CN113016676A - 一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法 - Google Patents

一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，包括如下步骤：假微型海链藻培养与准备、养殖池消毒与接藻种、养殖管理；其中，养殖管理包括养殖池换水和饲料投喂。本发明通过定向培有益的假微型海链藻，不定期补充藻液和营养盐，稳定养殖水中假微型海链藻的浓度，就可有效抑制其它杂藻和弧菌等滋生，降低水中氨氮与亚硝酸氮浓度，明显提高对虾养殖成活率，促进凡纳滨对虾快速生长，因此本发明是一种成活率高，生长迅速，易于操作的凡纳滨对虾养殖方法。

Description

一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法
技术领域
本发明涉及凡纳滨对虾养殖领域，尤其是涉及一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法。
背景技术
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有生长速度快、饲料蛋白要求低和出肉率高等优点，加上适盐范围广，可适合淡水、半咸水、海水等养殖环境，是当今世界养殖产量最高的三大优良虾种之一。但近几年，随着凡纳滨对虾的养殖面积不断扩大，养殖户片面地追求高密度和高产出，进而引起凡纳滨对虾疾病的爆发和泛滥，各种病害层出不穷、流行无忌，严重影响了凡纳滨对虾的成活率(或者称为存活率)和生长速度，造成养殖丰欠不一，这已成为妨碍凡纳滨对虾养殖业健康持续发展的主要瓶颈。
定向培藻是指在放虾苗前定向接入一种或者几种有益藻类，从而起到稳定水质和降低养殖动物发病率的作用。关于定向培藻目前国内外研究的较多的是波吉卵囊藻(Oocysits borgei)，但波吉卵囊藻生长缓慢，难培养，将其用于养殖池定向培养时，不容易长久稳定地调节养虾水质，难以提高凡纳滨对虾的养殖成活率和生长速度。而其它微藻用于调节养虾水质的又鲜有报道。
假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)是一株适温范围广、易培养、不易爆发与老化的海洋硅藻，目前在贝类的育苗中已证明是一株比较理想的单细胞饵料藻，例如申请号为CN201510092775.0(公开号为CN104651235A)的中国发明申请《一株假微型海链藻及其作为美洲帘蛤育苗饵料的应用》公开了将假微型海链藻用作美洲帘蛤的育苗饵料的方案。而在室内水泥池采用假微型海链藻定向培藻调节养虾水质的相关研究未见报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术，提供一种凡纳滨对虾成活率高，生长迅速的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤a，准备与培养假微型海链藻
养殖凡纳滨对虾前一个月培养假微型海链藻，得到假微型海链藻的藻液；
步骤b，养殖池消毒与接藻种
放凡纳滨对虾虾苗前1～2天，养殖池采用漂白粉消毒干净，漂白粉的用量为100～300g/m3；对自然海水依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，然后再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h；向所述养殖池内添加消毒后的自然海水，再加培养母液和硅酸钠储液，添加量均为0.1L/m3；接种所述步骤a中得到的假微型海链藻的藻液，使养殖池中的假微型海链藻密度为X1；等养殖池内的假微型海链藻密度增加到X2后，再向所述养殖池中放入凡纳滨对虾虾苗，放虾密度为250～300尾/m2，凡纳滨对虾平均体长(2-d)cm～(2+d)cm，0＜d＜1；
步骤c，养殖管理
养殖池换水：
在凡纳滨对虾的养殖前期，每天或隔天换消毒后的自然海水，日换水量为5～13％，隔5～7天添加硝酸盐和磷酸盐，以控制水体中无机氮的浓度和无机磷的浓度；
在凡纳滨对虾的养殖中期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为8～15％，不再添加硝酸盐，但添加磷酸盐；
在凡纳滨对虾的养殖后期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为13～20％，不再添加硝酸盐和磷酸盐；
其中，在整个养殖周期内，设定需要控制的假微型海链藻的密度X3，隔1～5天检测养殖池中假微型海链藻的实际密度X4，如果检测到的假微型海链藻的实际密度X4小于所述需要控制的假微型海链藻的密度X3，则向养殖池内添加上述步骤a中得到的假微型海链藻的藻液，使得假微型海链藻的实际密度X4达到X3；
其中，养殖前期、养殖中期和养殖后期更换用的消毒后的自然海水是依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h后得到的；所述养殖前期为第1～29天，所述养殖中期为第30～65天，所述养殖后期为第66～87天；
饵料投喂：
采用对虾配合饲料作为投喂饵料，日投喂量为凡纳滨对虾体重的2％～12％，投喂饵料的规格随着凡纳滨对虾生长而改变，每日分4次投喂。
硝酸盐和磷酸盐可以有多种选择，优选地，所述步骤c中的硝酸盐为硝酸钾，所述磷酸盐为磷酸二氢钾。
所述步骤a可以有多种方法，优选地，所述步骤a包括对假微型海链藻进行一级培养、二级培养和三级培养的阶段；其中：
一级培养阶段：选用容积为1000～5000ml的三角烧瓶，对所述三角烧瓶的瓶口用锡箔纸包扎，在120℃的温度下消毒；在消毒后的所述三角烧瓶中放入经沙滤、暗沉淀、过滤和烧开冷却处理后的自然海水；在所述三角烧瓶中添加培养母液和硅酸钠储液，并接种假微型海链藻，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；遮盖三角烧瓶的瓶口，将三角烧瓶放置到温度为18℃～33℃，盐度为18～30，光照强度为3000～7000Lx的室内进行培养，三角烧瓶内不充气；
二级培养阶段：选用容积为50L的第一白桶，将第一白桶刷干净后，用漂白粉消毒；将自然海水依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再依次经漂白粉消毒处理、漂白片消毒处理、硫代硫酸钠处理，再曝气2h，其中所述漂白粉含有效氯≥28％、用量为34g/m3、消毒时间为12～24h，所述漂白片含有效氯≥55％、用量为50片/m3、消毒12h，所述硫代硫酸钠的用量为50g/m3；向第一白桶中添加消毒后的自然海水，再加培养母液和硅酸钠储液，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；将所述一级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液按预设的体积比接种到第一白桶中，再将第一白桶放置到温度为20℃～23℃，盐度为18～30的环境下进行自然光照，并充气培养；
三级培养阶段：选用容积为1000～3000L的第二白桶；对自然海水依次沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，然后再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h；向第二白桶中添加消毒后的自然海水，再向所述第二白桶或水泥池中添加培养母液和硅酸钠储液，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；将所述二级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液按预设的体积比接种到第二白桶；将第二白桶在温度20℃～23℃，盐度18～30的环境下进行自然光照，再向第二白桶中充气，不遮盖第二白桶的桶口。
培养母液的配方可以有多种，优选地，所述步骤a的一级培养阶段、二级培养阶段、三级培养阶段、以及所述步骤b中使用的培养母液具体配方均为：硝酸钾80g、磷酸二氢钾8g、硫酸亚铁2g、硫酸锰0.2g、EDTA二钠10g以及蒸馏水或烧开淡水1000ml。此配方中减少了硝酸钾和磷酸二氢钾的用量，且没有加入维生素，因此配方更简单，成本更低。
硅酸钠储液可以配置成不同质量百分比，优选地，所述硅酸钠储液的具体配方为：硅酸钠1g，蒸馏水100ml。
为了防止污染，在所述二级培养阶段，所述第一白桶的桶口采用高温消毒后的薄膜覆盖。桶口覆盖薄膜后，第一白桶内不容易进入其它杂质。
步骤b中假微型海链藻可以控制在不同密度，优选地，所述步骤b中接种的假微型海链藻的密度X1控制在0.5×104～1×104cell/ml范围内。
步骤b中增加后的假微型海链的密度X2可以控制在不同浓度，优选地，所述步骤b中增加后的假微型海链藻的密度X2控制在3×104～5×104cell/ml范围内。
步骤c中假微型海链藻可以控制在不同密度，优选地，所述步骤c的整个养殖周期中假微型海链藻的密度X3控制在1×104～5×104cell/ml范围内。
水体中的无机氮的浓度和无机磷的浓度可以控制在不同的浓度，优选地，所述步骤c的养殖前期，控制水体中无机氮的浓度使其大于1mg/L，控制水体中的无机磷的浓度使其大于0.1mg/L。因为在养殖前期，无机氮和无机磷的含量比较少，可能不能满足假微型海链藻生长所需，所以需要不间断地进行检测，并通过添加营养盐来满足假微型海链藻生长所需。
与现有技术相比，本发明的优点在于：通过在接种时，控制养殖池中的假微型海链藻密度为X1，等假微型海链藻的密度增加到X2后，再放入凡纳滨对虾的虾苗，这样在放入虾苗前，养殖水体内的假微型海链藻密度已经较高，有利于假微型海链藻成为养殖池水体中的优势种；
接着，因为养殖前期水体中无机氮和无机磷的含量较少，通过补充硝酸盐和磷酸盐，来分别控制水体中用于给假微型海链藻生长提供营养盐的无机氮的浓度和无机磷的浓度，有利于在养殖早期假微型海链藻能达到一定的密度，并相对稳定；
在养殖中期，养殖水体中随着投饵和凡纳滨对虾的排泄物的增加，无机氮的浓度会随着增加，所以在养殖中期无需再向水体中补充硝酸盐，而无机磷的浓度虽也会增加，但因为投饵少，水中无机磷的浓度不能满足假微型海链藻生长需要，所以还需补充磷酸盐；
在养殖后期，因为投入养殖水体中的配合饲料随着凡纳滨对虾体重的增加而增加，配合饲料已经能给水体补充较多的营养盐，此时无需再向养殖水体中补充硝酸盐和磷酸盐，有利于简化养殖步骤和降低养殖成本；
在整个养殖周期中，因为水中原生动物等增加和假微型海链藻陆续老化，假微型海链藻的数量会减少，所以要根据实际藻密度X4情况，增添新的假微型海链藻的藻液，使藻密度控制在X3，以稳定水质；
这样，使得在凡纳滨对虾的整个养殖周期中，养殖水体都能维持一定密度的假微型海链藻，就可有效抑制其它杂藻和弧菌等滋生，降低水中氨氮与亚硝酸氮浓度，从而明显提高凡纳滨对虾养殖成活率，促进凡纳滨对虾快速生长，因此本发明是一种成活率高，生长迅速，易于操作的凡纳滨对虾养殖方法。
附图说明
图1为本发明实施例中不同营养盐对假微型海链藻生长速率的影响示意图；
图2为该发明实施例中不同藻株定向培养对水泥池中弧菌密度的影响示意图；
图3为该发明实施例中不同藻株定向培养对凡纳滨对虾成活率的影响示意图；
图4为该发明实施例中不同藻株定向培养对凡纳滨对虾产量的影响示意图；
图5为该发明实施例中假微型海链藻不同藻密度对凡纳滨对虾成活率的影响示意图；
图6为该发明实施例中假微型海链藻不同藻密度对凡纳滨对虾产量的影响；
图7为本发明实施例的流程图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
为了比较不同营养盐对假微型海链藻生长速率的影响。
一、实验方法
分对照组、实验组，各三平行，进行实验。
(一)对照组
选用容积为1000ml的三角烧瓶5只，对三角烧瓶的瓶口用锡箔纸包扎，在120℃的温度下消毒；在消毒后的三角烧瓶中放入经沙滤、暗沉淀、过滤和烧开冷却处理后的自然海水，各加900ml，加对照组培养母液0.9ml，质量分数为1％的硅酸钠储液0.9ml，接种假微型海链藻的藻液100ml，藻密度保持在1×104cell/ml，放入GXZ智能型光照培养箱培养7天；培养条件控制：温度为25℃，盐度为18，光照强度为4000Lx。
对照组培养母液配方具体为：硝酸钠100g，磷酸二氢钾10g，硫酸亚铁2.0g，硫酸锰0.25g，EDTA二钠10g，维生素B16mg，维生素B1255μg，蒸馏水1000ml。
质量分数为1％硅酸钠储液配方具体为：硅酸钠1g，蒸馏水100ml。
(二)实验组
与对照组方法基本相同，不同之处在于：加实验组培养母液0.9ml；
实验组培养母液(下面简称为改良后的培养母液)具体为：硝酸钾80g，磷酸二氢钾8g，硫酸亚铁2.0g，硫酸锰0.2g，EDTA二钠10g蒸馏水1000ml。此配方中减少了硝酸钾和磷酸二氢钾的用量，且没有加入维生素。
二、检测方法和计算方法
假微型海链藻的密度检测采用血球计数板法计数，计算生长速率K值。
三、结果
培养7天后检测各组假微型海链藻的密度，计算假微型海链藻的生长速率，结果见图1。对照组的假微型海链藻细胞密度在30×104～33×104cell/ml，K值为0.210～0.215；实验组的假微型海链藻密度细胞密度在33×104～35×104cell/ml，K值为0.215～0.220。可见，两种营养盐配方对假微型海链藻的生长速率无显著性影响。而实验组配方中减少了硝酸钾和磷酸二氢钾的用量，且没有加入维生素，因此采用改良后的母液配方，养殖成本将更低，同时不影响假微型海链藻的生长速率。
为了研究比较不同藻株定向培养对水泥池内弧菌、凡纳滨对虾成活率和凡纳滨对虾产量的影响
一、实验方法
分假微型海链藻组、微绿球藻组和对照组，各三平行进行实验。
(一)假微型海链藻组(以下简称为海链藻组)
养殖条件：凡纳滨对虾苗种放养前1～2天，养殖池用100～300g/m3漂白粉进行消毒，也可以采用次氯酸钠进行消毒；
养殖池：室内长方形水泥池，大小为长6m、宽5m、高1.6m的水泥池；
养殖方法：放虾苗前2天，在水泥池中放入经漂白消毒后的自然海水并使其水位达到1.0m，加上述改良后的培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液各0.1L/m3，接种假微型海链藻，假微型海链藻的密度需要控制0.5×104～1.0×104cell/ml，等1～2天后水泥池中藻色变浓时(此时假微型海链藻的藻密度已增加到3×104～5×104cell/ml)，向水泥池内放入凡纳滨对虾，放苗密度为250尾/m2；
换水方法：在凡纳滨对虾的养殖前期，每天或隔天换消毒后的自然海水，换水量为5～13％，隔5～7天添加硝酸钾和磷酸二氢钾，以控制水体中无机氮的浓度大于1.0mg/L以上，无机磷浓度在0.1mg/L以上，因为无机氮和无机磷低于上述浓度假微型海链藻的生长繁殖就会受到抑制。
在凡纳滨对虾的养殖中期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为8～15％，不再添加硝酸钾，但添加磷酸二氢钾；
在凡纳滨对虾的养殖后期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为13～20％，不再添加硝酸钾和磷酸二氢钾；
在整个养殖期内，设定需要控制的假微型海链藻的密度1×104～5×104cell/ml，隔1～5天检测养殖池中假微型海链藻的实际密度，如果检测到的假微型海链藻的实际密度小于该需要控制的假微型海链藻的密度，则向养殖池内添加假微型海链藻，使养殖池内假微型海链藻的实际密度达到该需要控制的假微型海链藻的密度1×104～5×104cell/mL；
其中，养殖前期、养殖中期和养殖后期更换用的消毒后的自然海水是依次经沙滤、暗沉淀、筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，然后再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h后得到的；
养殖前期为第1～29天，养殖中期为第30～65天，养殖后期为第66～87天；
饵料投喂：采用正大饲料集团公司生产的商业对虾配合饲料，投喂饵料规格和数量随着对虾生长而改变，养殖的第1～18天投喂正大饲料集团公司的0#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的10％～12％；养殖的第19～30天投喂正大饲料集团公司的1#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的6％～10％；养殖的第31～87天投喂正大饲料集团公司的2A#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的2％～6％，每日分4次投喂。当然，商业对虾配合饲料也可以选用宁波天邦股份有限公司生产的饲料。
养殖周期：共养殖87天。
(二)微绿球藻组
与假微型海链藻组的养殖方法基本相同，不同之处在于：定向培藻为微绿球藻，接种微绿球藻的藻液，使得养殖池中微绿球藻的密度为20×104cell/ml；
在凡纳滨对虾的整个养殖周期中，隔1～5天加微绿球藻的藻液，使养殖水体中微绿球藻的密度维持在10×104～80×104cell/ml。
(三)对照组
对照组用于模拟养殖户养殖时添加藻的方法。与假微型海链藻组的养殖方法基本相同，不同之处在于：向养殖池内接种的是混合藻(微绿球藻和假微型海链藻)，控制微绿球藻的密度为1×104cell//ml、假微型海链藻的密度为0.05×104cell/ml；
在凡纳滨对虾的整个养殖周期中，每天或隔天换水，但以后都不再添加营养盐与混合藻。
二、测定方法和计算方法
硝酸盐采用锌镉还原法测定(GB 12763.4-2007)；亚硝酸盐采用重氮-偶氮法(GB7493-1987)测定；氨氮采用纳氏比色法(HJ 535-2009)测定；正磷酸盐采用磷钼蓝分光光度法(HJ 593-2010)测定；藻密度检测采用血球计数板法计数，计算生长速率K值；弧菌的检测采用TCBS琼脂培养基在30℃下培养24h下测定；凡纳滨对虾体长测定方法：取10～15尾凡纳滨对虾，从眼柄基部到尾节末端量取，取平均值。凡纳滨对虾虾体质量测定方法：取30～50尾凡纳滨对虾，用捞网甩3次水后测定。凡纳滨对虾的平均体重＝捞取的凡纳滨对虾总重/尾数。凡纳滨对虾的产量＝称量产量×含水率(95％)。
成活率测定方法：
Figure BDA0002336891780000071
其中：Y为存活率，a为每池虾产量(g)，b为平均每尾虾体重(g)，c为投放虾苗数量(尾)，d为每池实验中检测消耗虾数量(尾)。
三、实验结果
不同藻株定向培养对水泥池内弧形密度的影响，参见图2。结果表明，在养殖的87天内，各组的弧菌数目逐渐上升；所有组弧菌初始值均为0；在21～61天内，对照组(98～1275cfu/mL)的弧菌密度显著高于微绿球藻组(34～786cfu/mL)和海链藻组(56～867cfu/mL)(P＜0.05)，在61～87天，所有组不存在显著性差异(P＞0.05)。
不同藻株定向培养对凡纳滨对虾成活率的影响，参见图3。海链藻组成活率显著高于对照组(P＜0.05)，微绿球藻组与其它组不存在显著性差异(P＞0.05)，对照组成活率为85.87％，微绿球藻组成活率为83.43％，海链藻组成活率为94.20％。
不同藻株定向培养对凡纳滨对虾产量的影响，参见图4。海链藻组与其它组存在显著性差异(P＜0.05)。海链藻组虾产量为4.3kg/m2，微绿球藻组虾产量为3.8kg/m2，对照组虾产量为3.1kg/m2。
综上：
海链藻组：在养殖的87d内，弧菌数量呈逐渐上升，弧菌初始值均为0；在养殖21～61d内海链藻组弧菌数量达56～867cfu/mL，另外，水中NH4 +-N浓度为0～0.268mg/L，水中NO2 --N浓度在0.687mg/L(37d)～2.957mg/L(49d)，凡纳滨对虾的养殖成活率达94.20％，凡纳滨对虾产量达4.3kg/m2。
微绿球藻组：在养殖的87d内，弧菌数目逐渐上升，初始值均为0，在养殖21～61d内，弧菌数量达34～786cfu/mL，另外，水中NH4 +-N浓度为0～0.349mg/L，水中NO2 --N浓度在1.328mg/L(37d)～3.678mg/L(49d)，凡纳滨对虾养殖成活率达83.43％，凡纳滨对虾产量为3.8kg/m2。
对照组：在养殖期内弧菌数目逐渐上升，初始值均为0，在养殖21～61d内，弧菌数量达98～1275cfu/mL，另外，水中NH4 +-N浓度为0～0.308mg/L，水中NO2 --N浓度在1.364mg/L(37d)～3.586mg/L(49d)，凡纳滨对虾养殖成活率达85.87％，凡纳滨对虾产量为3.1kg/m2。
可见，相比采用微绿球藻和混合藻，在水泥池定向培假微型海链藻养殖凡纳滨对虾效果更好，具体地，在水中弧菌数量明显减少、水中NH4 +-N和NO2 --N显著降低，凡纳滨对虾的养殖成活率更高、凡纳滨对虾的产量更高，也即生长更迅速。
为了比较假微型海链藻不同藻密度对凡纳滨对虾成活率与产量的影响。
一、实验方法
假微型海链藻密度控制0.5×104～1×104cell/ml、3×104～5×104cell/ml和空白对照组(也就是不投放假微型海链藻)，进行实验，各三平行。
养殖池：室内长方形水泥池，大小为长6m、宽5m、高1.6m的水泥池；
养殖条件：凡纳滨对虾苗种放养前1～2天，养殖池用100～300g/m3漂白粉进行消毒，也可以采用次氯酸钠进行消毒；
养殖方法：放凡纳滨对虾虾苗前2天，在水泥池中放入经漂白消毒后的自然海水并使其水位达到1.0m，空白对照组(不投藻)除外，实验组均加上述改良后的培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液各0.1L/m3，接种假微型海链藻，1天后各水泥池内均放入凡纳滨对虾虾苗(平均体重3.96g，体长6.95cm)，放苗密度为150尾/m2后，整个养殖周期中，部分养殖池中假微型海链藻的密度控制在0.5×104～1×104cell/ml范围内，另一部分养殖池中假微型海链藻的密度控制在3×104～5×104cell/ml范围内；
换水方法：在凡纳滨对虾的养殖期，每天或隔天换消毒后的自然海水，换水量为8～15％，当水体中无机氮的浓度≤1.0mg/L，无机磷浓度≤0.1mg/L时添加硝酸钾和磷酸二氢钾，添加量：无机氮浓度为2～3mg/L，无机磷浓度0.2～0.3mg/L。
饵料投喂：采用正大饲料集团公司生产的商业对虾配合饲料，投喂饵料规格2#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的2％～5％；
养殖周期：共养殖40天。
二、实验结果
假微型海链藻不同藻密度定向培养对凡纳滨对虾成活率的影响，参见图5。结果表明，各组差异显著，假微型海链藻高密度组(3×104～5×104cell/ml)成活率最高(98.6～98.9％)，低密度组(0.5×104～1×104cell/ml)成活率(68.2～76.3％)次之，对照组成活率最低(59.5～61.1％)。
假微型海链藻不同藻密度定向培养对凡纳滨对虾产量的影响，参见图6。结果表明，各组差异显著，假微型海链藻高密度组(3×104～5×104cell/ml)产量最高(26.93～26.95kg)，假微型海链藻低密度组(0.5×104～1×104cell/ml)产量(21.85～24.07kg)次之，对照组产量最低(16.28～18.29kg)。
可见，假微型海链藻的密度控制在0.5×104～1×104cell/ml和3×104～5×104cell/ml这两个范围时，凡纳滨对虾的成活率和产量均明显高于对照组，特别是采用3×104～5×104cell/ml这个藻密度养殖凡纳滨对虾时，成活率明显高于其他组。
下面结合具体实施例来说明水泥池定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法。
参见图7，一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，包括如下步骤。
步骤a，准备与培养假微型海链藻
养殖凡纳滨对虾前一个月对假微型海链藻进行一级培养、二级培养和三级培养，得到假微型海链藻的藻液；其中：
一级培养阶段：选用容积为1000～5000ml的三角烧瓶，对三角烧瓶的瓶口用锡箔纸包扎，在120℃的温度下消毒；在消毒后的三角烧瓶中放入经沙滤、暗沉淀、脱脂棉过滤和烧开冷却处理后的自然海水；在三角烧瓶中添加培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液，添加量各为1ml/L；并接种假微型海链藻；遮盖三角烧瓶的瓶口，将三角烧瓶放置到温度为18℃～33℃，盐度为18～30，光照强度为3000～7000Lx的室内进行培养，三角烧瓶内不充气。培养母液具体配方为：硝酸钾80g、磷酸二氢钾8g、硫酸亚铁2g、硫酸锰0.2g、EDTA二钠10g以及蒸馏水或烧开淡水1000ml。质量分数为1％的硅酸钠储液具体配方为：1g硅酸钠，100ml蒸馏水。
二级培养阶段：选用容积为50L的第一白桶，第一白桶为塑料白桶，将第一白桶刷干净后，用漂白粉消毒；在消毒后的第一白桶中放入自然海水，将自然海水依次经沙滤、暗沉淀、200目筛绢网过滤，再依次经漂白粉消毒处理、洁象牌漂白片消毒处理、硫代硫酸钠处理，再曝气2h，其中漂白粉含有效氯≥28％、用量为34g/m3、消毒时间为12～24h，漂白片含有效氯≥55％、用量为50片/m3、消毒12h，硫代硫酸钠的用量为50g/m3；向第一白桶中添加培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液，添加量各为1ml/L，培养母液和硅酸钠储液的配方同一级培养阶段；将一级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液按预设体积比例(例如体积比1∶10)接种到第一白桶中；将第一白桶放置到温度为20℃～23℃，盐度为18～30的玻璃钢瓦大棚下进行自然光照，并充混合空气，以补充二氧化碳，每个第一白桶内放置1个充气气头；第一白桶的桶口采用高温消毒后的薄膜覆盖。
三级培养阶段：选用容积为1000～3000L的第二白桶，第二白桶也为橡胶白桶；对自然海水依次沙滤、暗沉淀、200目筛绢网过滤；再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h；再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h；再向第二白桶添加培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液，添加量各为1ml/L，培养母液和硅酸钠储液的配方同一级培养阶段；再将二级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液预设体积比(例如按1∶10的体积比)接种到该第二白桶中；第二白桶在温度20℃～23℃，盐度18～30的环境下进行自然光照，向第二白桶中充混合空气，以补充二氧化碳，不遮盖第二白桶的桶口。需要说明的是，此处的第二白桶也可以替换成面积为20～40m2水泥池。
步骤b，养殖池消毒与接藻种
放凡纳滨对虾虾苗前1～2天，以水泥池作为养殖池，养殖池采用高位池，并对该养殖池采用漂白粉消毒干净，养殖池的大小为长6m、宽5m，高1.6m，漂白粉的用量为100～300g/m3；对自然海水依次经沙滤、暗沉淀、筛绢网过滤；再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h；再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h，水位高度为1.0m；向养殖池内添加培养母液和质量分数为1％硅酸钠储液，添加量各为0.1L/m3，培养母液和硅酸钠储液的配方同一级培养阶段，接种步骤a中得到的假微型海链藻的藻液，使养殖池中的假微型海链藻密度为X1，X1控制在0.5×104～1×104cell/ml；等养殖池内的假微型海链藻密度增加到X2后，X2控制在3×104～5×104cell/mL，再向养殖池中放入凡纳滨对虾虾苗，放虾密度为250～300尾/m2，凡纳滨对虾平均体长(2-d)cm～(2+d)cm，0＜d＜1。
步骤c，养殖管理
养殖池换水：
在凡纳滨对虾的养殖前期，每天或隔天换消毒后的自然海水，日换水量5～13％，隔5～7天添加硝酸盐和磷酸盐，硝酸盐可以是硝酸钾，磷酸盐可以是磷酸二氢钾，使水体中无机氮浓度控制在大于1mg/L，此时无机氮主要是NO3 --N，使无机磷的浓度控制在大于0.1mg/L，无机磷主要是PO4-P；
在凡纳滨对虾的养殖中期，每天换消毒后的自然海水，日换水量8～15％，不再添加硝酸钾，但添加磷酸二氢钾；因为此时投喂的饵料中的硝酸盐含量已能满足假微型海链藻生长所需，无需再添加硝酸钾，但饵料中的磷酸盐含量还不够，所以需要向水体中添加磷酸二氢钾；
在凡纳滨对虾的养殖后期，每天换消毒后的自然海水，日换水量13～20％，不再添加硝酸钾和磷酸二氢钾；因为饵料随着凡纳滨对虾体重的增加而增加，已经能够提供足够的营养盐；这样，养殖后期无需添加硝酸钾和磷酸二氢钾，有利于减缓养殖步骤、节约硝酸钾和磷酸二氢钾的使用成本，也能防止养殖水体营养盐过剩，有利于水质稳定和假微型海链藻生长稳定。
其中，在整个养殖周期内，设定需要控制的假微型海链藻的密度X3，X3控制在1×104～5×104cell/ml范围内；隔1～5天检测养殖池中假微型海链藻的实际密度X4，如果检测到的假微型海链藻的实际密度X4小于该需要控制的假微型海链藻的密度X3，则向养殖池内添加上述步骤a中得到的假微型海链藻至该需要控制的假微型海链藻的密度X3；
其中，养殖前期、养殖中期和养殖后期更换用的消毒后的自然海水是依次经沙滤、暗沉淀、筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h后得到的；养殖前期为第1～29天，养殖中期为第30～65天，养殖后期为第66～87天；
饵料投喂：
采用正大饲料集团公司生产的商业对虾配合饲料作为投喂饵料，日投喂量为凡纳滨对虾体重的2％～12％，投喂饵料的规格随着凡纳滨对虾生长而改变，每日分4次投喂，具体地，可以在养殖的第1～18天投喂正大饲料集团公司的0#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的10％～12％；养殖的第19～30天投喂正大饲料集团公司的1#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的6％～10％；养殖的第31～87天投喂正大饲料集团公司的2A#料，日投喂量为凡纳滨对虾质量的2％～6％。
这样，根据养殖情况来添加硝酸钾、磷酸二氢钾、假微型海链藻的藻液，使得在凡纳滨对虾的整个养殖周期中，养殖水体都能维持一定密度的假微型海链藻，就可有效抑制其它杂藻和弧菌等滋生，降低水中氨氮与亚硝酸氮浓度，有利于水质稳定，从而明显提高凡纳滨对虾养殖成活率，促进凡纳滨对虾快速生长。

Claims (10)

1.一种定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤a，准备与培养假微型海链藻
养殖凡纳滨对虾前一个月培养假微型海链藻，得到假微型海链藻的藻液；
步骤b，养殖池消毒与接藻种
放凡纳滨对虾虾苗前1～2天，养殖池采用漂白粉消毒干净，漂白粉的用量为100～300g/m3；对自然海水依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，然后再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h；向所述养殖池内添加消毒后的自然海水，再加培养母液和硅酸钠储液，添加量均为0.1L/m3；接种所述步骤a中得到的假微型海链藻的藻液，使养殖池中的假微型海链藻密度为X1；等养殖池内的假微型海链藻密度增加到X2后，再向所述养殖池中放入凡纳滨对虾虾苗，放虾密度为250～300尾/m2，凡纳滨对虾平均体长(2-d)cm～(2+d)cm，0＜d＜1；
步骤c，养殖管理
养殖池换水：
在凡纳滨对虾的养殖前期，每天或隔天换消毒后的自然海水，日换水量为5～13％，隔5～7天添加硝酸盐和磷酸盐，以控制水体中无机氮的浓度和无机磷的浓度；
在凡纳滨对虾的养殖中期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为8～15％，不再添加硝酸盐，但添加磷酸盐；
在凡纳滨对虾的养殖后期，每天换消毒后的自然海水，日换水量为13～20％，不再添加硝酸盐和磷酸盐；
其中，在整个养殖周期内，设定需要控制的假微型海链藻的密度X3，隔1～5天检测养殖池中假微型海链藻的实际密度X4，如果检测到的假微型海链藻的实际密度X4小于所述需要控制的假微型海链藻的密度X3，则向养殖池内添加上述步骤a中得到的假微型海链藻的藻液，使得假微型海链藻的实际密度X4达到X3；
其中，养殖前期、养殖中期和养殖后期更换用的消毒后的自然海水是依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h后得到的；所述养殖前期为第1～29天，所述养殖中期为第30～65天，所述养殖后期为第66～87天；
饵料投喂：
采用对虾配合饲料作为投喂饵料，日投喂量为凡纳滨对虾体重的2～12％，投喂饵料的规格随着凡纳滨对虾生长而改变，每日分4次投喂。
2.根据权利要求1所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤c中的硝酸盐为硝酸钾，所述磷酸盐为磷酸二氢钾。
3.根据权利要求1所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤a包括对假微型海链藻进行一级培养、二级培养和三级培养的阶段；其中：
一级培养阶段：选用容积为1000～5000ml的三角烧瓶，对所述三角烧瓶的瓶口用锡箔纸包扎，在120℃的温度下消毒；在消毒后的所述三角烧瓶中放入经沙滤、暗沉淀、过滤和烧开冷却处理后的自然海水；在所述三角烧瓶中添加培养母液和硅酸钠储液，并接种假微型海链藻，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；遮盖三角烧瓶的瓶口，将三角烧瓶放置到温度为18℃～33℃，盐度为18～30，光照强度为3000～7000Lx的室内进行培养，三角烧瓶内不充气；
二级培养阶段：选用容积为50L的第一白桶，将第一白桶刷干净后，用漂白粉消毒；将自然海水依次经沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再依次经漂白粉消毒处理、漂白片消毒处理、硫代硫酸钠处理，再曝气2h，其中所述漂白粉含有效氯≥28％、用量为34g/m3、消毒时间为12～24h，所述漂白片含有效氯≥55％、用量为50片/m3、消毒12h，所述硫代硫酸钠的用量为50g/m3；向第一白桶中添加消毒后的自然海水，再加培养母液和硅酸钠储液，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；将所述一级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液按预设的体积比接种到第一白桶中，再将第一白桶放置到温度为20℃～23℃，盐度为18～30的环境下进行自然光照，并充气培养；
三级培养阶段：选用容积为1000～3000L的第二白桶；对自然海水依次沙滤、暗沉淀和筛绢网过滤，再采用漂白粉消毒，漂白粉的用量为67g/m3、消毒时间为12h，然后再采用硫代硫酸钠处理，硫代硫酸钠的用量为33g/m3，曝气时间为2h；向第二白桶中添加消毒后的自然海水，再向所述第二白桶中添加培养母液和硅酸钠储液，培养母液和硅酸钠储液的添加量均为1ml/L；将所述二级培养阶段得到的假微型海链藻的藻液按预设的体积比接种到第二白桶；将第二白桶在温度20℃～23℃，盐度18～30的环境下进行自然光照，再向第二白桶中充气，不遮盖第二白桶的桶口。
4.根据权利要求3所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤a的一级培养阶段、二级培养阶段、三级培养阶段、以及所述步骤b中使用的培养母液具体配方均为：硝酸钾80g、磷酸二氢钾8g、硫酸亚铁2g、硫酸锰0.2g、EDTA二钠10g以及蒸馏水或烧开淡水1000ml。
5.根据权利要求3所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述硅酸钠储液的具体配方为：硅酸钠1g，蒸馏水100ml。
6.根据权利要求3所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，在所述二级培养阶段，所述第一白桶的桶口采用高温消毒后的薄膜覆盖。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤b中接种的假微型海链藻的密度X1控制在0.5×104～1×104cell/ml范围内。
8.根据权利要求1～6中任一项所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤b中增加后的假微型海链藻的密度X2控制在3×104～5×104cell/ml范围内。
9.根据权利要求1～6中任一项所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤c的整个养殖周期中假微型海链藻的密度X3控制在1×104～5×104cell/ml范围内。
10.根据权利要求1～6中任一项所述的定向培硅藻养殖凡纳滨对虾的方法，其特征在于，所述步骤c的养殖前期，控制水体中无机氮的浓度使其大于1mg/L，控制水体中的无机磷的浓度使其大于0.1mg/L。
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