CN113008864B - 一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，包括如下步骤：(1)在金属试纸条上固载拉曼信号分子和致病菌对应适配体的互补链段；(2)制备金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒，用致病菌适配体修饰所述的磁性复合纳米粒；(3)将所述的修饰后的磁性复合纳米粒固载到所述的修饰后的金属试纸条上，得到表面增强拉曼光谱传感器；(4)将所述的表面增强拉曼光谱传感器浸渍到含有致病菌的待测菌液中，反应后磁性分离，取出表面增强拉曼光谱传感器。本发明所述的表面增强拉曼光谱传感器在外磁场辅助分离下可以准确测定食源性致病菌的浓度，具有分析速度快、灵敏度高、特异性强、准确度高、操作简便等优势。

Description

一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法
技术领域
本发明属于表面增强拉曼光谱检测领域，尤其是涉及一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法。
背景技术
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特氏菌、副溶血性弧菌等均为常见的、且危险系数极高的食源性致病微生物，对人和动物均有危害性，感染后可引起腹泻、腹痛、炎症、溃疡等症状，对于婴幼儿尤其危险。所以，开发食源性致病微生物的快速、灵敏的分析检测方法是众多领域的迫切需求，涉及环境、食品、医药卫生、农林渔业等领域。但是目前食源性致病微生物的分析检测方法在检测速度和分析灵敏度上还很不理想，亟待需要创新。
最为常用的食源性致病微生物的检测方法为培养计数法，该方法将致病菌经分离培养后，在培养基中观察菌落形态、颜色变化和生化反应，从而计数。这种方法检测成本较低，灵敏度较优，但是最大的问题就是耗时长，一般需要3-7天，阻碍了该方法的进一步普及应用。此外，酶联免疫吸附技术、微流控技术和聚合酶链式反应技术在致病菌的分析检测中也有应用，但是这些方法也存在一些问题，如灵敏度不佳，检测试剂昂贵，对操作人员的要求高和稳定性不强等，也不能较好解决致病菌的分析检测问题。近年来，基于光学的传感检测技术在食源性致病微生物的检测中获得较好效果，尤其是基于表面增强拉曼光谱技术的传感器，在致病微生物的快速、灵敏检测中具有突出效果。
表面增强拉曼光谱技术是一种发生在金属纳米粒子之间的间隙处，即“热点”区域，由局部表面等离子体共振导致强烈的局部场增强现象。所以在该分析检测中，形成拉曼增强“热点”是关键。目前的热点形成技术大多依赖于纳米溶胶基底和固相基底，纳米溶胶基底的稳定性低，重复性差，故在实际应用中使用较多的一般为固相基底。在运用固相基底进行致病菌的表面增强拉曼光谱检测时，选择合理的分子组装策略达到快速、灵敏的检测是重点。
发明内容
有鉴于此，本发明旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法。
为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，包括如下步骤：
(1)在金属试纸条上固载拉曼信号分子和致病菌对应适配体的互补链段，得到修饰后的金属试纸条；
(2)制备金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒，用致病菌适配体修饰所述的磁性复合纳米粒，得到修饰后的磁性复合纳米粒；
(3)将所述的修饰后的磁性复合纳米粒固载到所述的修饰后的金属试纸条上，得到表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量所述的表面增强拉曼光谱传感器得到拉曼信号S1；
(4)将所述的表面增强拉曼光谱传感器浸渍到含有致病菌的待测菌液中，反应后磁性分离，取出表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量得到拉曼信号S2；
(5)建立拉曼信号S1和拉曼信号S2的差值与待测菌液的浓度的回归关系即成。
进一步，所述的致病菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特氏菌或副溶血性弧菌中的至少一种。
进一步，所述的步骤(3)中的固载步骤的温度为30-40℃，时间为1-2h；所述的步骤(3)中的修饰后的磁性复合纳米粒与修饰后的金属试纸条的反应比例为每平方毫米修饰后的金属试纸条中添加1-2μg修饰后的磁性复合纳米粒。
进一步，所述的步骤(1)中的适配体的互补链段为端基巯基修饰的核酸链；所述的步骤(1)中的拉曼信号分子与适配体的互补链的摩尔比例为(300-7000)：1；所述的步骤(1)中的固载步骤的温度为1-10℃，时间为12-24h。
进一步，所述的步骤(2)中的致病菌适配体为端基巯基修饰的核酸链；所述的步骤(2)中的致病菌适配体与所述的复合纳米粒的质量比例为(80-350)：1；所述的步骤(2)中的金属纳米为纳米金或纳米银中的至少一种；所述的步骤(2)中的修饰步骤包括：向所述的磁性复合纳米粒中加入致病菌适配体，然后加入三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，反应后磁性分离30-120s，得到纯化的修饰后的磁性复合纳米粒；所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐与致病菌适配体的摩尔比例为1：5-20。
进一步，所述的步骤(4)中的表面增强拉曼光谱传感器与待测菌液的反应温度为30-40℃，反应时间为1-2h；所述的步骤(4)中的磁性分离步骤采用的磁铁为钕铁硼强力磁铁。
进一步，所述的步骤(1)中的拉曼信号分子为4-巯基苯甲酸、4-巯基吡啶、4-巯基苯胺、1,4-对巯基苯、4-甲基巯基苯、罗丹明6G、罗丹明B、尼罗蓝A、结晶紫、4-巯基苯硼酸、5，5-二硫双酚-(2-硝基苯甲酸)或耐尔蓝A中的至少一种。
进一步，所述的步骤(1)中的金属试纸条包括衬底与镀膜层，所述的镀膜层覆盖于所述的衬底的上方；所述的衬底为石英、陶瓷、硅、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚酰亚胺中的至少一种；所述的镀膜层为纳米金、纳米银或纳米金与纳米银混合物中的至少一种；所述的步骤(1)中的金属试纸条的长度为2-20mm，宽度为1-10mm，厚度为0.001-5mm。
一种表面增强拉曼光谱传感器，该传感器由致病菌适配体修饰的磁性复合纳米粒固载到修饰后的金属试纸条上得到。
进一步，所述的表面增强拉曼光谱传感器在检测水、食品、中药饮片、中药提取物、中药浸膏、中药制剂或非无菌药用原料及辅料中食源性致病菌中的应用。
所述的步骤(2)中金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒由包括如下步骤的方法制成：聚乙烯亚胺(PEI)作为连接剂，经HAuCl4迭代还原法制备得到。
具体合成步骤包括：
首先制备PEI修饰的Fe3O4纳米粒(Fe3O4-PEI)：由氯化亚铁、氯化铁和PEI在加热和氮气保护条件下合成Fe3O4-PEI；
制备金属纳米种包被的Fe3O4-PEI颗粒(Fe3O4-PEI-Mseed)：先制备金属纳米溶胶，在超声条件下将纳米溶胶与所述的Fe3O4-PEI溶液混合，并搅拌反应2-3h制得Fe3O4-PEI-Mseed粒子，用蒸馏水洗涤并磁性分离3-6次后，向其中加入4-6.5g/L的PEI溶液，加热到50-70℃继续反应1-2h，用蒸馏水洗涤并磁性分离3-6次后，得到交联PEI的Fe3O4-PEI-Mseed粒子，将得到的该粒子溶液于强碱性条件下，加入1％氯金酸和0.2M盐酸羟胺，搅拌反应10min，得到一次迭代产物Fe3O4-PEI-Mcoat1，继续上述迭代操作5-7次，得到对应次数(n)的金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒Fe3O4-PEI-Mcoatn。
所述的步骤(2)中用致病菌适配体修饰所述的磁性复合纳米粒具体为：按照质量比例为(80-350)：1将对应致病菌适配体与所述的Fe3O4-PEI-Mcoat6复合纳米粒混合，再按照三(2-羰基乙基)磷盐酸盐与致病菌适配体的摩尔比例为1：5-20添加三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，将三者混合后在中性条件下，在30-40℃时振荡反应0.5-2h；反应结束后，采用钕铁硼强力磁铁磁性分离30-120s，除去残余的适配体和三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，得到纯净的致病菌适配体修饰的磁性复合纳米粒。
相对于现有技术，本发明具有以下优势：
本发明所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法采用稳定性高的金属试纸条和金属纳米包被的磁性纳米复合颗粒作为固相基底材料，利用适配体与致病菌和其互补链的竞争性识别产生灵敏的拉曼检测信号。
本发明所述的表面增强拉曼光谱传感器在外磁场辅助分离下可以准确测定食源性致病菌的浓度，具有分析速度快、灵敏度高、特异性强、准确度高、操作简便等优势。
附图说明
图1为本发明实施例1所述的不同比例尺下Fe3O4、Fe3O4-PEI纳米粒和Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒的透射电镜图：其中，1-a为Fe3O4，1-b为Fe3O4-PEI，1-c为Fe3O4-PEI-Aucoat6，1-d为Fe3O4-PEI-Aucoat6；
图2为本发明实施例1所述的动态光散射图：其中，曲线a为Fe3O4-PEI纳米粒，曲线b为Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒；
图3为本发明实施例1所述的紫外光谱图：其中，曲线a为PEI，曲线b为Au，曲线c为Fe3O4-PEI-Aucoat6，曲线d为Fe3O4-PEI，曲线e为Fe3O4磁性粒子；
图4为本发明实施例1所述的检测金黄色葡萄球菌的表面增强拉曼光谱传感器的拉曼图谱；
图5为本发明实施例2所述的检测大肠杆菌的表面增强拉曼光谱传感器的拉曼图谱；
图6为本发明实施例3所述的拉曼强度与大肠杆菌浓度的线性关系图；
图7为本发明所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法的流程图。
具体实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
本发明采用的金属试纸条购于苏州中通传感科技有限公司。
本发明采用的拉曼信号分子为分析纯，购于化学试剂公司。
本发明采用的适配体核酸序列由上海生工有限公司合成。
本发明采用的大肠杆菌(保藏号为CICC NO.10372)与金黄色葡萄球菌(保藏号为CICC NO.10473)均购于中国生物菌种保藏中心。
其余的试剂都为普通化学试剂，实验用水为二次蒸馏水。
下面结合实施例来详细说明本发明。
实施例1检测金黄色葡萄球菌的表面增强拉曼光谱传感器的制备
首先，0.9g四水合氯化亚铁和0.4克六水合氯化铁用100mL蒸馏水溶解，在氮气氛保护下机械搅拌15min，用50mL蒸馏水溶解1g的PEI，将制备的PEI溶液逐滴加入上述铁盐溶液中。滴加完毕后，整个溶液在氮气氛保护下，在90℃下继续反应1小时，反应结束后，待反应瓶逐步降为室温后，在磁分离作用下，用蒸馏水洗涤5次，收集滤渣，得到PEI修饰的Fe3O4纳米粒(Fe3O4-PEI)。
其次，质量分数0.075％硼氢化钠、1％氯金酸在38.8mM柠檬酸钠的保护作用下，合成2nm大小的纳米胶体金溶液。取10mL上述得到的Fe3O4-PEI，与90mL纳米金胶体溶液室温下混合，得到Fe3O4-PEI-Auseed晶种，在磁分离作用下，用蒸馏水洗涤5次，将所得滤渣与5g/LPEI溶液混合，在60℃下继续反应1h，再用蒸馏水洗涤5次，收集滤渣得到交联PEI的Fe3O4-PEI-Auseed粒子。
然后，在强碱性条件下，取上述得到的20mL交联PEI的Fe3O4-PEI-Auseed粒子溶液，加入0.5mL，1％的氯金酸和0.75mL，0.2M盐酸羟胺反应10min，得到一次迭代产物Fe3O4-PEI-Aucoat1，继续上述迭代操作6次，得到金纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒Fe3O4-PEI-Aucoat6。图1a-d为不同比例尺下Fe3O4、Fe3O4-PEI纳米粒和Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒的透射电镜图，Fe3O4纳米粒子呈球形分布，粒径约为10nm，Fe3O4-PEI纳米粒也为类球形分布，粒径约为20nm，且能基本看出PEI的壳层分布，该复合粒子呈核-壳结构。图1c和图1d为Fe3O4-PEI-Aucoat6的透射电镜图，粒径约为50nm，呈类球形分布。图2为Fe3O4-PEI纳米粒和Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒的动态光散射图，据此看出二者的水和粒径分别为121±2nm和155±3nm。图3为PEI，Au，Fe3O4-PEI-Aucoat6，Fe3O4-PEI和Fe3O4磁性粒子的紫外光谱图。PEI粒子没有紫外吸收峰，Au纳米粒子的紫外吸收峰在520nm附近。Fe3O4和,Fe3O4-PEI纳米粒子的紫外吸收峰也不明显。但当包被上金纳米粒子，Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒的紫外吸收峰红移至550nm附近，也说明Au纳米粒子的包被成功。
最后，将0.2μM的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，2μM的金黄色葡萄球菌适配体和30mg的Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒在pH＝7，37℃时振荡反应1h。反应结束后，采用钕铁硼强力磁铁磁性分离60s，除去残余的适配体和三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，得到纯净的金黄色葡萄球菌适配体修饰的磁性复合纳米粒。同时，取长度为10mm，宽度为1mm，厚度为1mm，衬底为聚对苯二甲酸乙二醇酯，镀膜层为纳米金的金属试纸条，将其浸没到2μM的金黄色葡萄球菌适配体互补链和60μM的拉曼探针分子罗丹明6G的混合溶液中，在4℃培养反应12h，得到拉曼探针和适配体互补链修饰的金箔试纸条。其后，取10μg的Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒，于37℃振荡反应1h，将Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒固载到修饰后的金属试纸条上，得到一种检测金黄色葡萄球菌的表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量得到拉曼信号S1，图4为该传感器的拉曼图谱。
实施例2检测大肠杆菌的表面增强拉曼光谱传感器的制备
Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒的制备方法同实施例1。取30mg的Fe3O4-PEI-Aucoat6复合纳米粒，2.5μM的大肠杆菌适配体和0.25μM的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐在pH＝7，37℃条件下振荡反应1h。反应结束后，采用钕铁硼强力磁铁磁性分离120s，除去残余的适配体和三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，得到纯净的大肠杆菌适配体修饰的磁性复合纳米粒。同时，取长度为20mm，宽度为5mm，厚度为3mm，衬底为硅，镀膜层为纳米银的金属试纸条，将其浸没到2μM的大肠杆菌适配体互补链和1mM的拉曼探针分子4-巯基苯硼酸的混合溶液中，在4℃培养反应12h，得到拉曼探针和适配体互补链修饰的金属试纸条。取上述得到的200μg大肠杆菌适配体修饰的磁性复合纳米粒，37℃振荡反应1h，将该复合纳米粒固载到修饰后的金属试纸条上，得到一种检测大肠杆菌的表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量得到拉曼信号S1′。图5为该传感器的拉曼图谱。
实施例3运用表面增强拉曼光谱传感器检测大肠杆菌的方法建立
将得到的上述检测大肠杆菌的表面增强拉曼光谱传感器与用纯水稀释的不同浓度的大肠杆菌(0-108CFU/mL)在37℃培养反应1.5h后，用磁铁分离，金属试纸条用水冲洗三次后在室温下干燥后测量拉曼信号为S2，建立拉曼信号S1′和拉曼信号S2的差值(Y)与大肠杆菌浓度(X)的线性关系。图6为线性关系图，线性方程为：Y＝2448.71-307.40X，检测限为1.25CFU/mL。
实施例4表面增强拉曼光谱传感器用于检测甘草流浸膏中大肠杆菌的含量
对中药甘草流浸膏进行灭菌处理后，向所述甘草流浸膏中加入三种不同浓度的大肠杆菌，分别得到待测样品1、待测样品2和待测样品3。以实施例2和实施例3的方法检测待测样品1-3中大肠杆菌的浓度。
对比例1平板计数法检测甘草流浸膏中大肠杆菌的浓度
采用平板计数法分别检测实施例4中待测样品1-3中大肠杆菌的浓度：
(1)分别取待测样品1-3进行梯度稀释，每个稀释度的样本接种3个无菌结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)平皿，每皿1ml，用涂布器涂均匀后，静置10min，翻转平皿，置于37℃培养24h。
(2)分别计数平皿上的菌落数，再从VRBA平皿上挑取10个典型菌落，移种于10支BGLB肉汤管中，37℃培养24-48h，观察产气情况，产气者为阳性管。
(3)阳性管比例乘以平皿上的菌落数，再乘以样品稀释倍数，即为每毫升样品中的大肠杆菌菌群数。
实施例4与对比例1的方法检测待测样品1-3中大肠杆菌菌群数(即大肠杆菌的浓度)结果如表1所示。
表1大肠杆菌菌群数结果
Figure BDA0002961780480000111
通过表1的结果可以发现，本发明的方法与国标的平板计数法相比，P值均大于0.05，没有显著性差异，说明本发明的测定结果与国标方法测定结果基本一致。此外，本发明的方法相比于国标的方法省时省力，可以实现食源性致病菌的快速、灵敏检测。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）在金属试纸条上固载拉曼信号分子和致病菌对应适配体的互补链段，得到修饰后的金属试纸条；
（2）制备金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒，用致病菌适配体修饰所述的磁性复合纳米粒，得到修饰后的磁性复合纳米粒；
（3）将所述的修饰后的磁性复合纳米粒固载到所述的修饰后的金属试纸条上，得到表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量所述的表面增强拉曼光谱传感器得到拉曼信号S1；
（4）将所述的表面增强拉曼光谱传感器浸渍到含有致病菌的待测菌液中，反应后磁性分离，取出表面增强拉曼光谱传感器，干燥后测量得到拉曼信号S2；
（5）建立拉曼信号S1和拉曼信号S2的差值与待测菌液的浓度的回归关系即成；
所述的金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒的具体合成步骤包括：
首先制备PEI修饰的Fe3O4纳米粒（Fe3O4-PEI）：由氯化亚铁、氯化铁和PEI在加热和氮气保护条件下合成Fe3O4-PEI；
制备金属纳米种包被的Fe3O4-PEI颗粒（Fe3O4-PEI-Mseed）：先制备金属纳米溶胶，在超声条件下将纳米溶胶与所述的Fe3O4-PEI溶液混合，并搅拌反应2-3h制得Fe3O4-PEI-Mseed粒子，用蒸馏水洗涤并磁性分离3-6次后，向其中加入4-6.5g/L的PEI溶液，加热到50-70℃继续反应1-2h，用蒸馏水洗涤并磁性分离3-6次后，得到交联PEI的Fe3O4-PEI-Mseed粒子，将得到的该粒子溶液于强碱性条件下，加入1％氯金酸和0.2 M盐酸羟胺，搅拌反应10min，得到一次迭代产物Fe3O4-PEI-Mcoat1，继续上述迭代操作5-7次，得到对应次数（n）的金属纳米包被的四氧化三铁磁性复合纳米粒Fe3O4-PEI-Mcoatn。
2.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的致病菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特氏菌或副溶血性弧菌中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（3）中的固载步骤的温度为30-40℃，时间为1-2h；所述的步骤（3）中的修饰后的磁性复合纳米粒与修饰后的金属试纸条的反应比例为每平方毫米修饰后的金属试纸条中添加1-2μg修饰后的磁性复合纳米粒。
4.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的适配体的互补链段为端基巯基修饰的核酸链；所述的步骤（1）中的拉曼信号分子与适配体的互补链的摩尔比例为（300-7000）：1；所述的步骤（1）中的固载步骤的温度为1-10℃，时间为12-24h。
5.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（2）中的致病菌适配体为端基巯基修饰的核酸链；所述的步骤（2）中的致病菌适配体与所述的复合纳米粒的质量比例为（80-350）：1；所述的步骤（2）中的金属纳米为纳米金或纳米银中的至少一种；所述的步骤（2）中的修饰步骤包括：向所述的磁性复合纳米粒中加入致病菌适配体，然后加入三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，反应后磁性分离30-120s，得到纯化的修饰后的磁性复合纳米粒；所述的三(2-羰基乙基)磷盐酸盐与致病菌适配体的摩尔比例为1：5-20。
6.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（4）中的表面增强拉曼光谱传感器与待测菌液的反应温度为30-40℃，反应时间为1-2h；所述的步骤（4）中的磁性分离步骤采用的磁铁为钕铁硼强力磁铁。
7.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的拉曼信号分子为4-巯基苯甲酸、4-巯基吡啶、4-巯基苯胺、1,4-对巯基苯、4-甲基巯基苯、罗丹明6G、罗丹明B、尼罗蓝A、结晶紫、4-巯基苯硼酸、5，5-二硫双酚-（2-硝基苯甲酸)或耐尔蓝A 中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱传感器检测食源性致病菌的方法，其特征在于：所述的步骤（1）中的金属试纸条包括衬底与镀膜层，所述的镀膜层覆盖于所述的衬底的上方；所述的衬底为石英、陶瓷、硅、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚酰亚胺中的至少一种；所述的镀膜层为纳米金、纳米银或纳米金与纳米银混合物中的至少一种；所述的步骤（1）中的金属试纸条的长度为2-20 mm，宽度为1-10 mm，厚度为0.001-5 mm。
9.一种权利要求1-8中任一项所述的方法制备得到的表面增强拉曼光谱传感器，其特征在于：该传感器由致病菌适配体修饰的磁性复合纳米粒固载到修饰后的金属试纸条上得到。
10.权利要求9所述的表面增强拉曼光谱传感器的应用，其特征在于：所述的表面增强拉曼光谱传感器在检测水、食品、中药饮片、中药提取物、中药浸膏、中药制剂或非无菌药用原料及辅料中食源性致病菌中的应用。
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