CN113365508A - 具有高等电蛋白质的蛋白质组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明属于蛋白质组合物领域，特别是用于婴儿配方奶的蛋白质组合物。根据本发明的蛋白质组合物包含乳清蛋白、酪蛋白和高等电点蛋白质，例如等电点至少为6.0的蛋白质。本发明进一步涉及所述蛋白质组合物的用途。

Description

具有高等电蛋白质的蛋白质组合物
发明领域
本发明属于蛋白质组合物领域。特别地，本发明涉及适用于婴儿配方奶的包含高等电蛋白质的蛋白质组合物，以及包含本发明的蛋白质组合物的婴儿配方奶及其用于改善消化性和/或预防/治疗与婴儿和/或幼儿中消化性欠佳或受损相关的病症的用途。
发明背景
人乳是婴幼儿营养的金标准。然而，母乳并不总是可用的选择。在这种情况下，婴儿配方奶是人乳替代品的首选，并在作为单一或联合营养来源喂养时支持婴儿的充分生长。人乳是一种复杂的组分基质，其具有独特的分子结构和生物功能，这在婴儿配方奶中不易复制，特别是考虑到产品必须经过热处理以确保其长期储存的安全性和稳定性。
虽然牛奶是婴幼儿乳业的重要成分来源，但它在蛋白质含量和浓度方面与人乳有很大不同。人乳中复杂的蛋白质结构及其相互作用被认为与人乳对婴儿的健康益处有着内在的联系，因此很难在婴儿配方奶中复制。
蛋白质消化发生在两个阶段：胃和肠。在胃中(pH约为6.5-3.0)，胃蛋白酶将蛋白质部分分解成大多肽和寡肽。在胃中经过一段时间后，胃内容物被排空并进入肠道阶段。在肠道中(pH约为6.6)，胰蛋白酶和肽酶会将多肽水解成足够小以通过细胞运输到血液中的三肽、二肽和游离氨基酸。
理想情况下，婴儿配方奶的消化性应该与人乳的消化性相当，因为后者是人类营养和发育的金标准。然而，已知在配方奶粉或牛奶喂养的婴儿中消化性不同于人乳喂养的婴儿：人乳的消化性远低于目前可用的标准婴儿配方奶的消化性，这导致用婴儿配方奶喂养时在餐后血液中的氨基酸比母乳出现得更快(Moro等人，“Postprandial plasma aminoacids in preterm infants:influence of the protein source”Act.Paediatr.1999,88(8):885-889)。
模拟人乳的较低消化性曲线是合乎需要的，因为据信较低的蛋白质消化性促进婴儿充分的胃肠道发育和营养吸收。缓慢吸收的蛋白质促进餐后蛋白质沉积，而快速吸收的蛋白质如市售标准配方奶会刺激氨基酸氧化，最终影响婴儿的组织发育。进一步认为，人乳在婴儿/幼儿中较低的消化性促进了胃肠道特定部分中蛋白质、肽和氨基酸的充足供应，这些特定部分负责为相关肠道部分的形态和功能发育发出信号。此外，在配方奶喂养婴儿中肠道功能发育或营养吸收欠佳或不足的后果不仅是直接的，而且可能持续到成年，从而为增加对许多疾病和病症(例如肥胖、免疫力下降等)的易感性奠定基础。
已经尝试调节婴儿的消化。
WO 2012/045801描述了包含复合凝聚层的组合物，该复合凝聚层包含乳铁蛋白和至少一种等电点低于pH 7.0的其他蛋白质。描述了制备这些蛋白质-蛋白质复合物的方法。据说该复合凝聚层稳定且易于掺入食品中。在实施例中，描述了该凝聚层的制备，并测试了包含该凝聚层的蛋白质溶液的体外消化。
US 6,190,724 B1描述了包含修饰蛋白质的组合物和修饰蛋白质的方法。所述方法包括：1)聚合和/或交联，2)包含某些氨基酸，3)糖基化，4)去磷酸化或5)蛋白质的部分或全部热重排。修饰的蛋白质以占总蛋白质的至少15wt.％的量用于婴儿配方奶中。修饰的蛋白质被描述为改变消化动力学(即将其速度放慢)。
仍然需要改善婴幼儿配方奶的消化性，并使营养吸收曲线模拟人乳的吸收曲线。
发明内容
标准婴儿配方奶的蛋白质组合物通常包含例如来自牛奶的酪蛋白和乳清蛋白。标准婴儿配方奶比母乳具有更高的消化性，这是不期望的。在此参考图1。
本发明人已经发现，与目前用于标准婴儿配方奶的组合物(即不具有此类高pI蛋白质)相比，在包含酪蛋白和乳清蛋白的组合物中包含大量的高等电点(pI)蛋白质令人惊讶地降低了蛋白质消化性曲线。如本文所用，“低”/“较低”的消化性并不意味着蛋白质在体内消化的程度较低或不被消化，而是蛋白质消化较慢。因此，根据本发明的蛋白质组合物允许配制表现出更接近于人母乳的消化性曲线的婴儿配方奶(即，低于标准婴儿配方奶的消化性)。由于人母乳是金标准，因此蛋白质组合物产生改善的蛋白质消化性。因此，“改善的”蛋白质消化性是指低/较低的蛋白质消化性(例如，在图1中母乳具有比参考配方奶低/较低的消化性)。
因此，在第一方面，本发明涉及用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，该蛋白质组合物包含酪蛋白、乳清蛋白和等电点为6.0至11的至少一种非乳品高等电蛋白质(即非乳品来源的高等电蛋白质)，其中酪蛋白和乳清蛋白的总和与非乳品高等电蛋白质的重量比为95:5至75:25。
根据第二方面，本发明涉及适用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，该组合物包含重量比为40:60至55:45的酪蛋白和乳清蛋白，基于总蛋白质含量，该组合物包含10至40wt.％的等电点为6.0至11的至少一种高等电蛋白质。
