CN113332275A - 穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 - Google Patents
穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113332275A CN113332275A CN202110549427.7A CN202110549427A CN113332275A CN 113332275 A CN113332275 A CN 113332275A CN 202110549427 A CN202110549427 A CN 202110549427A CN 113332275 A CN113332275 A CN 113332275A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- andrographolide
- fat
- product
- white
- promoting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N Andrographolide Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@H](O)[C@]([C@H]2CCC1=C)(CO)C)\C=C1/[C@H](O)COC1=O BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N 0.000 title claims abstract description 104
- ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N andrographolide Natural products CC1(CO)C(O)CCC2(C)C(CC=C3/C(O)OCC3=O)C(=C)CCC12 ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 96
- 210000000593 adipose tissue white Anatomy 0.000 title claims abstract description 50
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 41
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 37
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 108010028924 PPAR alpha Proteins 0.000 claims description 36
- 102000023984 PPAR alpha Human genes 0.000 claims description 35
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 13
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 210000003486 adipose tissue brown Anatomy 0.000 abstract description 19
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 18
- 238000009826 distribution Methods 0.000 abstract description 13
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 abstract description 7
- 238000004146 energy storage Methods 0.000 abstract description 4
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 abstract 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 48
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 44
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 18
- 102000015494 Mitochondrial Uncoupling Proteins Human genes 0.000 description 17
- 108010050258 Mitochondrial Uncoupling Proteins Proteins 0.000 description 17
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 14
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N fenofibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(=O)OC(C)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N Oil red O Chemical compound Cc1ccc(C)c(c1)N=Nc1cc(C)c(cc1C)N=Nc1c(O)ccc2ccccc12 NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 229960002297 fenofibrate Drugs 0.000 description 11
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 11
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 11
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 9
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 9
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 8
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 8
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 7
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 7
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 238000013116 obese mouse model Methods 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 5
- 230000000476 thermogenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 5
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 4
- 210000001593 brown adipocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 4
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 3
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 3
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 3
- 210000000636 white adipocyte Anatomy 0.000 description 3
- 102000011690 Adiponectin Human genes 0.000 description 2
- 108010076365 Adiponectin Proteins 0.000 description 2
- 244000118350 Andrographis paniculata Species 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 2
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 2
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102100029820 Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 108050002686 Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 2
- KAEGGIFPLJZUOZ-UHFFFAOYSA-N Renilla luciferin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C(N1)=CN2C(=O)C(CC=3C=CC=CC=3)=NC2=C1CC1=CC=CC=C1 KAEGGIFPLJZUOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021068 Western diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 235000019577 caloric intake Nutrition 0.000 description 2
- YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N capsaicin Chemical compound COC1=CC(CNC(=O)CCCC\C=C\C(C)C)=CC=C1O YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N 0.000 description 2
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 210000001596 intra-abdominal fat Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 208000020588 necrotizing soft tissue infection Diseases 0.000 description 2
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 210000000229 preadipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 2
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004611 Abdominal Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000207965 Acanthaceae Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000014777 Adipokines Human genes 0.000 description 1
- 108010078606 Adipokines Proteins 0.000 description 1
- 102000049320 CD36 Human genes 0.000 description 1
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 206010065941 Central obesity Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 238000003718 Dual-Luciferase Reporter Assay System Methods 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 101710088172 HTH-type transcriptional regulator RipA Proteins 0.000 description 1
- 102100024594 Histone-lysine N-methyltransferase PRDM16 Human genes 0.000 description 1
- 101000686942 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase PRDM16 Proteins 0.000 description 1
- 101000685655 Homo sapiens Long-chain fatty acid transport protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000685660 Homo sapiens Long-chain fatty acid transport protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102100023111 Long-chain fatty acid transport protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023113 Long-chain fatty acid transport protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000012141 Peroxisome proliferator-activated receptor alpha Human genes 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000007156 Resistin Human genes 0.000 description 1
- 108010047909 Resistin Proteins 0.000 description 1
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000478 adipokine Substances 0.000 description 1
- 239000000808 adrenergic beta-agonist Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000883 anti-obesity agent Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- YNGQHHUHCOYPKT-UHFFFAOYSA-L azanium;calcium;phosphate Chemical compound [NH4+].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O YNGQHHUHCOYPKT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N berberine Chemical compound C1=C2CC[N+]3=CC4=C(OC)C(OC)=CC=C4C=C3C2=CC2=C1OCO2 YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093265 berberine Drugs 0.000 description 1
- QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N berberine Natural products COc1ccc2C=C3N(Cc2c1OC)C=Cc4cc5OCOc5cc34 QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037237 body shape Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960002504 capsaicin Drugs 0.000 description 1
- 235000017663 capsaicin Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000000731 choleretic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001989 choleretic effect Effects 0.000 description 1
- QWJSAWXRUVVRLH-UHFFFAOYSA-M choline bitartrate Chemical compound C[N+](C)(C)CCO.OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O QWJSAWXRUVVRLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004874 choline bitartrate Drugs 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 210000003109 clavicle Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000013037 co-molding Methods 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000219 ethylidene group Chemical group [H]C(=[*])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011229 interlayer Substances 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000003468 luciferase reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000013227 male C57BL/6J mice Methods 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001370 mediastinum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004630 mental health Effects 0.000 description 1
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008558 metabolic pathway by substance Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000006540 mitochondrial respiration Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N orlistat Chemical compound CCCCCCCCCCC[C@H](OC(=O)[C@H](CC(C)C)NC=O)C[C@@H]1OC(=O)[C@H]1CCCCCC AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N 0.000 description 1
- 229960001243 orlistat Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091008725 peroxisome proliferator-activated receptors alpha Proteins 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000021715 photosynthesis, light harvesting Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 1
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- WVYADZUPLLSGPU-UHFFFAOYSA-N salsalate Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=C1O WVYADZUPLLSGPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000953 salsalate Drugs 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000028201 sequestering of triglyceride Effects 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 229940126158 β3 adrenergic receptor agonist Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/19—Acanthaceae (Acanthus family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及一种天然产物的药物应用技术领域，具体涉及穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的新用途。本发明中穿心莲内酯将储能组织白色脂肪组织激活转化成能量代谢的棕色脂肪组织，并激活棕色脂肪功能，提高棕色脂肪活性，促进脂肪转化为热能耗散，保持机体能量平衡，并且还能调节机体脂肪分布，减少总体脂肪重量、降低体重的效果。因此，所述穿心莲内酯、含有穿心莲内酯的提取物或其制剂在调节脂肪分布，预防或治疗肥胖症相关代谢性疾病具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种可激活过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)，促进白色脂肪棕色化的药物或保健食品或食品添加剂，特别涉及一种中药穿心莲提取成分在促进白色脂肪棕色化的相关产品中的应用。
背景技术
脂肪代谢紊乱是代谢综合征如肥胖，2型糖尿病，脂肪肝等疾病的特征性病理改变。脂肪代谢紊乱的患者其甘油三酯在脂肪组织存储异常，进而导致脂质沉积在身体不同部分，并逐渐导致胰岛素抵抗。随着脂肪的日益增加和较低利用率会使得脂肪组织逐步增大，导致肥胖的形成。随着经济的发展和科技的变革，越来越多国家的肥胖率均呈快速上升趋势。
脂肪组织可通过内皮细胞、成纤维细胞、白细胞和巨噬细胞分泌脂肪细胞因子，包括蛋白质、激素、瘦素，脂联素，抵抗素和炎症因子等，对脑、肝、心脏、骨骼肌和免疫系统等产生影响。脂肪的过度累积将导致脂肪细胞因子在机体中的代谢失衡，诱导低度慢性炎症、糖脂代谢紊乱和心血管疾病的发生。研究证实脂肪的过度堆积(肥胖)与高脂血症、脂肪肝、糖尿病、高血压、心脑血管疾病等多种代谢性疾病和癌症、抑郁症等非代谢性疾病密切相关。肥胖会导致多种并发症，很大程度上会提高个体的健康风险，严重影响人体的身心健康和生活质量。
脂肪组织是重要的新陈代谢器官，根据形态及功能特点主要可以分为白色脂肪组织(White adipose tissue,WAT)和棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)。白色脂肪和棕色脂肪二者不但解剖位置、形态特征完全不同，而且在能量代谢方面的作用截然相反：WAT的主要功能是以脂滴(甘油三酯)的形式储存能量，而BAT则通过消耗能量、产热来维持机体的能量代谢平衡。
白色脂肪组织是构成正常成年人的主要脂肪组织类型，约占健康成年人体重的20％，主要分布在腹部皮下、腹股沟、肠系膜和内脏周围等处，在功能上主要是通过储存多余的甘油三酯和脂肪动员，参与调控人体的物质和能量代谢。白色脂肪细胞有一个大的单房脂滴，其特征是线粒体数量较少，肥胖症主要取决于WAT的数目和体积。而棕色脂肪细胞颜色较深，细胞内含有多房小脂滴，富含线粒体以及解偶联蛋白(uncouple protein 1，ucp1)，其主要功能是产生热量来维持体温，主要分布在颈部、锁骨上缘、纵隔、肩胛间区和脊柱两侧的皮下。棕色脂肪细胞可通过CD36、FATP1和FATP4等转运脂肪酸的因子吸收脂肪酸，脂肪酸通过相应的生化反应变成甘油三酯，之后存于脂滴中，冷刺激可激活棕色脂肪组织，促使棕色脂肪对甘油三酯的吸收和利用。棕色脂肪含有丰富的线粒体，可氧化消耗脂肪酸和甘油三脂，大量提供能量，维持体温。随着研究的深入，发现在寒冷刺激或β肾上腺素能受体激动剂的作用下，WAT中会出现散在的棕色化的脂肪细胞，该细胞内线粒体数量增加，氧化磷酸化加快，单一大脂滴变成多个小脂滴。这些细胞的特性介于白色脂肪细胞与棕色脂肪细胞之间，后来将这种细胞命名为米色脂肪细胞(brite or beige cell)，这种分化过程称为白色脂肪棕色化。
