CN113260347B - 包含改性黏土和双酚的抗微生物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于抗微生物组合物领域，例如用于个人护理。特别地，本发明涉及用于口腔护理诸如牙膏的抗微生物组合物，其包含抗微生物颗粒和双酚。因此，本发明涉及包含改性黏土颗粒的抗微生物组合物以及至少一种双酚化合物，该颗粒包含抗微生物化合物和黏土颗粒。本发明还涉及本发明的抗微生物组合物的用途和方法。
Description
本发明属于个人护理领域。特别地，本发明涉及可用于例如口腔护理的抗微生物组合物。该抗微生物组合物包含改性黏土和另外的双酚组分，该改性黏土包含抗微生物化合物。本发明还涉及该抗微生物组合物的用途。
背景技术
卫生和适当的个人护理可以预防和治疗由微生物引起的多种疾病。促进和改善卫生的有用工具包括个人护理组合物。用于此目的的最有效的个人护理组合物包括抗微生物组分，其可减少皮肤和粘膜表面上的微生物总数。例如，除臭剂中的抗微生物组合物可减少或防止产生恶臭或促进身体油脂分解成有臭味的脂肪酸的微生物的生长。类似的原理适用于洗发水、沐浴凝胶、牙膏、洗手剂和沐浴剂以及包含抗微生物组合物的个人护理组合物的其它实例。
这种个人护理产品的抗微生物活性不仅可确保美容效果，而且可以有效地防护和治疗影响皮肤和其它身体表面的多种疾病和病症，诸如痤疮和皮肤感染(例如湿疹)。
个人护理最重要的方面之一为口腔健康。龋齿、牙垢、牙龈疾病例如齿龈炎、牙菌斑和口臭是口腔中的疾病(或由疾病引起或可能导致疾病的病症)，其可以通过适当的口腔卫生容易地预防或治疗。这些疾病和病症不仅从医学角度来看很重要，而且从美容角度来看也很重要，因为它们可能损害一个人的笑容外观(诸如牙齿变黄或口臭，其不一定具有病理起源)。在任何情况下，不健康和/或受损的口腔病症均可能影响人们的社交活动，有时会导致避世、焦虑、抑郁或恐慌。尽管其与人类对象的口腔健康相关，但在兽医行业中无论是对于宠物或大型动物，口腔护理也越来越重要。
牙齿表面上形成生物膜会导致口腔疾病和美容上有害的口腔病症。口腔生物膜会影响美容外观，因为其促进牙变色和/或染色。此外，口腔生物膜使微生物附着到牙齿表面，可能导致疾病。
口腔生物膜通过将获得性薄膜(acquired pellicle)(其为源自唾液糖蛋白的含蛋白薄膜)附着到洁净的牙齿表面而形成。该薄膜允许来自所谓的先锋物种(pioneerspecies)(诸如放线菌属(Actinomyces spp)、链球菌属(Streptococcus spp)、嗜血菌属(Haemophilus spp)、噬二氧化碳细胞菌属(Capnocytophaga spp)、韦荣球菌属(Veillonella spp)和奈瑟球菌属(Neisseria))的细菌粘附到牙齿表面。这种生物膜形成的早期阶段可以容易地逆转。然而，如果不去除，先锋细菌将使与牙菌斑、牙垢、牙龈疾病等的形成相关的细菌种类(诸如具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)、密螺旋体属(Treponema spp)、福赛斯坦纳菌(Tannerella forsythensis)、牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)、放线共生放线杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans)等)随后附着。
口臭可为口腔疾病的一种症状，因为其通常指示引起例如蛀牙和齿龈炎的病原体的存在。然而，口臭并不总是与医学病症有关。口臭或口腔恶臭可由例如一些药物、过量摄入咖啡因或唾液产生减少(口干)引起。当非病理性口臭时，可以用口腔护理组合物来预防或控制口臭，该口腔护理组合物诸如口腔清洗剂、口香糖、牙膏、口气片剂(breathtablets)和确保口腔清洁并提供清新口气的其它产品。
WO2001/82922描述了口腔组合物，其包含有效量的多酚草药提取物(其选自厚朴酚、和厚朴酚、四氢厚朴酚、四氢和厚朴酚及其混合物)；有效量的缓冲剂；约40％至约99％的一种或多种水性载体；其中该口腔组合物的总水含量为约5％至约70％。
WO2013/081266描述了包含异丁基厚朴酚和丙二醇单月桂酸酯的口腔护理组合物，其用于治疗龋齿、齿龈炎、牙周炎、牙齿变黄和口臭。实施例1描述了一种包含1.4％厚朴酚和丙二醇月桂酸酯的组合物，其在体外显示出优异的抗菌活性。
US2006/0127329描述了一种包含有效量的抗菌成分的抗牙菌斑、抗牙结石和抗齿龈炎的口腔组合物，该抗菌成分包含至少一种来自木兰属提取物的活性化合物，以及有效量的抗牙菌斑体系，该抗牙菌斑体系包含焦磷酸四钠(TSPP)和三聚磷酸钠(STPP)。基于组合物的总重量，TSPP的存在量为约0.5％至约2.5％，且STPP的存在量为约1％至约10％。表I和表II分别描述了包含0.3％木兰皮提取物与8％和5％抗牙结石体系的洁牙剂组合物。
WO2011/036031A1描述了一种用于衣物洗涤剂组合物、织物调理剂、个人护理和化妆品组合物的双极性抗微生物颗粒及其制备方法。其中所述的抗微生物颗粒包含具有连接有抗微生物基团的改性黏土颗粒。实施例描述了该改性黏土颗粒的制备及其特别是在织物上的抗微生物活性。
仍然需要具有进一步改善的抗微生物活性的抗微生物组合物，特别是用于个人护理抗微生物组合物，诸如用于口腔护理的组合物。
发明内容
本发明人惊奇地发现，包含抗微生物组分的改性黏土颗粒在用于还包含双酚组分的组合物中时表现出改善的抗微生物活性。
因此，在第一方面，本发明涉及一种抗微生物组合物，其包含：
a)包含抗微生物化合物的改性黏土颗粒，该改性黏土颗粒包含：
(i)一种不对称的1：1或2：1：1黏土颗粒，其包含交替的四面体片和八面体片，该交替的四面体片和八面体片在一个外表面平面处终止于四面体片，而在另一外表面平面处终止于八面体片，以及
(ii)至少一种口服可接受的抗微生物化合物，其选自季铵材料，该季铵材料选自西吡氯铵(CPC)、氯化十六烷基三甲基铵(CTAC)、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)、苯扎氯铵(BKC)、苄索氯铵、西三溴胺、季铵盐(quaternium)、聚六亚甲基BH；抗微生物醇；抗微生物有机酸/盐；吡啶硫酮锌；酮康唑；吡罗克酮乙醇胺；或其组合，其中该至少一种抗微生物化合物与黏土颗粒的外表面平面上的配位阳离子连接(attached)；以及
b)至少一种双酚化合物。
在第二方面，根据本发明的抗微生物组合物用于预防或治疗哺乳动物的疾病。
在第三方面，本发明的抗微生物组合物用于去除哺乳动物对象中的口腔生物膜。
在第四方面，本发明涉及一种处理哺乳动物的皮肤或口腔的非治疗性方法，该方法包括使哺乳动物的皮肤或口腔与根据本发明的抗微生物组合物接触的步骤。
在另一方面，本发明涉及本发明的抗微生物组合物用于在哺乳动物中减少身体恶臭，优选口腔恶臭，和/或用于减少口腔生物膜形成和/或用于减少牙变色的用途。
具体实施方式
抗微生物颗粒
根据本发明的组合物包含包含抗微生物化合物的改性黏土颗粒，该改性黏土颗粒包含不对称的1：1或2：1：1黏土颗粒，该黏土颗粒具有交替的四面体片和八面体片，其在外表面平面终止于四面体片和八面体片。优选1：1黏土颗粒。
该颗粒由具有双极性拓扑特异性(topospecific)特征的前体制备。其中抗微生物化合物选择性地连接到不对称黏土的四面体或八面体表面平面的外表面上的配位阳离子上的任何化学反应或一系列反应可用于制备用于本发明的包含抗微生物化合物的双极性颗粒。为了获得真正的双极性抗微生物颗粒，优选地反应仅对一个外部平面具有选择性。选择性是指超过50％，优选超过75％，更优选超过80％，还更优选超过90％，甚至更优选超过95％，或甚至超过99％的总抗微生物化合物存在于外部平面之一上。包含在根据本发明的组合物中使用的抗微生物化合物的双极性颗粒可以例如通过WO2011/036031(其通过引用并入本文)中描述的方法制备。
根据本发明，优选的1：1黏土包括高岭石和蛇纹石亚族矿物。包括在高岭石亚族内的种类包括但不限于高岭石、地开石、埃洛石和珍珠陶土。蛇纹石亚族内的种类包括但不限于贵橄榄石、利蛇纹石和镁绿泥石。
根据本发明，优选的2：1：1黏土包括绿泥石族矿物。一些矿物学家有时将绿泥石错称为2：2黏土。绿泥石包含四面体-八面体-四面体片，如2：1黏土，在四面体层之间具有额外的弱结合的水镁石样层。
四面体片优选包含硅的配位四面体阳离子。四面体片还可包含同晶取代的配位四面体阳离子，其不是硅。同晶取代的配位四面体阳离子包括但不限于铝的阳离子、铁的阳离子或硼的阳离子。
八面体片优选包含铝的配位八面体阳离子。八面体片还可包含同晶取代的配位八面体阳离子，其不是铝。同晶取代的配位八面体阳离子包括镁或铁的阳离子。
至少一种抗微生物化合物与黏土颗粒的外表面平面上的配位阳离子连接。优选地，没有抗微生物化合物与非外部四面体或八面体平面，或表面片的内侧上的配位阳离子连接。
抗微生物化合物可与四面体片的外侧上的配位阳离子连接或与八面体片的外侧上的配位阳离子连接。优选地，至少一种抗微生物化合物与八面体表面平面的外表面上的配位阳离子连接。
至少一种抗微生物化合物可与同一表面片的外侧上或在四面体和八面体表面片中每一个的外侧上的配位阳离子连接。抗微生物化合物可相同或不同。优选地，连接到四面体表面片的外侧上的配位阳离子的抗微生物化合物优选地与连接到八面体表面片的外侧上的配位阳离子的化合物不同。
优选地，改性黏土颗粒的黏土：抗微生物化合物比为1：0.001至1：0.1，更优选1：0.01至1：0.05，最优选约1：0.018。
抗微生物化合物
抗微生物化合物优选地选自季铵盐、抗微生物醇、抗微生物有机酸/盐或其组合。
优选的抗微生物醇包括但不限于苯氧基乙醇、苯甲醇、二氯苯甲醇、二甲基恶唑烷、DMDM乙内酰脲、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇、重氮烷基脲、六氯酚。
优选的抗微生物有机酸/盐选自苯甲酸/苯甲酸钠、水杨酸/水杨酸钠、山梨酸/山梨酸钾、羟甲基甘氨酸钠、环己烷二乙酸单酰胺、氯烟酸、琥珀酸、过乙酸或吡啶硫酮锌、酮康唑、吡罗克酮乙醇胺或其组合。
优选的季铵盐选自包含以下的组：西吡氯铵(CPC)、氯化十六烷基三甲基铵(CTAC)、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)、苯扎氯铵(BKC)、苄索氯铵、西三溴胺、季铵盐、聚六亚甲基BH等。季铵盐是指具有季铵基团的化合物。
在优选的实施方案中，该至少一种抗微生物化合物为季铵盐，更优选地，该至少一种抗微生物化合物为西吡氯铵(CPC)。
抗微生物组合物中的抗微生物化合物的浓度将取决于组合物的用途。因此，在一些实施方案中，抗微生物组合物将包含改性黏土颗粒，该改性黏土颗粒包含治疗有效量的抗微生物化合物。在另一实施方案中，抗微生物组合物将包含改性黏土颗粒，该改性黏土颗粒包含美容有效量的抗微生物化合物。
通常，按组合物的总重量计，该组合物包含0.001wt.％至50wt.％的改性颗粒(即，包含至少一种抗微生物化合物的颗粒)，按组合物的总重量计，更优选0.01wt.％至20wt.％，甚至更优选0.1wt.％至10wt.％，最优选1wt.％至5wt.％，甚至按组合物的重量计最优选0.2％至3％。优选地，抗微生物化合物为CPC，因此该颗粒为CPC-黏土颗粒，其以0.01wt.％至50wt.％，更优选0.1wt.％至20wt.％，甚至更优选1wt.％至5wt.％的量存在于组合物中。
双酚
根据本发明的抗微生物组合物包含至少一种双酚。适用于本发明的优选的至少一种双酚的实例包括2,4′-双酚(IUPAC名称：2,4′-二羟基联苯)、2,2′-双酚(2,2′-二羟基联苯)、3,3′-双酚(3,3′-二羟基联苯)、4,4′-双酚(4,4′-二羟基联苯)及其混合物。优选地，该至少一种双酚选自2,4′-双酚或2,2′-双酚。
优选地，该至少一种双酚为二烯丙基双酚。这意味着双酚包含二烯丙基取代。二烯丙基取代可存在于双酚结构上的任何位置。优选的二烯丙基双酚为(5-3′-二烯丙基)双酚或(5-5′-二烯丙基)双酚。最优选的二烯丙基双酚为(5-3′-二烯丙基)双酚。
优选地，至少一种双酚化合物选自和厚朴酚(honokiol)以及厚朴酚(magnolol)。更优选地，抗微生物组合物包含两种双酚化合物，甚至更优选为和厚朴酚以及厚朴酚。
优选地，基于组合物的总重量，该组合物包含0.001wt.％至10wt.％的量的双酚，更优选按抗微生物组合物的重量计0.01％至5％，甚至更优选0.1wt.％至3wt.％，还更优选1wt.％至2wt.％的量的双酚。
在一个实施方案中，使用的抗微生物化合物为和厚朴酚以及厚朴酚，并且抗微生物组合物中存在的和厚朴酚以及厚朴酚的总和占组合物总重量的0.01wt.％至10wt.％，更优选按组合物的总重量计0.1wt.％至5wt.％，甚至更优选0.5wt.％至2wt.％。优选地，在包含改性颗粒(其为CPC-黏土颗粒)的组合物中使用这种量的和厚朴酚与厚朴酚的组合。
和厚朴酚与厚朴酚的组合可以30：70至70：30，更优选60：40至40：60，最优选50：50之间的比率存在。
抗微生物组合物
根据本发明的抗微生物组合物优选为用于个人护理的抗微生物组合物，诸如选自以下的组合物：口腔护理组合物、洗发水、除臭剂(任选地包含推进剂(propellant))、洗手剂或沐浴剂等。
在本发明的一个实施方案中，该组合物存在于霜(包括UV-A和UV-B防晒剂)、肥皂、凝胶(geal)、除臭剂、洗发水或洗手或沐浴(Body-wash)组合物中。沐浴组合物也称为洗涤剂组合物。除臭剂、洗发水或洗手或沐浴组合物可包含其它常规组分，诸如表面活性剂、湿润剂、芳香剂、缓冲剂、皮肤舒缓剂、防腐剂、UV-A或UV-B防晒剂等。
优选地，该组合物包含溶剂，诸如乙醇、异丙醇、丙酮、乙二醇单乙醚、二甘醇单丁醚、二甘醇单乙醚及其混合物。
该组合物还可包含非-酚醇。该非-酚醇优选选自例如脂肪族醇、一元醇。最优选的非-酚醇为一元醇。优选地，具有直链或支链碳原子的醇优选含有1至16个，更优选2至10个，甚至更优选3至8个碳原子。可用于组合物中的醇的示例性实例包括甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、异丁醇、正丁醇、正戊醇、正己醇及其混合物。优选地，醇选自乙醇、异丙醇及其混合物。优选地，该组合物包含按重量计40％至95％，更优选45％至90％，甚至更优选50％至85％，还更优选55％至80％，还更优选60％至75％，并且最优选65至70％的非-酚醇。
有利地，该组合物可优选包含以下的成分，如维生素、抗-痤疮活性物质、抗-皱、抗-皮肤萎缩和皮肤修复活性物质、皮肤屏障修复活性物质、非-甾体化妆舒缓活性物质(non-steroidal cosmetic soothing actives)、人工美黑剂(artificial tanningagents)和促进剂、皮脂刺激剂、皮脂抑制剂、抗氧化剂、蛋白酶抑制剂、皮肤紧致剂、止痒成分、毛发生长抑制剂、5-α还原酶抑制剂、脱皮酶增强剂、抗-糖化剂及其混合物。
该组合物可优选包含粉末如白垩、滑石、填料土、高岭土、淀粉、树胶(gums)、胶体二氧化硅聚丙烯酸钠、四烷基和/或三烷基芳基铵蒙脱石、化学改性的硅酸铝镁、有机改性的蒙脱石黏土、水合硅酸铝、烟雾硅胶、羧乙烯基聚合物、羧甲基纤维素钠、乙二醇单硬脂酸酯及其混合物。
优选地，根据本发明的抗微生物组合物还包含表面活性剂。优选地，该表面活性剂选自阴离子、非离子、阳离子、两性表面活性剂及其混合物。更优选地，该表面活性剂选自阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂及其混合物。
优选的阴离子表面活性剂包括皂，烷基醚硫酸盐和磺酸盐，烷基硫酸盐和磺酸盐，烷基苯磺酸盐，烷基和二烷基磺基琥珀酸盐，C8-C20酰基羟乙基磺酸盐，酰基谷氨酸盐，C8-C20烷基醚磷酸盐及其混合物。
优选的非离子表面活性剂为C10-C20脂肪醇或酸性疏水物与2至100摩尔环氧乙烷或环氧30丙烷/摩尔疏水物缩合的那些；C2-C10烷基酚与2至20摩尔氧化烯缩合的那些；乙二醇的单脂肪酸酯和二脂肪酸酯；脂肪酸单甘油酯；脱水山梨糖醇，单-和二-C8-C20脂肪酸；嵌段共聚物(环氧乙烷/环氧丙烷)；聚氧乙烯脱水山梨糖醇及其混合物。烷基多糖苷和糖类脂肪酰胺(例如甲基葡糖酰胺)也是合适的非离子表面活性剂。
优选的阳离子表面活性剂包括溴化十六烷基三甲铵、苯扎卤化物，其也称为烷基二甲基苄基卤化铵。可用于组合物中的优选阳离子表面活性剂为苯扎氯铵，也称为烷基二甲基苄基氯化铵。
优选的两性表面活性剂包括酰胺、甜菜碱和氧化胺类型。特别地两性表面活性剂包括椰油二乙醇酰胺和椰油单乙醇酰胺，椰油酰胺丙基甜菜碱和椰油酰胺丙基氧化胺。可在组合物中用作表面活性剂的优选两性表面活性剂为椰油酰胺丙基甜菜碱。
当掺入组合物中时，按组合物的重量计，表面活性剂可以1％至80％，优选3％至60％，更优选5％至40％，甚至更优选7％至30％，进一步更优选9％至15％的量存在。
优选地，该组合物还包含化妆品或药学上可接受的基质。该化妆品或药学上可接受的基质优选为霜剂、洗剂、凝胶或乳剂的形式。水和/或醇也可用作化妆品或药学上可接受的基质。醇可为一元醇或多元醇。一元醇通常是短链的，这意味着其包含至多6个碳，并且实际上最通常为乙醇或有时为异丙醇。多元醇通常包含乙二醇或丙二醇，或者可以使用同系物诸如二甘醇。优选地，化妆品或药学上可接受的基质的存在量优选为按组合物重量计的10％至99.9％，更优选为50％至99％，甚至更优选为60％至85％，且进一步更优选为65％至80％。
在优选的实施方案中，该抗微生物组合物存在于口腔护理产品中。因此，根据本发明的组合物优选包括在口腔护理产品中，该口腔护理产品选自牙膏、洁齿剂、牙粉、局部口腔凝胶、口腔清洗剂、假牙产品、口腔喷雾剂、锭剂、口腔片剂、口香糖、浸渍的牙科用具、牙线及其组合。更优选地，该口腔护理产品为牙齿护理产品，诸如牙粉、牙膏、浸渍的牙科用具、牙线。
优选地，该组合物包含一种或多种口腔可接受的组分，诸如研磨剂(abrasives)、口腔可接受的活性物质(诸如Fluor)、牙齿增白剂、芳香剂、稳定剂、防腐剂以及口腔护理组合物的其它常规组分。
抗微生物组合物的用途
本发明人已发现根据本发明的抗微生物组合物具有改善的抗微生物活性。因此，该抗微生物组合物可用于美容(非治疗)或治疗应用。
a)治疗用途
在一方面，根据本发明的抗微生物组合物用于预防或治疗哺乳动物的疾病。如本文所用，该疾病是指由体表(皮肤、指甲、粘膜等)上的微生物引起的疾病。在一个实施方案中，该疾病为皮肤病，诸如选自包含以下的组：痤疮、湿疹或头皮、指甲或皮肤上的细菌或真菌感染，诸如由丙酸杆菌属(Propionibacteria spp.)、棒状杆菌属(Corynebacteriaspp.)、放线菌属(Actinobacteriales)、葡萄球菌属(Staphylococci spp.)(例如表皮葡萄球菌(S.epidermidis))、乳杆菌属(Lactobacilales)、梭菌目(Clostridiales)、变形菌门(proteobacteria)、黄杆菌目(Flavobacteriales)，拟杆菌目(Bacteriodales)，马拉色菌属(Malassezia yeasts)(例如糠秕马拉色菌(Malassezia furfur)和球型马拉色菌(Malassezia lobosa))等引起的那些。
优选地，该用途为预防或治疗口腔疾病。优选的口腔疾病选自龋齿、牙垢、牙菌斑、牙龈疾病及其组合，例如由放线菌属(Actinomyces spp)、链球菌属(Streptococcus spp)(诸如变形链球菌(S.mutans)和茸毛链球菌(S.sobrinus))、乳杆菌属(Lactobacillusssp)(诸如嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus))、诺卡尔菌属(Nocardia spp.)、嗜血菌属(Haemophilus spp)、噬二氧化碳细胞菌属(Capnocytophaga spp)、韦荣球菌属(Veillonella spp)、奈瑟球菌属(Neisseria)、梭菌属(Fusobacterium)诸如具核梭杆菌(F.nucleatum)、密螺旋体属(Treponema spp)、坦纳菌属(Tannerella ssp.)诸如福赛斯坦纳菌(T.forsythensis)、牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)、放线共生放线杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans)等引起的疾病。
在另一方面，本发明的抗微生物组合物用于去除哺乳动物对象中的口腔生物膜。
通常，包含抗微生物化合物的颗粒优选以组合物的重量计的0.05％至10％，更优选以组合物的重量计0.1％至10％，最优选0.2％至5％的量掺入用于美容用途的组合物中。黏土：抗微生物剂比为1：0.001至1：0.1，更优选1：0.01至1：0.05，最优选约1：0.018。优选地，根据本发明的用于治疗用途的抗微生物组合物包含治疗有效量的抗微生物化合物。
b)美容/非治疗用途
本发明提供了抗微生物组合物在体表诸如皮肤、牙齿、头皮、粘膜(牙龈)、舌头等上的美容用途。本发明人已发现对通常在所述体表上发现的并且可能损害身体外观(例如牙齿变黄)或体味，特别是口腔恶臭的微生物具有改善的抗微生物活性。优选地，该抗微生物组合物用于预防或治疗口腔中由微生物引起的口臭的美容用途。
因此，在另一方面，本发明涉及一种处理哺乳动物的皮肤或口腔的非治疗方法，该方法包括使哺乳动物的皮肤或口腔与根据本发明的抗微生物组合物接触的步骤。
在另一方面，本发明涉及本发明的抗微生物组合物用于在哺乳动物中减少体臭，优选口腔恶臭，和/或减少口腔生物膜形成和/或减少牙变色的用途。
包含抗微生物化合物的颗粒优选以组合物的重量计0.05％至10％，更优选以组合物的重量计0.1％至10％，最优选以组合物的重量计0.2％至5％的量掺入用于美容用途的组合物中。
实施例
实施例1：改性黏土颗粒的制备
为了制备根据本发明的包含抗微生物化合物的改性黏土颗粒，使用以下方法：
将5g的高岭石(Super shine 90，EICL)置于500ml的0.1N HCl(Merck)溶液中并超声处理30分钟。然后通过滴加NaOH(Merck)溶液将pH升高至9。向其中加入10g CPC，并将悬浮液在磁力搅拌器(Spinpot)上搅拌6小时，同时将溶液的温度保持在75-80℃。然后将悬浮液用水洗涤约10次以除去过量的CPC，并进行最终的乙醇(Les Alcools De Commerce)洗涤。然后将黏土在热风烘箱中干燥。
为了确定反应后CPC连接到黏土上，采用FTIR光谱法。所用仪器为Perkin Elmer仪器，Spectrum One FT-IR分光计。粉末(漫反射)技术用于该测量。用研杵和研钵将作为对照的黏土和本发明的反应的黏土与50％w/w KBr一起研磨，然后对这些粉末进行IR。将反应的黏土的红外光谱与纯黏土的红外光谱进行比较。反应的黏土在2926cm-1、2855cm-1、1487cm-1和1466cm-1处观察到新峰。2926cm-1和2855cm-1处的峰归因于CPC的烷基链的C-C拉伸，而1487cm-1和1466cm-1处的峰归因于CPC的环碳和氮。
实施例2：抗微生物活性
将根据本发明的组合物的抗微生物活性与仅包含含有抗微生物化合物的改性黏土颗粒(‘CPC’，如实施例1中制备)或仅包含双酚化合物(‘HM’，即，和厚朴酚和厚朴酚，各自纯度98％，来自World Way Biotech，中国)的组合物进行比较。根据以下方法测试组合物(表1)。
用添加有活性物质的牙膏基质制剂处理薄膜(pellicle)包被的HAP圆片2分钟，进行无菌水洗涤，并用唾液菌群进行攻击，然后温育过夜。在温育结束时，用菌斑显示染料(Plak-check，Vishal Dentocare PVT.LTD)对圆片进行染色。详细方法如下：
从5-6名志愿者收集清晨唾液并汇集。将汇集的唾液通过以4000g离心10分钟来沉淀，得到唾液薄膜(salivary pellicle)(上清液通过0.22μm过滤器过滤除菌，并在4℃储存)和唾液菌群(沉淀通过5ml的1XPBS(pH7.0)离心洗涤两次)。在含有2％蔗糖的超滤胰蛋白胨酵母提取物肉汤(营养培养基)中，将唾液菌群调至108Log CFU/ml(0.2OD620nm)。
用唾液薄膜包被各无菌HAP(将圆片水平放置在12孔板中)以允许在无菌HAP表面上形成初始薄膜。将薄膜包被的HAP圆片浸洗并用30％稀释的牙膏浆液(添加有活性物质)攻击2分钟。接触2分钟后，将处理后的HAP在5ml无菌水中连续浸洗3次。将处理后的HAP圆片用唾液菌群进行攻击，并于37℃厌氧温育22-24小时。
在22-24小时温育结束时，将圆片在无菌蒸馏水中浸洗三次。将冲洗过的圆片浸入菌斑显示溶液(含有赤藓红的Plak-Check，Vishal Dentocare Pvt Ltd)中5分钟。在5分钟结束时，将染色的圆片在5ml无菌蒸馏水中连续浸洗3次。将染色的圆片在25±3℃干燥1小时。干燥后，使用1ml 0.1N NaOH洗脱圆片上的染色剂。在OD540nm处读取洗脱液的吸光度。吸光度读数越高，圆片上形成的生物膜越多。结果描述于下表1中。
表1
| ％生物膜 | |
| 基础牙膏 | 100 |
| 0.33％HM | 97 |
| 0.5％CPC-黏土 | 89 |
| 0.33％HM+0.5％CPC-黏土 | 34 |
实施例3：恶臭减少
如实施例1所述制备具有不同浓度的抗微生物化合物的黏土溶液(溶液的浓度在下表2中给出)。唾液硫醇使用BDC-OH比色测定法[4,4′-双(二甲氨基)二苯甲醇]进行定量，其中蓝色BDC-OH在与硫醇基团反应时脱色。
从志愿者收集人唾液并汇集。向所有唾液样品中加入测试溶液并在振荡培养箱中在37℃温育24小时。离心后，通过将50μl上清液加入96孔板中的250μl BDC-OH溶液(TCIChemicals)中，96孔板用箔覆盖并在37℃温育1小时，分离上清液用于分析。还制备了BDC-OH标准溶液。
使用读板器在630nm处读取样品的OD。绘制标准品与测试样品产生的OD读数的校准曲线。使用校准曲线方程，根据OD读数计算测试孔中剩余的BDC-OH的量。结果如表2所示。
表2
| 剩余BDC-OH的量(mM) | |
| 水对照 | 0.0 |
| 0.005％CPC-黏土 | 0.64 |
| 0.005％HM | 4.78 |
| 0.005％CPC-黏土+0.005％HM | 8.18 |
Claims (13)
1.一种抗微生物组合物，其包含：
a)包含抗微生物化合物的改性黏土颗粒，所述改性黏土颗粒包含：
(i)一种不对称的1：1或2：1：1黏土颗粒，其包含交替的四面体片和八面体片，所述交替的四面体片和八面体片在一个外表面平面处终止于四面体片，而在另一外表面平面处终止于八面体片，以及
(ii)至少一种口腔可接受的抗微生物化合物，所述抗微生物化合物选自季铵材料，所述季铵材料选自西吡氯铵、氯化十六烷基三甲基铵、溴化十六烷基三甲铵、苯扎氯铵、苄索氯铵、西三溴胺、聚六亚甲基双胍盐酸盐；抗微生物醇；抗微生物有机酸/其盐；吡啶硫酮锌；酮康唑；吡罗克酮乙醇胺；或其组合，其中所述至少一种抗微生物化合物与所述黏土颗粒的外表面平面上的配位阳离子连接；以及
b)至少一种双酚化合物，其中所述双酚化合物为二烯丙基双酚化合物；
其中所述至少一种抗微生物化合物包含西吡氯铵。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种抗微生物化合物与所述八面体片的外表面上的配位阳离子连接。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中黏土颗粒：抗微生物化合物比为1：0.001至1：0.1。
4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述包含抗微生物化合物的改性黏土颗粒以所述组合物的重量的0.01-5wt.％的量存在。
5.根据权利要求1的组合物，其中所述至少一种双酚化合物选自2,4′-双酚、2,2′-双酚、3,3′-双酚、4,4′-双酚或其混合物。
6.根据权利要求1的组合物，其中所述二烯丙基双酚化合物为(5-3′-二烯丙基)双酚或(5-5′-二烯丙基)双酚。
7.根据权利要求6的组合物，其中所述双酚选自和厚朴酚或厚朴酚。
8.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物包含一种或多种药学上可接受的组分。
9.根据权利要求1的组合物，其中所述组合物包括在口腔护理产品中，所述口腔护理产品选自牙膏、洁齿剂、牙粉、局部口腔凝胶、口腔清洗剂、假牙产品、口腔喷雾剂、锭剂、口腔片剂、口香糖、浸渍的牙科用具、牙线及其组合。
10.根据权利要求1至9中任一项的抗微生物组合物在制备预防或治疗哺乳动物的疾病的药物中的用途，所述疾病选自包含以下的组：龋齿、牙垢、牙菌斑、牙龈疾病及其组合。
11.根据权利要求10所述的抗微生物组合物在制备预防或治疗哺乳动物的疾病的药物中的用途，其中所述用途用于去除哺乳动物对象中的口腔生物膜。
12.一种处理哺乳动物的皮肤和/或口腔的非治疗性方法，所述方法包括使所述哺乳动物的皮肤和/或口腔与根据权利要求1至9中任一项所述的抗微生物组合物接触的步骤。
13.根据权利要求1至9中任一项的抗微生物组合物在制备预防或治疗哺乳动物的疾病的药物中的用途，所述药物用于在所述哺乳动物中减少体臭，和/或减少口腔生物膜形成和/或减少牙变色。
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