CN113348167A - 用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺衍生物 - Google Patents

用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺衍生物 Download PDF

Info

Publication number
CN113348167A
CN113348167A CN201980086920.0A CN201980086920A CN113348167A CN 113348167 A CN113348167 A CN 113348167A CN 201980086920 A CN201980086920 A CN 201980086920A CN 113348167 A CN113348167 A CN 113348167A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
group
pharmaceutically acceptable
ring
mixture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980086920.0A
Other languages
English (en)
Inventor
吴耀祥
金其辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nexas Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Nexas Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nexas Pharmaceutical Co ltd filed Critical Nexas Pharmaceutical Co ltd
Publication of CN113348167A publication Critical patent/CN113348167A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/74—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及药物化合物、组合物及方法，特别是因为它们涉及用于治疗和/或预防与TGFβR1活性相关的增殖性病症，例如癌症或纤维化的组合物和方法。本发明提供如本文进一步描述的式(I)和式(II)化合物，其具有增强对靶组织和器官的组织特异性的酸性部分。本发明包括药物组合物、药物组合以及使用这些化合物治疗包括癌症或纤维化的病症的方法。

Description

用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺 衍生物
发明领域
本发明的领域为化合物、药物组合物及方法，特别在其与用于治疗细胞增生病症例如纤维化或癌症的组合物及方法有关时，特别是在本发明化合物由于其药代动力学特性而倾向于以相对较高浓度积聚的组织及器官中。
发明背景
本发明是关于具有酸性部分的新的芳氧基吡啶基化合物，其抑制转化生长因子β受体1(TGFβR1)的活性，且由于酸性部分而倾向于具有有限的全身分布且因此限制脱靶组织暴露于抑制剂。化合物必须用于治疗在消化道及首过代谢组织(肝脏、肾脏)中出现的病症，例如癌症及纤维化。本发明提供包含该化合物的药物组合物，以及使用该化合物治疗癌症，优选结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、胰脏癌、骨髓增生异常综合征(MDS)和胃癌，和/或纤维化，优选肝纤维化及慢性肾病的方法。
转化生长因子β(TGF-β或TGFβ)为多功能的细胞因子，其结合于TGF-βI型及II型丝氨酸/苏氨酸激酶受体的杂聚复合物且活化TGF-β受体复合物，该复合物磷酸化和活化SMAD2及SMAD3，其接着与SMAD4结合且迁移至细胞核中且调节不同目标基因的表达。TGF-β受体信号转导途径的关键参与者包括TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβR1、TGFβR2、SMADs、SnoN、SARA、SKI、DAB、TRAP、TAKI、SMIF、E2F4、E2F5、RBLl、RBL2、RBI、TFDPl、TFDP2、SMURFl、SMURF2、P300、CBP及JUN。SMAD介导的TGF-β受体途径经由已与一些适应症中的癌症及肿瘤进展相关的TGF途径来调节各种细胞及信号传导(Elliott等人(2005)J Clin Oncol 23:2078；Levy等人(2006)Cytokine&Growth Factor Rev 17:41-58)。存在一些类型的如下癌症：其中由肿瘤或由肿瘤微环境中的间质产生的TGF配体可参与肿瘤进展。
TGF-β1与人类前列腺癌及晚期胃癌中的血管生成、癌转移及不良预后相关(Wikstrom,P.等人(1998)Prostate 37:19-29；Saito,H.等人(1999)Cancer 86:1455-1462)。在乳腺癌中，不良预后与升高的TGF-β相关联(Dickson等人(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:837-841；Kasid等人(1987)Cancer Res.47:5733-5738；Daly等人(1990)J.Cell Biochem.43:199-211；Barrett-Lee等人(1990)Br.J Cancer 61:612-617；King等人(1989)J.Steroid Biochem.34:133-138；Welch等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:7678-7682；Walker等人(1992)Eur.J.Cancer 238:641-644)，且通过他莫昔芬治疗诱导TGF-β1(Butta等人(1992)Cancer Res.52:4261-4264)与他莫昔芬治疗对于乳腺癌失效相关(Thompson等人(1991)Br.J.Cancer 63:609-614)。抗TGFβ1抗体抑制无胸腺小鼠中MDA-231人类乳腺癌细胞的生长(Arteaga等人(1993)J.Clin.Invest.92:2569-2576)，其为与脾脏自然杀伤细胞活性增加相关的治疗。用潜伏性TGFβ1转染的CHO细胞也在裸小鼠中显示降低的NK活性及增加的肿瘤生长(Wallick等人(1990)J.Exp.Med.172:1777-1784)。因此，由乳房肿瘤分泌的TGF-β可引起内分泌免疫抑制。已显示TGFβ1的高血浆浓度指示晚期乳腺癌患者的不良预后(Anscher等人(1993)N.Engl.J.Med.328:1592-1598)。在高剂量化学疗法及自体骨髓移植之前具有高循环TGF的患者处于肝静脉闭塞性疾病(15-50％的所有患者，死亡率高达50％)和特发性间质性肺炎(40-60％的所有患者)的高风险下。这些发现意味着：1)升高的TGFβ血浆水平可用于鉴别处于风险下的患者，以及2)TGFβ信号传导的减少可降低针对乳腺癌患者的这些常用治疗的发病率及死亡率。
近来的公布文本也表明TGFβ信号传导在驱动肿瘤对标准护理疗法，包括化学疗法及受体酪氨酸激酶的耐受性中可以是重要的(WO2012138783)。特别是，在结肠癌中，已显示特定基因表达签名分离了对常用的第一线治疗具有耐受性的一群患者。当TGFβ途径被TGFβRI特异性小分子抑制剂阻断时，这些肿瘤细胞恢复对治疗的敏感性(Huang等人(2012)Cell151:937-950；Sadanandam等人(2013)Nat Med 19:619-625；Vermeulen等人(2013)Nat Ned19:614-618；Roepman等人(2014)134:552-562)。
骨髓增生异常综合征(MDS)为髓室中的造血系统病症，其特征在于骨髓细胞的无效产生。MDS与由降低的SMAD7水平表示的TGFβ途径改变有关。SMAD7为一种抑制性SMAD，其用于抑制TGFβ介导的SMAD信号传导且在经由TGFβRI及TGFβRII的配体活化的信号传导的下游。因此认为SMAD7的过度表达导致MDS中的TGFβ信号传导过度活化，且此表型可通过用TGFβRI小分子抑制剂治疗来逆转(Zhou等人(2011)Cancer Res.71:955-963)。类似地，在胶质母细胞瘤(GBM)中，TGFβ配体水平升高且与疾病进展相关。已显示反义寡核苷酸治疗剂AP1002在一个亚组的GBM患者中潜在地具有活性(Bogdahn等人(2011).Curr PhannBiotechnol)。在黑素瘤中，TGFβ途径信号传导活化也与对BRAF及MEK抑制剂的耐受性有关(Sun等人(2014)Nature.508:118-122)。
许多恶性细胞分泌转化生长因子-β(TGF-β)，一种强效免疫抑制剂，表明TGFβ产生可表示肿瘤逃避宿主免疫监视的一种重要机制(Flavell等人(2010)Nat Rev Immunol 10:554-567；Kast等人(1999)Leukemia 13:1188-1199)。建立在带瘤宿主中具有破坏的TGFβ信号传导的白细胞亚群为癌症免疫疗法提供一种潜在手段，该癌症免疫疗法单独或与一种或多种其他免疫疗法组合，例如与一种或多种PD-1抑制剂(例如纳武单抗(nivolumab)、派立珠单抗(pembrolizumab))、PD-L1抑制剂、癌症疫苗及双特异性免疫接合分子(例如IMCgp100)组合。已在临床前显示由淋巴细胞产生的TGFβ配体拮抗肿瘤免疫监视(Donkor等人(2012)Development.Oncoimmunology 1:162-171，Donkor等人(2011)CytokineImmunity 35:123-134)；已显示临床前破坏此轴在鼠类模型中及体外提供抗肿瘤益处(Zhong等人(2010)Cancer Res 16:1191-1205；Petrausch等人(2009)J Immunol 183:3682-3689)；Wakefield等人(2013)Nat.Rev Cancer 13:328-341)。相比于单独的结合剂，结合TGFβ及PD-L1两者的双特异性融合蛋白也展现协同抗肿瘤活性。Lan等人,Sci.Transl.Med.第10卷,2018年1月17日。在T细胞中具有破坏的TGFβ信号传导的转基因动物模型能够根除通常致死性的过度表达TGFβ的淋巴瘤EL4(Gorelik及Flavell,(2001)Nature Medicine 7(10):1118-1122)。下调肿瘤细胞中的TGF分泌使得宿主中的免疫原性恢复，T细胞对TGFβ不敏感导致加速的分化及自体免疫性，可能需要其成分以对抗耐受宿主中表达自体抗原的肿瘤。TGFβ的免疫抑制作用也牵涉到基于CD4/CD8 T细胞计数具有低于预测的免疫反应的HIV患者亚群(Garba等人J.Immunology(2002)168:2247-2254)。TGFβ中和抗体能够逆转培养物中的该作用，表明TGFβ信号传导抑制剂可用于逆转该HIV患者亚组中存在的免疫抑制。
在癌发生的最早阶段期间，TGFβ1可充当强效肿瘤抑制剂且可介导一些化学预防剂的作用。然而，在恶性瘤产生及进展期间的一些时间点，肿瘤细胞似乎与在微环境中出现生物活性TGFβ并行地逃避TGFβ依赖性生长抑制。TGFβ的双重肿瘤抑制/肿瘤促进作用已在角质细胞中过度表达TGFβ的转基因系统中最清楚地阐明。尽管转基因对形成良性皮肤病变更具抗性，但转基因中的转移性转化比率显著增加(Cui等人(1996)Cell 86(4):531-42)。
原发性肿瘤中的恶性细胞的TGFβ产量似乎随着肿瘤进展阶段前进而增加。许多主要上皮癌中的研究表明，通过人类癌症增加的TGFβ产量作为肿瘤进展期间的相对晚期事件出现。另外，这种肿瘤相关TGFβ为肿瘤细胞提供选择性优势且促进肿瘤进展。TGFβ对细胞/细胞及细胞/基质相互作用的影响导致侵袭及癌转移的更大倾向。肿瘤相关的TGF可允许肿瘤细胞逃避免疫监视，因为其为活化淋巴细胞的克隆扩增的强效抑制剂。也显示TGFβ抑制血管生长抑素产生。
癌症治疗模式例如放射疗法及化学疗法诱导在肿瘤中产生活化的TGFβ，由此选择对TGFβ生长抑制作用具抗性的恶性细胞的过度生长。因此，这些抗癌治疗提高具有增强的生长及侵袭性的肿瘤的风险且促进该肿瘤产生。在此情况下，靶向TGFβ介导的信号转导的活性剂可以是极有效的治疗策略。已显示肿瘤细胞对TGFβ的耐受性抵消了放射疗法及化学疗法的许多细胞毒性作用，且基质中TGFβ的治疗依赖性的活化可能甚至是有害的，因为其可使得微环境更有助于肿瘤进展且促进组织损伤，导致纤维化。开发TGFβ信号转导抑制剂可能在单独使用或与其他疗法组合使用时对治疗进展的癌症有益。
另外，本领域中已知TGFβ信号传导涉及纤维化病症，例如肝纤维化及慢性肾病。参见例如Ueha S等人2012.Front Immunol.3:71.Cellular and molecular mechanisms ofchronic inflammation-associated organ fibrosis；Bottinger等人2002.J Amer SocNephrol.13:2600.TGFβSignaling in Renal Disease；Trachtman H.等人2011.KidneyInternational 79:1236.A phase 1,single-dose study of fresolimumab,an anti-TGFβantibody,in treatment-resistant primary focal segmental glomerulosclerosis；和Rosenbloom J等人2010.Narrative review:fibrotic diseases:cellular andmolecular mechanisms and novel therapies.Ann Intern Med 152:159-166。
本领域中已知的TGFβR1的小分子抑制剂用于治疗癌症和/或纤维化。参见例如WO2012/002680、WO2009/022171、WO2004/048382、WO2002/094833及WO2016/057278。不幸的是，已知类别的抑制剂尚未产生任何达到监管批准的药物(尽管有至少一种，即Galunisertib仍在研究中)，可能是因为TGFβR1的多种生物活性，其可在与治疗功效所需类似的体内浓度下产生毒性反应。
Figure BDA0003136327520000051
仍需要新的TGFβR1小分子抑制剂，其适用于治疗细胞增生病症，如癌症及纤维化，且特别是具有如下药代动力学特性的抑制剂：可在待治疗的器官或组织中提供较高浓度且在其他组织中提供较低有效浓度，从而可降低非目标组织中的毒性作用。例如，小分子抑制剂可经口服施用以治疗消化系统癌症，小分子抑制剂可在消化系统中与靶向组织直接相互作用而无需全身分布。类似地，这些化合物可具有使其优先聚集于例如肝脏或肾脏的目标器官中，以使其能够用于治疗那些器官中的癌症的药代动力学特性，而该化合物仍可在其完全进入全身循环之前相对快速地排泄，因此不产生倾向于在其它地方例如心脏组织中产生毒性的高全身药物浓度。
本发明提供化合物，其抑制TGFβR1(也称为Alk5)，且在不干扰与目标位点结合的结构区域中包含酸性部分。本发明化合物即使仅间歇地存在也可有效；因此，未必需要长保留时间(长的体内半衰期)和维持药物水平高于最低抑制浓度(MIC)以获得治疗功效，特别在本发明化合物与其它抗癌治疗剂，包括PD-1或PD-L1抑制剂组合使用时。这些化合物因此用于治疗例如肝脏、肾脏及胃肠道系统的靶向组织中的癌症及纤维化病症，同时在非靶向器官或组织中呈现降低的毒性。
在不受理论束缚的情况下，式(I)和式(II)化合物中的酸性部分倾向于降低许多组织中的药物浓度或促进相对快速排泄，同时在例如结肠、小肠、肝脏和/或肾脏中产生局部有效浓度，因此相对于用于这些器官的TGFβR1的非酸性抑制剂增加治疗指数。增加这些组织中的治疗指数特别有利于口服施用。也相信酸性化合物经由转运多肽(例如OATP1、OATP2)主动转运至肝脏及肾脏组织中，因此在那些器官中产生局部浓度，即使在化合物进入全身循环时也如此。另外，由于结肠癌经常转移至肝脏；也预期本发明化合物通过在结肠及肝脏组织两者中呈现局部高浓度而抑制癌转移。本发明化合物因此特别用于治疗结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、肝癌及胃癌，以及消化系统和首过代谢系统中的纤维化，特别是肝纤维化及肾纤维化病症。
发明简述
在一个方面，本发明提供具有根据式I的结构的杂环化合物：
Figure BDA0003136327520000061
其中：
环A为5-6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员，任选地进一步被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基及C3-C6环烷基，或与其它苯基或吡啶基环稠合；
R1是选自H、卤素、CN、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基、苯基、及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
R2在每次出现时独立地选自卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
Cy为选自C3-C6环烷基、苯基和含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基的环，且其任选地进一步被一个或两个选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
L为选自以下的二价连接体：键、CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-和-(CR2)m-X-(CR2)n-，
其中R在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；且
X为含有1至4个选自N、O和S的杂原子作为环成员的5元杂芳环；
或其可药用盐。
在另一方面中，本发明提供式(II)化合物：
Figure BDA0003136327520000071
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基及C3-C6环烷基；
R1是选自CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、5-6元杂环基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自Q1的基团取代；
Q1在每次出现时独立地选自卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
L1为选自以下的二价连接体：-C(R9)2-、-(C(R10)2)2-4-、-O-(C(R10)2)1-3-和-(C(R10)2)m-X-C(R10)2)n-；
R9各自独立地为C1-C2烷基，或两个R9可与两者所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
R10在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R10基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；
X为吡唑基、三唑基或四唑基环；
Z2是选自CH、CQ2及N；且
q为0或1；
Q2是选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
本发明的其他方面是关于包含式(I)或式(II)化合物的药物组合物。在其他方面中，本发明提供使用本发明的化合物和组合物治疗病症例如癌症的方法，如本文进一步公开。本文公开了本发明的其他方面。
尽管描绘为特定互变异构体，但应当理解，式(I)和式(II)化合物包括其他互变异构体，特别是在式(I)化合物的四唑环部分中。
本文所述的化合物可用于多种合适的目的。在一些实施方案中，上文所述的化合物可用于疗法，特别是治疗细胞增生性病症的疗法，该增生性病症例如癌症及纤维化病症，特别是胃肠道系统或首过代谢系统的病症，包括本文所述的病症。
在另一方面中，本发明提供一种药物组合物，其包含本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式的化合物以及至少一种可药用的载体或赋形剂。
在另一方面中，本发明提供一种治疗和/或预防细胞增生病症，例如癌症或纤维化的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式的化合物，或含有至少一种本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式的化合物的药物组合物。尽管适合于治疗许多细胞增生性病症，但化合物特别指定用于治疗与TGFβR1(也称为Alk5)的过度活性相关的癌症，特别是肝脏、肾脏及胃肠道系统的癌症，其中其理化特性促进这些器官中的较高局部浓度且减少在倾向于出现毒性效应的其他组织中的暴露。
在另一方面中，本发明提供本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式的化合物用于制备药物的用途。本发明的酸性化合物特别适用于制备用于治疗与TGFβR1(也称为Alk5)的过度活性相关的癌症，特别是肝脏、肾脏及胃肠道系统的癌症的药物。
在另一方面中，本发明提供一种治疗和/或预防个体的细胞增生病症的组合，该组合包含有效量的本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式，或其可药用盐，以及有效量的第二预防剂或治疗剂，其用于治疗和/或预防个体的细胞增生病症，例如癌症或纤维化，个体优选为已诊断为需要治疗此类病症的个体。与本发明化合物组合使用的适合的第二治疗剂包括小分子及抗体治疗剂，其适用于治疗与用式(I)或式(II)和其亚式的化合物所治疗相同的病症。用于此类组合的化学治疗剂包括5-氟尿嘧啶；甲酰四氢叶酸；奥沙利铂；卡培他滨；伊立替康；瑞戈非尼(regorafenib)；曲氟尿苷；替吡嘧啶(tipiracil)；靶向VEGF的药物，例如贝伐单抗(bevacizumab)、ziv-阿柏西普(aflibercept)或雷莫芦单抗(ramucirumab)；或靶向EGFR的药物，例如西妥昔单抗或帕尼单抗(panitumumab)。
在一个方面，本发明的组合包含式(I)或式(II)或其任何亚式的化合物与免疫肿瘤学治疗剂，例如PD-1或PD-L1抑制剂，或其他帮助身体的自身免疫系统识别及对抗癌细胞的已知的检查点抑制剂的组合。检查点抑制剂帮助个体的免疫系统识别及攻击异常细胞，例如癌细胞，且可显著加强化学疗法，例如本文公开的化合物的功效。适合的检查点抑制剂包括生物制剂以及小分子治疗剂；这些的实例包括伊匹单抗(ipilimumab)、纳武单抗(nivolumab)、阿特珠单抗(atezolizumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、派立珠单抗(pembrolizumab)、缇勒珠单抗(tislelizumab)和德瓦鲁单抗(durvalumab)。
在另一方面中，本发明提供一种治疗和/或预防个体的增生病症、癌症或纤维化的方法，该方法包含向有需要的个体施用有效量的上文所述的组合，其含有本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式的化合物。本发明的酸性化合物特别适用于治疗与TGFβR1(也称为Alk5)的过度活性相关的癌症，特别是肝脏、肾脏及胃肠道系统的癌症。
在另一方面中，本发明提供一种抑制TGFβR1活性的方法，该方法包含将有效量的本文所述的式(I)或式(II)或任何亚式或含有此类化合物组合的药物组合物向有需要的个体施用或与具有此类活性的细胞接触。
本发明的其他方面及实施方案描述于以下详细描述及实施例中或根据以下详细描述及实施例将是显而易见的。
详细描述
除非另外定义，否则本文中所使用的所有技术及科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。本文所提及的所有专利、专利申请、公开的专利申请及其他公布文本均以全文引用的方式并入本文中。若此部分中所阐述的定义与以引用的方式并入本文中的专利、专利申请或其他公布文本中所阐述的定义相反或以其他方式与其不符，则相对于以引用的方式并入本文中的定义，以此部分中所阐述的定义为主。
如本文所用，“一种”或“一个”的含义是“至少一种”或“一个或多个”。
如本文所用，术语“个体”是指动物。在某些方面中，动物为哺乳动物。个体也指例如灵长类(例如，人类)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔子、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施方案中，个体为人类。如本文所用的“患者”是指人类个体。
如本文所用，术语“抑制”是指降低或压制既定病况、症状或病症或疾病，或显著降低生物活动或过程的基线活性。
如本文所用，在一个实施方案中，术语“治疗”任何疾病或病症是指改善疾病或病症(即，减缓或遏制或减少疾病或其至少一种临床症状的进展)。在另一实施方案中，“治疗”是指缓解或改善至少一个生理参数，包括患者可能无法辨别的生理参数。在另一实施方案中，“治疗”是指在身体上(例如稳定可辩别的症状)、生理上(例如身体参数稳定)或这两方面调节疾病或病症。
在又一实施方案中，“治疗”是指预防或延缓疾病或病症的发病或发展或进展。
如本文所用，除非本文中另外指示或与上下文明显矛盾，否则本发明的上下文中(特别在权利要求书的上下文中)所用的术语“一种”、“一个”、“该”及类似术语应解释为涵盖单数及复数形式两者。
“任选地被取代”含义是提及的基团可未被取代或可在一个或多个位置被适合于取代该基团的基团，或那些指定基团中的任一个或任何组合取代。取代基的数量、位置及选择理解为仅涵盖熟练的化学家将预期为相当稳定的那些取代；因此，‘氧代’将不是例如芳基或杂芳基环上的取代基，且单个碳原子将不具有三个羟基或氨基取代基。
如本文所用，“卤代”或“卤素”可以是氟、氯、溴或碘。
如本文所用的“C1-C6烷基”或“C1-6烷基”指示具有1-6个碳原子的直链或支链烷基。如果指定不同碳原子数，例如C4或C3，则相应地修正定义，例如“C1-C4烷基”将表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基。
如本文所用的“C1-C6烷氧基”或“C1-6烷氧基”指示具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基。如果指定不同碳原子数，例如C4或C3，则相应地修正定义，例如“C1-C4烷氧基”将表示甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。
如本文所用的“C1-C4卤代烷基”或“C1-4卤代烷基”指示具有1-4个碳原子的直链或支链烷基，其中至少一个氢已被卤素代替。卤素替代数可以是一个氢原子至未被取代的烷基上的氢原子数。如果指定不同碳原子数，例如C6或C3，则相应地修正定义。因此，“C1-C4卤代烷基”将表示具有至少一个被卤素取代的氢的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基，例如其中卤素为氟：CF3CF2-、(CF3)2CH-、CH3-CF2-、CF3CF2-、CF3、CF2H-、CF3CF2CHCF3或CF3CF2CF2CF2-。
如本文所用的“C3-C8环烷基”是指具有3至8个碳原子的饱和单环烃环。此类基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基及环己基。如果指定不同碳原子数，例如C3-C6，则相应地修正定义。
如本文所用的“3-6元环醚”是指含有一个氧原子作为环成员的3-6元饱和杂环，包括环氧乙烷、环氧丙烷、四氢呋喃及四氢吡喃。这些3-6元环醚可被适合用作其他杂环部分上的取代基的基团取代。
“4至8元杂环基”、“5至6元杂环基”、“3至10元杂环基”、“3至14元杂环基”、“4至14元杂环基”及“5至14元杂环基”分别是指4至8元、5至6元、3至10元、3至14元、4至14元及5至14元杂环；除非另外规定，否则该环含有选自氮、氧和硫的1至7个、1至5个或1至3个杂原子作为环成员，且该环可以是饱和或部分饱和的但不是芳族。杂环基可在杂原子或碳原子处连接。术语“杂环基”包括单环基团、稠环基团及桥连基团。杂环基的实例包括(但不限于)吡咯烷、哌啶、哌嗪、吡咯烷、吡咯烷酮、吗啉、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢噻喃、四氢吡喃、1,4-二噁烷、1,4-氧杂硫杂环己烷、8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷、3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷、3-氧杂-8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷、8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛烷、2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.1]庚烷、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷、氮杂环丁烷、亚乙二氧基、氧杂环丁烷或噻唑。优选的杂环或杂环基为含有一个选自N、O和S的杂原子的5元饱和环，以及含有一个或两个不相邻的且选自N、O和S的杂原子的6元饱和环。
如本文所用的“环醚”是指包含至少一个氧原子作为环成员的杂环。一般而言，该术语是指含有恰好一个氧原子作为环成员的杂环。环醚的特定实例包括环氧丙烷或环氧丙烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等。环醚可被一个或多个适合用作杂环上的取代基的基团取代。
“杂芳基”为完全不饱和(芳族)环。术语“杂芳基”是指5-14元单环或双环或三环芳环系统，其具有1至8个选自N、O或S的杂原子。通常，杂芳基为5-10元环或环系统(例如5-7元单环基团或8-10元双环基团)，通常为5-6元环。典型杂芳基包括呋喃、异噻唑、噻二唑、噁二唑、吲唑、吲哚、喹啉、2-噻吩基或3-噻吩基、2-呋喃基或3-呋喃基、2-吡咯基或3-吡咯基、2-咪唑基、4-咪唑基或5-咪唑基、3-吡唑基、4-吡唑基或5-吡唑基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基、3-异噻唑基、4-异噻唑基或5-异噻唑基、2-噁唑基、4-噁唑基或5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基或5-异噁唑基、3-(1,2,4-三唑基)或5-(1,2,4-三唑基)、4-(1,2,3-三唑基)或5-(1,2,3-三唑基)、四唑基、三嗪、嘧啶、2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基、3-哒嗪基或4-哒嗪基、3-吡嗪基、4-吡嗪基或5-吡嗪基、2-吡嗪基、及2-嘧啶基、4-嘧啶基或5-嘧啶基。
术语“羟基”是指基团-OH。
如本文所用的术语“烷基”是指呈直链、支链或环状构型或其任何组合的饱和烃基，且特别预期的烷基包括具有十个或更少碳原子，特别是1-6个碳原子的那些，以及具有1-4个碳原子的低级烷基。示例性烷基为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、环丙基甲基等。
烷基可以未被取代，或其可在此类取代在化学有意义的程度上被取代。典型取代基包括但不限于卤素、＝O、＝N-CN、＝N-ORa、＝NRa、-ORa、-NRa 2、-SRa、-SO2Ra、-SO2NRa 2、-NRaSO2Ra、-NRaCONRa 2、-NRaCOORa、-NRaCORa、-CN、-COORa、-CONRa 2、-OOCRa、-CORa及-NO2，其中各Ra独立地为H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C3-C8杂环基、C4-C10杂环基烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基，且Ra各自任选地被以下基团取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-ORb、＝NRb、ORb、NRb 2、SRb、SO2Rb、SO2NRb 2、NRbSO2Rb、NRbCONRb 2、NRbCOORb、NRbCORb、CN、COORb、CONRb 2、OOCRb、CORb及NO2，其中Rb各自独立地为H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C3-C8杂环基、C4-C10杂环基烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C2-C8烯基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基。烷基、烯基及炔基也可被C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基取代，它们各自可被适合于具体基团的取代基取代。当取代基在相同或相邻原子上含有两个Ra或Rb基团(例如-NRb 2，或-NRb-C(O)Rb)时，该两个Ra或Rb基团可任选地与其所连接的取代基中的原子一起形成具有5-8个环成员的环，其可在对于Ra或Rb自身允许的情况下被取代，且可含有其它杂原子(N、O或S)作为环成员。
如本文所用的术语“烯基”是指具有至少两个碳原子及至少一个碳-碳双键的如上文所定义的烷基。因此，特别预期的烯基包括直链、支链或环状烯基，其具有二至十个碳原子(例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基等)或5-10个原子(对于环状烯基)。烯基任选地被适合于本文所述的烷基的基团取代。
类似地，如本文所用的术语“炔基”是指如上文所定义且具有至少两个(优选三个)碳原子及至少一个碳-碳叁键的烷基或烯基。特别预期的炔基包括具有二至十个总碳原子的直链、支链或环状炔烃(例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、环丙基乙炔基等)。炔基任选地被适合于本文所述的烷基的基团取代。
如本文所用术语“环烷基”是指环状烷烃(即，其中烃的碳原子链形成环)，优选包括三至八个碳原子。因此，示例性环烷烃包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基及环辛基。环烷基也可包括一个或两个双键，其形成“环烯基”。环烷基任选地被适合于本文所述的烷基的基团取代。
如本文所用的术语“芳基”或“芳族部分”是指芳环系统，其可进一步包括一个或多个非碳原子。这些通常为5-6元单独的环，或8-10元双环基团，且可被取代。因此，预期的芳基包括(例如苯基、萘基等)和吡啶基。另外预期的芳基可与一个或两个5或6元芳基或杂环基稠合(即，与第一芳环上的2个原子共价结合)，因此称为“稠合芳基”或“稠合芳环”。
含有一个或多个杂原子(通常为N、O或S)作为环成员的芳族基可称为杂芳基或杂芳族基。典型杂芳基包括单环5-6元芳族基，例如吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、异噁唑基及咪唑基，以及稠合双环部分，其由这些单环基团中的一个与苯环或与杂芳族单环基团中的任一个稠合形成，以形成8-10元双环基团，例如吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、异喹啉基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基等。具有就整个环系统中的电子分布而言的芳香性特征的任何单环或稠环双环系统均包括于此定义中。其也包括其中至少与分子的其余部分直接连接的环具有芳香性特征的双环基团。通常，所述环系统含有5-12个环原子。优选杂芳基为5-6元环。
也如本文所用，术语“杂环”、“环杂烷基”及“杂环部分”在本文中可互换使用，是指其中多个原子经由多个共价键形成环的任何化合物，其中所述环包括至少一个除碳原子以外的原子作为环成员。特别预期的杂环包括具有氮、硫或氧作为非碳原子的5元及6元环(例如咪唑、吡咯、三唑、二氢嘧啶、吲哚、吡啶、噻唑、四唑等)。通常，这些环含有0-1个氧或硫原子、至少一个且通常2-3个碳原子及至多四个氮原子作为环成员。另外预期的杂环可与一个或两个碳环或杂环稠合(即，与第一杂环上的两个原子共价结合)，因此称为如本文所用的“稠合杂环”或“稠合杂环部分”。当所述环为芳族环时，这些可在本文中称为‘杂芳基’或杂芳族基。
不是芳族的杂环基可被如上文所述的适合于烷基取代基的基团取代。
芳基和杂芳基可在允许时被取代。适合的取代基包括但不限于卤素、-ORa、-NRa 2、-SRa、-SO2Ra、-SO2NRa 2、-NRaSO2Ra、-NRaCONRa 2、-NRaCOORa、-NRaCORa、-CN、-COORa、-CONRa 2、-OOCRa、-CORa及-NO2，其中各Ra独立地为H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C3-C8杂环基、C4-C10杂环基烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C2-C8烯基、C2-C8杂烯基、C2-C8炔基、C2-C8杂炔基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基，且Ra各自任选地被以下基团取代：卤素、＝O、＝N-CN、＝N-ORb、＝NRb、ORb、NRb 2、SRb、SO2Rb、SO2NRb 2、NRbSO2Rb、NRbCONRb 2、NRbCOORb、NRbCORb、CN、COORb、CONRb 2、OOCRb、CORb及NO2，其中Rb各自独立地为H、C1-C8烷基、C2-C8杂烷基、C3-C8杂环基、C4-C10杂环基烷基、C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C2-C8烯基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基。烷基、烯基及炔基也可被C1-C8酰基、C2-C8杂酰基、C6-C10芳基或C5-C10杂芳基取代，它们各自可被适合于具体基团的取代基取代。当取代基在相同或相邻原子上含有两个Ra或Rb基团(例如-NRb 2，或-NRb-C(O)Rb)时，该两个Ra或Rb基团可任选地与其所连接的取代基中的原子一起形成具有5-8个环成员的环，其可在对于Ra或Rb自身允许的情况下被取代，且可含有其它杂原子(N、O或S)作为环成员。
如本文所用的术语“烷氧基”是指经由氧原子连接的烃基，例如-O-Hc，其中烃部分Hc可具有任何数目的碳原子，通常1-10个碳原子，其可进一步包括双键或叁键且可在烷基链中包括一个或两个氧、硫或氮原子，且可被芳基、杂芳基、环烷基和/或杂环基取代。例如，适合的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、甲氧基乙氧基、苄氧基、烯丙氧基等。类似地，术语“烷硫基”是指通式-S-Hc的烷基硫化物，其中烃部分Hc如关于烷氧基所描述。例如，预期的烷硫基包括甲硫基、乙硫基、异丙硫基、甲氧基乙硫基、苄硫基、烯丙基硫基等。
如本文所用的术语‘氨基’是指基团-NH2。术语“烷基氨基”是指其中一个或两个氢原子被如上文所述的烃基Hc代替的氨基，其中氨基氮“N”可被一个或两个如关于上文所述的烷氧基所阐述的Hc基团取代。示例性烷基氨基包括甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基等。另外，术语“被取代的氨基”是指其中一个或两个氢原子被如上文所述的烃基Hc代替的氨基，其中氨基氮“N”可被一个或两个如关于上文所述的烷氧基所阐述的Hc基团取代。
如本文所用的术语‘酰基’是指式-C(＝O)-D的基团，其中D表示如上文所述的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基、或杂环。典型实例为其中D为C1-C10烷基、C2-C10烯基或炔基或苯基的基团，它们各自任选地被取代。在一些实施方案中，D可以是H；Me；Et；异丙基；丙基；丁基；被-OH、-OMe或NH2取代的C1-C4烷基；苯基；卤代苯基；烷基苯基等。
如本文所用的术语“芳氧基”是指连接至氧原子的芳基，其中芳基可进一步被取代。例如，适合的芳氧基包括苯氧基等。类似地，如本文所用的术语“芳硫基”是指连接至硫原子的芳基，其中芳基可进一步被取代。例如，适合的芳硫基包括苯硫基等。
每个烷氧基、烷硫基、烷基氨基和芳氧基等的烃部分可在适合于相关烃部分的情况下被取代。
以下列举的实施方案代表本发明的一些方面：
1.式(I)化合物：
Figure BDA0003136327520000171
其中：
环A为5-6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员，任选地与其它苯基或吡啶基环稠合，且任选地进一步被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基及C3-C6环烷基；
R1是选自H；卤素；CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
R2在每次出现时独立地选自卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
Cy为选自C3-C6环烷基、苯基和含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基的环，且其任选地进一步被一个或两个选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
L为选自以下的二价连接体：键、CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-及-(CR2)m-X-(CR2)n-，
其中R在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；且
X为含有1至4个选自N、O和S的杂原子作为环成员的5元杂芳环；
或其可药用盐。
2.根据实施方案1的化合物，其中R1是选自C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。
3.根据实施方案1或2的化合物，其中R1为甲基、苯基或2-吡啶基；或其可药用盐。
4.根据实施方案1至3中任一项的化合物，其中Cy为选自苯基和吡啶基的环，且其任选地进一步被选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
5.根据实施方案4的化合物，其具有下式：
Figure BDA0003136327520000181
其中Z为CH或N，且Q是选自H、Me、CF3、OMe及卤素；
或其可药用盐。
6.根据前述实施方案中任一项的化合物，其中L为选自以下的二价连接体：CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-及-(CR2)m-X-(CR2)n-；
或其可药用盐。
7.根据实施方案6的化合物，其中R在每次出现时独立地选自H、F及Me；
或其可药用盐。
8.根据实施方案6的化合物，其中L是选自CH2、-CH2CH2-、C(Me)2、-CHMe-、-OCH2-、-CH2CF2-、-CF2CH2-、-CMe2CH2-及-CH2CMe2-；
或其可药用盐。
9.根据前述实施方案中任一项的化合物，其为式(Ia)化合物：
Figure BDA0003136327520000191
其中Q在每次出现时独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C1-C4烷氧基；且
Z为CH、CQ或N；
或其可药用盐。
10.根据前述实施方案中任一项的化合物，其中环A为吡啶基或吡唑基，且任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
11.根据实施方案1的化合物，其中R1为吡啶基、苯基、甲基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，且任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。优选地，R1在这些实施方案中为2-吡啶基、甲基或苯基。
12.根据实施方案1至10中任一项的化合物，其为式(Ib)化合物：
Figure BDA0003136327520000192
其中R4和R5独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R4和R5可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R4和R5所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
13.根据实施方案1至10中任一项的化合物，其为式(Ic)化合物：
Figure BDA0003136327520000201
其中R6是选自C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
14.根据实施方案13的化合物，其中R6是选自甲基、乙基、异丙基和环丙基；或其可药用盐。
15.根据前述实施方案中任一项的化合物，其中L为[Cy]-(CR2)m-X-(CR2)n-，其中[Cy]指示L与基团Cy的连接点；
m为1或2；
n为0、1或2；且
X为四唑基环；
或其可药用盐。
16.根据实施方案1至15中任一项的化合物，其中L为CH2、C(Me)2、-OCH2-[T]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[T]、-CH2C(Me)2-[T]或-CF2CH2-[T]，其中[T]指示L与式(I)中四唑环的连接端；或其可药用盐。
17.根据实施方案1的化合物，其中该化合物选自实施例12-33、44-65、67和175-216的化合物；或其可药用盐。
18.式(II)化合物：
Figure BDA0003136327520000211
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基及C3-C6环烷基；
R1是选自CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、5-6元杂环基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自Q1的基团取代；
Q1在每次出现时独立地选自卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
L1为选自以下的二价连接体：-C(R9)2-、-(C(R10)2)2-4-、-O-(C(R10)2)1-3-及-(C(R10)2)m-X-C(R10)2)n-；
各R9独立地为C1-C2烷基，或两个R9可与两者所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
R10在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R10基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；
X为吡唑基、三唑基或四唑基环；
Z2是选自CH、CQ2及N；且
q为0或1；
Q2是选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
19.根据实施方案18的化合物，其中该化合物具有式(IIa)：
Figure BDA0003136327520000221
R7及R8独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R7及R8可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R7及R8所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
20.根据实施方案18或19的化合物，其中该化合物具有式(IIb)：
Figure BDA0003136327520000222
其中Z1是选自CH及N；
p为0、1或2；且
Q1各自独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
21.根据实施方案18至20中任一项的化合物，其中L1为C(Me)2、-OCH2-[C]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[C]、-CH2C(Me)2-[C]或-CF2CH2-[C]，其中[C]指示L与式(II)或(IIa)或(IIb)中羧酸的连接端；
或其可药用盐。
22.根据实施方案18至20中任一项的化合物，其中L1为-(CR10 2)m-X-(CR10 2)n-，其中m为1且n为1；或其可药用盐。
23.根据实施方案19至22中任一项的化合物，其中R7及R8各自独立地选自H和Me；或其可药用盐。
24.根据实施方案19至23中任一项的化合物，其中Z2为CH或N；或其可药用盐。