线粒体是细胞进行能量代谢的核心场所，棕色和米色脂肪细胞中线粒体含量丰富，可以进行适应性产热将脂肪转化为热能耗散，保持机体能量平衡，这一过程需要线粒体内膜上的UCP1参与。UCP1能消除线粒体内膜的质子电化学梯度，过高的质子堆积会致使线粒体呼吸作用中的氧化磷酸化解偶联，抑制ATP的合成。因此白色脂肪组织是机体的主要储能组织，棕色脂肪组织是机体能量代谢失衡的重要调控者，促进机体白色脂肪“棕色化”并激活棕色脂肪功能可促进能量消耗、抑制肥胖。目前亟需寻找新的药物或手段激活体内棕色脂肪活性、促进白色脂肪“棕色化”，从而为肥胖及其相关代谢性疾病的防治提供新的策略。
自19世纪使用药物治疗肥胖开始，大量减肥药物因安全性问题而相继退市。现有的减肥药多是针对限制能量摄入而开发的，如奥利司他通过可逆的抑制胃肠脂肪酶减少脂肪吸收，但长期服用会引起肠胃胀气、腹部疼痛、消化不良。已有一些研究发现可以激活产热性脂肪组织的化合物，如辣椒素及其类似物、黄连素、白藜芦醇、水杨酰水杨酸等，进一步说明了产热性脂肪组织通过化学手段激活，具有作为治疗靶点的可行性。
穿心莲内酯(andrographolide)是从爵床科草本穿心莲(Andrographispanicultata(Burm.f)Nees)全草中提取的主要有效成分，具有抗炎、抗病毒、保肝利胆、免疫调节、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病、抗糖尿病、神经保护、中止妊娠等多种药理作用。
目前，穿心莲内酯促进白色脂肪棕色化，调节机体脂肪分布，减少总体脂肪重量，治疗肥胖相关疾病的研究尚未见诸报道。
发明内容
本发明的首要目的是提供一种穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用，即穿心莲内酯作为促进白色脂肪棕色化的新用途。穿心莲内酯将储能组织白色脂肪组织激活转化成能量代谢的棕色脂肪组织，并激活棕色脂肪功能，提高棕色脂肪活性，促进脂肪转化为热能耗散，保持机体能量平衡。内脏脂肪的堆积与炎症反应、代谢性疾病密切相关，穿心莲内酯减少内脏白色脂肪，调节脂肪在机体中的分布，健身和塑形；尤其是调节白色脂肪在内脏中的分布，减轻内脏脂肪组织脂沉积，从而改善脂诱性胰岛素抵抗等代谢性疾病。
穿心莲内酯(3-[2-[decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxy-methyl)-5,8a-dimethyl-2-methylenenaphthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxyfuran-2(3H)-one)，分子式为C20H30O5；分子量为M＝350.44；其结构式如下：
为实现本发明的目的，本发明提供一种穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
其中，所述促进白色脂肪棕色化为激活产热性脂肪组织，调节脂肪在体内的分布。
特别是，所述产热性脂肪组织为棕色脂肪组织。本发明的穿心莲内酯将白色脂肪组织转化成棕色脂肪组织，进行适应性产热将脂肪转化为热能耗散，保持机体能量平衡；抑制ATP合成；预防或治疗脂肪代谢紊乱。
穿心莲内酯激活棕色脂肪功能，提高棕色脂肪活性，促进脂肪转化为热能耗散。
穿心莲内酯促进白色脂肪棕色化为激活产热性脂肪组织，调节脂肪在体内的分布。
本发明又一方面提供一种穿心莲内酯在制备用于预防或治疗肥胖症的产品中的应用，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
本发明另一方面提供一种穿心莲内酯在制备用于促进PPARα活性的的药物、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂中的应用。
本发明另一方面提供一种穿心莲内酯在制备用于ATP合成促进剂的药物、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂中的应用。
其中，所述药物由穿心莲内酯和药学上可接受的载体组成。
特别是，所述药物由穿心莲内酯和药学上可接受的载体组成。
尤其是，所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶型、霜剂、酊剂、巴布剂、橡胶贴膏剂或贴膏剂形式存在。
药学上可接受的载体通常被保健专家认可用于这一目的且作为药剂的非活性成分。有关药学上可接受的载体的汇编可以在《药物赋形剂手册》(Handbook ofPharmaceutical excipients，第2版，由A.Wade和P.J.Weller编辑；AmericanPharmaceutical Association出版，Washington and The Pharmaceutical Press,London,1994)等工具书中找到。
尤其是，所述的载体包括赋形剂，如淀粉、水等；润滑剂，如硬脂酸镁等；崩解剂，如微晶纤维素等；填充剂，如乳糖等；粘结剂，如预胶化淀粉、糊精等；甜味剂；抗氧化剂；防腐剂、矫味剂、香料等；
其中，所述药物是通过经胃肠道给药和非经胃肠道给药途径给药。
特别是，所述的非经胃肠道给药途径选择注射给药、呼吸道给药、皮肤给药、粘膜给药或腔道给药。
其中，非经胃肠道给药药剂选择注射剂、喷雾剂、气雾剂、贴剂等。
特别是，所述的经胃肠道给药制剂选择片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、丸剂、溶液剂或糖浆剂等。
穿心莲内酯作为PPARα激活剂的应用。
在制备用于预防、缓解和/或治疗由PPARα活性受到抑制所引起的病理性病症的药物、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂中的应用。
PPARα活性受到抑制所引起的病理性病症或症状为腹型肥胖、代谢综合征及相关并发症中的一种或多种；调整脂肪在机体内的分布，还能对健身、体型塑造起作用。
本发明再一方面提供一种促进白色脂肪棕色化的产品，含有穿心莲内酯，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
其中，所述穿心莲内酯的重量与所述产品的总重量之比为0.01～10：100。
本发明又一方面提供一种促进白色脂肪棕色化的方法，包括给予有效量的穿心莲内酯或其药学上可接受的盐。
本发明中，穿心莲内酯的体内治疗有效量为10～90mg/kg·d。
除非另外说明，本文所用的术语“治疗有效量”为需要产生有效作用的药物的用量；“治疗有效量”是可以调整和变化的，最终由医务人员确定，其所考虑的因素包括给药途径和制剂的性质、接受者的体重、年龄等一般情况以及所治疗疾病的性质和严重程度。
与现有技术相比，本发明具有如下的明显优点：
1、本发明对已知化合物穿心莲内酯发掘了新的药用价值，基于促进白色脂肪棕色化这一作用机理，穿心莲内酯表现出降低体重的效果，制备成治疗、预防肥胖相关代谢疾病的药物或保健品。
2、穿心莲内酯将储能组织白色脂肪组织激活转化成能量代谢的棕色脂肪组织，并激活棕色脂肪功能，提高棕色脂肪活性，促进脂肪转化为热能耗散，保持机体能量平衡，并且穿心莲内酯调节脂肪在机体内的分布。
3、本发明的产品原料来源丰富、价廉、临床使用安全，制备工艺简单，可制成各种剂型，且服量小，使用方便，因此易于推广。
附图说明
图1为不同浓度的非诺贝特对PPARα转录活性的影响结果图；
图2为PPARα特异性阻断剂对非诺贝特激活的PPARα转录活性的影响结果图；
图3为不同浓度的穿心莲内酯对PPARα转录活性的影响；
图4为PPARα特异性阻断剂对穿心莲内酯激活的PPARα转录活性的影响；
图5A为3T3-L1脂肪细胞油红O染色结果图，空白对照组；
图5B为穿心莲内酯大剂量(15umol/L)处理3T3-L1脂肪细胞油红O染色结果图；
图5C为穿心莲内酯小剂量(5umol/L)处理3T3-L1脂肪细胞油红O染色结果图；
图6A为正常空白对照组小鼠附睾白色脂肪组织UCP1免疫组织化学染色结果图；
图6B为模型组肥胖小鼠附睾白色脂肪组织UCP1免疫组织化学染色图；
图6C为穿心莲内酯治疗组肥胖小鼠附睾白色脂肪组织UCP1免疫组织化学染色影响图；
图7为穿心莲内酯对肥胖小鼠附睾白色脂肪组织UCP1蛋白表达的影响，A为正常对照组，B为模型组，C为穿心莲内酯治疗组。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试验例包括了本发明药物的药效学试验。
试验例1：穿心莲内酯具有激活PPARα受体的作用
当PPARα受体被相应激动剂激活后，会直接激活PRDM16、白色脂肪组织中UCP-1mRNA及脂联素的表达，促进白色脂肪的棕色化改变。当PPARα基因缺失时，β3肾上腺素能受体激动剂诱导的脂肪组织褐变减弱。UCP1启动子包含PPRE，即PPAR家族分子的共有序列，激活PPARα转录活性可激活UCP1表达。
1.1、细胞质粒
HEK293细胞系从北京协和医学院细胞资源中心(其为细胞系资源的国家基础设施，NSTI的总部)购得。通过PCR和培养检查细胞系没有支原体污染，用PCR鉴定其种源，用STR谱(FBI，CODIS)鉴定细胞系的鉴定结果，所有结果均可在网站(http://cellresource.cn)上查看。
pcDNA3.1(+)-PPARα、pGL4.23-PPRE-luc及pRL-CMV由北京合生基因科技有限公司构建。
1.2药品及主要试剂
穿心莲内酯(Andrographolide，AG)：批号：190402；检验编号：C-01-19013，四川文龙药业有限公司。
非诺贝特，上海源叶生物科技有限公司，货号49562-28-9；GW6471，MCE,美国，货号HY-15372；Lipofectamine3000，赛默飞，美国，货号L3000015；双荧光素酶报告基因检测系统，promega，美国，货号E1910
1.3主要仪器
SynergyII酶标仪，bio-tek，美国
2、试验方法
2.1、分组及给药
实验分别设空白对照组，阳性药物组，穿心莲内酯实验组，其中，空白对照组为0.1％DMSO；阳性药物组中阳性药物非诺贝特的浓度分别为5、10、20、30、40uM；穿心莲内酯实验组中穿心莲内酯的浓度分别为5、10、15、20、25uM。阳性药物、穿心莲内酯用0.1％DMSO溶解，制成上述相应的浓度。
2.2质粒瞬时转染HEK293细胞
2.2.1取生长旺盛的HEK293细胞，转染前18-24小时传代，接种至24孔板，细胞密度为2×105/孔；
2.2.2接种24小时后换液，至于培养箱中30min-1h；
2.2.3制备脂质体-DNA复合物，按每孔转染样品量描述：
(A)将0.75ul lipo3000加入至25ul无血清无抗生素的培养基中，充分混匀；
(B)将pcDNA3.1(+)-PPARα、pGL4.23-PPRE-luc、pRL-CMV、P3000按每孔0.2μg、0.2μg、0.02μg、1ul的比例加入至25ul无血清无抗生素的DMEM培养基中，充分混匀；
(C)将B液加入A液中，室温静置15min。
(D)按每孔50ul将脂质体-DNA复合物加入到24孔板培养体系中，轻摇培养板使其混匀，37℃培养24h后给药干预。
2.2.4加药干预：
(A)PPARα特异性激动剂及抑制剂干预
转染24h后，吸弃培养基，加入不同浓度的非诺贝特，浓度设置为0.1％DMSO、5uM、10uM、20uM、30uM、40uM；选择激动PPARα作用最强的浓度，加入PPARα特异性抑制剂GW64710.1uM，每个浓度4个复孔，重复3次。
(B)穿心莲内酯及PPARα特异性抑制剂干预
转染24h后，吸弃培养基，加入不同浓度的穿心莲内酯，浓度设置为0.1％DMSO、5uM、10uM、15uM、20uM、25uM；选择激动PPARα作用最强的浓度，加入PPARα特异性抑制剂GW6471 0.1uM，每个浓度4个复孔，重复3次。
2.2.5荧光素酶报告基因检测：除去培养基，用预冷的1×PBS清洗2遍，不要接触贴壁细胞，尽可能多地将漂洗用PBS吸出，每孔加100μl的1×被动裂解液，室温下震摇15min，将裂解液转移至96孔板中，每孔20ul。应用双荧光素酶活性表达测定试剂盒测定荧光素酶活性，预先将100ul荧光素酶测定试剂(LARII)加入孔板，酶标仪测定萤火虫荧光素活性(F)，再加入100ul终止液后测定海肾荧光素活性(R)，萤火虫荧光素与海肾荧光素光强的比值(F/R)即为PPARα转录表达强度。
3.检测指标
3.1非诺贝特对PPARα转录活性的影响
共转染48h后，非诺贝特以浓度依赖的方式增加HEK293细胞PPARα的转录活性，非诺贝特30uM时荧光素酶活性达到峰值(图1)；其中与空白对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；PPARα特异性拮抗剂GW6471与30uM非诺贝特共同孵育后可显著抑制PPARα的转录活性(图2)，其中与30uM非诺贝特比较，**p＜0.01。以上说明该筛选体系成立且灵敏。
3.2穿心莲内酯对PPARα活性的影响
共转染48h后，穿心莲内酯以浓度依赖的方式增加HEK293细胞荧光素酶的活性，穿心莲内酯15uM时荧光素酶活性达到峰值(图3)，其中与空白对照组比较，**p＜0.01；GW6471与15uM穿心莲内酯共同孵育后可显著抑制荧光素酶活性(图4)，其中与15uM穿心莲内酯比较，**p＜0.01。
该实验利用双萤光素酶报告基因分析方法，建立PPARα激动剂体外筛选体系，采用不同浓度的PPARα激动剂非诺贝特干预，PPARα的转录活性随浓度增加而增强，加入特异性阻断剂GW6471后转录活性被抑制，表明该筛选体系成立。穿心莲内酯以浓度依赖的方式增加PPARα的转录活性，并可以被GW6471抑制。以上结果表明，穿心莲内酯具有通过激活PPARα发挥生物学作用，诱导并促进白色脂肪向褐色脂肪组织转化。
试验例2：穿心莲内酯对3T3-L1脂肪细胞脂滴的影响
1、实验材料
1.1、细胞
3T3-L1前脂肪细胞系从北京协和医学院细胞资源中心(其为细胞系资源的国家基础设施，NSTI的总部)购得。通过PCR和培养检查细胞系没有支原体污染，用PCR鉴定其种源，用STR谱(FBI，CODIS)鉴定细胞系的鉴定结果，所有结果均可在网站(http://cellresource.cn)上查看。
1.2、药品
穿心莲内酯同试验例1；
3T3-L1细胞诱导液A(分化诱导液组成为：0.5mmol/L IBMX(sigma:I7018)、1μg/mL胰岛素(sigma:I9278)、0.25μmol/L地塞米松(sigma:D1756)，底液为完全培养基)
3T3-L1细胞诱导液B，(1μg/mL胰岛素，底液为完全培养基)
油红O粉末，购自美国sigma公司(货号：O0625)。
2、实验方法
2.1、分组及给药
实验分别设对照组，穿心莲内酯低剂量组，穿心莲内酯高剂量组。
将复苏培养的3T3-L1前脂肪细胞以1×106接种于24孔细胞培养板内，于完全培养基(DMEM培养基，10％FBS(胎牛血清))内培养，接触抑制48h后，各组细胞先加入3T3-L1细胞诱导液A诱导分化48h，然后换3T3-L1细胞诱导液B继续诱导分化，分化48h后可见脂滴形成，吸出处理液后，加入完全培养基、相应的处理药物，对各组细胞进行如下处理：
对照组：DMEM培养基(10％FBS)，不添加任何处理药物；
穿心莲内酯低剂量组：DMEM培养基(10％FBS)+5μM穿心莲内酯；
穿心莲内酯高剂量组：DMEM培养基(10％FBS)+15μM穿心莲内酯。
2.2染色
培养12天后，向各组细胞中加入细胞油红O进行染色：
2.2.1.油红O染色液的配制
油红O染色液分储备液和工作液，①油红O储备液的配方：100％异丙醇100mL+0.5g油红O干粉，充分溶解，过滤。②油红O工作液的配方：实验前，将储备液与蒸馏水按3:2稀释，过滤。
2.2.2. 60％异丙醇的配制
60％异丙醇的配方：100％异丙醇60mL+蒸馏水40mL，4度保存。
2.2.3.细胞吸掉培养液，PBS润洗两次，多聚甲醛固定20min,PBS润洗2次。
2.2.4. 60％异丙醇分化1min,油红O染色15min(避光)。
2.2.5. 60％异丙醇润洗一次(30s)，PBS洗两次，显微镜下观察并拍照。
3.结果
显微镜下观察并拍照，图5A为对照组，图5B为大剂量穿心莲内酯组，图5C为小剂量穿心莲内酯组。3T3-L1脂肪细胞经油红染色后显示，与对照组比较，穿心莲内酯组脂滴明显较小，多为多房脂滴，而对照组中脂滴较大，表明穿心莲内酯使脂滴呈多房脂滴，诱导和促进白色脂肪组织向褐色脂肪组织转化。
试验例3：穿心莲内酯对LDLR-/-小鼠体重，附睾脂肪体重比和血脂调节作用
1.实验材料
1.1实验动物及饲养
选取40只6周龄LDLR-/-雄性小鼠，体质量(20±2)g，购自江苏集萃药康实验动物有限公司(许可证号SCXK(苏)2018-0008)；10只C57BL/6J雄性小鼠，体质量(20±2)g，购自北京维通利华实验动物有限公司(许可证号SCXK(京)2018-0006)。
适应性喂养(SPF级)1周后开始实验。在广安门医院Ⅱ级动物房饲养，每笼5只，给予规律光照(昼夜各12小时)，饮用无菌水，环境温度为20±2℃，相对湿度为45％-50％，良好的通风条件。
模型组及治疗组小鼠以高脂饲料饲料喂养6月；空白对照组小鼠以普通饲料喂养6月；高脂饲料购于北京华阜康生物科技有限公司，普通饲料由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供。
高脂饲料(又称西方饮食)的配方：酪蛋白、蛋氨酸、玉米淀粉、麦芽糖糊精、蔗糖、纤维素、玉米油、无水奶油、矿物质混合物、碳酸钙、维生素混合物、酒石酸氢胆碱、胆固醇、抗氧化剂等，营养成分如表1。
维持饲料(即普通饲料)的原料组成：玉米、豆粕、鱼粉、面粉、麸皮、食盐磷酸铵钙、石粉、多种维生素、多种微量元素、氨基酸等，营养成分如表1。
表1小鼠标准饲料和高脂饲料的组成表
1.2主要药品及试剂
穿心莲内酯(Andrographolide，AG)：同试验例1.
