CN113278462A - 一种芝麻香油的提取方法及在皮肤修复领域的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明具体涉及一种芝麻香油的提取方法及在皮肤修复领域的应用。芝麻香油是我国传统的调味植物油，具有良好的风味及皮肤修复活性。目前药品级或化妆品级芝麻香油通常为冷榨芝麻香油，存在热稳定性不足、货架期短的缺陷。本发明目的在于提供一种适用于药品或护肤品添加，具有更好皮肤修复功效及稳定性的芝麻香油。为了实现该技术目的，本发明针对传统“水代法”进行了优化，并引入酶解提高了制备效率，获得了一种活性高并且更为稳定的芝麻香油；进一步的，本发明还提供了一种所述芝麻香油制备的外用膏剂，可用于治疗多种皮肤疾病。
Description
技术领域
本发明属于芝麻香油制备技术领域，具体涉及一种芝麻香油的提取方法、所述方法提取制备的芝麻香油及其在皮肤修复领域的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
芝麻油，又被称为香油、麻油，是中国传统的调味植物油，它是从芝麻中榨取的油脂，有浓郁的炒芝麻香味。芝麻油中富含亚油酸、油酸、亚麻酸等不饱和脂肪酸，容易被人体分解、吸收和利用，其保健功效在《神农本草经》和《本草纲目》中均有记载。现代研究表明，芝麻油能够促进胆固醇的代谢，并有助于消除动脉血管壁上的沉积物，对防治心血管疾病有一定的作用。芝麻油主要药效包括防止动脉硬化、治疗支气管炎引起的咳嗽、治疗牙龈出血、保护食道粘膜等功能，其中丰富的维生素E还有抗衰老的作用。除上述生理功效外，芝麻油还具有皮肤修复功能，《本草纲目》记载，“长食麻油，可消痹心怡，增强食欲，提神明目而防衰”记载了芝麻香油的护肤功效。解放军总医院风湿科针对芝麻油在变应性血管炎患者干痂类皮损愈合中的应用进行了研究，采用芝麻油浸润变应性血管炎患者、脱痂后再敷用抗菌敷料，能够显著缩短皮肤创面的愈合时间；李宏娟等人的研究中也提供了芝麻油配合中药应用于失禁性皮炎护理的研究。
芝麻油按制作方法分为冷榨芝麻油及热榨芝麻油，热榨取芝麻油包括小磨香油和机榨芝麻香油，其中，小磨香油是传统地方名产，在皖、冀、鲁、豫等地至今沿用着“小磨盘”和祖传技法酿制，讲究“淘、炒、磨、烫”纯手工、无添加制作工艺，学名“水代法”。小磨香油生产方式包括：将芝麻炒熟后，采用石磨研磨成酱坯，向酱坯中加入水，利用水油比重将油进行代换，属于纯物理方法制油，与压榨法、溶剂法等现代制油工艺相比具有操作温度低、营养成分及香味物质损失少的优点，产品呈琥珀色、香味浓郁，深受消费者喜爱。冷榨芝麻香油制备过程中没有热炒工艺，所以不会因为高温作用额外产生多环芳烃、聚合物等危害因子；所得冷榨芝麻香油色泽较浅，气味清香，用途更加广泛，但缺点是相比热榨法出油率低、无法灭菌、油脂的氧化稳定性差。
针对上述研究成果，发明人认为，目前针对芝麻油的研究主要集中于制备工艺的考察和芝麻油中挥发性成分的分析。芝麻油能够应用于受损皮肤的修复，可应用于护肤品及药品的开发——国际著名品牌Neutrogena(露得清)将芝麻油应用到身体油中，Avon(雅芳)将芝麻油添加至卸妆油中；我国烧伤学科带头人徐荣祥教授研发的美宝湿润烧伤膏中也使用了芝麻油。1987年，美国FDA就确定了芝麻油在化妆品中的安全性和应用范围，确认了芝麻油的活性成分包括油酸、亚油酸和棕搁酸三甘油醋和类酯，可应用于人体皮肤、头发、指甲、黏膜及眼睛等部位，以芝麻油为基础油的身体按摩油产品也是炙手可热的护肤产品。然而，上述化妆品或药品级的芝麻油均为冷榨芝麻油，根据李晓栋等人的研究，冷榨芝麻油的热稳定性存在明显的不足，烘箱实验后，冷榨芝麻油维生素E仅剩余1/5，热榨芝麻油仍有2/3，更为重要的，加入冷榨芝麻油的护肤产品无法采用常规灭菌工艺，这会显著提高护肤品质量控制难度，缩短货架期。
发明内容
针对上述研究背景，本发明目的在于提供一种适用于药品或化妆品添加的、具有更好的稳定性的芝麻香油，为了实现该技术目的，本发明针对传统“水代法”进行了优化，首选引入酶解方式提高了芝麻中油脂成分的溶出，另外通过控制制备工艺参数实现了无需高温加热和晃锅的操作即可实现芝麻香油的提取。本发明方法提取得到芝麻香油相比传统香油及冷榨香油具有良好的抗氧化性能、热稳定性及皮肤修复效果。