25.根据实施方案18至24中任一项的化合物，其中Z2为CH；或其可药用盐。
26.根据实施方案18的化合物，其选自实施例1、4-7、10-11、34-37、39-41、43、66、68、70-110、115-116、118-174和217的化合物；或其可药用盐。
27.化合物，其选自实施例1-217的化合物；
或其可药用盐。
28.药物组合物，其包含根据前述实施方案中任一项的化合物与至少一种可药用的载体或赋形剂。
29.治疗癌症或纤维化的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的根据实施方案1至27中任一项的化合物，或根据实施方案28的药物组合物。
30.根据实施方案29的方法，其为治疗结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、肝癌、胃癌或肝脏或肾脏中的纤维化的方法。
31.根据实施方案1至27中任一项的化合物，其用于治疗。
32.根据实施方案1至27中任一项的化合物的用途，其用于制备药物。
33.药物组合，其包含有效量的根据实施方案1至27中任一项的化合物以及其它治疗剂。
本发明的另一组实施方案包括这些：
1A.式(II)化合物：
Figure BDA0003136327520000241
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基、4-6元环醚及C3-C6环烷基；
R1是选自CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、5-6元杂环基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自Q1的基团取代；
Q1在每次出现时独立地选自卤素、CN、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
L1为选自以下的二价连接体：-C(R9)2-、-(C(R10)2)2-4-、-O-(C(R10)2)1-3-及-(C(R10)2)m-X-C(R10)2)n-；
R9各自独立地为C1-C2烷基或卤素，或两个R9可与两者所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
R10在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R10基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；
X为吡唑基、三唑基或四唑基环；
Z2是选自CH、CQ2及N；且
q为0或1；
Q2是选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
在实施方案1A的实例中，环A为吡啶基或吡唑基。
2A.根据实施方案1A的化合物，其中该化合物具有式(IIa)：
Figure BDA0003136327520000251
其中：
R7及R8独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R7及R8可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R7及R8所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
优选地，在此实施方案2A中，R7及R8各自独立地选自H、卤素和C1-C4烷基。在实施方案2A的一个实例中，R1是选自甲基、苯基、吡啶基及四氢吡喃基。
3A.根据实施方案1A或2A的化合物，其中该化合物具有式(IIb)：
Figure BDA0003136327520000252
其中Z1是选自CH及N；
p为0、1或2；且
Q1各自独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
优选地，在实施方案3A中，R7及R8各自独立地选自H、卤素和C1-C4烷基。
4A.根据实施方案1A或2A的化合物，其中R1是选自CN、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基以及含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；或其可药用盐。
5A.根据实施方案1A的化合物，其中该化合物具有式(IIc)：
Figure BDA0003136327520000261
其中R6是选自C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
在实施方案5A的一个实例中，R1选自甲基、苯基、吡啶基及四氢吡喃基。
6A.根据实施方案1A-5A中任一项的化合物，其中L1为C(Me)2、-OCH2-[C]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[C]、-CH2C(Me)2-[C]或-CF2CH2-[C]，其中[C]指示L与式(II)或(IIa)或(IIb)中的羧酸的连接端；
或其可药用盐。
7A.根据实施方案1A至5A中任一项的化合物，其中L1为-(CR10 2)m-X-(CR10 2)n-，其中m为1且n为1；或其可药用盐。
8A.根据实施方案1AA-4中任一项的化合物，其中R7及R8各自独立地选自H、Me及Et；或其可药用盐。
9A.根据实施方案1A至8A中任一项的化合物，其中Z2为CH或N；或其可药用盐。
10A.根据实施方案9A的化合物，其中Z2为CH；或其可药用盐。
11A.根据实施方案10A的化合物，其中R1为Me且L1为-C(Me)2-，或其可药用盐。
12A.根据实施方案1A的化合物，其选自实施例1、4-7、10-11、34-37、39-41、43、66、68、70-110、115-116、118-174和217的化合物；或其可药用盐。
13A.式(I)化合物：
Figure BDA0003136327520000271
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基、4-6元环醚及C3-C6环烷基；
R1是选自H；卤素；CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、苯基、5-6元杂环基及5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
R2在每次出现时独立地选自卤素、CN、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
Cy为选自C3-C6环烷基、苯基和含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基的环，且其任选地进一步被一个或两个选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
L为选自以下的二价连接体：键、CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-及-(CR2)m-X-(CR2)n-，
其中R在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；且
X为含有1至4个选自N、O和S的杂原子作为环成员的5元杂芳环；
或其可药用盐。
通常，在实施方案13A中，R1为甲基、苯基、吡啶基或四氢吡喃基。优选地，环A为吡啶基或吡唑基。另外优选地，Cy为苯基或吡啶基环，且在一些实施方案中，式(I)中所示的-NH和-L基团呈间位(1,3-二取代的)定向。
14A.根据实施方案13A的化合物，其中R1是选自C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。
15A.根据实施方案13A或14A的化合物，其中R1为甲基、苯基或2-吡啶基；或其可药用盐。
16A.根据实施方案13A至15A中任一项的化合物，其中Cy为选自苯基和吡啶基的环，且其任选地进一步被选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
17A.根据实施方案16A的化合物，其具有下式：
Figure BDA0003136327520000291
其中Z为CH或N，且Q是选自H、Me、CF3、OMe及卤素；
或其可药用盐。
在实施方案17A的优选实例中，环A为吡啶基或吡唑基。在此类化合物的许多实例中，R1是选自甲基、苯基及2-吡啶基。
18A.根据实施方案13A至17A中任一项的化合物，其中L为选自以下的二价连接体：CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-及-(CR2)m-X-(CR2)n-；
或其可药用盐。
19A.根据实施方案18A的化合物，其中R在每次出现时独立地选自H、F及Me；
或其可药用盐。
20A.根据实施方案19A的化合物，其中L是选自CH2、-CH2CH2-、C(Me)2、-CHMe-、-OCH2-、-CH2CF2-、-CF2CH2-、-CMe2CH2-及-CH2CMe2-；
或其可药用盐。
21A.根据实施方案13A至20A中任一项的化合物，其为式(Ia)化合物：
Figure BDA0003136327520000292
其中Q在每次出现时独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C1-C4烷氧基；且
Z为CH、CQ或N；
或其可药用盐。
在实施方案21A的化合物的优选实施方案中，环A为吡唑基或吡啶基环，且通常R1是选自甲基、苯基和吡啶基。
22A.根据实施方案13A至21A中任一项的化合物，其中环A为吡啶基或吡唑基，且任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
23A.根据实施方案13A的化合物，其中R1为吡啶基、苯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，且任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。
优选地，当R1为吡啶基时，其为任选地被取代的2-吡啶基，吡啶的环N原子与环A相邻(邻位)。
24A.根据实施方案13A至23A中任一项的化合物，其为式(Ib)化合物：
Figure BDA0003136327520000301
其中R4和R5独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R4和R5可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R4和R5所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
在实施方案24A的化合物的优选实施方案中，R4和R5独立地选自H、卤素、甲基、乙基及环丙基。在这些实施方案中，优选地，R4不是H。
25A.根据实施方案13A至23A中任一项的化合物，其为式(Ic)化合物：
Figure BDA0003136327520000311
其中R6是选自C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
在实施方案25A的化合物中，R1优选为甲基、苯基或吡啶基。
26A.根据实施方案25A的化合物，其中R6是选自甲基、乙基、异丙基和环丙基；或其可药用盐。
27A.根据实施方案13A至26A中任一项的化合物，其中L为[Cy]-(CR2)m-X-(CR2)n-，其中[Cy]指示L与基团Cy的连接点；
m为1或2；
n为0、1或2；且
X为四唑基环；
或其可药用盐。
28A.根据实施方案13A至27A中任一项的化合物，其中L为CH2、C(Me)2、-OCH2-[T]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[T]、-CH2C(Me)2-[T]或-CF2CH2-[T]，其中[T]指示L与式(I)中四唑环的连接端；
或其可药用盐。
29A.根据实施方案13A的化合物，其中该化合物是选自实施例12-33、44-65、67及175-216的化合物；
或其可药用盐。
30A.化合物，其选自编号实施例1-217的化合物；
或其可药用盐。
31A.药物组合物，其包含根据实施方案1A至30A中任一项的化合物与至少一种可药用的载体或赋形剂。
32A.治疗癌症或纤维化的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的根据实施方案1A至30A中任一项的化合物，或根据实施方案31A的药物组合物。
33A.根据实施方案32A的方法，其为治疗结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、肝癌、胃癌或肝脏或肾脏中的纤维化的方法。
34A.根据实施方案1A至30A中任一项的化合物，其用于治疗。
35A.根据实施方案1A至30A中任一项的化合物的用途，其用于制备药物。
36A.药物组合，其包含有效量的根据实施方案1A至30A中任一项的化合物以及其它治疗剂。
37A.药物组合物，其包含根据实施方案36A的药物组合与至少一种可药用的赋形剂。
38A.治疗有需要的个体的癌症或纤维化的方法，其包含施用有效量的根据实施方案37A的药物组合物。
除非本文另外指示或另外明显地与上下文相矛盾，否则本文所述的所有方法均可以任何合适的次序进行。使用本文所提供的任何及所有实例或示例性语言(例如“例如”)仅用于更好地阐明本发明，并不对另外所要求保护的本发明的范围造成限制。
应当进一步意识到，所有上文所定义的基团可进一步被一个或多个取代基取代，其可进一步被羟基、氨基、氰基、C1-C4烷基、卤素或C1-C4卤代烷基取代。例如，烷基或芳基中的氢原子可被氨基、卤素或C1-C4卤代烷基或烷基代替。
应当理解，在如上文所定义的所有被取代的基团中，本文中不打算包括通过用其自身的另外的取代基定义取代基而获得的化合物(例如被取代的芳基具有被取代的芳基作为取代基，后者自身被被取代的芳基取代，该取代基进一步被被取代的芳基取代等)。在此类情况下，此类取代的最大数目为三。例如，本文中具体涵盖的被取代的芳基的连续取代限于被取代的芳基-(被取代的芳基)-被取代的芳基。
对于本文公开的含有一个或多个取代基的基团中的任一个，当然应当理解，此类基团不含在空间上不切实际和/或在合成上不可行的任何取代或取代模式。另外，主题化合物包括由这些化合物的取代所产生的所有立体化学异构体。
术语“光学异构体”或“立体异构体”是指可以是本发明的给定化合物存在的各种立体异构构型中的任一个，且包括几何异构体。应当理解，取代基可连接在碳原子的手性中心处。术语“手性”是指对其镜像伴侣具有不可重叠性的特性的分子，而术语“非手性”是指可与其镜像伴侣重叠的分子。因此，本发明包括化合物的对映异构体、非对映异构体或外消旋物。“对映异构体”为一对彼此为不可重叠镜像的立体异构体。一对对映异构体的1:1混合物为“外消旋”混合物。该术语用于在适当时指代外消旋混合物。“非对映异构体”为具有至少两个不对称原子但彼此不是镜像的立体异构体。根据Cahn-lngold-Prelog R-S系统指定绝对立体化学。当化合物为纯对映异构体时，可通过R或S指定各手性碳处的立体化学。根据化合物旋转钠D线的波长下的平面偏振光的方向(右旋或左旋)，可将绝对构型未知的经拆分的化合物指定为(+)或(-)。本文所描述的某些化合物含有一个或多个不对称中心或轴，且可因此产生对映异构体、非对映异构体以及就绝对立体化学而言可定义为(R)-或(S)-的其他立体异构形式。
根据起始材料及方法的选择，化合物可以可能的异构体之一的形式或以其混合物形式存在，例如以纯光学异构体形式或以异构体混合物形式存在，例如外消旋物及非对映异构体混合物(根据不对称碳原子的数目而定)。本发明意图包括所有此类可能的立体异构体，包括外消旋混合物、非对映异构混合物及光学纯形式，另外规定的情况除外。光学活性的(R)-和(S)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。若化合物含有二取代或三取代的双键，则取代基可呈E或Z构型。若化合物含有二取代的环烷基，则环烷基取代基可具有顺式或反式构型。也意图包括所有互变异构形式。
任何所得异构体混合物可基于成分的物理化学差异例如通过色谱和/或分步结晶而分离成纯的或基本上纯的几何或光学异构体或非对映异构体。
任何所得最终产物或中间体的外消旋物可通过已知方法而拆分成光学对映体，例如通过分离其非对映异构体盐(该盐用光学活性酸或碱获得)并释放光学活性的酸性或碱性化合物。具体而言，碱性部分可因此用于将本发明化合物拆分为其光学对映体，例如通过将由光学活性酸(例如酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二乙酰基酒石酸、二-O,O’-对甲苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸)形成的盐分步结晶。外消旋产物也可通过手性色谱来拆分，例如使用手性固定相的高压液相色谱(HPLC)。
此外，本发明的化合物(包括其盐)也可以其水合物的形式获得，或包括用于其结晶的其他溶剂。本发明的化合物可固有地或经设计与可药用的溶剂(包括水)形成溶剂合物；因此，本发明意图涵盖溶剂化及非溶剂化形式两者。术语“溶剂合物”是指本发明化合物(包括其可药用盐)与一种或多种酸(硫酸、硝酸、磷酸等)的分子复合物。
可衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、丁二酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。可药用的碱加成盐可用无机碱及有机碱形成。
可衍生出盐的无机碱包括例如铵盐及元素周期表的第I列至第XII列的金属。在某些实施方案中，盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌及铜；特别适合的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐及镁盐。
有机溶剂分子。这些溶剂分子为通常用于药学领域中已知对接受者无害的溶剂分子，例如水、乙醇等。术语“水合物”是指其中溶剂分子为水的复合物。
本发明化合物，包括其盐、水合物及溶剂合物可固有地或经设计以形成多晶型物。
如本文所用，术语“盐”是指本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。“盐”特别包括“可药用盐”。术语“可药用盐”是指保留本发明的化合物的生物学效力及特性且通常在生物学上或其他方面没有不希望的性质的盐。在许多情况下，本发明化合物能够凭借氨基和/或羧基或其类似基团的存在而形成酸盐和/或碱盐。
可药用的酸加成盐可用无机酸及有机酸形成，例如乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/氢氯酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂基磺酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基磺酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及三氟乙酸盐。
可衍生盐的无机酸包括例如盐酸，可衍生盐的碱包括例如伯、仲和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代胺)、环胺、碱离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、苄星(benzathine)、胆酸盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨基丁三醇。
本发明的可药用盐可通过常规化学方法从碱性或酸性部分合成。一般而言，此类盐可通过使这些化合物的游离酸形式与化学计算量的适当碱(例如Na、Ca、Mg或K的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应，或通过使这些化合物的游离碱形式与化学计算量的适当酸反应来制备。此类反应通常在水中或有机溶剂中，或在两者的混合物中进行。通常，在可实行时，需要使用非水性介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。其他适合的盐的清单可见于例如“Remington’s Pharmaceutical Sciences”,第20版,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)中；以及“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use”,Stahl及Wermuth(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中。
本文所述的化合物及组合物可向个体施用，该个体需要治疗细胞增生病症，例如癌症或纤维化，特别是在胃肠道系统和首过代谢系统的器官及组织中发生的癌症。
使用本发明的化合物及药物组合物治疗的个体通常为诊断为需要治疗此类增生性病症中的一种或多种的哺乳动物，且个体通常为人类。通常，个体为诊断患有与TGFβR1(也称为Alk5)的过度活性相关的癌症，特别是肝脏、肾脏及胃肠道系统的癌症的患者。所述方法包含施用有效量的至少一种本发明化合物；任选地，化合物可与一种或多种其它治疗剂，特别是已知适用于治疗影响特定个体的癌症或增生性病症的治疗剂组合施用。
本发明化合物可用于治疗如本文所描述的状态、病症或疾病，或用于制备用于治疗这些疾病的药物组合物。本发明提供使用本发明化合物治疗这些疾病或制备用于治疗这些疾病的具有本发明化合物的药物组合物的方法。
术语“药物组合物”包括适合于向哺乳动物(例如人类)施用的制剂。当本发明化合物作为药物向哺乳动物(例如人类)施用时，其可以本身或以药物组合物形式给药，该药物组合物含有例如0.1至99.5％(更优选0.5至90％)的式(I)或式(II)化合物，或在本文中描述为活性成分的其任何亚属，以及可药用的赋形剂，以及任选地两种或更多种可药用的赋形剂。
短语“可药用的赋形剂”为本领域技术人员所理解，包括适合于向哺乳动物施用本发明化合物的可药用的材料、组合物或载体。赋形剂包括液体或固体填充剂、稀释剂、载体、溶剂或囊封材料，其涉及将主题活性剂从身体的一个器官或部分运载或输送至身体的另一器官或部分，或制备更易于配制、压片、储存、使用或施用的药品。每种赋形剂在与制剂的其他成分相容且对患者无害的意义上必须为“可接受的”。可充当可药用的赋形剂的材料的一些实例包括：糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉及马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素及乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，例如可可脂(cocoa butter)和栓剂蜡；油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油及大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁及氢氧化铝；褐藻酸；无热原的水；等张盐水；林格溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及药物制剂中所用的其他无毒、相容的物质。通常，可药用的赋形剂为灭菌的和/或基本上无热原的。
润湿剂、乳化剂及润滑剂(例如月桂硫酸钠及硬脂酸镁)以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂及芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。
可药用的抗氧化剂的实施例包括：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如棕榈酸抗坏血酸酯、丁羟茴醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；以及金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。
本发明制剂包括适合于口服、经鼻、吸入、局部、经皮、经颊、舌下、经直肠、经阴道和/或胃肠外施用的制剂。制剂可方便地以单位剂型呈现且可通过药剂学技术中熟知的任何方法制备。可与载体材料组合以制备单一剂型的活性成分的量一般为产生治疗作用的化合物的量。一般而言，以100％为基准，此量将在约1％至约99％、优选约5％至约70％、最优选约10％至约30％的活性成分范围内。
制备这些制剂或组合物的方法包括将本发明化合物与载体或赋形剂及任选地存在的一种或多种助剂成分结合的步骤。一般而言，通过将本发明化合物与液体赋形剂或细粉状固体赋形剂或二者均匀且紧密地结合且在必要时接着使成形来制备制剂。
适合于经口服施用的本发明制剂可以胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味基质，例如通常为蔗糖及阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉末、颗粒剂的形式，或以水性或非水性液体中的溶液或混悬液形式，或以水包油或油包水的液体乳剂形式，或以酏剂或糖浆形式，或以糖锭剂(使用惰性基质，例如明胶及甘油，或蔗糖及阿拉伯胶)和/或以漱口剂形式等，其各自含有预定量的本发明化合物作为活性成分。本发明化合物也可以推注剂、舐剂或糊剂形式施用。
在用于口服施用的本发明的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣药丸、粉末、颗粒剂等)中，将活性成分与一种或多种可药用的赋形剂混合，例如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下中的任一个：填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐及碳酸钠；溶液阻滞剂，例如石蜡；吸收促进剂，例如季铵化合物；湿润剂，例如鲸蜡醇及单硬脂酸甘油酯；吸收剂，例如高岭土及膨润土；润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂硫酸钠及其混合物；以及着色剂。在胶囊、片剂及丸剂的情况下，该药物组合物也可包含缓冲剂。也可使用赋形剂例如乳糖和高分子量聚乙二醇等将类似类型的固体组合物用作软填充及硬填充明胶胶囊中的填充剂。
片剂可通过任选地与一种或多种助剂成分一起压制或模制来制备。可使用粘合剂(例如明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如羟乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备压制片剂。模制片剂可通过在适合的机器中模制用惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物的混合物来制备。
本发明的药物组合物的片剂及其他固体剂型，例如糖衣药丸、胶囊、丸剂及颗粒，可任选地得到或制备成具有包衣及壳层，例如肠溶衣及药物制剂领域中熟知的其他包衣。其也可使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素以提供所要的释放特征、其他聚合物基质、脂质体和/或微球来配制，以便提供其中活性成分的缓慢或控制释放。其可通过(例如)经细菌截留过滤器过滤，或通过掺入在使用前可溶解于无菌水或一些其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌。这些组合物也可任选地含有遮光剂且可以是仅在或优先在胃肠道的某些部分中任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质及蜡。活性成分也可以是在适当时与一种或多种上述赋形剂一起的微囊形式。
用于经口服施用的本发明化合物的液体剂型包括可药用的乳剂、微乳剂、溶液、混悬液、糖浆及酏剂。除活性成分以外，液体剂型可含有本领域内常用的惰性稀释剂(例如水或其他溶剂)、增溶剂及乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及其混合物。
除惰性稀释剂以外，口服组合物也可包括佐剂，例如湿润剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂及防腐剂。
除了活性化合物以外，混悬液可含有助悬剂，例如乙氧基化异硬脂基醇、聚氧乙烯山梨醇及脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。
适用于经阴道施用的本发明制剂也包括含有例如本领域内已知为适当的载体的子宫托、棉塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂制剂。
用于局部或经皮施用本发明化合物的剂型包括粉末、喷雾、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液、贴剂及吸入剂。活性化合物可在无菌条件下与可药用的赋形剂和与可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。
除本发明化合物以外，粉剂及喷雾剂也可含有赋形剂，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙及聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾可另外含有常规推进剂，例如氯氟烃和挥发性的未被取代的烃，例如丁烷及丙烷。
在本发明的范畴内也涵盖眼用制剂、眼膏、粉末、溶液等。
适合于胃肠外施用的本发明药物组合物包含一种或多种本发明化合物与一种或多种可药用的载体(例如无菌等张水性或非水性溶液、分散液、混悬液或乳液)或可仅在临用前复原成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末，该组合物可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使得制剂与指定接受者的血液等张的溶质或助悬剂或增稠剂。
可用于本发明药物组合物中的适合的水性及非水性载体的实例包括水、乙醇、二醇醚、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其适合的混合物、植物油(例如橄榄油)以及可注射的有机酯(例如油酸乙酯)。适当的流动性可例如通过使用包衣材料(例如卵磷脂)、在分散液的情况下通过维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持。
这些组合物也可含有佐剂，例如防腐剂、湿润剂、乳化剂及分散剂。微生物作用的预防可通过包括各种抗细菌及抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸等来确保。也可能需要在组合物中包括等张剂，例如糖、氯化钠等。另外，可注射药物形式的延长吸收可通过包括延迟吸收的试剂(例如单硬脂酸铝及明胶)来达成。
在一些情况下，为延长药物的效果，需要减缓药物自皮下或肌肉内注射的吸收。这可通过使用水溶性较差的结晶或无定形物质的液体混悬液来实现。药物吸收速率则视其溶解速率而定，而溶解速率又可视晶体大小及结晶形态而定。或者，通过将药物溶解或悬浮于油性载体中来实现胃肠外施用的药物形式的延迟吸收。
本发明的制剂可经口服、胃肠外、局部或经直肠给药。其当然以适合于各施用途径的形式给药。例如，其是以片剂或胶囊形式施用，通过注射、吸入施用，以眼部洗剂、软膏、栓剂等形式施用，通过注射、输注或吸入施用，通过洗剂或软膏局部施用，以及通过栓剂经直肠施用。
如本文所使用，短语“胃肠外施用”及“胃肠外给药”的含义是除经肠和局部施用以外的施用模式，通常为注射，且包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内及胸骨内注射及输注。静脉内输注有时为递送本发明化合物的优选方法。输注可用于递送单个日剂量或多个剂量。在一些实施方案中，本发明化合物以15分钟与4小时之间、通常在0.5与3小时之间的时间间隔、通过输注来施用。该输注可每天一次、每天两次或至多每天三次使用。
这些化合物可通过任何适合施用途径向人类及其他动物施用以供治疗，施用途径包括经口、经鼻(如通过例如喷雾剂)、经直肠、阴道内、胃肠外、脑池内及局部，通过粉末、软膏或滴剂，包括经颊及舌下施用。
不论所选择的施用途径如何，可以适合的水合形式和/或本发明的药物组合物来使用的本发明化合物是通过本领域技术人员已知的常规方法配制成可药用的剂型。
可改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以便获得一定量的活性成分，该量的活性成分对于特定患者、组合物及施用模式可有效地达成所需治疗反应，而对患者无毒。
所选剂量水平将视多种因素而定，包括所用的本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性；施用途径；施用时间；所用特定化合物的排泄速率；治疗持续时间；与所用特定化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料；所治疗患者的年龄、性别、体重、状态、整体健康及先前病史；以及医学领域中熟知的类似因素。
熟知本领域技术的医师或兽医可容易确定及开具所需药物组合物的有效量。例如，医师或兽医可以低于达到所需治疗作用所需的水平开始施用药物组合物中所用的本发明化合物，且逐渐增加剂量直至达到所需作用。
一般而言，本发明化合物的适合日剂量为有效产生治疗效果的最低剂量的化合物的量。此有效剂量通常视上文所描述的因素而定。一般而言，本发明化合物用于患者的静脉内及皮下剂量当根据指定效果使用时，在每天每公斤体重约0.0001至约100mg，更优选约0.01至约50mg/kg/天，且更优选约1.0至约100mg/kg/天范围内。有效量为达到所需或可观测的治疗效果的量。
必要时，活性化合物的有效日剂量可以2次、3次、4次、5次、6次或大于6次亚剂量施用，这些亚剂量以单位剂量形式分别在全天内的适当间隔时间施用。经口或通过吸入递送的化合物通常以每天一至四次剂量施用。通过注射递送的化合物通常每天一次或每隔一天施用一次。通过输注递送的化合物通常以每天一至三次剂量施用。
虽然本发明化合物有可能单独施用，但优选以药物组合物(例如本文所描述的药物组合物)形式施用该化合物。
药物组合物、组合及其他相关用途
在另一方面中，本发明提供药物组合物，其包含本文所述的式(I)或式(II)或其任何亚式的化合物与至少一种可药用的载体或赋形剂。
上述化合物可用于任何适合的目的。例如，本发明化合物可用于疗法和/或测试。
在另一方面中，本公开物提供治疗和/或预防增生病症，例如癌症或肿瘤的方法。化合物、组合物及方法特别适用于治疗与TGFβR1(也称为Alk5)的过度活性相关的癌症，特别是肝脏、肾脏及胃肠道系统的癌症。
在另一方面中，本公开物提供上文所述的化合物用于制备药物的用途。
在另一方面中，本公开物提供治疗和/或预防增生病症的组合产品，该组合产品包含有效量的本文公开的式(I)或式(II)或其任何亚式的化合物或其可药用盐，以及有效量的第二预防剂或治疗剂，用于治疗和/或预防增生病症、癌症或肿瘤或纤维化，特别用于治疗结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、肝癌及胃癌以及消化系统及首过代谢系统中的纤维化，特别是肝纤维化及肾纤维化病症。
在另一方面中，本发明提供抑制个体的TGFβR1活性的方法，其包含向个体施用有效量的如本文所述的式(I)或式(II)化合物。
在另一方面中，本发明提供抑制组织或细胞中的TGFβR1活性的方法，其包含使组织或细胞与有效量的如本文所述的式(I)或式(II)化合物接触。
在一些实施方案中，化合物为本文公开的编号实施例的化合物中的任一个。
制剂
可制备本文所述的化合物的任何适合的制剂。一般参见Remington’sPharmaceutical Sciences,(2000)Hoover,J.E.编,第20版,Lippincott Williams andWilkins Publishing Company,Easton,Pa.,第780-857页。选择适合于适当施用途径的制剂。在化合物足够酸性以形成稳定无毒性碱盐的情况下，施用盐形式的化合物可以是适当的。可药用盐的实例为由形成生理学上可接受的阴离子的酸形成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、丁二酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐及α-甘油磷酸盐。也可形成适合的无机盐，包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐及碳酸盐。可药用盐是使用本领域内熟知的标准方法获得，例如通过足够碱性的化合物(例如胺)与适合的酸，获得生理学上可接受的阴离子。也制备碱金属(例如钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐以及羧酸及四唑的胺盐。
当在药理学组合物中施用预期化合物时，预期该化合物可与可药用的赋形剂和/或载体混合配制。例如，预期化合物可作为中性化合物或可药用盐经口服施用，或在生理盐水溶液中静脉内施用。常规缓冲液，例如磷酸盐、碳酸氢盐或柠檬酸盐可用于此目的。当然，本领域技术人员可在本说明书的教导内修改制剂，以得到用于特定施用途径的多种制剂。具体而言，预期化合物可被修改以使其更可溶于水或其他载体，其可例如在属于本领域内一般技术的微小修改(盐配制、酯化等)下容易地完成。属于本领域内一般技术的还包括选择或修改特定化合物的施用途径及给药方案以管理本发明化合物的药代动力学，以使患者中的有益作用最大化。
具有如本文所述的式I和II的化合物一般可溶于有机溶剂中，例如氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、异丙醇、乙腈、甘油、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等。在一个实施方案中，本发明提供制剂，其通过混合具有式I和II的化合物与可药用的赋形剂而制备。在一个方面，制剂可使用包含以下的方法制备：a)将所述化合物溶解于水溶性有机溶剂、非离子溶剂、水溶性脂质、维生素(例如生育酚)、脂肪酸、脂肪酸酯或其组合中，以得到溶液；以及b)添加生理盐水或含有1-10％碳水化合物溶液的缓冲液。在一个实例中，碳水化合物包含右旋糖。使用本发明方法获得的药物组合物为稳定的且适用于动物及临床应用。
用于本发明方法的水溶性有机溶剂的说明性实例包括且不限于聚乙二醇(PEG)、醇、乙腈、N-甲基-2-吡咯烷酮、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜或其组合。醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、异丙醇、甘油或丙二醇。
用于本发明方法的水溶性非离子表面活性剂的说明性实例包括且不限于
Figure BDA0003136327520000431
聚乙二醇改良的
Figure BDA0003136327520000439
(聚氧乙烯二醇三蓖麻酸酯35)、氢化
Figure BDA0003136327520000432
氢化
Figure BDA0003136327520000433
PEG-丁二酸酯、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、
Figure BDA0003136327520000434
(聚乙二醇660 12-羟基硬脂酸酯)、脱水山梨糖醇单油酸酯、泊洛沙姆、
Figure BDA0003136327520000435
(乙氧基化桃仁油)、
Figure BDA0003136327520000437
(癸酰基-己酰基聚乙二醇-8-甘油酯)、
Figure BDA0003136327520000436
(甘油酯)、
Figure BDA0003136327520000438
(PEG 6辛酸甘油酯)、甘油、二醇-聚山梨醇酯或其组合。
用于本发明方法的水溶性脂质的说明性实例包括但不限于植物油、甘油三酯、植物油或其组合。脂质油的实施例包括但不限于蓖麻油、聚乙二醇蓖麻油、玉米油、橄榄油、棉籽油、花生油、薄荷油、红花油、芝麻油、大豆油、氢化植物油、氢化大豆油、椰子油的甘油三酯、棕榈籽油，以及其氢化形式，或其组合。
用于本发明方法的脂肪酸及脂肪酸酯的说明性实例包括但不限于油酸、单甘油酯、甘油二酯、PEG的单或二脂肪酸酯或其组合。
本领域技术人员可在本说明书的教导内修改制剂，以得到用于特定施用途径的许多制剂。具体而言，化合物可被修改以使其更可溶于水或其他载体。属于本领域内一般技术的还包括修改特定化合物的施用途径及给药方案以管理本发明化合物的药代动力学，以使患者中的有益作用最大化。
药物组合
实施方案的方法包含施用有效量的至少一种示例性本发明化合物；任选地，化合物可与一种或多种其它治疗剂，特别是已知适用于治疗使个体痛苦的病症或疾病的治疗剂组合施用。
其它活性成分可在与至少一种示例性本发明化合物分离的药物组合物中施用，或可与至少一种示例性本发明化合物一起包括于单一药物组合物中。其它活性成分可与施用至少一种示例性本发明化合物同时、在其之前或之后施用。
使用示例性化合物及其药物组合物的方法
本发明也提供用于治疗和/或预防增生病症或癌症(例如本文公开的那些)的药物组合物，其包含具有式I或II的任何化合物，或本文实施例1-110的化合物中的任一个。
为了实践本发明方法，具有式的化合物及其药物组合物可经口、胃肠外、通过吸入、局部、经直肠、经鼻、颊内、经阴道、经由植入式贮器或其他施用方法施用。如本文所使用的术语“胃肠外”包括皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内及颅内注射或输注技术。
无菌的可注射的组合物，例如无菌可注射水性或油性混悬液可根据本领域内已知的技术使用适合的分散剂或湿润剂及助悬剂来配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液。在可接受的载体及溶剂中，可采用的包括甘露醇、水、林格溶液及等张氯化钠溶液。适合的载体及其他药物赋形剂通常为无菌的。
另外，无菌的非挥发性油常规地用作溶剂或悬浮介质(例如合成的单甘油酯或二甘油酯)。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物适用于制备可注射剂，可药用的油(例如橄榄油或蓖麻油，特别以其聚氧乙基化形式)也是如此。这些油溶液或混悬液也可含有长链醇稀释剂或分散剂或羧甲基纤维素或类似分散剂。通常用于制备可药用的固体、液体或其他剂型的各种乳化剂或生物利用度增强剂也可用于配制目的。
口服施用的组合物可以是任何口服可接受的剂型，包括但不限于片剂、胶囊、乳液及水性混悬液、分散液及溶液。在用于经口使用的片剂的情况下，常用载体包括乳糖及玉米淀粉。也可添加例如硬脂酸镁的润滑剂。对以胶囊形式经口服施用，适用的稀释剂包括乳糖及干燥玉米淀粉。当水性混悬液或乳剂经口服施用时，活性成分可与乳化剂或助悬剂组合悬浮或溶解于油相中。在需要时可添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。可根据药物制剂领域中熟知的技术制备鼻气雾剂或吸入组合物，且可制备为例如生理盐水中的溶液，采用适合的防腐剂(例如苯甲醇)、吸收促进剂来增强生物可用性，和/或本领域内已知的其他溶解剂或分散剂。
另外，具有式I或式(II)或其任何亚式的化合物可单独或与其他治疗剂，例如抗癌剂组合施用，以治疗需要治疗的个体。根据本发明的组合疗法包含施用至少一种如本文所公开的示例性式(I)或式(II)或其任何亚式的化合物及至少一种其它药物活性成分。本发明化合物和其它药物活性剂可分开或一起施用。将选择本发明化合物和其它药物活性剂的量以及相对施用时机以达成所需的组合治疗效应。
如本文所描述的化合物可通过以下一般合成途径合成，其具体实施例更详细地描述于实施例中。
在本文的范畴内，除非上下文另外指示，否则只有不是本发明化合物的特定所需最终产物的成分的可容易移除的基团被指定为“保护基”。通过此类保护基保护官能团、保护基本身及其裂解反应描述于例如标准参考著作中，例如Science of Synthesis:Houben-Weyl Methods of Molecular Transformation.Georg Thieme Verlag,Stuttgart,Germany.2005.第41627页(URL:http://www.science-of-synthesis.com(电子版,第48卷))；J.F.W.McOmie,“Protective Groups in Organic Chemistry”,Plenum Press,London and New York 1973，T.W.Greene及P.G.M.Wuts,“Protective Groups in OrganicSynthesis”,第三版,Wiley,New York 1999，“The Peptides”；第3版(编者：E.Gross和J.Meienhofer),Academic Press,London and New York 1981，“Methoden derorganischen Chemie”(Methods of Organic Chemistry),Houben Weyl,第4版,第15/I卷,Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974，H.-D.Jakubke和H.Jeschkeit,“
Figure BDA0003136327520000451
Peptide,Proteine”(Amino acids,Peptides,Proteins),Verlag Chemie,Weinheim,Deerfield Beach，Basel 1982，以及Jochen Lehmann,“Chemie der Kohlenhydrate:Monosaccharide und Derivate”(Chemistry of Carbohydrates:Monosaccharides andDerivatives),Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974。保护基的特征为其可容易例如通过溶剂解、还原、光解或者在生理条件下(例如通过酶促裂解)移除(即不发生不希望的副反应)。
具有至少一个成盐基团的本发明化合物的盐可以本身已知的方式制备。例如，具有酸基团的本发明化合物的盐可例如通过用以下各种化合物处理而形成：金属化合物，例如适合的有机羧酸的碱金属盐，例如2-乙基己酸的钠盐，有机碱金属或碱土金属化合物，例如对应的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，例如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾或碳酸氢钠或碳酸氢钾，对应的钙化合物或用氨或适合的有机胺、化学计量或仅少量过量的优选使用的成盐试剂。本发明化合物的酸加成盐以常规方式获得，例如通过用酸或适合的阴离子交换试剂处理化合物。含有形成酸性和碱性盐的基团，例如游离羧基及游离氨基的本发明化合物的内盐可例如通过将盐，例如酸加成盐中和至等电点(例如用弱碱)或通过用离子交换剂处理而形成。
盐可以常规方式转化成游离化合物；金属及铵盐可例如通过用适合的酸处理来转化，且酸加成盐例如通过用适合的碱性试剂处理来转化。
可根据本发明获得的异构体的混合物可以本身已知的方式分离成单独异构体；非对映异构体可例如通过在多相溶剂混合物之间分配、重结晶和/或色谱分离(例如经由硅胶)或通过例如经由反相柱的中压液相色谱分离；且外消旋物可例如通过用光学纯成盐试剂形成盐并且分离可例如通过分步结晶或通过经由光学活性柱材料的色谱将获得的非对映异构体混合物来分离。
中间体和最终产物可根据标准方法进行后处理和/或纯化，例如使用色谱法、分配法、(重)结晶法等。
合成本发明化合物的方法步骤可在本身已知的反应条件，包括如下提及的反应条件下进行：在不存在或通常存在溶剂或稀释剂，包括例如对于所用试剂惰性且将其溶解的溶剂或稀释剂的情况下，在不存在或存在催化剂、缩合剂或中和剂，例如离子交换剂，例如阳离子交换剂的情况下，该交换剂例如以H+形式，取决于反应性质和/或反应物，在低温、常温或高温，例如在约-100℃至约190℃，包括例如约-80℃至约150℃范围内的温度下，例如在-80至-60℃下、在室温下、在-20至40℃下或在回流温度下，在大气压下或在密闭容器中，适当时在压力下和/或在惰性气氛中，例如在氩气或氮气氛围下。
在反应的所有阶段，所形成的异构体混合物可分离成单独异构体，例如非对映异构体或对映异构体，或分离成任何所需的异构体混合物，例如外消旋物或非对映异构体混合物，例如类似于Science of Synthesis:Houben-Weyl Methods of MolecularTransformation,Georg Thieme Verlag,Stuttgart,Germany,2005中所描述的方法。
除非在方法描述中另外指示，否则可从中选择适合于任何特定反应的那些溶剂的溶剂包括具体提及的溶剂，或例如为水；酯，例如低级烷基-低级烷酸酯，例如乙酸乙酯；醚，例如脂族醚，例如乙醚，或环醚，例如四氢呋喃或二噁烷；液态芳族烃，例如苯或甲苯；醇，例如甲醇、乙醇或1-丙醇或2-丙醇；腈，例如乙腈；卤代烃，例如二氯甲烷或氯仿；酰胺，例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺；碱，例如杂环氮碱，例如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮；羧酸酐，例如低级烷酸酐，例如乙酸酐；环状、直链或支链烃，例如环己烷、己烷或异戊烷；或这些溶剂的混合物，例如水溶液。该溶剂混合物也可用于例如通过色谱或分配的后处理。
也可获得呈水合物形式的化合物(包括其盐)，或其晶体可例如包括用于结晶的溶剂。可存在不同结晶形式。
本发明也涉及这样的方法：其中使用可在方法的任何阶段以中间体形式获得的化合物作为起始材料且进行剩余方法步骤，或其中起始材料是在反应条件下形成或以衍生物形式使用(例如以被保护形式或以盐形式使用)，或在方法条件下产生可通过根据本发明方法获得的化合物并在原位进一步处理的那些方法。
根据前文，本发明在另一方面中提供：
一种药物组合，其包含a)第一药剂，其为本发明化合物，例如式(I)或式(II)或其任何亚式的化合物，和b)共活性剂，例如如上文所定义的其它药物活性剂。
一种如上文所定义的方法，其包含共施用(例如相伴或先后)治疗有效量的本发明化合物，例如式I或式(II)或其任何亚式的化合物，以及共活性剂，例如如上文所定义的其它治疗剂。
如本文所用，术语“共施用”或“组合施用”或其类似术语的含义是涵盖向单个患者施用所选择的治疗剂，且意图包括不必通过相同施用途径或在相同时间施用活性剂的治疗方案。固定组合也在本发明的范畴内。施用本发明的药物组合与仅施用其药物活性成分中的一个的单一疗法相比产生有益效果，例如协同的治疗效果。
根据本发明的组合的各组分可分开、一起或以其任何组合施用。
本发明化合物及任何其它活性剂可以独立剂型配制。或者，为减少向患者施用的剂型的数量，本发明化合物及任何其它活性剂可以任何组合配制在一起。例如，本发明化合物抑制剂可以一种剂型配制且其它活性剂可以另一剂型配制。任何独立剂型可同时或不同时施用。
或者，本发明组合物包含如本文所描述的其它活性剂。各组分可以以分开的组合物、组合的组合物或单一组合物形式存在。
缩写
Ac 乙酰基
ACN 乙腈
AcOEt/EtOAc 乙酸乙酯
AcOH 乙酸
aq 水溶液
Ar 芳基
Bn 苄基
Bu 丁基(nBu＝正丁基，tBu＝叔丁基)
CDI 羰基二咪唑
CH3CN 乙腈
DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]-十一-7-烯
Boc2O 二碳酸二叔丁酯
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DiBAl-H 二异丁基氢化铝
DIPEA N-乙基二异丙基胺
DMA N,N-二甲基乙酰胺
DMAP 二甲氨基吡啶
DMF N,N’-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
EI 电喷雾电离
Et2O 乙醚
Et3N 三乙胺
Ether 乙醚
EtOAc或EA 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
FC 快速色谱
h 小时
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HBTU O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HCl 盐酸
HMPA 六甲基磷酰胺
HOBt 1-羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱
H2O 水
L 升
LC-MS 液相色谱质谱
LiHMDS 双(三甲基硅基)氨基锂
mCPBA 间氯过氧苯甲酸
MgSO4 硫酸镁
Me 甲基
MeI 碘甲烷
MeOH 甲醇
mg 毫克
min 分钟
mL 毫升
MS 质谱
NaHCO3 碳酸氢钠
Na2SO4 硫酸钠
NH2OH 羟胺
Pd/C 钯/碳
Pd(OH)2 氢氧化钯
PE 石油醚
PG 保护基
Ph 苯基
Ph3P 三苯基膦
Prep 制备型
Rf 比移值
RP 反相
Rt 保留时间
r.t. 室温
RT 室温
SiO2 硅胶
SOCl2 亚硫酰氯
TBAF 氟化四丁基铵
TBDMS 叔丁基二甲基硅烷基
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱
TsCl 甲苯磺酰氯
本发明化合物可通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法参照以下反应方案和实施例制得。合成式(I)和式(II)化合物的通用方法提供于以下流程1至3中。
通用合成方法
本发明化合物是根据本文所提供的实施例和流程，使用本领域技术人员已知的方法由通常可获得的化合物制备。
流程1.
Figure BDA0003136327520000511
在流程1中，被氨基取代且与酯连接的环A偶联至氯吡啶。酯可被水解以得到游离羧酸。根据R的选择，产物可以是式(I)或式(II)化合物或此类化合物的前体。环A对应于例如式(I)化合物中的基团Cy，或式(II)化合物中的苯基/吡啶基环。
流程2.
Figure BDA0003136327520000512
在流程2中，环A具有氨基且与腈连接；在与氯吡啶偶联之后，腈可通过水解转化为羧酸基团，或其可通过三甲基硅烷基叠氮化物转化为酸性四唑基。同样，根据R的选择，产物可以是式(I)或式(II)化合物或此类化合物的前体。
流程3.
Figure BDA0003136327520000521
在流程3中，流程2的四唑产物经溴乙酸叔丁酯烷基化，以得到两种异构的羧甲基四唑产物。同样，根据R的选择，产物可以是式(I)或式(II)化合物或此类化合物的前体。
使用这些和已知的替代起始原料，本领域技术人员可制备多种具有羧酸或四唑作为酸性基团的式(I)或式(II)化合物。
中间体：
中间体A1：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000522
该化合物是按照WO2005080377中公布的方法制备。
步骤1：(4,5-二甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
在Ar下，在0℃下向2,3-二甲基呋喃(1.0当量)在Et2O(0.65M)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(1.6M，1.3当量)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时且接着冷却至-78℃。向其中逐滴添加吡啶甲腈(1.0当量)在Et2O(2M)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌1.5小时，随后用冰猝灭。用2N HCl将混合物的pH值调节至约5。用DCM萃取混合物。将合并的DCM层用水洗涤且经Na2SO4干燥。除去有机溶剂，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 10:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题产物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝202；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(d,J＝5.2Hz,1H),8.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.86(t,J＝7.6Hz,1H),7.82(s,1H),7.46(dd,J＝7.6,5.2Hz,1H),2.38(s,3H),2.04(s,3H)。
步骤2：5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将以上产物(1.0当量)在MeOH(0.033M)和28％NH3·H2O(10mL)中的混合物密封于试管中，且在170℃下搅拌8小时。将混合物冷却至室温，浓缩通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 20:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝201；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ13.86(s,1H),8.58(d,J＝8.0Hz,1H),8.47(d,J＝4.4Hz,1H),7.86(td,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.28-7.25(m,1H),7.08(s,1H),2.47(s,3H),2.28(s,3H)。
步骤3：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2,2’-联吡啶
将以上产物(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(2.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.09M)中的混合物在180℃下搅拌5小时。将混合物冷却至室温。将混合物用水猝灭且用EtOAc萃取。减压除去溶剂。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 2:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝312；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(ddd,J＝4.8,2.0,1.2Hz,1H),8.13(d,J＝6.0Hz,1H),7.84(dt,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.70(td,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.27(d,J＝6.0Hz,1H),7.20(ddd,J＝7.6,4.8,1.2Hz,1H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),6.70(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),2.63(s,3H),2.38(s,3H)。
中间体A2：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,6-二甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000531
该化合物是按照WO2009022171中公布的方法制备。将2,6-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.5当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.5M)中的混合物在150℃下搅拌3小时。通过TLC监测反应。将溶液冷却至室温并用EA/H2O萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。浓缩有机相。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 9:1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝235.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(d,J＝5.6Hz,1H),7.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),6.74-6.71(m,2H),2.58(s,3H),2.38(s,3H)。
中间体A3：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000541
该化合物是按照WO2009022171中公布的方法制备。
步骤1：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-碘-6-甲基吡啶
将2-碘-6-甲基吡啶-3-醇(1.05当量)、2,4-二氯吡啶(1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.22M)中的混合物在100℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将反应混合物冷却至室温，过滤且用EtOAC洗涤。将滤液用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。减压浓缩有机相。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAC 8:1)纯化，得到呈白色固体状的产物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝347；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(d,J＝5.6Hz,1H),7.25(d,J＝8.0Hz,1H),7.18(d,J＝8.0Hz,1H),6.71(d,J＝2.4Hz,1H),6.69(dd,J＝5.6,2.4Hz,1H),2.54(s,3H)。
步骤2：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2,2’-联吡啶
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-碘-6-甲基吡啶(1.0当量)、吡啶-2-基溴化锌(II)(0.5M于THF中，1.2当量)、Pd(PPh3)4(0.1当量)在DMA(0.43M)中的混合物在120℃下在Ar下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将混合物溶液冷却至室温且用EtOAC稀释。将混合物用盐水洗涤，接着经Na2SO4干燥。减压浓缩有机相。通过硅胶快速色谱(100％EtOAc)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝298。
以下化合物是根据对于中间体A3所描述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000542
Figure BDA0003136327520000551
中间体A6：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000552
该化合物是按照WO2009022171中公布的方法制备。
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-碘-6-甲基吡啶(1.0当量)、苯基硼酸(1.2当量)、Pd(dppf)Cl2(0.1当量)和Na2CO3(2.0当量)在二噁烷/H2O(5:1，0.25M)中的混合物在100℃下搅拌3小时。通过LC-MS监测反应。将混合物溶液冷却至室温且用EtOAc稀释。将混合物用盐水洗涤，接着用Na2SO4干燥。减压浓缩有机相。通过硅胶快速色谱(100％EtOAc)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝297；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝6.0Hz,1H),7.68(dd,J＝8.0,1.6Hz,2H),7.31-7.24(m,4H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),6.64(d,J＝2.4Hz,1H),6.59(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),2.59(s,3H)。
以下化合物是根据对于中间体A6所描述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000553
Figure BDA0003136327520000561
中间体A12：2-氯-4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶
Figure BDA0003136327520000562
该化合物是按照WO2016057278中公布的方法制备。
步骤1：2-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙-1-酮
将2-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙-1-酮(1.0当量)、2-氯吡啶-4-醇(1.0当量)和K2CO3(1.5当量)在丙酮(0.12M)中的混合物在室温下搅拌16小时。通过TLC监测反应。接着滤出固体且在减压下浓缩滤液，得到呈棕色油状的标题化合物。
步骤2：2-氯-4-((3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶
将2-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙-1-酮(1.0当量)在DMF-DMA(0.37M)中的溶液在100℃下搅拌2小时。减压浓缩混合物。在0℃下将残余物溶解于AcOH(50mL)中，用NH2NH2·H2O(80重量％，3.0当量)处理。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。接着，混合物用水稀释且用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，减压浓缩，得到呈棕色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝280。
步骤3：2-氯-4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶
将吡啶(1.1当量)和Cu(OAc)2(1.1当量)在DCE(0.37M)中的混合物在75℃下搅拌0.5小时。将混合物冷却至室温，且添加以上产物(1.0当量)在DCE(0.1M)中的溶液，接着添加环丙基硼酸(2.0当量)和Na2CO3(2.0当量)。将所得混合物在75℃下在氧气氛围下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。滤出固体，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 10:1至2:1)纯化，得到呈棕色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝320。
中间体A13：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-氰基吡啶
Figure BDA0003136327520000571
步骤1：5-羟基-2-甲基吡啶1-氧化物
向6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)在DCM(0.5M)中的溶液中添加m-CPBA(1.2当量)。将混合物在室温下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。滤出固体且在减压下浓缩滤液。将残余物溶解于热EtOH中，随后冷却至室温且用Et2O处理。通过过滤收集沉淀固体，干燥以得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝126。
步骤2：3-羟基-6-甲基-2-氰基吡啶
将以上产物(1.0当量)、TMSCN(3.5当量)和TEA(2.5当量)在MeCN(3.0mL)中的混合物密封至管式反应器中。将混合物在150℃下在微波中搅拌2.5小时。通过LC-MS监测反应。减压浓缩混合物，得到呈黑色油状的标题化合物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。LC-MS(m/z):[M+H]+＝135；1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.34(s,1H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),2.33(s,3H)。
步骤3：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-氰基吡啶
将以上产物(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.5当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.37M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。接着，混合物用水稀释且用EtOAc萃取。减压浓缩有机层。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 10:1至3:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝246。
中间体A14：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-(三氟甲基)吡啶
Figure BDA0003136327520000581
步骤1:6-甲基-2-(三氟甲基)吡啶-3-醇
将2-碘-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2-氯-2,2-二氟乙酸甲酯(3.0当量)、CuI(1.5当量)、KF(2当量)、KBr(2.0当量)在DMF(0.2M)中的混合物在110℃下在Ar下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。在反应完成之后，过滤反应混合物，且在减压下浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 1:0至50:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝178.4。
步骤2：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-(三氟甲基)吡啶
将6-甲基-2-(三氟甲基)吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(2.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.1M)中的混合物在140℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，用水处理且用EtOAc萃取。在减压下除去溶剂，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 2:1)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝289。
中间体A15：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-乙基-6-甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000591
将2-乙基-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMF(1.5M)中的混合物在110℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。过滤混合物且用水洗涤，用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc20:1)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝249；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝5.6Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝8.0Hz,1H),7.01(d,J＝2.0Hz,1H),6.91(dd,J＝5.6,2.4Hz,1H),2.60(q,J＝7.6Hz,2H),2.50(s,3H),1.13(t,J＝7.6Hz,3H)。
中间体A16：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000592
步骤1：6-碘-2-甲基吡啶-3-醇
将2-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、I2(1.0当量)、Na2CO3(2.2当量)在H2O(0.46M)中的混合物在室温下在Ar下搅拌1小时。通过LCMS监测反应。用HCl(2N)将溶液调节至pH 6。固体沉淀经过滤，用水(10mL×2)洗涤且干燥，得到黄色固体。将固体溶解于80℃的EtOAc中，且添加石油醚(70ml)。将混合物冷却至室温。结晶固体经过滤及干燥，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤2：2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-醇
将6-碘-2-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、三氟(乙烯基)硼酸钾(1.0当量)、Pd(dppf)Cl2(0.1当量)、K2CO3(3.0当量)在1,4-二噁烷-水(20:1，0.85M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。过滤反应混合物且减压浓缩滤液。通过硅胶快速色谱纯化残余物，得到黄色油状的标题化合物。
步骤3：6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇
向2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-醇(1.0当量)在MeOH(0.35M)中的溶液中添加Pd/C(10％重量，0.02当量)。将反应混合物在室温下在H2下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤4：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-甲基吡啶
将6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.58M)中的混合物在100℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。过滤混合物且用水(15ml)洗涤，用EtOAc(15ml×3)萃取。用盐水(10ml×2)洗涤有机层，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 20:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝249.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝5.6Hz,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,1H),7.00(d,J＝2.0Hz,1H),6.90(dd,J＝5.6,2.4Hz,1H),2.76(q,J＝7.6Hz,2H),2.29(s,3H),1.25(t,J＝7.6Hz,3H)。
制备6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇的替代途径
Figure BDA0003136327520000601
步骤1：2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺
将6-溴-2-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)、C2H3BF3K(1.2当量)、K2CO3(3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.05当量)在1,4-二噁烷:H2O(4:1，0.27M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用水及EtOAc稀释。分离有机层，用EtOAc萃取水层。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至1:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝135。
步骤2：6-乙基-2-甲基吡啶-3-胺
将2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺(1.0当量)和Pd/C(10％，0.01当量)在MeOH(2.1M)中的混合物在室温下在H2下搅拌2小时。滤出固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的标题化合物。
步骤3：6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向6-乙基-2-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在HCl水溶液(1.0N，5当量)中的溶液中逐滴添加NaNO2(1.5当量)在H2O(3.1M)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，接着在70℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc洗涤两次。浓缩水层，且用3.0M NaOH水溶液将pH调节至约7。在减压下完全蒸发溶剂，将残余物溶解于DCM/MeOH(v/v＝8:1)中。滤出固体，浓缩滤液，得到呈棕色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝138。
中间体A17：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-甲基喹啉
Figure BDA0003136327520000611
步骤1：3-甲氧基-2-甲基喹啉
将2-氨基苯甲醛(1.0当量)、1-甲氧基丙-2-酮(1.4当量)、KOH(1当量)在EtOH-水(5:1，0.34M)中的混合物在85℃下加热1小时。将混合物冷却至室温且后处理。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 15:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤2：2-甲基喹啉-3-醇
将3-甲氧基-2-甲基喹啉(5.7g，32.95mmol，1.0当量)在DCM(0.33M)中的溶液冷却至-20℃。在Ar下缓慢添加BBr3(3.0当量)，且将所得混合物在室温下搅拌过夜。通过LC-MS及TLC监测反应。完成后，将反应混合物冷却至低于0℃，用饱和NaHCO3水溶液猝灭，用DCM/MeOH萃取。减压浓缩有机层，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤3：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-甲基喹啉
将2-甲基喹啉-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.2当量)、Cs2CO3(3.0当量)在DMSO(0.16M)中的混合物在150℃下在N2下搅拌3小时。通过TLC监测反应。将混合物冷却至室温，用水处理，用EtOAc萃取，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 4:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝5.6Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.75-7.71(m,1H),7.56(t,J＝7.2Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.82(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),2.61(s,3H)。
中间体A18：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-乙基-6-甲基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000621
步骤1：2-甲基-5-硝基-3-乙烯基吡啶
在Ar氛围下，将3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶(1.0当量)、三氟(乙烯基)硼酸钾(1.0当量)、K2CO3(2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.1当量)在二噁烷/H2O(v/v＝4:1，0.5M)中的混合物在100℃下搅拌16小时。混合物经硅藻土层过滤。滤液用EtOAc稀释，用水、盐水洗涤，且有机层经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝165.3。
步骤2：5-乙基-6-甲基吡啶-3-胺
将2-甲基-5-硝基-3-乙烯基吡啶(1.0当量)和Pd/C(10％，0.01当量)在MeOH(0.3M)中的混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体，且减压浓缩滤液，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝137.2。
步骤3：5-乙基-6-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5-乙基-6-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在1.0N HCl水溶液(0.7M)中的搅拌溶液中逐滴添加NaNO2(1.0当量)在H2O(7M)中的溶液。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时，接着再在70℃下加热2小时。将所得混合物在室温下搅拌16小时，用NaHCO3中和至pH约8，接着用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。在除去溶剂后获得标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝138.2。
步骤4：5-乙基-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇
将5-乙基-6-甲基吡啶-3-醇(1.9g，13.8mmol，1.0当量)、I2(3.52g，13.8mmol，1.0当量)和Na2CO3(3.23g，30.5mmol，2.2当量)在H2O(50mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。用EtOAc萃取反应混合物，且减压浓缩合并的有机层。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至5:1)纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝264.2。
步骤5：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-乙基-2-碘-6-甲基吡啶
将5-乙基-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.05当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.2M)中的混合物在100℃下在Ar氛围下搅拌16小时。将混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤10次，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝50:1至10:1)纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝375.0。
步骤6：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-乙基-6-甲基-2,2’-联吡啶
向3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-乙基-2-碘-6-甲基吡啶(1.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.1当量)在DMA(0.4M)中的混合物中添加吡啶-2-基溴化锌(II)(0.5M于THF中，1.2当量)。将反应混合物在120℃下在Ar下搅拌16小时。经硅藻土层过滤混合物，浓缩滤液。将残余物用EtOAc稀释，用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝326.2。
以下中间体是根据中间体A18中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000631
中间体A20：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-异丙基-6-甲基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000641
步骤1：5-(羟基(吡啶-2-基)甲基)-2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯
在0℃下，向AlBr3(1.0当量)在无水DCM(0.2M)中的混悬液中添加吡啶甲醛(1.0当量)，且将所得混合物在0℃下在Ar下搅拌30分钟，随后逐滴添加2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯(1.0当量)在DCM(0.1M)中的溶液。将所得混悬液在室温下搅拌16小时，接着用NaHCO3饱和水溶液猝灭。混合物分配于DCM/水之间，分离有机层并用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚/EtOAc，100:1至2:1)纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝248.1。
步骤2：2-(5-(羟基(吡啶-2-基)甲基)-2-甲基呋喃-3-基)丙-2-醇
向5-(羟基(吡啶-2-基)甲基)-2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯(1.0当量)在THF(0.12M)中的溶液中添加CH3MgBr(4.0当量)。将所得混合物在室温下在Ar下搅拌2小时，随后用饱和NaHCO3猝灭。将混合物分配于EtOAc/水之间。分离有机层并用Na2SO4干燥。在除去溶剂后，获得标题化合物且不经进一步纯化即用于下一步骤。LC-MS(m/z):[M+H]+＝248.1。
步骤3：(4-(2-羟基丙-2-基)-5-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
向2-(5-(羟基(吡啶-2-基)甲基)-2-甲基呋喃-3-基)丙-2-醇(1.0当量)在DCM(0.25M)中的溶液中添加MnO2(3.0当量)，且将所得混合物在室温下搅拌过夜。经硅藻土层过滤混合物，浓缩滤液且通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚/EtOAc，100:1至2:1)纯化，得到呈淡黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝246.1。
步骤4：5-(2-羟基丙-2-基)-6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将(4-(2-羟基丙-2-基)-5-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮(1.0当量)在NH3·H2O/MeOH(1:1，0.15M)中的溶液在170℃下在密封管中搅拌8小时。除去溶剂，将残余物冻干，得到呈淡黄色固体状的标题物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝245.2。
步骤5：6-甲基-5-(丙-1-烯-2-基)-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将5-(2-羟基丙-2-基)-6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇(370mg，1.51mmol，1.0当量)、p-TsOH(317mg，1.67mmol，1.1当量)在甲苯中的混合物在135℃下回流16小时。反应完成后，浓缩混合物以得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝227.3。
步骤6：5-异丙基-6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将6-甲基-5-(丙-1-烯-2-基)-[2,2’-联吡啶]-3-醇(343mg，1.52mmol，1.0当量)和Pd/C(10％，0.06当量)在THF/MeOH(5:1，0.025M)中的混合物在室温下在H2下搅拌5小时。滤出固体，浓缩滤液，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝229.1。
步骤7：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-异丙基-6-甲基-2,2’-联吡啶
将5-异丙基-6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(2.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.1M)中的混合物在150℃下搅拌6小时。将混合物冷却至室温，且用水猝灭。通过硅胶快速色谱(洗脱剂MeOH/DCM 0至5％)纯化粗产物，得到呈淡黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝340.1。
中间体A21：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000651
通过按照中间体A1中所述的方法制备化合物。
步骤1：(5-乙基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
在0℃下，向2-乙基呋喃(2.0g，20.8mmol，1.0当量)在Et2O(80mL)中的搅拌溶液中逐滴添加n-BuLi(2.5M，10.8mL，27.1mmol，1.3当量)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时，接着冷却至-78℃。将吡啶甲腈(2.4g，22.9mmol，1.1当量)在Et2O(20mL)中的溶液逐滴添加至以上混合物。将所得混合物在室温下搅拌1.5小时。通过LC-MS监测反应。用冰水猝灭反应混合物。用2N HCl将混合物的pH值调节至约5。用DCM萃取水层。将有机层用水洗涤且经Na2SO4干燥，过滤且浓缩。通过FCC(洗脱剂：PE/EA＝10:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的化合物3(1.25g，30％)。LC-MS(m/z):[M+1]+＝202.2。
步骤2：6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将置于密封管中的(5-乙基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮(1.25g，4.97mmol，1.0当量)、MeOH(10mL)和NH3.H2O(10mL)的混合物在170℃下加热8小时。使混合物冷却至室温，且除去溶剂，得到呈黄色固体状的标题化合物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LC-MS(m/z):[M+1]+＝201.2
步骤3：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,2’-联吡啶
将6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.05当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.4M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将混合物用水猝灭且用EA萃取。经Na2SO4干燥有机层，浓缩。通过FCC(洗脱剂：PE/EA＝2:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝312.1。
以下中间体是根据中间体A21中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000661
中间体A23：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-5-甲基-2,2’-联吡啶
Figure BDA0003136327520000671
步骤1：2-溴-3-甲基呋喃
将3-甲基呋喃(1.0当量)、NBS(1.0当量)和AIBN(0.08当量)在Et2O(0.5M)中的混合物在50℃下在Ar氛围下搅拌2小时。在常规处理之后获得产物，且不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2：(5-溴-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲醇
在0℃下，向2-溴-3-甲基呋喃(1.0当量)在Et2O(0.5M)中的溶液中逐份添加AlBr3(1.0当量)。在将混合物在0℃下搅拌0.5小时之后，添加吡啶甲醛(1.0当量)。将所得混合物在室温下在Ar下搅拌16小时，随后用NaOH水溶液猝灭。用EtOAc混合物，且将合并的有机层用盐水洗涤，接着用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+:268。
步骤3：(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲醇
在0℃下，向(5-溴-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲醇(1.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.05当量)在THF(0.25M)中的混合物中逐滴添加Et2Zn(3.0当量)。将混合物在70℃下在Ar下搅拌16小时。将混合物倒入冰水中，且经硅藻土层过滤。用EtOAc萃取滤液，合并的有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+:218。
步骤4：(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
将(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲醇(1.0当量)和MnO2(5.0当量)在THF(0.2M)中的混合物在50℃下搅拌16小时。经硅藻土层过滤混合物，浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+:216。
步骤5：6-乙基-5-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇
将密封管中的(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮(1.0当量)和NH3.H2O/MeOH(1:1，0.2M)的混合物在170℃下加热8小时。除去溶剂，得到标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LC-MS(m/z):[M+H]+:215。
步骤6：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-5-甲基-2,2’-联吡啶
