CN1133884A - 一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术领域。一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺。该工艺采用饲料酵母、豆饼粉、玉米粉、鱼粉、CaCO、KCl制备发酵培养基，变温变风量通气搅拌发酵，发酵液毒力可达到4500-5000IU(PX)/mg，采用本工艺发酵，降压生产成本，稳定产品质量，缩小发酵液毒力效价波动范围，缩短发酵时间，有效排除噬菌体干扰。
Description
本发明涉及一种Bt菌液体深层发酵工艺，属生物技术领域。Bt菌属于一种微生物，国内外已广泛用于农作物及林、果、蔬菜和仓库害虫的防治。提高发酵水平，降低生产成本是进一步推广应用的关键。目前发达国家采用的工艺，发酵液效价可达到3000IU/mg (见国外生防P185)。我国八·五攻关取得重大进展，发酵水平已能达到2000-3000IU/mg(见国家八·五攻关总结)，但波动范围过大，毒力不稳定。
本发明的目的是要提供一种Bt液体深层发酵工艺，采用本工艺，可显著提高发酵液毒力效价，选用优良菌种发酵，发酵毒力效价可达到4500-5000IU(PX)/mg；发酵液毒力效价波动范围控制在20％以内；缩短发酵周期，有效地抗噬菌体干扰。
本发明的目的是这样实现的。用饲料酵母、豆饼粉、玉米粉、鱼粉、碳酸钙、氯化钾、豆油或其它消泡剂配制发酵培养基，经高温蒸汽消毒后降温至35℃接种，变温变风量搅拌通气发酵28-35小时，80％芽孢与伴孢晶体分离，90％以上芽孢成熟为发酵终点。发酵液经毒力检测后按行业标准要求，调配加工成粉剂或液剂。
下面结合实例对本发明作进一步说明。
1、配料：鱼粉100-150kg，酵母粉60-70kg，玉米粉280-350kg，豆饼粉50-80kg，加水7600kg，调PH至7.5，加入0.3％碳酸钙，0.1％氯化钾，0.15％豆油，打入12立方米发酵罐，夹层或列管通蒸汽预热至80℃后，罐内直接通入蒸汽，维持0.15mPa搅拌消毒40分钟。
2、冷却至35℃接种，通气搅拌发酵。发酵采用变温、变风量发酵，温度变化过程是：
0-5小时 34±1℃
5-8小时 31±1℃
8-13小时 28±1℃
13-15小时 32±1℃
15小时后 34±1℃
根据各项参数确定最大通气量为245立方米/小时，根据最大通气量确定风量变化过程是：
0-2小时 80立方米/小时
2-5小时 120立方米/小时
5-7小时 150立方米/小时
7-9小时 220立方米/小时
9小时以后 245立方米/小时
发酵28-29小时取样镜检，80％芽孢与伴孢晶体分离，90％芽孢分化成熟，停止发酵，泵入后加工处理车间。
3、加入3％二甲苯，0.3％农孔-600，充分搅拌后取样生测，经生测毒力效价为4800IU(PX)/mg，加入2120kg自来水，充分搅拌后混匀，配制成4000IU(PX)/mg药液，再进行其它后处理，装瓶，即得毒力效价为4000IU(PX)/mg乳剂成品。
Claims (4)
1、一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺，包括配料、消毒、冷却、接种，发酵及风量和温度控制，生测步骤。其特征在于采用饲料酵母、豆饼粉、玉米粉、鱼粉、碳酸钙、氯化钾作为基本原料按比例配制培养基；在发酵过程中采用变风量、变温条件。
2、根据权利要求1所述的Bt液体深层发酵工艺，其特征是用饲料酵母、豆饼粉、玉米粉、鱼粉、碳酸钙、氯化钾按以下要求配制发酵培养基。
(1)总固形物含量为4-9.5％
(2)饲料酵母用量∶豆饼粉用量∶玉米粉用量∶鱼粉用量＝1.0∶1.0-1.8∶4.0-6.0∶3.0-5.0
(3)培养基中碳酸钙含量为0.2-0.3％，氯化钾含量为0.05-0.1％
(4)碳氮比为3.5-6.5∶1.0
3、根据权利要求1所述的Bt液体深层发酵工艺，其特征是采用变温发酵，温度与发酵时间的对应关系是：
0-4±1小时 34±1℃
4±1-8±2小时 31±1℃
8±2-13±2小时 28±1℃
13±2小时-15±1小时 32±1℃
15±1小时 34±1℃
4、根据权利要求1所述Bt液体深层发酵工艺，其特征是采用变风量发酵。发酵前要根据各项参数确定最大通气量Vgz，最大通气量Vgz的计算公式是：0.00531Vgz＝πR2H＋πR2L－Vm＋VF＋0.667β(1＋P)[VT－R2π(H＋L)]
式中，R：发酵罐半径(米)
Vgz：最大通气量(立方米/小时)
Vm.培养基体积(立方米)
VF：下封头体积(立方米)
P：发酵罐内压(公斤/平方厘米)
VT：消沫器以下发酵罐体积，如无消沫器，则为罐全体积(立方米)
H：上档搅拌器园盘距罐筒体下边缘垂直距离(米)
β：泡沫密度系数(吨/立方米)，与消沫剂性质及用量和培养基性质相关。风量与发酵时间的对应关系是
0-2±1小时 1/3Vgz
2±1-4±1小时 1/2Vgz
4±1-7±1小时 3/5Vgz
7±1-9±1小时 8/9Vgz
9±1小时后 1Vgz
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 96100784 CN1133884A (zh) | 1996-02-08 | 1996-02-08 | 一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺 |
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| CN 96100784 CN1133884A (zh) | 1996-02-08 | 1996-02-08 | 一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺 |
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| Publication Number | Publication Date |
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| CN1133884A true CN1133884A (zh) | 1996-10-23 |
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ID=5116738
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| CN 96100784 Pending CN1133884A (zh) | 1996-02-08 | 1996-02-08 | 一种苏云金杆菌(Bt)液体深层发酵工艺 |
Country Status (1)
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|---|---|
| CN (1) | CN1133884A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101225404B (zh) * | 2008-01-25 | 2010-12-29 | 华东理工大学 | 一种用于微生物发酵的复合有机氮源 |
| CN109593680A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-04-09 | 武汉科诺生物科技股份有限公司 | 一种苏云金杆菌液体发酵培养基及其菌粉和油悬剂 |
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1996
- 1996-02-08 CN CN 96100784 patent/CN1133884A/zh active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101225404B (zh) * | 2008-01-25 | 2010-12-29 | 华东理工大学 | 一种用于微生物发酵的复合有机氮源 |
| CN109593680A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-04-09 | 武汉科诺生物科技股份有限公司 | 一种苏云金杆菌液体发酵培养基及其菌粉和油悬剂 |
| CN109593680B (zh) * | 2018-12-26 | 2022-02-22 | 武汉科诺生物科技股份有限公司 | 一种苏云金杆菌液体发酵培养基及其菌粉和油悬剂 |
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| PB01 | Publication | ||
| C01 | Deemed withdrawal of patent application (patent law 1993) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |