CN113249248A - 一种暗红戈登氏菌、用途及生产色素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)、用途及生产色素的方法，涉及微生物及其应用技术领域。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.21239。本发明暗红戈登氏菌是从传统酿造郫县豆瓣中分离和筛选得到，具有发酵以生产类胡萝卜素的能力。该菌株的发现为替代动植物原料生产色素提供了一种新的微生物资源。

Description

一种暗红戈登氏菌、用途及生产色素的方法

技术领域

本发明涉及微生物及其应用技术领域，尤其是涉及一种暗红戈登氏菌(Gordoniarubripertincta)、用途及生产色素的方法。

背景技术

色素在日常生活中被广泛使用，按照其来源可分为合成色素和天然色素，但合成色素存在致癌和致毒等弊端，因此天然色素取代合成色素已成为一种必然的趋势。天然色素广泛存在于许多植物和微生物体内，但从植物中获得天然色素受到了产量低、生产成本高等因素的限制。而微生物发酵生产色素因其生产周期短、产量高、不受季节因素的限制，逐渐成为当前的研究热点。

类胡萝卜素是一类天然色素的总称，在天然色素研究领域中因其具有的独特多支链段和共轭双键结构，使其成为自然界中最重要的化合物之一。类胡萝卜素按照其链长和取代基的不同可分为胡萝卜素类和叶黄素类，并且其颜色随着共轭双键的增加而逐渐加深。它不仅具有良好的色泽还具有诸多的生理活性功能，如具有强抗氧化能力、能维持视功能和预防夜盲症，因此在食品、饲料、化妆品等领域广泛应用。类胡萝卜素主要存在于一些高等植物和微生物中，人体因不能自身合成而主要从日常膳食中摄取。目前能够合成类胡萝卜素的微生物主要为真菌、微藻和细菌等，但工业化生产类胡萝卜素的菌种非常有限，因此，从自然界中继续筛选高产类胡萝卜素的优良菌种资源具有较高的研究和开发价值。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的微生物菌株即暗红戈登氏菌(Gordoniarubripertincta)及其在生产色素中的用途，并提供一种生产色素的方法。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

在一个方面，本发明提供一种分离的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)菌株GH-1，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:21239；保藏时间为：2020年11月26日。

本发明从传统酿造郫县豆瓣中筛选到一株在GD培养基上产黄色素的革兰氏阳性菌株GH-1，菌落的形状为圆形，不透明，凸起有褶皱。在显微镜下观察，菌株为长杆状。通过16S rRNA分子鉴定该菌株为暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)GH-1。

利用紫外全波长扫描初步确定该橘黄色素为类胡萝卜素，进一步经过薄层层析(TLC)、硅胶柱层析对色素产物进行分离纯化，通过紫外-可见光谱扫描(UV-Vis)、傅里叶红外光谱扫描(FTIR)、高效液相色谱(HPLC)、核磁共振和高分辨质谱对纯化后色素结构进行鉴定，确定该色素属于类胡萝卜素。

在一个实施方案中，所述暗红戈登氏菌的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。

本发明涵盖上述保藏编号的暗红戈登氏菌菌株以及所述菌株的突变菌株。所述“菌株的突变菌株”是指与本发明的SEQ ID No.1所示的GH-1菌株16S rRNA同源性≥95，优选≥99的同源性的菌株。并且，所述“菌株的突变菌株”具有生产类胡萝卜素的性能。

本发明还提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂含有前述的暗红戈登氏菌菌株GH-1或所述暗红戈登氏菌菌株的培养物。所述微生物菌剂含有暗红戈登氏菌(Gordoniarubripertincta)菌株GH-1作为主要活性成分。

在具体的应用中，通常需要将所述菌株制备成菌剂的形式进行运输或使用。例如，可以将所述菌剂制备成组合物(纯培养物或混合培养物)的形式。进一步地，可以将所述组合物制成液体、固体粉末等形式，例如乳液或悬浮剂或颗粒剂。进一步地，所述组合物还可以包含一些微生物菌剂制备中常用的载体，例如固态载体或液态载体，具体地，例如膨润土、碳酸钙、沸石、淀粉；或者植物油、矿物油和水等。

在一个实施方案中，所述微生物菌剂可以为液体菌剂或固体菌剂。进一步地，所述微生物菌剂所含暗红戈登氏菌的总活菌数为0.5-2.5×10⁸cfu·mL^-1或0.5-2.5×10⁸cfu·g^-1。

在一些具体的实施方案中，所述微生物菌剂所含暗红戈登氏菌的总活菌数为10⁸cfu·mL^-1、1.5×10⁸cfu·mL^-1、2×10⁸cfu·mL^-1、或10⁸cfu·g^-1、1.5×10⁸cfu·g^-1、2×10⁸cfu·mL^-1。

在另一个方面，本发明还提供了前述暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)或前述微生物菌剂在生产类胡萝卜素中的用途。

在另一个方面，本发明还提供了一种生产色素的方法，所述方法包括将前述的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)接种到培养基中进行培养发酵以获得含有类胡萝卜素的培养物。

在一个实施方案中，所述方法采用的培养基为GD培养基；优选地，所述培养基的pH为6.5-10；更优选的，所述培养基的pH值为7-9。

在具体的实施方案中，GD培养基的组成为：蔗糖20g/L；硝酸钾4g/L；硫酸镁0.4g/L；硫酸亚铁0.015g/L；磷酸二氢钾2g/L；磷酸氢二钠3g/L；柠檬酸钠2g/L。

在一个实施方案中，所述接种量为培养基体积的6％-10％(v/v)，优选7-9％；所述发酵的时间为120-160h，优选125-155h，更优选140-144h。

在一个具体的实施方案中，所述培养基的pH为7；所述接种量为培养基体积的8％；所述发酵的时间为144h。

在一个实施方案中，所述培养基的装液量为60-70mL/250mL培养容器；最优的培养基装液量为60mL/250mL培养容器。

在本发明中，发明人通过实验发现，当接种量为培养基体积的6％-10％、发酵培养时间为144h、培养基pH为7、最优的培养基装液量为60mL(60/250mL)的情况下，该株暗红戈登氏菌的生物量较高，代谢产物的单位含量较高。该菌株的生物量以及类胡萝卜素产量可达到约7.24mg/L。

在一个实施方案中，所述方法中，所述胡萝卜素为玉米黄质。

在一个具体实施方案中，将所述暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)GH-1接入GD液体培养基中，在20-30℃的条件下，培养3d后得到种子液；将得到的种子液按照体积比8％(v/v)的接种量转接到马铃薯液体培养基中，在20-30℃，pH 7.0-9.0条件下静置培养140-144h得到发酵液，8000rpm离心10min，浸提，取上清，即为粗色素。将上清进行萃取、干燥得到类胡萝卜素。

在一个实施方案中，所述暗红戈登氏菌在生产类胡萝卜素中的应用方法的类胡萝卜素产量达到约7.24mg/L。菌株生长速度快、类胡萝卜素表达量高。本发明的菌株可直接用于制备类胡萝卜素，或食品化妆品色素添加剂中，也可用于制备抗氧化、免疫调节、抗癌、延缓衰老等相关产品中。

本申请提供的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)，菌株名为GH-1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏时间为：2020年11月26日，保藏编号CGMCCNO.21239。经保藏中心于2017年11月26日检测为存活菌株。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)菌株GH-1是发明人通过大量筛选工作，首次于郫县豆瓣中筛选得到的，该菌株具有生产色素(尤其类胡萝卜素)的能力。该菌株的发现为替代动植物原料生产色素提供了一种新的微生物资源。可以广泛地应用于色素生产相关的领域例如食品、化妆品等的生产制备中。

(2)本发明通过对暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)菌株GH-1培养，可以实现大规模发酵生产类胡萝卜素，适合于规模化生产和实际工程应用。

(3)本发明提供了一种利用暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)菌株GH-1生产类胡萝卜素的方法，用该菌株发酵进行生产，生产工艺简单且稳定性好。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明提供的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)GH-1在GD琼脂培养基上培养3d的生长、革兰氏染色(40倍)和电镜扫描图(50000倍)；

图2为本发明基于16S rRNA序列构建的系统发育树；

图3为纯化后色素的紫外-可见光谱扫描；

图4为纯化后色素的HPLC图；

图5为纯化后色素的FT-IR图；

图6为纯化后色素的NMR图；

图7为纯化后色素的高分辨质谱图；

图8为不同培养条件对菌株产类胡萝卜素影响(a:培养时间；b:接种量；c:培养基pH；d:装液量)；

图9为菌株所产类胡萝卜素对三种自由基的清除能力；

图10为发酵色素菌体沉淀、色素粗提液及色素粗提物。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：产类胡萝卜素暗红戈登氏菌(GH-1)的分离与鉴定

(1)产类胡萝卜素菌株的分离纯化：取传统酿造过程中的郫县豆瓣(采集地为成都市郫都区)2g于100mL GD培养基(GD培养基：蔗糖20g/L；硝酸钾4g/L；硫酸镁0.4g/L；硫酸亚铁0.015g/L；磷酸二氢钾2g/L；磷酸氢二钠3g/L；柠檬酸钠2g/L)中，光照，30℃富集培养5d。后取200μL菌液稀释涂布于GD固体培养基，30℃培养3d。挑取产色素的单菌落于GD固体培养基中划线纯化(图1中a图)，30℃培养3d后挑取单菌落富集培养，于-50℃进行甘油保藏。

(2)产类胡萝卜素菌株的鉴定：利用16S rRNA对菌株GH-1进行分子生物学鉴定。选择细菌鉴定通用引物1492R和EU27F进行PCR扩增。最后将提取出的DNA送至成都擎科梓熙生物技术有限公司测序，将测序结果在NCBI的GenBank数据库进行比对分析。

菌株GH-1的16S rRNA如以下SEQ ID No.1所示：

TCCGTACCCTTCGACGTCCCTCCCCACAAGGGGTTAGGCCACCGGCTTCGGGTGTTACCGACTTTCATGACGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCAGCGTTGCTGATCTGCGATTACTAGCGACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGACCCCAATCCGAACTGAGACTGGCTTTAAGGGATTCGCTCCACCTCACGGTATCGCAGCCCTCTGTACCAGCCATTGTAGCATGTGTGAAGCCCTGGACATAAGGGGCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGAGTTGACCCCGGCAGTCTCCTGCAAGTCCCCGGCATAACCCGCTGGCAATACAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCACCACCTGTACACCAACCACAAGGGAACATGTATCTCTACATGCGTCTGGTGTATGTCAAACCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCATCGAATTAATCCACATGCTCCGCCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGGGTACTTAATGCGTTAGCTACGGCACGGAACTCGTGAAATGAGCCCCACACCTAGTACCCACCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTACCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACTACCCAGAGACCCGCCTTCGCCACCGGTGTTCCTCCTGATATCTGCGCATTTCACCGCTACACCAGGAATTCCAGTCTCCCCTGTAGTACTCAAGTCTGCCCGTATCGCCTGCACGCCTACAATTGAGTTGCAGAATTTCACAGACGACGCGACAAACCGCCTACGAGCTCTTTACGCCCAGTAATTCCGGACAACGCTCGCACCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTGGCCGGTGCTTCTTCTCCAGGTACCGTCACTTGCGCTTCGTCCCTGGTGAAAGAGGTTTACAACCCGAAGGCCGTCATCCCTCACGCGGCGTCGCTGCATCAGGCTTGCGCCCATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACCCGTCGTCGCCTTGGTAGGCCATTACCCCACCAACAAGCTGATAGGCCGCGGGCCCATCCTGAACCGCAAAAGCTTTCCACCCCAGAGCATGCACTCCAAGGTCATATCCGGTATTAGACCCAGTTTCCCAGGCTTATCCCAAAGTTCAGGGCAGATCACCCACGTGTTACTCACCCGTTCGCCACTCGAGTACCCAGCAAGCTGGGCCTTTCCGTCGACTGCAGGTAAGCACCCGCATCC。

