CN112985952A - 一种新型的病理封片材料 - Google Patents

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Abstract

一种新型的病理封片材料，包括封片材料，所述的封片材料自下而上依次为由丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物层、压敏粘合剂层、具有透光聚合物基材以及保护涂层。本发明提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、新型的病理封片材料及制备方法，主要用于病理组织染色后的封片，本发明制备的封片材料具有透明度、折光率与载玻片的相似，与活化溶剂具有快速的相互作用，与样品上使用的染色化学品具有相容性，当在显微镜载玻片上使用时，本发明的封片材料优选的可以长时间暴露于高湿度和高温下，而本材料不会明显的从载玻片上分离并且染色病理样品没有明显的褪色。

Description

一种新型的病理封片材料
技术领域
本发明属于病理学组织切片固定领域，具体地说是一种新型的病理封片材料。
背景技术
在诸如组织病理学和微生物学的生命学科中，通常使用显微镜(例如光学显微镜)检验样本，这种方法需要将样本安置在载玻片上，经过染色后，使用玻璃盖玻片加以粘合剂进行封片。在病理学检查中通常使用中性树胶作为粘合剂。封片完成后，所使用的中性树胶在自然条件下需要经过4-7天才能很好的粘合盖玻片和载玻片，并且在需要在通风处晾干1-2个月才没有二甲苯的味道。在其完全干透之前，该病理切片即不利于用来进行全片数字扫描(容易滑动或卡片)，也不利于存放(容易和其它切片相互粘结)。如果能够开发一种新的封片方法来缩短干燥时间、使用环保型溶剂，并且不影响切片图像质量，不仅可以提高检验的效率，还可以改善制片环境，保护操作技术人员。因此，使用新的方法来改变传统的封片方式，对于改善显微检验样本的制作具有重要的意义和广泛的应用前景。
为此，减少切片样本的晾片时间已经成为当前亟待解决的问题，目前已有部分专利对此有所优化。专利(CN 108225871 A)中采用UV光学胶来代替传统的中性树胶，可在数分钟内快速固化，大大缩短了切片干燥时间，但因为UV光学胶需要在紫外灯照射下活化封片，需要特殊的干燥设备，使用不方便并且存在紫外线污染的问题。
发明内容
本发明提供一种新型的病理封片材料，用以解决现有技术中的缺陷。
本发明通过以下技术方案予以实现：
一种新型的病理封片材料，包括封片材料，所述的封片材料自下而上依次为由丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物层、压敏粘合剂层、具有透光聚合物基材以及保护涂层。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的具有透光聚合物基材为三醋酸纤维素膜、二醋酸纤维素膜、聚对苯二甲酸丙二醇酯膜、聚对苯二甲酸乙二醇酯膜和聚甲基丙烯酸甲酯膜其中的任意一种。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的保护涂层为聚硅氧烷涂层。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的压敏粘合剂层的材料为光学压敏粘合剂。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的压敏粘合剂层的作用为防止因基材与聚合物层发生干裂而影响光学观察。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层的丙烯酸酯类为丙烯酸甲酯、丙烯酸正丙酯、丙烯酸仲丁酯和丙烯酸月桂酯其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层的甲基丙烯酸酯类选自甲基丙烯酸异冰片酯、甲基丙烯酸甲酯其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的具有透光聚合物基材为三醋酸纤维素膜。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的具有透光聚合物基材的厚度为80-140μm。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的具有透光聚合物基材的厚度为110μm。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的保护涂层的厚度为0.3-0.5μm。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的压敏粘合剂层的厚度为5-10μm。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层的厚度为15-25μm。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的折光率为1.45至1.55。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的折光率为1.47至1.53。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的透光率为85％以上。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的透光率为93％以上。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层7的丙烯酸酯类和甲级丙烯酸酯类的重量比为40：60-10：90。
如上所述的一种新型的病理封片材料，其制备方法包括如下步骤：
步骤一：将透光聚合物制备成厚度为80-140μm的薄膜，得具有透光聚合物基材；
步骤二：在具有透光聚合物基材的一面按照0.5g/m2的用量涂抹涂层剂，干燥；
步骤三：在具有透光聚合物基材的另一面按照10g/m2的用量涂抹光学压敏胶粘合剂，干燥；
步骤四：在压敏粘合剂层的外侧一面按照22g/m2的用量涂抹丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物，干燥；
步骤五：将步骤四中烘干好的材料按照宽24mm，长80m的标准切成长条带并卷起放置，卷起时保护涂层在外，聚合物层在内。
如上所述的一种新型的病理封片材料，其使用方法为：
步骤一：将病理组织样本放置在载玻片上进行传统染色；
步骤二：将活化溶剂施加到载玻片上；
步骤三：用本发明制备的病理封片材覆盖到病理样本上，聚合物层与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上，从将病理组织样本固定。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层能在60s内与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层能在10s内与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的聚合物层能在5s内与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的活化剂为D-柠檬烯、柑橘油、脂肪烃其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的折光率在1.45-1.55，所述的病理封片材料的透光率在85％以上，所述的病理封片材料的聚合物层的粘度值小于1.5，所述的病理封片材料在50℃的条件下暴露至少七天后能够不阻塞的展开，所述的病理封片材料在50℃、90％的相对湿度条件下的可耐受时间大于7天，封片材料与载玻片间没有起泡、染色切片无明显褪色。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述的病理封片材料的聚合物层的粘度值小于0.5。
如上所述的一种新型的病理封片材料，所述聚合物层在未被溶剂激活前，是不具有粘附连接性能的，以防止封片材料彼此间的黏连而影响自动化设备使用。
本发明的优点是：本发明提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、新型的病理封片材料及制备方法，主要用于病理组织染色后的封片，本发明制备的封片材料具有透明度、折光率与载玻片的相似，与活化溶剂具有快速的相互作用，与样品上使用的染色化学品具有相容性，当在显微镜载玻片上使用时，本发明的封片材料优选的可以长时间暴露于高湿度和高温下，而本材料不会明显的从载玻片上分离并且染色病理样品没有明显的褪色。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明的结构示意图；
图2本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人肠样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(2a)为对比例的显微图像，图(2b)为实施例7的显微图像；
图3本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人肝样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(3a)为对比例的显微图像，图(3b)为实施例7的显微图像；
图4本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人阑尾样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(4a)为对比例的显微图像，图(4b)为实施例7的显微图像；
图5本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人肾样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(5a)为对比例的显微图像，图(5b)为实施例7的显微图像；
图6本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人食管样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(6a)为对比例的显微图像，图(6b)为实施例7的显微图像；
图7本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人输卵管样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(7a)为对比例的显微图像，图(7b)为实施例7的显微图像；
图8本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶作为对比例对人胎盘样本进行固定后的的100X视野的显微图像，其中图(8a)为对比例的显微图像，图(8b)为实施例7的显微图像。
图9为本发明实际产品图片。
附图标记：1、载玻片；2、病理组织样本；3、封片材料；4、具有透光聚合物基材；4a、第一表面；4b、第二表面；5、保护涂层；6、压敏粘合剂层；7、聚合物层。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1-9的制备方法为：
步骤一：将透光聚合物制备成厚度为110μm的薄膜，得具有透光聚合物基材；
步骤二：在具有透光聚合物基材的一面按照0.5g/m2的用量涂抹涂层剂，干燥；
步骤三：在具有透光聚合物基材的另一面按照10g/m2的用量涂抹光学压敏胶粘合剂，干燥；
步骤四：在压敏粘合剂层的外侧一面按照22g/m2的用量涂抹丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物，干燥；
步骤五：将步骤四中烘干好的材料按照宽24mm，长80m的标准切成长条带并卷起放置，卷起时保护涂层在外，聚合物层在内。
实施例1-9中聚合物层的甲基丙烯酸异冰片酯和丙烯酸正丁酯单体占比如表一所示。
实施例编号 丙烯酸正丁酯 甲基丙烯酸异冰片酯
实施例1 50g 50g
实施例2 45g 45g
实施例3 40g 60g
实施例4 35g 65g
实施例5 30g 70g
实施例6 25g 75g
实施例7 20g 80g
实施例8 15g 85g
实施例9 10g 90g
表一
测试方法
粘性测试
通过手指轻触和短时间接触定性测定本发明聚合物层的粘性，并指定0-4的值，其中0＝无粘性，0.5＝近乎无粘性，1＝非常低粘性，2＝低至中等粘性，3＝中等粘性。4＝高粘性。
封片滑动测试
使用上述制备的病理封片材料，滴加环保溶剂D-柠檬烯后进行病理切片封片，稍干燥后，切片首先用两手指较用力搓，观测封片材料与载玻片间是否有滑动，并指定0-2的值，其中0＝无滑动，1＝轻微滑动,2＝滑动。
切片叠放黏连测试
将2.2切片竖立，前后叠放，存放24小时，观察切片彼此是否发生黏连，并指定0-1的值，其中0＝无黏连，1＝存在黏连
加速老化测试
将制备的新型病理封片材料放置在设定为50℃、90％相对湿度的测试间中进行老化试验，老化结束后通过目视和显微镜观察评定为“通过”或“失败”。“通过”意味着载玻片上的病理封片材料近无滑动、无鼓泡、显微镜下染色后的病理样本(如苏木精-伊红染色)无褪色；“失败”意味着载玻片上的病理封片材料存在较大滑动或与载玻片分离、存在鼓泡、褪色等。
实验结果：
病理组织切片经过H&E染色后分别采用实施例1～9制备的封片材料和传统盖玻片中性树胶封片后作对比，发现实施例2～9可获得与传统盖玻片中性树胶封片一致的结果，均能满足病理诊断要求。与传统盖玻片中性树胶封片不同的是，实施例2～9在封片结束后无需晾干，可直接用于全片数字扫描，存放方便，不会发生黏连，检测结果如表二所示。
Figure BDA0002945903210000081
Figure BDA0002945903210000091
表二
为检验本发明封片材料对活化溶剂的选择性，分别选用二甲苯、D-柠檬烯、柑橘油、溶剂油D60(脂肪烃混合物)、无味煤油(脂肪烃混合物)，并将实验组进行上述“加速老化测试”。实验结果(如表三)表明，实施例2-9可使用上述检验活性溶剂均能通过加速老化测试，并且显微镜下观察病理切片无褪色，满足临床病理检验要求；比较例为盖玻片中性树胶封片，仅能使用二甲苯作为溶剂，当选择其他溶剂时均会影响显微镜检查质量。
样品名 二甲苯 D-柠檬烯 柑橘油 D60 无味煤油
实施例2 Y Y Y Y Y
实施例3 Y Y Y Y Y
实施例4 Y Y Y Y Y
实施例5 Y Y Y Y Y
实施例6 Y Y Y Y Y
实施例7 Y Y Y Y Y
实施例8 Y Y Y Y Y
实施例9 Y Y Y Y Y
比较例 Y N N N N
表三
注：Y＝Yes，表示显微镜下效果良好；N＝No，表示显微镜下效果不佳。
为体现本发明的实际效果，图2-图4是使用本发明的实施例7与传统盖玻片中性树胶比较例对比图像，其中a为实施例，b为比较例，组织来源分别为人肠(图2)、人肝(图3)、人阑尾(图4)、人肾(图5)、人食管(图6)、人输卵管(图7)、人胚胎(图8)。与比较例相比，实施例仅需5s就可与载玻片紧密粘合，无溢胶、无滑动，可直接使用病理切片扫描仪进行数字化。经5位病理专家审核判定，实施例获得与比较例一致的镜检结果，细胞核结构清晰，胶原纤维、肌纤维、细胞质、红细胞等分化清晰，长时间保存染色无明显褪色、出血现象，满足临床病理检查的需求。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种新型的病理封片材料，其特征在于：包括封片材料，所述的封片材料自下而上依次为由丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物层、压敏粘合剂层、具有透光聚合物基材以及保护涂层。
2.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：
所述的具有透光聚合物基材为三醋酸纤维素膜、二醋酸纤维素膜、聚对苯二甲酸丙二醇酯膜、聚对苯二甲酸乙二醇酯膜和聚甲基丙烯酸甲酯膜其中的任意一种；
所述的保护涂层为聚硅氧烷涂层；
所述的压敏粘合剂层的材料为光学压敏粘合剂；
所述的聚合物层的丙烯酸酯类为丙烯酸甲酯、丙烯酸正丙酯、丙烯酸仲丁酯和丙烯酸月桂酯其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物；
所述的聚合物层的甲基丙烯酸酯类选自甲基丙烯酸异冰片酯、甲基丙烯酸甲酯其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物。
3.根据权利要求2所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：所述的具有透光聚合物基材为三醋酸纤维素膜。
4.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：
所述的具有透光聚合物基材的厚度为80-140μm；
所述的保护涂层的厚度为0.3-0.5μm；
所述的压敏粘合剂层的厚度为5-10μm；
所述的聚合物层的厚度为15-25μm。
5.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：
所述的病理封片材料的折光率为1.45至1.55；
所述的病理封片材料的透光率为85％以上。
6.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：所述的聚合物层的丙烯酸酯类和甲级丙烯酸酯类的重量比为40：60-10：90。
7.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：
步骤一：将透光聚合物制备成厚度为80-140μm的薄膜，得具有透光聚合物基材；
步骤二：在具有透光聚合物基材的一面按照0.5g/m2的用量涂抹涂层剂，干燥；
步骤三：在具有透光聚合物基材的另一面按照10g/m2的用量涂抹光学压敏胶粘合剂，干燥；
步骤四：在压敏粘合剂层的外侧一面按照22g/m2的用量涂抹丙烯酸酯类和/或甲级丙烯酸酯类组成的聚合物，干燥；
步骤五：将步骤四中烘干好的材料按照宽24mm，长80m的标准切成长条带并卷起放置，卷起时保护涂层在外，聚合物层在内。
8.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：其使用方法为：
步骤一：将病理组织样本放置在载玻片上进行传统染色；
步骤二：将活化溶剂施加到载玻片上；
步骤三：用本发明制备的病理封片材覆盖到病理样本上，聚合物层与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上，从将病理组织样本固定。
9.根据权利要求8所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：
所述的聚合物层能在60s内与活化剂接触后部分溶解并粘附在载玻片上；
所述的活化剂为D-柠檬烯、柑橘油、脂肪烃其中的一种或任意两种以上以任意比例混合的混合物。
10.根据权利要求1所述的一种新型的病理封片材料，其特征在于：所述的病理封片材料的折光率在1.45-1.55，所述的病理封片材料的透光率在85％以上，所述的所述的病理封片材料的聚合物层的粘度值小于1.5，所述的病理封片材料在50℃的条件下暴露至少七天后能够不阻塞的展开，所述的病理封片材料在50℃、90％的相对湿度条件下的可耐受时间大于7天，封片材料与载玻片间没有起泡、染色切片无明显褪色。
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