2、实验方法
2.1动物分组
所有小鼠适应性喂养1周后按体重随机分组，分组如下：
正常(空白)对照组：10只C57BL/6J小鼠，普通饮食+生理盐水灌胃。
模型对照组：10只LDLR-/-小鼠，高胆固醇饮食+生理盐水灌胃。
穿心莲内酯高剂量组：10只LDLR-/-小鼠，高胆固醇饮食+穿心莲内酯(90mg/kg/d)灌胃。
穿心莲内酯中剂量组：10只LDLR-/-小鼠，高胆固醇饮食+穿心莲内酯(30mg/kg/d)灌胃。
穿心莲内酯低剂量组：10只LDLR-/-小鼠，高胆固醇饮食+穿心莲内酯(10mg/kg/d)灌胃。
每周使用小鼠体重计测定体重。AG配制使用研磨钵研细后使用生理盐水配成悬浊液，每次混匀后按体重给药，给药容积为10ml/kg。对照组及模型组每日灌服同容积的生理盐水。共造模及给药8周。所有小鼠均为自由摄食及摄水。
2.2取材
取材前禁食12小时以上，对小鼠进行异氟烷气体麻醉。沿腹中线剪开腹部及胸腔，注射器针尖插入左心室，同时剪开右心耳，用预冷的冰生理盐水灌流，完整取下两侧附睾脂肪，生理盐水中清洗血渍，滤纸吸干多余水分，称重。部分放入多聚甲醛固定液中待病理检测。其余组织保存于-80℃备用。
3、实验结果
3.1AG对小鼠体重的影响
比较各组小鼠灌胃前以及取材前称重，结果见表2。
表2LDLR-/-小鼠体重
注：与模型组比较，*P＜0.05
3.2AG对小鼠附睾周围脂肪的影响
高脂饮食对小鼠脂肪组织影响较大，经6个月的高脂饮食喂养后，小鼠附睾周围脂肪重量明显增加。给予穿心莲内酯后，相比模型组，中、高剂量穿心莲内酯治疗组脂肪重量明显下降(P<0.05)。见表3
表3LDLR-/-小鼠附睾脂肪质量与体重比值
注：与模型组比较，*P＜0.05
由上表2、3可见，穿心莲内酯组小鼠体重明显低于模型组，附睾脂肪比重降低，提示本品可能有调节机体脂肪分布的作用，减少脂肪重量的作用。
3.3甘油三脂检测
用贝克曼AU5822自动生化仪检测血清甘油三酯(TG)水平，结果如表4。
表4穿心莲内酯对LDLR-/-小鼠模型甘油三酯的影响
注：与模型组比较，*P＜0.05
本发明的穿心莲内酯具有降低甘油三酯作用。可用于预防和治疗高甘油三脂血症以及控制继发心血管疾病等。
试验例4：穿心莲内酯对肥胖小鼠附睾UCP1蛋白的影响
1.实验材料
1.1实验动物及饲养
选取30只5月龄ICR雄性小鼠，体质量(43±3)g，购自北京维通利华实验动物有限公司(许可证号SCXK(京)2016-0002)。适应性喂养(SPF级)1周后开始实验。在广安门医院Ⅱ级动物房饲养，每笼2只，给予规律光照(昼夜各12小时)，饮用无菌水，环境温度为20±2℃，相对湿度为45％-50％，良好的通风条件。
模型组及治疗组小鼠以高脂饲料喂养24周；对照组小鼠以普通饲料喂养24周；高脂饲料购于北京华阜康生物科技有限公司，普通饲料由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供。
高脂饲料(又称西方饮食)、普通饲料的配方同试验例3。
1.2主要药品及试剂
穿心莲内酯(Andrographolide，AG)：同试验例1。
重组Anti-UCP1抗体(ABCAM，ab234430)；goat anti rabbit IgG(CW0103S，康为世纪)；高效RIPA裂解液(Cat#R0010，索莱宝)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(PC0020-50T，索莱宝)；PVDF(YA1701,索莱宝)。
1.3主要仪器
YB502精密电子天平(上海精密仪器仪表有限公司)；3-18K高速冷冻离心机(Sigma，Germany)；IX70光学显微镜(Olympus，Japan)；-80℃超低温冰箱(Sanyo，Japan)；BCD-190TMPK 4℃冰箱(中国海尔公司)；Milli-Q超纯水净化装置(MerckMillipore，USA)；SIM-F140AY65自动制冰机(Sanyo，Japan)；BioRad转膜仪(Bio-Rad Laboratories,Inc.,USA)。
2.2.分组及干预方法
2.1动物分组
所有小鼠适应性喂养1周后按体重随机分组，分组如下：
正常(空白)对照组：10只ICR小鼠，普通饮食+生理盐水灌胃。
模型对照组：10只ICR小鼠，高胆固醇饮食+生理盐水灌胃。
穿心莲内酯组：10只ICR小鼠，高胆固醇饮食+穿心莲内酯(90mg/kg/d)灌胃。
2.2取材
同试验例3
2.3石蜡切片步骤
①固定：脂肪组织在4％多聚甲醛固定液中固定48h后，流水冲洗30min，脱水浸蜡；
②脱水：按照70％-80％-95％-100％-100％浓度乙醇各1h；
③透明：二甲苯I、II各20min；
④浸蜡：60℃石蜡I、II、III中各1h；
⑤石蜡包埋：包埋机包埋横切面；
⑥切片：包埋后的蜡块按4μm厚度切片，45℃水展片，充分展平切片后，捞到载玻片的中下1/3处，微晾干后，放入70℃恒温箱内烘片1h。
2.4免疫组化
2.4.1脱蜡、水化：将切片依次浸入二甲苯Ⅰ10min，二甲苯Ⅱ(10min)。再次浸入无水乙醇Ⅰ5min)-无水乙醇Ⅱ(5min)-95％酒精(5min)-80％酒精(5min)-70％酒精(5min)，然后去离子水冲洗2次，每次2min。
2.4.2抗原修复：将组织切片放入修复盒，然后加入适量0.01M枸橼酸缓冲液(pH6.0)或EDTA修复液(pH 9.0)，液面要浸没组织。微波中档修复10min(液体沸腾时开始计时)，此过程中勿使组织干片。将修复盒从微波炉中拿出，自然冷却降温，当修复液降至室温后取出玻片，PBS(pH 7.4)冲洗3遍，每次3min(冲洗过程中切勿对着组织冲洗，以免弄破组织)。
2.4.3灭活：将配制好的3％的过氧化氢(去离子水稀释30％过氧化氢)滴加于切片组织上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min，PBS冲洗3次，每次3min。
2.4.4抗体孵育：吸水纸吸干PBS，在玻片上滴加5％的正常血清(与二抗种属来源一致或相似)，37℃封闭30min。用吸水纸擦干玻片组织周围的液体，用油性笔在组织周围画圈，然后滴加稀释好的一抗，如果做阴性对照实验，就在对照组的组织上滴加PBS。加完一抗后于4℃湿盒中孵育过夜。(抗体的最佳稀释比应预先通过实验确定，时间控制在15h以上)。PBS冲洗切片3次，每次3min，吸水纸擦干切片后滴加辣根过氧化物酶标记二抗，37℃孵育30min。
2.4.5显色：PBS冲洗切片4次，每次3min，甩去PBS液体后吸水纸擦干切片，每张切片滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，阳性信号为棕黄色或棕褐色，时间要控制好，切勿显色过深。用自来水冲洗切片终止显色。Harris苏木素复染，一般30s-1min左右，水洗后用1％的盐酸酒精分化，再用自来水冲洗返蓝。
2.4.6脱水固定封片：将切片置于水中冲洗后，将切片依次放入：70％酒精-80％酒精-90％酒精-95％酒精-无水乙醇Ⅰ-无水乙醇Ⅱ-二甲苯Ⅰ-二甲苯Ⅱ中脱水透明，每个试剂中放置2min，最后在通风橱中风干切片。中性树胶滴在组织旁边，再用盖玻片盖上。先放平一侧，然后轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的切片平躺置于通风橱中晾干。晾干的切片可以在显微镜下观察并采集图像。
2.5Western Blot
2.5.1脂肪组织蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用。称取0.1g脂肪组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入1ml的新配置的裂解液，冰上匀浆；将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4℃12000g离心30min；吸取上清至新的管中；
2.5.2.BCA法测定蛋白浓度
配制BCA工作液：根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液，充分混匀。
稀释标准品：取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(样品一般可用PBS稀释)，使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足至20微升。
将样品作适当稀释,加20微升到96孔板的样品孔中。各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。上清与5x上样缓冲液(含琉基乙醇)混匀后煮沸5分钟。
2.5.3.蛋白印迹
样品首先在80V恒压下电泳至染料接近分离胶顶端；然后12OV恒压电泳至溴酚蓝刚出胶底部；滤纸在转移缓冲液中至少浸泡30秒；pvdf膜浸入电转液中浸泡1分钟；从玻璃板上取下凝胶,去除所有浓缩胶；将凝胶浸入电转液中浸泡30分钟；按照泡沫、滤纸、凝胶、转印膜、滤纸、泡沫的顺序组装转移夹层；将转移夹放入转移槽中,凝胶侧面向阴极(-)而膜侧面向阳极(+)；加预冷电转液,1OOV恒压转膜50min；lxTBST加入5％w/v封闭奶粉,4℃封闭过夜；洗膜液洗膜3-4次,每次5分钟；一抗为UCP-1抗体(1:1000稀释于1％BSA),室温振荡孵育膜lhr；洗膜液洗膜3-4次,每次5分钟；HRP标记的山羊抗兔lgG二抗,加入膜上,室温1小时振荡孵育；洗膜液洗膜3-4次,每次5分钟；以1:1比例混合eECL溶液A和溶液B,避光；将膜平铺在工作液上,至完全覆盖工作液,室温孵育5分钟；用镊子从工作液中取下膜(避免用手触碰),以塑料膜将膜封好,不留气泡，曝光显影；用β-actin做内参。
2.6数据分析
实验数据采用SPSS22.0软件包进行统计学分析，计量资料用均数±标准差表示：组间比较，符合正态分布时用单因素方差分析，p＜0.05为差异有统计学意义；非正态分布时，采用非参数检验，p＜0.05为差异有统计学意义。
3指标测定
3.1AG对小鼠体重的影响
比较各组小鼠灌胃前以及取材前称重，结果见表5。
表5ICR小鼠体重
注：与模型组比较，*P＜0.05
3.2AG对小鼠附睾周围脂肪的影响
高脂饮食对小鼠脂肪组织影响较大，经24周的高脂饮食喂养后，小鼠附睾周围脂肪重量明显增加。给予穿心莲内酯后，与模型组比较，穿心莲内酯组脂肪重量明显下降(P<0.05)。见表6
表6ICR小鼠附睾脂肪质量与体重比值
注：与模型组比较，*P＜0.05，与对照组比较，#p＜0.05
由表5,6可知，穿心莲内酯可以明显减轻高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重，减少内脏白色脂肪占比。
3.2穿心莲内酯对小鼠白色脂肪UCP1蛋白表达的影响
3.2.1免疫组化
附睾脂肪为内脏白色脂肪，已有研究证明高脂饮食会诱导小鼠附睾脂肪UCP1表达，镜下可见棕黄色颗粒出现于模型组及穿心莲内酯组白色脂肪细胞胞质中，穿心莲内酯组UCP1表达较模型组显著，观察结果如图6A-6C，图中穿心莲内酯对肥胖小鼠附睾白色脂肪组织UCP1免疫组织化学染色的影响(×200)。说明穿心莲内酯促进了小鼠白色脂肪棕色化，即穿心莲内酯能诱导并促进白色脂肪组织向褐色脂肪组织褐变。
3.2.2Western blot
用Western blot法对小鼠附睾脂肪UCP1蛋白表达量进行检测。检测结果如图7，检查结果表明穿心莲内酯组UCP1蛋白表达量高于模型组。
穿心莲内酯激动PPARα后可直接激活白色脂肪组织中UCP-1表达，促进脂肪的褐变。穿心莲内酯作为PPARα的激动剂，可通过降低肥胖小鼠体重、血清中甘油三酯和白色脂肪重量/体重比值，减少白色脂肪堆积，同时增加白色脂肪组织UCP1蛋白的表达，促进肥胖小鼠白色脂肪棕色化，增加热量消耗，调节脂肪分布。
Claims (10)
1.穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
2.穿心莲内酯在制备用于促进PPARα活性的的药物、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂中的应用。
3.穿心莲内酯在制备用于预防或治疗肥胖症的产品中的应用，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
4.根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征是，所述药物由穿心莲内酯和药学上可接受的载体组成。
5.根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征是所述药物以片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂或乳剂形式存在。
6.穿心莲内酯作为PPARα激活剂的应用。
7.一种促进白色脂肪棕色化的产品，其特征是，含有穿心莲内酯，其中所述产品为药物、制剂、食品、保健品、食品添加剂或营养补充剂。
8.根据权利要求7所述的产品，其特征是，所述穿心莲内酯的重量与所述产品的总重量之比为0.01～10：100。
9.一种促进白色脂肪棕色化的方法，其特征是，包括给予有效量的穿心莲内酯或其药学上可接受的盐。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征是所述穿心莲内酯的含量为1％～98％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110549427.7A CN113332275A (zh) | 2021-05-20 | 2021-05-20 | 穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110549427.7A CN113332275A (zh) | 2021-05-20 | 2021-05-20 | 穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113332275A true CN113332275A (zh) | 2021-09-03 |
Family
ID=77469978
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110549427.7A Pending CN113332275A (zh) | 2021-05-20 | 2021-05-20 | 穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113332275A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102784137A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-11-21 | 湖北凤凰白云山药业有限公司 | 一种抗肥胖药物组合物及其应用 |
| CN103766901A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-05-07 | 浙江大学 | 一种穿心莲丙素在制备减肥食品或药品中的应用 |
| CN110507647A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-11-29 | 中国中医科学院广安门医院 | 亚硫酸氢钠穿心莲内酯在制备用于治疗高血脂病症的药物中的应用 |
| CN110538175A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-12-06 | 中国中医科学院广安门医院 | 穿心莲内酯在制备用于促进胆固醇逆转运的促进剂中的应用 |
-
2021
- 2021-05-20 CN CN202110549427.7A patent/CN113332275A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102784137A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-11-21 | 湖北凤凰白云山药业有限公司 | 一种抗肥胖药物组合物及其应用 |
| CN103766901A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-05-07 | 浙江大学 | 一种穿心莲丙素在制备减肥食品或药品中的应用 |
| CN110507647A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-11-29 | 中国中医科学院广安门医院 | 亚硫酸氢钠穿心莲内酯在制备用于治疗高血脂病症的药物中的应用 |
| CN110538175A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-12-06 | 中国中医科学院广安门医院 | 穿心莲内酯在制备用于促进胆固醇逆转运的促进剂中的应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LILI DING，ET.AL.: ""Andrographolide Prevents High-Fat Diet-Induced Obesity in C57BL/6 Mice by Suppressing the Sterol Regulatory Element-Binding Protein Pathway"", 《JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS》 * |
