CN113056280A - 包含复合蘑菇培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种白桦茸、灵芝以及桑黄的复合培养方法，通过上述方法制造的复合培养菌丝体因为β葡萄糖含量高而具有优秀的健康功能性，而且能够作为各种食品的添加剂或烹调用调料使用。此外，在利用上述复合培养菌丝体腌制原料肉类时，能够轻易地制造出味道和风味出色的肉类食物。

Description

包含复合蘑菇培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法
技术领域
本发明涉及一种包含复合蘑菇培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法。
背景技术
桑黄(Phellinus linteus)也被称之为裂蹄木层孔菌，在东医宝鉴中以桑木耳为名记录于汤药篇中。桑黄生长在桑树的枝干上，除菌盖表面之外均为黄色。在初期貌似团成一团的泥块，而在长成之后变成从树桩上吐出的舌头形状，因此也被称之为树舌。自古以来，桑黄适用于如子宫出血、月经不调等症状的治疗，最近还有报告指出其具有优秀的肿瘤抑制、免疫力强化以及美白效果。
灵芝(Ganoderma lucidum)在夏季生长于阔叶树的树根。灵芝还被称之为秦始皇的不老草，在本草纲目中还将其与人参同列于上等药材之列。灵芝具有如强身健体、镇咳、消肿等功效，对如呼吸系统疾病、神经衰弱、心脏病、高血压等症状有良好的治疗效果，还能够降低胆固醇且具有抗癌效果。
此外，为了将上述蘑菇类适用于医药品、功能性食品的混合原材料，需要采摘子实体的蘑菇进行使用，但是蘑菇本身在自然状态下并不易于繁殖，而且还会因为过度采摘而导致资源枯竭以及生态系统破坏的问题。虽然能够采取利用如锯末等对子实体进行栽培的方法，但是上述方法仍然需要至少几个月的栽培时间。为了实现产业应用级别的原材料供应，需要消耗大量的生产设施以及经费，因此并不能满足大批量生产的需求。如上所述，虽然上述蘑菇类作为抗癌剂或免疫强化剂具有一定的效果，但是因为其供应比较有限且大批量生产以及快速生产困难而难以得到普遍应用。因此，对于上述蘑菇，最近正在积极开展能够呈现出与蘑菇菌的子实体同等效果的菌丝体的大批量培养方法相关研究。
在大韩民国注册专利第10-922311号中公开了一种对白桦茸、桑黄、灵芝、绣球菌以及冬虫夏草菌丝体进行复合培养的方法，在大韩民国注册专利第10-135648号中公开了一种白桦茸、桑黄以及灵芝的复合培养方法，在大韩民国注册专利第10-1652035号中公开了一种白桦茸、桑黄以及绣球菌的复合蘑菇菌丝体的培养方法。但是，复合培养菌丝体会因为其培养条件而在菌丝体所具有的自身酶活性或β葡聚糖含量等方面出现差异，而且在利用其加工食品时也会呈现出各不相同的味道和风味等。
本发明人发现通过复合培养方法获得的白桦茸、灵芝以及桑黄的复合培养菌丝体以及利用上述复合培养菌丝体的组合物具有血糖调节功能，从而完成了本发明。
先行技术文献
专利文献
(专利文献1)大韩民国注册专利第10-1923408号(发明的名称：白桦茸、灵芝以及桑黄菌丝体的复合培养方法，申请人：株式会社GIUNCHAN，注册日期：2018年11月23日)
(专利文献2)大韩民国注册专利第10-1652035号(发明的名称：白桦茸、桑黄以及绣球菌的复合蘑菇菌丝体的生产方法，申请人：株式会社GIUNCHAN，注册日期：2016年08月23日)
(专利文献3)大韩民国注册专利第10-1358648号(发明的名称：利用蘑菇提取物的白桦茸、桑黄以及灵芝的复合培养方法，申请人：LEETAEBONG，注册日期：2014年01月28日)
(专利文献4)大韩民国注册专利第10-1269410号(发明的名称：利用蘑菇培养基的白桦茸、桑黄、灵芝、绣球菌以及冬虫夏草的复合培养方法，申请人：LEETAEBONG，注册日期：2013年05月24日)
(专利文献5)大韩民国注册专利第10-0922311号(发明的名称：生成包含活性化的糖相关化合物的白桦茸、桑黄、灵芝、绣球菌以及冬虫夏草的复式培养方法，申请人：LEETAEBONG，注册日期：2009年10月12日)
专利内容
本发明的目的在于提供一种包含蘑菇复合培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法。
本发明涉及一种包含复合蘑菇培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法。
上述蘑菇菌素体的培养步骤，能够包括：(第1步骤)在将白桦茸、灵芝以及桑黄的子实体组织分别接种到马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)之后对各个蘑菇的菌素体进行单独培养的步骤；
(第2步骤)将在第1步骤中培养出的各个白桦茸、灵芝以及桑黄的3种菌丝体复合接种到马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato Dextrose Broth)中的步骤；
(第3步骤)对已接种3种菌丝体的马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato DextroseBroth)进行4～6周培养的步骤；
(第4步骤)将通过第3步骤的培养获取到的菌丝体接种到青稞培养基的步骤；以及，
(第5步骤)通过在青稞培养基中对所接种的菌丝体进行4～7周的追加培养而获取复合培养菌丝体的步骤。
上述第3步骤中的菌丝体培养，是在10～30％的相对湿度、25～30℃下执行为宜。此外，在初始的1～2周之内进行静置培养但以每天1～2次每次1～5分钟的周期进行搅拌为宜，接下来在以50～150rpm进行搅拌的同时进行振荡培养将有利于菌丝体的培养。
上述第4步骤中的青稞培养基，能够通过在对青稞进行4～8小时的水浸之后再进行脱水，接下来在以所脱水的青稞100重量份为基准添加碳酸钙0.5～2重量份之后在120～125℃下进行30～2小时的灭菌处理而获得。
上述第5步骤中的培养，是在40～60％的相对湿度、25～30℃下执行为宜。
上述血糖调节用组合物，能够作为1型糖尿病或2型糖尿病的预防、治疗、改善用药学组合物或健康功能食品提供。
本发明还提供一种利用在如上所述的方法制造的蘑菇菌丝体粉末中包含白瓜、甜南瓜、海藻以及褐藻苷苔的加热处理物的血糖以及食物调节用颗粒组合物。
上述白瓜、甜南瓜、海藻以及褐藻苷苔直接使用生的状态，尤其是白瓜、甜南瓜仅使用去籽之后的果肉。
上述加热处理物，能够在以白瓜100重量份为基准包含甜南瓜50～150重量份、海藻30～70重量份以及褐藻苷苔30～70重量份的混合物中添加水200～400重量份之后在120～130℃下进行1～5小时的加热处理而获得。
上述颗粒组合物，能够通过以蘑菇菌丝体粉末100重量份为基准添加上述加热处理物80～120重量份而获得。
上述颗粒组合物，还能够包括蚱蜢成虫粉末以及蚕蛹粉末，能够以蘑菇菌丝体粉末为基准添加蚱蜢成虫粉末30～70重量份以及蚕蛹粉末30～70重量份。上述蚱蜢或蚕蛹，在120～200℃的温度下进行10～20分钟的炒制或加热之后使用为宜。
因此，上述颗粒组合物，能够作为需要对血糖进行调节的1型糖尿病或2型糖尿病的预防、治疗、改善用药学组合物或健康功能食品提供。
接下来，将对本发明进行详细的说明。
在本发明中用于蘑菇菌丝体培养的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato DextroseAgar)，能够通过对以总体积
Figure BDA0002356470510000061
为基准包含马铃薯淀粉3～5g、葡萄糖10～30g，琼脂糖10～30g的混合物进行灭菌而制造。此时，能够加水至总体积达到
Figure BDA0002356470510000062
。上述灭菌在至少120～125℃下执行15～20分钟为宜。作为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)的最佳制造条件，能够通过在向马铃薯淀粉4g、葡萄糖20g以及琼脂糖15g加水至总体积达到
Figure BDA0002356470510000063
之后进行灭菌而获得。
此外，在本发明中用于蘑菇菌丝体培养的马铃薯葡萄糖培养液(PDB，PotatoDextrose Broth)，能够通过在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)的制造条件中利用水替代琼脂糖而制造。作为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)的最佳制造条件，能够通过在向马铃薯淀粉4g以及葡萄糖20g加水至总体积达到
Figure BDA0002356470510000071
之后进行灭菌而获得。
在上述第1步骤中对各蘑菇子实体进行单独培养时，在将各个蘑菇子实体碎片分别接种到马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)之后再在25～30℃下进行1～3周培养为宜，此时的培养期间，能够根据蘑菇子实体个体所具有的生长能力在1～3周范围内进行适当的调节。此外，在上述条件下进行培养时的相对湿度为10～60％为宜。当湿度未满10％或超过60％时，可能会减缓菌丝体的生长速度。
但是，当培养期间未满1周时菌丝体可能无法生长到可在日后对液体培养进行活性化的程度，而且当超过3周时也可能导致在日后的液体培养时无法有效培养菌丝体的问题。此外，当培养温度未满25℃或超过30℃时，同样可能会对液体培养时的菌丝体培养造成不良影响。
在上述第2步骤中将3种菌丝体复合接种到马铃薯葡萄糖培养液(PDB，PotatoDextrose Broth)中的过程中，当对第1步骤中所培养的各个蘑菇的菌丝体进行复合接种时以大致类似的量对菌丝体进行接种即可，但较佳地，在将各个所培养出的菌丝体切割成0.5～2㎜2之后以各个蘑菇菌丝体3～7片的的量将3种菌丝体复合接种到马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato Dextrose Broth)中为宜。
在上述第3步骤中，在25～30℃下执行菌丝体的培养为宜，尤其是，当培养温度未满25℃时可能会导致菌丝体无法有效生长的问题，而当超过30℃时同样可能会导致菌丝体的培养缓慢的问题。此外，在初始的1～2周之内进行静置培养但以每天1～2次每次1～5分钟的周期进行搅拌为宜，接下来在以50～150rpm进行搅拌的同时进行振荡培养将有利于菌丝体的培养。此外，在上述条件下进行培养时的相对湿度并不受到严格限制，但较佳地将相对湿度控制在10～30％为宜。
在上述第4步骤中，能够以青稞培养基1㎏为基准将通过第3步骤的培养获得的菌丝体以培养液状态接种各
Figure BDA0002356470510000081
此时，如果所接种的菌丝体培养液未满
Figure BDA0002356470510000082
可能会导致在青稞培养基中的追加培养不良的问题，而如果所接种的培养液超过
Figure BDA0002356470510000083
也可能会导致培养的活性化程度过低的问题。
上述第4步骤中的青稞培养基，能够通过在对青稞进行4～8小时的水浸之后再进行脱水，接下来在以所脱水的青稞100重量份为基准添加碳酸钙0.5～2重量份之后在120～125℃下进行30～2小时的灭菌处理而获得。此时，如果使用没有被水充分浸泡的水浸时间未满4小时的青稞，会因为菌丝体培养时的水分不足而导致无法有效地将青稞作为营养源使用的问题，而如果水浸时间超过8小时，因为青稞并不能吸收更多的水分而只会导致制造时间延长的问题。
在上述第5步骤中，在25～30℃下执行培养为宜。当培养温度未满25℃时可能会导致菌丝体无法有效生长的问题，而当超过30℃时同样可能会导致菌丝体的培养缓慢的问题。此外，在上述条件下进行培养时的相对湿度为40～60％为宜。当湿度未满40％或超过60％时，可能会减缓菌丝体的生长速度。
本发明能够提供一种包含白桦茸、灵芝以及桑黄的复合培养菌丝体以及药剂学赋形剂的药学组合物。
上述药学组合物，能够分别通过一般的方法以如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浊液、乳液、糖浆、气雾等经口剂型或外用剂、栓剂以及灭菌注射溶液的形态进行制剂化后使用。作为可包含于上述药学组合物中的载体、赋形剂以及稀释剂，包括如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉，硬脂酸镁以及矿物油。在进行制剂化时，使用通常所使用的如填充剂、增量剂、结合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂等稀释剂或赋形剂进行调配。作为经口给药的固态制剂，包括如片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，而如上所述的固态制剂是通过在适用本发明的复合培养菌丝体中混合一种以上的如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等赋形剂的方式进行制造。而且，除了单纯的赋形剂之外，还使用如硬脂酸镁、滑石粉等润滑剂。作为经口给药的液态制剂，包括如悬浊液、内溶液剂、乳剂、糖浆等，除了通常所使用的单纯稀释剂即水、液体石蜡之外，还能够包含如湿润剂、甜味剂、芳香基、保存剂等多种赋形剂。作为非经口给药的制剂，包括如灭菌水溶液、非水性溶剂、悬浊剂、乳剂、冻结干燥制剂、栓剂。作为非水性溶剂、悬浊剂，能够使用如丙二醇、聚乙二醇、橄榄油等植物性油以及如油酸乙酯等可注射的酯类等。作为栓剂的基剂，能够使用如混合脂肪酸甘油酯(witepsol)、聚乙二醇、吐温(tween)61、可可脂、月桂酸酯、甘油明胶等。
适用本发明的药学组合物的给药量，可能会根据治疗对象的年龄、性别、体重、治疗目标疾病或病理状态、疾病或病理状态的严重程度、给药路径以及处方医师的判断而有所不同。相关从业人员能够以上数因素为基础决定给药量，一般的给药量在0.01水浸/㎏/天至2000水浸/㎏/天的范围之内。更较佳的给药量为1水浸/㎏/天至500水浸/㎏/天。在给药时，能够每天进行一次给药，也能够分成数次进行给药。上述给药量在任何方面都不是对本发明的范围做出的限定。
适用本发明的药学组合物，能够通过多种途径给药至如老鼠、家畜、人类等哺乳动物。能够通过所有方式进行给药，例如能够通过经口、直肠或静脉、肌肉、皮下、子宫内膜或脑血管内注射的方式进行给药。适用本发明的复合培养菌丝体技术没有毒性以及副作用，因此是即使以预防为目的长时间服用时也能够安心使用的药剂。
此外，本发明提供一种包含白桦茸、灵芝以及桑黄的复合培养菌丝体和食品学上可容许的食品辅助添加剂的血糖调节用健康功能食品。上述白桦茸、灵芝以及桑黄的复合培养菌丝体，能够在适用本发明的健康功能食品中以0.001～100重量％进行添加。适用本发明的健康功能食品，包括如片剂、胶囊剂、丸剂或液剂等形态，作为能够添加适用本发明的复合培养菌丝体的食品，包括如各种饮料、肉类、香肠、面包、糖果类、快餐类、面类、冰激凌、乳制品、汤羹、离子饮料、饮用水、酒精饮料、口香糖、茶以及维生素复合剂等。
本发明涉及一种包含蘑菇菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法，能够通过在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)中对蘑菇菌丝体进行单独培养、在马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato Dextrose Broth)中对菌丝体进行复合培养并在青稞培养基中对通过上述方式获得的复合培养菌丝体进行培养而提供一种血糖调节能力最为优秀的复合蘑菇菌丝体。
具体实施方式
接下来，将对适用本发明的较佳实施例进行详细的说明。但是，本发明并不限定于在此说明的实施例，还能够以其他形态实现。在此说明的实施例只是为了更加彻底且完整地公开所介绍的内容，并向相关从业人员充分传递本发明的思想。
<制造例1.白桦茸、灵芝以及桑黄菌丝体的复合培养>
在对白桦茸、灵芝、桑黄的子实体组织进行分离并接种到马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)之后，在27～29℃下对各个蘑菇的菌丝体进行培养。在准备以
Figure BDA0002356470510000121
为单位细分的马铃薯葡萄糖培养液(PDB)之后，利用解剖刀将在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)中培养的各个蘑菇菌丝体切割成1㎜2，然后向装有马铃薯葡萄糖培养液(PDB)的每个三角烧瓶分别复合接种3种菌株各5片。
将复合接种的培养基在生物需氧量培养器(BOD incubator，Bio-Oxygen Demand培养器，低温培养器)中以27～28℃、湿度20％的条件进行1周的静置培养，且在培养期间内每天搅拌约1分钟左右。在1周之后将复合接种并进行培养的烧瓶移动到振荡培养器中并在27℃、100rpm条件下进行4周培养，从而制造出复合培养菌丝体培养液。
在对青稞进行6小时的水浸之后再进行8小时的脱水，接下来以经过脱水的青稞100g为基准添加1g的碳酸钙并均匀混合，然后利用高压灭菌器在121℃下进行1小时的灭菌而制造出青稞培养基。在完成灭菌之后冷却至25℃的青稞培养基每1㎏中，将经过5周培养的复合培养菌丝体培养液分株接种各
Figure BDA0002356470510000122
在完成接种之后，在温度维持26～28℃且湿度维持45～50％的培养室中进行30天的培养。
对于完成培养的复合培养菌丝体，在包含青稞的状态下利用干燥器在57～60℃下进行24小时的干燥并利用针磨粉碎器进行粉碎而制造成粉末。
其中，本发明发与在大韩民国注册专利第10-1923408号的实施例1种公开的方法相同。
<比较制造例1.各个蘑菇菌丝体的制造>
利用与实施例1相同的方法，但是作为比较条件，按照相同的过程执行白桦茸、灵芝、桑黄的单独菌丝体培养和桑黄以及白桦茸的复合培养，从而获得蘑菇菌丝体。
【表1】
菌丝体
比较制造例1-1 白桦茸菌丝体
比较制造例1-2 灵芝菌丝体
比较制造例1-3 桑黄菌丝体
比较制造例1-4 白桦茸以及桑黄的复合菌丝体
<试验例1.血糖调节效果确认>
试验例1-1.在1型糖尿病动物模型中的血糖调节效果
作为1型糖尿病动物的模型，利用美国癌症研究所(ICR)小鼠(雄性，7周龄，每组7只)以50mg/㎏的量静脉注射四氧嘧啶(Alloxan，Sigma，MA，USA)而进行诱导。在试验组中，将蘑菇菌丝体的干燥粉末悬浊到磷酸盐缓冲盐水(PBS，Phosphate buffered saline)中并从四氧嘧啶(alloxan)给药的3天前开始以2㎎/小鼠的量进行每天1次的经口给药。此外，在四氧嘧啶(alloxan)给药之后以3天为间隔采集血液至第9天并对血液中的葡萄糖含量进行测定，其结果如下述表2所示。
【表2】
Figure BDA0002356470510000141
参阅表2可以确认，在复合培养菌丝体给药组动物中，在给药期间内能够维持与四氧嘧啶未给药组即非糖尿病诱导小鼠几乎类似的血糖水准。
试验例1-2.在2型糖尿病动物模型中的血糖调节效果
作为2型糖尿病动物模型，购买使用了db/db糖尿病小鼠(5周龄，雄性)。在试验组中，将蘑菇菌丝体的干燥粉末悬浊到磷酸盐缓冲盐水(PBS)之后以2㎎/小鼠的量每天1次进行8周的经口给药并对血液中的葡萄糖含量进行测定，其结果如下述表3所示。
【表3】
Figure BDA0002356470510000151
db/db糖尿病小鼠的特征在于血液中葡萄糖浓度维持390～420㎎/dL，但是通过表3中的结果可以确认，制造例1的复合培养菌丝体给药组与未处理组相比减少了约50％左右。
通过如上所述的动物试验可以确认，在本发明中制造出的复合培养菌丝体具有非常优秀的血糖调节能力。
接下来，为了将复合培养菌丝体制造成便于糖尿病患者直接服用以及携带的状态而进行了制剂化试验。
此时为了进行制剂化，考虑了如是否属于能够在服用时轻易地缓解饥饿感并快速调节血糖的形态、大体上是否能够提供筋力不足的糖尿病患者需要的蛋白质、是否有可持续服用的较好的味道和香气等。
此外，最终决定将其制造成能够有效地利用一次性包装纸进行包装且在没有水的状态下也能够方便地服用的颗粒形态。
通过预备试验发现当采用粉末混合物状态时难以在没有水的状态下进行服用，因此粉末混合物形态被排除在外，而且丸状形态的坚硬剂型在服用之后需要一定的时间才能够在胃中消化且因此无法快速地对血糖进行调节，因此丸状剂型同样被排除在外。
<制造例2.利用白瓜、甜南瓜、海藻以及褐藻苷苔的加热处理物的制造>
购买白瓜果实以及甜南瓜果实，且白瓜和甜南瓜仅使用了去籽之后的果肉部分。此外，购买使用了以生的状态销售的海藻以及褐藻苷苔。
利用通过上述方式准备的原材料，在将白瓜、甜南瓜、海藻、褐藻海苔以及水按照如表2所示的方式投入到高压灭菌器并在121℃、1.5大气压下进行1小时的加热之后再将其冷却至室温状态。接下来，将经过冷却的内容物投入到食物用粉碎机中进行粉碎，从而制造出粥状形态的加热处理物。
【表4】
Figure BDA0002356470510000161
<比较制造例2.比较条件加热处理物的制造>
按照制造例2的条件制造加热处理物，且各个成分的含量以下述表5中的条件进行制造。
【表5】
Figure BDA0002356470510000171
<实施例1以及比较例1.颗粒组合物的制造-I>
按照下述表6中的条件对各个粉末和加热处理物进行混合而制造成糊状状态，然后利用颗粒机进行颗粒化。此时的颗粒化过程如下所述。利用逆旋转颗粒机(GARYEO产业)制造成颗粒形态并将所制造出颗粒物在50℃的干燥室中进行5小时的干燥处理直至其水分含量达到3～4重量％，接下来利用筛子(sieve)筛选回收直径为0.5㎜以上的颗粒物。
对于作为颗粒原材料使用的蚱蜢成虫以及蚕蛹的粉末，按照如下所述的方式进行制造。在从昆虫饲养农户处购买蚱蜢成虫和蚕蛹之后进行30分钟的蒸煮并进行干燥处理，接下来在180℃的干燥器中进行3个小时的烤制，从而制造成粉末形态。
【表6】
Figure BDA0002356470510000181
<实施例2以及比较例3.颗粒组合物的制造-II>
适用实施例1以及比较例1的颗粒制造过程，其中通过按照下述表7中的条件变更加热处理物的条件而制造出颗粒。
【表7】
条件 特征
实施例2-1 利用制造例2-2的加热处理物制造的颗粒
实施例2-2 利用制造例2-3的加热处理物制造的颗粒
实施例2-3 利用制造例2-4的加热处理物制造的颗粒
比较例2-1 利用比较制造例2-1的加热处理物制造的颗粒
比较例2-2 利用比较制造例2-2的加热处理物制造的颗粒
比较例2-3 利用比较制造例2-3的加热处理物制造的颗粒
比较例2-4 利用比较制造例2-4的加热处理物制造的颗粒
<试验例2.颗粒生成程度确认>
对按照加热处理物的制造条件是否能够有效地制造出颗粒物进行确认，其结果如下述表8所示。在最终制造之后有90％以上能够维持稳定的形态时判定为颗粒生成良好，而且在完全没有制造出颗粒物或在制造之后的干燥过程中发生5％以上的破碎时对其状态进行了记载。
【表8】
条件 状态
实施例1-1 良好
实施例1-2 良好
实施例1-3 良好
实施例1-4 良好
实施例2-1 良好
实施例2-2 良好
实施例2-3 良好
比较例1-1 利用颗粒机无法有效生成颗粒
比较例1-2 利用颗粒机无法有效生成颗粒
比较例1-3 利用颗粒机无法有效生成颗粒
比较例1-4 利用颗粒机无法有效生成颗粒
比较例2-1 在制造颗粒之后的干燥过程中发生粉碎
比较例2-2 在制造颗粒之后的干燥过程中发生粉碎
比较例2-3 在制造颗粒之后的干燥过程中发生粉碎
比较例2-4 在制造颗粒之后的干燥过程中发生粉碎
其结果，能够确认在实施例1以及实施例2中能够稳定地制造出颗粒剂型，同时发现在比较例1以及比较例2的条件下因为在颗粒机内的搅拌不足而无法有效地制造出颗粒物或在对所制造出的颗粒物进行干燥的过程中发生破碎现象。
借此可以确认，作为颗粒原料的各个原料试料的含量或上述原料试料中尤其是加热处理物的制造条件非常重要。
<试验例3.服用颗粒时的血糖降低效果确认>
对于1个月之内有10天以上的空腹血糖达到110～130㎎/dl的高血糖状态(判定为糖尿病之前的状态，只有在超过130㎎/dl时才会判定为糖尿病)的40～69岁患者各5人，在1个月之内分别服用实施例1以及实施例2的组合物，且在服用期间内对空腹血糖上升至110㎎/dl的期间进行了测定。虽然并没有为其提供指定的膳食表，但是在每次用餐之后都在30分钟之内服用各5g的颗粒物。其测定值如下述表9所示，所记载的数值为在各个组中出现高血糖症状的次数的平均值。平均值的小数点被舍去。此时，将服用制造例1的复合培养菌丝体粉末的组设定为比较组。
通过结果可以确认，在实施例1以及实施例2的所有颗粒服用组中，1个月之内的高血糖次数显著减少。尤其是与制造例1的复合培养蘑菇菌丝体粉末相比其效果比较类似，这表明与复合培养蘑菇的摄取量相比持续服用更加重要。
【表9】
条件 服用1个月期间内的血糖偏高次数
实施例1-1 2
实施例1-2 3
实施例1-3 2
实施例1-4 3
实施例2-1 2
实施例2-2 1
实施例2-3 3
制造例1 2
<试验例4.官能评估>
在确认上述的血糖下降效果之后，通过如下所述的官能评估确认除了血糖下降效果之外，是否能够作为健康辅助食品有效地缓解在具有高血糖症状的患者身上出现的饥饿感。此时，对在尝试颗粒制剂化的试料中没有成功完成颗粒化的各个原料试料进行混合以及干燥，接下来在进行粉末化之后服用。
为此，将20～69岁的成年男女老少分成两组并在3天内使各20人在每次用餐后的30分钟之内服用上述粉末或颗粒5g。通过在空腹时服用而对饥饿感的缓解和对味道的喜好度等进行确认，并在1分～5分(1分：很差～5分：很好)范围内进行评分。此时，同样将制造例1的复合培养菌丝体粉末作为比较组。
【表10】
条件 缓解饥饿感 对味道的喜好度
实施例1-1 4.3 4.1
实施例1-2 4.2 4.5
实施例1-3 4.3 4.2
实施例1-4 4.1 4.1
实施例2-1 4.2 4.4
实施例2-2 3.9 4.2
实施例2-3 4.2 3.8
比较例1-1 2.4 2.9
比较例1-2 2.5 2.8
比较例1-3 2.9 2.1
比较例1-4 2.1 2.4
制造例1 2.3 2.5
通过其结果可以确认，实施例1以及实施例2的颗粒剂型有助于缓解饥饿感且对味道的喜好度较高，是适合于作为健康辅助食品使用的产品。尤其是可以确认其效果明显优于复合培养菌丝体本身的粉末，这表明颗粒的原材料、加热处理物的制造条件对饥饿感以及味道都会造成影响。

Claims (6)

1.一种包含复合蘑菇培养菌丝体的血糖调节用组合物的制造方法，其特征在于：包括如下所述的步骤。
(第1步骤)在将白桦茸、灵芝以及桑黄的子实体组织分别接种到马铃薯葡萄糖琼脂(PDA，Potato Dextrose Agar)之后对各个蘑菇的菌素体进行单独培养的步骤；
(第2步骤)将在第1步骤中培养出的各个白桦茸、灵芝以及桑黄的3种菌丝体复合接种到马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato Dextrose Broth)中的步骤；
(第3步骤)对已接种3种菌丝体的马铃薯葡萄糖培养液(PDB，Potato Dextrose Broth)进行4～6周培养的步骤；
(第4步骤)将通过第3步骤的培养获取到的菌丝体接种到青稞培养基的步骤；以及，
(第5步骤)通过在青稞培养基中对所接种的菌丝体进行4～7周的追加培养而获取复合培养菌丝体的步骤。
2.一种糖尿病的预防或治疗用组合物，其特征在于：
包含利用权利要求1所述的方法制造的蘑菇复合培养菌丝体。
3.一种糖尿病的预防或改善用健康功能食品，其特征在于：
包含利用权利要求1所述的方法制造的蘑菇复合培养菌丝体。
4.一种血糖以及食物调节用颗粒组合物，其特征在于：
除了利用权利要求1所述的方法制造的蘑菇菌丝体粉末之外，还包含白瓜、甜南瓜、海藻以及褐藻苷苔的加热处理物。
5.一种糖尿病的预防或治疗用组合物，其特征在于：
包含根据权利要求4所述的颗粒组合物。
6.一种糖尿病的预防或改善用健康功能食品，其特征在于：
包含根据权利要求4所述的颗粒组合物。
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