CN113150182A

CN113150182A - 一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法

Info

Publication number: CN113150182A
Application number: CN202110556510.7A
Authority: CN
Inventors: 龙芳羽; 王钰; 向安妮; 岳田利; 袁亚宏; 任虹; 冯小平
Original assignee: Northwest A&F University
Current assignee: Northwest A&F University
Priority date: 2021-05-21
Filing date: 2021-05-21
Publication date: 2021-07-23

Abstract

本发明涉及食品医疗技术领域，具体涉及一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法。克服了传统富硒茶多糖提取温度高、耗时长、萃取溶剂量大等缺点。本发明以富硒茶为原料，硒多糖得率为评价指标，优化超高压提取富硒茶多糖的工艺条件，得到硒多糖的最佳提取工艺条件为：处理压力400 MPa，料液比1:40，保压时间10 min，在此条件下，硒多糖得率最高为2.48%。超高压作为一种非热提取技术，可以较大程度的保存富硒茶中生理活性成分不变，为富硒茶多糖的提取提供了新的手段。

Description

一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法

一、技术领域：

本发明涉及食品医疗技术领域，具体涉及一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法。

二、背景技术：

富硒茶是人体补充有机硒的重要来源，具有降低血糖、胆固醇、心血管疾病发生率、癌症等多重功效。

富硒茶的生理活性成分主要有蛋白质、多糖、多酚、硒等物质，其中多糖和硒会结合形成有机化合物硒多糖，硒多糖不仅极大的降低了无机硒带来的毒性，而且具有硒与多糖的双重生理活性，易被人体吸收利用，在降血糖、降血脂、免疫调节、抗肿瘤和抗菌等方面发挥重要作用。此外，硒多糖是膳食补充剂中硒的重要来源，可以作为功能性产品配方的成分。

目前，硒多糖的高效提取已成为多糖研究领域的热点。传统富硒茶多糖的提取方法为热水提取，普遍存在提取温度较高、时间较长等缺点，而长时间的高温处理会破坏硒多糖的结构，进而影响其生理活性。

三、发明内容：

本发明为了克服传统富硒茶多糖提取温度高、耗时长、萃取溶剂量大等缺点，提供一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法，其特征在于：所述的方法步骤为：

步骤1)对富硒茶叶进行清洗、烘干至60℃、粉碎，然后过60目筛制成富硒茶干粉；

步骤2)称取富硒茶干粉，通过蒸馏水进行超高压提取；

步骤3)将提取后的溶液在转速为4500r/min下进行离心15min，收集上清液；

步骤4)将上清液与Sevage溶液按体积比为3:1混合，去除蛋白质，收集上清液，收集2次；

步骤5)合并两次上清液后，旋转蒸发浓缩至1/3体积，然后加入4倍体积的无水乙醇，封口静置过夜，离心取沉淀，将沉淀进行冷冻干燥，得到富硒茶多糖粉末。

进一步，步骤2)的提取压力为200-500MPa，提取时间3-20min，富硒茶干粉与蒸馏水的料液比1:20-50g/mL。

进一步，步骤4)中Sevage溶液为体积比为4:1的氯仿和正丁醇的混合液。

与现有技术相比，本发明具有的优点和效果如下：

1)本发明采用超高压提取，具有提取温度低、提取时间短、较大程度的保护硒多糖结构不被破坏，获得具有较高生理活性的硒多糖。

2)本发明提取技术操作简便，能够较大程度的保留硒多糖的生理活性，满足消费者对产品功能性和疗效的需求，具有广阔的应用市场。

3)本发明的目的是通过研究提取压力、料液比以及保压时间对硒多糖得率的影响，进一步确定硒多糖的最佳提取工艺参数，为超高压提取富硒茶中的硒多糖提供依据。

4)本发明提取方法硒多糖得率最达2.48％。

四、附图说明：

图1为提取压力对硒多糖得率的影响；

图2为提取时间对硒多糖得率的影响；

图3为料液比对硒多糖得率的影响。

五、具体实施方式：

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本实施例提供一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法，方法步骤为：

步骤2)称取富硒茶干粉，通过蒸馏水进行超高压提取；提取压力为200-500MPa，提取时间3-20min，富硒茶干粉与蒸馏水的料液比1:20-50g/mL。

步骤4)将上清液与Sevage溶液(氯仿：正丁醇＝4:1，v/v)按体积之比3:1，去除蛋白质，收集上清液重复以上操作一次；

本发明采用苯酚-硫酸法测定硒多糖含量，并计算硒多糖提取率：

精确称取0.0100g富硒茶多糖粉末，用蒸馏水定容至100mL得0.1mg/mL粗多糖溶液；

标准曲线的配置：精密称取在60℃烘箱中干燥至恒重的葡萄糖标品0.050g，用蒸馏水定容至500mL，得0.1mg/mL葡萄糖标准溶液。分别取上述标液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL到对应编号的试管中，不足1.0mL用蒸馏水补足1.0mL，每组3个平行。得到浓度为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL的葡萄糖标准溶液。分别向每组试管加5％苯酚1mL、5mL浓硫酸。使溶液充分混合均匀，室温下反应30min后于490nm下测其吸光度。空白调零为1mL蒸馏水加1mL 5％苯酚溶液以及5mL浓硫酸。

根据葡萄糖标准曲线与公式计算硒多糖得率。

其中C是提取物中多糖的含量，W代表干燥的样品重量。

现通过以下实验证明本发明多糖得率：

1、最佳提取时间及压力的筛选

按照表1所示，提取硒多糖，每组实验重复3次，测定多糖含量。

表1筛选最佳提取压力及时间

2、最佳料液比的筛选

在上述筛选出的最佳提取压力及时间(用字母A、B代替)的基础上筛选最佳提取料液比，设计不同料液比的实验配方如表2,称取同样重量的茶叶干粉，超高压提取，除蛋白，醇沉干燥，定容，每组实验设置3个平行，测定多糖含量。

表2筛选最佳料液比

3、提取压力对硒多糖得率的影响

称取富硒茶多糖粉末2.0g，在提取时间10min，料液比1:40，提取压力分别为200MPa、300MPa、400MPa、500MPa的条件下进行超高压提取，提取后的溶液离心(4500r/min)15min，收集上清液，然后用Sevage溶液(氯仿：正丁醇＝4:1，v/v)去除蛋白质，合并上清液，旋转蒸发浓缩至1/3体积，然后加入4倍体积的无水乙醇，封口静置过夜，离心取沉淀，冷冻干燥得到富硒茶多糖粉末。采用苯酚-硫酸法测定硒多糖含量，并计算硒多糖提取率。

结果表明：硒多糖得率随压力变化为先减少后增加再减少，在400MPa时，硒多糖提取率达到最大值，如图1所示。因此400MPa为富硒茶多糖提取的最佳压力条件。这是由于超高压使细胞破裂，高压促使溶剂快速进入细胞内部溶解溶质，当压力卸除后，溶剂开始渗出；但是压力过大会导致泄压后过多的杂质被溶剂带出，影响硒多糖游离到细胞外，最终降低提取率。

4.提取时间对硒多糖得率的影响

称取富硒茶多糖粉末2.0g，在料液比1:40，提取压力400MPa，提取时间分别为3min、5min、10min、20min的条件下进行超高压提取，提取后的溶液离心(4500r/min)15min，收集上清液，然后用Sevage溶液(氯仿：正丁醇＝4:1，v/v)去除蛋白质，合并上清液，旋转蒸发浓缩至1/3体积，然后加入4倍体积的无水乙醇，封口静置过夜，离心取沉淀，冷冻干燥得到富硒茶多糖粉末。采用苯酚-硫酸法测定硒多糖含量，并计算硒多糖提取率。

结果表明：硒多糖得率随时间先增加后减少，如图2所示，保压10min为硒多糖提取的最佳时间。这是由于超高压使细胞破碎需要一定时间，高压下溶剂因为渗透压快速进入细胞内部溶解溶质，当压力卸除后，溶质才会随溶剂开始渗出，10min时细胞已破裂，若时间过长，细胞破碎过度，泄压后，过多的杂质会随溶剂溶出，影响硒多糖游离到细胞外。

5.料液比对硒多糖得率的影响

不同料液比会影响超高压辅助提取硒多糖的得率，随着料液比的增大，硒糖得率也相应的提高，如图3所示，料液比在1:20～1:40g/mL范围内，料液比增大，多糖得率也提高，但增大到一定比例后，多糖得率有所下降。这是由于超高压条件下，高压使细胞破碎，溶剂越多，细胞两侧浓度差越大，溶剂能更快进入细胞，溶质溶出细胞，溶剂达到一定量后，溶质不再溶出，若继续增加溶剂，会导致后续的能源消耗。因此，料液比以1:40g/mL为最佳。

因此，得到富硒茶多糖的最佳提取工艺条件为：处理压力400MPa，料液比1:40，保压时间10min。在此条件下，硒多糖的提取率最高为2.48％。

以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。

Claims

1.一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法，其特征在于：所述的方法步骤为：

步骤2)称取富硒茶干粉，通过蒸馏水进行超高压提取；

2.根据权利要求1所述的一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法，其特征在于：所述的步骤2)的提取压力为200-500MPa，提取时间3-20min，富硒茶干粉与蒸馏水的料液比1:20-50g/mL。

3.根据权利要求1或2所述的一种利用超高压提取富硒茶多糖的方法，其特征在于：所述的步骤4)中Sevage溶液为体积比为4:1的氯仿和正丁醇的混合液。