| SHU, JIA，ET.AL.: ""Andrographolide protects against endothelial dysfunction and inflammatory response in rats with coronary heart disease by regulating PPAR and NF-κB signaling pathways"", 《ANNALS OF PALLIATIVE MEDICINE》 * |
| 栗茜，等: ""穿心莲内酯通过下调PPARγ-C/EBPα抑制脂滴形成"", 《天津中医药》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ghafurniyan et al. | The effect of green tea extract on reproductive improvement in estradiol valerate-induced polycystic ovarian syndrome in rat | |
| Park | Raspberry ketone increases both lipolysis and fatty acid oxidation in 3T3-L1 adipocytes | |
| Chen et al. | Adiponectin activates the AMPK signaling pathway to regulate lipid metabolism in bovine hepatocytes | |
| Setiawati et al. | The enhancement of growth performance and feed efficiency of Asian catfish, Pangasianodon hypophthalmus fed on Cinnamomum burmannii leaf powder and extract as nutritional supplementation | |
| Chen et al. | Inhibition of the leptin-induced activation of the p38 MAPK pathway contributes to the protective effects of naringin against high glucose-induced injury in H9c2 cardiac cells | |
| Han et al. | Chlorogenic acid stimulates the thermogenesis of brown adipocytes by promoting the uptake of glucose and the function of mitochondria | |
| CN106994131B (zh) | 一种调节脂代谢和肥胖的化合物paqg在制药中的应用 | |
| KR20080065593A (ko) | 지방세포의 지방 축적을 관리하는 방법 | |
| Cheng et al. | Sodium butyrate promotes milk fat synthesis in bovine mammary epithelial cells via GPR41 and its downstream signalling pathways | |
| Malinowski et al. | Effect of different separation protocols between mares and foals on plasma cortisol and cell-mediated immune response | |
| Lin et al. | The in vitro and in vivo wound-healing effects of royal jelly derived from Apis mellifera L. during blossom seasons of Castanea mollissima Bl. and Brassica napus L. in South China exhibited distinct patterns | |
| Zhang et al. | Positive effects of Mulberry leaf extract on egg quality, lipid metabolism, serum biochemistry, and antioxidant indices of laying hens | |
| Xu et al. | Adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase ameliorates bovine adipocyte oxidative stress by inducing antioxidant responses and autophagy | |
| Liu et al. | Prenylated flavonoid‐standardized extract from seeds of Psoralea corylifolia L. activated fat browning in high‐fat diet–induced obese mice | |
| CN113332275A (zh) | 穿心莲内酯在制备促进白色脂肪棕色化的产品中的应用 | |
| EP1847244B1 (en) | Metabolic syndrome-improving agent and medicine, supplement, functional food and food additive containing the same | |
| CN111317830A (zh) | 芒果苷对小鼠糖尿病药理作用的研究方法 | |
| JP2009263344A (ja) | 脂肪細胞分化促進剤 | |
| KR20150083622A (ko) | 오갈피나무와 뽕나무를 이용한 항비만 조성물 | |
| EP1847266B1 (en) | Metabolic syndrome-improving agent and medicine, supplement, functional food and food additive containing the same | |
| Chu et al. | The protective effects of mangiferin on metabolic and organs functions in the adolescent rat model of alcohol abuse | |
| CN112451512A (zh) | 一种药物组合物及其治疗骨质疏松的用途 | |
| CN109172559B (zh) | 依他尼酸在制备治疗和预防肥胖及相关代谢性疾病药物中的应用 | |
| US20180177836A1 (en) | Traditional chinese medicine composition for promotion of browning of white adipocytes, preparation method and use thereof | |
| Yu et al. | Effects of a traditional Chinese medicine formula and its extraction on muscle fiber characteristics in finishing pigs, porcine cell proliferation and isoforms of myosin heavy chain gene expression in myocytes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20210903 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |