CN113209147A - 降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法，包括如下步骤：将含大三果鞣质成分的上清液经大孔树脂柱动态吸附、冲洗、洗脱，然后将所得洗脱液干燥，得到大三果鞣质部位；所述上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比为2～4:2，大孔树脂柱的径高比为1:7～9，动态吸附的速度为2～4BV/h。其中大孔树脂富集纯化时上样液浓度及其上样量，冲洗溶剂及其用量是本方法的关键技术。本发明可以改善大三果鞣质成分防泄漏效果，提高大三果鞣质成分转移率。

Description

降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法
技术领域
本发明涉及一种降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法。采用控制泄漏总量确定大孔树脂上样液浓度及其上样量，冲洗溶剂及其用量，用以改善大三果鞣质成分在经大孔树脂纯化过程中转移率低的问题。
背景技术
大三果是由诃子(Terminalia chebula Retz)、毛诃子(Terminalia bellirica(Gaertn.)Roxb)和余甘子(Phyllanthus emblica Linn.)三味藏药组成的混合物，由于三味药常配伍使用，或以它们为主药配伍为三果汤散、三果汤等剂型，所以称为大三果。临床应用研究表明，大三果具有清除自由基、抗氧化、抗炎、调节免疫、刺激食欲、止痛、抗菌、抗诱变、愈创、抗肿瘤、抗应激、降血糖、保肝、化学防护、防辐射和促进化疗效果等作用。化学成分研究显示，大三果主要含有鞣质类、酚酸类、三萜酸类及黄酮类等化合物，目前研究表明，大三果的鞣质类成分具有良好的抗癌活性，但目前针对大三果鞣质成分的富集方法研究较少。
CN109876031A公开了一种从余甘子药材中制备鞣质的方法，首先将余甘子鞣质提取液浓缩至浓度相当于0.1～0.3g生药/ml的药液，离心或过滤，得上清液；然后将上清液经大孔吸附树脂进行动态吸附，再用乙醇水梯度洗脱；将洗脱液减压干燥，得余甘子的鞣质。该方法仅对余甘子进行鞣质部位的富集，并不适用于大三果鞣质的提取与纯化。CN109453212A公开了一种具有抗癌作用的毛诃子提取物及其有效部位制备方法，该方法采用含水有机溶剂从毛诃子中得到具有抗癌活性成分的提取物，然后使用大孔吸附树脂对抗癌活性成分进行富集。该方法仅对毛诃子的抗癌活性成分进行富集，并不适用于大三果鞣质的提取与纯化。且上述两种方法均未考察鞣质成分在纯化过程中的泄露率，不适于工业化生产。
发明内容
鉴于此，本发明的目的在于提供一种降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法，关键在大孔树脂上样和冲洗除杂步骤，从而满足工业化生产需求。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法，包括如下步骤：
将含大三果鞣质成分的上清液经大孔树脂柱动态吸附、冲洗、洗脱，然后将所得洗脱液干燥，得到大三果鞣质部位；
其中，所述上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比为2～4:2，大孔树脂柱的径高比为1:7～9，动态吸附的速度为2～4BV/h。
根据本发明的制备方法，优选地，所述大孔树脂柱是由非极性树脂、中极性树脂或氢键吸附型树脂形成的树脂柱。
根据本发明的制备方法，优选地，所述大孔树脂柱为HPD-400型树脂或HPD-100型大孔树脂形成的树脂柱。
根据本发明的制备方法，优选地，冲洗过程中，所用冲洗溶剂为水或5vol％～13vol％的乙醇水溶液，冲洗溶剂用量为1.5～2.5BV，冲洗速度为2～6BV/h。
根据本发明的制备方法，优选地，冲洗溶剂用量为1.8～2.2BV，冲洗速度为2.5～3.5BV/h。
根据本发明的制备方法，优选地，洗脱过程中，所用洗脱溶剂为60vol％～80vol％的乙醇水溶液，洗脱溶剂用量为4.5～5.5BV，洗脱速度为3.5～7BV/h。
根据本发明的制备方法，优选地，洗脱溶剂用量为4.8～5.2BV，洗脱速度为5.5～6.5BV/h。
根据本发明的制备方法，优选地，所述含大三果鞣质成分的上清液采用如下方法制得：将大三果药材采用50vol％～70vol％的乙醇水溶液浸泡提取1～5次得到提取液，将提取液浓缩得到浓缩液，然后经离心或过滤，得到含大三果鞣质成分的上清液；其中，每毫升浓缩液含生药0.1～0.2g。
根据本发明的制备方法，优选地，每次浸泡提取6～12h，每次浸泡提取的温度均为45～55℃，大三果药材与乙醇水溶液的体积比为1:8～12。
根据本发明的制备方法，优选地，所述大三果药材是诃子、毛诃子和余甘子按质量比1～2:1～2:1～2组成的混合物。
本发明的方法降低了大三果鞣质成分泄露率，且提高其转移率，这样有助于降低生产成本、满足工业化生产需求。根据本发明优选的技术方案，本发明的方法可以使得使大三果鞣质成分的提取率达90％以上。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
在本发明中，BV表示柱体积。
本发明的降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法包括大三果鞣质的纯化步骤，任选地包括大三果鞣质的提取步骤。大三果鞣质的纯化步骤中可以包括对大孔树脂柱的活化步骤，该活化步骤与大三果鞣质提取步骤的先后顺序并没有特别限制。下面进行详细阐述。
＜提取步骤＞
将大三果药材采用50vol％～70vol％的乙醇水溶液浸泡提取1～5次得到提取液，将提取液浓缩得到浓缩液(每ml浓缩液含生药0.1～0.2g)；然后将浓缩液离心或过滤，得到含大三果鞣质成分的上清液。
本发明中，大三果药材可以是诃子、毛诃子和余甘子按质量比1～2:1～2:1～2组成的混合物。优选地，大三果药材是将诃子、毛诃子和余甘子按质量比1:1:1混合、粉碎制得的粒径为5～20目的药粉混合物。实验结果表明，与单味药及其他质量比组成的大三果药材相比，诃子、毛诃子和余甘子质量比为1:1:1时，大三果药材提取物具有更高的体外抗肿瘤活性。更优选地，大三果药材是将诃子、毛诃子和余甘子按质量比1:1:1混合、粉碎制得的粒径为5～10目的药粉混合物。选择上述粒径范围，既可以保证大三果鞣质成分的提取率在90％以上，同时可以防止粒径过小，影响生产效率。
本发明中，提取方式优选为乙醇水溶液浸泡提取。采用乙醇水溶液浸泡法可防止有效成分被破坏。此外，该方法简单而且提取率高，有助于降低生产成本。
根据本发明的一些实施方式，乙醇水溶液的浓度可以为50vol％～70vol％，优选为60vol％～70vol％，更优选为65vol％～70vol％。大三果药材与乙醇水溶液的体积比可以为1:8～12，优选为1:9～10。在考虑生产成本的前提下，采用70vol％的乙醇水溶液进行提取，控制大三果药材与乙醇水溶液的体积比为1:10时，提取率较高，生产成本最低。提取次数可以为1～5次，优选为1～3次，更优选为2～3次。每次提取时间为6～12h，优选为6～10h，更优选为6h。当提取时间为6h，提取次数为3次时，既可以达到较高的提取率，同时也可以缩短生产时间，提高生产效率。提取温度可以为45～55℃，优选为48～53℃，更优选为50～51℃，在该温度下进行提取，提取率较高。
＜纯化步骤＞
将上清液经大孔树脂柱动态吸附、冲洗、洗脱，然后将所得洗脱液干燥，得大三果鞣质部位。
本发明发现，相较于传统的采用常规泄露曲线和泄露拐点确定纯化步骤的工艺参数，通过控制泄露率确定纯化步骤的工艺参数可有效改善大三果鞣质成分在经大孔树脂纯化过程中转移率低的问题。
上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比可以为2～4:2；所述上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比优选为2～3:2。大孔树脂柱的径高比可以为1:7～9；大孔树脂柱的径高比优选为1:7～8。动态吸附的速度为可以2～4BV/h；大孔树脂柱的径高比优选为1:7；动态吸附的速度优选为2～3BV/h。这样不仅防泄漏效果良好，而且可以保证大三果鞣质较高的吸附-解吸附率及转移率。
根据本发明的一些优选实施方式，所述上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比优选为3:2；大孔树脂柱的径高比优选为1:7；动态吸附的速度优选为3BV/h。该动态吸附参数的设定不仅防泄漏效果良好，而且可以保证大三果鞣质较高的吸附-解吸附率及转移率。
本发明的大孔树脂柱采用由非极性树脂、中极性树脂或氢键吸附型树脂形成的树脂柱，优选为HPD-400型或HPD-100型大孔树脂形成的树脂柱。本发明发现，非极性(如HPD-100型大孔树脂)、中极性(如HPD-400型大孔树脂)、氢键吸附型树脂(如HPD-826型大孔树脂)和极性吸附性树脂(如NKA-2、NKA-9)对大三果鞣质的总吸附量相当，但非极性、中极性和氢键吸附型树脂对大三果鞣质的吸附-解吸附率高于极性吸附性树脂。
在本发明的某些优选实施方式中，大孔树脂柱采用由HPD-100型大孔树脂形成的树脂柱；更优选的实施方式中，大孔树脂柱采用HPD-400型大孔树脂形成的树脂柱，该类型大孔树脂对大三果鞣质吸附量大、泄漏率低、转移率较高。尽管HPD-100型大孔树脂和HPD-400型大孔树脂是常规的，但是将其用于纯化大三果鞣质以降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率则不是常规的。
大三果鞣质的纯化步骤中，大孔树脂柱可以为活化后的大孔树脂柱。根据本发明的一个实施方式，大孔树脂柱的活化包括如下步骤：
(a)采用95vol％乙醇水溶液浸泡4小时，用4BV的95vol％乙醇水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液无醇味；
(b)采用5wt％盐酸水溶液浸泡3小时，用3BV的5wt％盐酸水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液接近中性；
(c)采用5wt％NaOH水溶液浸泡3小时，用3BV5wt％NaOH水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液为中性；
(d)用95vol％乙醇水溶液洗至洗脱液与水按体积比1:5混合后无白色混浊，再用水洗至流出液无醇味，得到活化后的大孔树脂柱。
本发明中，冲洗过程中，所用冲洗溶剂可以为水或5vol％～13vol％乙醇水溶液，优选为水或8vol％～12vol％乙醇水溶液，更优选为10vol％乙醇水溶液。冲洗速度可以为2～6BV/h，优选为2.5～3.5BV/h。所用冲洗溶剂的用量可以为1.5～2.5BV，优选为1.8～2.2BV。采用上述浓度及用量的乙醇水溶液进行除杂冲洗，除杂效果较好，且冲洗流出液的泄露率较低，有助于提高转移率。
本发明中，洗脱过程中，所用洗脱溶剂可以为63vol％～80vol％乙醇水溶液，优选为65vol％～75vol％乙醇水溶液，优选为70vol％乙醇水溶液。洗脱速度可以为3.5～7BV/h，优选为5.5～6.5BV/h，更优选为5.5～6BV/h。洗脱溶剂的用量可以为4.5～5.5BV，优选为4.8～5.2BV，更优选为5～5.1BV。采用上述浓度及用量的乙醇水溶液进行洗脱，鞣质的吸附-解吸附率较高，有助于提高转移率。
本发明中，干燥可以采用本领域常规的干燥方式，可以为减压干燥。这样可以防止大三果药材中某些有效成分的氧化。
以下通过具体实施例对本发明进行详细说明。
以下实施例和对比例中，余甘子、诃子和毛诃子药材均购自北京藏医院(产地尼泊尔)，经北京中医药大学生药系阎玉凝教授鉴定，分别为大戟科植物余甘子(Phyllanthusemblica L.)、使君子科植物诃子(Terminalia chebula Retz.)及毗黎勒(Terminaliabellirica(Gaertn.)Rox.)的干燥成熟果实。
以下实施例和对比例中，含量测定方法如下：
1、供试品溶液的配制
①大三果药材供试品溶液：
取余甘子、诃子以及毛诃子药材粉末(过50目筛)各100mg，置于250ml平底烧瓶中，加入150ml的60vol％乙醇水溶液，50℃浸泡12h，冷却至室温，用60vol％乙醇水溶液补足减失的重量，过滤，得续滤液。
取续滤液2ml，移入25ml容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，作为大三果药材总酚测定的样品溶液。
取续滤液23ml，移入50ml容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，作为测定不被吸附多酚的大三果药材样品溶液。
②大三果鞣质部位供试品溶液：
取34mg大三果鞣质部位粉末置于50ml容量瓶，加入60vol％乙醇水溶液，定容至刻度，摇匀，得到待测液。取2ml待测液，加水定容至10ml，摇匀，作为大三果鞣质部位总酚测定的样品溶液。
取34mg大三果鞣质部位粉末置于50ml容量瓶，加入60vol％乙醇水溶液，定容至刻度，摇匀，得到待测液，将该待测液作为大三果鞣质部位测定不被吸附多酚的样品溶液。
③显色剂：
按2015版《药典第1部》附XB方法，取钨酸钠100g、钼酸钠25g，加水700ml使溶解，加盐酸100ml磷酸50ml，加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂150g、水50ml和溴0.2ml，煮沸除去残留的溴(15分钟)，冷却，加水稀释至1000ml，滤过，即得磷钼钨酸试液。
取29g碳酸钠溶于100ml蒸馏水中，即得29％碳酸钠溶液。
2、采用磷钼钨酸比色法(药典法)测定大三果药材和大三果鞣质部位总鞣质的含量。
测试条件：分光光度计为紫外-可见分光光度计TU1810(普析通用公司)；检测波长：760nm。
3、采用HPLC测定大三果药材和大三果鞣质部位中指标性成分(没食子酸、柯里拉京和鞣花酸)的含量。
测试条件：色谱柱为安捷伦ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6×250mm，5μm)；柱温为30℃；流动相为甲醇-0.1％甲酸/水；流速为1ml·min-1；检测波长为270nm、254nm和262nm；进样量为20μL。
4、转移率及泄露率的计算公式如下：
转移率(％)＝(洗脱液中鞣质质量/上样上清液鞣质质量)×100％
泄露率(％)＝(上样流出液鞣质质量+冲洗流出液鞣质质量)/上样上清液鞣质含量×100％
鞣质吸附-解吸附率(％)＝[洗脱液中鞣质质量/(上样上清液鞣质质量-上样流出液鞣质质量)]×100％。
指标性成分，如没食子酸、柯里拉京和鞣花酸的吸附-解吸附率的计算公式同鞣质吸附-解吸附率。
采用控制泄漏率确定大孔树脂上样液浓度及其上样量，冲洗溶剂及其用量，用以改善大三果鞣质成分在经大孔树脂纯化过程中转移率低的问题。
制备例1
(a)将HPD-400型大孔树脂柱采用95vol％乙醇水溶液浸泡4小时，用4BV的95vol％乙醇水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液无醇味；
(b)采用5wt％盐酸水溶液浸泡3小时，用3BV的5wt％盐酸水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液接近中性；
(c)采用5wt％NaOH水溶液浸泡3小时，用3BV的5wt％NaOH水溶液进行动态洗脱，再用水洗至流出液为中性；
(d)用95vol％乙醇水溶液洗至洗脱液与水按体积比1:5混合后无白色混浊，再用水洗至流出液无醇味，得活化后的HPD-400型大孔树脂柱。
实施例1
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到药粉混合物。将药粉混合物置于50℃的70vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取6h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:10。抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每ml浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液。
2)取30ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，径高比为1:7，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的10vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为3BV/h。然后以5BV的70vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集70vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
实施例2
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到药粉混合物。将药粉混合物置于50℃的70vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取6h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:8。抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每ml浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液.
2)取30ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，径高比为1:9，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的10vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为3BV/h。然后以5BV的70vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集70vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
实施例3
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到粉混合物。将药粉混合物置于50℃的60vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取9h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:10。抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每ml浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液.
2)取20ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，HPD-400型大孔树脂柱的径高比为1:7，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的10vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为3BV/h。然后以5BV的70vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集70vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
实施例4
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到药粉混合物。将药粉混合物置于50℃的70vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取6h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:10。抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每毫升浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液。
2)取30ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，径高比为1:7，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的5vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为3BV/h。然后以5BV的70vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集70vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
实施例5
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到药粉混合物。将药粉混合物置于50℃的70vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取6h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:10，抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每毫升浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液。
2)取30ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，径高比为1:7，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的10vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为6BV/h。然后以5BV的70vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集70vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
实施例6
1)取余甘子、诃子和毛诃子各30g，混合，粉碎，过10目筛，得到药粉混合物。将药粉混合物置于50℃的70vol％乙醇水溶液中提取3次，每次提取6h。药粉混合物与乙醇水溶液的体积比为1:10，抽滤，合并滤液，得到大三果鞣质提取液。将大三果鞣质提取液置于40℃下，减压浓缩至每ml浓缩液含生药0.2g，然后于3000r/min下离心30min，得到上清液。
2)取30ml上清液经活化后的HPD-400型大孔树脂柱(活化过程同制备例1，径高比为1:7，树脂湿体积为20ml)动态吸附，动态吸附的速度为3BV/h。待吸附完成后，用2BV的10vol％乙醇水溶液进行冲洗，冲洗速度为3BV/h。然后以5BV的80vol％乙醇水溶液作为洗脱溶剂洗脱，洗脱流速为6BV/h。收集80vol％乙醇水溶液的洗脱液，减压干燥，得到大三果鞣质部位。
分别测定上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分转移率及泄露率，计算结果见表2。
对比例1～5
除了表1所列区别，其余条件与实施例1相同。
分别测定大三果鞣质提取液、上清液、上样流出液、冲洗流出液及洗脱液中大三果鞣质含量，计算大三果鞣质成分的转移率及泄露率，计算结果见表2。
表1
Figure BDA0003131250850000141
表2
Figure BDA0003131250850000142
由表2可以看出，实施例1～6的大三果鞣质成分泄漏率均不同程度低于对比例1～5，其大三果鞣质成分转移率明显高于对比例1～5。虽然对比例1和对比例5的泄漏率较低，但其转移率偏低，导致生产成本较高。
表3
Figure BDA0003131250850000151
由表3可以看出，实施例1的各指标成分的吸附-解吸附率高于对比例4～5。结合表2可知，本发明可以降低大三果鞣质成分在纯化过程中的泄露率，提高大三果鞣质成分的转移率，最大限度地保证大三果鞣质成分中各单一成分保持较高的吸附-解吸附率。
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。

Claims (10)

1.一种降低大三果鞣质成分泄露率且提高其转移率的方法，其特征在于，包括如下步骤：
将含大三果鞣质成分的上清液经大孔树脂柱动态吸附、冲洗、洗脱，然后将所得洗脱液干燥，得到大三果鞣质部位；
其中，所述上清液的上样量与大孔树脂柱中树脂的体积比为2～4:2，大孔树脂柱的径高比为1:7～9，动态吸附的速度为2～4BV/h。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大孔树脂柱是由非极性树脂、中极性树脂或氢键吸附型树脂形成的树脂柱。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大孔树脂柱为HPD-400型树脂或HPD-100型大孔树脂形成的树脂柱。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，冲洗过程中，所用冲洗溶剂为水或5vol％～13vol％的乙醇水溶液，冲洗溶剂用量为1.5～2.5BV，冲洗速度为2～6BV/h。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，冲洗溶剂用量为1.8～2.2BV，冲洗速度为2.5～3.5BV/h。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，洗脱过程中，所用洗脱溶剂为63vol％～80vol％的乙醇水溶液，洗脱溶剂用量为4.5～5.5BV，洗脱速度为3.5～7BV/h。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，洗脱溶剂用量为4.8～5.2BV，洗脱速度为5.5～6.5BV/h。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含大三果鞣质成分的上清液采用如下方法制得：将大三果药材采用50vol％～70vol％的乙醇水溶液浸泡提取1～5次得到提取液，将提取液浓缩得到浓缩液；然后经离心或过滤，得到含大三果鞣质成分的上清液；
其中，每ml浓缩液含生药0.1～0.2g。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，其中，每次浸泡提取6～12h，每次浸泡提取的温度均为45～55℃，大三果药材与乙醇水溶液的体积比为1:8～12。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述大三果药材是诃子、毛诃子和余甘子按质量比1～2:1～2:1～2组成的混合物。
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