将6-乙基-5-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.5当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.5M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。将混合物冷却至室温，用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至1:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+:326。
制备(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮的替代途径：
Figure BDA0003136327520000681
步骤1：(4-(氯甲基)-5-乙基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
将(5-乙基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮(1.0当量)、(HCHO)n(4.0当量)、ZnCl2(4.0当量)和HCl/二噁烷(10当量)在DCE(0.22M)中的混合物在50℃下在Ar下搅拌16小时。移除大部分溶剂，且用1.0M NaOH水溶液将残余物调节至pH约8。用DCM稀释混合物。分离有机层，用DCM萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至5:1)纯化粗产物，得到呈棕色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝250。
步骤2：(5-乙基-4-甲基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮
将(4-(氯甲基)-5-乙基呋喃-2-基)(吡啶-2-基)甲酮(1.0当量)、Pd/C(10％，0.03当量)和TEA(2.0当量)在EtOAc(0.2M)中的混合物在室温下在H2下搅拌2.5小时。滤出固体，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至5:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝216。
中间体A24：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶
Figure BDA0003136327520000691
步骤1：5,6-二甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5,6-二甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在2M H2SO4(0.33M)中的混合物中逐滴添加NaNO2(1.0当量)在H2O中的溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，在70℃下搅拌2小时且接着在室温下搅拌16小时。用EtOAc/H2O稀释混合物。分离有机层并用Na2SO4干燥。除去溶剂，得到标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤。LC-MS(m/z):[M+H]+＝124.4。
步骤2：2-碘-5,6-二甲基吡啶-3-醇
向5,6-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、Na2CO3(2.0当量)在H2O/THF(1:4，0.15M)中的混合物中逐份添加I2(1.1当量)，且将混合物在室温下搅拌0.5小时。用DCM/H2O稀释混合物，分离有机层并用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝2:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝250.0。
步骤3：2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-5,6-二甲基吡啶-3-醇
将2-碘-5,6-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.5当量)、PdCl2(dppf)(0.1当量)和Na2CO3(2.0当量)在二噁烷/H2O(10:1，0.2M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。将混合物用DCM/H2O稀释，分离有机层并用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝3:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝206.4。
步骤4：5,6-二甲基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-3-醇
将2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-5,6-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、Pd/C(20％重量，0.05当量)在MeOH(0.1M)中的混合物在室温下在H2下搅拌2小时。滤出固体，浓缩滤液，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝208.4。
步骤5：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶
将5,6-二甲基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.1当量)、Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.1M)中的混合物在130℃下在Ar下搅拌2小时。将混合物冷却至室温，用EtOA和水稀释。分离有机层并用Na2SO4干燥。通过制备型TLC(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝3:1)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝319.3。
中间体A25：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡啶
Figure BDA0003136327520000701
此化合物是按照中间体A24中所述的方法制备。LCMS(m/z):[M+1]+＝305。
中间体A26：3-氯-5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,6-二甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000702
步骤1：5-氯-6-甲基吡啶-3-胺
向3-氯-2-甲基-5-硝基吡啶(1.0当量)在MeOH/H2O(1:1，0.6M)中的混合物中添加Zn粉(10当量)和NH4Cl(10当量)，且将反应混合物在室温下搅拌16小时。经硅藻土层过滤反应混合物，用EtOAc洗涤固体滤饼。分离有机层，用EtOAc萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝143.1。
步骤2：5-氯-6-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5-氯-6-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在1M HCl(0.56M)中的溶液中逐滴添加NaNO2(1.1当量)在水(3.0M)中的溶液，且将反应混合物在0℃下搅拌2小时，接着加热至70℃后维持16小时。将反应物用Na2CO3饱和水溶液(20mL)猝灭，用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：DCM/MeOH＝30:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝144.1。
步骤3：5-氯-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5-氯-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、Na2CO3(2.0当量)在水(1.0M)中的混合物中添加I2(1.0当量)，且将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用EtOA萃取，合并的有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝270.0。
步骤4：5-氯-2,6-二甲基吡啶-3-醇
将5-氯-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、三甲基三硼杂三氧杂环己烷(1.1当量)、Pd(dppf)Cl2(0.05当量)和K2CO3(2.5当量)在二噁烷(0.2M)中的混合物在100℃下在Ar氛围下搅拌16小时。将反应物用NH4Cl水溶液(10mL)猝灭，且经硅藻土层过滤混合物。用EtOAc萃取滤液，合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝158.1。
步骤5：3-氯-5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,6-二甲基吡啶
向5-氯-2,6-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)在DMF(0.07M)中的溶液中添加2,4-二氯吡啶(1.1当量)和Cs2CO3(2.5当量)。在100℃下在Ar下搅拌16小时之后，反应混合物用冰水(10mL)猝灭，用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，随后用无水Na2SO4干燥。通过制备型TLC(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝6:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝269.0。
中间体A27：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,5,6-三甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000721
通过按照中间体A26中所述的方法制备此化合物。LCMS(m/z):[M+1]+＝249.1。
以下中间体是根据中间体A6中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000722
Figure BDA0003136327520000731
Figure BDA0003136327520000741
中间体A41：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-环丙基-6-甲基-2-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000742
步骤1：3-环丙基-2-甲基-5-硝基吡啶
将3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶(1.0当量)、环丙基硼酸(1.2当量)、Na2CO3(2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.1当量)在二噁烷/H2O(10:1，0.3M)中的溶液在100℃下在Ar下搅拌16小时。过滤混合物，且滤液用EA稀释，用水、盐水洗涤，接着用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝179.2。
步骤2：5-环丙基-6-甲基吡啶-3-胺
将3-环丙基-2-甲基-5-硝基吡啶(1.0当量)、Pd/C(10％重量，0.1当量)在MeOH(0.3M)中的混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体，且在减压下浓缩滤液，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝149.2。
步骤3：5-环丙基-6-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5-环丙基-6-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在1N HCl水溶液(0.3M)中的搅拌溶液中逐滴添加NaNO2(1.0当量)在H2O(2.7M)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌0.5小时，在70℃下搅拌2小时，且在室温下搅拌16小时。用NaHCO3将混合物调节至pH约8，接着用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥。在除去溶剂后获得标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝150.4。
步骤4：5-环丙基-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇
将5-环丙基-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、I2(1.0当量)、Na2CO3(2.2当量)在H2O(0.25M)中的混合物在室温下搅拌2小时。用EA萃取混合物，合并的有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至5:1)纯化粗产物，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝276.1。
步骤5：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-环丙基-6-甲基-2-苯基吡啶
将5-环丙基-2-碘-6-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、苯基硼酸(1.2当量)、Na2CO3(2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.1当量)在二噁烷/H2O(10:1，0.1M)中的溶液在100℃下在Ar下搅拌16小时。过滤混合物，将滤液用EA稀释，用水、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝226.3。
步骤6：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-环丙基-6-甲基-2-苯基吡啶
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-环丙基-6-甲基-2-苯基吡啶(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.05当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.1M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。用EA及盐水稀释混合物。分离有机层并用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝50:1至5:1)纯化粗产物，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝337.1。
中间体A42：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-乙基-6-甲基-2-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000761
通过按照中间体A41中所述的方法制备此化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝325.1。
中间体A43：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5-异丙基-6-甲基-2-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000762
通过按照中间体A20中所述的方法稍加修改来制备此化合物。
Figure BDA0003136327520000763
步骤1：5-苯甲酰基-2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯
向FeCl3(0.013当量)在CCl4(4.5M)中的混悬液中添加苯甲酰氯(1.05当量)，接着添加2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯(6.0g，42.8mmol，1.0当量)。将混合物在80℃下搅拌1小时，接着分配于DCM/水之间。分离有机层，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc＝1:0至10:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤2：5-(羟基(苯基)甲基)-2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯
在0℃下，向5-苯甲酰基-2-甲基呋喃-3-甲酸甲酯(1.0当量)在MeOH(1.0M)中的溶液中逐份添加NaBH4(2.0当量)，且在0℃下搅拌混合物2小时。用饱和NH4Cl猝灭反应物，用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc＝1:0至5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。
其余的步骤按照中间体A20中所述的方法(步骤2-7)。通过硅胶快速色谱(洗脱剂MeOH/DCM＝0至5％)纯化粗产物，得到呈淡黄色固体状的中间体A43。LCMS(m/z):[M+H]+＝339.3。
中间体A44：2-(5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-甲基-6-苯基吡啶-3-基)丙-2-醇
Figure BDA0003136327520000771
通过按照中间体A43中所述的方法制备此化合物。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：MeOH/DCM＝0至5％)纯化粗产物，得到呈淡黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝355。
中间体A45：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000772
步骤1：2-苯基吡啶-3-醇
将2-碘吡啶-3-醇(1.0当量)、苯基硼酸(1.1当量)、PdCl2(dppf)(0.1当量)和Na2CO3(2.0当量)在二噁烷/H2O(10:1，0.2M)中的混合物在90℃下在Ar氛围下搅拌16小时。用DCM稀释混合物。分离有机层，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝3:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝172.2。
步骤2：6-碘-2-苯基吡啶-3-醇
向2-苯基吡啶-3-醇(1.0当量)和Na2CO3(2.0当量)在THF/H2O(4:1，0.15M)中的混合物中逐份添加I2(1.1当量)，且将混合物在室温下搅拌0.5小时，随后用DCM稀释。分离有机层，用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝4:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝297.9。
步骤3：2-苯基-6-乙烯基吡啶-3-醇
将6-碘-2-苯基吡啶-3-醇(1.0当量)、CH2CHBF3K(1.5当量)、K2CO3(2.0当量)和PdCl2(dppf)(0.1当量)在二噁烷/H2O(4:1，0.1M)中的混合物在95℃下在Ar氛围下搅拌16小时。用DCM稀释混合物，分离有机层，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝3:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝198.0。
步骤4：6-乙基-2-苯基吡啶-3-醇
将2-苯基-6-乙烯基吡啶-3-醇(1.0当量)和Pd/C(10％重量，0.02当量)在MeOH(0.06M)中的混合物在室温下在H2下搅拌1小时。滤出固体，浓缩滤液，得到呈白色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝200.0。
步骤5：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-苯基吡啶
将6-乙基-2-苯基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(2.0当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMSO(0.1M)中的混合物在130℃下在Ar下搅拌2小时。用EtOAc及水稀释混合物。分离有机层，用Na2SO4干燥。通过制备型TLC(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝4:1)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝311.1。
以下中间体是根据中间体A45中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000781
Figure BDA0003136327520000791
中间体A49：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,5-二甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000792
步骤1：2,5-二甲基-3-硝基吡啶
将2,5-二溴-3-硝基吡啶(1.0当量)、三甲基三硼杂三氧杂环己烷(3.0当量)、Pd(dppf)Cl2(0.04当量)和K2CO3(6.0当量)在二噁烷(0.25M)中的混合物在100℃下在Ar氛围下搅拌16小时。混合物经后处理，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝153。
步骤2：2,5-二甲基吡啶-3-胺
将2,5-二甲基-3-硝基吡啶(1.0当量)、10％Pd/C(10％重量，0.01当量)在MeOH(0.3M)中的混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝123。
步骤3：6-溴-2,5-二甲基吡啶-3-胺
在0℃下，在Ar下向2,5-二甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在MeCN(0.4M)中的搅拌溶液中逐份添加NBS(1.0当量)。将混合物在0℃下搅拌1小时，接着用水猝灭。除去乙腈，用EtOAc萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。在除去溶剂后获得标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝201。
步骤4：2,5-二甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺
将6-溴-2,5-二甲基吡啶-3-胺(1.0当量)、三氟(乙烯基)硼酸钾(1.2当量)、Pd(dppf)Cl2(0.05当量)和K2CO3(3.0当量)在二噁烷/水(14:1，0.27M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时。混合物经后处理，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝150。
步骤5：6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-胺
将2,5-二甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺(1.0当量)、Pd/C(10％重量，0.01当量)在MeOH(0.32M)中的混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝151。
步骤6：6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在1N HCl(0.16M)中的溶液中逐滴添加NaNO2(1.0当量)在H2O(2.4M)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌1小时，接着加热至70℃后维持16小时。在用1.0M NaOH水溶液将pH调节至约8之后，浓缩混合物，将残余物溶解于DCM/MeOH(v/v＝10/1)中。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝152。
步骤7：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,5-二甲基吡啶
将6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.0当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.25M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌16小时，接着用水及EtOAc稀释混合物。分离有机层，用EtOAc萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝2:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝263。
中间体A50：3-氯-5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-乙基-6-甲基吡啶
Figure BDA0003136327520000801
步骤1：5-氯-2-甲基吡啶-3-胺
向5-氯-2-甲基-3-硝基吡啶(30.0g，0.17mol，1.0当量)在EtOH/NH4Cl饱和水溶液(1:4，0.7M)中的溶液中添加Zn粉(4.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，随后经硅藻土层过滤。用EtOAc萃取滤液，合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：DCM/MeOH＝100:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝142.0。
步骤2：6-溴-5-氯-2-甲基吡啶-3-胺
在0℃下，向5-氯-2-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在乙腈(0.5M)中的溶液中逐份添加NBS(1.0当量)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时，接着用冰水(100mL)猝灭。减压移除部分溶剂，用EtOAc萃取残余物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝221.0。
步骤3：5-氯-2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺
将6-溴-5-氯-2-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)、三氟(乙烯基)硼酸钾(1.2当量)、Pd(dppf)Cl2(0.05当量)和K2CO3(2.5当量)在二噁烷/水(5:1，0.4M)中的混合物在80℃下在氛围下搅拌2小时。经硅藻土层过滤混合物且用EtOAc萃取滤液。合并的有机层经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝8:1)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝169.0。
步骤4：5-氯-6-乙基-2-甲基吡啶-3-胺
向5-氯-2-甲基-6-乙烯基吡啶-3-胺(1.0当量)和饱和NH4Cl水溶液/EtOH(2:1，0.5M)的溶液中添加Zn粉(5.0当量)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。经硅藻土层过滤混合物，用EtOAc萃取滤液。合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：100％DCM)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝171.0。
步骤5：5-氯-6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇
在0℃下，向5-氯-6-乙基-2-甲基吡啶-3-胺(1.0当量)在1N HCl水溶液(0.25M)中的溶液中逐滴添加NaNO2(1.5当量)在水(3.0M)中的溶液，且将混合物在0℃下搅拌2小时，接着在70℃下搅拌16小时。添加饱和NaHCO3水溶液，用DCM萃取所得混合物。合并的有机层经无水Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：DCM/MeOH＝100:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝172.0。
步骤6：3-氯-5-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-乙基-6-甲基吡啶
向5-氯-6-乙基-2-甲基吡啶-3-醇(1.0当量)在DMF(0.4M)中的溶液中添加2,4-二氯吡啶(1.2当量)和Cs2CO3(2.5当量)。将反应混合物在100℃下在Ar氛围下搅拌16小时，冷却至室温。添加冰水(100mL)，用EtOAc萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过制备型TLC(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝283.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.27(d,J＝5.6Hz,1H),7.34(s,1H),6.77(d,J＝2.0Hz,1H),6.74(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),2.96(q,J＝7.6Hz,2H),2.37(s,3H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。
以下中间体是根据中间体A12中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000821
Figure BDA0003136327520000831
中间体A56：2-氯-4-((1-环丁基-3-苯基-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶
Figure BDA0003136327520000832
将2-氯-4-((3-苯基-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶(1.0当量)、溴环丁烷(2.0当量)和K2CO3(2.0当量)在二噁烷(0.35M)中的混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释。分离有机层，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1至1:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝326。
以下中间体是根据中间体A56中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000833
Figure BDA0003136327520000841
中间体A64：2-氯-4-((1-(二氟甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶
Figure BDA0003136327520000851
将2-氯-4-((3-苯基-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶(1.0当量)、二乙基(溴二氟甲基)亚膦酸二酯(10当量)、KF(2.0当量)和NaI(1.0当量)在MeCN(0.2M)中的混合物在80℃下在Ar氛围下搅拌过夜。经硅藻土层过滤混合物，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+1]+＝322.1。
中间体A65：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-甲基-6-苯基吡啶
Figure BDA0003136327520000852
步骤1：2-甲基-6-苯基吡啶-3-醇
将6-碘-2-甲基吡啶-3-醇(中间体A16的步骤1，1.0当量)、苯基硼酸(1.05当量)、Pd(dppf)Cl2(0.1当量)和K2CO3(3.0当量)在二噁烷/H2O(8:1，0.61M)中的混合物在115℃下在Ar下搅拌16小时。过滤混合物，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚:EtOAc＝10:1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物。
步骤2：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-甲基-6-苯基吡啶
将2-甲基-6-苯基吡啶-3-醇(1.0当量)、2,4-二氯吡啶(1.0当量)和Cs2CO3(2.0当量)在DMF(0.36M)中的混合物在115℃下在Ar下搅拌16小时。过滤混合物，且将滤液用水处理，用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚:EtOAc＝20:1)纯化粗产物，得到呈无色油状的标题化合物。
中间体A66：3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶
Figure BDA0003136327520000861
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2-碘-6-甲基吡啶(中间体A3的步骤1，500mg，1.45mmol，1.0当量)、(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸(1.2当量)、Pd(dppf)Cl2(0.1当量)、Na2CO3(2.0当量)在二噁烷/H2O(10:1，0.13M)中的混合物在100℃下在Ar下搅拌过夜。滤出固体，且将滤液用EtOAc稀释，用水、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝301.1。
中间体B1：3-(3-氨基苯基)丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520000862
步骤1：3-(3-硝基苯基)丙酸
在室温下，将TEA(1.4当量)逐滴添加至搅拌中的HCOOH(3.5当量)。将所得试剂添加至3-硝基苯甲醛(1.0当量)、2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1.0当量)在DMF(2.5M)中的溶液中。将反应混合物在130℃下加热3小时。将溶液冷却至室温，用H2O(200mL)稀释，用NaHCO3饱和水溶液调节至pH 9，用EtOAc(2×50mL)洗涤。用浓HCl将水相酸化至pH 2。通过过滤收集沉淀固体，用H2O洗涤，且在真空中干燥，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[2M-1]-＝389。
步骤2：3-(3-硝基苯基)丙酸甲酯
在室温下向以上产物(1.0当量)在MeOH(0.74M)中的溶液中添加SOCl2(2.0当量)。将所得混合物在60℃下搅拌2小时。接着将混合物冷却至室温，减压浓缩。将残余物用H2O(150mL)稀释，用EtOAc(2×50mL)萃取。有机相用饱和NaHCO3水溶液(2×20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 10:1)纯化，得到白色固体状的标题化合物。
步骤3：3-(3-氨基苯基)丙酸甲酯
向以上产物(1.0当量)在MeOH(0.5M)中的搅拌的溶液中添加Pd/C(10％重量)，且将混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体，浓缩滤液。将残余物溶解于DCM(30mL)中，且用4.0M HCl/二噁烷(9mL)处理。浓缩混合物，且残余物用Et2O(30mL)湿磨。通过过滤收集固体，接着溶解于H2O(100mL)中。用饱和NaHCO3水溶液将溶液调节至pH约9且用DCM(2×50mL)萃取。DCM层经Na2SO4干燥，减压浓缩，得到呈浅黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝180。
中间体B2：3-(3-氨基苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000871
步骤1：3-(3-硝基苯基)丙酰胺
向3-(3-硝基苯基)丙酸(1.0当量)在DCM(0.25M)中的溶液中添加HATU(1.2当量)，将混合物在室温下搅拌30分钟，接着添加NH4Cl(1.5当量)和DIEA(3.0当量)。将混合物在室温下搅拌4小时，接着用H2O(50mL)猝灭。用DCM(3×30mL)萃取水溶液。合并的有机层经Na2SO4干燥，浓缩，得到呈黄色油状的标题化合物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。LC-MS(m/z):[M+1]+＝195。
步骤2：3-(3-硝基苯基)丙腈
将3-(3-硝基苯基)丙酰胺(1.0当量)和(CNCl)3(1.5当量)在DMF(0.25mM)中的混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用H2O(200mL)猝灭且用EA(3x50mL)萃取。合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，接着用Na2SO4干燥。除去溶剂，通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 4:1至2:1)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝177；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(d,J＝8.4Hz,1H),8.12(s,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,1H),7.55(t,J＝8.0Hz,1H),5.01(s,2H),3.09(t,J＝7.2Hz,2H),2.72(t,J＝7.2Hz,2H)。
步骤3：3-(3-氨基苯基)丙腈
将3-(3-硝基苯基)丙腈(1.0当量)、Zn(5.0当量)在MeOH/NH4Cl(1:1，0.4M)中的混合物在80℃下搅拌16小时。通过TLC监测反应。将反应混合物冷却至室温且过滤。用EA萃取滤液。合并的有机层用盐水洗涤且经Na2SO4干燥。除去溶剂，得到呈黄色油状的标题产物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝147；1H NMR(400MHz,DMSO)δ6.95(dd,J＝8.4,7.2Hz,1H),6.44(d,J＝0.8Hz,1H),6.43-6.39(m,2H),5.01(s,2H),2.73-2.68(m,4H)。
中间体B3：3-(4-氨基苯基)丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520000881
按照中间体B1中所述的方法获得化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.98(d,J＝8.4Hz,2H),6.62(d,J＝8.4Hz,2H),3.66(s,3H),2.84(t,J＝7.6Hz,2H),2.57(t,J＝7.6Hz,2H)。
中间体B4：3-(4-氨基苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000882
步骤1：3-(4-硝基苯基)丙酰胺
向3-(4-硝基苯基)丙酸(1.0当量)在DCM(0.4M)中的溶液中添加HATU(1.2当量)且在室温下搅拌30分钟，接着添加NH4Cl(1.5当量)和DIEA(3.0当量)。将混合物在室温下搅拌4小时，随后用H2O(50mL)猝灭。水层用DCM(3×30mL)萃取且经Na2SO4干燥。除去溶剂，得到呈黄色油状的标题化合物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤。
步骤2：3-(4-硝基苯基)丙腈
将3-(4-硝基苯基)丙酰胺(1.0当量)和(CNCl)3(1.5当量)在DMF(0.25mM)中的混合物在室温下搅拌2小时。用H2O猝灭溶液。用EA(3×50mL)萃取水层。将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤且经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 4:1至2:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.21(d,J＝8.8Hz,2H),7.60(d,J＝8.8Hz,2H),3.05(t,J＝7.2Hz,2H),2.90(t,J＝7.2Hz,2H)。
步骤3：3-(4-氨基苯基)丙腈
向3-(4-硝基苯基)丙腈(1.0当量)在MeOH(0.4M)中的溶液中添加Pd/C(0.1当量)。将混合物在室温下在H2下搅拌3小时。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝147。1H NMR(400MHz,DMSO)δ6.92(d,J＝8.4Hz,2H),6.51(d,J＝8.4Hz,2H),4.94(s,2H),2.68(s,4H)。
中间体B5：2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙腈
Figure BDA0003136327520000891
步骤1：2-甲基-2-(3-硝基苯基)丙腈
在0℃下向2-(3-硝基苯基)乙腈(1.0当量)在DMF(0.3M)中的溶液中逐份添加t-BuOK(3.0当量)。将混合物在0℃下搅拌15分钟且逐滴添加MeI(5.0当量)。接着将混合物在室温下搅拌2小时。通过TLC监测反应。将混合物溶液用NH4Cl(水溶液，50mL)猝灭，用EtOAc(100mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。浓缩有机相。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 8:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(t,J＝2.0Hz,1H),8.14(ddd,J＝8.0,2.0,1.2Hz,1H),7.82(ddd,J＝8.0,2.0,1.2Hz,1H),7.54(t,J＝8.0Hz,1H),3.74(s,2H),2.83(t,J＝7.2Hz,2H),2.57(t,J＝7.2Hz,2H)。
步骤2：2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙腈
将以上产物(1.0当量)、Zn(5.0当量)、NH4Cl(10.0当量)在MeOH-H2O(2:1，0.15mM)中的混合物在80℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将混合物溶液过滤，用EtOAc(10mL)洗涤。用EtOAc(50mL)萃取滤液，且将有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩，以得到残余物。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 5:1)纯化，得到呈黄色油状的标题产物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝161。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08(t,J＝8.0Hz,1H),6.76-6.72(m,2H),6.57-6.53(m,1H),3.38(s,2H),1.61(s,6H)。
中间体B6：3-(3-氨基-4-氟苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000901
步骤1：2-(溴甲基)-1-氟-4-硝基苯
将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(1.0当量)、NBS(1.1当量)和BPO(过氧化苯甲酰，0.1当量)在CCl4(0.86M)中的混合物在95℃下在Ar下搅拌16小时。通过TLC监测反应。接着过滤混合物。在减压下浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 1:0至50:1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物。
步骤2：2-(2-氟-5-硝基苄基)丙二酸二乙酯
在0℃下，向NaH(60％于油中，1.0当量)在DMF(0.22M)中的搅拌溶液中添加丙二酸二乙酯(2.0当量)在DMF(2M)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌0.5小时，接着将含2-(溴甲基)-1-氟-4-硝基苯(1.0当量)的DMF(0.34M)逐滴添加至以上混合物且再搅拌0.5小时。通过TLC监测反应。将所得混合物用冰水稀释且用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，随后用Na2SO4干燥。在减压下除去溶剂，得到呈油状的标题化合物。
步骤3：2-(2-氟-5-硝基苯基)丙酸
将2-(2-氟-5-硝基苄基)丙二酸二乙酯(1.0当量)在6N HCl水溶液(31当量，0.19M)中的混合物在120℃下加热16小时。通过LC-MS监测反应。使反应混合物冷却至室温，用水稀释且用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，随后用Na2SO4干燥。在减压下除去溶剂，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAC 3:1)纯化残余物，得到标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20-8.12(m,2H),7.26-7.16(m,1H),3.07(t,J＝7.6Hz,2H),2.75(t,J＝7.6Hz,2H)。
步骤4：2-(2-氟-5-硝基苯基)丙酰胺
将2-(2-氟-5-硝基苯基)丙酸(1.0当量)、SOCl2(2.0当量)和催化量DMF(1滴)在甲苯(0.42M)中的混合物在85℃下搅拌1小时。通过TLC监测反应。混合物经减压浓缩。将残余物再溶解于Et2O(0.8M)中，且在0℃下逐滴添加NH3·H2O的搅拌的溶液(30mL)中。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。通过LC-MS监测反应至完成。反应混合物用EtOAc萃取。有机层经Na2SO4干燥，减压浓缩，得到标题化合物。
步骤5：2-(2-氟-5-硝基苯基)丙腈
在0℃下，向2-(2-氟-5-硝基苯基)丙酰胺(1.0当量)和吡啶(2.5当量)在DCM(0.39M)中的溶液中逐滴添加TFAA(2.5当量)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。TLC指示反应完成。混合物用1.0M HCl水溶液、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。在减压下除去溶剂，得到标题化合物。
步骤6：2-(5-氨基-2-氟苯基)丙腈
将2-(2-氟-5-硝基苯基)丙腈(1.0当量)、Zn(5.0当量)和NH4Cl(10当量)在EtOH/H2O(v/v＝5:1，0.5M)中的混合物在80℃下搅拌0.5小时。过滤混合物。将滤液用水稀释，用EtOAc萃取。有机层经Na2SO4干燥，减压浓缩，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝165；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.82-8.87(m,2H),6.52-6.56(m,2H),2.90(t,J＝7.6Hz,2H),2.62(t,J＝7.2Hz,2H)。
根据中间体B6中所述的方法制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520000911
Figure BDA0003136327520000921
中间体B10：3-(5-氨基-2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520000922
步骤1：3-(2-氟-5-硝基苯基)丙酸甲酯
将3-(2-氟-5-硝基苯基)丙酸(1.0当量)在2.5M HCl/MeOH(6.7当量，0.37M)中的溶液在室温下搅拌1小时。通过TLC监测反应。减压浓缩反应混合物，得到标题化合物。
步骤2：3-(5-氨基-2-氟苯基)丙酸甲酯
向3-(2-氟-5-硝基苯基)丙酸甲酯(1.0当量)在MeOH(0.35M)中的溶液中添加Pd/C(10％重量，0.02当量)。将反应混合物在室温下在氢气下搅拌3小时。通过TLC监测反应。滤出固体，减压浓缩滤液，得到棕色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝198.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.77(t,J＝7.6Hz,1H),6.53-6.61(m,2H),3.64(s,3H),2.83(t,J＝7.6Hz,2H),2.58(t,J＝8.0Hz,2H)。
根据中间体B10中所述的方法制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520000923
Figure BDA0003136327520000931
中间体B14：3-(6-氨基吡啶-2-基)丙腈
Figure BDA0003136327520000932
步骤1：(E)-3-(6-氨基吡啶-2-基)丙烯腈
将6-溴吡啶-2-胺(1.0当量)、丙烯腈(3.0当量)、Pd2(dba)3(0.1当量)、三-邻甲苯基膦(0.3当量)在DMF(0.57M)中的混合物在140℃下加热过夜。使混合物冷却至室温。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 1:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤2：3-(6-氨基吡啶-2-基)丙腈
将(E)-3-(6-氨基吡啶-2-基)丙烯腈(1.0当量)和Pd/C(10％重量，0.02当量)在MeOH(0.41M)中的混合物在室温下在H2下搅拌2小时。通过TLC监测反应。滤出固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(t,J＝8.0Hz,1H),6.56(d,J＝7.2Hz,1H),6.38(d,J＝8.0Hz,1H),4.41(s,2H),2.92(t,J＝7.6Hz,2H),2.77(t,J＝7.6Hz,2H)。
根据中间体B14中所述的方法制备以下中间体。
Figure BDA0003136327520000933
中间体B17：3-(6-氨基吡啶-2-基)丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520000941
步骤1：(E)-3-(6-氨基吡啶-2-基)丙烯酸甲酯
将6-溴吡啶-2-胺(3.0g，17.34mmol，1.0当量)、丙烯酸甲酯(4.5mL，52.02mmol，3.0当量)、Pd2(dba)3(0.1当量)、三-邻甲苯基膦(0.3当量)在DMF(0.58M)中的混合物在140℃下加热过夜。将混合物冷却至室温，且减压除去溶剂。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 2:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤2：3-(6-氨基吡啶-2-基)丙酸甲酯
将(E)-3-(6-氨基吡啶-2-基)丙烯酸甲酯(1.0当量)和Pd/C(10％重量，0.02当量)在MeOH(0.36M)中的混合物在室温下在H2下搅拌4小时。通过TLC监测反应。滤出固体且浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33(t,J＝7.6Hz,1H),6.52(d,J＝7.2Hz,1H),6.32(d,J＝8.0Hz,1H),4.36(s,2H),3.67(s,3H),2.93(t,J＝7.2Hz,2H),2.73(t,J＝7.2Hz,2H)。
根据中间体B17中所述的方法制备以下中间体。
Figure BDA0003136327520000942
中间体B20：3-(4-氨基吡啶-2-基)丙酸乙酯
Figure BDA0003136327520000943
步骤1：(E)-3-(4-氨基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯
将2-溴吡啶-4-胺(842mg，4.86mmol，1.0当量)、(E)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)丙烯酸乙酯(0.95当量)、Pd(PPh3)2Cl2(0.1当量)、K2CO3(2.5当量)在二噁烷/H2O(5:1，0.4M)中的混合物在95℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，且减压除去溶剂。残余物通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 1:4)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤2：3-(4-氨基吡啶-2-基)丙酸乙酯
将(E)-3-(4-氨基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(1.0当量)和Pd/C(0.02当量)在MeOH(0.3M)中的混合物在室温下在H2下搅拌2小时。通过TLC监测反应。滤出固体，且减压浓缩滤液，得到呈棕色油状的标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(d,J＝5.6Hz,1H),6.43(d,J＝2.0Hz,1H),6.38-6.36(m,1H),3.66(s,3H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.75(t,J＝7.6Hz,2H)。
中间体B21：3-(5-氨基-2-甲基苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000951
步骤1：(E)-3-(2-甲基-5-硝基苯基)丙烯腈
将2-溴-1-甲基-4-硝基苯(1.0当量)、丙烯腈(1.5当量)、Pd2(dba)3(0.1当量)、P(o-Tol)3(0.2当量)和TEA(3.0当量)在DMF(2.3M)中的混合物在120℃下在Ar下搅拌16小时。通过TLC监测反应。将反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。有机层经Na2SO4干燥，在减压下浓缩。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚/EtOAc 20:1至5:1)纯化，得到呈棕色固体状的标题化合物。
步骤2：3-(5-氨基-2-甲基苯基)丙腈
向(E)-3-(2-甲基-5-硝基苯基)丙烯腈(1.0当量)在MeOH(0.15M)中的溶液中添加Pd/C(10％重量，0.02当量)。将反应混合物在室温下在H2下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。滤出固体，且减压浓缩滤液，得到呈棕色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝161；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.96(d,J＝8.8Hz,1H),6.55-6.52(m,2H),3.57(br s,2H),2.88(t,J＝7.6Hz,2H),2.55(t,J＝8.0Hz,2H),2.20(s,3H)。
以下中间体是根据中间体B21中所述的方法制备。
Figure BDA0003136327520000961
中间体B26：1-(3-氨基苯基)环丙烷-1-甲酸甲酯
Figure BDA0003136327520000962
步骤1：1-(3-硝基苯基)环丙烷-1-甲腈
向2-(3-硝基苯基)乙腈(2.0g，12.33mmol，1.0当量)、1,2-二溴乙烷(3.47g，18.50mmol，1.5当量)、Et3NBnCl(562mg，2.47mmol，0.2当量)在甲苯(1.2M)中的混合物中添加NaOH水溶液(50％wt,10当量)。将反应混合物在35℃下搅拌16小时。通过TLC及H NMR监测反应。用水稀释混合物且用EtOAc萃取。有机层用1.0M HCl水溶液、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。在除去溶剂后，获得呈棕色固体状的标题化合物3(700mg，30％)。
步骤2：1-(3-硝基苯基)环丙烷-1-甲酸
将1-(3-硝基苯基)环丙烷(600mg，3.19mmol，1.0当量)在浓HCl(10mL)中的溶液在120℃下搅拌4小时。通过LCMS监测反应。用水稀释混合物且用DCM萃取。有机层用NaHCO3水溶液洗涤，随后用Na2SO4干燥。滤出固体，且减压浓缩滤液，得到黑色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M-H]-＝206；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.96(d,J＝8.8Hz,1H),6.55-6.52(m,2H),3.57(br s,2H),2.88(t,J＝7.6Hz,2H),2.55(t,J＝8.0Hz,2H),2.20(s,3H)。
步骤3：1-(3-氨基苯基)环丙烷-1-甲酸
向1-(3-硝基苯基)环丙烷-1-甲酸(1.0当量)在MeOH(0.24M)中的溶液中添加Pd/C(20％wt，0.1当量)。将混合物在35℃下在H2下搅拌3小时。通过TLC监测反应。滤出固体，且减压浓缩滤液，得到呈棕色固体状的标题化合物。
步骤4：1-(3-氨基苯基)环丙烷-1-甲酸甲酯
将1-(3-氨基苯基)环丙烷-1-甲酸(428mg，2.41mmol，1.0当量)在2.5MHCl/MeOH(1.0当量，0.24M)中的溶液在50℃下搅拌3小时。通过TLC及LC-MS监测反应直至完成。减压浓缩混合物，将残余物溶解于DCM中，用NaHCO3水溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机层。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：DCM/MeOH 1:0至20:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝192。
中间体B27：2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520000971
步骤1：2-甲基-2-(3-硝基苯基)丙酸甲酯
在0℃下向2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯(1.0当量)在DMF(0.14M)中的溶液中逐份添加t-BuOK(3.0当量)。在相同温度下搅拌混合物10分钟。将MeI(5.0当量)引入至混合物中且将温度保持低于5℃。在室温下搅拌2小时之后用水猝灭反应混合物。用Et2O萃取所得溶液。有机层经合并且浓缩，通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 20:1至15:1)纯化残余物，得到呈淡黄色油状的标题化合物。
步骤2：2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙酸甲酯
向2-甲基-2-(3-硝基苯基)丙酸甲酯(1.0当量)在MeOH/H2O(1:1，0.12M)中的溶液中添加NH4Cl(10当量)和Zn(5.0当量)。在80℃下加热反应物2小时。通过TLC监测反应。滤出固体，浓缩滤液且用DCM萃取。有机层经合并、干燥且通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 15:1至8:1)纯化，得到标题化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.72(d,J＝8.0Hz,1H),6.65(t,J＝1.6Hz,1H),6.57(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),3.65(s,3H),1.48(s,6H)。
中间体B28：3-(3-氨基-5-甲氧基苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000981
按照中间体B2中所述的方法制备中间体。LCMS(m/z):[M+H]+＝177；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.18-6.13(m,3H),3.76(s,3H),3.69(s,2H,NH2),2.82(t,J＝7.6,2H),2.58(t,J＝7.6Hz,2H)。
中间体B29：3-(3-氨基-5-氟苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000982
按照中间体B2中所述的方法制备中间体。LCMS(m/z):[M+1]+＝165.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.32-6.26(m,3H),3.80(br s,2H),2.83(t,J＝7.6Hz,2H),2.59(t,J＝7.6Hz,2H)。
中间体B30：3-(3-氨基-5-氯苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520000983
按照中间体B6中所述的方法制备中间体。LCMS(m/z):[M+1]+＝181.1。
中间体B31：3-(3-氨基苯基)-2,2-二甲基丙腈
Figure BDA0003136327520000984
步骤1：1-(溴甲基)-3-硝基苯
将1-甲基-3-硝基苯(1当量)、NBS(1.05当量)和AIBN(0.03当量)在CCl4中的溶液在95℃下加热16小时。通过TLC监测反应至完成。滤出固体且浓缩滤液，得到粗产物，其通过硅胶快速色谱(石油醚作为洗脱剂)纯化，得到标题化合物。
步骤2：2,2-二甲基-3-(3-硝基苯基)丙腈
在-78℃下，向LDA(1.1当量)在THF中的溶液中添加异丁腈(1.0当量)在THF中的溶液，且将所得溶液在-78℃下搅拌30分钟。接着添加1-(溴甲基)-3-硝基苯(1.0当量)在THF中的溶液，且使反应混合物在3小时内升温至室温。完成后，反应物用饱和NH4Cl溶液猝灭且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，浓缩且通过硅胶快速色谱(100％石油醚)纯化，得到标题化合物。
步骤3：3-(3-氨基苯基)-2,2-二甲基丙腈
将2,2-二甲基-3-(3-硝基苯基)丙腈(1.0当量)和钯/碳(0.03当量)在MeOH中的混合物在室温下在H2(气球)下搅拌16小时。滤出固体，浓缩滤液，得到标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝175；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.11(t,J＝7.2Hz,1H),6.65-6.61(m,3H),3.67(br s,2H),2.72(s,2H),1.34(s,6H)。
中间体B32：3-(3-氨基-5-甲基苯基)-2,2-二甲基丙腈
Figure BDA0003136327520000991
按照中间体B31中所述的方法制备该中间体。LCMS(m/z):[M+1]+＝189.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.46(s,1H),6.44(s,1H),6.42(s,1H),3.61(br s,2H),2.68(s,2H),2.25(s,3H),1.34(s,6H)。
中间体B33：3-(3-氨基苄基)环氧丙烷-3-甲腈
Figure BDA0003136327520000992
按照中间体B31中所述的方法制备该中间体。将硝基还原为胺的最后一步使用Zn/NH4Cl而非Pd/C/H2方法。LCMS(m/z):[M+1]+＝189.2。
中间体B34：3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁酸甲酯
Figure BDA0003136327520000993
步骤1：3-(4-溴苯基)-3-甲基丁酸
将3-甲基丁-2-烯酸(1当量)、AlCl3(2当量)在溴苯(4当量)中的混合物在65℃下搅拌1小时。混合物用NaOH水溶液猝灭，用EtOAc(3×50mL)洗涤。水相经柠檬酸溶液中和且用EtOAc(3×50mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经NaSO4干燥，且在真空中浓缩，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M-H]-＝255。
步骤2：3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁酸
将3-(4-溴苯基)-3-甲基丁酸(1.6当量)和KNO3(1.0当量)在浓H2SO4(1.2M)中的混合物在-30℃下搅拌5分钟。将混合物用水猝灭且用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，浓缩。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5/1至2/1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M-H]-＝300。
步骤3：3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁酸
将3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁酸(1当量)和Pd/C(10％，0.03当量.)在MeOH(0.3M)中的混合物在室温下搅拌16小时。滤出固体，浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝194。
步骤4：3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁酸甲酯
将3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁酸(1.55mmol)在1M HCl/MeOH(0.16M)中的溶液在室温下搅拌1小时，且减压除去溶剂，得到呈黄色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝208。
中间体B35：3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁腈
Figure BDA0003136327520001001
步骤1：3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁酰胺
向3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁酸(1.0当量)在THF(0.25M)中的溶液中添加HATU(1.3当量)、DIEA(2.0当量)和NH4Cl(2.0当量)。将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用水猝灭，用EA(2×30mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝301.0。
步骤2：3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁腈
向3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁酰胺(1.0当量)在DMF(0.66M)中的溶液中添加(CNCl)3(1.2当量)，且将所得混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用NH4Cl水溶液猝灭，且用EA(3×20mL)萃取。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1至1:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤3：3-(3-氨基苯基)-3-甲基丁腈
向3-(4-溴-3-硝基苯基)-3-甲基丁腈(1.0当量)在MeOH(0.4M)中的溶液中添加10％Pd/C(10％重量，0.03当量)。将混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体且在真空中浓缩滤液，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝175.1。
中间体B36：2-(3-氨基-5-甲基苯基)乙腈
Figure BDA0003136327520001011
步骤1：1-(溴甲基)-3-甲基-5-硝基苯
将1,3-二甲基-5-硝基苯(1.0当量)、NBS(1.1当量)和BPO(0.015当量)在CCl4(0.5M)中的混合物在95℃下在Ar下搅拌过夜。过滤反应混合物，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤2：2-(3-甲基-5-硝基苯基)乙腈
将1-(溴甲基)-3-甲基-5-硝基苯(1.0当量)、KCN(2.0当量)在DMSO(0.65M)中的混合物在40℃下在Ar下搅拌过夜。完成后，将反应混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚:EtOAc＝5:1)纯化粗产物，得到呈黄色油状的标题化合物。
步骤3：3-(3-氨基-5-甲基苯基)乙腈
将2-(3-甲基-5-硝基苯基)乙腈(1.0当量)和Pd/C(10％，0.01当量)在MeOH(0.1M)中的混合物在室温下在H2(气球)下搅拌2小时。滤出固体，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚:EtOAc＝1:1)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝147。
中间体B37：2-(3-氨基-5-甲基苯基)-2-甲基丙腈
Figure BDA0003136327520001021
步骤1：2-甲基-2-(3-甲基-5-硝基苯基)丙腈
在0℃下，在Ar氛围下向2-(3-甲基-5-硝基苯基)乙腈(1.0当量)在DMF(0.13M)中的搅拌溶液中逐份添加t-BuOK(3.0当量)，且将所得混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用冰水猝灭，用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝25:1至10:1)纯化粗产物，得到标题化合物。1HNMR(400MHz,CDCl3)8.09(S,1H),8.02(s,1H),7.69(s,1H),2.51(s,3H),1.78(s,6H)。
步骤2：2-(3-氨基-5-甲基苯基)-2-甲基丙腈
向2-甲基-2-(3-甲基-5-硝基苯基)丙腈(1.0当量)在MeOH(0.06M)中的溶液中添加Pd/C(10％重量，0.04当量)，且将所得混合物在室温下在H2下搅拌6小时。滤出固体，浓缩滤液且通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至8:1)纯化，得到呈油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝175.0。
中间体B38：2-(5-氨基-2-甲基苯基)乙酸甲酯
Figure BDA0003136327520001022
步骤1：2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸
在0℃下，向2-(邻甲苯基)乙酸(3.5g，23.6mmol，1.0当量)在DCM(20mL)中的混合物中添加浓H2SO4(10mL)和HNO3(1.0mL)的预先冷却的混合物，且将反应混合物在室温下搅拌2小时，随后倒入冰水中。通过过滤收集白色固体，且用水洗涤固体滤饼，且在真空下干燥。通过硅胶快速色谱(DCM/MeOH＝10:1)进一步纯化粗产物，得到标题化合物。
步骤2：2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸甲酯
向2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸(1.7g，6.52mmol，1.0当量)在MeOH(8.0mL)中的溶液中添加SOCl2(5.2g，5.0当量)，且将反应混合物在40℃下在Ar下搅拌16小时。混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在除去溶剂后获得呈黄色油状的标题化合物。
步骤3：2-(5-氨基-2-甲基苯基)乙酸甲酯
将2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸甲酯(200mg，0.96mmol，1.0当量)和Pd/C(10％，20mg)在MeOH(20mL)中的混合物在室温下在H2(气球)下搅拌2小时。滤出固体，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚:EtOAc＝10:1)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝180。
中间体B39：2-(5-氨基-2-甲基苯基)-2-甲基丙腈
Figure BDA0003136327520001031
步骤1：(2-甲基-5-硝基苯基)甲醇
在0℃下向2-甲基-5-硝基苯甲酸甲酯(1.0当量)在EtOH(0.5M)中的溶液中逐份添加CeCl3.7H2O(0.2当量)，接着分批添加NaBH4(2.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时，随后用冰水猝灭。将混合物用EtOAc萃取，合并的有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。
步骤2：2-(氯甲基)-1-甲基-4-硝基苯
在0℃下，向(2-甲基-5-硝基苯基)甲醇(1.0当量)在DCM(0.3M)中的溶液中逐滴添加SOCl2(5.0mL)。将所得混合物在室温下搅拌16，随后用冷NaHCO3水溶液猝灭。用EtOAc萃取混合物。有机层经Na2SO4干燥，过滤，且浓缩，得到呈白色固体状的化合物。
步骤3：2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙腈
向2-(氯甲基)-1-甲基-4-硝基苯(1.0当量)在DMSO(0.27M)中的溶液中添加KCN(2.0当量)。将混合物在室温下搅拌16小时，随后用冰水猝灭。用EtOAc萃取混合物，合并的有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝5:1至3:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。
步骤4：2-甲基-2-(2-甲基-5-硝基苯基)丙腈
在0℃下，向2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙腈(1.0当量)在DMSO(0.5M)中的溶液中添加NaOH水溶液(5.0mL，30％wt)，接着添加MeI(10当量)。将混合物在0℃下搅拌5分钟，接着用NH4Cl水溶液猝灭。混合物经后处理，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至8:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。
步骤5：2-(5-氨基-2-甲基苯基)-2-甲基丙腈
将2-甲基-2-(2-甲基-5-硝基苯基)丙腈(1.0当量)和Pd/C(10％重量，0.05当量)在MeOH(0.04M)中的混合物在室温下在H2下搅拌1小时。滤出固体且浓缩滤液，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝175.2。
中间体B40：2-(4-氨基苯基)-2-甲基丙酸甲酯
Figure BDA0003136327520001041
步骤1：2-甲基-2-(4-硝基苯基)丙酸甲酯
在-5℃下，向2-(4-硝基苯基)乙酸甲酯(1.0q)在DMF(0.1M)中的溶液中逐份添加NaH(3.0当量)。移除冷却浴，且将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物再次冷却至-5℃，且逐滴添加MeI(6.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌1小时，随后用冰水猝灭。用EtOAc萃取混合物，且将合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。在除去溶剂后获得呈黄色固体的标题化合物。
步骤2：2-(4-氨基苯基)-2-甲基丙酸甲酯
将2-甲基-2-(4-硝基苯基)丙酸甲酯(1.0当量)、Pd/C(10％重量，0.03当量)在MeOH(0.1M)中的混合物在室温下在H2下搅拌3小时。滤出固体且浓缩滤液，得到呈无色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝194.0。
中间体B41：2-(3-氨基苯基)-2,2-二氟乙酸甲酯
Figure BDA0003136327520001042
步骤1：2,2-二氟-2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯
在-70℃下，向2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯(1.0当量)在THF(0.13M)中的搅拌溶液中逐滴添加KHMDS(3.0当量)的溶液。将混合物在-70℃下搅拌20分钟，接着缓慢添加FN(SO2Ph)2(3.0当量)在THF(1.5M)中的溶液。将所得混合物在-70℃下搅拌30分钟，且使其升温至-10℃。用水猝灭反应物，用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1至10:1)纯化粗产物，得到呈油状的标题化合物。
步骤2：2-(3-氨基苯基)-2,2-二氟乙酸甲酯
将2,2-二氟-2-(3-硝基苯基)乙酸甲酯(1当量)和Pd/C(10％，0.03当量)在MeOH(0.2M)中的混合物在室温下在H2(气球)下搅拌16小时。滤出固体且浓缩滤液，通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至5:1)纯化残余物，得到呈棕色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝202。
中间体B42：2-(3-氨基苯氧基)乙腈
Figure BDA0003136327520001051
将3-硝基苯酚(1.0当量)、2-溴乙腈(1.2当量)和K2CO3(2.0当量)在CH3CN(0.5M)中的混合物在室温下搅拌16小时。滤出固体且浓缩滤液，得到粗产物2-(3-硝基苯氧基)乙腈，其用Zn(1.0当量)、饱和NH4Cl/MeOH(5mL/5mL)在65℃下处理3小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用水及盐水洗涤，用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚:EtOAc＝50:1)纯化粗产物，得到呈棕色油状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+1]+＝149.0。
中间体B43：3-(5-氨基-2-甲氧基苯基)丙腈
Figure BDA0003136327520001052
步骤1：(E)-3-(5-氨基-2-甲氧基苯基)丙烯腈
将3-溴-4-甲氧基苯胺(1当量)、丙烯腈(5当量)、Pd2(dba)3(0.05当量)和三乙胺(1.25当量)在DMF中的混合物用氩气吹扫，且在100℃下在微波反应器中加热1小时。将混合物冷却至室温且过滤。在减压下浓缩滤液。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc＝6:1)纯化粗产物，得到呈棕色固体状的标题化合物。
步骤2：3-(5-氨基-2-甲氧基苯基)丙腈
将(E)-3-(5-氨基-2-甲氧基苯基)丙烯腈(1当量)和Pd/C(10％重量，0.05当量)在MeOH(0.05M)中的混合物在室温下在H2下搅拌16小时。滤出固体，浓缩滤液。通过硅胶快速色谱纯化残余物，得到呈棕色固体状的标题化合物。LCMS(m/z):[M+H]+＝177.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.72-6.68(m,1H),6.60-6.56(m,2H),3.76(s,3H),2.87(t,J＝7.4Hz,2H),2.60(t,J＝7.4Hz,2H)。
中间体B44：3-(4-氨基-1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0003136327520001061
步骤1：3-(4-硝基-1H-吡唑-1-基)丙腈
将4-硝基-1H-吡唑(1.0当量)、丙烯腈(1.0当量)和Na2CO3(2.0当量)在H2O(0.9M)中的混合物在50℃下在Ar下搅拌12小时。将反应混合物用DCM/i-PrOH＝5:1(100mL×3)和H2O(100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱：石油醚/EtOAc＝4:1至1:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝167.3。
步骤2：3-(4-氨基-1H-吡唑-1-基)丙腈
将3-(4-硝基-1H-吡唑-1-基)丙腈(1.0当量)和Zn(10.0当量)在饱和NH4Cl水溶液/MeOH(1:2，0.1M)中的混合物在80℃下搅拌1小时。过滤反应混合物，且减压除去溶剂。通过硅胶快速色谱(洗脱：DCM/MeOH＝10:1)纯化残余物，得到呈棕色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝137.4。
中间体B45：3-(3-氨基-1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0003136327520001062
按照中间体B44中所述方法，使用3-硝基-1H-吡唑作为起始物质且使用1:1H2O/THF作为第一步中的溶剂来制备此中间体。LC-MS(m/z):[M+H]+＝137.0。
实施例
实施例1：3-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001071
步骤1：3-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸甲酯
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2,2’-联吡啶(中间体A1，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙酸甲酯(中间体B1，1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)和Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.064M)中的混合物在120℃下在Ar下搅拌16小时。使混合物冷却至室温。滤出固体且在减压下浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 5:1至0:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝455。
步骤2：3-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
向3-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸甲酯(1.0当量)在THF(0.022M)中的溶液中添加1N NaOH水溶液(45当量)。将反应溶液加热至70℃且搅拌2小时。LC-MS显示反应完成。减压浓缩反应混合物，且通过HPLC(流动相：CH3CN/H2O/0.1％HCOOH)纯化残余物。收集流份，且经由冻干器除去溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物(甲酸盐)。LC-MS(m/z):[M+1]+＝441.2；1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.83(s,1H),8.50(ddd,J＝4.8,1.6,0.8Hz,1H),8.23(s,0.4H,HCOOH),7.97(d,J＝5.6Hz,1H),7.84(ddd,J＝7.2,4.8,1.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(s,1H),7.46-7.44(m,1H),7.36(s,1H),7.34-7.31(m,1H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.71(d,J＝7.6Hz,1H),6.34(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.09(d,J＝2.4Hz,1H),2.74(t,J＝7.6Hz,2H),2.53(s,3H),2.48(t,J＝7.6Hz,2H),2.35(s,3H)。
根据实施例1中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。无实施例编号的化合物不属于式(I)或(II)。
Figure BDA0003136327520001081
Figure BDA0003136327520001091
Figure BDA0003136327520001101
Figure BDA0003136327520001111
实施例12：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-胺
Figure BDA0003136327520001112
步骤1：3-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2,2’-联吡啶(中间体A1，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙腈(中间体B2，1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)和Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.06M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。将混合物冷却至室温。滤出固体且在减压下浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 1:1至0:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝422。
步骤2：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-胺
将以上产物(1.0当量)、Bu2SnO(2.0当量)和TMSN3(5.0当量)在二噁烷(0.08M)中的混合物在120℃下在Ar下搅拌16小时。混合物经减压浓缩。通过HPLC(流动相：CH3CN/H2O/0.1％HCOOH)纯化残余物。收集流份，且经由冻干器除去溶剂，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝465.2；1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.85(s,1H),8.51-8.49(m,1H),8.15(s,1H),7.97(d,J＝6.0Hz,1H),7.84(td,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.57(s,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.40(s,1H),7.32(ddd,J＝7.2,4.8,1.2Hz,1H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.70(d,J＝7.6Hz,1H),6.35(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),6.09(d,J＝2.0Hz,1H),3.13(t,J＝7.6Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.52(s,3H),2.35(s,3H)。
根据实施例12中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001121
Figure BDA0003136327520001131
Figure BDA0003136327520001141
Figure BDA0003136327520001151
Figure BDA0003136327520001161
Figure BDA0003136327520001171
实施例34：2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-2H-四唑-2-基)乙酸(34A)和2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-1H-四唑-1-基)乙酸(34B)
Figure BDA0003136327520001172
步骤1：2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-2H-四唑-2-基)乙酸叔丁酯及2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-1H-四唑-1-基)乙酸叔丁酯
在0℃下在Ar下向N-(3-((1H-四唑-5-基)甲基)苯基)-4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-胺(实施例16，1.0当量)在丙酮(0.01M)中的搅拌溶液中添加K2CO3(1.5当量)。将所得混合物在0℃下搅拌30分钟且逐滴添加2-溴乙酸叔丁酯(1.5当量)。将混合物缓慢升温至室温且搅拌5小时。将混合物用饱和NH4Cl猝灭。将混合物分配于DCM/水之间。有机相经Na2SO4干燥，浓缩且通过制备型HPLC(流动相：0.1％TFA/MeCN/H2O)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物A及B。LC-MS(m/z):[M+1]+＝565。
步骤2，用于34A异构体：2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-2H-四唑-2-基)乙酸
向以上混合物(1.0当量)在MeCN(0.2M)中的搅拌溶液中添加4N HCl/二噁烷(80当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。减压浓缩反应混合物。通过HPLC(流动相：MeCN/H2O/0.1％HCOOH)纯化残余物。收集流份，且经由冻干器除去溶剂，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝509.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(s,1H),8.48(dd,J＝4.8,0.8Hz,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),7.82(td,J＝7.6,2.0Hz,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,1H),7.59(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.55(s,1H),7.38(s,1H),7.31(ddd,J＝7.6,4.8,1.6Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.73(d,J＝7.6Hz,1H),6.34(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),6.08(d,J＝2.4Hz,1H),5.27(s,2H),4.21(s,2H),2.51(s,3H),2.34(s,3H)。
步骤2，用于34B异构体：2-(5-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)-1H-四唑-1-基)乙酸
向来自步骤1的混合物(1.0当量)在MeCN(0.2M)中的搅拌溶液中添加4N HCl/二噁烷(80当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。减压浓缩反应混合物。通过HPLC(流动相：MeCN/H2O/0.1％HCOOH)纯化残余物。收集流份，且通过冻干器除去溶剂，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝509.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(s,1H),8.50(dd,J＝4.8,0.4Hz,1H),7.96(d,J＝6.0Hz,1H),7.84(td,J＝7.6,2.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(s,1H),7.54(dd,J＝9.2,0.8Hz,1H),7.47(s,1H),7.32(ddd,J＝7.2,4.8,1.2Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.75(d,J＝7.6Hz,1H),6.34(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.09(d,J＝2.0Hz,1H),5.59(s,2H),4.16(s,2H),2.52(s,3H),2.35(s,3H)。
根据实施例34中所述的方法制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001191
实施例36：3-(5-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-2-氟苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001192
步骤1：3-(5-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-2-氟苯基)丙酸甲酯
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,6-二甲基吡啶(中间体A2，1.0当量)、3-(5-氨基-2-氟苯基)丙酸甲酯(中间体B10，1.3当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)、Xantphos(0.1当量)和Cs2CO3(2.0当量)在二噁烷(0.29M)中的混合物在115℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。过滤反应混合物且减压浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚/EtOAc 10:1至3:1)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS:[M+H]+＝396.2。
步骤2：3-(5-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-2-氟苯基)丙酸
将3-(5-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-2-氟苯基)丙酸甲酯(1.0当量)和NaOH(5.0当量)在MeOH/H2O(v/v5:1，0.08M)中的混合物在50℃下搅拌2小时。通过LC-MS监测反应。滤出固体，且减压浓缩滤液。通过HPLC(流动相：0.1％NH3.H2O/MeCN/H2O)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝382.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(s,1H),8.04(d,J＝6.0Hz,1H),7.55-7.51(m,1H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(dd,J＝6.4,2.4Hz,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,1H),6.99(t,J＝9.2Hz,1H),6.40(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.02(d,J＝2.0Hz,1H),2.75(t,J＝7.6Hz,2H),2.47(s,3H),2.37(t,J＝7.6Hz,2H),2.28(s,3H)。
根据实施例36中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001201
Figure BDA0003136327520001211
Figure BDA0003136327520001221
实施例44：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-胺
Figure BDA0003136327520001222
步骤1：3-(3-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-2,6-二甲基吡啶(中间体A2，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙腈(中间体B2，1.3当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.2M)中的混合物在115℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将溶液冷却至室温且用EtOAc(50mL)稀释。将混合物用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(石油醚/EtOAc 3:2)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝345。
步骤2：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-胺
将3-(3-((4-((2,6-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)、TMSN3(5.0当量)和Bu2SnO(2.0当量)在二噁烷(0.06M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。冷却混合物溶液。有机相经浓缩。通过HPLC(流动相：0.1％HCOOH/MeCN/H2O)纯化残余物。收集流份，且通过冻干器除去溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物(甲酸盐)。LC-MS(m/z):[M+H]+＝388.3；1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.93(s,1H),8.17(s,0.6H,HCOOH),8.06(d,J＝5.6Hz,1H),7.50-7.43(m,3H),7.22(d,J＝8.0Hz,1H),7.13(t,J＝8.0Hz,1H),6.72(d,J＝7.2Hz,1H),6.43(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.04(d,J＝1.6Hz,1H),3.15(t,J＝7.6Hz,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.47(s,3H),2.29(s,3H)。
根据实施例44中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001231
Figure BDA0003136327520001241
Figure BDA0003136327520001251
实施例52：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-胺
Figure BDA0003136327520001252
步骤1：3-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-苯基吡啶(中间体A6，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙腈(中间体B2，1.5当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)和Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.25M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc(50mL)稀释，用盐水洗涤，接着用Na2SO4干燥。有机相经浓缩，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝407
步骤2：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-胺
将3-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)、TMSN3(5.0当量)和Bu2SnO(2.0当量)在二噁烷(0.17M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温且减压浓缩。通过制备型TLC(DCM/MeOH 8:1)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝450.4；1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.89(s,1H),8.00(d,J＝6.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,2H),6.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.44-7.36(m,7H),7.11(t,J＝7.6Hz,1H),6.71(d,J＝7.6Hz,1H),6.41-6.39(m,1H),6.09(s,1H),3.11(t,J＝7.6Hz,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),2.58(s,3H)。
根据实施例52中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001261
Figure BDA0003136327520001271
Figure BDA0003136327520001281
Figure BDA0003136327520001291
实施例66：3-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001292
将3-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(实施例52的步骤1，1.0当量)和KOH(10.0当量)在二噁烷/H2O(5:1，0.07M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将反应混合物冷却至室温且移除二噁烷。用1N HCl(水溶液)将残余物调节至pH 6-7，且通过过滤收集固体且用H2O洗涤。通过硅胶快速色谱(DCM/MeOH 8:1)纯化固体，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝426.4；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.64(br.s,1H),7.76-7.72(m,3H),7.41-7.35(m,4H),7.23-7.17(m,2H),7.14(s,1H),6.99(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),6.40(d,J＝2.0Hz,1H),6.21(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),2.95(t,J＝6.8Hz,2H),2.66(t,J＝6.8Hz,2H),2.65(s,3H)。
实施例67：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-胺
Figure BDA0003136327520001301
步骤1：3-(3-((4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将2-氯-4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶(中间体A12，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙腈(中间体B2，1.3当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)、Xantphos(0.1当量)和Cs2CO3(2.0当量)在二噁烷(0.21M)中的溶液在115℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。减压浓缩反应混合物。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc 10:1至2:1)纯化，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝430。
步骤2：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-胺
将3-(3-((4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)、TMSN3(5.0当量)和Bu2SnO(2.0当量)在二噁烷(0.12M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。减压浓缩反应混合物。通过制备型TLC(洗脱剂：DCM/MeOH 10:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝473.5；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(s,1H),8.02(d,J＝5.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.45(s,1H),7.13(t,J＝7.6Hz,1H),6.72(d,J＝7.6Hz,1H),6.44(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.25(d,J＝2.0Hz,1H),3.84-3.81(m,2H),3.68-3.63(m,1H),3.34-3.30(m,2H),3.15(t,J＝7.6Hz,2H),2.98(t,J＝7.6Hz,2H),2.74-2.69(m,1H),1.67-1.62(m,4H),1.03-0.91(m,4H)。
实施例68：3-(3-((4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001311
将3-(3-((4-((1-环丙基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(实施例67的步骤1，1.0当量)和KOH(5.0当量)在DMSO/H2O(v/v＝1:1，0.12M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。过滤反应混合物且用1.0MHCl水溶液将滤液调节至pH 7。通过过滤收集所沉淀固体。滤饼用水洗涤且通过HPLC(流动相：0.1％NH3·H2O/MeCN/H2O)纯化。收集流份，且通过冻干器除去溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝449.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(s,1H),8.02(d,J＝6.0Hz,1H),7.85(s,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(s,1H),7.11(t,J＝7.6Hz,1H),6.72(d,J＝7.6Hz,1H),6.43(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.25(d,J＝2.0Hz,1H),3.84-3.80(m,2H),3.67-3.63(m,1H),3.34-3.27(m,2H),2.76-2.71(m,3H),2.41(t,J＝8.0Hz,2H),1.67-1.62(m,4H),1.03-0.93(m,4H)。
根据实施例1中所述的方法，使用适当中间体制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001312
Figure BDA0003136327520001321
实施例70：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001322
步骤1：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-苯基吡啶(中间体A6，1.0当量)、2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙腈(中间体B5，1.5当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.3M)中的溶液在120℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。过滤反应混合物，且减压浓缩。残余物用EtOAc稀释，用水、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂石油醚/EtOAc100:1至10/1)纯化粗产物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝421.4；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.94(d,J＝6.0Hz,1H),7.72-7.70(m,2H),7.61(d,J＝8.4Hz,2H),7.42-7.27(m,6H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.34(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.13(d,J＝2.0Hz,1H),2.63(s,3H),1.71(s,6H)。
步骤2：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
将2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)在浓HCl水溶液(0.06M)中的溶液在110℃下在密封管中搅拌16小时。通过LCMS监测反应。通过HPLC(0.1％NH3·H2O/ACN/H2O)纯化混合物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝440.5；1H NMR(400MHz,CD3ODδ7.86(d,J＝5.6Hz,1H),7.67(d,J＝6.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.39-7.29(m,5H),7.20-7.18(m,2H),7.00-6.99(m,1H),6.26-6.25(m,1H),6.11(s,1H),2.59(s,3H),1.48(s,6H)。
实施例71：2-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸
Figure BDA0003136327520001331
步骤1：2-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-5,6-二甲基-2,2’-联吡啶(中间体A1，1.0当量)、2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙腈(中间体B5，1.1当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)和Xantphos(0.1当量)在二噁烷(0.18M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将混合物溶液冷却至室温且用EtOAc(50mL)稀释。混合物用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。浓缩有机相，且通过制备型TLC纯化残余物，得到呈淡黄色固体的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝436.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58-8.56(m,1H),7.90(d,J＝5.6Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.64-7.60(m,1H),7.29(t,J＝1.8Hz,1H),7.25-7.21(m,2H),7.18-7.12(m,2H),7.05-7.02(m,1H),6.76(s,1H),6.23(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H),6.15(d,J＝2.0Hz,1H),2.54(s,3H),2.28(s,3H),1.62(s,6H)。
步骤2：2-(3-((4-((5,6-二甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸
将以上产物(1.0当量)在HCl(水溶液，12N)(0.04M)中的混合物在110℃下在密封管中搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。通过HPLC(CH3CN/H2O/0.1％HCOOH)纯化混合物溶液，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝455.4；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.56(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(s,1H,HCOOH),(m,1H),7.92(td,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(d,J＝6.4Hz,1H),7.57(s,1H),7.42(t,J＝5.6Hz,1H),7.33(t,J＝8.0Hz,1H),7.28(s,1H),7.21-7.17(m,2H),6.49(dd,J＝6.4,2.4Hz,1H),6.19(d,J＝2.4Hz,1H),2.60(s,3H),2.41(s,3H),1.51(s,6H)。
实施例72：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
Figure BDA0003136327520001341
步骤1：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2,2’-联吡啶(中间体A3，1.0当量)、2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙腈(中间体B5，1.5当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.033M)中的混合物在120℃下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释，用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。减压浓缩有机相。通过HPLC(0.1％NH3·H2O/ACN/H2O)纯化残余物，得到呈白色固体状的产物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝422.3；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.59(s,1H),7.91-7.75(m,5H),7.48-7.25(m,4H),7.08-7.06(m,1H),6.30(s,1H),6.12(s,1H),2.63(s,3H),1.68(s,6H)。
步骤2：2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙酸
将2-甲基-2-(3-((4-((6-甲基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)、KOH(20当量)在二噁烷-H2O(1:1，0.015M)中的混合物在120℃下搅拌36小时。通过LC-MS监测反应。将混合物溶液冷却至室温且浓缩。通过HPLC(0.1％NH3·H2O/ACN/H2O)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝441.4；1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.25(br,1H),8.89(s,1H),8.52(d,J＝2.8Hz,1H),7.95(d,J＝5.2Hz,1H),7.86(t,J＝7.6Hz,1H),7.76(d,J＝8.0Hz,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.65-7.62(m,1H),7.46(d,J＝7.6Hz,1H),7.40-7.34(m,2H),7.15(m,1H),6.86-6.81(m,1H),6.33(d,J＝3.6Hz,1H),6.09(s,1H),2.58(s,3H),1.41(s,6H)。
根据实施例72中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001351
Figure BDA0003136327520001361
实施例77：1-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0003136327520001362
步骤1：1-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)环丙烷-1-甲酸甲酯。
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-苯基吡啶(中间体A6，1.0当量)、1-(3-氨基苯基)环丙烷-1-甲酸甲酯(中间体B26，1.0当量)、Xantphos(0.1当量)、Cs2CO3(2.0当量)和Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.17M)中的混合物密封于管式反应器中。将所得混合物在115℃下在Ar下搅拌16小时。通过LC-MS监测反应。过滤混合物，在减压下浓缩滤液。通过制备型TLC(洗脱剂：DCM/MeOH 20:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝452.3。
步骤2：1-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)环丙烷-1-甲酸
将1-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)环丙烷-1-甲酸甲酯(100mg，0.22mmol，1.0当量)、NaOH水溶液(2.0M，5.0当量)在MeOH(0.05M)中的混合物在50℃下搅拌2小时。通过LC-MS监测反应。减压浓缩混合物且通过制备型HPLC(流动相：0.1％HCOOH/MeCN/H2O)纯化残余物。经由冻干器除去溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物(甲酸盐)。LC-MS(m/z):[M+H]+＝438.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(s,1H),8.29(s,1H,HCOOH),8.00(d,J＝6.0Hz,1H),7.78(d,J＝6.8Hz,2H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),7.45-7.35(m,5H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.81(d,J＝7.6Hz,1H),6.38(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.09(d,J＝2.0Hz,1H),2.58(s,3H),1.39(m,2H),1.03(m,2H)。
根据实施例77中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001371
Figure BDA0003136327520001381
实施例81：2-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸
Figure BDA0003136327520001382
步骤1：2-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸甲酯
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-甲基吡啶(中间体A16，1.0当量)、2-(3-氨基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(中间体B27，1.5当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.1当量)和Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.1M)中的混合物在115℃下搅拌16小时。经硅藻土层过滤反应混合物，浓缩滤液。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至1:1)纯化残余物，得到标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝406.2。
步骤2：2-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸
将2-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2-甲基丙酸甲酯(1.0当量)和KOH(5.0当量)在MeOH/H2O(4:1，0.05M)中的混合物在50℃下搅拌16小时。在减压下移除MeOH，且用1.0M HCl水溶液将水性残余物调节至pH约7。用EtOAc萃取混合物，合并的有机层用盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过制备型HPLC(流动相：0.1％NH3.H2O/MeCN/H2O)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝392.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.27(br s,1H),8.98(s,1H),8.06(d,J＝6.0Hz,1H),7.69(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.43(t,J＝1.6Hz,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.18(t,J＝8.0Hz,1H),6.85(d,J＝8.0Hz,1H),6.42(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.07(d,J＝2.0Hz,1H),2.76(q,J＝7.6Hz,2H),2.46(s,3H),1.44(s,6H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H)。
根据实施例81中所述的方法，使用适当中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001391
Figure BDA0003136327520001401
Figure BDA0003136327520001411
Figure BDA0003136327520001421
Figure BDA0003136327520001431
Figure BDA0003136327520001441
Figure BDA0003136327520001451
Figure BDA0003136327520001461
Figure BDA0003136327520001471
Figure BDA0003136327520001481
Figure BDA0003136327520001491
Figure BDA0003136327520001501
Figure BDA0003136327520001511
实施例131：2,2-二氟-2-(3-((4-((6-甲基-2-苯基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)乙酸
Figure BDA0003136327520001521
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-甲基-2-苯基吡啶(中间体A6，1.0当量)、2-(3-氨基苯基)-2,2-二氟乙酸甲酯(中间体B41，2.2当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.10当量)、Pd(OAc)2(0.10当量)在二噁烷(0.23M)中的混合物在110℃下在Ar氛围下搅拌16小时。过滤混合物，浓缩滤液。通过制备型HPLC(流动相：0.1％HCOOH/CH3CN/H2O纯化残余物，得到呈固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝448.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(s,1H),8.24(s,0.4H,HCO2H),8.03(d,J＝5.6Hz,1H),7.82-7.76(m,4H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.43-7.28(m,5H),7.02(d,J＝7.6Hz,1H),6.44(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.11(d,J＝2.0Hz,1H),2.59(s,3H)。
实施例132：2-(3-((4-((1-环丙基-3-苯基-1H-吡唑-4-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸
Figure BDA0003136327520001522
通过按照实施例131中所述的方法，使用中间体A51及中间体B41来制备此化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝463.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.12(s,1H),8.09(s,1H),8.05(d,J＝5.6Hz,1H),7.78(d,J＝8.8Hz,1H),7.71-7.68(m,3H),7.36(t,J＝7.6Hz,2H),7.29-7.23(m,2H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.53(dd,J＝5.6,2.4Hz,1H),6.32(d,J＝2.4Hz,1H),3.84-3.77(m,1H),1.17-1.13(m,2H),1.04-1.00(m,2H)。
实施例133：3-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2,2-二甲基丙酸
Figure BDA0003136327520001531
步骤1：3-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2,2-二甲基丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2-甲基吡啶(中间体A16，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)-2,2-二甲基丙腈(中间体B31，1.1当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)、Xantphos(0.1当量)和Cs2CO3(2.0当量)在二噁烷(0.1M)中的混合物在110℃下在Ar氛围下搅拌16小时。将混合物冷却至室温，用DCM/H2O稀释。分离有机层，用Na2SO4干燥。通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝2:1)纯化粗产物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝387.4。
步骤2：3-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2,2-二甲基丙酸
将3-(3-((4-((6-乙基-2-甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)-2,2-二甲基丙腈(1.0当量)在浓HCl(0.04M)中的混合物在115℃下搅拌16小时。浓缩混合物，其通过制备型HPLC(流动相：0.1％HCOOH/MeCN/H2O)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝406.3；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.97(d,J＝6.0Hz,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.26-7.22(m,2H),7.17-7.13(m,2H),6.81(d,J＝7.2Hz,1H),6.36(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),6.11(d,J＝2.0Hz,1H),2.81(s,2H),2.80(q,J＝7.6Hz,2H),2.38(s,3H),1.29(d,J＝7.6Hz,3H),1.14(s,6H)。
根据实施例133中所述的方法，使用对应中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001532
Figure BDA0003136327520001541
Figure BDA0003136327520001551
Figure BDA0003136327520001561
Figure BDA0003136327520001571
Figure BDA0003136327520001581
Figure BDA0003136327520001591
Figure BDA0003136327520001601
Figure BDA0003136327520001611
Figure BDA0003136327520001621
Figure BDA0003136327520001631
Figure BDA0003136327520001641
Figure BDA0003136327520001651
实施例174：3-(3-((4-((6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)环氧丙烷-3-甲酸
Figure BDA0003136327520001661
步骤1：3-(3-((4-((6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)环氧丙烷-3-甲腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,5-二甲基吡啶(中间体A49，1.0当量)、3-(3-氨基苄基)环氧丙烷-3-甲腈(中间体B33，1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.2当量)和Pd(OAc)2(0.2当量)在二噁烷(0.06M)中的混合物在110℃下在Ar下搅拌16小时。经硅藻土层过滤混合物，浓缩滤液。将残余物再溶解于EtOAc中，用水、盐水洗涤，随后用Na2SO4干燥。通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝10:1至2:1)纯化粗产物，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝415.2。
步骤2：3-(3-((4-((6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)环氧丙烷-3-甲酸
将3-(3-((4-((6-乙基-2,5-二甲基吡啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苄基)环氧丙烷-3-甲腈(1.0当量)和KOH(5.0当量)在乙二醇/H2O(v/v＝4:1，0.02M)中的混合物在130℃下搅拌2小时。将混合物冷却至室温，用EtOAc洗涤。用1.0M HCl水溶液将水层调节至pH约7，且减压除去溶剂。通过制备型HPLC(流动相：0.1％HCOOH/MeCN/H2O)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝434.2；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.97(d,J＝6.0Hz,1H),7.33(s,1H),7.27-7.25(m,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),6.83(d,J＝7.6Hz,1H),6.38(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.10(d,J＝1.6Hz,1H),4.84(d,J＝6.4Hz,2H),4.60(d,J＝6.0Hz,2H),3.27(s,2H),2.82(q,J＝7.6Hz,2H),2.34(s,6H),1.24(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例175：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-胺
Figure BDA0003136327520001671
步骤1：3-(3-((4-((6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈
将3-((2-氯吡啶-4-基)氧基)-6-乙基-2,2’-联吡啶(中间体A21，1.0当量)、3-(3-氨基苯基)丙腈(中间体B2，1.0当量)、Cs2CO3(2.0当量)、Xantphos(0.10当量)、Pd(OAc)2(0.1当量)在二噁烷(0.1M)中的混合物在110℃下在Ar氛围下搅拌16小时。滤出固体，浓缩滤液。残余物通过硅胶快速色谱(洗脱剂：石油醚/EtOAc＝20:1)纯化，得到呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+1]+＝422.3。
步骤2：N-(3-(2-(2H-四唑-5-基)乙基)苯基)-4-((6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-胺
将3-(3-((4-((6-乙基-[2,2’-联吡啶]-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)苯基)丙腈(1.0当量)、TMSN3(5.0当量)和Bu2SnO(2.0当量)在二噁烷(0.04M)中的混合物在100℃下在Ar氛围下搅拌16小时。除去溶剂，且通过制备型HPLC(流动相：0.1％HCOOH/MeCN/H2O)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(m/z):[M+H]+＝465.2；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.58(d,J＝4.8Hz,1H),7.89(td,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.86(d,J＝6.0Hz,1H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.43-7.38(m,1H),7.22(s,1H),7.17-7.10(m,2H),6.76(d,J＝6.8Hz,1H),6.32(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.09(d,J＝2.0Hz,1H),3.18(t,J＝7.6Hz,2H),3.02(t,J＝7.6Hz,2H),2.90(q,J＝7.6Hz,2H),1.34(t,J＝7.6Hz,3H)。
根据实施例175中所述的方法，使用对应中间体来制备以下化合物。
Figure BDA0003136327520001672
Figure BDA0003136327520001681
Figure BDA0003136327520001691
Figure BDA0003136327520001701
Figure BDA0003136327520001711
Figure BDA0003136327520001721
Figure BDA0003136327520001731
Figure BDA0003136327520001741
Figure BDA0003136327520001751
Figure BDA0003136327520001761
以下化合物可使用本文中的反应流程及方法制备。
Figure BDA0003136327520001762
Figure BDA0003136327520001771
Figure BDA0003136327520001781
Figure BDA0003136327520001791
在一些实施方案中，本发明提供选自本文所述的实施例化合物的化合物。
测定：
HEK-Blue TGFβ细胞报告基因试验：
HEK-Blue TGFβ细胞是购自Invivogen。使用测试培养基(Test Medium)(含有0.5％v/v加热灭活FBS的DMEM)制备2.5×105个细胞/毫升的细胞混悬液。通过在使用之前用测试培养基稀释TGF-β储备溶液(10μg/ml)来获得TGF-β工作溶液(6ng/ml)。使用TGF-β工作溶液通过3×梯度稀释法获得八种不同浓度的所有化合物。向平底96孔板的每个孔添加100μl测试培养基(载体)或测试物或TGF-β工作溶液。每个孔添加100μl HEK-Blue TGF-β细胞混悬液。将板在37℃下在CO2培育箱中培育22至23小时。向新的平底96孔板的每个孔添加150μl再悬浮的QUANTI-Blue。添加30μl诱导的HEK-Blue TGF-β细胞上清液。避免在孔底部吸取液体。将板在37℃培育箱中培育30-40分钟。使用分光光度计在630nm处测定分泌的胚胎碱性磷酸酶(SEAP)水平。
使用以下方程式计算抑制：
Figure BDA0003136327520001792
活性数据：
HEK-Blue TGFβ细胞报告基因分析：
Figure BDA0003136327520001793
Figure BDA0003136327520001801
Figure BDA0003136327520001811
Figure BDA0003136327520001821
比较所选实施例与临床化合物Galunisertib和LY3200882的AUC肝脏/AUC心脏比。在以10mpk进行PO给药的Balb/c小鼠中测定组织暴露。应注意，心脏毒性是鉴别为与LY3200882最相关且鉴别为Galunisertib的限制因素。参见Stauber等人,J.Clin.Pract.,2014,4(3),196。
一般PK方案：
Balb/c小鼠在治疗之前禁食过夜且自由获取饮用水。化合物在具有或不具有1当量NaOH的0.5％CMC/0.5％Tween 80中配制，且以10mg/Kg胃内施用。通过首先经CO2吸入处死动物而在给药后0.5、1、3、5、7、24小时的时间点(每个时间点2只小鼠)收集小鼠的肝脏及心脏组织。在用冰生理盐水冲洗及移除其表面上的过量水之后，对肝脏及心脏组织称重且在含有20％甲醇的1:5体积(w/v)的水中均质化。组织样品在分析之前保持于-40至-20℃下。使用确立的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法测定肝脏及心脏中化合物的浓度。通过线性回归分析处理组织浓度-时间数据。所有药代动力学参数均使用Pharsight Phoenix8.0的非室模型计算。
Figure BDA0003136327520001822
Figure BDA0003136327520001823
Figure BDA0003136327520001831
如数据所展示，当与Galunisertib或LY3200882相比时，相比于在心脏组织中，本发明化合物更加倾向于集中在肝脏中，因此能够比已知化合物更好地提供有用的安全性边际和治疗指数。由于心脏毒性为研发新药物时的主要关注点，表现出目标位点上的强效体外活性以及促进安全性的显著更好的药代动力学特性的本发明化合物显示出优于本领域内已知的化合物。
提供上文阐述的实施方式以帮助本领域技术人员实施本发明。然而，本文中描述及要求的本发明的范围不受本文中公开的特定实施方案限制，因为这些实施方案预期作为本发明的一些方面的说明。任何明显的替代或其它实施方案意图落入本发明的范围内。实际上，根据不脱离本发明发现的主旨或范围的前述描述，除本文所显示及描述的修改以外的本发明的各种修改将对本领域技术人员变得显而易见。此类修改也意图落入所附申请专利范围的范围内。
本申请中引用的所有公开物、专利、专利申请及其他参考文献均出于所有目的以全文引用的方式并入本文中，其程度如同单个公开物、专利、专利申请或其他参考文献专门和个别地指示为出于所有目的以全文引用的方式并入本文中一样。本文中参考文献的引用不应视为承认此类引用为本发明的现有技术。

Claims (38)

1.式(II)化合物：
Figure FDA0003136327510000011
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基、4-6元环醚和C3-C6环烷基；
R1是选自CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、5-6元杂环基、苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自Q1的基团取代；
Q1在每次出现时独立地选自卤素、CN、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
L1为选自以下的二价连接体：-C(R9)2-、-(C(R10)2)2-4-、-O-(C(R10)2)1-3-和-(C(R10)2)m-X-C(R10)2)n-；
R9各自独立地为C1-C2烷基或卤素，或两个R9可与两者所连接的碳原子一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
R10在每次出现时独立地选自H、F和C1-C4烷基；或相同碳上的两个R10基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；
X为吡唑基、三唑基或四唑基环；
Z2是选自CH、CQ2及N；且
q为0或1；
Q2是选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
2.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物具有式(IIa)：
Figure FDA0003136327510000021
其中：
R7和R8独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R7和R8可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R7和R8所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其中该化合物具有式(IIb)：
Figure FDA0003136327510000022
其中Z1是选自CH和N；
p为0、1或2；且
Q1各自独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
4.如权利要求1或2所述的化合物，其中R1是选自CN、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C3-C6环烷基和含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；或其可药用盐。
5.如权利要求1所述的化合物，其中该化合物具有式(He)：
Figure FDA0003136327510000031
其中R6是选自C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
6.如权利要求1或2或5所述的化合物，其中L1为C(Me)2、-OCH2-[C]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[C]、-CH2C(Me)2-[C]或-CF2CH2-[C]，其中[C]指示L与式(II)或(IIa)或(IIb)中的羧酸连接的末端；
或其可药用盐。
7.如权利要求1或2或5中任一项所述的化合物，其中L1为-(CR10 2)m-X-(CR10 2)n-，其中m为1且n为1；或其可药用盐。
8.如权利要求1或2所述的化合物，其中R7和R8各自独立地选自H、Me和Et；或其可药用盐。
9.如权利要求1或2所述的化合物，其中Z2为CH或N；或其可药用盐。
10.如权利要求9所述的化合物，其中Z2为CH；或其可药用盐。
11.如权利要求10所述的化合物，其中R1为Me且L1为-C(Me)2-，或其可药用盐。
12.如权利要求1所述的化合物，其选自实施例1、4-7、10-11、34-37、39-41、43、66、68、70-110、115-116、118-174和217的化合物；或其可药用盐。
13.式(I)化合物：
Figure FDA0003136327510000041
其中：
环A为5元或6元杂芳环，其任选地含有其它氮原子作为环成员且任选地与苯基或吡啶基环稠合，且环A任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基、吡啶基、4-6元环醚及C3-C6环烷基；
R1是选自H；卤素；CN；C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C3-C6环烷基、苯基、5-6元杂环基及5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
R2在每次出现时独立地选自卤素、CN、-OH、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
Cy为选自C3-C6环烷基、苯基和含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基的环，且其任选地进一步被一个或两个选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
L为选自以下的二价连接体：键、CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-及-(CR2)m-X-(CR2)n-，
其中R在每次出现时独立地选自H、F及C1-C4烷基；或相同碳上的两个R基团可与其所连接的碳一起形成3-6元环烷基环或3-6元环醚；
m为0、1或2；
n为0、1或2；且
X为含有1至4个选自N、O和S的杂原子作为环成员的5元杂芳环；
或其可药用盐。
14.如权利要求13所述的化合物，其中R1选自：C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基；以及含有一个或两个氮原子作为环成员的5-6元杂芳基，
其中所述C1-C4烷基；C1-C4卤代烷基；C1-C4烷氧基；C1-C4卤代烷氧基；C3-C6环烷基；含有N、O或S作为环成员的5-6元杂环基；苯基和5-6元杂芳基各自任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。
15.如权利要求13或14所述的化合物，其中R1为甲基、苯基或2-吡啶基；或其可药用盐。
16.如权利要求13或14所述的化合物，其中Cy为选自苯基和吡啶基的环，且其任选地进一步被选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基和C1-C4卤代烷氧基；
或其可药用盐。
17.如权利要求16所述的化合物，其具有下式：
Figure FDA0003136327510000051
其中Z为CH或N，且Q是选自H、Me、CF3、OMe和卤素；
或其可药用盐。
18.如权利要求13、14和17中任一项所述的化合物，其中L为选自以下的二价连接体：CR2、-(CR2)2-4-、-O-(CR2)1-3-和-(CR2)m-X-(CR2)n-；
或其可药用盐。
19.如权利要求18所述的化合物，其中R在每次出现时独立地选自H、F及Me；
或其可药用盐。
20.如权利要求19所述的化合物，其中L是选自CH2、-CH2CH2-、C(Me)2、-CHMe-、-OCH2-、-CH2CF2-、-CF2CH2-、-CMe2CH2-及-CH2CMe2-；
或其可药用盐。
21.如权利要求13、14或17中任一项所述的化合物，其为式(Ia)化合物：
Figure FDA0003136327510000061
其中Q在每次出现时独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C1-C4烷氧基；且
Z为CH、CQ或N；
或其可药用盐。
22.如权利要求13、14或17中任一项所述的化合物，其中环A为吡啶基或吡唑基，且任选地被一个或两个独立地选自以下的基团取代：卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基和C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
23.如权利要求13所述的化合物，其中R1为吡啶基、苯基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，且任选地被一个或两个选自R2的基团取代；
或其可药用盐。
24.如权利要求13、14、17或23中任一项所述的化合物，其为式(Ib)化合物：
Figure FDA0003136327510000062
其中R4和R5独立地选自H、卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、苯基和吡啶基；或R4和R5可与其所连接的碳原子一起形成苯环，该苯环与R4和R5所连接的吡啶基环稠合；
或其可药用盐。
25.如权利要求13或14所述的化合物，其为式(Ic)化合物：
Figure FDA0003136327510000071
其中R6是选自C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基及C3-C6环烷基；
或其可药用盐。
26.如权利要求25所述的化合物，其中R6是选自甲基、乙基、异丙基和环丙基；或其可药用盐。
27.如权利要求13、14、17或26中任一项所述的化合物，其中L为[Cy]-(CR2)m-X-(CR2)n-，其中[Cy]指示L与基团Cy的连接点；
m为1或2；
n为0、1或2；且
X为四唑基环；
或其可药用盐。
28.如权利要求13、14和17中任一项所述的化合物，其中L为CH2、C(Me)2、-OCH2-[T]、-CH2CH2-、-C(Me)2CH2-[T]、-CH2C(Me)2-[T]或-CF2CH2-[T]，其中[T]指示L与式(I)中四唑环的连接端；
或其可药用盐。
29.如权利要求13所述的化合物，其中该化合物是选自实施例12-33、44-65、67和175-216的化合物；
或其可药用盐。
30.化合物，其选自实施例1-217的化合物；
或其可药用盐。
31.药物组合物，其包含如权利要求13、14、17、26和29中任一项所述的化合物与至少一种可药用的载体或赋形剂。
32.治疗癌症或纤维化的方法，其包含向有需要的个体施用有效量的如权利要求13、14、17、26和29中任一项所述的化合物，或如权利要求31所述的药物组合物。
33.如权利要求32所述的方法，其为治疗结肠癌、肝细胞癌(HCC)、肾癌、肝癌、胃癌或肝脏或肾脏中的纤维化的方法。
34.如权利要求1、2、13和14中任一项所述的化合物，其用于治疗。
35.如权利要求1、2、13和14中任一项所述的化合物用于制备药物的用途。
36.药物组合，其包含有效量的如权利要求1、2、13和14中任一项所述的化合物以及其它治疗剂。
37.药物组合物，其包含如权利要求36所述的药物组合与至少一种可药用的赋形剂。
38.治疗有需要的个体的癌症或纤维化的方法，其包含施用有效量的如权利要求37所述的药物组合物。
CN201980086920.0A 2018-12-27 2019-12-17 用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺衍生物 Pending CN113348167A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862785616P 2018-12-27 2018-12-27
US62/785,616 2018-12-27
PCT/US2019/066993 WO2020139636A1 (en) 2018-12-27 2019-12-17 (pyridin-2-yl)amine derivatives as tgf-beta r1 (alk5) inhibitors for the treatment of cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN113348167A true CN113348167A (zh) 2021-09-03

Family

ID=69185691

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980086920.0A Pending CN113348167A (zh) 2018-12-27 2019-12-17 用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺衍生物

Country Status (15)

Country Link
US (1) US20220054465A1 (zh)
EP (1) EP3902796B1 (zh)
JP (2) JP2022517730A (zh)
KR (1) KR20210110316A (zh)
CN (1) CN113348167A (zh)
AR (1) AR117539A1 (zh)
AU (1) AU2019417418A1 (zh)
BR (1) BR112021007006A2 (zh)
CA (1) CA3117838A1 (zh)
EA (1) EA202191619A1 (zh)
IL (1) IL284266B1 (zh)
MX (1) MX2021007738A (zh)
SG (1) SG11202103457PA (zh)
TW (1) TW202039436A (zh)
WO (1) WO2020139636A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113214111A (zh) * 2021-04-30 2021-08-06 上海立科化学科技有限公司 3-（2-氰基苯基）丙酸及4-氰基-1-茚满酮的制备方法

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021216454A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. 4-(3-(pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-5-yl)piperazine for use in the the treatment of cov-229e or cov-oc43 coronaviruses infections
CA3175970A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 Suma GOPINATHAN Aak1 inhibitors for use in treating viral infections
US20230054602A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 Hyundai Mobis Co., Ltd. Robot system for automated assembly of modular component

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009022171A1 (en) * 2007-08-13 2009-02-19 Astrazeneca Ab Pyridinyiioxy pyridines as alk5 inhibitors
CN103619170A (zh) * 2011-05-04 2014-03-05 默沙东公司 含有氨基-吡啶的脾酪氨酸激酶(syk)抑制剂
WO2014155300A2 (en) * 2013-03-28 2014-10-02 Aurigene Discovery Technologies Limited Substitued pyrimidine amine derivatives as tak-1 inhibitors
US20150239866A1 (en) * 2012-09-28 2015-08-27 Merck Canada Inc. Triazolyl derivatives as syk inhibitors
US20150353535A1 (en) * 2012-12-21 2015-12-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiazole-substituted aminopyridines as spleen tyrosine kinase inhibitors
CN106795139A (zh) * 2014-10-07 2017-05-31 伊莱利利公司 氨基吡啶基氧基吡唑化合物
US20180169097A1 (en) * 2015-06-12 2018-06-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA76461C2 (en) 2001-05-24 2006-08-15 Lilly Co Eli Pyrrazole derivatives as pharmaceutical agents, use thereof, a pharmaceutical composition on their basis
UA80571C2 (en) 2002-11-22 2007-10-10 Lilly Co Eli Quinolinyl-pyrrolopyrazoles
TW200538120A (en) 2004-02-20 2005-12-01 Kirin Brewery Compound having TGF-beta inhibitory activity and pharmaceutical composition containing same
US8080568B1 (en) 2010-06-29 2011-12-20 Ewha University - Industry Collaboration Foundation 2-pyridyl substituted imidazoles as therapeutic ALK5 and/or ALK4 inhibitors
AU2012240240A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009022171A1 (en) * 2007-08-13 2009-02-19 Astrazeneca Ab Pyridinyiioxy pyridines as alk5 inhibitors
CN103619170A (zh) * 2011-05-04 2014-03-05 默沙东公司 含有氨基-吡啶的脾酪氨酸激酶(syk)抑制剂
US20150239866A1 (en) * 2012-09-28 2015-08-27 Merck Canada Inc. Triazolyl derivatives as syk inhibitors
US20150353535A1 (en) * 2012-12-21 2015-12-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiazole-substituted aminopyridines as spleen tyrosine kinase inhibitors
WO2014155300A2 (en) * 2013-03-28 2014-10-02 Aurigene Discovery Technologies Limited Substitued pyrimidine amine derivatives as tak-1 inhibitors
CN106795139A (zh) * 2014-10-07 2017-05-31 伊莱利利公司 氨基吡啶基氧基吡唑化合物
US20180169097A1 (en) * 2015-06-12 2018-06-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113214111A (zh) * 2021-04-30 2021-08-06 上海立科化学科技有限公司 3-（2-氰基苯基）丙酸及4-氰基-1-茚满酮的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022517730A (ja) 2022-03-10
AU2019417418A1 (en) 2021-04-15
EP3902796B1 (en) 2024-02-07
JP2023052437A (ja) 2023-04-11
TW202039436A (zh) 2020-11-01
SG11202103457PA (en) 2021-05-28
MX2021007738A (es) 2021-08-05
BR112021007006A2 (pt) 2021-08-10
KR20210110316A (ko) 2021-09-07
EA202191619A1 (ru) 2021-09-28
CA3117838A1 (en) 2020-07-02
AR117539A1 (es) 2021-08-11
WO2020139636A1 (en) 2020-07-02
US20220054465A1 (en) 2022-02-24
EP3902796A1 (en) 2021-11-03
IL284266B1 (en) 2024-02-01
EP3902796C0 (en) 2024-02-07
IL284266A (en) 2021-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI790492B (zh) Glp-1r調節化合物
TWI631124B (zh) 新穎胺基酸衍生物，其製備方法及含彼等之醫藥組合物
CN113348167A (zh) 用于治疗癌症的作为TGF-βR1(ALK5)抑制剂的(吡啶-2-基)胺衍生物
US10717738B2 (en) Pyrimidinone and its derivatives inhibiting factor XIa
US10058550B2 (en) Methods of treating heart failure
KR102007056B1 (ko) 과증식성 질환 치료시 Bub1 키나제 저해제로 사용하기 위한 치환된 벤질인다졸
JP6545199B2 (ja) ３−アミノ−１，５，６，７−テトラヒドロ−４ｈ−インドール−４−オン類
ES2463676T3 (es) Inhibidor de la producción de quinurenina
AU2011251321A1 (en) Nitrogen-containing heterocyclic compound having kynurenine production inhibitory activity
KR102609431B1 (ko) Phd 저해제로서의 활성을 갖는 융합된 바이시클릭 헤테로아릴 유도체
CN111344287B (zh) 作为吲哚胺2，3-双加氧酶(ido)抑制剂的新型取代的联芳基化合物
CN114127049A (zh) Acss2抑制剂和其使用方法
US20220251082A1 (en) Next-generation modulators of stimulator of interferon genes (sting)
EP4271672A1 (en) Carboxy-benzimidazole glp-1r modulating compounds
JP2022526890A (ja) 化合物及びその使用
IL301480A (en) Condensed heteroaryl compounds and their use as CAMKII inhibitors
EA043088B1 (ru) Производные (пиридин-2-ил)амина в качестве ингибиторов tgf-бета r1 (alk5) для лечения злокачественных новообразований
KR102655210B1 (ko) 아데노신 a2a 수용체 길항제 및 이의 용도
CN117355517A (zh) 大环胰高血糖素样肽1受体激动剂
TW202310838A (zh) 類升糖素肽1受體促效劑

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination