CN113163741A - 螨组合物及用于饲养螨的方法 - Google Patents
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本发明涉及大规模饲养捕食性螨的方法、螨组合物及它们用于生物控制的用途。特别地，本发明涉及跗线被捕食性螨用于大规模饲养捕食性螨和用于控制作物中的害虫的用途。
Description
技术领域
本发明涉及大规模饲养捕食性螨的方法、螨组合物及它们用于生物控制的用途。特别地，本发明涉及跗线被捕食性螨(tarsonemid prey mites)用于大规模饲养捕食性螨和用于控制作物中的害虫的用途。
背景技术
捕食性螨传统上被用于广泛的农业害虫管理领域。已提出或商业化了多种用于植食性害虫螨和昆虫害虫(诸如粉虱和蓟马)的生物控制的捕食性螨种。
近年来，所涉及的主要节肢动物害虫物种大体上已被化学试剂(即杀虫剂)控制。过去十年中提供的许多较新的杀虫剂比大多数较旧的化合物更具选择性且危险性更低。然而，越来越明显的是，单方面依赖化学控制的策略不是解决问题的办法。在这方面，化学防治伴随着几个主要问题，即在靶标害虫物种中产生对化学品(chemicals)的抗性的发展；有用的注册杀昆虫剂和杀螨剂的供应减少；一些不希望的残留物的沉积；这些化学品对非靶标物种的损害性(或有害)影响导致二次害虫爆发(污染土壤和水影响野生动物、水生生物和其他非靶标生物，并干扰有益生物，诸如传粉昆虫和害虫的天敌)；和经处理植物的植物毒性反应。出于这些原因，许多农民和园丁正在探索和采用减少杀虫剂使用的方法。
生物控制是使用化学试剂的一种替代方法。生物控制是为了限制害虫种群而对活的有益生物(天敌)种群进行的有意操纵。几乎所有的害虫都有天敌，并且对天敌的适当管理可以有效控制许多害虫。生物控制可以是有效、经济和安全的。生物控制的目的不是消灭害虫，而是将它们保持在不造成明显损害的可容忍水平。
螨的天敌包括捕食者(predators)、寄生性昆虫、线虫，和病原体。许多出版物已经证明了使用捕食性螨种群来控制害虫。例如，目前主要采用植绥捕食性螨来防治诸如植食性螨、蓟马和粉虱等害虫。一个实例是，黄瓜新小绥螨(Neoseiulus cucumeris)(大蜂螨)在商业上用于控制蓟马幼虫和蜘蛛螨。此外，选自中气门类(mesostigmatid)和前气门类(prostigmatid)捕食性物种中的其他捕食性螨种在生物害虫控制中受到关注，并且一些已经进入市场。
因此，开发有效的大规模饲养系统在商业上相关的规模上以可接受的价格生产捕食性螨种群是有意义的。在目前的商业饲养系统中，捕食性螨种群在维持于载体上的培养物中以被捕食性生命(life prey)饲养。例如，WO2006071107和WO2013103295公开了一种螨组合物，其包括捕食性螨种的个体种群、作为捕食性螨个体食物来源的被捕食性螨种群，和载体。根据该现有技术文件的组合物适用于饲养螨种和用于害虫的生物控制。在现有技术的大规模饲养方法中最常用的被捕食性螨是无气门类(Astigmatid)螨，诸如腐食酪螨(Tyrophagus putrescentiae)(Schrank)、食昆虫狭螨(Thyreophagus entomophagous)(laboulbeéne&Robin)和乳果螨(Carpoglyphus lactis L.)。到目前为止，用于商业大规模饲养捕食性螨的所有被捕食性螨种都属于无气门类目。例如，WO 2006/056552、WO 2008/015393、WO 2008/104807和WO 2007/075081证明了无气门类螨作为捕食性螨的大规模饲养中的被捕食性螨的潜力。
害虫螨有时用于研究捕食性螨和害虫螨之间的相互作用。例如，来自跗线螨科家族的侧多食跗线螨(Polyphagotarsonemus latus)(Rodriguez Morell et al.,2010,International Journal of Acarology 36(5):371-376)和PPhytonemus pallidus(Tuovinen&Lindqvist,2010,Biological Control 54(2):119-125)活体植物材料上以实验室规模生长，并用于研究捕食性螨的攻击。然而，具有这种被捕食性螨种群的螨组合物对于商业培养不是现实的解决方案，因为这些是已知为不应散布的害虫。
捕食性螨的大规模饲养系统在很大程度上取决于捕食者是否有合适的被捕食物。鉴于被捕食性螨在捕食性螨饲养中的作用，饲养它们的商业相关性正在增加。
鉴于以上内容，存在获得用于大规模饲养和大规模生产捕食性螨种群，用于包括这种螨组合物的更大量的螨组合物的商业流通，以及用于更好的害虫控制和农业管理的改进的(更有效的)螨组合物的持续需求。
此外，商业螨饲养需要在合适的温度(通常介于20至30℃)和高湿度(通常介于80至95％相对湿度)的饲养条件下进行。在这些条件下，很容易出现真菌污染的问题。因此，还需要改进螨饲养方法，以降低真菌污染的风险。
发明内容
本发明人惊奇地发现，使用跗线螨作为被捕食性螨克服了现有技术的问题。
因此，本发明提供一种螨组合物，其包括
-捕食性螨种群，
-被捕食性螨种群，和
-用于所述种群个体的载体，
其中，所述被捕食性螨种群包括来自跗线螨科的螨，前提是所述螨组合物不包括选自由侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus组成的组的活的螨种。
附图说明
图1：当在22±1℃和85±5％RH条件下喂食T.fusarii(TF)、乳果螨(C.lactis)(CL)或食昆虫狭螨(TE)时，雌性斯氏钝绥螨(A.swirskii)连续3天产卵数。柱形图上方的不同字母表示不同处理之间的显著差异(GLM后比较，p＜0.05)。
图2：雌性斯氏钝绥螨对T.fusarii(TF)、乳果螨(CL)或食昆虫狭螨(TE)的卵、幼虫和成虫的捕获成功率。不同的字母表示每个发育阶段被捕食性螨种之间的显著差异(GLM后比较，p＜0.05)。
图3：当喂食T.fusarii与仅由西红柿叶平台(arena)组成的对照相比时，雌性安科纳似前线螨(H.anconai)连续3天产卵数(22±1℃和85±5％RH)。
图4：当喂食T.fusarii与喂食乳果螨和没有被捕食性螨的对照处理相比时，雌性普遍前线螨(P.ubiquitus)连续3天产卵数(22±1℃和85±5％RH)。
图5：当喂食T.fusarii或T.confusus时，雌性斯氏钝绥螨连续2天产卵数(22±1℃和85±5％RH)。
图6：当喂食Fungitarsonemus sp.与仅由常春藤叶平台组成的对照相比时，雌性斯氏钝绥螨连续2天产卵数(22±1℃和85±5％RH)。
具体实施方式
如本文前述，本发明提供一种螨组合物，其包括
-捕食性螨种群，
-被捕食性螨种群，和
-用于所述种群个体的载体，
其中，所述被捕食性螨种群包括来自跗线螨科的螨。特别地，这种组合物中的所述螨组合物不包括选自由侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus组成的组的活的螨种。
术语《捕食性螨种群》在本发明的意义上是指以被捕食性螨种群为食的有益螨种群。
术语《被捕食性螨种群》在本发明的意义上是指至少部分被捕食性螨种群消耗的螨种群。
术语《载体》在本发明的意义上是指适于向捕食性螨和被捕食性螨种群的个体提供载体表面的任何固体材料。载体通常充当三维基质，其中，被捕食螨种群和捕食性螨种群可以在其上四处移动、躲藏、发育和捕食或被捕食。
发明人惊奇地观察到，根据本发明的螨组合物在效率方面显示出更好的结果。据观察，与常规使用的无气门类被捕食性螨相比，来自跗线螨科的被捕食性螨种群中的螨更容易被杀死并且更容易为捕食性螨种群所吃掉。另一个优势是，跗线被捕食性螨的所有生命阶段都很容易被杀死，而较大的无气门类螨生命阶段(诸如成虫)，被杀死的比率要低得多。此外，观察到即使在高密度下，被捕食性螨种群对捕食性螨种群的干扰也小于用于大规模饲养螨的无气门类被捕食性螨。尽管不希望受理论的束缚，但与无气门类螨相比，跗线螨可能不会产生驱避挥发物或产生程度低得多的挥发物。这可能引起跗线螨对捕食性螨种群的干扰效应较低。因此，捕食性螨种群中的个体可能生长得更快，并因此成熟得更快，从而使得能够更高的繁殖率。这种较高的繁殖率使得捕食性螨种群中个体数量的快速增加。这一优点有利于捕食性螨的饲养和包括捕食性螨的组合物的生产，以及有利于控制作物中的害虫。应当注意，本发明中使用的被捕食性螨种群还可以包括死亡的被捕食性螨种群(或由死亡的被捕食性螨种群组成)。与现有技术的被捕食性螨(诸如无气门类螨)相比，本发明的被捕食性螨更容易被吃掉的观察结果也适用于死的跗线螨(相比于死的无气门类螨)。使用含死亡的被捕食性螨的被捕食性螨种群提供了这样的益处，即捕食性螨需要更少的能量来杀死和消耗被捕食性螨。
其次，观察到用本发明的螨组合物防止了霉菌的出现。事实上，有人观察到，来自跗线螨科的螨以真菌为食。令人惊讶地，跗线被捕食性螨不仅减少真菌生长，而且能够在商业相关饲养条件下将其完全抑制到不可见的程度。实际上，如本文前述，为了生产和分配目的饲养捕食性螨，维持严格的温度和湿度条件是必要的。炎热潮湿的环境是饲养捕食性螨的理想场所。不幸的是，这种特定条件有利于真菌生长，这严重限制了饲养螨和生产商业上可接受的捕食性螨组合物的能力。与现有技术的螨组合物相反，根据本发明的组合物使得能够大规模饲养，并因此使得能够更大量的商业流通，两者都使得成本降低。因此，优选地，所述被捕食性螨种群包括来自跗线螨科的活螨。使用根据本发明的活螨提供了优于使用死螨的许多益处，诸如抑制真菌污染。
在一个具体的实施方案中，本发明中使用的被捕食性螨种群包括(a)死亡的被捕食螨性种群，和(b)来自跗线螨科的活螨种群。由于使用死亡的被捕食性螨经常引起饲养培养物的真菌污染，添加根据本发明的活的被捕食性螨抑制了该问题。在一个更具体的实施方案中，本发明中使用的被捕食性螨种群包括(a)来自跗线螨科的死亡的被捕食螨性种群，和(b)来自跗线螨科的活螨种群。
术语《霉菌》在本发明的意义上是指以称为菌丝的多细胞丝的形式生长的真菌。霉菌是一种数量众多且分类多样的真菌物种，会导致天然物质的生物降解。霉菌不构成特定的分类或系统发育分组，但可在接合菌门(Zygomycota)和子囊菌门(Ascomycota)中发现。常见的霉菌属包括支顶孢霉属(Acremonium)、链格孢霉属(Alternaria)、曲霉属(Aspergillus)、枝孢霉属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)、毛霉属(Mucor)、青霉属(Penicillium)、根霉属(Rhizopus)、葡萄穗酶属(Stachybotrys)、木霉属(Trichoderma)和毛癣菌属(Trichophyton)。在本发明的意义上，术语《霉菌》也包括霉状物(mildew)，与霉菌密切相关的对应物，其是白粉菌目(Erysiphales)中的真菌物种，或霜霉菌科(Peronosporaceae)中的类真菌生物体。第三，与被认为是夏季月份低海拔地区的次主要害虫的侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus相反，根据本发明的跗线螨不引起显著的植物损害。事实上，在温带和亚热带地区，来自侧多食跗线螨和P.pallidus的螨侵袭了许多水果和蔬菜作物。因此，与包括侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus的螨组合物相反，根据本发明的组合物使得能够大规模饲养并能够控制害虫。
有利地，根据本发明的组合物可以进一步包括真菌。当将真菌加入到根据本发明的组合物中时，观察到更好的效率结果。事实上，被捕食性螨种群以真菌为食。因此，在根据本发明的组合物中活性添加真菌使得有可能改善跗线螨科的生长并因此加速其生殖成熟，这将使得被捕食性螨种群的跗线螨科个体的更快增加。此外，已观察到活性添加有益真菌稳定了饲养培养物，并进一步抑制了不需要的真菌污染物的生长。因此，在根据本发明的组合物中活性添加真菌将间接增强捕食性螨种群的饲养、它们的大规模生产和根据本发明的组合物在较大量下的分布，而且也将显示对作物上的害虫控制的更好效果。在一个优选的实施方案中，所述真菌属于肉座菌科(Hypocreaceae)，特别地，所述真菌选自胶枝霉属(Gliocladium)和木霉属。
本文所用的“跗线螨(Tarsonemid)”是指跗线螨科的螨种，这两个术语在本文中可互换使用。跗线螨科是螨的一个科，也称为线足螨或白螨。在一个具体的实施方案中，跗线螨属于跗线螨亚科(Tarsoneminae)，更特别地属于Hemitarsonemini、Steneotarsonemini、Tarsonemini，或Pseudacarapini族。
在一个优选的实施方案中，跗线螨选自由以下项组成的组：跗线螨属(例如，谷跗线螨(Tarsonemus granarius)、Tarsonemus floricolus、Tarsonemus myceliophagus、Tarsonemus subcorticalis、Tarsonemus minimax、Tarsonemus fusarii)、Fungitarsonemus(例如，Fungitarsonemus peregrinus、Fungitarsonemus pulvirosus)、Heterotarsonemus(例如，Heterotarsonemus lindquisti、Heterotarsonemuscoleopterorum)、Daidalotarsonemus(例如，Daidalotarsonemus vandevriei、Diadalotarsonemus tesselatus)、Neotarsonemoides(例如，Neotarsonemoidesdenigrates)和Pseudacarapis(例如，Pseudacarapis indoapis)。在一个更优选的实施方案中，本发明的被捕食性螨选自跗线螨属；更特别地选自由谷跗线螨、Tarsonemusfloricolus、Tarsonemus myceliophagus、Tarsonemus subcorticalis、Tarsonemusminimax和Tarsonemus fusarii组成的组。
优选地，根据本发明的跗线螨不会引起显著的植物损害。本领域技术人员非常清楚如何选择不会对植物造成显著损害的跗线螨。此外，不引起显著植物损害的情况很容易确定，例如通过将植物与所选的跗线螨一起培养，并在几天后确定植物是否损害。在一个具体的实施方案中，根据本发明的被捕食性螨包括来自跗线螨科的螨，其中，所述来自跗线螨科的螨不选自包括侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus的组。从本文的上下文中可以理解，根据本发明的跗线螨优选是以真菌为食的跗线螨。
有利地，根据本发明的组合物包括捕食性和/或被捕食性螨种群的食物来源。在一个具体的实施方案中，本发明的组合物包括所述被捕食性螨种群的食物来源。又如在其他地方所描述的，所述被捕食性螨种群的食物来源可以包括真菌。在另一个实施方案中，所述被捕食性螨种群的食物来源包括非光合植物材料。在进一步的实施方案中，食物来源包括小麦胚芽或花粉。如本领域技术人员所知，可以选择既作为载体又作为食物来源的载体，例如小麦胚芽。
在一个具体的实施方案中，本发明的组合物进一步包括所述捕食性螨种群的补充食物来源。本文所用的补充食物来源是指除被捕食螨性种群外还存在的食物来源。补充食物来源有时在捕食性螨饲养中用作比被捕食性螨更节约成本的食物来源。经常观察到，若干捕食性螨可以通过补充食物来获得额外的能量，但也需要被捕食性螨的存在来生存、发育和繁殖。使用补充食物来源的一个主要缺点是它容易受到真菌污染。通过将补充食物来源与本发明的被捕食性螨组合，抑制了该缺点。优选的补充食物的实例是天然食物来源(诸如花粉或死螨)和人工食物(
et al.(2005)Plant-provided food forcarnivorous insects:a protective mutualism and its applications 356p；Morales-Ramos et al.(2014)Mass production of beneficial organisms 742p；Cohen(2015)Insect diets.Science and Technology,Second edition,473p)。用于饲养捕食性螨的补充食物来源是本领域技术人员熟知的。
如前所述，载体可以是适于为个体提供载体表面的任何固体材料。在优选的实施方案中，载体是固体载体元件的混合物。优选地，载体是固体载体元件的基本均匀的混合物。虽然固体载体元件可以具有多种尺寸，但基本均匀的混合物是指在载体中基本均匀分布的多种尺寸。
固体载体元件的平均最长轴线典型地介于1.0至20.0mm，更特别地介于2.0至12.0mm，优选地介于3.0至9.0mm。在另一个具体的实施方案中，载体是具有相似尺寸的固体载体元件的混合物。在进一步的实施方案中，90％的固体载体元件的最长轴线在固体载体元件混合物的平均最长轴线的0.1倍至10.0倍的范围内，特别是在0.2倍至5.0倍的范围内，更特别是在0.5倍至2.0倍的范围内。从本文公开内容可以理解，可以使用和混合两种或更多种不同类型的载体元件。在这种情况下，尺寸分布是指每种类型的载体元件的尺寸分布。优选地，载体提供多孔介质，其使得能够交换由螨种群产生的代谢气体和热。合适载体的实例是非光合植物材料(诸如(小麦)麸皮、荞麦壳、稻壳、锯末、玉米芯粗粉等)，或无机材料(诸如蛭石)。有利地，所述载体包括草物种的谷粒或其任何部分，诸如胚芽或麸皮。优选地，所述载体不包括活的绿色植物材料，诸如植物的叶或茎。在一个具体的实施方案中，载体包括非光合植物材料。特别优选的是选自蛭石、小麦麸皮、米糠、稻壳和荞麦壳的载体。
优选地，所述载体包括平均最长轴线介于1.0至20.0mm，特别是介于3.0至9.0mm的载体元件。载体材料可以为被捕食性螨和捕食性螨提供庇护所，减少应激条件和同类相食。在大规模饲养期间，载体使得能够产生三维饲养基质，并可为被捕食性螨提供食物来源。在生物控制的储存和分配过程中，载体充当填充剂，并使得捕食性螨在作物中的分布能够更加均匀。
有利地，捕食性螨种群的个体数相对于被捕食性螨种群的个体数为约1∶1至1∶500，诸如约1∶50至1∶200，并优选介于1∶75至1∶125。
由于本发明，可以达到被捕食性螨和捕食性螨的高密度。在一个具体的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少1000个被捕食性螨种群的螨，特别是至少2000个被捕食性螨，更特别是至少3000个被捕食性螨。在进一步的实施方案中，至少5000个被捕食性螨、至少10000个被捕食性螨、至少20000个被捕食性螨、至少30000个被捕食性螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少50000个被捕食性螨种群的螨。
在另一个具体的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少20个捕食性螨种群的螨，特别是至少30个捕食性螨，更特别是至少50个捕食性螨。在进一步的实施方案中，至少100个捕食性螨、至少150个捕食性螨、至少200个捕食性螨、至少300个捕食性螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少500个捕食性螨种群的螨。
除非上下文另有明确说明，本文提及的螨数量是指所有螨发育阶段的总数，因此包括卵、幼虫、若虫和成虫。从本文的公开内容可以理解，本发明组合物中的被捕食性螨不需要是活的被捕食性螨。
在一个具体的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少1000个被捕食性螨种群的非卵螨，特别是至少2000个非卵被捕食性螨，更特别是至少3000个非卵被捕食性螨。在进一步的实施方案中，至少5000个被捕食性非卵螨、至少10000个被捕食性非卵螨、至少20000个被捕食性非卵螨、至少30000个被捕食性非卵螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少50000个被捕食性螨种群的非卵螨。
在另一个具体的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少20个捕食性螨种群的非卵螨，特别是至少30个非卵捕食性螨，更特别是至少50个非卵捕食性螨。在进一步的实施方案中，至少100个非卵捕食性螨、至少150个非卵捕食性螨、至少200个非卵捕食性螨、至少300个非卵捕食性螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少500个捕食性螨种群的非卵螨。
在另一个具体的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少20个捕食性螨种群的成虫螨，特别是至少30个成虫捕食性螨，更特别是至少50个成虫捕食性螨。在另一个实施方案中，至少100个成虫捕食性螨、至少150个成虫捕食性螨、至少200个成虫捕食性螨、至少300个成虫捕食性螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少500个捕食性螨种群的成虫螨。在进一步的实施方案中，本发明的螨组合物包括每克组合物至少20个捕食性螨种群的活的成虫螨，特别是至少30个活的成虫捕食性螨，更特别是至少50个活的成虫捕食性螨。在进一步的实施方案中，至少100个活的成虫捕食性螨、至少150个活的成虫捕食性螨、至少200个活的成虫捕食性螨、至少300个活的成虫捕食性螨。在一个优选的实施方案中，螨组合物包括每克组合物至少500个捕食性螨种群的活的成虫螨。
显然地，上述被捕食性螨和捕食性螨数量的范围可以组合以达到本发明的特定和优选的实施方案。因此，接下来本发明提供例如螨组合物，包括每克组合物至少1000个被捕食性螨种群的螨和至少20个捕食性螨种群的螨。作为另一个实例，至少5000个被捕食性螨种群的螨和至少100个捕食性螨种群的螨。作为另一个实例，至少50000个被捕食性螨种群的螨和至少500个捕食性螨种群的螨。
在一个优选的实施方案中，所述捕食性螨是中气门类或前气门类螨种。在进一步的实施方案中，所述捕食性螨选自：
-中气门类捕食性螨种，诸如：
i)植绥螨科，诸如来自：
a)-钝绥螨亚科(Amblyseiinae)，诸如来自钝绥螨属(Amblyseius)，例如安德森氏钝绥螨(Amblyseius andersoni)、Amblyseius aerialis、斯氏钝绥螨(Amblyseiusswirskii)、草栖钝绥螨(Amblyseius herbicolus)或拉哥钝绥螨(Amblyseiuslargoensis)，来自真绥螨属(Euseius)，例如芬兰真绥螨(Euseius finlandicus)、木槿真绥螨(Euseius hibisci)、卵圆真绥螨(Euseius ovalis)、维多利亚真绥螨(Euseiusvictoriensis)、草茎真绥螨(Euseius stipulatus)、盾形真绥螨(Euseius scutalis)、土拉真绥螨(Euseius tularensis)、阿多真绥螨(Euseius addoensis)、一致真绥螨(Euseiusconcordis)、Euseius ho或柑桔真绥螨(Euseius citri)，来自小新绥螨属(Neoseiulus)，例如巴氏小新绥螨(Neoseiulus barkeri)、加利福尼亚小新绥螨(Neoseiuluscalifornicus)、黄瓜小新绥螨(Neoseiulus cucumeris)、长毛小新绥螨(Neoseiuluslongispinosus)、温氏小新绥螨(Neoseiulus womersleyi)、树莓小新绥螨(Neoseiulusidaeus)、无名小新绥螨(Neoseiulus anonymus)、食雀稗小新绥螨(Neoseiuluspaspalivorus)、萎缩小新绥螨(Neoseiulus reductus)或伪小新绥螨(Neoseiulusfallacis)，来自近钝走螨属(Amblydromalus)，例如柠檬近钝走螨(Amblydromaluslimonicus)，来自近盲走螨属(Typhlodromalus)，例如阿里波近盲走螨(Typhlodromalusaripo)、莱拉近盲走螨(Typhlodromalus laila)或奇异近盲走螨(Typhlodromalusperegrinus)，来自拟盲走螨属(Typhlodromips)，例如高山拟盲走螨(Typhlodromipsmontdorensis)，来自小植绥螨属(Phytoseiulus)，例如智利小植绥螨(Phytoseiuluspersimilis)、粗毛小植绥螨(Phytoseiulus macropilis)、长足小植绥螨(Phytoseiuluslongipes)、草莓小植绥螨(Phytoseiulus fragariae)；
b)盲走螨亚科(Typhlodrominae)，诸如来自静走螨属(Galendromus)，例如西静走螨(Galendromus occidentalism)，来自盲走螨属(Typhlodromus)，例如梨盲走螨(Typhlodromus pyri)、多琳盲走螨(Typhlodromus doreenae)、Typhlodromus rhenanus或者阿西盲走螨(Typhlodromus athiasae)；
c)植绥螨亚科(Phytoseiinae)，诸如来自植绥螨属(Phytoseius)，例如粗毛植绥螨(Phytoseius macropilis)、Phytososeius finitimus或者Phytoseius plumifer。
ii)囊螨科(Ascidae)，诸如来自肛厉螨属(Proctolaelaps)，诸如矮肛厉螨(Proctolaelaps pygmaeus)(Muller)；来自蠊螨属(Blattisocius)，例如跗蠊螨(Blattisocius tarsalis)(Berlese)、Blattisocius keegani(Fox)；来自毛绥螨属(Lasioseius)，例如粪堆毛绥螨(Lasioseius fimetorum)Karg、佛罗里达毛绥螨(Lasioseius floridensis)Berlese、二刺毛绥螨(Lasioseius bispinosus)Evans、具齿毛绥螨(Lasioseius dentatus)Fox、梭形毛绥螨(Lasioseius scapulatus)(Kenett)、阿西毛绥螨(Lasioseius athiasae)Nawar&Nasr；来自北绥螨属(Arctoseius)，例如半裂北绥螨(Arctoseius semiscissus)(Berlese)；来自原革鞍螨属(Protogamasellus)，例如狄奥斯科鲁斯原革鞍螨(Protogamasellus dioscorus)Manson；
iii)厉螨科(Laelapidae)，诸如来自层厉螨属(Stratiolaelaps)，例如剑毛层厉螨(Stratiolaelaps scimitus)(Womersley)(也被分在下盾螨属(Hypoaspis))；大地厉螨属(Gaeolaelaps)，例如尖狭大地厉螨(Gaeolaelaps aculeifer)(Canestrini)(也被分在下盾螨属)；阳厉螨属(Androlaelaps)，例如茅舍阳厉螨(Androlaelaps casalis)(Berlese)；
iv)巨螯螨科(Macrochelidae)，诸如来自巨螯螨属(Macrocheles)，例如强壮巨螯螨(Macrocheles robustulus)(Berlese)、家蝇巨螯螨(Macrocheles muscaedomesticae)(Scopoli)、宫卵巨螯螨(Macrocheles matrius)(Hull)；
v)寄螨科(Parasitidae)，诸如来自偏革螨属(Pergamasus)，例如垃圾偏革螨(Pergamasus quisquiliarum Canestrini)；寄螨属(Parasitus)，例如粪堆寄螨(Parasitus fimetorum)(Berlese)、二疣寄螨(Parasitus bituberosus)Karg；Parasitellus，例如Parasitellus fucorum(De Geer)；
vi)双革螨科(Digamasellidae)，诸如来自双革螨属(Digamasellus)；例如，Digamasellus quadrisetus或者Digamasellus punctum；来自枝厉螨(Dendrolaelaps)属；例如Dendrolaelaps neodisetus；和
-前气门类(Prostigmatid)螨种，诸如来自：
i)镰螯螨科(Tydeidae)，诸如来自似前线螨属(Homeopronematus)，例如安科纳似前线螨(Homeopronematus anconai)(Baker)；来自镰螯螨属(Tydeus)，例如兰氏镰螯螨(Tydeus lambi)(Baker)、有尾镰螯螨(Tydeus caudatus)(Duges)；来自前线螨属(Pronematus)，例如普遍前线螨(Pronematus ubiquitous)(McGregor)；
ii)肉食螨科(Cheyletidae)，诸如来自肉食螨属(Cheyletus)，例如普通肉食螨(Cheyletus eruditus)(Schrank)、马六甲肉食螨(Cheyletus malaccensis)Oudemans；
iii)巨须螨科(Cunaxidae)，诸如来自鞘硬瘤螨属(Coleoscirus)，例如简单鞘硬瘤螨(Coleoscirus simplex)(Ewing)，来自巨须螨属(Cunaxa)，例如钩螯巨须螨(Cunaxasetirostris)(Rermann)；
iv)赤螨科(Erythraeidae)，诸如来自多室赤螨属(Balaustium)，例如普氏多室赤螨(Balaustium putmani)Smiley、苜蓿多室赤螨(Balaustium medicagoense)Meyer&Ryke、墙多室赤螨(Balaustium murorum)(Hermann)；
v)长须螨科(Stigmaeidae)，诸如来自神蕊螨属(Agistemus)，例如具瘤神蕊螨(Agistemus exsertus)Gonzalez；诸如来自寻螨属(Zetzellia)，例如苹果寻螨(Zetzelliamali)(Ewing)；和
vi)跗线螨科，诸如来自Acaronemus，例如Acaronemus destructor(Smiley和Landwehr)；诸如来自Dendroptus属近suski Sharonov和Livshits；诸如Lupotarsonemusfloridanus Attiah。
在一个优选的实施方案中，捕食性螨属于植绥螨科。在一个具体的实施方案中，捕食性螨选自钝绥螨亚科、横绥螨属(Transeius)、小新绥螨属和近钝走螨属；更特别地，所述捕食性螨选自斯氏钝绥螨、高山横绥螨(Transeius montdorensis)、加利福尼亚小新绥螨(Neoseiulus californicus)和柠檬近钝走螨(Amblydromalus limonicus)。
在另一个实施方案中，捕食性螨是前气门类螨，特别地，镰螯螨科。在进一步的实施方案中，捕食性螨来自似前线螨属(Homeopronematus)或前线螨属(Pronematus)，优选安科纳似前线螨(Homeopronematus anconai)或者普遍前线螨(Pronematus ubiquitous)。
本发明还提供了用于储存和分配本发明组合物的商业包装。因此，本发明进一步涉及含根据本发明组合物的容器。特别地，容器的内部容积介于0.2l至3l，优选介于0.5l至2l。根据优选的实施方案，容器优选地包括用于螨虫的至少一个活动生命阶段的出口，更优选地包括适于提供所述至少一个活动生命阶段的持续释放的出口。在一个具体的实施方案中，容器(例如，瓶子或小袋)具有至少一个带有可移除密封件的出口。特别地，本文所用的密封件是指胶粘或热封的封闭件。优选地，容器适于将其附接到作物上，例如通过包括将容器悬挂在作物叶子或分枝上的钩子，或者通过包括将容器粘附到作物表面的粘性表面。
本发明进一步涉及一种饲养捕食性螨的方法，该方法包括
-提供本发明的组合物，以及
-使得捕食性螨种群的个体能够以所述被捕食性螨种群为食。
优选地，使得捕食性螨种群的个体能够以所述被捕食性螨种群为食，同时将所述螨组合物维持在5至35℃和30至100％相对湿度；特别地，在15-35℃和50-100％相对湿度下。
如本文前述，在另一个实施方案中，饲养捕食性螨的方法进一步包括添加真菌。在一个具体的实施方案中，真菌是冻干真菌。例如，本发明提供了一种饲养捕食性螨的方法，该方法包括：
-通过使载体与被捕食性螨种群、捕食性螨种群和真菌培养物接触产生螨组合物，以及
-使得捕食性螨种群的个体能够以所述被捕食性螨种群为食。原则上，真菌可以在饲养方法期间的任何时间加入，并且然后在饲养期间和/或在所得组合物用于生物控制的使用期间提供益处。在一个具体的实施方案中，添加真菌使得真菌存在，同时捕食性螨种群的个体以被捕食性螨种群为食。在一个优选的实施方案中，在使得捕食性螨种群能够以所述被捕食性螨种群为食之前加入真菌。在进一步的实施方案中，本发明的饲养方法包括：
-使载体与被捕食性螨种群和真菌接触，
-在所述真菌的存在下在所述载体上饲养所述被捕食性螨种群，
-使所述经饲养的被捕食性螨种群与捕食性螨种群接触，以及
-使得捕食性螨种群的个体能够以所述被捕食性螨种群为食。
有利地，在添加被捕食性螨种群之前，可以将载体与真菌一起孵育。这使得真菌能够在载体上生长，并确保被捕食性螨种群有足够的食物来源。
有利地，当经饲养的被捕食性螨种群与捕食性螨种群接触时，被捕食性螨种群可保留在载体上并存在真菌。因此，在将被捕食性螨种群与捕食性螨种群接触之前，无需从载体和真菌中分离被捕食性螨种群。此外，在捕食性螨的饲养过程中真菌的存在提供了本文所述的益处。特别地，真菌可以作为被捕食性螨种群的食物来源，使得被捕食性螨种群可以进一步发展，同时被捕食性螨被增长的捕食性螨种群捕食。
本发明进一步涉及根据本发明的来自跗线螨科的一种或更多种螨控制真菌生长的用途。有利地，在捕食性螨饲养系统中控制真菌生长。
本发明进一步涉及一种控制作物害虫的方法，该方法包括向所述作物提供根据本发明的螨组合物。本发明的螨组合物可以直接分布在作物上。或者，本发明的螨组合物在作物附近提供。例如，本发明的螨组合物可以通过将装有螨组合物的容器放置在作物近处并使得捕食性螨能够从所述容器中离开而提供给作物。通过这种方式，捕食性螨通过作物传播自己，并控制作物害虫。在一个优选的实施方案中，害虫是节肢动物害虫。
本发明的这些和其他实施方案在所附权利要求中指出。
现在将参考以下实施例进一步描述本发明，这些实施例显示了本发明不同方面的非限制性实施方案。
实施例
实施例1：斯氏钝绥螨Athias-Henriot对不同被捕食性螨的产卵率。
第一个实施例是为了评估与用于植绥捕食性螨的两种标准使用的无气门类被捕食性螨相比，跗线被捕食性螨的营养质量。更具体地，与两种无气门类被捕食性螨(即乳果螨(CL)(蜱螨亚纲:无气门亚目:果螨科)和食昆虫狭螨(粉螨)(TE)(蜱螨亚纲:无气门亚目:粉螨科(acaridae)))相比，在跗线被捕食性螨Tarsonemus fusarii Cooreman上对捕食性螨斯氏钝绥螨Athias-Henriot(蜱螨亚纲:中气门亚目:植绥螨科)的产卵率进行了测试。
被捕食性螨在含有麸皮、小麦胚芽和酵母的培养基上培养，培养基在带通风盖的塑料容器(8×5，7cm)中。容器保持在22±1℃的温度和85±5％的相对湿度下。
将一只妊娠雌性斯氏钝绥螨从大规模饲养设施转移到放置在一层湿棉花上的黑色PVC平台(2×4cm)上。平台的边缘覆盖着薄纸，以防止螨逃脱。添加了一片带有棉线的黑色塑料(1×1cm)，以提供庇护所和产卵基质。被捕食性螨被随意提供。连续4天每天计数每只雌性产卵数。分析中省略了第一天的产卵率，以限制实验前饮食的影响(Sabelis 1990)。每个处理重复12次。将第2、3、4天的产卵量总和与泊松分布的GLM模型进行比较。使用一般线性假说检验(R,Lenth 2016中lsmeans包的glht函数)确定处理之间的对比。所有分析均采用统计软件R 3.10(RDevelopment Core Team 2012)进行。
结果表明，斯氏钝绥螨能够在跗线被捕食性螨T.fusarii上繁殖。产卵受被捕食性物种(GLM，χ2＝20.3，d.f.＝2，p<0.001)的影响，与对乳果螨的影响一致，且显著优于由食昆虫狭螨组成的食物(图1)。与无气门类被捕食性螨相比，在跗线被捕食性螨上生长时产卵更多，尽管这与乳果螨相比没有达到统计学意义。综上所述，跗线螨是商业饲养捕食性螨类(诸如斯氏钝绥螨)的合适被捕食性螨种群。
实施例2：当提供不同发育阶段的被捕食性螨时斯氏钝绥螨的捕获成功率
先前的研究已经报道了无气门类被捕食性螨的成虫阶段比这些螨的卵和幼虫更难被制服和消耗。在本实施例中，评估了跗线被捕食性螨T.fusarii，和无气门类被捕食性螨乳果螨和食昆虫狭螨的卵、幼虫和成虫的捕获成功率。
如实施例1所述饲养捕食性螨和被捕食性螨。通过将雌性斯氏钝绥螨转移到没有任何食物来源的黑色PVC板中，在实验开始前将它们饥饿16h。16小时后，如实验1所述，将一只雌性斯氏钝绥螨转移至黑色PVC平台。在引入雌性斯氏钝绥螨之前，将三种被捕食性螨的50个卵、50个幼虫或25个成虫转移到实验平台。引入捕食者后，观察5分钟或直至攻击成功(即杀死并取食被捕食物)。如果雌性在5分钟内未能成功杀死被捕食物，则记录为未成功。对于每种处理，设置15个重复。采用二项式分布的GLM模型比较各处理之间的数据。通过聚集非显著性因素水平，逐步简化模型评估处理之间的对比(Crawley2013)。所有统计分析均采用电脑软件R 3.1.0版(R Core Team 2014)进行。
当提供跗线螨T.fusarii卵时，所有雌性在5分钟内成功地以卵为食。令人惊讶的是，不到30％的雌性能够杀死乳果螨卵，而没有雌性杀死食昆虫狭螨卵。就成虫而言，与其他无气门类被捕食性螨种相比，当提供跗线被捕食性螨T.fusarii时，被制服的被捕食性个体的比例也较高。对于幼虫，所有雌性在5分钟内杀死幼虫。
当被捕食物为幼虫时，所有物种的捕获率相等(GLM，χ2＝2×10-10，d.f.＝2，p＝0.05)。然而，当提供卵(GLM，χ2＝1315.3，d.f.＝2，p<0.05)和成虫(GLM，χ2＝39.2，d.f.＝2，p<0.05)时，捕获率受到物种的影响。从图2中给出的结果可以清楚地看出，与常规使用的无气门类被捕食性螨种乳果螨和食昆虫狭螨相比，雌性斯氏钝绥螨能够杀死和消耗更多的跗线被捕食性螨T.fusarii的卵和成虫。因此，对于跗线被捕食性螨而言，所有发育阶段都更容易被制服和杀死，使其成为更合适的被捕食物。
实施例3：安科纳似前线螨对Tarsonemus fusarii的产卵率
本实验旨在评估用于前气门类捕食性螨(即安科纳似前线螨(Baker))的跗线被捕食性螨的营养质量。
被捕食性螨在含有麸皮、小麦胚芽和酵母的培养基上培养，培养基在带通风盖的塑料容器(8×5，7cm)中。容器保持在22±1℃的温度和85±5％的相对湿度下。
将一只妊娠雌性安科纳似前线螨从大规模饲养设施转移到放置在一层湿棉花上的西红柿叶平台(2×4cm)上。平台的边缘覆盖着薄纸，以防止螨逃脱。被捕食性螨被随意提供。
连续4天每天计数每只雌性产卵数。分析中省略了第一天的产卵率，以限制实验前饮食的影响(Sabelis 1990)。每个处理重复10次。使用统计学软件R3.10(R DevelopmentCore Team 2012)将第2、3、4天的产卵量总和与泊松分布的GLM模型进行比较。结果在图3中示出。在西红柿叶平台提供T.fusarii使得安科纳似前线螨产卵数量显著增加(GLM，χ2＝20.418，d.f.＝1，p<0.001)，支持跗线螨可用作饲养前气门类捕食性螨的被捕食性螨。
实施例4：普遍前线螨对Tarsonemus fusarii和乳果螨的产卵率
本实验旨在评估用于另一种前气门类捕食性螨(即普遍前线螨(Baker))的跗线被捕食性螨的营养质量。
被捕食性螨在含有麸皮、小麦胚芽和酵母的培养基上培养，培养基在带通风盖的塑料容器(8×5，7cm)中。容器保持在22±1℃的温度和85±5％的相对湿度下。
将一只妊娠雌性普遍前线螨从大规模饲养设施转移到放置在一层湿棉花上的西红柿叶平台(2×4cm)上。平台的边缘覆盖着薄纸，以防止螨逃脱。被捕食性螨被随意提供。
连续4天每天计数每只雌性产卵数。分析中省略了第一天的产卵率，以限制实验前饮食的影响(Sabelis 1990)。每个处理重复10次。使用统计学软件R3.10(R DevelopmentCore Team 2012)将第2、3、4天的产卵总量与用类泊松(quasipoisson)分布的GLM模型进行比较以校正不平均分布。结果在图4中示出。
当喂食Tarsonemus fusarii与喂食乳果螨和没有食物的对照处理相比时，观察到普遍前线螨显著更高的产卵率(GLM，χ2＝15.039，d.f.＝2,p＝0.002)。
因此，跗线被捕食性螨有潜力用于饲养前气门类捕食性螨(诸如普遍前线螨)，而传统使用的饲料螨(诸如乳果螨)则没有。
实施例5：用Tarsonemus confusus和Tarsonemus fusarii饲养时斯氏钝绥螨的产 卵率的比较
如实施例1和2所示，斯氏钝绥螨能够成功的用Tarsonemus fusarii饲养。在当前的实施例中，与Tarsonemus fusarii进行比较测试了斯氏钝绥螨对Tarsonemus confusus的产卵率。
被捕食性螨在含有麸皮、小麦胚芽和酵母的培养基上培养，培养基在带通风盖的塑料容器(8×5，7cm)中。容器保持在22±1℃的温度和85±5％的相对湿度下。
将一只妊娠雌性斯氏钝绥螨从大规模饲养设施转移到放置在一层湿棉花上的黑色PVC平台(2×4cm)上。平台的边缘覆盖着薄纸，以防止螨逃脱。添加了一片带有棉线的黑色塑料(1×1cm)，以提供庇护所和产卵基质。被捕食性螨被随意提供。连续3天每天计数每只雌性产卵数。每种处理，设置12个重复。分析中省略了第一天的产卵率，以限制实验前饮食的影响(Sabelis 1990)。使用GLM模型(类泊松分布)将第2和第3天的产卵量总数进行比较。使用一般线性假说检验(R,Lenth 2016中lsmeans包的glht函数)确定处理之间的对比。使用统计软件R 3.10(R Development Core Team 2012)进行分析。
实验结果在图5中示出。当提供T.fusarii或T.Confusus时，产卵量相似(GLM；χ2＝0.0164，df＝1，p＝0.898)。该结果证实，来自跗线螨属的其他跗线螨种(诸如T.confusus)，可用作大规模生产捕食性螨的食物来源。
实施例6：斯氏钝绥螨对Fungitarsonemus sp.的产卵率
进行这次实验以评估另一跗线被捕食性螨(即Fungitarsonemus sp.)的营养质量。
从常春藤叶子(Hedera helix L.)收集Fungitarsonemus sp.活动个体和卵。将被捕食性螨转移到倒置放置在一层湿棉花上的常春藤叶盘(2×4cm)上。叶盘的边缘覆盖着湿润的薄纸，以防止螨逃脱。将实验前饥饿24小时的一只妊娠雌性斯氏钝绥螨转移至叶盘。每天将新鲜的菌跗线螨活动个体和卵转移到试验叶平台，以便随意提供被捕食性螨。添加了一片带有棉线的黑色塑料(1×1cm)，以提供庇护所和产卵基质。连续2天每天计数雌性产卵数。叶盘保持人工气候室，其设置为22±1℃的温度和85±5％的相对湿度。每种处理，设置6个重复。使用GLM模型(泊松分布)将2天的产卵量总数进行比较。使用一般线性假说检验(R,Lenth 2016中lsmeans包的glht函数)确定处理之间的对比。使用统计软件R 3.10(RDevelopment Core Team 2012)进行分析。
结果在图6中示出。当在常春藤叶盘上提供Fungitarsonemus sp.时，计数了显著更高的卵的数量(GLM，χ2＝5.062，df＝1，p＝0.0245)。这证实了跗线螨属以外的跗线螨也可用于捕食性螨饲养。
Claims (15)
1.螨组合物，包括：
-捕食性螨种群，
-被捕食性螨种群，和
-用于所述种群的个体的载体，
其中，所述被捕食性螨种群包括来自跗线螨科的螨，
前提是所述螨组合物不包括选自由侧多食跗线螨和Phytonemus pallidus组成的组的活的螨种。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述被捕食性螨种群包括至少一种选自以下属的螨种：
-跗线螨属，例如，谷跗线螨、Tarsonemus floricolus、Tarsonemus myceliophagus、Tarsonemus subcorticalis、Tarsonemus minimax；Tarsonemus fusarii；
-Fungitarsonemus属，例如，Fungitarsonemus peregrinus,、Fungitarsonemuspulvirosus；
-Heterotarsonemus属，例如，Heterotarsonemus lindquisti、Heterotarsonemuscoleopterorum；
-Daidalotarsonemus属，例如，Daidalotarsonemus vandevriei、Diadalotarsonemustesselatus；
-Neotarsonemoides属，例如，Neotarsonemoides denigratus；
-Pseudacarapis属，例如，Pseudacarapis indoapis。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，进一步包括用于所述螨种群的食物来源。
4.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，用于所述被捕食性螨种群的食物来源包含非光合作用植物材料，诸如小麦胚芽和花粉。
5.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述载体包括草物种的谷粒或其任何部分，诸如胚芽或麸皮。
6.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述载体包括平均最长轴线介于1.0至20.0mm的载体元件。
7.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述捕食性螨种的个体数相对于所述被捕食性螨的个体数为约1∶1至约1∶500；特别地，约1∶50至约1∶200；更特别地，介于1∶75至1∶125。
8.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述捕食性螨种是中气门类螨种或前气门类螨种，特别是植绥螨科。
9.前述权利要求中任一项所述的组合物，进一步包括来自肉座菌科的真菌。
10.容器，包括前述权利要求中任一项所述的组合物。
11.一种饲养捕食性螨的方法，所述方法包括
-提供权利要求1至9中任一项所述的组合物，以及
-使得所述捕食性螨种群的个体能够以所述被捕食性螨种群为食。
12.权利要求11所述的方法，进一步包括在5至35℃和30至100％相对湿度下维持所述螨组合物。
13.来自权利要求1的跗线螨科所选的属的一种或更多种螨种控制真菌生长的用途。
14.权利要求13所述的用途，其中，真菌生长控制于捕食性螨饲养系统中。
15.一种用于控制作物中害虫的方法，所述方法包括向所述作物提供根据权利要求1至9中任一项的螨组合物。
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