CN113142388A - 一种微生物动物营养液饲料及其制备方法 - Google Patents

一种微生物动物营养液饲料及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种微生物动物营养液饲料及其制备方法，包括：益生菌菌液、中药提取物和微量元素添加剂。所述益生菌菌液包括：小韦荣氏球菌、多对毛螺菌等；中药提取物包括：焦山楂、党参、莱菔子、蒲公英、陈皮、山药、胡蔓藤、黄芪。微量元素添加剂包括：羟基甲硫氨酸铁、硫酸亚铁、羟基甲硫氨酸锌、硫酸锌、酵母硒、亚硒酸钠、硫酸锰。本发明能显著增加肉鸡平均日增重、平均日采食量，显著降低料肉比；显著增加蛋鸡平均产蛋数、单蛋平均质量；显著增加肉鸡胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数、和血清IgG含量。本发明能显著增加猪平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比；显著增加猪屠宰率、净肉率，显著降低了胴体冷却损失率。

Description

一种微生物动物营养液饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及动物营养液或功能饲料领域，具体涉及一种微生物动物营养液饲料及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平不断提高，人们对肉制品的品质要求越来越高，绿色无污染的养殖业逐渐成为人们的追求和期望。我国畜牧养殖业参差不齐，畜禽对饲料的消化利用率低，造成饲料资源潜在的浪费微生物在胃肠道壁的定殖效果不稳定。大量使用抗生素和含重金属的添加剂造成肉品质下降，甚至危害人体。肠道菌群的稳态研究近年来在医学和动物营养学业越来越热门。能够改善饲养动物的肠道菌群，提高动物免疫力和消化能力即能节省饲料，减少抗生素等药物的使用，最终改善肉品质。
现有技术问题：微生物发酵动物饲料在国内外的报道越来越多，但是由于其生产成本很高或质量不稳定，造成使用效果不好。添加单一微生物的营养液无法起到多种功能，而多种微生物联合需要攻克微生物生存环境是否需要氧气，发酵温度，发酵pH，发酵必需的营养条件以及微生物营养液的保存和运输问题。
本申请旨在提供一种微生物动物营养液饲料及其制备方法，该微生物动物营养液包含多种有益肠道菌、微量元素添加剂和中药提取物等，能够改善饲养动物肠道菌群稳态，提高动物免疫力和消化吸收能力。并且，本申请还提供了该营养液的生产、保存和使用方法。此外，本发明依托该营养液还生产了家禽饲料。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种微生物动物营养液饲料及其制备方法。采用如下技术方案：
1.一种微生物动物营养液，包括：益生菌菌液、中药提取物和微量元素添加剂。
优选的，所述益生菌菌液包括：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、乳酸菌(lactic acid bacteria)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)、多对毛螺菌(Lachnospiramultiparus)。
优选的，中药提取物包括：焦山楂、党参、莱菔子、蒲公英、陈皮、山药、胡蔓藤、黄芪。
优选的，微量元素添加剂包括：羟基甲硫氨酸铁、硫酸亚铁、羟基甲硫氨酸锌、硫酸锌、酵母硒、亚硒酸钠、硫酸锰。
2.一种微生物动物营养液的制备方法，包括：
(1)菌液制备：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、乳酸菌(lactic acidbacteria)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)购自北纳生物。分别独立划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h。挑取菌落在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存。小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)取自健康人呕吐物(餐后2h采用物理刺激咽部取得样品)划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h。挑去菌落采用引物PCR验证：经PCR验证为阳性的小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)和多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)培养在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存。
(2)中药提取物制备：甲液：焦山楂50g、党参100g、莱菔子50g、蒲公英200g、山药50g加入1L纯净水，90摄氏度提取4h，提取液4摄氏度低温真空浓缩至200ml，备用。乙液：陈皮100g、胡蔓藤50g、黄芪100g采用乙醇在索氏提取器中提取4h，提取液浓缩至100ml后分散在500ml水中，超声震荡溶解，备用。
(3)微量元素添加剂配置：A液：1L纯净水中加入30mg羟基甲硫氨酸铁(30mg/L)、20mg羟基甲硫氨酸锌(20mg/L)震荡混匀，备用。B液：1L纯净水中加入30mg硫酸亚铁(30mg/L)、20mg硫酸锌(20mg/L)、5mg硫酸锰(5mg/L)，震荡混匀，备用。C液：1L纯净水中加入15mg酵母硒(15mg/L)，震荡混匀，备用。D液：1L纯净水中加入15mg亚硒酸钠(15mg/L)，震荡混匀，备用。
3.一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡产量的应用，所述微生物动物营养液饲料显著增加了平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
4.一种微生物动物营养液饲料提高蛋鸡产蛋量的应用，所述微生物动物营养液饲料显著增加了平均产蛋数、单蛋平均质量。
5.一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡免疫力的应用，所述微生物动物营养液饲料显著增加了胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数、和血清IgG含量。
6.一种微生物动物营养液饲料提高猪产量的应用，所述微生物动物营养液饲料显著增加了猪平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
7.一种微生物动物营养液提高猪胴体质量的应用，所述微生物动物营养液饲料显著增加了猪屠宰率、净肉率，显著降低了胴体冷却损失率。
有益效果：本发明提供的一种微生物动物营养液及制备的饲料能显著增加肉鸡平均日增重、平均日采食量，显著降低料肉比；显著增加蛋鸡平均产蛋数、单蛋平均质量；显著增加肉鸡胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数、和血清IgG含量。本发明还能显著增加猪平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比；显著增加猪屠宰率、净肉率，显著降低了胴体冷却损失率。
附图说明
图1是该微生物动物营养液制备流程和效果评价图。
具体实施方法
为使本发明专利的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例对本发明专利的具体实施方式进行详细说明。下述实施例中试验方法如无特殊说明，均为常规试验方法，下述实施例中所述的实验试剂及耗材如无特殊说明，均来自常规生化试剂公司。为使本发明专利的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例对本发明专利的具体实施方式进行详细说明。这些优选实施方式的示例在具体实施例中进行了例示。在此，还需要说明的是，为了避免因不必要的细节而模糊了本发明专利的技术方案，在实施例中仅仅示出了与根据本发明专利的方案密切相关的技术方案和/或处理步骤，而省略了关系不大的其他细节。
实施例1
本实施例提供一种微生物动物营养液，包括：益生菌菌液、中药提取物和微量元素添加剂。
进一步的地，所述益生菌菌液包括：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、乳酸菌(lactic acid bacteria)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)、多对毛螺菌(Lachnospiramultiparus)。
进一步的地，中药提取物包括：焦山楂、党参、莱菔子、蒲公英、陈皮、山药、胡蔓藤、黄芪。
进一步的地，微量元素添加剂包括：羟基甲硫氨酸铁、硫酸亚铁、羟基甲硫氨酸锌、硫酸锌、酵母硒、亚硒酸钠、硫酸锰。
实施例2
本实施例提供一种微生物动物营养液的制备方法，包括：
1.菌液制备
(1)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、乳酸菌(lactic acid bacteria)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)购自北纳生物。分别独立划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h。挑取菌落在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存。
(2)小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)、多对毛螺菌(Lachnospiramultiparus)取自健康人呕吐物(餐后2h采用物理刺激咽部取得样品)划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h。挑去菌落采用如下引物PCR验证：
小韦荣氏球菌F：CCGTACTGCATATCGGCTCG；小韦荣氏球菌R：GGAACTGTCACGTAACGTTCC；
多对毛螺菌F：GAACTGCAATGGCGTACGGC；多对毛螺菌R：CCATGTGGTTAACGTGCACTGGAC。
在冰浴中，按以下次序将各成分加入PCR管：
10μl 10×PCR mix
2μl 引物1(10pM)
2μl 引物2(10pM)
1μl 菌液或菌液提取的DNA模板(50ng-1μg/μl)
5μl ddH2O
95℃变性30s，58℃退火10s，72℃延伸20s，循环40次，PCR产物采用琼脂糖凝胶电泳验证。
经PCR验证为阳性的小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)和多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)培养在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存。
2.中药提取物制备
(1)甲液：焦山楂50g、党参100g、莱菔子50g、蒲公英200g、山药50g加入1L纯净水，90摄氏度提取4h，提取液4摄氏度低温真空浓缩至200ml，备用。
(2)乙液：陈皮100g、胡蔓藤50g、黄芪100g采用乙醇在索氏提取器中提取4h，提取液浓缩至100ml后分散在500ml水中，超声震荡溶解，备用。
3.微量元素添加剂配置
(1)A液：1L纯净水中加入30mg羟基甲硫氨酸铁(30mg/L)、20mg羟基甲硫氨酸锌(20mg/L)震荡混匀，备用。
(2)B液：1L纯净水中加入30mg硫酸亚铁(30mg/L)、20mg硫酸锌(20mg/L)、5mg硫酸锰(5mg/L)，震荡混匀，备用。
(3)C液：1L纯净水中加入15mg酵母硒(15mg/L)，震荡混匀，备用。
(4)D液：1L纯净水中加入15mg亚硒酸钠(15mg/L)，震荡混匀，备用。
实施例3
本实施例提供一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡产量的应用，包括：
1.实验方法
选取1日龄科宝肉仔鸡，随机分为2组，每组3个重复，每个重复8只鸡，共48只。对照组喂基础饲料(通威股份普通鸡饲料)和纯净水；试验组为微生物动物营养液组，饲含菌液纯净水并投喂中药和微量元素饲料。肉鸡饲养42天，计算平均日增重、平均日采食量和料肉比。
所述含菌液纯净水包括：lL纯净水中混入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液100mL、乳酸菌(lactic acid bacteria)液100mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)液100mL、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液50mL、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)液50mL、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)液50mL
所述中药和微量元素饲料包括：基础饲料1kg粉碎，加入甲液100ml、乙液80ml、A液50ml、B液50ml、C液40ml、D液20ml，再加适量纯净水混合均匀，采用制粒机重新压制成员大小的饲料颗粒。
2.实验结果
实验第42天统计每天采集的数据，统计如表1所示，微生物动物营养液饲料显著增加了平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
表1微生物动物营养液饲料增加肉鸡产量
对照组 实验组
平均日增重(g/d) 4.2±1.18 8.5±1.12**
平均日采食量(g/d) 62.25±18.18 120.14±12.52**
料肉比(g/g) 2.3±1.01 1.5±0.78**
实施例4
本实施例提供一种微生物动物营养液饲料提高蛋鸡产蛋量的应用，包括：
1.实验方法
选取1日龄产蛋鸡(海兰褐)，随机分为2组，每组3个重复，每个重复8只鸡，共48只。对照组喂基础饲料(通威股份普通鸡饲料)和纯净水；试验组为微生物动物营养液组，饲含菌液纯净水并投喂中药和微量元素饲料。鸡饲养120天自第一轮产蛋期结束，计算平均产蛋数、单蛋平均质量。
所述含菌液纯净水包括：lL纯净水中混入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液100mL、乳酸菌(lactic acid bacteria)液100mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)液100mL、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液50mL、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)液50mL、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)液50mL
所述中药和微量元素饲料包括：基础饲料1kg粉碎，加入甲液100ml、乙液80ml、A液50ml、B液50ml、C液40ml、D液20ml，再加适量纯净水混合均匀，采用制粒机重新压制成员大小的饲料颗粒。
2.实验结果
实验第120天统计每天采集的数据，统计如表2所示，微生物动物营养液饲料显著增加了平均产蛋数、单蛋平均质量。
表2微生物动物营养液饲料增加蛋鸡产蛋量
对照组 实验组
平均产蛋数(g/只) 6.2±2.17 10.3±3.12**
单蛋平均质量(g) 60.25±19.12 85.23±14.72**
实施例5
本实施例提供一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡免疫力的应用，包括：
1.实验方法
选取1日龄科宝肉仔鸡，随机分为2组，每组3个重复，每个重复8只鸡，共48只。对照组喂基础饲料(通威股份普通鸡饲料)和纯净水；试验组为微生物动物营养液组，饲含菌液纯净水并投喂中药和微量元素饲料。肉鸡饲养42天，屠宰后取胸腺、脾脏、法氏囊测量指数，取血清测量IgG(采用南京建成试剂盒按试剂盒说明书操作)。
所述含菌液纯净水包括：lL纯净水中混入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液100mL、乳酸菌(lactic acid bacteria)液100mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)液100mL、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液50mL、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)液50mL、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)液50mL
所述中药和微量元素饲料包括：基础饲料1kg粉碎，加入甲液100ml、乙液80ml、A液50ml、B液50ml、C液40ml、D液20ml，再加适量纯净水混合均匀，采用制丽机重新压制成员大小的饲料颗粒。
2.实验结果
实验第42天统计每天采集的数据，统计如表3所示，微生物动物营养液饲料显著增加了胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数、和血清IgG含量。
表3微生物动物营养液饲料增加肉鸡免疫力
对照组 实验组
胸腺指数 0.22±0.18 0.52±0.17**
法氏囊指数 0.13±0.18 0.32±0.12**
脾脏指数 0.08±0.01 0.19±0.08**
IgG(ug/ml) 21.23±8.01 35.25±10.08**
实施例6
本实施例提供一种微生物动物营养液饲料提高猪产量的应用，包括：
1.实验方法
选取达到出栏标准的杜洛克猪、伊比利亚猪和拉康姆猪三个品种，每个品种20头随机分为对照组和实验组，雌雄各半共60头。对照组喂基础饲料(通威股份普通猪饲料)和纯净水；实验组为微生物动物营养液组，饲含菌液纯净水并投喂中药和微量元素饲料。育肥期3周，记录数据并计算平均日增重、平均日采食量和料肉比。
所述含菌液纯净水包括：lL纯净水中混入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液100mL、乳酸菌(lactic acid bacteria)液100mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)液100mL、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液50mL、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)液50mL、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)液50mL。
所述中药和微量元素饲料包括：基础饲料1吨粉碎，加入甲液100L、乙液80L、A液50L、B液50L、C液40L、D液20L，再加适量纯净水混合均匀，投喂。
2.实验结果
实验3周统计每天采集的数据，统计如表4所示，微生物动物营养液饲料显著增加了平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
表4微生物动物营养液饲料增加猪产量
Figure BDA0002975254010000071
实施例7
本实施例提供一种微生物动物营养液提高猪胴体质量的应用，包括：
1.实验方法
选取达到出栏标准的杜洛克猪、伊比利亚猪和拉康姆猪三个品种，每个品种20头随机分为对照组和实验组，雌雄各半共60头。对照组喂基础饲料(通威股份普通猪饲料)和纯净水；实验组为微生物动物营养液组，饲含菌液纯净水并投喂中药和微量元素饲料。育肥期3周，记录数据并计算屠宰率、净肉率和胴体冷却损失率。
所述含菌液纯净水包括：lL纯净水中混入枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液100mL、乳酸菌(lactic acid bacteria)液100mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)液100mL、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液50mL、小韦荣氏球菌(Veillonella parvula)液50mL、多对毛螺菌(Lachnospira multiparus)液50mL。
所述中药和微量元素饲料包括：基础饲料1吨粉碎，加入甲液100L、乙液80L、A液50L、B液50L、C液40L、D液20L，再加适量纯净水混合均匀，投喂。
2.实验结果
实验第3周统计每天采集的数据，统计如表5所示，微生物动物营养液饲料显著增加了屠宰率、净肉率，显著降低了胴体冷却损失率。
表5微生物动物营养液饲料增加猪产量
Figure BDA0002975254010000081
以上所述仅是本申请的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本申请的保护范围。

Claims (7)

1.一种微生物动物营养液饲料，其特征在于，包括：益生菌菌液、中药提取物和微量元素添加剂；所述益生菌菌液包括：枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、乳酸菌lactic acidbacteria、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus、小韦荣氏球菌Veillonella parvula、多对毛螺菌Lachnospira multiparus；所述中药提取物包括：焦山楂、党参、莱菔子、蒲公英、陈皮、山药、胡蔓藤、黄芪；所述微量元素添加剂包括：羟基甲硫氨酸铁、硫酸亚铁、羟基甲硫氨酸锌、硫酸锌、酵母硒、亚硒酸钠、硫酸锰。
2.一种微生物动物营养液的制备方法，其特征在于，包括：
(1)菌液制备：枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、乳酸菌lactic acid bacteria、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus购自北纳生物，分别独立划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h；挑取菌落在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存；小韦荣氏球菌Veillonella parvula、多对毛螺菌Lachnospira multiparus取自健康人呕吐物划线培养在固体LB培养基上，35℃培养24h；挑去菌落采用引物PCR验证：经PCR验证为阳性的小韦荣氏球菌Veillonella parvula和多对毛螺菌Lachnospiramultiparus培养在液体LB培养基里震荡培养24h，4摄氏度保存；
(2)中药提取物制备：甲液：焦山楂50g、党参100g、莱菔子50g、蒲公英200g、山药50g加入1L纯净水，90摄氏度提取4h，提取液4摄氏度低温真空浓缩至200ml，备用；乙液：陈皮100g、胡蔓藤50g、黄芪100g采用乙醇在索氏提取器中提取4h，提取液分散在500ml水中，超声震荡溶解，备用；
(3)微量元素添加剂配置：A液：1L纯净水中加入30mg羟基甲硫氨酸铁、20mg羟基甲硫氨酸锌震荡混匀，备用；B液：1L纯净水中加入30mg硫酸亚铁、20mg硫酸锌、5mg硫酸锰，震荡混匀，备用；C液：1L纯净水中加入15mg酵母硒，震荡混匀，备用；D液：1L纯净水中加入15mg亚硒酸钠，震荡混匀，备用。
3.一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡产量的应用，其特征在于所述微生物动物营养液饲料显著增加了平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
4.一种微生物动物营养液饲料提高蛋鸡产蛋量的应用，其特征在于所述微生物动物营养液饲料显著增加了平均产蛋数、单蛋平均质量。
5.一种微生物动物营养液饲料提高肉鸡免疫力的应用，其特征在于所述微生物动物营养液饲料显著增加了胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数、和血清IgG含量。
6.一种微生物动物营养液饲料提高猪产量的应用，其特征在于所述微生物动物营养液饲料显著增加了猪平均日增重、平均日采食量，显著降低了和料肉比。
7.一种微生物动物营养液饲料提高猪胴体质量的应用，其特征在于所述微生物动物营养液饲料显著增加了猪屠宰率、净肉率，显著降低了胴体冷却损失率。
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