上述序列经NCBI比对，构建系统发育树(图2)，确定菌株GH-1为暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)。且筛选获得的暗红戈登氏菌Gordonia rubripertincta GH-1已于2020年11月26日在中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏。

实施例2：菌株GH-1的菌落形态和生理生化特征

本发明分离的菌株GH-1(Gordonia rubripertincta)在GD琼脂培养基上菌落呈黄色，形状为圆形，不透明，凸起有褶皱。在显微镜下观察，菌株为长杆状。经形态学鉴定和16SrRNA序列发育树分析，该菌株被命名为暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)GH-1。

本发明分离的菌株GH-1的生理生化结果如下表1所示：

表1菌株GH-1生理生化结果

注：生理生化试验结果(“+”表示阳性，“-”表示阴性)

实施例3：菌株GH-1所产色素的鉴定过程

(1)菌株GH-1接入GD培养基，30℃培养120h。取菌液于冷冻离心机中，8000rpm离心10min。用无菌生理盐水洗涤菌体两次后加入丙酮试剂超声破碎20min，离心，浸提，取上清，即为粗色素。

(2)粗色素的纯化采用硅胶柱层析进行，采用石油醚湿法装柱，选择石油醚：丙酮＝4：1；石油醚：丙酮＝1：1；石油醚：丙酮＝1：4进行梯度洗脱。并采用薄层层析和高效液相色谱检验分离效果。TLC条件：展开剂为石油醚：丙酮＝1：4。HPLC的条件：C18色谱柱，流动相A为纯甲醇，流动相B为水，按照纯甲醇：水＝95：5(V/V)等度洗脱；检测波长473nm；流速：1mL/min；进样量：10μL。

图10示出了发酵色素菌体沉淀、色素提取液及色素粗提物。

(3)纯化后色素的鉴定：分别将纯化后的色素进行紫外-可见光谱扫描、纯化色素的HPLC和薄层层析分析、傅里叶红外光谱扫描、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱的测定。

纯化色素的UV-Vis分析：如图3所示，纯化后的色素在紫外光谱扫描中出现类胡萝卜素典型的三指峰，且色素与浓硫酸反应呈蓝绿色，表明该菌株所产色素为类胡萝卜素类。

纯化色素的HPLC、薄层层析分析：由图4可知，经柱层析纯化后的色素仅存在少量杂质，杂质出现的原因可能是色素不稳定出现的降解产物。

纯化色素的FT-IR分析：由图5可知，3325cm^-1处的吸收峰为-OH的伸缩振动峰，2946、2834cm^-1为-CH₃、-CH₂、-CH的对称或反对称伸缩振动，1655cm^-1处的吸收峰为C＝C伸缩振动，1449、1371cm^-1为饱和C-H的面外弯曲振动，1019cm^-1处的吸收峰为C-O伸缩振动。故该物质中含有多个CH₃、-CH₂、-CH、-OH以及-OH、C＝C等结构特征。

纯化色素的NMR分析：如图6中a所示，黄色素的¹H-NMR图谱分析表明，化学位移δ在0.77-2.0之间有多重峰出现，是物质结构中-CH₃、-CH₂、-CH上的H的特征峰，1.22左右的化学位移δ为斜二甲基中H的特征峰，1.76左右的化学位移δ为杂环上H的特征峰4.52左右的化学位移δ为与羟基相连C上H的特征峰，化学位移δ在5.03-7.70之间有多重峰出现，为C＝C上H的特征峰。黄色素的¹³C-NMR图谱分析如图6中b所示，化学位移δ在61.15-77.67之间的多重峰归因于与羟基相连的C的特征峰，130左右的化学位移δ为C＝C上C的特征峰。

纯化色素的高分辨质谱分析：由图7可知，纯化色素的相对分子质量为568，分子式为C₄₀H₅₆O₂，结合红外、核磁共振分析，得出该黄色素为玉米黄质。

实施例4：菌株GH-1产类胡萝卜素最适培养条件

实验以GD培养基(GD培养基：蔗糖20g/L；硝酸钾4g/L；硫酸镁0.4g/L；硫酸亚铁0.015g/L；磷酸二氢钾2g/L；磷酸氢二钠3g/L；柠檬酸钠2g/L)为基础，设置不同的培养时间(24h、48h、72h、96h、120h、144h和168h)来培养菌种。此外，还设置不同的接种量、培养基pH以及装液量等培养条件，在不同的培养条件下对菌种进行培养，从而考察不同培养条件对菌种生长以及主要产物含量的影响，进而选出菌种最佳的培养条件。

培养时间：不同培养时间对菌种生长和色素产量的影响如图8中a图所示(培养时间不同，接种量均为6％(v/v)，pH为7)。从图8中a图可以看出，随着培养时间的增加，菌株色素产量逐渐增加，当培养时间达到144h时，菌株色素产量最高。继续培养，色素产量开始下降，其原因可能是因为培养基营养的消耗，菌体的生长受到抑制，从而使色素合成受到影响

接种量：实验设置1％、2％、4％、6％、8％、10％以及12％(v/v)七种接种量，结果如图8中b图所示(培养时间为144h，pH为7)。随着接种量的增加，菌株GH-1的色素产量逐渐增加。当接种量达到8％时，菌株GH-1色素产量达到最大。继续增大接种量，菌株色素产量开始减少。其原因可能是因为接种量过大导致培养基溶氧不足从而影响菌体的生长以及产物的生成。

pH：实验设置pH 4-10，从而考察培养基pH对菌株的生长以及色素产量的影响，结果如图8中c所示(接种量为8％(v/v)，培养时间为144h)。菌株GH-1在酸性环境下不适合生长，但随着pH的升高，菌株的色素产量逐渐增加，当pH为7时，菌株GH-1的色素产量达到最大。继续升高pH，菌株色素产量变化不大，表明菌株GH-1能适应偏碱环境。

装液量：实验设置不同的装液量(50、60、70、80、90、100、110mL/250mL)来考察装液量对菌株生长以及色素产量的影响，结果如图8中d所示。最佳的装液量为60mL，此时菌株GH-1的色素产量达到最大。继续增加装液量，菌株色素产量变化不大。

实施例5.提取的类胡萝卜素的性能分析(清除自由基能力)

菌株GH-1类胡萝卜素对三种常见自由基的清除能力如图9所示。DPPH自由基的清除能力结果(图9中a图)表明，随色素浓度升高，其对DPPH自由基的清除能力不断增强。当色素浓度达到200μg/mL时，其对DPPH自由基的清除率为67.0％，表明该色素具有良好的DPPH自由基清除能力。

羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力结果如图9中b图和c图所示。在所有浓度下(40、80、120、160、200μg/mL)，色素对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用均随着色素浓度的升高而逐渐增强。当色素浓度为200μg/mL时，羟基自由基的清除率最大为54.3％，与40μg/mL Vc的清除能力接近；超氧阴离子自由基的清除率为44.1％，表明该色素具有一定的羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力，综上显示该色素分子可作为一种潜在的抗氧化剂。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

序列表

<110> 西华大学

<120> 一种暗红戈登氏菌、用途及生产色素的方法

<130> 案号

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1418

<212> DNA

<213> 暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertinctaGH-1 16S rRNA)

<400> 1

tccgtaccct tcgacgtccc tccccacaag gggttaggcc accggcttcg ggtgttaccg 60

actttcatga cgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga acgtattcac cgcagcgttg 120

ctgatctgcg attactagcg actccgactt catggggtcg agttgcagac cccaatccga 180

actgagactg gctttaaggg attcgctcca cctcacggta tcgcagccct ctgtaccagc 240

cattgtagca tgtgtgaagc cctggacata aggggcatga tgacttgacg tcatccccac 300

cttcctccga gttgaccccg gcagtctcct gcaagtcccc ggcataaccc gctggcaata 360

caggacaagg gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg 420

acagccatgc accacctgta caccaaccac aagggaacat gtatctctac atgcgtctgg 480

tgtatgtcaa acccaggtaa ggttcttcgc gttgcatcga attaatccac atgctccgcc 540

gcttgtgcgg gcccccgtca attcctttga gttttagcct tgcggccgta ctccccaggc 600

ggggtactta atgcgttagc tacggcacgg aactcgtgaa atgagcccca cacctagtac 660

ccaccgttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg ttcgctaccc acgctttcgc 720

tcctcagcgt cagttactac ccagagaccc gccttcgcca ccggtgttcc tcctgatatc 780

tgcgcatttc accgctacac caggaattcc agtctcccct gtagtactca agtctgcccg 840

tatcgcctgc acgcctacaa ttgagttgca gaatttcaca gacgacgcga caaaccgcct 900

acgagctctt tacgcccagt aattccggac aacgctcgca ccctacgtat taccgcggct 960

gctggcacgt agttggccgg tgcttcttct ccaggtaccg tcacttgcgc ttcgtccctg 1020

gtgaaagagg tttacaaccc gaaggccgtc atccctcacg cggcgtcgct gcatcaggct 1080

tgcgcccatt gtgcaatatt ccccactgct gcctcccgta ggagtctggg ccgtgtctca 1140

gtcccagtgt ggccgatcac cctctcaggt cggctacccg tcgtcgcctt ggtaggccat 1200

taccccacca acaagctgat aggccgcggg cccatcctga accgcaaaag ctttccaccc 1260

cagagcatgc actccaaggt catatccggt attagaccca gtttcccagg cttatcccaa 1320

agttcagggc agatcaccca cgtgttactc acccgttcgc cactcgagta cccagcaagc 1380

tgggcctttc cgtcgactgc aggtaagcac ccgcatcc 1418

Claims (10)

1.一种暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)，其特征在于，所述暗红戈登氏菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No.21239。

2.根据权利要求1所述的暗红戈登氏菌，其特征在于，所述暗红戈登氏菌的16S rDNA序列为SEQ ID No.1所示序列。

3.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有权利要求1或权利要求2所述的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)或所述暗红戈登氏菌的培养物。

4.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为固体菌剂；所述微生物菌剂中所含所述暗红戈登氏菌的总活菌数为0.5-2.5×10⁸cfu·g^-1。

5.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体菌剂；所述微生物菌剂中所含所述暗红戈登氏菌的总活菌数为0.5-2.5×10⁸cfu·mL^-1。

6.根据权利要求1或权利要求2所述的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)或根据权利要求3-5任一项所述的微生物菌剂在生产类胡萝卜素中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述类胡萝卜素主要为玉米黄质。

8.一种生产色素的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1所述的暗红戈登氏菌(Gordonia rubripertincta)接种到培养基中进行培养发酵以获得含有类胡萝卜素的培养物。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法采用的培养基为GD培养基；优选地，所述培养基的pH为6.5-7.5；更优选的，所述培养基的pH值为7-9。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的方法，其特征在于，所述接种量为培养基体积的6％-10％(v/v)，优选7-9％(v/v)；所述发酵的时间为120-160h，优选125-155h，更优选140-144h。

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