基于上述技术效果，本发明提供以下技术方案：
本发明第一方面，提供一种芝麻香油的提取方法，所述提取方法包括加热、粉碎及提取，所述提取方法的特征在于，所述提取工艺中包括酶解。
本发明所述芝麻香油的提取方法主要包括如下的步骤：将芝麻置于60～80℃条件下加热一段时间，加热完成后将芝麻粉成细粉，加水得到芝麻细粉混悬液并进行酶解，向酶解后的混合物中继续加水并加热至一定温度，冷却后分离油脂层即为所述芝麻香油。
本发明提供的提取方法中，不再需要高温加热或炒制的过程，大大降低了芝麻焦糊产生苯并吡及反式脂肪的可能性。另外，本发明制备方法也不再需要传统的晃锅等操作，使制备方法更易实现、易工业化。另外，本发明制备方法提取的芝麻香油经证实具有良好的抗氧化作用，尤其是应用于皮肤表面相比传统芝麻香油具有更好的抗皮肤氧化及修复效果，同时克服了冷榨芝麻香油热稳定性不足的缺陷。
本发明第二方面，提供第一方面所述提取方法制备得到的芝麻香油。
本发明第三方面，提供第二方面所述芝麻香油在皮肤修复领域的应用。
传统的医药领域中，还将芝麻香油用于外用膏剂的制备，通过添加蜂蜡形成膏体基质，配合清热消毒功效的天然药物制备皮肤外用制剂，因此本发明第四方面，提供一种皮肤外用制剂，所述皮肤外用制剂中包括第二方面所述芝麻香油。
以上一个或多个技术方案的有益效果是：
1、现有冷榨芝麻香油在热稳定性方面存在不足，这同时提高了将冷榨芝麻香油应用于皮肤护理产品的成本。传统的热榨取芝麻香油虽然具有良好的热稳定性，但是因为色泽较深并且具有浓郁的香气，应用于护肤产品、特别是化妆品，会影响使用者的体验。本发明提供的芝麻香油则兼顾上述两者的优点，通过改善提取工艺实现了热稳定性的显著提高，相比传统“小磨香油”淡化了香味和颜色，易于保存，更适用于化妆品、护肤品或皮肤外用膏剂的添加。
2、本发明提供的外用膏剂成分简单，应用成本更低。并且与常规治疗烧烫伤的外用膏剂不同，本发明提供的膏剂着重于应用芝麻香油对于烧伤、烫伤及疤痕的修复作用，提供了一种成方思路与现有技术不同的外用膏剂。针对多种皮肤损伤都具有良好的治疗和修复作用，应用领域广泛，可以应对日常生活中常见的皮肤外伤情形，有效的预防瘢痕的形成。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例1中所述芝麻香油的实物图；
图2为热稳定性实验中所用三种芝麻香油实物图；
其中，图2A为冷榨芝麻香油；图2B为实施例1中制备得到的芝麻香油，图2C 为小磨香油；
图3为烘箱实验后正常油样与热处理油样的对比图；
其中，图3A为冷榨芝麻香油；图3B为实施例1中制备得到的芝麻香油，图3C 为小磨香油；每一组左侧为正常油样，右侧为热处理油样；
图3为本发明中DEEP测定结果折线图；
图4为本发明中芝麻香油抗皮肤氧化作用结果图。
图5为本发明中小鼠皮肤SOD活力和皮肤总羟脯氨酸含量测定结果。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，现有技术中针对芝麻香油对皮肤修复作用的具体机制尚不明确，为了解决如上的技术问题，本发明提出了一种芝麻香油的提取方法及所述芝麻香油在皮肤修复领域的应用。
本发明第一方面，提供一种芝麻香油的提取方法，所述提取方法包括加热、粉碎及提取，所述提取方法的特征在于，所述提取工艺中包括酶解。
优选的，所述芝麻香油的提取方法如下：将芝麻置于60～80℃条件下加热一段时间，加热完成后将芝麻粉成细粉，加水得到芝麻细粉混悬液并进行酶解，向酶解后的混合物中继续加水并加热至一定温度，冷却后分离油脂层即为所述芝麻香油。
进一步的，所述芝麻为白芝麻、黑芝麻或两者的混合。应用本发明所述提取方法进行芝麻香油的榨取采用白芝麻或黑芝麻作为原料均可，当上述芝麻香油应用护肤制剂时，优选白芝麻或黑、白芝麻的混合物。
进一步的，所述芝麻置于60～80℃进行加热，所述加热方式为烘干，所述烘干为烘筒式烘干、热风式烘干和远红外烘干中的一种，更优选的方式为远红外烘干。
实际生产过程中，芝麻在烘干之前还包括清洗的步骤，将芝麻储存或脱壳过程中代入的其他杂质及灰尘洗去，清洗后芝麻在上述温度条件下烘干，所述烘干的目的一方面在于将芝麻中的水分去除，另一方面，升温的过程有助于芝麻当中活性成分的转变，及更多抗氧化活性成分的释放，经历过该升温阶段进行提取的芝麻香油具有更好的促进皮肤修复活性，增加芝麻香油自身的稳定性。
经验证，所述烘干程度以芝麻中含水量降至3.6％及以下为宜，烘干过程中技术人员可视芝麻干燥的情况对芝麻进行翻动。所述芝麻含水量可通过直接干燥法、或《GB/T5009.3-1985》中规定的方法进行测定。
在具体的实施方式中，所述芝麻的烘干温度进一步为70℃、71℃、72℃、73℃、 74℃、75℃或76℃。
进一步的，所述芝麻的粉碎方式为机械粉碎，包括粉碎机粉碎或螺杆挤压机粉碎方式。
进一步的，所述芝麻细粉的尺寸为30目及以下，更进一步的为30目～70目。该步骤中将芝麻粉碎的主要目的在于帮助其中的有益成分进行充分的溶出，经测定，本发明认为30目及以下的颗粒尺寸能够兼顾粉碎效率和提取效率。并且，芝麻粉碎过细容易在加热过程中粘附在容器壁上导致提取效果不佳，因此，所述芝麻细粉的粒径以30目～70目最为适宜。
进一步的，所述酶解步骤的具体操作如下：向芝麻细粉中加入0.8～1.2倍体积的水，混合均匀得到芝麻细粉混悬液，向芝麻细粉混悬液中加入酶使混悬液中酶浓度达到80～100u/ml，在30～37℃条件下反应4～6h。
更进一步的，所述酶为包括但不限于果胶酶、纤维素酶、磷脂酶中的一种或其混合。
进一步的，上述酶解反应结束后，将反应后的混合物进行加热处理，并且向反应后的体系中继续加入反应体系0.5～1倍的水，静置后将上层油脂分离得到所述芝麻香油脂。该步骤中，对所述混合物进行加热处理的目的一方面在于将酶加热失活使其留在芝麻细粉混悬液中，另一方面，本发明研究证实，在升温的状态下继续向反应体系中缓慢加水有助于油脂的溶出，效果更好的方案中，可通过加入盐水的方式帮助油脂进一步溶出。
上述技术方案中，所述加热方式温度为85～140℃，所述加热采用直接加热或间接加热的方式均可，本发明提供的一些实施方式中，所述加热优选水浴加热或将酶解后的混悬液置于高温灭菌锅中进行处理，完成升温处理的同时进行灭菌。
具体的实施方式中，所述反应体系通过水浴加热，加热过程中继续向所述混悬液中加水，待混悬液温度加热至80～85℃后继续加热0.5～1h反应结束。
又一种具体的实施方式中，所述反应体系通过高温灭菌锅加热10～15min，待其温度降至90℃以下后向混悬液中继续加水。
上述实施方式中，加水采用分次加入的方式实现缓慢加入，本领域技术人员可依据反应状况决定加水的次数，常见的实施方式中，比如分三次或四次。
上述技术方案中，所述盐水优选食用盐水，所述氯化钠的浓度为0.3～0.5％。
本发明第二方面，提供第一方面所述提取方法制备得到的芝麻香油。
本发明第三方面，提供第二方面所述芝麻香油在皮肤修复领域的应用。
优选的，所述应用包括以下方面的应用：
(1)在治疗皮肤轻微损伤方面的应用，所述皮肤轻微损伤包括皮肤炎症、轻度擦伤、烫伤或烧伤。
(2)在制备皮肤外用制剂方面的应用。
优选的，所述皮肤外用制剂中还包括其他具有修复活性的成分，进一步的，包括保湿成分(实例包括透明质酸、胶原蛋白、神经酰胺等)、生长因子(实例包括EGF表皮生长因子等)、抗炎成分(实例包括维生素B5、传明酸、4-叔丁基环己醇等)、抗氧化成分(实例包括维生素C、维生素E、花青素、辅酶Q等)或天然药物提取物。
本发明第四方面，提供一种皮肤外用制剂，所述皮肤外用制剂中包括第二方面所述芝麻香油。
为了提供一种适用于皮肤破损的治疗膏剂，本发明除加入清热解毒的药物外，还增加了祛风除湿、杀菌止痒的成分改善皮肤恢复过程中可能出现的肿胀、瘙痒。避免由于皮肤苦痒难忍而抓挠，导致破溃迟迟无法恢复。其中，所述清热解毒的药味包括金银花、穿心莲、黄柏、薄荷等，所述祛风除湿的药味包括枳壳、车前子、木通、地肤子、冬葵子、苦参、金钱子等。效果较好的方案中，所述祛风除湿的药味选择枳壳及金钱子，采用芝麻香油高温提取很好的消除了枳壳与金钱子的苦寒之力，同时保留了其止痒散结、消水利肿的功效。
因此，本发明第四方面一种效果较好的实施方式中，所述皮肤外用制剂中采用如下原料：金银花、穿心莲、枳壳及金钱子。
金银花，又称银花、双花、二花、二宝花，为忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山银花(毛萼忍冬)Lonicera confusa DC.或毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd.的干燥花蕾或带初开的花。性味甘，寒，归肺、心、胃经。主治清热解毒，凉散风热。用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热。
穿心莲，别称榄核莲、一见喜、斩舌剑、苦草、苦胆草、四方草。为爵床科植物穿心莲(圆锥须药草)Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees的干燥地上部分。性味苦，寒，归心、肺、大肠、膀胱经。主治清热解毒，凉血，消肿。用于感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤。
枳壳，为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实。性味苦、辛、酸，温，归脾、胃经。主治理气宽中，行滞消胀。用于胸胁气滞，胀满疼痛，食积不化，痰饮内停；胃下垂，脱肛，子官脱垂。
金钱子，即绛梨木子，又称打枪子、叫梨子、叫耳母子、叫铃子、震天雷、雷震子、黑枣子。为鼠李科植物薄叶鼠李的果实，性味苦，寒，主治消食，行水，通便。治食积饱胀，水肿臌胀，大便秘结。
进一步的，所述皮肤外用制剂中，各成分及重量份数如下：芝麻香油450～550 份，金银花20～40份，穿心莲10～30份、枳壳10～30份及金钱子2～5份。
更进一步的，各成分及重量份数如下：芝麻香油470～520份，金银花25～35 份，穿心莲15～25份、枳壳15～25份及金钱子2～4份。
在效果较好的一些实施方式中，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油500份、金银花30份、穿心莲20份、枳壳20份及金钱子3份。
另外的一些实施方式中，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油470份、金银花28份、穿心莲15份、枳壳15份及金钱子2份。
另外的一些实施方式中，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油520份、金银花35份、穿心莲24份、枳壳25份及金钱子4份。
进一步的，所述皮肤外用制剂为膏剂，制备过程中还需要加入蜂蜡，所述膏剂中各成分及重量份数如下：芝麻香油500份、金银花30份、穿心莲20份、枳壳20份、金钱子3份及蜂蜡30份；或芝麻香油470份、金银花28份、穿心莲 15份、枳壳15份、金钱子2份及蜂蜡28份；或芝麻香油520份、金银花35份、穿心莲24份、枳壳25份、金钱子4份及蜂蜡32份。
更进一步的，所述外用膏剂的制备方法如下：将金银花、穿心莲、枳壳、金钱子加入芝麻香油中浸泡，浸泡好的芝麻香油及药材置于文火上熬制一段时间，待药材出现焦糊后移除上述药材，待芝麻香油温度稍降后加入蜂蜡将搅拌均匀得到所述外用膏剂。
进一步的，所述皮肤外用膏剂应用于皮肤炎症、破溃、浅度烧伤及烫伤。
所述浅度烧伤及烫伤依据临床烧烫伤划分方式具体如下：
所述烧伤为浅度烧伤，包括Ⅰ度烧伤和浅Ⅱ度和部分较浅的深Ⅱ度烧伤。
所述Ⅰ度烧伤：又称红斑性烧伤，仅伤及表皮的一部分，但生发层健在，因而增殖再生能力活跃，常于3～5天内愈合，不留瘢痕。
所述浅Ⅱ度烧伤：伤及整个表皮和部分乳头层。由于生发层部分受损，上皮的再生有赖于残存的生发层及皮肤附件，如汗腺及毛囊的上皮增殖。如无继发感染，一般经1～2周左右愈合，亦不留瘢痕。
所述深Ⅱ度烧伤：烧伤深及真皮乳头层以下，但仍残留部分真皮及皮肤附件，愈合依赖于皮肤附件上皮，特别是毛囊突出部内的表皮祖细胞的增殖。
所述烫伤为一度烫伤及二度烫伤。
其中，所述一度烫伤为伤及表皮颗粒层，所述二度烫伤包括浅二度烫伤及深二度烫伤，所述浅二度烫伤为伤及真皮浅层，保留部分生发层；所述深二度烫伤为伤及真皮深层，残留部分网状层。
为了使本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
该实施例中，提供一种芝麻香油的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：
将芝麻清洗除去表面的灰尘及其他杂物，清洗后的芝麻放置于烘箱中于75℃左右的温度进行干燥，时间为1.5～2小时，待芝麻中含水量降低至3.6％以下时结束干燥。
将干燥完成后的芝麻加入高速粉碎机中粉碎10min将芝麻分成细粉(粒径为 30目以下)。向芝麻细粉中加入相同体积的纯净水使其混合成为均匀的混悬液，按照配置后浓度为100u/ml加入纤维素酶，并搅拌使纤维素酶混合均匀，在30℃条件下反应4h。
反应结束后将反应体系置于水浴中加热至温度为85℃，加热过程中继续向反应体系中加入反应体系一半体积的0.5％氯化钠溶液，采用边加边搅拌的方式分三次将所述氯化钠溶液全部加入，反应体系温度达到85℃之后继续加热0.5h反应停止，自然降温后静置6h至表面油脂层不再增加，将表面油脂分离得到一种芝麻香油。
实施例2
该实施例中，提供又一种芝麻香油的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：
将芝麻清洗除去表面的灰尘及其他杂物，清洗后的芝麻放置于烘箱中在60℃左右的温度进行干燥，时间为2小时，待芝麻中含水量降低至3.5％以下时结束干燥。
将干燥完成后的芝麻加入螺杆挤压机中粉碎得到芝麻细粉(粒径为30目以下)。向芝麻细粉中加入1.2倍体积的纯净水使其混合成为均匀的混悬液，按照配置后浓度为80u/ml加入果胶酶，在35℃条件下反应5h。
反应结束后，将反应体系封闭后置于高压灭菌锅中处理15min，待其温度降低至90℃以下后向反应体系中继续加入反应体系0.6倍体积的纯净水，加水采用边加边搅拌的方式分四次加入，加水完毕后将反应体系降至5h至表面油脂层不再出现明显的增多，将表面油脂层分离，得到一种芝麻香油。
实施例3
该实施例中，提供又一种芝麻香油提取方法，所述提取方法包括以下步骤：将清洗后的芝麻置于80℃环境中烘干，烘干至芝麻中含水量降低至3％以下。
将干燥完成后的芝麻加入螺杆挤压机中粉碎得到芝麻细粉(粒径为30目以下)。向芝麻细粉中加入0.8倍体积的纯净水使其混合成为均匀的混悬液，按照配置后浓度为100u/ml加入果胶酶及纤维素酶，在33℃条件下反应5.5h。
反应结束后将反应体系置于水浴中加热至温度为85℃，加热过程中继续向反应体系中加入反应体系0.6倍体积的0.3％的氯化钠溶液，采用边加边搅拌的方式分三次将所述氯化钠溶液全部加入，反应体系温度达到80℃之后继续加热1h反应停止，自然降温后静置6h至表面油脂层不再增加，将表面油脂分离得到一种芝麻香油。
实施例4
本实施例中，提供一种用于皮肤修复的外用膏剂，所述外用膏剂中各成分及重量如下：芝麻香油500克，金银花30克，穿心莲20克，金钱子3克，蜂蜡30克，枳壳20克。
通过以下方法制备得到膏剂：将金银花30克，穿心莲20克，金钱子3克，枳壳20克加入芝麻香油中浸泡24h。将浸泡好的芝麻香油及药材至于文火上熬制4h，熬制过程中不断搅拌，带药材出现焦糊的褐色后，将药材移除，待芝麻香油温度降低至70℃时，将称量好的蜂蜡加入其中，搅拌均匀，待其自然晾凉后得到所述外用膏剂。
实施例5
本实施例中，提供一种外用膏剂，所述外用膏剂中各成分及重量如下：芝麻香油470g、金银花28g、穿心莲15g、枳壳15g、金钱子2g及蜂蜡28g。
通过以下方法制备得到膏剂：将金银花28g、穿心莲15g、枳壳15g、金钱子 2g加入芝麻香油中浸泡36h。将浸泡好的芝麻香油及药材至于文火上熬制3.5h，熬制过程中不断搅拌，带药材出现焦糊的褐色后，将药材移除，待芝麻香油温度降低至75℃时，将称量好的蜂蜡加入其中，搅拌均匀，待其自然晾凉后得到所述外用膏剂。
对比例1
本实施例中，提供又一种芝麻香油的提取方法，所述提取方法与实施例1不同之处在于，清洗后的芝麻通过曝晒进行干燥，待芝麻中含水量降低至3.6％以下时结束干燥。
对比例2
本实施例中，提供一种外用膏剂，所述外用膏剂中各成分及重量如下：芝麻香油470g、金银花28g、穿心莲15g、枳壳15g及蜂蜡28g。
对比例3
本实施例中，提供一种外用膏剂，所述外用膏剂中各成分及重量如下：芝麻香油470g、金银花28g、穿心莲15g、枳壳15g、苦参2g及蜂蜡28g。
有效性验证
一、芝麻香油抗氧化作用验证
1、DEEP自由基清除实验
将实施例1-3及对比例1中制备得到的芝麻香油加入无水乙醇配制成 50μL/mL、100μL/mL、150μL/mL、200μL/mL、250μL/mL、300μL/mL的样品溶液，取50μL上述样品溶液及150μL 0.1mM DEEP乙醇溶液加入96孔板中，轻微振荡使其混合均匀，将加样后的96孔板置于避光处35min后于517n处测定吸光值，以无水乙醇作为空白对照，DEEP自由基清除率计算公式如下：
清除率(％)＝(A空白-A样品)/A空白×100
精测定，上述各组芝麻香油清除DEEP自由基活性如图3所示，实施例1-3中所述方法制备的芝麻香油具有具有基本相似的DEEP自由基清除活力，并且显著优于对比例1中芝麻香油的制备效果。根据该结果，发明人认为加热的温度对于芝麻中抗氧化物质的转变具有促进作用，在本发明研究过程中还发现，过高的温度同样会导致芝麻香油中抗氧化活性成分的损失。
2、芝麻香油抗皮肤氧化损伤的作用
1、材料和方法
1.1实验动物：选用60日龄昆明小鼠50只(购自济南朋悦实验动物繁育有限公司)。
1.2主要试剂：实施例1-3及对比例1制备的芝麻香油及小磨香油(购自大润发超市，品牌为“崔字牌”)，超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒及羟脯氨酸(Hyp)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.3实验方法
1.3.1动物分组、造模及给药：随机分为5组，每组10只。
采用剃毛器剃去小鼠背部被毛，暴露大小约2cm×3cm的皮肤，每日清水清洗后分别涂抹芝麻香油，各组给药方式如下：
实验组：将实施例1-3及对比例1中制备得到芝麻香油涂抹于暴露的皮肤处，每日200μL，采用定量滴管给药后按摩2min使其吸收。
对照组：涂抹“崔字牌”小磨香油200μL。
空白组：每日采用相同方式涂抹清水200μL。
1.3.2小鼠皮肤SOD活力和皮肤总羟脯氨酸含量测定：
各组小鼠均于45天后处死，取背部脱毛部位皮肤组织块，生理盐水清洗并去除皮下脂肪及结缔组织后拭干，取0.5g组织加入生理盐水至5ml进行组织匀浆，离心获得组织液(期间一直冰上保存)，采用SOD试剂盒和羟脯氨酸试剂盒进行测定，测定结果如下图5所示。
从图5中可以看出，实施例1-3中芝麻香油涂抹于小鼠皮肤都具有提升SOD及总羟脯氨酸含量的效果，效果优于市售的芝麻香油产品，证明本发明制备方法得到的芝麻香油是一种进一步提高皮肤修复效果的芝麻香油产品。而对比例1涂抹后小鼠皮肤中SOD含量甚至低于仅仅用水的空白组，猜测可能是油脂中营养物质缺乏，同时加重了皮肤失水的缘故。
3、芝麻香油热稳定性验证
本实施例中所述冷榨芝麻香油(“贝科姆”进口冷压食用香油)、热榨芝麻香油(“崔字牌”小磨香油)均为市售产品。
本实施例中，采用Schaal烘箱法对市售冷榨、热榨芝麻香油及本发明提取芝麻香油的热稳定性进行了考察，考察指标包括过氧化值及维生素E含量。其中，过氧化值检测采用碘化钾滴定法检测，所述维生素E的液相色谱检测条件如下：
检测器：Waters 2475荧光检测器；
色谱柱：Phenomenex Luna NH2氨基柱(250mm×4.6mm，5μm)；
流动相：V(正己烷)∶V(正戊醇)＝99∶1；
流速：0.8mL/min；
柱温：40℃；
激发波长：298nm；发射波长：325nm；进样量：10μL。
将三种芝麻香油放置在(60±1)℃烘箱中，定期取样分别测定过氧化值、维生素E含量，检测结果如下表1所示：
表1芝麻香油样品热稳定性考察结果
从表1数据可以看出，冷榨芝麻香油经烘箱处理后，过氧化值明显提升，并且维生素E的含量也出现了快速下降，说明冷榨芝麻香油经热处理后发生了明显的酸败。从图3结果也可以看出，热处理后的冷榨芝麻香油和小磨香油都出现了明显的颜色加深。同时，本发明中提供的芝麻香油经热处理后过氧化值变化不明显，相比热榨芝麻香油过氧化值升高幅度更小，维生素E的损失也更少，热处理后油脂颜色变化不明显，表明本发明方法制备的芝麻香油相比现有热榨芝麻香油具有更好的热稳定性。
二、外用膏剂效果验证
1、抗炎、镇痛作用研究
取20～25g昆明小鼠，雌雄各半，随机分为对照组(注射用油)、基质组(芝麻香油与蜂蜡混合)、阳性药物组(湿润烧伤膏)、低剂量组(0.1g生药/g膏) 及高剂量组(0.2g生药/g膏)、高剂量对照组(0.2g生药/g膏，对比例3制备外用膏剂)，每组12只。其中，低剂量组及高剂量组中药材比例采用实施例1中所述比例，高剂量组减少基质的用量从而提高药物浓度。
以0.05mL二甲苯/只的剂量将二甲苯溶液涂抹于小鼠左耳整个耳廓，30min 后清除小鼠耳廓多余液体并给予各组药物0.2g，用药1h后处理小鼠，用打孔器分别取左右耳相同部位耳片称重测量肿胀率，结果见表2：
表2各实验组小鼠耳组织肿胀率(X±s，n＝12)
从表1中可以看出，对照组小鼠在涂抹注射用油后耳廓肿胀趋势增加，基质组小鼠耳廓肿胀程度有所缓解，而本发明所提供的外用膏剂能够有效的缓解二甲苯导致的小鼠皮肤炎症。本领域公知，二甲苯与临床急性炎症机制相似，上述研究结果表明，本发明提供的外用膏剂可用于缓解多种皮肤炎症。
另外，通过对比高剂量对照组与高剂量组可以看出，对比例3中调整药味后的膏剂效果相比实施例4或5具有明显的下降，并且发明人在实验过程中发现，对比例3和对比例2用药的小鼠在饲养过程中出现明显的抓挠耳部行为，甚至同一笼小鼠频发斗殴事件，猜测可能是伤口的瘙痒引起小鼠郁闷烦躁，导致攻击行为。
2、对实验性动物烫伤效果
实验方法：选取180～220gSD大鼠，雌雄各半，通过硫化钠溶液给大鼠背部皮肤脱毛，使其暴露直径为4.5cm的皮肤。脱毛48h后麻醉动物，将脱毛处消毒后。浸入80℃的热水中持续5s，制备二度烫伤模型。烫伤造模结束30min后，分别在烫伤部位涂抹药物0.5g/只/天。连续给药15天，观察各组大鼠创面结痂及愈合时间，结果如表3所示：
表3各组大鼠创面结痂面积及愈合时间(X±s，n＝10)
3、对实验性动物烧伤效果
实验方法：选取180～220gSD大鼠，雌雄各半，通过硫化钠溶液给大鼠背部皮肤脱毛，使其暴露直径约为4.5cm的皮肤。脱毛48h后麻醉动物，将脱毛处消毒。将挖空的石棉板放置于大鼠背部，用吸管吸取95％的酒精在暴露处点燃，持续燃烧10秒制备二级烧伤模型。烧伤后第二天开始用药，分别在烧伤部位涂抹药物0.5g/只/天，连续给药15天，观察各组大鼠创面结痂及愈合时间，由于对比例2和 3中外用膏剂在抗炎镇痛及烫伤实验中表现均不佳，本实验中不再继续用药。烧伤实验结果如表4所示：
表4各组大鼠创面结痂及愈合时间(X±s，n＝10)
从上述表3及表4结果可以看出，本发明提供所述外用膏剂针对动物皮肤表面的二度及以内烧伤和烫伤都具有良好的治疗效果。药膏涂抹于大鼠皮肤表面，大鼠无不良反应，证明所述药物对皮肤不具有刺激性。在烫伤实验中，所述外用膏剂涂抹后烫伤造成的红肿消失速度较快，大鼠生长状态相比对照组状况良好。在烧伤实验中，部分大鼠出现较大面积的水泡，在无菌条件下将水泡刺破并去除组织液后继续用药，高剂量组大鼠中组织液渗出等现象均快速得到改善，较早长出粉色新皮。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种芝麻香油的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括加热、粉碎及提取，所述提取方法的特征在于，所述提取工艺中包括酶解。
2.如权利要求1所述芝麻香油的提取方法，其特征在于，所述芝麻香油的提取方法如下：将芝麻置于60～80℃条件下加热一段时间，加热完成后将芝麻粉成细粉，加水得到芝麻细粉混悬液并进行酶解，向酶解后的混合物中继续加水并加热至一定温度，冷却后分离油脂层即为所述芝麻香油。
3.如权利要求2所述芝麻香油的提取方法，其特征在于，所述芝麻为白芝麻、黑芝麻或两者的混合；
或，所述芝麻置于60～80℃进行加热，所述加热方式为烘干，所述烘干为烘筒式烘干、热风式烘干和远红外烘干中的一种，更优选的方式为远红外烘干；所述芝麻的烘干温度进一步为70℃、71℃、72℃、73℃、74℃、75℃或76℃；
或，所述芝麻的粉碎方式为机械粉碎，包括粉碎机粉碎或螺杆挤压机粉碎方式；优选的，所述芝麻细粉的尺寸为30目及以下，进一步的为30目～70目。
4.如权利要求2所述芝麻香油的提取方法，其特征在于，所述酶解步骤的具体操作如下：向芝麻细粉中加入0.8～1.2倍体积的水，混合均匀得到芝麻细粉混悬液，向芝麻细粉混悬液中加入酶使混悬液中酶浓度达到80～100u/ml，在30～37℃条件下反应4～6h；
优选的，所述酶为包括但不限于果胶酶、纤维素酶、磷脂酶中的一种或其混合；
优选的，所述酶解反应结束后，将反应后的混合物进行加热处理，并且向反应后的体系中继续加入反应体系0.5～1倍的水或盐水，静置后将上层油脂分离得到所述芝麻香油脂；
进一步的，所述加热方式温度为85～140℃；
进一步的，所述加热采用直接加热或间接加热；更进一步的，所述加热采用水浴加热或将酶解后的混悬液置于高温灭菌锅中进行处理；
更进一步的，所述反应体系通过水浴加热，加热过程中继续向所述混悬液中加水，待混悬液温度加热至80～85℃后继续加热0.5～1h反应结束；
更进一步的，所述反应体系通过高温灭菌锅加热10～15min，待其温度降至90℃以下后向混悬液中继续加水；
更进一步的，所述盐水为食用盐水，其中氯化钠的浓度为0.3～0.5％。
5.权利要求1-4任一项所述提取方法制备得到的芝麻香油。
6.权利要求5所述芝麻香油在皮肤修复领域的应用。
7.如权利要求6所述芝麻香油在皮肤修复领域的应用，其特征在于，所述应用包括以下方面的应用：
(1)在治疗皮肤轻微损伤方面的应用，所述皮肤轻微损伤包括皮肤炎症、轻度擦伤、烫伤或烧伤；
(2)在制备皮肤外用制剂方面的应用；
优选的，所述皮肤外用制剂中还包括其他具有修复活性的成分；进一步的，包括保湿成分、生长因子、抗炎成分、抗氧化成分或天然药物提取物。
8.一种皮肤外用制剂，其特征在于，所述皮肤外用制剂中包括权利要求5所述芝麻香油。
9.如权利要求8所述皮肤外用制剂，其特征在于，皮肤外用制剂中还包括如下的原料：金银花、穿心莲、枳壳及金钱子；
进一步的，所述皮肤外用制剂中，各成分及重量份数如下：芝麻香油450～550份，金银花20～40份，穿心莲10～30份、枳壳10～30份及金钱子2～5份；
更进一步的，各成分及重量份数如下：芝麻香油470～520份，金银花25～35份，穿心莲15～25份、枳壳15～25份及金钱子2～4份；
具体的，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油500份、金银花30份、穿心莲20份、枳壳20份及金钱子3份；
具体的，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油470份、金银花28份、穿心莲15份、枳壳15份及金钱子2份；
具体的，所述皮肤外用制剂中各成分及重量份如下：芝麻香油520份、金银花35份、穿心莲24份、枳壳25份及金钱子4份。
10.如权利要求8所述皮肤外用制剂，其特征在于，所述皮肤外用制剂为膏剂，制备过程中还需要加入蜂蜡，所述膏剂中各成分及重量份数如下：芝麻香油500份、金银花30份、穿心莲20份、枳壳20份、金钱子3份及蜂蜡30份；或芝麻香油470份、金银花28份、穿心莲15份、枳壳15份、金钱子2份及蜂蜡28份；或芝麻香油520份、金银花35份、穿心莲24份、枳壳25份、金钱子4份及蜂蜡32份；
优选的，所述外用膏剂的制备方法如下：将金银花、穿心莲、枳壳、金钱子加入芝麻香油中浸泡，浸泡好的芝麻香油及药材置于文火上熬制一段时间，待药材出现焦糊后移除上述药材，待芝麻香油温度稍降后加入蜂蜡将搅拌均匀得到所述外用膏剂；
进一步的，所述皮肤外用膏剂应用于皮肤炎症、破溃、浅度烧伤及烫伤。
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