy3、Cy5、德克萨斯红、荧光素和Alexa染料(例如Alexa 568)。进-步的荧光标签可从Molecular Probes(Oregon)购得。同样，还考虑使用量子点作为荧光标签。放射性标签可以通过任何已知且适当的方法检测，所述方法为例如感光胶片或磷光成像仪。
多肽的量也可以优选地如下测定：(a)使包含如本文其他部分所述的多肽的结合试剂的固体支持物与包含所述肽或多肽的样品接触，以及(b)测量与支持物结合的肽或多肽的量。制造支持物的材料在本领域中是众所周知的，并且尤其包括商用柱材料、聚苯乙烯珠粒、乳胶珠粒、磁性珠粒、胶体金属颗粒、玻璃和/或硅片和表面、硝化纤维带、膜、片材、duracytes、反应盘的孔和壁、塑料管等。
在另一方面中，在测量形成的复合物的量之前，从结合试剂与至少一种标记物之间形成的复合物中移除样品。因此，在一个方面中，该结合试剂可固定在固体支持物上。在另一方面中，通过应用洗涤溶液，可以从固体支持物上形成的复合物中移除样品。
“夹心测定”是最有用和最常用的测定之一，包括夹心测定技术的许多变型。简单地说，在典型的测定中，未标记的(捕获)结合试剂被固定或可以固定在固体底物上，并且使待测样品与捕获结合试剂接触。在适当的孵育期后，添加和孵育用能够产生可检测信号的报告分子标记的第二(检测)结合试剂达足以允许形成结合试剂-生物标记物复合物的时间段，从而使时间足以形成结合试剂-生物标记物-标记的结合试剂的另一复合物。可将任何未反应的材料洗去，并且通过观察由与检测结合试剂结合的报告分子产生的信号来确定生物标记物的存在。结果可以通过简单观察可见信号来定性，或者可以通过与含有已知量的生物标记物的对照样品进行比较来量化。
典型夹心测定的孵育步骤可以根据需要和在适当时进行变化。此类变化包括例如同时孵育，其中将两种或更多种结合试剂和生物标记物共孵育。例如，将待分析的样品和标记的结合试剂同时添加到固定的捕获结合试剂中。也可以首先孵育待分析的样品和标记的结合试剂，然后添加结合到固相或能够结合到固相的抗体。
特异性结合试剂与生物标记物之间形成的复合物应与样品中存在的生物标记物的量成比例。应理解的是，要应用的结合试剂的特异性和/或敏感性性限定了样品中包含的能够被特异性地结合的至少一种标记物的比例程度。也可在本文其他地方找到关于可以如何进行测量的进一步细节。形成的复合物的量应转化为生物标记物的量，从而反映样品中真实存在的量。
术语“结合试剂”、“特异性结合试剂”、“分析物特异性结合试剂”、“检测剂”和“与生物标记物特异性地结合的试剂”在本文中可互换使用。优选地，它涉及这样的试剂，该试剂包含特异性地结合对应成纤维细胞生长因子结合蛋白生物标记物的结合部分。“结合试剂”、“检测剂”、“试剂”的实例是核酸探针、核酸引物、DNA分子、RNA分子、适体、抗体、抗体片段、肽、肽核酸(PNA)或化合物。优选的试剂是特异性地结合待测定生物标记物的抗体。本文的术语“抗体”以最广泛的含义使用，并且包括各种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的抗原结合活性(即其抗原结合片段)即可。优选地，该抗体是多克隆抗体(或其抗原结合片段)。更优选地，抗体是单克隆抗体(或来自其的抗原结合片段)。因此，如本文别处所述，设想使用在FGFBP-1的不同位置处结合的两种单克隆抗体(在夹心免疫测定中)。因此，将至少一种抗体用于测定FGFBP-1的量
在一个实施例中，至少一种抗体是小鼠单克隆抗体。在另一实施例中，至少一种抗体是兔单克隆抗体。在又一实施例中，抗体是山羊多克隆抗体。在又另一实施例中，抗体是绵羊多克隆抗体。
术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指结合对分子在它们没有与其他分子显著结合的条件下表现为彼此结合的结合反应。当提及蛋白质或肽作为生物标记物时，术语“特异性结合”或“特异性地结合”优选地指结合试剂以至少107M-1的亲和力(“缔合常数”Ka)与对应成纤维细胞生长因子结合蛋白生物标记物结合的结合反应。术语“特异性结合”或“特异性地结合”优选地是指对其靶分子具有至少108M-1或甚至更优选至少109M-1的亲和力。术语“特异的”或“特异性地”用于表示样品中存在的其他分子不显著地与特异于该靶分子的结合试剂结合。
在一个实施例中，根据本发明的方法是基于检测包含人FGFBP-1和非人或嵌合FGFBP-1特异性结合试剂的蛋白复合物。在这样的实施例中，本发明继续公开用于评定受试者的心房颤动的方法，该方法包括以下步骤(a)将来自所述受试者的样品与非人FGFBP-1特异性结合试剂一起孵育(b)测量在(a)中形成的FGFBP-1特异性结合试剂和FGFBP-1之间的复合物，以及(c)将测量的复合物的量与参考量进行比较。等于或高于参考量的复合物的量指示心房颤动的诊断(并且因此存在)，持续性心房颤动的存在，应当经历ECG的受试者，或处于不良事件的风险中的受试者。低于(或等于)参考量的复合物的量指示心房颤动的不存在，阵发性心房颤动的存在，不应当经历ECG的受试者，或未处于不良事件的风险中的受试者。
如本文所用的术语“量”包括本文提及的生物标记物(诸如FGFBP-1或利钠肽)的绝对量、所述生物标记物的相对量或浓度，以及与其相关或可从其导出的任何值或参数。此类值或参数包括来自通过直接测量从所述肽获得的所有具体物理或化学性质的强度信号值，例如质谱或NMR谱中的强度值。此外，所包含的是通过在本说明书其他地方指定的间接测量获得的所有值或参数，例如，响应于肽或从特异性地结合的配体获得的强度信号而从生物读出系统测定的响应量。应理解的是，与上述量或参数相关的值也可以通过所有标准数学运算获得。
如本文所用的术语“比较”是指将来自受试者的样品中的生物标记物(诸如FGFBP-1以及利钠肽，诸如NT-proBNP或BNP)的量与本说明书其他地方指定的生物标记物的参考量进行比较。应理解的是，如本文所用的比较通常指对应成纤维细胞生长因子结合蛋白参数或值的比较，例如，将绝对量与绝对参考量进行比较，而将浓度与参考浓度进行比较，或将从样品中的生物标记物获得的强度信号与从第一样品获得的相同类型的强度信号进行比较。可手动或计算机辅助进行比较。因此，可以由计算装置进行比较。例如，可以将来自受试者的样品中生物标记物的测定或检测量的值与参考量相互比较，并且可以由执行比较算法的计算机程序自动执行所述比较。执行所述评估的计算机程序将以适当的输出格式提供所需的评定。对于计算机辅助的比较，可将所测定的量的值与由计算机程序存储在数据库中的与适当参考值相对应的成纤维细胞生长因子结合蛋白的值进行比较。计算机程序可进一步评估比较的结果，即以适当的输出格式自动提供所需的评定。对于计算机辅助的比较，可将所测定的量的值与由计算机程序存储在数据库中的与适当参考值相对应的成纤维细胞生长因子结合蛋白的值进行比较。计算机程序可进一步评估比较的结果，即以适当的输出格式自动提供所需的评定。
根据本发明，将生物标记物FGFBP-1的量和任选地至少一种另外的生物标记物(诸如利钠肽)的量与参考值进行比较。因此，参考优选地为参考量。术语“参考量”被技术人员很好地理解。应当理解，参考量应允许本文所述的心房颤动评定。例如，关于诊断心房颤动的方法，参考量优选地是指这样的量，所述量允许将受试者分配到(i)患有心房颤动的受试者的组，或(ii)未患有心房颤动的受试者的组。可从要与测试样品一起(即同时或随后)分析的第一样品确定适当的参考量。
应当理解，将FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，而将至少一另外的生物标记物(诸如利钠肽)的量与所述至少一种另外的生物标记物(诸如利钠肽)的参考量进行比较。如果测定了两种或更多种标记物的量，则还可以设想基于两种或更多种标记物的量(诸如FGFBP-1的量和利钠肽的量)来计算综合得分。在随后的步骤中，将评分与参考评分进行比较。
原则上，可以基于给定生物标记物的平均值或均值，通过施加标准统计方法来计算如上文所指定的受试者群组的参考量。特别地，测试(诸如旨在诊断发生事件或未发生事件的方法)的准确性通过其接收器操作特性(ROC)而被最好地描述(特别地参见Zweig MH.等人，Clin.Chem.1993；39：561-577)。ROC曲线图是在观察到的整个数据范围内连续改变决策阈值所产生的所有敏感性对比特异性对的曲线。诊断方法的临床性能取决于其准确性，即其能够正确地将受试者分配到某一预后或诊断中。ROC曲线通过将对于适用于区分的整个阈值范围的敏感性对比1-特异性绘制成曲线而显示了两种分布之间的重叠。y轴上是敏感性，即真阳性分数，其被定义为真阳性测试结果数与真阳性测试结果数和假阴性测试结果数之积的比率。其仅从受影响的子组计算。x轴上是假阳性分数，即1-特异性，其被定义为假阳性结果数与真阴性结果数和假阳性结果数之积的比率。这是一个特异性指数，并且完全由未受影响的子组计算得出。由于真阳性分数和假阳性分数是完全分开计算的，所以通过使用来自两个不同子组的测试结果，ROC曲线与群组中事件的患病率无关。ROC曲线上的每一点代表与特定决策阈值相对应的成纤维细胞生长因子结合蛋白的敏感性/1-特异性对。有理想辨别力(两种结果分布没有重叠)的测试具有穿过左上角的ROC曲线，其中真阳性分数为1.0或100％(理想的敏感性)，并且假阳性分数为0(理想的特异性)。无区别(两个组的结果分布相同)的测试的理论曲线是从左下角到右上角的45°对角线。大多数曲线落在这两个极端之间。如果ROC曲线完全落到低于45°对角线，则可以通过将“阳性”的标准从“大于”逆转为“小于”或反之亦然来轻松纠正。定性地，曲线越接近左上角，则测试的总体准确度就越高。根据期望的置信区间，可以从ROC曲线推导出阈值，从而允许分别在适当的敏感性和特异性平衡下针对给定事件进行诊断。因此，优选地，通过建立如上所述的所述群组的ROC并由此导出阈值量，可以生成用于本发明方法的参考，即允许评定心房颤动的阈值。根据诊断方法所需的敏感性和特异性，ROC曲线允许推导得出合适的阈值。应理解的是，对于例如排除患有心房颤动的受试者(即排除)，期望最佳的敏感性，而对于评定为患有心房颤动的受试者(即确定)，设想到最佳特异性。在一个实施例中，根据本发明的方法允许预测受试者存在患有与心房颤动相关的不良事件的风险，例如心房颤动和/或脑卒中的发生或复发。
在优选实施例中，本文的术语“参考量”是指预定值。所述预定值应当允许评定心房颤动，且因此允许诊断心房颤动，区分阵发性和持续性心房颤动，预测与心房颤动相关的不良事件的风险，鉴别应当接受心电描记术(ECG)的受试者，或用于心房颤动的治疗的评定。应当理解，参考量可以基于评定的类型而不同。例如，用于AF的区分的FGFBP-1的参考量通常会高于用于AF的诊断的参考量。然而，技术人员将考虑到这一点。
如上所述，术语“评定心房颤动”优选地是指诊断心房颤动，区分阵发性和持续性心房颤动，预测与心房颤动相关的不良事件的风险，鉴别应当接受心电描记术(ECG)的受试者，或对于心房颤动的治疗的评定。在下文中，将更详细地描述根据本发明的方法的这些实施例。以上定义相应地适用。
诊断心房颤动(例如，持续性心房颤动)的方法
如本文所用，术语“诊断”意指评价如根据本发明的方法所提及的受试者是否患有心房颤动(AF)。
可以诊断所有类型的AF。优选地，心房颤动可以是阵发性，持续性或永久性AF。更优选地，诊断出受试者是否患有持续性心房颤动。最优选地，诊断出持续性心房颤动，已知该受试者不患有永久性AF。
受试者是否患有AF的实际诊断可以包括进一步的步骤，诸如诊断的证实(例如通过ECG，诸如Holter-ECG)。因此，本发明允许评定患者患有心房颤动的可能性。具有高于参考量的FGFBP-1量的受试者可能患有心房颤动，而具有低于(或等于)参考量的FGFBP-1量的受试者不太可能患有心房颤动。因此，在本发明的上下文中的术语“诊断”也涵盖帮助医师评定受试者是否患有心房颤动，特别是受试者是否患有持续性心房颤动
优选地，来自测试受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或与多种参考量)相比增加指示受试者患有心房颤动，和/或来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或多种参考量)相比减少指示受试者未患有心房颤动。
在优选实施例中，参考量，即参考量FGFBP-1，以及如果确定的话，至少一种另外的生物标记物的参考量，应允许区分患有心房颤动的受试者和不患有心房颤动的受试者。优选地，所述参考量是预定值。
在一个实施例中，根据本发明的方法允许诊断受试者是否患有心房颤动。优选地，如果FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)高于参考量，则受试者患有AF。在一个实施例中，如果FGFBP-1的量高于参考量的特定百分位数(例如，第99百分位数)上限参考限值(URL)，则受试者患有AF。
在诊断心房颤动的方法的实施例中，所述方法进一步包括基于诊断结果建议和/或开始心房颤动治疗的步骤。优选地，如果诊断出受试者患有AF，则推荐或开始治疗。用于心房颤动的优选疗法在本文其他地方公开(诸如抗凝治疗)。
区分阵发性和持续性心房颤动的方法
如本文所用，术语“分化”是指区分受试者的阵发性和持续性心房颤动。如本文所用的术语优选地包括差异地诊断受试者中的阵发性和持续性心房颤动。因此，根据本发明的方法允许评定具有心房颤动的受试者是否患有阵发性心房颤动或持续性心房颤动。实际区分可以包括进一步的步骤，诸如对区分结果进行证实。因此，在本发明的上下文中，术语“区分”还涵盖辅助医师区分阵发性AF和持续性AF。
优选地，来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或与多种参考量)相比增加指示受试者患有持续性心房颤动，和/或来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或多种参考量)相比减少指示受试者患有阵发性心房颤动。在两种AF类型(阵发性和持续性)中，与非AF受试者的参考量相比，FGFBP-1的量增加。
在优选实施例中，参考量应当允许区分患有阵发性心房颤动的受试者和患有持续性心房颤动的受试者。
在上述区分阵发性和持续性心房颤动的方法的实施例中，受试者不患有永久性心房颤动。
预测与心房颤动相关的不良事件的风险的方法
根据本发明的方法还设想了预测不良事件风险的方法。
在一个实施例中，本文所述的不良事件的风险可以是对于与心房颤动相关的任何不良事件的预测。优选地，所述不良事件选自心房颤动的复发(例如心脏复律后的心房颤动的复发)和脑卒中。因此，应预测受试者(患有心房颤动的受试者)将来患有不良事件(诸如脑卒中或心房颤动复发)的风险。
此外，设想与心房颤动有关的所述不良事件是尚无已知心房颤动病史的受试者发生心房颤动。
在特别优选的实施例中，预测脑卒中的风险。
因此，本发明的用于预测受试者的脑卒中风险的方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量与参考量进行比较，由此预测脑卒中的风险。
具体的见，本发明涉及预测受试者的脑卒中风险的方法，该方法包括以下步骤：
(a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
(b)将生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此预测脑卒中的风险。
优选地，如本文所用，术语“预测风险”是指评定受试者将来患有如本文所提及的不良事件(例如，脑卒中)的概率。典型地，预测受试者是存在患有所述不良事件的风险(并且因此风险升高)，或是不存在患有所述不良事件的风险(并且因此风险降低)。因此，本发明的方法允许区分存在患有所述不良事件的风险的受试者和不存在患有所述不良事件的风险的受试者。进一步地，设想根据本发明的方法允许区分具有降低、平均或升高风险的受试者。
如上所述，应预测在一定时间窗口内患有所述不良事件的风险(和概率)。在本发明优选实施例中，预测窗口为约三个月、约六个月或特别是约一年的时段。因此，预测短期风险。
在另一优选实施例中，预测窗口为约五年的时段(例如，用于预测脑卒中)。此外，预测窗口可为约六年(例如用于预测脑卒中)的时段。替代地，预测窗口可以是约10年。此外，设想预测窗口为1年至3年的时段。因此，预测在1至3年内患脑卒中的风险。此外，设想预测窗口为1年至10年的时段。因此，可以预测在1至10年内患脑卒中的风险。
优选地，从根据本发明的方法的完成起计算所述预测窗口。更优选地，从获得待测样品的时间点计算所述预测窗口。如本领域技术人员应理解的，风险的预测通常不意在对100％的受试者是正确的。但是，该术语要求可以以适当和正确的方式预测受试者的统计学显著部分。可以由本领域技术人员使用各种众所周知的统计评估工具(例如，确定置信区间、p值确定、学生t检验、Mann-Whitney检验等)在无需费力的情况下测定某一部分是否是统计上显著的。详情见Dowdy和Wearden，Statistics for Research，John Wiley&Sons，NewYork 1983。优选的置信区间为至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％。p值优选地为0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。
在优选实施例中，“预测患有所述不良事件的风险”的表述是指要通过根据本发明的方法分析的受试者被分配到存在患有所述不良事件的风险的受试者组中，或被分配到不存在患有所述不良事件(诸如脑卒中)的风险的受试者组中。因此，可以预测受试者是否存在患有所述不良事件的风险。如本文所用，“存在患有所述不良事件的风险的受试者”优选地具有升高的患有所述不良事件的风险(优选在预测窗口内)。优选地，与受试者群组中的平均风险相比，所述风险是升高的。如本文所用，“不存在患有所述不良事件风险的受试者”优选地具有降低的患有所述不良事件的风险(优选在预测窗口内)。优选地，与受试者群组中的平均风险相比，所述风险是降低的。存在患有所述不良事件的风险的受试者优选地具有至少20％或更优选地至少30％的患有所述不良事件(诸如心房颤动的复发或发生)的风险，优选地在约一年的预测窗口内。不存在患有所述不良事件的风险的受试者优选具有低于12％、更优选低于10％的患有所述不良事件的风险，优选地在一年的预测窗口内。
关于脑卒中的预测，存在患有所述不良事件的风险的受试者优选地具有至少10％或更优选地至少13％的患有所述不良事件的风险，优选地在约五年或特别是约六年的预测窗口内。不存在患有所述不良事件的风险的受试者优选地具有低于10％、更优选低于8％、或最优选低于5％的患有所述不良事件的风险，优选地在约五年或特别是约六年的预测窗口内。如果受试者未接受抗凝治疗，则风险可能更高。技术人员会考虑到这一点。
优选地，来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或与多种参考量)相比增加指示受试者存在患有与心房颤动相关的不良事件的风险，和/或来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或多种参考量)相比减少指示受试者不存在患有与心房颤动相关的不良事件的风险。
在优选实施例中，一种参考量(或多种参考量)应当允许区分存在患有如本文所提及的不良事件的风险的受试者和不存在患有所述不良事件的风险的受试者。优选地，所述参考量是预定值。
待预测的不良事件优选地是脑卒中。术语“脑卒中”在本领域是众所周知的。如本文所用，该术语优选地是指缺血性脑卒中，特别是指脑缺血性脑卒中。通过本发明的方法预测的脑卒中应是由于流向大脑或其部分的血流量减少所致，该血流量减少导致脑细胞供氧不足。特别地，由于脑细胞死亡，脑卒中会导致不可逆转的组织损伤。脑卒中的症状在本领域是众所周知的。例如，脑卒中症状包括面部、手臂或腿部突然麻木或无力，特别是在身体的一侧，突然意识混乱，说话或理解困难，一只或两只眼睛突然看不到，以及突然行走困难，头晕，失去平衡或协调。缺血性脑卒中可能是由动脉粥样硬化血栓形成或大脑主动脉栓塞、由凝血障碍或非肿瘤性血管疾病、或由导致总血流量减少的心脏缺血引起的。缺血性脑卒中优选地选自由动脉粥样硬化性血栓性脑卒中、心栓塞性脑卒中和腔隙性脑卒中组成的组。优选地，要预测的脑卒中是急性缺血性脑卒中，特别是心栓塞性脑卒中。心房颤动可引起心源性脑卒中(通常也称为栓塞性或血栓栓塞性脑卒中)。
优选地，所述脑卒中应与心房颤动相关。更优选地，脑卒中应由心房颤动引起。但是，还可以设想该受试者没有心房颤动的病史。
优选地，如果脑卒中与心房颤动的发作之间存在时间关系，则脑卒中与心房颤动相关。如果脑卒中是由心房颤动引起的，则更优选地，脑卒中与心房颤动相关。最优选地，如果脑卒中可以由心房颤动引起，则脑卒中与心房颤动相关。例如，心房颤动可引起心源性脑卒中(通常也称为栓塞性或血栓栓塞性脑卒中)。优选地，与AF相关的脑卒中可以通过口服抗凝作用来预防。同样优选地，如果待测试的受试者患有心房颤动和/或具有其已知病史，则认为脑卒中与心房颤动相关。同样，在一个实施例中，如果怀疑受试者患有心房颤动，则可以认为脑卒中与心房颤动相关。
术语“脑卒中”优选地不包括出血性脑卒中。
在预测不良事件(诸如脑卒中)的上述方法的优选实施例中，待测受试者患有心房颤动。更优选地，受试者具有心房颤动的已知病史。根据预测不良事件的方法，受试者优选地患有永久性心房颤动，更优选地患有持续性心房颤动，最优选地患有阵发性心房颤动。
在预测不良事件的方法的实施例中，在采集样品时，患有心房颤动的受试者经历心房颤动发作。在预测不良事件的方法的另一实施例中，当采集样品时，患有心房颤动的受试者不经历心房颤动的发作(因此应具有正常窦性心律)。此外，待预测其风险的受试者可以进行抗凝治疗。
在预测不良事件的方法的另一实施例中，待测受试者没有心房颤动的已知病史。特别地，设想该受试者不患有心房颤动。
根据本发明的方法可以辅助个性化医疗。在优选实施例中，预测受试者的脑卒中风险的方法进一步包括i)建议抗凝治疗的步骤，或ii)如果已确定受试者有脑卒中的风险则建议加强抗凝治疗的步骤。
在另一优选实施例中，用于预测受试者的脑卒中风险的方法进一步包括i)开始抗凝治疗的步骤，或ii)如果已(通过根据本发明的方法)确定该受试者有脑卒中风险则加强抗凝治疗。
如果测试受试者正在接受抗凝治疗，并且如果已经确定该受试者没有脑卒中的风险(通过本发明的方法)，则可以减少抗凝治疗的剂量。因此，可以建议减少剂量。通过减少剂量，可以减少患有副作用(诸如出血)的风险。
如本文所用的术语“建议”是指建立可应用于受试者的治疗方案。然而，应该理解的是该术语并不包括应用实际治疗。建议的治疗取决于通过本发明的方法提供的预后结果。
特别地，以下规定适用：
如果待测受试者未接受抗凝治疗，则如果已确定受试者有脑卒中风险，就建议开始抗凝治疗。因此，应开始抗凝治疗。
如果待测受试者已接受抗凝治疗，则如果已确定受试者有脑卒中风险，就建议加强抗凝治疗。因此，应加强抗凝治疗。
在一个优选实施例中，通过增加抗凝剂的剂量(即，当前施用的凝结剂的剂量)来加强抗凝治疗。
在特别优选的实施例中，通过增加用更有效的抗凝剂替换当前施用的抗凝剂来加强抗凝治疗。因此，建议更换抗凝剂。
据描述，与维生素K拮抗剂华法林相比，用口服抗凝剂阿哌沙班实现了高风险患者中的更好预防，如Hijazi等人，The Lancet 2016387，2302-2311(图4)所示。
因此，设想待测受试者是用维生素K拮抗剂(诸如华法林或双香豆素)治疗的受试者。如果已确定受试者有患脑卒中的风险(通过本发明的方法，建议用口服抗凝剂(特别是达比加群、利伐沙班或阿哌沙班)替代维生素K拮抗剂。根据用维生素K拮抗剂的治疗中止，开始用口服抗凝剂进行治疗。
鉴别应接受心电描记术(ECG)的受试者的方法
根据本发明方法的该实施例，应评定待使用生物标记物接受测试的受试者是否应当接受心电描记术(ECG)，即心电描记术评定。应当进行所述评定以用于诊断，即检测所述受试者中AF的存在或不存在。
如本文所用，术语“鉴别受试者”优选地是指使用涉及受试者的样品中的FGFBP-1的量(以及任选的至少一种另外生物标记物的量)而生成的信息或数据来鉴别受试者应当接受ECG。所识别的受试者患有AF的可能性增加。ECG评定被用作证实。
心电描记术(简称ECG)是通过合适的ECG记录心脏的电活动的过程。ECG设备记录由心脏产生的电信号，该电信号通过身体散布至皮肤。通过使测试受试者的皮肤与由ECG设备包含的电极接触来实现电信号的记录。获得记录的过程是非侵入性且无风险的。实施ECG以用于诊断心房颤动，即用于评价测试受试者中心房颤动的存在或不存在。在根据本发明的方法的实施例中，ECG设备是单引线设备(例如单引线手持式ECG设备)。在另一优选实施例中，ECG设备是12导联ECG设备，诸如Holter监视器。
优选地，来自测试受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或与多种参考量)相比增加指示受试者应当接受ECG，和/或来自受试者的样品中FGFBP-1的量(以及任选至少一种另外的生物标记物诸如ESM-1、Ang-2、IGFBP7和/或利钠肽的量)与一种参考量(或多种参考量)相比减少指示受试者不应当接受ECG。
在优选实施例中，参考量应允许区分应当接受ECG的受试者和不应当接受ECG的受试者。优选地，所述参考量是预定值。
用于评定心房颤动的治疗的方法
如本文所用，术语“评定心房颤动的治疗”优选地是指对旨在治疗心房颤动的治疗方法的评定。具体地讲，应评定治疗的功效。在优选实施例中，所述治疗是抗凝治疗。因此，本发明涵盖用于评定抗凝治疗的方法。
要评定的治疗可以是旨在治疗心房颤动的任何治疗方法。优选地，所述治疗选自由以下项组成的组：施用至少一种抗凝剂、节律控制、速率控制、心脏复律和消融。所述治疗是本领域公知的，并且例如综述于Fuster V等人，Circulation 2011；123：e269-e367，其据此全文以引用方式并入。
在一个实施例中，治疗是施用至少一种抗凝剂，即抗凝治疗。抗凝治疗优选地是旨在降低所述受试者抗凝风险的治疗。施用至少一种抗凝剂(即，抗凝治疗)应旨在减少或预防血液凝固和相关的脑卒中。
在优选实施例中，至少一种抗凝剂选自由以下项组成的组：肝素、香豆素衍生物(即维生素K拮抗剂)(特别是华法林或双香豆素)、口服抗凝剂(特别是达比加群(dabigatran)、利伐沙班(rivaroxaban)或阿哌沙班(apixaban))、组织因子途径抑制剂(TFPI)、抗凝血酶III、因子IXa抑制剂，因子Xa抑制剂、因子Va和VIIIa的抑制剂以及凝血酶抑制剂(抗IIa型)。因此，设想受试者服用上述药物中的至少一种。
在优选的实施例中，该抗凝剂是维生素K拮抗剂，诸如华法林或双香豆素。维生素K拮抗剂，诸如华法林或双香豆素价格较低，但是因为治疗不方便，繁琐，而且往往不可靠，并且治疗时间在治疗范围内波动，所以需要更好的患者依从性。NOAC(新的口服抗凝剂)包括直接因子Xa抑制剂(阿哌沙班、利伐沙班、达瑞沙班(darexaban)、依度沙班(edoxaban))、直接凝血酶抑制剂(达比加群)和PAR-1拮抗剂(沃拉帕沙(vorapaxar)、阿托帕沙(atopaxar))。
在另一优选实施例中，抗凝剂是口服抗凝剂，特别是阿哌沙班、利伐沙班、达瑞沙班、依度沙班、达比加群、沃拉帕沙或阿托帕沙。
因此，待测受试者可在测试时(即收到样品时)用口服抗凝剂或维生素K拮抗剂进行治疗。
在优选实施例中，对心房颤动的治疗的评定是对所述治疗的监测。在该实施例中，参考量优选地是较早获得的样品(即在步骤a中的测试样品之前获得的样品)中FGFBP-1的量。
任选地，除FGFBP-1的量外，还测定本文所述的至少一种另外的生物标记物的量。
因此，本发明涉及在受试者中监测心房颤动的治疗的方法，诸如监测抗凝治疗的方法，所述受试者优选地患有心房颤动，其中所述方法包括以下步骤：
(a)在来自受试者的第一样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，
(b)在来自受试者的第二样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，其中所述第二样品是在所述第一样品之后获得的，
(c)比较第一样品中的FGFBP-1的量与所述第二样品中的FGFBP-1的量，并且任选地比较第一样品中所述至少一种另外的生物标记物的量与所述第二样品中所述至少一种另外的生物标记物的量，从而监测治疗，诸如抗凝治疗。
在上述方法的实施例中，受试者患有心房颤动。在上述方法的另一实施例中，受试者不患有心房颤动。
如本文所用，术语“监测”优选地涉及评定如本文别处提及的治疗的效果。因此，监测治疗(诸如抗凝治疗)的功效。
前述方法可包括基于步骤c)中实施的比较步骤的结果监测治疗的进一步的步骤。如本领域技术人员应理解的，风险的预测通常不意在对100％的受试者是正确的。但是，该术语要求可以以适当和正确的方式预测受试者的统计学显著部分。因此，实际监测可以包括进一步的步骤，诸如证实。
优选地，通过实施根据本发明的方法，可以评定受试者是否对所述治疗有响应。如果受试者的病况在获得第一样品和第二样品之间改善，则受试者对治疗有响应。优选地，如果病况在获得第一样品和第二样品之间恶化，则受试者未对治疗有响应。
替代地，对抗凝治疗有响应的受试者优选地为在获得第一样品和第二样品之间脑卒中风险降低的受试者。对抗凝治疗无响应的受试者优选地为在获得第一样品和第二样品之间脑卒中风险增加或保持不变的受试者。例如，可通过评定受试者的临床脑卒中风险评分来确定脑卒中的风险是增加、减少还是保持不变。优选分数在本文其他地方公开。
优选地，在开始所述治疗之前获得第一样品。更优选地，在开始所述治疗之前的一周内，特别是两周内获得样品。然而，还考虑到可以在所述治疗开始之后(但是在获得第二样品之前)获得第一样品。在这种情况下，对正在进行的治疗进行监测。
因此，应在第一样品之后获得第二样品。应当理解，第二样品应在所述治疗开始后获得。
此外，特别预期的是，在获得第一样品之后的一段合理的时间之后获得第二样品。应当理解，本文提及的生物标记物的量不会立即改变(例如在1分钟或1小时内)。因此，在该缩写为中，“合理的”是指获得第一样品和第二样品之间的间隔，该间隔允许生物标记物进行调整。因此，优选地，在所述第一样品之后至少一个月，在所述第一样品之后至少三个月，或特别是至少六个月，获得第二样品。
优选地，第二样品中生物标记物(即FGFBP-1和任选利钠肽)的量与第一样品中生物标记物的量相比降低，并且更优选地显著降低，并且最优选地统计学显著降低，指示受试者对治疗有响应。因此，治疗是有效的。还优选地，与第一样品中的生物标记物的量相比，第二样品中的生物标记物的量没有FGFBP-1浓度的变化或增加，更优选地显著增加，最优选地统计学显著增加，指示受试者对治疗无响应。因此，治疗是无效的。
术语“显著的”和“统计学显著的”是本领域技术人员已知的。因此，本领域技术人员可以使用各种众所周知的统计学评估工具，不必再费周折地确定增加或降低是否是显著的或统计学显著的。例如，显著的增加或降低是增加或降低至少10％，特别是至少20％。
如果治疗降低了受试者心房颤动复发的风险，则通常认为该受试者对治疗有响应。如果治疗未降低该受试者心房颤动复发的风险，则认为该受试者对该治疗无响应。
在一个实施例中，如果受试者对治疗没有响应，则增加治疗强度。此外，设想如果受试者对治疗有响应，则治疗强度会降低。替代地，如果受试者对治疗有响应，则可以以相同强度继续治疗。
例如，可以通过增加所施用药物的剂量来增加治疗强度。例如，可以通过减少所施用药物的剂量来降低治疗强度。因此，有可能避免有害的不良副作用，诸如出血。如果以相同强度继续治疗，则施用的药物和剂量可能保持不变。关于增加抗凝治疗的强度，参见例如，本文其他地方进行的解释，例如与评定受试者抗凝治疗的功效有关的解释。
在另一优选实施例中，心房颤动治疗的评定是心房颤动治疗的指导。如本文所用，术语“指导”优选地涉及基于治疗期间对生物标记物即FGFBP-1的测定来调整治疗强度，诸如增加或减少口服抗凝剂的剂量。
在另又一优选实施例中，对心房颤动的治疗的评定是对心房颤动的治疗的分层。因此，应当鉴定有资格接受用于心房颤动的特定治疗的受试者。如本文所用，术语“分层”优选地涉及基于特定药物或程序的特定风险、鉴定的分子途径和/或预期功效来选择适当的治疗。根据检测到的风险，具体地与心律失常相关的症状最小或没有症状的患者将变得有资格控制心室率、心脏复律或消融，其否则仅接受抗血栓治疗。
上面给出的定义和解释在细节上作必要的修改后适用于以下(除非另有说明)。
本发明进一步涉及辅助评定心房颤动的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供来自受试者的至少一份样品，
b)在步骤a)中提供的所述至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
c)向医师提供关于测定的所述生物标记物FGFBP-1的量以及任选地关于测定的所述至少一种另外的生物标记物的量的信息，由此辅助所述心房颤动的评定。
医师应为主治医师，即要求测定生物标记物的医师。上述方法应帮助主治医师评定心房颤动。因此，该方法不包括以上结合评定心房颤动的方法所涉及的诊断、预测、监测、区分、鉴别。
上述样品获得方法的步骤a)不包括从受试者处提取样品。优选地，通过接收来自所述受试者的样品来获得该样品。因此，可以递送样品。
在一个实施例中，上述方法是辅助脑卒中预测的方法，所述方法包括以下步骤：
a)结合评定心房颤动的方法，特别是结合预测心房颤动的方法，提供如本文提到的来自受试者的至少一份样品，
b)确定生物标记物FGFBP-1的量和选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种生物标记物的量，以及
c)c)向医师提供关于测定的生物标记物FGFBP-1的量和任选地关于测定的至少一种另外的生物标记物的量的信息，从而辅助脑卒中的预测。
本发明进一步涉及一种方法，该方法包括：
a)提供对所述生物标记物FGFBP-1的测定，以及任选地对选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的另外的生物标记物的至少一种另外的测定，以及
b)提供关于在所述心房颤动的评定中使用通过所述测定获得或可获得的测定结果的说明。
前述方法的目的优选地是在辅助评定心房颤动。
使用说明应包含实施评定如上所述的心房颤动的方法的方案。此外，说明书应当含有FGFBP-1的参考量的至少一个值和任选地利钠肽的参考量的至少一个值。
“测定”优选地是适于测定生物标记物的量的试剂盒。术语“试剂盒”在下文中解释。例如，所述试剂盒应包含用于生物标记物FGFBP-1的至少一种检测剂以及任选地选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂。因此，可以存在一种至四种检测剂。一种至四种生物标记物的检测剂可在单个试剂盒或分开的试剂盒中提供。
通过所述测试获得或可获得的测试结果是一个或多个生物标记物的量的值。
在一个实施例中，步骤b)包括提供关于在脑卒中的预测(如本文别处所述)中使用通过所述一个或多个测试获得或可获得的测试结果的使用说明。
本发明进一步涉及用于评定心房颤动的计算机实现的方法，该方法包括
a)在处理单元处接收FGFBP-1的量的值，以及任选地接收选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量的至少一个另外的值，其中所述FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量已经在来自受试者的样品中测定，
b)通过所述处理单元，将在步骤(a)中接收到的一个或多个值与一个或多个参考值进行比较，以及
c)基于所述比较步骤b)评定心房颤动。
上述方法是计算机实现的方法。优选地，计算机实现的方法的所有步骤由计算机(或计算机网络)的一个或多个处理单元执行。因此，步骤(c)中的评定由处理单元实施。优选地，所述评定基于步骤(b)的结果。
如本文其他地方所述，步骤(a)中接收的一个或多个值应从测定来自受试者的生物标记物的量中得出。优选地，该值是生物标记物浓度的值。该值通常将由处理单元通过将值上载或发送到处理单元来接收。替代地，通过经由用户界面输入值，处理单元可以接收该值。
在前述方法的实施例中，步骤(b)中提出的一个或多个参考值是从存储器建立的。优选地，从存储器建立用于参考的值。
在本发明的上述计算机实现的方法的实施例中，步骤c)中进行的评定的结果经由显示器被提供，该显示器配置成用于呈现结果。
在本发明的上述计算机实现的方法的实施例中，该方法可包括将关于步骤c)中进行的评定的信息传送到受试者的电子医疗记录的进一步的步骤。
用于预测脑卒中的方法
如上所述，本文所指的生物标记物的测定允许预测脑卒中的风险，诸如(但不限于)与心房颤动相关的脑卒中的风险。
在本发明的基础研究中，进一步证明，FGFBP-1(以及如本文提到的另外的生物标记物)的测定允许提高受试者的临床脑卒中风险评分的预测准确性。因此，与FGFBP-1的测定或单独的临床脑卒中风险评分的测定相比，临床脑卒中风险评分的测定和FGFBP-1的测定的组合可以更可靠地预测脑卒中。
因此，预测脑卒中风险的方法可进一步包括将FGFBP-1的量与临床脑卒中风险评分相结合。基于FGFBP-1的量与临床风险评分的组合，预测测试受试者的脑卒中风险。
在前述方法的实施例中，该方法进一步包括将FGFBP-1的量与参考量进行比较。在这种情况下，比较结果与临床脑卒中风险评分结合在一起。
因此，本发明特别涉及一种预测受试者的脑卒中风险的方法，该方法包括以下步骤：
a)确定受试者样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1量的值与临床脑卒中风险评分结合起来，由此预测所述受试者的脑卒中风险。
根据该方法，设想受试者是具有已知临床脑卒中风险评分的受试者。因此，临床脑卒中风险评分的值是受试者已知的。
在优选实施例中，上述方法的步骤a)和b)如下：
a)在来自受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，其中受试者具有已知的临床脑卒中风险评分，以及
b)将FGFBP-1的量和/或一种或多种包括利钠肽、ESM-1、Ang2、IGFBP7的生物标记物的量的值与临床脑卒中风险评分相组合，由此预测所述受试者的脑卒中风险。
替代地，该方法可包括获得或提供临床脑卒中风险评分的值。
优选地，该值是数字。在一个实施例中，临床脑卒中风险评分是通过医师可用的基于临床的工具中的一种生成的。优选地，值是通过测定受试者的临床脑卒中风险评分的值而提供的。更优选地，该值是从受试者的患者记录数据库和病史获得的。因此，评分的值也可以使用该受试者的历史数据或公布的数据来确定。
根据本发明，将FGFBP-1(以及任选地另外的标记物)的量与临床脑卒中风险评分相结合。这意味着优选地，将FGFBP-1的量的值与临床脑卒中风险评分结合。因此，将这些值有效结合以预测受试者罹患脑卒中的风险。通过结合该值，可以计算单个值，该单个值本身可用于预测。
临床脑卒中风险评分在本领域中是众所周知的。例如，所述分数在Kirchhof P.等人，(European Heart Journal 2016；37：2893-2962)中进行了描述，其全部公开内容以引用方式并入本文。在一个实施例中，评分是CHA2DS2-VASc评分。在另一个实施例中，评分是CHADS2评分。(Gage BF.等人，JAMA，285(22)(2001)，pp.2864-2870)，以及ABC评分(HijaziZ.等人，Lancet 2016；387(10035)：2302-2311)。
根据本发明的方法还可包括评定临床风险评分的步骤。因此，可以通过以下方式预测患有脑卒中的风险：
(a)在来自受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
(b)评定所述受试者的临床脑卒中风险评分，以及
(c)基于步骤a)和b)的结果预测所述脑卒中风险。
用于提高临床脑卒中风险评分的预测准确性的方法
本发明进一步涉及一种提高受试者的临床脑卒中风险评分的预测准确性的方法，该方法包括以下步骤
a)确定样品中FGFBP-1的量，以及
b)将FGFBP-1的量的值与临床脑卒中风险评分结合，从而提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
该方法可包括进一步的步骤：c)基于步骤b)的结果提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
在优选实施例中，上述方法的步骤a)和b)如下：
c)在来自受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，其中受试者具有已知的临床脑卒中风险评分，以及
d)将所述FGFBP-1的量和/或所述一种或多种包括利钠肽、ESM-1、Ang2、IGFBP7的生物标记物的量的值与临床脑卒中风险评分相组合，由此提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
本文中给出的与评定心房颤动的方法有关的定义和解释，特别是预测不良事件(诸如脑卒中)的风险的定义和解释优选地同样适用于上述方法。例如，设想受试者是具有已知临床脑卒中风险评分的受试者。替代地，该方法可包括获得或提供临床脑卒中风险评分的值。
根据本发明，将FGFBP-1的量与临床脑卒中风险评分结合。这意味着优选地，将FGFBP-1的量的值与临床脑卒中风险评分结合。因此，将这些值有效结合，以提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
而且，本发明涉及以下各项的用途(特别是体外用途，例如在来自受试者的样品中)：
i)生物标记物FGFBP-1以及任选地选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物，和/或
ii)与FGFBP-1特异性地结合的至少一种试剂，以及任选地，选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂，
用于a)评定心房颤动，b)预测受试者的脑卒中风险，以及用于c)提高临床脑卒中风险评分的预测准确性的体外用途。
优选地，上述用途是体外用途。此外，该检测剂优选地为抗体，诸如单克隆抗体(或其抗原结合片段)。
本发明还涉及试剂盒。在一个实施例中，根据本发明的试剂盒包含与FGFBP-1特异性地结合的试剂以及选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂。
优选地，所述试剂盒适于实施根据本发明的方法，即用于评定心房颤动的方法。任选地，所述试剂盒包括用于实施所述方法的说明书。
如本文所用，术语“试剂盒”是指前述组分的集合，优选地，所述前述组分分开提供或在单个容器内提供。该容器还包括用于实施根据本发明的方法的说明书。这些说明书可以呈手册的形式，或者可以由计算机程序代码提供，所述计算机程序代码能够实施根据本发明的方法中提及的计算和比较，并且当在计算机或数据处理装置上执行时相应地确立评定或诊断。计算机程序代码可提供于数据存储介质或设备诸如光存储介质(例如，光盘)中或直接提供于计算机或数据处理设备中。此外，试剂盒可优选地包含用于校准目的之生物标记物FGFBP-1的标准量。在优选实施例中，试剂盒进一步包含用于校准目的的本文所述的至少一种另外的生物标记物(诸如利钠肽或ESM-1)的标准量
在一个实施例中，所述试剂盒用于评定心房颤动或用于预测体外风险。
附图说明
图1：在绘图研究中测量FGFBP1：探索性AFib图：有心房颤动病史的患者接受开胸手术并进行持续性AF或SR的心外膜绘图(绘图研究)。评定循环FGFBP1水平。左侧的箱线图显示患有SR的患者与患有persAF患者的FGFBP-1分布。右侧的ROC显示出区分患有SR的患者与患有persAF患者的FGFBP-1的诊断能力。
图2：预测脑卒中FGFBP1的风险(Beat AF研究)：图2显示，FGFBP1滴度升高与脑卒中风险增加有关。FGFBP1改善了多个临床风险评分的C-指数。图2显示由FGFBP-1值＜＝35与＞35NPX定义的两组的无脑卒中生存率。
实例
本发明仅通过以下实例来说明。无论如何，所述实例不得以限制本发明范围的方式进行解释。
实例
实例1：借助循环FGFBP-1评定AF
绘图研究与接受开胸手术的患者有关。在麻醉和手术之前获得样品。使用具有多电极阵列的高密度心外膜绘图(高密度绘图)对患者进行电生理学表征。
在尽可能达到最佳匹配(年龄、性别、共病)的前提下，已在16例持续性心房颤动患者和30例对照组受试者中测定了循环FGFBP-1水平。在绘图研究的样品中测定了FGFBP-1。
在30例有窦性心律(SR)的患者和16例持续性心房颤动(persAF)的患者中进行了测量。
图1显示，与SR患者相比，患有persAF的患者中FGFBP-1显著升高(AUC 0.70)。因此，FGFBP-1可用于辅助诊断persAF。FGFBP-1值升高表明persAF的概率更高。
实例2：脑卒中的预测
在关于具有记录的心房颤动的患者的多中心前瞻性注册登记研究中评定了循环FGFBP-1预测脑卒中发生风险的能力(Conen D.，Forum Med Suisse 2012；12：860-862)。使用Borgan(2000)中所述的分层病例群组设计测量了FGFBP-1。
对于在随访(“事件”)期间经历脑卒中的70位患者中的每位患者，均选择了1例匹配的对照组受试者。基于年龄、性别、高血压病史、心房颤动类型和心力衰竭病史(CHF病史)的人口统计学和临床信息匹配对照组受试者。
发生事件的67例患者和未发生事件的66例患者出现了可用的FGFBP-1结果。FGFBP-1是使用Olink平台测量的，因此，没有绝对浓度值可用并可报告。结果将以任意信号标度(NPX)报告。
为了定量FGFBP-1的单变量预后值，将比例危险模型与脑卒中预后一起使用。FGFBP-1的单变量预后表现通过FGFBP-1给出的预后信息的两种不同组合来评定。第一比例危险模型包括以中位数(35NPX)二值化的FGFBP-1，因此比较FGFBP-1低于或等于中位数的患者与FGFBP-1高于中位数的患者的风险。
第二比例危险模型包括原始的FGFBP-1水平，但转换为log2尺度。执行log2转换是为了实现更好的模型校准。
由于来自病例对照群组的先天比例危险模型的估计值存在偏差(由于病例与对照组受试者比例改变)，使用了加权比例危险模型。如Mark(2006)中所述，权重是基于每位患者选为病例对照群组的逆概率。
为了基于采用二分法的基线FGFBP-1测量(＜＝35NPX与＞35NPX)获得两组中绝对生存率的估计值，如Mark(2006)中所述创建Kaplan-Meier曲线的加权版本。为了评估FGFBP-1的预后值是否独立于已知的临床和人口统计学风险因素，计算了加权比例cox模型，该加权比例cox模型还包括以下变量：年龄、性别、CHF病史、高血压病史、脑卒中/TIA/血栓栓塞病史、血管疾病史和糖尿病史。
为了评定FGFBP-1改善脑卒中预后的现有风险评分的能力，通过FGFBP-1(经log2转换的)扩展CHADS2、CHA2DS2-VASc和ABC评分。通过创建包括FGFBP-1和相应风险评分作为自变量的分部危险模型来进行扩展。
将CHADS2、CHA2DS2-VASc和ABC评分的c指数与这些扩展模型的c指数进行比较。对于病例群组设置中的c指数的计算，使用Ganna(2011)中建议的c指数的加权版本。
结果
表1显示了两个单变量加权比例危险模型的结果，所述两个单变量加权比例危险模型包括经二值化或log2转换的FGFBP-1。在这两个模型中，发生脑卒中的风险与FGFBP-1的基线值之间的关联非常显著。
二值化的FGFBP-1的危险比意味着基线FGFBP-1＞＝35NPX的患者组的脑卒中风险比基线FGFBP-1＜35NPX的患者组的脑卒中风险高1.38倍。这在显示Kaplan-Meier曲线的图2中也可见，该曲线描绘了随着时间的推移直至脑卒中事件发生的生存概率。
然而，p值大于0.05，这可能表明在这种情况下二值化是次优的。
包括作为经log2转换的线性风险预测因子的FGFBP-1的比例危险模型的结果表明，经log2转换的值FGFBP-1与脑卒中风险成比例。危险比2.67可以解释为FGFBP-1增加2倍与脑卒中风险增加2.67有关。
Figure GDA0003169562330000441
表1：包括经二值化和经log2转换的FGFBP-1的单变量加权比例危险模型的结果。
表2显示了包括FGFBP-1(经log2转换的)的比例危险模型与临床和人口统计学变量相结合的结果。这清楚地表明，如果调整相关临床和人口统计学变量的预后效果，FGFBP-1的预后效果保持稳定。
Figure GDA0003169562330000442
表2：包括FGFBP-1及相关的临床和人口统计学变量的多变量比例危险模型。
表3显示了加权比例危险模型的结果，该加权比例危险模型将CHADS2评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合。此外，在该模型中，FGFBP-1可将预后信息添加到CHADS2评分中。
Figure GDA0003169562330000451
表3：将CHADS2评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合的加权比例危险模型
表4显示了加权比例危险模型的结果，该加权比例危险模型将CHA2DS2-VASc评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合。此外，在该模型中，FGFBP-1可将预后信息添加到CHA2DS2-VASc评分中。
Figure GDA0003169562330000452
表4：将CHA2DS2-VASc评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合的加权比例危险模型
表5显示了加权比例危险模型的结果，该加权比例危险模型将ABC评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合。此外，在该模型中，FGFBP-1可将预后信息添加到风险评分中。
Figure GDA0003169562330000453
表5：将ABC评分与FGFBP-1(经log2转换的)相结合的加权比例危险模型
表6显示了关于病例群组选择的以下各项的估计c指数：单独FGFBP-1、CHADS2、CHA2DS2-VASc、ABC评分，以及将CHADS2、CHA2DS2-VASc、ABC评分与FGFBP-1(log2)相结合的加权比例危险模型。
可以看出，添加FGFBP-1可改善所有三种风险模型的c指数。CHADS2、CHA2DS2-VASc、ABC评分分别提高了0.040、0.025和0.042。
表6显示了关于病例群组选择的以下各项的估计c指数：单独NTproBNP、单独ESM-1、单独Ang-2、单独IGFBP-7、CHA2DS2-VASc评分，以及将CHA2DS2-VASc评分与NTproBNP(log2)、与ESM-1(log2)、与ANG-2(log2)、与IGFBP-7(log2)相结合的加权比例危险模型。可以看出，所有生物标记物的添加都改善了CHA2DS2-VASc评分的c指数。对于NTproBNP、ESM-1、Ang-2、IGFBP-7，CHA2DS2-VASc评分提高0.002、0.064、0.036和0.006。
在这种情况下，有趣的是，FGFBP1与既定的标记物(NTproBNP和ChadsVasc)以及与ESM-1仅具有低相关性：a)FGFBP1与NTproBNP相关系数＝0.04，b)FGFBP1与ESM1相关系数＝0.31，c)FGFBP1与CHADsVASc.相关系数＝0.05。这些数据表明，FGFBP1提供了补充信息，并且与单独的每种标记物相比，FGFBP1和/或NTproBNP和/或ESM1和/或CHADsVASc标记物的组合可提供对处于脑卒中高风险的患者的改良检测。
C-指数
FGFBP-1单变量 0.609
CHADS<sub>2</sub> 0.650
CHADS<sub>2</sub>+FGFBP-1 0.690
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc 0.674
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc+FGFBP-1 0.698
ABC评分 0.648
ABC评分+FGFBP-1 0.690
NTprobNP单变量 0.651
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc+NTproBNP 0.676
ESM-1单变量 0.708
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc+ESM-1 0.738
Ang-2单变量 0.696
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc+Ang-2 0.710
IGFBP-7单变量 0.652
CHA<sub>2</sub>DS<sub>2</sub>-VASc+IGFBP-7 0.680
表6：FGFBP-1、ABC、CHADS2和CHA2DS2-VASc评分的C指数以及它们与FGFBP-1的组合。ESM-1、NTproBNP、IGFBP-7、Ang-2、CHA2DS2-VASc评分的C指数以及它们与ESM-1、NTproBNP、IGFBP-7、Ang-2的组合。
病例研究
了解和减少在没有心房颤动的患者中也有缺血性脑卒中风险的兴趣也越来越高(Yao X等人，Am Heart J.2018；199：137-143)。例如，通过鉴定这些脑卒中风险高的患者并将其纳入口服抗凝药物研究，预测脑卒中风险对于建立最佳治疗策略至关重要。例如，CHA2DS2-VASc评分还可以预测没有心房颤动但绝对事件发生率较低的患者中缺血性脑卒中的发生率(Mitchell LB等人，Heart.2014；100：1524-30)。因此，不那么清楚的是，这些未出现心房颤动的患者是否以及在达到什么CHA2DS2-VASc评分时应接受口服抗凝(OAC)剂并且以什么剂量接受口服抗凝剂，使得生物标记物诸如FGFBP-1有助于评定对治疗的需要和OAC的有效性。
76岁女性高血压患者，无心房颤动病史，出现窦性心律。在从患者获得的EDTA血浆样品中测定FGFBP-1。CHA2DS2-VASc评分的临床信息(高龄和高血压)表明存在一定的脑卒中风险，此外FGFBP-1值高于参考值。滴度升高指示脑卒中风险高。结果，允许对患者进行抗凝治疗。
无心房颤动病史的65岁男性患者要求在医生办公室进行检查。存在窦性心律，但可诊断为结构性心脏病。由于脑卒中的病史和较高的CHA2DS2-VASc总评分，该患者已接受低剂量的直接口服抗凝治疗。为了确定当前的脑卒中风险并得出最终治疗改变，在从患者获得的血清样品中测量了FGFBP-1。观察到的FGFBP-1值高于参考值。升高的FGFBP-1滴度和其他风险参数(脑卒中病史)指示较高的脑卒中残留风险高于出血风险(根据其他临床信息评定)。结果，增加了抗凝治疗的剂量。
68岁的肥胖女性患者，患有糖尿病和心力衰竭，射血分数降低，出现呼吸短促的急性症状。在先前的就诊中，患者没有心房颤动病史。根据高的CHA2DS2-VASc总风险评分，即使没有AFib，医师也决定开始口服抗凝作用(低剂量)。在抗凝发作之前和之后测定FGFBP-1水平。患者现在想知道抗凝治疗是否有效并且仍然必要。为了指定当前的脑卒中风险，在从患者获得的EDTA样品中测定FGFBP-1。与治疗开始相比，观察到的FGFBP-1值低于参考值并且更低。降低的FGFBP-1滴度指示有效的抗凝治疗。因此，维持抗凝治疗。

Claims (15)

1.一种用于评定受试者心房颤动的方法，所述方法包括以下步骤
a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
b)将所述生物标记物FGFBP-1的量与FGFBP-1的参考量进行比较，以及任选地，将所述至少一种另外的生物标记物的量与所述至少一种另外的生物标记物的参考量进行比较，由此评定心房颤动。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品是血液、血清或血浆样品。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者是人。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述心房颤动的评定是心房颤动的诊断。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述心房颤动的诊断是持续性心房颤动的诊断。
6.根据权利要求4所述的方法，其中FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量高于所述参考量指示受试者患有心房颤动，和/或其中FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量低于(或等于)所述参考量指示受试者未患有心房颤动。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述心房颤动的评定是对与心房颤动相关的不良事件的风险的预测，例如，其中所述与心房颤动相关的不良事件是脑卒中。
8.根据权利要求7所述的方法，其中FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量高于所述参考量指示受试者存在患有与心房颤动相关的不良事件的风险，和/或其中FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量低于(或等于)所述参考量指示受试者不存在患有与心房颤动相关的不良事件的风险。
9.一种用于预测受试者的脑卒中风险的方法，所述方法包括以下步骤：
(a)在来自所述受试者的至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
(b)评定所述受试者的临床脑卒中风险评分，以及
(c)基于步骤a)和b)的结果预测所述脑卒中风险。
10.一种用于提高受试者的临床脑卒中风险评分的预测准确性的方法，所述方法包括以下步骤
a)在来自所述受试者至少一份的样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2(血管生成素2)和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，其中所述受试者具有已知的临床脑卒中风险评分，以及
b)将所述FGFBP-1的量和/或所述一种或多种包括利钠肽、ESM-1、ANGT2、IGFBP7的生物标记物的量的值与临床脑卒中风险评分相组合，由此提高所述临床脑卒中风险评分的预测准确性。
11.一种辅助心房颤动的评定的方法，所述方法包括以下步骤：
a)提供来自受试者的至少一份样品，
b)在步骤a)中提供的所述至少一份样品中，测定生物标记物FGFBP-1(成纤维细胞生长因子结合蛋白1)的量，以及任选地，测定选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量，以及
c)向医师提供关于测定的所述生物标记物FGFBP-1的量以及任选地关于测定的所述至少一种另外的生物标记物的量的信息，由此辅助所述心房颤动的评定。
12.一种用于辅助心房颤动的评定的方法，所述方法包括：
a)提供对所述生物标记物FGFBP-1的测定，以及任选地对选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的另外的生物标记物的至少一种另外的测定，以及
b)提供关于在所述心房颤动的评定中使用通过所述测定获得或可获得的测定结果的说明。
13.一种用于评定心房颤动的计算机实现的方法，所述方法包括
a)在处理单元处接收FGFBP-1的量的值，以及任选地接收选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物的量的至少一个另外的值，其中所述FGFBP-1的量以及任选地所述至少一种另外的生物标记物的量已经在来自受试者的样品中测定，
b)通过所述处理单元，将在步骤(a)中接收到的一个或多个值与一个或多个参考值进行比较，以及
c)基于所述比较步骤b)评定心房颤动。
14.一种试剂盒，所述试剂盒包含与FGFBP-1特异性地结合的试剂和选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂。
15.i)生物标记物FGFBP-1以及任选地选自由利钠肽、ESM-1(Endocan)、Ang2和IGFBP7(胰岛素样生长因子结合蛋白7)组成的组的至少一种另外的生物标记物，和/或
ii)与FGFBP-1特异性地结合的至少一种试剂，以及任选地，选自由以下项组成的组的至少一种另外的试剂：与利钠肽特异性地
结合的试剂、与ESM-1特异性地结合的试剂、与Ang2特异性地结合的试剂以及与IGFBP7特异性地结合的试剂，
用于a)评定心房颤动，b)预测受试者的脑卒中风险，以及用于c)提高临床脑卒中风险评分的预测准确性的体外用途。
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