在第三个方面，本发明涉及包含本发明的蛋白质组合物的婴儿配方奶。该婴儿配方奶适合施用于0至36个月的婴儿。
不希望受理论束缚，假设高等电蛋白质的静电相互作用和/或蛋白质结构有利地降低整个蛋白质组合物的消化性。例如在母乳喂养的婴儿中的较低消化性有利地转化为婴儿肠道部分的最佳形态和功能发育、减少的氨基酸氧化、氨基酸沉积的促进和改善的组织发育。
因此，本发明还涉及在婴儿，特别是有需要的婴儿，例如早产儿中用于改善营养吸收、促进氨基酸沉积和促进组织发育的婴儿配方奶。
项目
1.适用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述组合物包含酪蛋白、乳清蛋白和至少一种来自非乳品来源的高等电蛋白质，所述高等电蛋白质的等电点为6.0至11，其中所述组合物中酪蛋白和乳清蛋白的总和与高等电蛋白质的重量比为95:5至75:25。
2.根据项目1所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白和乳清蛋白以30:70至70:30，优选38:62至62:38，更优选约50:50或约40:60的重量比存在。
3.根据项目1或2所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的35至60wt.％的β-酪蛋白。
4.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的20至60wt.％的α-酪蛋白。
5.根据前述项目中任一项的所述蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的15至30wt.％的κ-酪蛋白。
6.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述乳清蛋白包含占总乳清蛋白含量的20至80wt.％的α-乳白蛋白。
7.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述乳清蛋白包含占总乳清蛋白含量的20至70wt.％的β-乳球蛋白。
8.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述高等电蛋白质是选自由溶菌酶、卵转铁蛋白、菜籽蛋白(canola protein)、油菜籽蛋白或其混合物组成的一种或更多种蛋白质。
9.适用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述组合物包含重量比为40:60至55:45的酪蛋白和乳清蛋白，所述组合物包含基于总蛋白质含量的10至40wt.％的等电点为6.0至11的至少一种高等电蛋白质。
10.根据项目9所述的蛋白质组合物，其中基于总蛋白质含量，所述至少一种高等电蛋白质以15至35wt.％，优选18至30wt.％的量存在。
11.根据项目9或10所述的蛋白质组合物，其中所述至少一种高等电蛋白质选自乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白、菜籽蛋白(canola protein)、油菜籽蛋白或其混合物，优选乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白或其混合物，最优选乳铁蛋白。
12.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述至少一种高等电蛋白质为完整形式。
13.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其中仅存在一种等电点为9.0至11的高等电蛋白质。
14.根据项目1-12中任一项所述的蛋白质组合物，其中存在等电点为6.0至11的两种高等电蛋白质，其中等电蛋白质之一具有9.0至11的等电点。
15.根据前述项目中任一项所述的蛋白质组合物，其由以下组成：酪蛋白、乳清蛋白和至少一种高等电蛋白质，优选一种或两种高等电蛋白质，包括来自非乳品来源的一种高等电蛋白质。
16.包含如项目1至14中任一项所定义的蛋白质组合物的婴儿配方奶，其适合施用于年龄为0至36个月的婴儿。
17.根据项目1至14中任一项所述的蛋白质组合物，或根据项目15所述的婴儿配方奶，其用于下述治疗用途：在患有或处于患有消化性受损和/或未成熟组织发育和/或未成熟胃肠道发育风险中的人类婴儿优选早产儿中改善消化性优选蛋白质消化性。
18.根据项目1至14中任一项所述的蛋白质组合物或根据项目15所述的婴儿配方奶用于在健康人类婴儿中改善蛋白质消化性和/或在健康人类婴儿中促进组织发育的用途。
19.用于改善健康人类婴儿的消化性优选蛋白质消化性的(非治疗性)方法，其中向所述婴儿施用根据项目1至14中任一项所述的蛋白质组合物，或根据项目15所述的婴儿配方奶。
20.根据项目1至14中任一项所述的蛋白质组合物在制造用于在人类婴儿中改善蛋白质消化性和/或在人类婴儿中促进组织发育的婴儿配方奶中的用途。
具体实施方式
蛋白质成分
