CN113372360A - 一种新型的他克莫司粗品提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种新型的他克莫司粗品提取方法，所述方法包括：取他克莫司菌丝体浸泡液，浓缩将有机溶剂除去，加入表面活性剂将油状物和他克莫司分离，使他克莫司从油状物中沉淀出来。本发明涉及的他克莫司粗体方法解决了他克莫司粗品难以提取的问题，得到较高含量的他克莫司固体。本发明操作简单，设备简易，成本低，对环境友好，便于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型的他克莫司粗品提取方法，通过非常简易的方法，将油性物质从他克莫司浸泡液中分离出去，得到他克莫司粗品固体，属于生物工程技术领域。
背景技术
他克莫司，又名FK-506，化学名[3S-[3R*[E(1S*,3S*,4S*)],4S*,5R*,8S*,9E,12R*,14R*,15S*,16R*，18S*,19S*,26aR*]]-5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-十六氢-5,19-二羟基-3-]2-(4-羟基-3-甲氧基环己基)-1-甲基乙烯基]-14，16-二甲氧基-4,10,12,18-四甲基-8-(2-丙烯基)-15,10-环氧-3H-吡啶并[2,1-c][1,4]氧杂氮杂环二十三烷-1,7,20,21(4H,23H)-四酮，高纯度成品外观表现为白色或类白色固体。他克莫司主要用于器官移植后免疫抑制，防止免疫排斥导致器官抑制失败，也可以用于抗真菌。由于他克莫司和菌丝体的浸泡液中含有大量的油性物质，目前所用的粗品提取方法需要多次结晶和层析，非常繁琐，他克莫司除油也是一个技术难题，因此研究一种新型简易的提取方法非常有必要。
目前已知的文献中报道他克莫司粗品提取方法均是采用树脂和结晶的方法：在中国专利CN 111253416A中提出将他克莫司发酵液酸化，树脂吸附；过滤除去上清液，接着用水冲洗去除菌丝体后得到富含他克莫司的树脂；然后用丙酮搅拌浸泡，得到他克莫司浸泡液，减压浓缩成浓缩物；加入有机溶剂搅拌，除去固体，再将所得溶液静置除去水层以获得有机溶液；加入饱和碳酸氢钠溶液进行洗涤，并除去水层，得到有机相，用纯化水洗涤到中性，然后分层以获得有机溶液层，最后将有机溶液减压浓缩，得到黑褐色油状物；加入极性溶剂搅拌溶解，再加入非极性溶剂，结晶后过滤得到他克莫司晶体；减压干燥，得到他克莫司粗品。此方法操作步骤较多，经过多次的洗涤、萃取、浓缩、结晶，致使他克莫司产率和收率较低，且需要耗费大量的溶剂，回收处理量也较大，对环境不友好，工业生产成本比较高。
因此，提供一种纯度高，生产成本低，对环境友好，适合工业生产的他克莫司结晶方法就成为该技术领域急需解决的技术难题。
发明内容
本发明针对以上这些问题，提供了一种新型的他克莫司粗品提取方法。本发明具有的优点是：纯度高，收率高，工艺简单，成本低，对环境友好。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种新型的他克莫司粗品提取方法，其步骤如下：
(1)取他克莫司菌丝体滤渣，加入55～100％的丙酮(甲醇或乙醇)水溶液，搅拌浸泡16～24h，过滤得到浸泡液；
(2)将浸泡液减压浓缩，除去有机溶剂，得到含有他克莫司的油状物；
(3)将水加热，加入表面活性剂，充分搅拌后，将他克莫司油状物缓慢倒入溶液中保温，他克莫司缓慢从油状物中沉淀析出；
(4)抽滤得到他克莫司粗品，用热水淋洗，将他克莫司表面的表面活性剂完全洗掉，得到较高含量的他克莫司粗品。
优选地，上述步骤(1)选用60～75％的丙酮(甲醇或乙醇)水溶液，虽然溶剂浓度越高越有利于浸泡出他克莫司，但同时也越容易浸泡出大量油性杂质，60～75％的丙酮(甲醇或乙醇)水溶液，不仅收率高，浸泡液中油性杂质和色素含量也较低。
优选地，上述步骤(2)所述减压浓缩温度为45～65℃，真空度要求为-0.1～-0.85Mpa。
优选地，上述步骤(3)所述表面活性剂为阴离子表面活性剂或阳离子表面活性剂，如n烷基苯磺酸钠、n烷基磺酸钠、n烷基硬脂酸钠、吐温等，优选n烷基苯磺酸钠和n烷基磺酸钠。
优选地，上述步骤(3)所述的加热温度为60～80℃。
优选地，上述步骤(3)所述所述表面活性剂浓度为50～100g/L。
优选地，上述步骤(3)所述搅拌速度为80rpm。
优选地，上述步骤(4)所述热水温度为60～80℃。
本发明制备他克莫司粗品的有益效果在于：
(1)本发明的提取方法，采用了简便的方法，将油性物质与他克莫司进行分离，获得他克莫司固体粗品，粗品纯度可以达到80％以上，除油过程不需要有机溶剂，而且对环境友好；
(2)工序简易不繁琐，有利于工业化大生产，同时本方法不仅仅局限于他克莫司的提取，其他难溶或微溶于水，需要用有机溶剂从菌丝体或中药材中浸泡出来的物质均可以使用本专利方法进行提取；
(3)原料和所使用的原料价廉易得，降低了生产成本。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1为本发明一种新型的他克莫司粗品提取方法的他克莫司粗品图谱
具体实施方式
下面通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或者改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
本发明所使用的试剂均为工业级合格品或者工业级合格品以上纯度。
实施例1
取他克莫司发酵液30L，板框压滤后得到他克莫司湿菌渣6kg，加入75％的丙酮水溶液35L，80rpm搅拌18h，过滤得到他克莫司浸泡液，浸泡液在-0.095Mpa、45℃条件下减压浓缩，至丙酮基本全部蒸出后，得到50ml油状物。取500ml饮用水，加热至70℃，加入80ml十六烷基苯磺酸钠，100rpm搅拌条件下缓慢加入上述的50ml油状物，搅拌20min后，静置15min，抽滤得到他克莫司湿粗品，用75℃饮用水淋洗滤渣，得到14.5g他克莫司粗品固体。取样进行高效液相检测，他克莫司纯度为87.4％，含量为72.3％。
实施例2
取他克莫司发酵液30L，板框压滤后得到他克莫司湿菌渣6kg，加入75％的甲醇水溶液35L，80rpm搅拌18h，过滤得到他克莫司浸泡液，浸泡液在-0.095Mpa、45℃条件下减压浓缩，至甲醇基本全部蒸出后，得到46ml油状物。取500ml饮用水，加热至70℃，加入80ml十六烷基磺酸钠，100rpm搅拌条件下缓慢加入上述的46ml油状物，搅拌20min后，静置15min，抽滤得到他克莫司湿粗品，用75℃饮用水淋洗滤渣，得到13.2g他克莫司粗品固体。取样进行高效液相检测，他克莫司纯度为86.9％，含量为71.4％。
实施例3
取他克莫司发酵液30L，陶瓷膜微滤后得到12L菌丝浓缩液，加入35L95乙醇，80rpm搅拌18h，过滤得到他克莫司浸泡液，浸泡液在-0.095Mpa、45℃条件下减压浓缩，至乙醇基本全部蒸出后，得到60ml油状物。取500ml饮用水，加热至70℃，加入80ml十二烷基苯磺酸钠，100rpm搅拌条件下缓慢加入上述的55ml油状物，搅拌20min后，静置15min，抽滤得到他克莫司湿粗品，用75℃饮用水淋洗滤渣，得到14.1g他克莫司粗品固体。取样进行高效液相检测，他克莫司纯度为87.2％，含量为72.0％。
实施例4
取他克莫司发酵液30L，陶瓷膜微滤后得到12L菌丝浓缩液，加入35L丙酮，80rpm搅拌18h，过滤得到他克莫司浸泡液，浸泡液在-0.095Mpa、45℃条件下减压浓缩，至乙醇基本全部蒸出后，得到56ml油状物。取500ml饮用水，加热至70℃，加入80ml十二烷基磺酸钠，100rpm搅拌条件下缓慢加入上述的56ml油状物，搅拌20min后，静置15min，抽滤得到他克莫司湿粗品，用75℃饮用水淋洗滤渣，得到14.3g他克莫司粗品固体。取样进行高效液相检测，他克莫司纯度为87.1％，含量为72.5％。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1:取他克莫司菌丝体溶剂浸泡液，减压浓缩，将有机溶剂蒸馏除去，得到他克莫司的油状物；
S2:将水加热，加入表面活性剂，充分搅拌后，将他克莫司油状物缓慢倒入溶液中保温，他克莫司缓慢从油状物中沉淀析出；
S3:抽滤得到他克莫司粗品，用热水淋洗，将他克莫司表面的表面活性剂完全洗掉，得到较高含量的他克莫司粗品。
2.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S1步骤所用的他克莫司菌丝体浸提液，指的是他克莫司发酵液经过陶瓷膜微滤或板框压滤后得到的菌丝体，再用乙醇、丙酮、甲醇等有机溶剂或这些溶剂的水溶液浸泡出来的含有他克莫司的液体。
3.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S1步骤的表面活性剂为阴离子表面活性剂或阳离子表面活性剂，如n烷基苯磺酸钠、n烷基磺酸钠、n烷基硬脂酸钠、吐温等，优选n烷基苯磺酸钠。
4.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S1步骤的他克莫司菌丝体溶剂浸泡液的减压浓缩温度为45～65℃，真空度要求为-0.1～-0.85Mpa。
5.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S2步骤的加热温度为50～100℃，优选60～80℃。
6.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S2步骤的表面活性剂浓度为10～300g/L。
7.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S2步骤的搅拌速度为60～120rpm，优选为80rpm。
8.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S2步骤的每升表面活性剂水溶液中加入的他克莫司浓缩液体积为50～400ml。
9.根据权利要求1所述的一种新型的他克莫司粗品提取方法，其特征在于，所述S3步骤的热水温度为50～100℃，优选60～80℃。
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Cited By (4)
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|---|---|---|---|---|
| CN113912624A (zh) * | 2021-12-03 | 2022-01-11 | 北大方正集团有限公司 | 一种他克莫司的分离纯化方法 |
| CN114315860A (zh) * | 2021-12-27 | 2022-04-12 | 无锡福祈制药有限公司 | 一种西罗莫司粗品的制备方法 |
| CN114957349A (zh) * | 2022-06-30 | 2022-08-30 | 宁夏华吉生物有限公司 | 一种阿卡波糖发酵液的预处理及过滤方法 |
| CN115536672A (zh) * | 2022-10-12 | 2022-12-30 | 国药集团川抗制药有限公司 | 他克莫司粗品的提取方法和应用 |
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113912624A (zh) * | 2021-12-03 | 2022-01-11 | 北大方正集团有限公司 | 一种他克莫司的分离纯化方法 |
| CN114315860A (zh) * | 2021-12-27 | 2022-04-12 | 无锡福祈制药有限公司 | 一种西罗莫司粗品的制备方法 |
| CN114957349A (zh) * | 2022-06-30 | 2022-08-30 | 宁夏华吉生物有限公司 | 一种阿卡波糖发酵液的预处理及过滤方法 |
| CN115536672A (zh) * | 2022-10-12 | 2022-12-30 | 国药集团川抗制药有限公司 | 他克莫司粗品的提取方法和应用 |
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