CN113244162B - 一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用 - Google Patents

一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用。所述可溶性微针包括基座和位于基座上的针体,所述针体内包埋有右旋糖酐。本发明所提供到的可溶性微针具有较好的抗炎效果。

Description

一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品 中的应用
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用。
背景技术
精准医疗是以个体化医疗为基础,运用基因组学、蛋白质组学和大数据分析等技术,实现对疾病个性化、精准化预防诊疗。随着精准医疗在国家号召下的快速发展,药物设计进入“精准”靶向药物分子设计时代。精准药物是实现精准医疗的物质基础,是精准医疗的本质体现,有望从根本上防治疾病。
皮肤为多种多样的微生物如细菌、真菌、病毒等提供定植场所,它们在皮肤各个部位共同生存,参与构成皮肤表面多样性的生态系统,这些紧密定植的复杂微生物群体被称为皮肤微生物群组。皮肤表面菌群的改变或者宿主免疫反应异常就会造成皮肤微生物菌群失衡,引起过度的炎症反应,导致一些非感染性皮肤病,如特应性皮炎、痤疮、湿疹等的发生发展。其中,金黄色葡萄球菌的定植影响最大,其通过破坏皮肤屏障、活化角质形成细胞及皮肤内的免疫细胞诱导炎症反应。
右旋糖酐是主链含大于50%的α-(1,6)糖苷键,支链可为α-(1,2)、α-(1,3)或α-(1,4)糖苷键链的多糖/寡糖。低分子量右旋糖酐因其分子尺寸小,可以自由进出免疫突触、表皮细胞等,具有益生元活性、免疫活性、抗氧化性等多种生物学活性,成为目前研究的热点。中国原创、国际首个靶向脑-肠轴的阿尔茨海默病治疗新药甘露特钠,代号GV-971的主要活性成分甘露寡糖二酸就是从海藻中提取的寡糖类分子,其药理学机制就是基于其益生元的活性改善菌群微生态。基于此,右旋糖酐等具有重要的益生元功效的寡糖成为改善皮肤微生态的关键原料,成为研究和使用的热点。因此,本发明提供了一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用。
发明内容
发明目的:本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种可溶性微针。
本发明还要解决的技术问题是提供上述可溶性微针的制备方法。
本发明进一步要解决的技术问题是提供上述可溶性微针在制备调节皮肤微生态产品中的应用。
为了解决上述技术问题,本发明公开了一种可溶性微针,其包括基座和位于基座上的针体。
其中,所述针体内包埋有右旋糖酐,所述右旋糖酐可以有效提高表皮葡萄糖菌的生长能力。
其中,所述右旋糖酐的重均分子量为6000Da以内;优选地,所述右旋糖酐的重均分子量为500-5000Da;进一步优选地,所述右旋糖酐的重均分子量为500-1000Da。
其中,所述右旋糖酐中α-1,6糖苷键占右旋糖酐中所有糖苷键的95%以上。
其中,所述右旋糖酐占可溶性微针总质量的10%-22%;优选地,所述右旋糖酐占可溶性微针总质量的16%。
其中,所述微针针体的长度为200-290μm;优选地,所述微针针体的长度为250-280μm。
其中,本发明对所述微针基座的大小没有具体的要求。
其中,所述基座和针体的成分均为透明质酸;其中,所述微针仅含有透明质酸和右旋糖酐,两个组分之间不发生化学反应。
其中,所述可溶性微针的应用方法为将可溶性微针需要垂直按压,使微针刺入皮肤角质层,从而可溶性微针将活性成分靶向到皮肤角质层,终端产品可广泛应用到调节皮肤微生态产品中。
其中,刺入皮肤角质层后保持30-120min;优选地,刺入皮肤角质层后保持45-60min。
为了解决上述第二个技术问题,本发明公开了上述可溶性微针的制备方法,将右旋糖酐、透明质酸和水的混合溶液置于模具中,在60℃以下干燥,即得可溶性微针。
其中,所述右旋糖酐占右旋糖酐、透明质酸和水总质量的0.5%-5%;优选地,所述右旋糖酐占右旋糖酐、透明质酸和水总质量的1%-4.5%;进一步优选地,所述右旋糖酐占右旋糖酐、透明质酸和水总质量的2%-3.5%。
其中,所述右旋糖酐与透明质酸的质量比为1:2-8;优选地,所述右旋糖酐与透明质酸的质量比为1:4-6;进一步;优选地,所述右旋糖酐与透明质酸的质量比为1:5。
为了解决上述第三个技术问题,本发明公开了上述可溶性微针在制备调节皮肤微生态产品中的应用。
其中,所述调节皮肤微生态产品为抗炎症性皮肤病产品;优选地,所述炎症性皮肤病为由金黄色葡萄球菌丰度异常导致的皮肤病,包括但不限于特应性皮炎、痤疮、湿疹等;优选地,所述产品为外用制剂。
其中,所述调节皮肤微生态产品为预防性化妆品。
有益效果:与现有技术相比,本发明具有如下优势:
(1)本发明以右旋糖酐为活性成分,并通过选择不同重均分子量的右旋糖酐作为活性成分,考察其对皮肤有益菌表皮葡萄球菌的促进作用,及其对有害菌金黄色葡萄球菌的抑制作用。进而考察不同比例右旋糖酐添加量、不同长度可溶性微针和最佳的使用时间。最终确定了一种基于皮肤微生态调节改善炎症性皮肤病的关键原料和使用方法,具有显著的应用价值和市场前景。
(2)本发明所提供的可溶性微针具有较好的抗炎效果。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明,本发明的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。
图1为可溶性微针电镜图片。
图2为实施例1添加1000Da的右旋糖酐对于表皮葡萄球菌生长的促进作用试验。
具体实施方式
下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
下述实施例中,所述右旋糖酐中α-1,6糖苷键占右旋糖酐中所有糖苷键的96%。
实施例1:考察右旋糖酐对于表皮葡萄球菌生长的促进作用
试验组:采用胰蛋白胨大豆肉汤固体培养基(TSB),接入质量比2%的重均分子量为1000Da的右旋糖酐,平板接种后在含有体积比5%二氧化碳的培养箱中培养48h。
对照组:与试验组的区别在于不接入右旋糖酐。
结果如图2(左图未添加右旋糖酐,右图添加了2%的右旋糖酐)所示,添加了右旋糖酐的平板上菌株的单菌落数量远高于未添加的对照组。
实施例2:考察右旋糖酐的分子量对于表皮葡萄球菌生长的促进作用和金黄色葡萄球菌的抑制作用
采用胰蛋白胨大豆肉汤液体培养基(TSB),接入质量比2%的右旋糖酐(重均分子量为分别为500Da,1000Da,2000Da,3000Da,4000Da和5000Da),摇瓶分别接种两种皮肤常见细菌(表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌)后在含有体积比5%二氧化碳的培养箱中培养48h。
同时,以不添加右旋糖酐的为对照空白样品。
结果如表1所示,相比于未添加右旋糖酐的空白样品,添加右旋糖酐后,表皮葡萄球菌的生长均有不同程度的提高,且对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。其中分子量500Da和1000Da的右旋糖酐对于表皮葡萄球菌生长的促进作用最强,同时对金黄色葡萄球菌抑制作用最大。
表1培养前后皮肤微生物计数比较(cfu/ml)
Figure BDA0003080284340000041
实施例3:考察添加不同含量右旋糖酐对于表皮葡萄球菌生长的促进作用和金黄色葡萄球菌的抑制作用
采用胰蛋白胨大豆肉汤液体培养基(TSB),接入不同量的分子量为1000Da的右旋糖酐,摇瓶接种两种皮肤常见细菌(表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌)后在含有体积比5%二氧化碳的培养箱中培养48h。
同时,以不添加右旋糖酐的为对照空白样品。
结果如表2所示,相比于未添加右旋糖酐的空白样品,按照质量比0.5%-5%的比例添加了1000Da的右旋糖酐后,表皮葡萄球菌的生长均有不同程度的提高,且对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。其中按照2%-3%的比例添加右旋糖酐对于表皮葡萄球菌生长的促进作用最强,同时对金黄色葡萄球菌抑制作用最大。
表2培养前后皮肤微生物计数比较(cfu/ml)
Figure BDA0003080284340000051
实施例4:考察不同长度的微针对特应性皮炎老鼠的辅助疗效
(1)微针的制备:按照质量比2%的1000Da右旋糖酐和质量比10%的透明质酸配置含有右旋糖酐和透明质酸的混合水溶液,通过模具制备不同长度的微针(针体长度为200μm,220μm,250μm,280μm),微针制备过程控制温度在55~60℃进行干燥成型。
(2)将30只特应性皮炎小鼠分为5组,即特应性皮炎空白组(A组)、短、中、长测试组(B1组、B2组、B3组和B4组,采用长度分别为200μm,220μm,250μm,280μm的微针治疗,每次微针使用时需垂直按压进入表皮,使用时间控制在2小时),每组6只,均规范饲养7天。采用酶联免疫吸附法检测各组小鼠免疫功能指标(IFN-γ,IL-4,IL-5,IgE)水平,结果如表3所示。结果表明280μm的微针治疗具有最佳的改善免疫指标效果,对皮炎的辅助治疗效果最优。
表3各组小鼠免疫指标检测结果(X±s,pg/mL,n=6)
组别 IFN-γ IL-4 IL-5 IgE
A组 14.2±2.7 36.6±3.7 51.3±2.3 160±48.3
B1组 17.3±2.8 28.5±2.9 42.7±1.4 137.6±47.9
B2组 18.5±2.7 29.7±2.6 43.9±2.3 138.8±43.6
B3组 22.6±3.3 20.5±1.2 29.3±1.7 74.8±23.7
B4组 24.8±3.1 15.3±3.7 25.8±4.4 60.1±15.5
本发明提供了一种可溶性微针及其制备方法和在制备调节皮肤微生态产品中的应用的思路及方法,具体实现该技术方案的方法和途径很多,以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

Claims (8)

1.一种可溶性微针在制备调节皮肤微生态产品中的应用,其特征在于,包括基座和位于基座上的针体,所述针体内包埋有右旋糖酐;所述右旋糖酐的重均分子量为6000Da以内;所述调节皮肤微生态为促进表皮葡萄球菌生长,抑制金黄色葡萄球菌。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述右旋糖酐中α-1,6糖苷键占右旋糖酐中所有糖苷键的95%以上。
3.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述右旋糖酐占可溶性微针微针总质量的10%-22%。
4.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述微针针体的长度为200-290μm。
5.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述基座和针体的成分均为透明质酸。
6.权利要求1-5中任意一项所述应用,其特征在于,所述可溶性微针的制备方法为将右旋糖酐、透明质酸和水的混合溶液置于模具中,在60℃以下干燥,即得可溶性微针。
7.根据权利要求6所述应用,其特征在于,所述右旋糖酐占右旋糖酐、透明质酸和水总质量的0.5%-5%。
8.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述调节皮肤微生态产品为抗炎症性皮肤病产品或预防性化妆品。
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