如本文所用，“蛋白质组合物”是指仅包含蛋白质材料(肽、氨基酸、蛋白质)的组合物，并且优选不包含对组合物的热量含量有贡献的其他组分，例如碳水化合物、脂肪和纤维。换句话说，本发明上下文中的术语“蛋白质组合物”不包括包含其他营养物(例如脂肪、碳水化合物等)的营养组合物。
通常，根据本发明的蛋白质组合物的pH在6.5至7.5的范围内。
根据本发明的蛋白质组合物包含酪蛋白和乳清蛋白。酪蛋白和乳清蛋白优选占蛋白质总重量的65-95wt％，更优选70-90wt％，甚至更优选75-85wt％。在优选的实施方案中，蛋白质的其余部分由本文定义的非乳品高等电蛋白质形成。
在一个实施方案中，酪蛋白和乳清蛋白的总和与至少一种高等电蛋白质的重量比优选为95:5至75:25，更优选90:10-75:25，甚至更优选85:15-75:25。
酪蛋白
通常，在根据本发明的蛋白质组合物中，酪蛋白以相对于乳清蛋白25:75至70:30，更优选30:70至70:30，甚至更优选38:62至62:38，最优选约50:50或约40:60的重量比存在。甚至更优选地，酪蛋白与乳清蛋白的比例为25:75-62:38，优选30:70-55:45，最优选40:60-52:48。
本发明中使用的酪蛋白优选但不一定是牛酪蛋白。通常，酪蛋白以例如从脱脂奶粉中获得的酪蛋白胶束(casein micelle)的形式使用。酪蛋白胶束包含αS1、αS2、β-和κ-酪蛋白，其比例可能因供应商而异。在优选的实施方案中，酪蛋白不包括酪蛋白酸盐和/或解离的酪蛋白胶束。
在优选的实施方案中，酪蛋白组分富含β-酪蛋白。因此，在一个实施方案中，基于总酪蛋白含量，蛋白质组合物包含35至60wt.％，优选38至55wt.％，更优选40至50wt.％的β-酪蛋白。为了比较，通常β-酪蛋白以大约33wt.％的量存在于酪蛋白中。
在另一个优选的实施方案中，酪蛋白组分富含κ-酪蛋白。因此，在一个实施方案中，蛋白质组合物包含酪蛋白组分，其包含总酪蛋白含量的15至30wt.％，优选15至28wt.％，更优选总酪蛋白含量的18至25wt.％的κ-酪蛋白。优选地，κ-酪蛋白不超过α-、β-和κ-酪蛋白总和的40wt.％，更优选不超过35wt.％，甚至更优选不超过30wt.％；但不少于α、β和κ酪蛋白的总和的10wt.％，更优选不少于15wt.％，甚至更优选不少于20wt.％。为了比较，通常κ-酪蛋白以大约13wt.％的量存在于酪蛋白中。
在优选的实施方案中，酪蛋白组分中β-酪蛋白和κ-酪蛋白的总和为总酪蛋白含量的50-80wt％，优选为总酪蛋白含量的60-75wt％。
通常，蛋白质组合物包含占总酪蛋白含量的20至60wt.％，优选25至55wt.％，更优选30至50wt.％的α-酪蛋白。优选地，基于α、β和κ酪蛋白的总和，αS1-酪蛋白和αS2-酪蛋白的总和不少于20wt.％，优选不少于25wt.％；但基于α、β和κ酪蛋白的总和不超过40wt.％，优选不超过35wt.％。
与市售标准婴儿配方奶相反，本发明的婴儿配方奶可包含相对于α-酪蛋白优选αS2-酪蛋白过量的β-酪蛋白。因此，在一个实施方案中，α-酪蛋白与β-酪蛋白的比例至少为55:45。
乳清蛋白
如本文所用，“乳清蛋白”，在本领域中也称为“血清蛋白”，是指主要和次要乳清蛋白。“主要乳清蛋白”包括α-乳白蛋白和β-乳球蛋白，取决于乳清来源。优选地，本发明中使用的主要乳清蛋白包含β-和α-乳白蛋白。“次要乳清蛋白”优选选自血清白蛋白、
Figure BDA0003121829510000071
(proteose)蛋白胨、免疫球蛋白、乳铁蛋白和溶菌酶。在本发明的上下文中，术语“乳清”和“乳清蛋白”可互换使用，是指乳清的蛋白质成分。
通常，可以包括在本发明的蛋白质组合物中的乳清蛋白包括乳白蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白、
Figure BDA0003121829510000072
(proteose)蛋白胨、免疫球蛋白、乳铁蛋白等，所有这些都符合其在本领域的常规含义。
优选地，本发明组合物的乳清蛋白富含α-乳白蛋白。通常，α-乳白蛋白以总乳清含量的20至80wt.％，更优选30至80wt.％，甚至更优选40至75wt.％，最优选45至70wt.％的量存在于蛋白质组合物中。α-乳白蛋白适合作为纯化的α-乳白蛋白成分或富含α-乳白蛋白的乳清蛋白浓缩物获得。为了比较，通常乳清蛋白包含约27wt.％的α-乳白蛋白。
乳清蛋白还包含β-乳球蛋白。优选地，β-乳球蛋白以总乳清含量的20至70wt.％、优选25至60wt.％、甚至更优选30至55wt.％的量存在。
优选地，α-乳白蛋白与β-乳球蛋白的比例为1:1至6:1，更优选2:1至5:1。据信，当本发明的蛋白质组分包含占总乳清蛋白含量的至少20wt.％的α-乳白蛋白时，在降低消化性尤其是蛋白质的消化性方面可获得特别更好的结果。在进一步优选的实施方案中，当本发明的蛋白质组合物包含占总乳清蛋白含量至少20wt.％的α-乳白蛋白与富含β-酪蛋白(即占总酪蛋白的至少28wt.％)的酪蛋白组分的组合时，观察到了降低消化性尤其是降低蛋白质的消化性的更好结果。
一些次要乳清蛋白例如免疫球蛋白和乳铁蛋白可能具有至少6.0的等电点。在一个实施方案中，基于总蛋白质含量，乳清包含小于0.2wt.％，优选小于0.1wt.％，甚至更优选小于0.05wt.％的等电点为6.0至11的乳蛋白。在更优选的实施方案中，所述蛋白质是乳铁蛋白。在甚至更优选的实施方案中，基于总蛋白质含量，婴儿配方奶包含小于0.2wt.％，优选小于0.1wt.％，甚至更优选小于0.05wt.％的乳铁蛋白。即，在一个实施方案中，在本发明的婴儿配方奶中非乳品高等电点蛋白质替代次要乳清蛋白，特别是选自
Figure BDA0003121829510000081
(proteose)蛋白胨、免疫球蛋白、乳铁蛋白的次要乳清蛋白。
在一个实施方案中，血清白蛋白以基于总乳清含量不超过2wt.％，优选不超过1wt.％，更优选不超过0.1wt.％的量存在。
高等电点(pI)蛋白质
根据本发明的蛋白质组合物包含至少一种具有高等电点的蛋白质。
如本文所用，“具有高等电点的蛋白质”定义为等电点为6.0至11，优选至少6.5，更优选至少7.0，甚至更优选至少7.5的蛋白质。本发明上下文中的高等电点蛋白质选自单一高等电点蛋白质或至少两种高等电点蛋白质的混合物(即，其中每种高等电点蛋白质的等电点为6.0至11，优选地在7.0到10的范围内)。
在一个实施方案中，至少一种高等电点蛋白质是非乳品来源的。如本文所用，“非乳”或“非乳基”蛋白质具有通常的含义，即该蛋白质不是从哺乳动物的乳腺中吸取或提取的。
因此，在一方面，本发明涉及用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述蛋白质组合物包含酪蛋白、乳清蛋白和至少一种等电点为6.0至11的非乳品高等电蛋白质，其中酪蛋白和乳清的总和与非乳品高等电蛋白质的重量比为95:5至75:25。
用于本发明的等电点为6.0至11的非乳品高等电蛋白质的合适实例包括但不限于从鸡蛋(例如溶菌酶)、豌豆、大豆、菜籽(canola)、油菜籽或其组合中提取的蛋白质。
优选地，根据本发明的至少一种非乳品高等电蛋白质选自卵转铁蛋白、溶菌酶、油菜籽或其组合；更优选卵转铁蛋白和溶菌酶。
在另一个实施方案中，至少一种高等电点蛋白质是乳来源(即来自哺乳动物)的高等电点蛋白质。用于本发明的等电点为6.0至11的乳品高等电蛋白质的合适实例包括例如免疫球蛋白(pI为5.5-8.3)、乳铁蛋白(pI约8.9)和溶菌酶(pI约10.4)。优选地，乳来源的至少一种高等电蛋白质选自乳铁蛋白或溶菌酶，更优选乳铁蛋白。
因此，在另一方面，本发明涉及用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述蛋白质组合物包含重量比为40:60至55:45的酪蛋白和乳清蛋白，基于总蛋白质含量，所述组合物包含10至40wt.％的等电点为6.0至11的至少一种高等电蛋白质。高等电蛋白质可以是单独的乳品高等电蛋白质，或与非乳品高等电蛋白质组合。
在又一个实施方案中，蛋白质组合物包含等电点为6.0至11的乳品和非品乳品高等电蛋白质的混合物。在那种情况下，乳品优选为乳铁蛋白，非乳品优选选自卵转铁蛋白、溶菌酶和/或油菜籽。
根据本发明使用的至少一种高等电点蛋白质优选选自乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白、菜籽蛋白(canola protein)、油菜籽蛋白或其混合物，优选乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白或其混合物，最优选乳铁蛋白。
优选地，基于总蛋白质含量，至少一种高等电蛋白质以15至35wt.％，优选18至30wt.％的量存在于蛋白质组合物中。
根据一个优选实施方案，根据本发明的蛋白质组合物包含等电点为9.0至11的单一高等电蛋白质。当单独使用时，高等电蛋白质具有至少9.5，更优选至少10.0的等电点。优选地，高等电点蛋白质是溶菌酶，更优选卵溶菌酶(egg lysozyme)。当用作唯一的高等电蛋白质时，基于总蛋白质含量，卵溶菌酶的合适量范围为15-30wt.％，更优选18-23wt.％。
根据另一个优选的实施方案，根据本发明的蛋白质组合物包含多种高等电点蛋白质，例如根据本发明的规定量的乳品和非乳品高等电点蛋白质的混合物，即最终在乳清组分中过量添加到高等电点蛋白质。在优选的实施方案中，存在超过两种等电点为6.0至11的高等电蛋白质，其中至少50％的等电蛋白质具有9.0至11的等电点。甚至更优选地，蛋白质组合物中存在两种等电点为6.0至11的高等电点蛋白质。两种高等电点蛋白质的优选组合是卵转铁蛋白和溶菌酶。
适当地，两种或更多种高等电点蛋白质以这样的比例存在，其中具有较高等电点的蛋白质以比具有最低等电点的高等电点蛋白质多至少50％的量存在。换句话说，在包含两种或更多种等电点为6.0至11的高等电点蛋白质的蛋白质组合物中，具有最低等电点的高等电点蛋白质优选不超过总高等电点蛋白质的50％，更优选不超过30％，甚至更优选不超过20％。
通常，本发明的蛋白质组合物包含至少一种高等电蛋白质，其含量为蛋白质总重量的5至35wt.％，更优选10至30wt.％，甚至更优选蛋白质总重量的15至25wt.％。
在一个实施方案中，高等电蛋白质的含量代替部分乳清蛋白，优选次要乳清蛋白，更优选选自
Figure BDA0003121829510000101
(proteose)蛋白胨、免疫球蛋白和/或乳铁蛋白的次要乳清蛋白。因此，基于总乳清含量，作为“次要乳清蛋白”替代物的至少一种高等电蛋白质以5至30wt.％，甚至更优选10至25wt.％，最优选15至20wt.％的量存在。优选地，基于蛋白质的总重量，本发明的蛋白质组合物包含2.5至15wt.％，优选5至10wt.％的量的高等电蛋白质作为“次要乳清蛋白”替代物。
高等电蛋白质可以是水解的、部分水解的或完整的。优选地，高等电蛋白质呈完整形式。如本文所用，术语“完整蛋白质”是指任何形式的完整蛋白质，包括但不限于蛋白质浓缩物和/或蛋白质分离物，以及其他形式的完整蛋白质。
基于包含根据本发明的任一蛋白质组合物的婴儿配方奶的最终重量，配方奶包含基于配方奶干重的5至25wt.％，更优选至少10至20wt.％的等电点为6.0至11的蛋白质。
优选地，在重新配制(reconstitution)时，等电点为6至11的蛋白质以0.01至0.33g/100ml，更优选0.1至0.3g/ml的量存在。
婴儿配方奶
在本发明的一方面，其中描述的蛋白质组合物包含在婴儿配方奶产品中。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及包含根据权利要求1所述的蛋白质组合物(即用于婴儿配方奶的蛋白质组合物)的婴儿配方奶，所述蛋白质组合物包含酪蛋白、乳清蛋白和至少一种等电点为6.0至11的非乳品高等电蛋白质，其中酪蛋白和乳清的总和与非乳品高等电蛋白质的重量比为95:5至75:25。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含根据权利要求9所述的蛋白质组合物(即用于婴儿配方奶的蛋白质组合物)的婴儿配方奶，所述蛋白质组合物包含重量比为40:60至55:45的酪蛋白和乳清蛋白，该组合物包含基于总蛋白质含量的10至40wt.％的至少一种等电点为6.0至11的高等电蛋白质。
对前述蛋白质组合物的所有限制均适用必要的修正(mutatis mutandis)。
术语“婴儿配方奶”由监管机构在国际上一惯地明确定义和控制。特别是，CODEXSTAN 73–1981“Standard For Infant Formula and Formulas For Special MedicalPurposes Intended for Infants”被广泛接受。它推荐营养价值和配方成分，要求制备的牛奶每100毫升含有不少于60kcal(250千焦)和不超过70kcal(295千焦)的能量。FDA和其他监管机构已据此制定了营养要求。这里使用的“婴儿配方”和“婴儿配方奶”是可以互换的。
根据本发明的婴儿配方奶可用作营养组合物、营养疗法、营养支持、用作医疗食品、特殊医疗目的的食品或用作营养补充剂。本婴儿配方奶优选为肠道(口服)组合物。婴儿配方奶被口服施用或意图口服施用给有需要的受试者，特别是儿童和婴儿，包括幼儿，优选高达6岁的儿童，优选婴儿或幼儿，通常为0-36个月大，更优选0-12个月大，最优选0-6个月大的婴儿或幼儿。因此，在一些实施方案中，本婴儿配方奶是用于0-6个月大的婴儿的婴儿配方奶，或用于6-12个月婴儿的后续配方奶(follow-on formula)，或用于12至36个月大的幼儿的幼儿配方奶(也称为成长奶)。
为了满足婴儿的热量需求，本婴儿配方奶优选包含50至200kcal/100ml液体，更优选60至90kcal/100ml液体，甚至更优选60至75kcal/100ml液体。这种热量密度确保了水和热量消耗之间的最佳比例。本婴儿配方奶的渗透压优选为150至420mOsmol/l，更优选260至320mOsmol/l。低渗透压旨在减少胃肠道压力。
优选地，本婴儿配方奶为液体形式，如在Brookfield粘度计中在20℃以100s-1的剪切速率所测量的，其粘度优选低于35mPa.s，更优选低于10mPa.s，甚至更优选低于6mPa.s。适当地，本发明的婴儿配方奶是粉状的，优选可以用水重新配制以形成液体，或呈液体浓缩物形式，其可用水稀释。当本婴儿配方奶为液体形式时，每日施用的优选体积在约80至2500ml的范围内，更优选约450至1000ml/日。
本发明的婴儿配方奶经过热处理。术语“热处理”在本文中是指在升高的温度下的处理，旨在增加婴儿配方奶的保质期。热处理的实例包括巴氏杀菌、灭菌和UHT(超热处理或超高温处理)。
适当地，本发明的配方奶不是或不包含哺乳动物乳，特别是本发明的配方奶不是或不包含人母乳。
其他组分
根据本发明的婴儿配方奶可以适当地包含通常量的典型婴儿配方奶组分。因此，婴儿配方奶可以包含蛋白质(本文所述的酪蛋白、乳清和高等电蛋白质之外的蛋白质)、脂肪酸(例如长链多不饱和脂肪酸)、动物脂肪、植物油或它们的混合物中的至少一种作为脂肪组分、可消化碳水化合物组分(例如乳糖)、不可消化碳水化合物组分，并且可以包含具有益生元活性的膳食纤维、益生菌、维生素-矿物质混合物等。
根据本发明的婴儿配方奶优选包含脂质组分，优选本领域已知的适用于婴儿营养的脂质组分。本婴儿配方奶的脂质组分优选提供每100kcal组合物2.9至6.0g，更优选4至6g。当呈液体形式时，婴儿配方奶通常每100毫升包含2.1至6.5克脂质，更优选每100毫升包含3.0至4.0克脂质。基于干重，本婴儿配方奶优选包含12.5至40wt.％的脂质，更优选19至30wt.％。
除了根据本发明的酪蛋白、乳清和高等电蛋白质之外，根据本发明的婴儿配方奶还可以包含其他蛋白质材料。在本发明的上下文中，额外的“蛋白质”或“蛋白质材料”或“蛋白质等同物”包括蛋白质、肽、游离氨基酸和部分或完全水解的蛋白质。优选地，其他蛋白质材料不会引起过敏反应或者是低过敏性的，例如游离氨基酸和水解蛋白质。作为其他蛋白质组分，根据本发明的婴儿配方奶优选包含游离氨基酸、水解乳清蛋白，优选部分水解的乳清蛋白。
基于总蛋白质的干重，本发明的婴儿配方奶优选包含至少50wt％的源自(非人)乳的蛋白质组分，更优选至少90wt％。
基于总卡路里，本婴儿配方奶优选包含5至20％，更优选7至16％，最优选7至12％的蛋白质。当为液体形式时，本婴儿配方奶每100毫升优选含有0.5至6.0克，更优选0.8至3.0克，甚至更优选1.0至2.5克蛋白质。基于总婴儿配方奶的干重，本婴儿配方奶优选包含至少7wt％，更优选至少8wt％，最优选至少9或至少10wt％的蛋白质。优选地，基于总婴儿配方奶的干重，本婴儿配方奶包含至多40wt.％，更优选至多15wt.％，优选至多20wt.％的蛋白质组合物。
婴儿配方奶可包含可消化碳水化合物。通常，使用本领域已知适用于婴儿营养组合物的可消化碳水化合物，例如选自可消化多糖(例如淀粉、麦芽糊精)、可消化单糖(例如葡萄糖、果糖)和可消化二糖(例如乳糖、蔗糖)。特别合适的是乳糖和/或麦芽糖糊精。
可消化碳水化合物组分优选包含基于总可消化碳水化合物的至少60wt％的乳糖，更优选基于总可消化碳水化合物的至少75wt％，甚至更优选至少90wt％的乳糖。
人类受试者
本发明的任何方面的配方奶旨在用于人类婴儿。适当地，本发明的任何方面的配方奶旨在用于人类足月婴儿和/或人类早产儿。适当地，本婴儿配方奶用于向人类婴儿提供每日营养需求，特别是用于施用于，特别是用于喂养人类，特别是婴儿，包括幼儿。人类受试者或目标人群优选为婴儿(0-12个月)和幼儿(最多36个月)，优选部分或完全用非人乳喂养的婴儿和幼儿。在本发明的上下文中，“人类足月婴儿”是在妊娠37周后出生的人类婴儿，优选在妊娠37-42周。相应地，“人类早产儿”是指在妊娠37周之前出生的人类婴儿。
在一个实施方案中，人类婴儿或幼儿用所述婴儿配方奶以及人乳喂养。在另一个实施方案中，人类婴儿或幼儿专门用婴儿配方奶喂养。
消化性
在理想情况下，在配方奶喂养婴儿中，蛋白质消化性尤其是酪蛋白和乳清蛋白的消化性与母乳喂养婴儿中观察到的消化性相似。然而，人乳消化性曲线远低于商业标准婴儿配方奶的消化性。图1显示了在新鲜人乳(以正方形表示；在收集的同一天使用)和根据包装说明制备并以1.3％w/w蛋白质重新配制的商业婴儿配方奶(以三角形表示；商业婴儿配方奶(IMF))的肠道消化条件下，总NH2随时间出现的比较。
如本文所用，“低”/“较低”的蛋白质消化性并不意味着蛋白质在体内消化的程度较低或不被消化，而是蛋白质消化较慢。在此，“蛋白质消化性”是指在婴儿的体外静态消化模型中消化3h时所消化的总蛋白质。
低人乳消化性有利于确保肠道阶段适当的营养吸收，特别是适当的蛋白质分解以及组织发育所需的肽和氨基酸吸收。更快的蛋白质消化性(例如标准婴儿配方奶)会导致血液中出现餐后氨基酸，刺激氨基酸氧化并最终对婴儿的组织发育产生不利影响。
进一步认为，母乳在婴儿/幼儿中的较低消化性促进了胃肠道特定部分中蛋白质、肽和氨基酸的充足供应，这些特定部分负责为相关肠道部分的形态和功能发育发出信号。
没有喂母乳的婴儿更容易受到蛋白质组合物肠道消化受损或欠佳的影响。这些后果可以在婴儿早期观察到(即直接影响)，或者可以在生命后期观察到。此外，配方奶喂养婴儿的肠道功能发育或营养吸收欠佳或缺陷的后果不仅是直接的，而且可能持续到成年，从而为增加对许多疾病和病症(例如肥胖、免疫力下降等)的易感性奠定了基础。
异常快速的消化性会影响营养吸收，最终可能导致婴儿组织发育和生长迟缓以及肠道功能发育受损。消化性受损可以在体外测量为随时间或优选在生理相关时间点的消化水解百分比。
有利地，当与商业标准婴儿配方奶中使用的蛋白质组合物相比时，根据本发明的蛋白质组合物具有较低的消化性曲线。
蛋白质消化性受损可能导致与婴儿生长和发育，特别是组织发育相关的疾病和病症。这在体重不足的婴儿或患有或处于患有影响肠道营养吸收的疾病或病症的风险中的婴儿中尤其相关。在这些情况下，特别希望蛋白质组合物被缓慢消化以确保最佳的营养吸收和氨基酸摄入到血流中。通过使用根据本发明的蛋白质组合物可以防止或治疗蛋白质消化性受损或欠佳。因此，一方面，本发明涉及本文所述的蛋白质组合物或婴儿配方奶用于下述治疗用途中的用途：在患有或处于患有消化性受损和/或组织发育迟缓和/或胃肠道发育迟缓的风险中的人类婴儿中改善消化性优选蛋白质消化性。早产儿可能尤其受益，因为他们的胃肠道不成熟。
与上述这些发现相关，本发明涉及如本文所定义的蛋白质组合物和婴儿配方奶，其用于下述治疗用途：在患有或处于患有消化性受损和/或组织发育迟缓和/或胃肠道发育迟缓的风险中的人类婴儿中，或组织发育不成熟特别是胃肠道组织不成熟的早产儿中，改善消化性优选蛋白质消化性。换句话说，本发明涉及如本文定义的蛋白质组合物和婴儿配方奶用于改善健康人类婴儿的蛋白质消化性，和/或促进健康人类婴儿的组织发育的用途。本发明还涉及用于改善健康人类婴儿的消化性优选蛋白质消化性的(非治疗性)方法，其中向婴儿施用如本文定义的蛋白质组合物或婴儿配方奶。换句话说，本发明涉及如本文所定义的蛋白质组合物在制造用于在人类婴儿中改善蛋白质消化性和/或在人类婴儿中促进组织发育的婴儿配方奶中的用途。在本发明的上下文中，术语“改善消化性”是指与常规婴儿配方奶获得的消化性相比降低消化性，即与人乳获得的消化性曲线相比，减少消化性方面的差距。在一个实施方案中，这种常规婴儿配方奶具有由酪蛋白和乳清蛋白制成的蛋白质组合物，其中酪蛋白:乳清蛋白的重量比为约40:60(如实施例1中所示)。与此相关，该用途延伸到在健康人类婴儿中促进组织发育，以及在健康人类婴儿中改善蛋白质、肽和/或氨基酸吸收。
婴儿或幼儿可能患有或处于患有生长迟缓或组织发育迟缓的风险中。优选地，婴儿或幼儿是早产人类婴儿或足月人类婴儿，优选早产或足月体重不足的人类婴儿。
实施例
实施例1：蛋白质组合物和消化性
如下制备表1中所述的蛋白质组合物：
乳清蛋白和/或高等电点蛋白质在室温下在2小时的温和搅拌下溶解在脱矿质水中。酪蛋白分散在50℃的脱矿质水中，并在350+50bar下均质化。通过以适当的比例将溶解的蛋白质成分混合以达到1.3％(w/w)的最终蛋白质浓度来获得最终蛋白质配方。高等电点蛋白质的量以基于总蛋白质的重量百分比表示。
表1
Figure BDA0003121829510000161
1:脱脂奶粉(Omia)
2:乳清蛋白浓缩物,80％脱矿质化(Friesland Campina)
3:胶束酪蛋白分离物(Friesland Campina)
4:Lacprodan(Arla；α-乳白蛋白含量60％)
5:Ultranor HT(Kerry Foods；β-酪蛋白含量40％)
6:pI＝6.7,非乳品来源(Bioseutica Group)
7:pI＝10.4,非乳品来源(Bioseutica Group)
使用适用于婴儿的静态INFOGEST体外消化模型消化表1的蛋白质组合物，如下表2所示：
表2
Figure BDA0003121829510000171
在250ml Duran瓶中进行100ml体积的消化。水浴(MixBathPC,2mag MagneticNotion)和磁力搅拌器(Mixcontrol 40,2mag Magnetic Notion)分别设置在37.5℃和100rpm。对于胃阶段，蛋白质溶液设定为37℃，并且模拟胃液(SGF)以63:37的比例混合。使用0.25M HCl将pH调节至4.5，在5、15、30和60分钟时对胃消化物(digesta)取样。在胃阶段之后，胃消化物与模拟肠液(SIF)以39:61的比例混合。使用0.25M NaOH/0.25M NaHCO3将pH调节至6.6。在2、6、10、15、22、30、40、55、70、80、90、105和120分钟的时间对肠道消化物进行取样。
通过以下操作进行取样：将1ml消化物与1ml 0.1M磷酸盐缓冲液在pH 7.2(胃样品)或5.5(肠样品)混合以停止消化，在5.5功率下均质(turraxed)(T10 BasicUtraturrax，IKA)25秒以增强蛋白质分散性，在液氮中速冻并储存在-20℃直至分析。每次消化以一式三份进行。
通过邻苯二醛(OPA)(生成伯氨基对收集的样品进行分析。该方法基于OPA与蛋白质中游离伯氨基在2-(二甲氨基)乙硫醇盐酸盐(DMA)存在下的特定反应，产生在340nm处显示吸光度的烷基异吲哚衍生物。消化物样品与2％SDS以1:1的比例混合，在95℃下煮沸5分钟，然后在室温下冷却。将5μl等分试样与200μl OPA工作试剂或OPA空白溶液混合并温育25分钟。使用Biowave酶标仪读取信号，使用Gen5 2.09软件分析结果。使用L-丙氨酸溶液(0、1、2、4、6、8和10mM)校准曲线对游离NH2基团进行定量。测量以一式两份进行。
消化结果表示为作为时间的函数的水解度(％)。消化性参数通过将数据拟合到先前描述的方程中获得(Deng，van der Veer等人，2017年)，如图2所示。
Ref.IMF表示标准婴儿配方奶的蛋白质消化性曲线。Ref.P和Ref.P-beta用作含有酪蛋白和乳清(50:50)且不含高等电点蛋白质的配方的蛋白质消化性曲线的参考。Ref.P和Ref.P-beta显示低于Ref.IMF的消化性，与酪蛋白来源无关。
在根据本发明的组合物(A、B)(即包含高等电点蛋白质)中观察到改善的消化性(较低)，当酪蛋白源富含β-酪蛋白时具有更加改善的结果。
实施例2：高等电点蛋白质的比较
使用不同来源和比例的高等电点蛋白质来复制表1的组合物B(基于总蛋白质，18wt.％的等电点至少为6.0的蛋白质；酪蛋白:乳清的比例为50:50；并使用富含β-酪蛋白的酪蛋白源)。以与实施例1中所述相同的方式制备组合物，并且也具有1.3％(w/w)的最终蛋白质浓度。
表3
Figure BDA0003121829510000181
1:pI＝6.7(Bioseutica Group)
2:pI＝8.7(FrieslandCampina)
3:pI＝7-11(Synthite Corporate)
4:pI＝10.4(Bioseutica Group)
结果在图3(单一高等电点蛋白质的影响)和图4(两种高等电点蛋白质的影响)中给出。图3显示所用蛋白质的等电点越高，蛋白质消化性越低。图4显示两种高等电点蛋白质比例为50:50的组合物在降低蛋白质消化性方面具有协同作用。

Claims (20)

1.适用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述组合物包含酪蛋白、乳清蛋白和至少一种来自非乳品来源的高等电蛋白质，所述高等电蛋白质的等电点为6.0至11，其中所述组合物中酪蛋白和乳清蛋白的总和与高等电蛋白质的重量比为95:5至75:25。
2.根据权利要求1所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白和乳清蛋白以30:70至70:30，优选38:62至62:38，更优选约50:50或约40:60的重量比存在。
3.根据权利要求1或2所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的35至60wt.％的β-酪蛋白。
4.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的20至60wt.％的α-酪蛋白。
5.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述酪蛋白包含占总酪蛋白含量的15至30wt.％的κ-酪蛋白。
6.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述乳清蛋白包含占总乳清蛋白含量的20至80wt.％的α-乳白蛋白。
7.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述乳清蛋白包含占总乳清蛋白含量的20至70wt.％的β-乳球蛋白。
8.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述高等电蛋白质是选自由溶菌酶、卵转铁蛋白、菜籽蛋白、油菜籽蛋白或其混合物组成的一种或更多种蛋白质。
9.适用于婴儿配方奶的蛋白质组合物，所述组合物包含重量比为40:60至55:45的酪蛋白和乳清蛋白，所述组合物包含基于总蛋白质含量的10至40wt.％的等电点为6.0至11的至少一种高等电蛋白质。
10.根据权利要求9所述的蛋白质组合物，其中基于总蛋白质含量，所述至少一种高等电蛋白质以15至35wt.％，优选18至30wt.％的量存在。
11.根据权利要求9或10所述的蛋白质组合物，其中所述至少一种高等电蛋白质选自乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白、菜籽蛋白、油菜籽蛋白或其混合物，优选乳铁蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白或其混合物，最优选乳铁蛋白。
12.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中所述至少一种高等电蛋白质为完整形式。
13.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其中仅存在一种等电点为9.0至11的高等电蛋白质。
14.根据权利要求1-12中任一项所述的蛋白质组合物，其中存在等电点为6.0至11的两种高等电蛋白质，其中等电蛋白质之一具有9.0至11的等电点。
15.根据前述权利要求中任一项所述的蛋白质组合物，其由以下组成：酪蛋白、乳清蛋白和至少一种高等电蛋白质，优选一种或两种高等电蛋白质，包括来自非乳品来源的一种高等电蛋白质。
16.包含如权利要求1至14中任一项所定义的蛋白质组合物的婴儿配方奶，其适合施用于年龄为0至36个月的婴儿。
17.根据权利要求1至14中任一项所述的蛋白质组合物，或根据权利要求15所述的所述婴儿配方奶，其用于下述治疗用途：在患有或处于患有消化性受损和/或未成熟组织发育和/或未成熟胃肠道发育风险中的人类婴儿优选早产儿中，与常规婴儿配方奶获得的消化性相比降低消化性优选蛋白质消化性。
18.根据权利要求1至14中任一项所述的蛋白质组合物或根据权利要求15所述的婴儿配方奶用于在健康人类婴儿中与常规婴儿配方奶获得的消化性相比降低蛋白质消化性和/或在健康人类婴儿中促进组织发育的用途。
19.用于在健康人类婴儿中与常规婴儿配方奶获得的消化性相比降低消化性优选蛋白质消化性的方法，其中向所述婴儿施用根据权利要求1至14中任一项所述的蛋白质组合物或根据权利要求15所述的婴儿配方奶。
20.权利要求1至14中任一项所述的蛋白质组合物在制造用于在人类婴儿中与常规婴儿配方奶获得的消化性相比降低蛋白质消化性和/或在人类婴儿中促进组织发育的婴儿配方奶中的用途。
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