CN112986166B - 一种莪术油注射液质量波动的检测方法 - Google Patents
一种莪术油注射液质量波动的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112986166B CN112986166B CN202110196373.0A CN202110196373A CN112986166B CN 112986166 B CN112986166 B CN 112986166B CN 202110196373 A CN202110196373 A CN 202110196373A CN 112986166 B CN112986166 B CN 112986166B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oil injection
- turmeric oil
- zedoary turmeric
- hemoglobin
- hemoglobin solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims abstract description 93
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims abstract description 93
- 240000009138 Curcuma zedoaria Species 0.000 title claims abstract description 92
- 235000003405 Curcuma zedoaria Nutrition 0.000 title claims abstract description 92
- 239000001812 curcuma zedoaria berg. rosc. Substances 0.000 title claims abstract description 92
- 239000010681 turmeric oil Substances 0.000 title claims abstract description 92
- 235000019509 white turmeric Nutrition 0.000 title claims abstract description 92
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims abstract description 82
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims abstract description 82
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims abstract description 78
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 73
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 43
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 13
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 19
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 5
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 5
- GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N Geraniol Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCO GLZPCOQZEFWAFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- KDPFMRXIVDLQKX-ISGXEFFDSA-N (+)-Curdione Natural products CC(C)[C@@H]1CC(=O)[C@@H](C)CC\C=C(C)/CC1=O KDPFMRXIVDLQKX-ISGXEFFDSA-N 0.000 description 1
- HICAMHOOTMOHPA-HIFRSBDPSA-N (5r,6r)-6-ethenyl-3,6-dimethyl-5-prop-1-en-2-yl-5,7-dihydro-4h-1-benzofuran Chemical compound C1[C@@](C=C)(C)[C@@H](C(=C)C)CC2=C1OC=C2C HICAMHOOTMOHPA-HIFRSBDPSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N Geraniol Natural products CC(C)=CCC\C(C)=C/CO GLZPCOQZEFWAFX-YFHOEESVSA-N 0.000 description 1
- 239000005792 Geraniol Substances 0.000 description 1
- KDPFMRXIVDLQKX-NHFJXKHHSA-N Germacr-1(10)-ene-5,8-dione Chemical compound CC(C)[C@@H]1CC(=O)[C@@H](C)CC\C=C(C)\CC1=O KDPFMRXIVDLQKX-NHFJXKHHSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- HICAMHOOTMOHPA-UHFFFAOYSA-N Isofuranogermacren Natural products C1C(C=C)(C)C(C(=C)C)CC2=C1OC=C2C HICAMHOOTMOHPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- KDPFMRXIVDLQKX-UHFFFAOYSA-N curdione Natural products CC(C)C1CC(=O)C(C)CCC=C(C)CC1=O KDPFMRXIVDLQKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- VMDXHYHOJPKFEK-IAVOFVOCSA-N furanodiene Chemical compound C1\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC2=C1OC=C2C VMDXHYHOJPKFEK-IAVOFVOCSA-N 0.000 description 1
- ZTKVJHVJKDVVES-UHFFFAOYSA-N furanodiene Natural products CC1CCC=C(/C)Cc2occ(C)c2CC1 ZTKVJHVJKDVVES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940113087 geraniol Drugs 0.000 description 1
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/33—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及一种莪术油注射液质量波动的检测方法，属于中药质量控制领域。所述检测方法包括以下步骤：(1)血红蛋白溶液配制；(2)将血红蛋白溶液加入96孔板中，测定吸光度；(3)将莪术油注射液加入步骤(2)的血红蛋白溶液中，测定吸光度；(4)对步骤(2)和步骤(3)得到的吸光度进行数据处理，采用均值‑空白对莪术油注射液的质量波动进行判断。本发明具有灵敏度高、特异性强、重现性好、简便快速的技术优势，从而为莪术油注射液的质量波动提供一种检测方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种莪术油注射液质量波动的检测方法，属于中药质量控制领域。
背景技术
中药注射剂成分复杂，因产品质量波动问题引起的不良反应，已严重阻碍中药注射液的发展。以目前的质量标准，很难做到全面的质量波动检测。因此，建立中药注射剂质量波动的早期快速预警评价的有效防范，减少中药注射剂不良反应的发生，保证临床用药安全，已经成为目前急需解决的问题。
莪术油注射液对呼吸道病毒及流感病毒有直接抑制或杀灭作用，对金葡菌、大肠杆菌及伤寒杆菌等也有抑制作用。临床用于病毒引起的上呼吸道感染、肺炎、肠炎、心肌炎、脑炎、肿瘤以及抗血栓等症状的治疗。临床中主要的不良反应有变态反应、呼吸及循环系统反应、消化系统反应。
莪术油是温莪术经水蒸气蒸馏提取的挥发油，主要成分有莪术二酮、牻牛儿酮、莪术烯、呋喃二烯。已经收进2020版《中国药典》。莪术油注射液为莪术油与适宜的助溶剂制成的灭菌水溶液，现执行的质量标准为2005版《中国药典》。检测项目为性状、鉴别、pH值、其他注射剂项下常规检测、含量。仅仅检测这些项目，难以做到全面、客观、准确的质量评价与控制。
发明内容
本发明针对莪术油注射液现有质量标准控制项目不全面的情况，克服上述现有技术的不足之处而提供一种能够高效、灵敏、快速的检测莪术油注射液质量波动的方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种莪术油注射液质量波动的检测方法，所述检测方法采用血红蛋白作为检测试剂，所述检测方法采用酶联免疫法。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述检测方法包括以下步骤：
(1)血红蛋白溶液配制；
(2)将血红蛋白溶液加入96孔板中，测定吸光度；
(3)将莪术油注射液加入步骤(2)的血红蛋白溶液中，测定吸光度；
(4)对步骤(2)和步骤(3)得到的吸光度进行数据处理，采用均值-空白对莪术油注射液的质量波动进行判断。
本发明的检测方法是用酶联免疫法(ELISA)检测莪术油注射液质量波动。ELISA检测的原理是莪术油中部分氧化物质与血红蛋白反应，使吸光度增加。通过累积30批合格样品的吸光度值制定酶联免疫法ELISA吸光度值的控制范围。若样品的吸光度值在控制范围内，则所述莪术油注射液质量波动正常。若样品溶液的吸光度值不在控制范围内，则所述莪术油注射液样品的质量波动异常。
本发明血红蛋白溶液与莪术油注射液的浓度和加入量为最优配比，从生物学角度建立莪术油注射液的质量波动方法，用于莪术油注射液内控。
本发明的检测方法是根据多批次检测结果，建立基于生物活性检测的莪术油注射液质量波动的评判方法和标准，弥补现行质量标准的缺陷，以提升莪术油注射质量波动早期预警能力，减少临床不良反应的发生。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(1)的具体操作为：取血红蛋白，加生理盐水制成1.0-4.0mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(2)的具体操作为：将50-250uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(3)的具体操作为：将20-200uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在10-60℃条件下震摇10-120min，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度。
研究发现，血红蛋白的浓度、体积；莪术油注射液的体积；莪术油注射液与血红蛋白的作用温度、时间；酶标仪的检测波长等对检测精度、准确性、重复性、合格样品与不合格样品的区分力影响非常明显。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述血红蛋白为人血红蛋白或牛血红蛋白，加生理盐水制成1.5-3.0mg/ml血红蛋白溶液。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述加入血红蛋白溶液的体积为50-150uL，酶标仪的检测波长为270-320nm。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述莪术油注射液的体积为50-100uL，在10-40℃条件下震摇10-60min，酶标仪的检测波长为270-320nm。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(4)中，步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值；质量波动的判断方法为：若莪术油注射液的吸光度值在控制范围内，则莪术油注射液的质量波动正常，若莪术油注射液的吸光度值不在控制范围内，则莪术油注射液的质量波动异常。
作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述控制范围为通过累积30批合格莪术油注射液样品的吸光度值范围制定得到。即，累积30批以上合格样品的吸光度值范围制定为莪术油注射液的吸光度值的控制范围，优选0.93-0.98。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明以莪术油注射液为研究对象，采用酶标仪检测其与血红蛋白反应后吸光度值的动态变化，通过吸光度值评价其质量波动范围，以体现样品的差异，从而实现对莪术油注射液质量波动的检测，具有灵敏度高、特异性强、重现性好，简便迅速的技术优势，为莪术油注射液临床不良反应早期预警提供技术支持。本发明无需对待测样品进行处理，避免了样品信息的丢失和偏离，成本低。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
本发明实施例中所使用的实验方法如无特殊说，均为常规方法。本发明实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。酶标仪采用的是TECAN SPARK20M多功能酶标仪。
实施例1
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成1.5mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将50uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将50uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在10℃条件下震摇30min，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.93-0.97。
实施例2
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成2.5mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将50uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将50uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在25℃条件下震摇30min，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.93-0.98。
实施例3
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成1.5mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将50uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将100uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在25℃条件下震摇30min，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.93-0.97。
实施例4
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成4.0mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将250uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将100uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在60℃条件下震摇50min，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.93-0.99。
实施例5
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成1.0mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将150uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将200uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在25℃条件下震摇30min，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.94-1.10。
实施例6
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成1.5mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将75uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将100uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在40℃条件下震摇60min，在270-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度值范围为0.93-0.97。
实施例7
一种莪术油注射液质量波动的检测方法，步骤如下：
(1)血红蛋白溶液配制：取血红蛋白，加生理盐水制成3.0mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用；
(2)加血红蛋白溶液：将50uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(3)加样品：将20uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在10℃条件下震摇120min，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度；
(4)计算：步骤(3)得到的吸光度值减去步骤(2)得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值，共检测30批合格样品，酶标仪吸光度平均值为0.90-1.05。
实施例8莪术油变质样品检测验证
取一批莪术油注射液分别采用开瓶和不开瓶两种方式放样，分别在2-8℃、25℃、40℃、60℃考察稳定性，在放置后的5天、10天、30天取样检测，检测项目为性状、含量。按实施例1的方法检测酶标值。结果如表1，性状的结果如表2，主要成分结果如表3。酶标值的结果与性状的变化和主要成分的变化一致。如在2-8℃性状和主要成分无明显变化，酶标值结果无明显变化。与2-8℃不开瓶5天相比，在60℃不开瓶放置30天时，溶液颜色无变化，溶液变浑浊，主要成分发生变化，酶标值由0.965增加至1.233。在60℃开瓶放置30天时，溶液颜色变为黄色，主要成分发生极大降解，相应的酶标值也发生很大变化，由0.965增至4.526。
表1酶标值检测结果
表2性状检测结果
表3主要成分检测结果
实施例9
对莪术油注射液进行质量控制。按照实施例1～7的方法，检测莪术油注射液过期样品、变色样品和有效期内合格样品，酶标值如表4。可知过期样品、破损变黄样品酶标值均高于正常样品，且合格样品的酶标值均在控制范围内。酶标法可以作为莪术油注射液的一种质量波动的早期预警监测手段。
表4莪术油注射液酶标值检测结果
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (8)
1.一种莪术油注射液质量波动的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用血红蛋白作为检测试剂，所述检测方法的步骤包括将莪术油注射液加入血红蛋白溶液中并测定吸光度；
所述检测方法包括以下步骤：
（1）血红蛋白溶液配制；
（2）将血红蛋白溶液加入96孔板中，测定吸光度；
（3）将莪术油注射液加入步骤（2）的血红蛋白溶液中，测定吸光度；
（4）对步骤（2）和步骤（3）得到的吸光度进行数据处理，得到莪术油注射液的吸光度值，然后对莪术油注射液的质量波动进行判断；其中，步骤（3）得到的吸光度值减去步骤（2）得到的吸光度值，即为莪术油注射液的吸光度值；质量波动的判断方法为：若莪术油注射液的吸光度值在控制范围内，则莪术油注射液的质量波动正常，若莪术油注射液的吸光度值不在控制范围内，则莪术油注射液的质量波动异常。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（1）的具体操作为：取血红蛋白，加生理盐水制成1.0-4.0mg/ml血红蛋白溶液，超声溶解，离心，备用。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（2）的具体操作为：将50-250uL血红蛋白溶液加入96孔板中，除去气泡，放置在酶标仪中，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤（3）的具体操作为：将20-200uL莪术油注射液加至血红蛋白溶液中，得到含有莪术油注射液的血红蛋白溶液，在10-60℃条件下震摇10-120min，在200-320nm下，间隔5nm，测定吸光度。
5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述血红蛋白为人血红蛋白或牛血红蛋白，加生理盐水制成1.5-3.0mg/ml血红蛋白溶液。
6.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述加入血红蛋白溶液的体积为50-150uL，酶标仪的检测波长为270-320nm。
7.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述莪术油注射液的体积为50-100uL，在10-40℃条件下震摇10-60min，酶标仪的检测波长为270-320nm。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述控制范围通过累积30批合格莪术油注射液样品的吸光度值范围制定。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110196373.0A CN112986166B (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种莪术油注射液质量波动的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110196373.0A CN112986166B (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种莪术油注射液质量波动的检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112986166A CN112986166A (zh) | 2021-06-18 |
| CN112986166B true CN112986166B (zh) | 2022-11-15 |
Family
ID=76394208
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110196373.0A Active CN112986166B (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种莪术油注射液质量波动的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112986166B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112504985B (zh) * | 2021-02-03 | 2021-06-08 | 首都医科大学附属北京友谊医院 | 一种评价莪术油中倍半萜类化合物不良反应的方法 |
| CN116459210A (zh) * | 2023-03-20 | 2023-07-21 | 百正药业股份有限公司 | 一种莪术油注射液产业化生产工艺以及检测方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101926962A (zh) * | 2010-08-20 | 2010-12-29 | 南京中医药大学 | 一种莪术油的羟丙基-β-环糊精包合物脂质体及其制备方法 |
| CN102759625A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-10-31 | 桂林医学院 | 莪术醇单克隆抗体在含莪术醇类中药中的免疫分析应用 |
| CN104165850A (zh) * | 2014-08-13 | 2014-11-26 | 四川省人民医院 | 一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体外评价方法 |
| CN105301231A (zh) * | 2015-10-10 | 2016-02-03 | 南京中医药大学 | 一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法 |
| CN106540175A (zh) * | 2015-09-22 | 2017-03-29 | 白建学 | 一种莪术油对白血病细胞株治疗方法 |
| CN108226070A (zh) * | 2018-01-23 | 2018-06-29 | 首都医科大学附属北京世纪坛医院 | 一种注射用血栓通质量波动的检测方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8372651B2 (en) * | 2007-04-05 | 2013-02-12 | Nalco Company | Method of monitoring a surfactant in a microelectronic process by absorbance |
| US20190219550A1 (en) * | 2012-11-02 | 2019-07-18 | Li Min Pharmaceutical Factory Of Livzon Pharmaceutical Group | System and Method for Identifying Shenqi Fuzheng Injection |
-
2021
- 2021-02-22 CN CN202110196373.0A patent/CN112986166B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101926962A (zh) * | 2010-08-20 | 2010-12-29 | 南京中医药大学 | 一种莪术油的羟丙基-β-环糊精包合物脂质体及其制备方法 |
| CN102759625A (zh) * | 2012-07-26 | 2012-10-31 | 桂林医学院 | 莪术醇单克隆抗体在含莪术醇类中药中的免疫分析应用 |
| CN104165850A (zh) * | 2014-08-13 | 2014-11-26 | 四川省人民医院 | 一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体外评价方法 |
| CN106540175A (zh) * | 2015-09-22 | 2017-03-29 | 白建学 | 一种莪术油对白血病细胞株治疗方法 |
| CN105301231A (zh) * | 2015-10-10 | 2016-02-03 | 南京中医药大学 | 一种鱼腥草注射液中抗原性物质检测方法 |
| CN108226070A (zh) * | 2018-01-23 | 2018-06-29 | 首都医科大学附属北京世纪坛医院 | 一种注射用血栓通质量波动的检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 中药莪术的研究概况;张炜等;《广西科学院学报》;20061130;全文 * |
| 复方莪术油乳膏外用对大鼠长期毒性实验研究;赵小倩等;《中国药房》;20160310(第07期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112986166A (zh) | 2021-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112986166B (zh) | 一种莪术油注射液质量波动的检测方法 | |
| Foster et al. | A single-reagent manual method for directly determining urea nitrogen in serum | |
| Neeld Jr et al. | Macro-and micromethods for the determination of serum vitamin A using trifluoroacetic acid | |
| Schleicher et al. | Is serum fructosamine assay specific for determination of glycated serum protein? | |
| CN106442754A (zh) | 一种同时检测血液中维生素a和维生素e含量的方法 | |
| CN103076455A (zh) | 快速定量检测血清淀粉样蛋白a试剂盒及其制备和应用 | |
| LEvy et al. | Uric acid (uricase) | |
| Do et al. | Procalcitonin identifies bacterial coinfections in Vietnamese children with severe respiratory syncytial virus pneumonia | |
| Julshamn et al. | A routine method for the determination of aluminium in human tissue samples using standard addition and graphite furnace atomic absorption spectrophotometry | |
| US20070196927A1 (en) | Method For Qualitative And/Or Quantitative Detection Of Polyethylene Glycols In Biological Fluids | |
| RU2303784C1 (ru) | Способ прогнозирования частоты острых респираторно-вирусных инфекций по оценке состояния местного иммунитета у детей младшего школьного возраста | |
| Raggam et al. | Evaluation of a novel standardized system for collection and quantification of oral fluid | |
| RU2486520C1 (ru) | Способ экспресс-диагностики антигенов энтеровирусов в цереброспинальной жидкости | |
| RU2299439C1 (ru) | Способ диагностики инфекционного мононуклеоза | |
| Sachs et al. | Studies on the metabolism of iron and copper: I. Method for the determination of iron and copper in blood serum | |
| Devgun | Delay in centrifugation and measurement of serum constituents in normal subjects | |
| SU1666956A1 (ru) | Способ определени концентрации этанола в биологическом материале и выдыхаемом воздухе | |
| US20220341929A1 (en) | Point of Sampling Kit and Method for Assessing Endotoxin Contamination | |
| CN101887062A (zh) | 含有13c-尿素溶液的检测幽门螺旋杆菌试剂盒 | |
| CN118604229A (zh) | 阿胶的质量检测方法及其应用 | |
| Chakrabarti et al. | Fluorometric determination of δ-aminolaevulinate dehydratase activity in human erythrocytes as an index to lead exposure | |
| Amneenah et al. | Neonatal Blood Glucose Assessment (Glucometer Vs Serum) | |
| Tovichien et al. | Accuracy of a point-of-care ammonia analyzer for screening of blood ammonia in pediatric patients with inborn error of metabolism | |
| Yin et al. | Early detection of Aspergillus spp. from lower respiratory tract is associated with higher mortality in viral CAP: A multicenter prospective cohort study in China | |
| CN115236344A (zh) | 糖化血红蛋白校准品及其制备方法与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |